Nghiên cứu tạo que thử để phát hiện nhanh một số độc tố ruột của tụ cầu khuẩn trong thực phẩm

ĐẠI HỌC QUỐC GIA HÀ NỘI TRƢỜNG ĐẠI HỌC KHOA HỌC TỰ NHIÊN TRẦN THỊ SAO MAI NGHIÊN CỨU TẠO QUE THỬ ĐỂ PHÁT HIỆN NHANH MỘT SỐ ĐỘC TỐ RUỘT CỦA TỤ CẦU KHUẨN TRONG THỰC PHẨM LUẬN ÁN TIẾN SĨ SINH HỌC HÀ NỘI, 2015 ĐẠI HỌC QUỐC GIA HÀ NỘI TRƢỜNG ĐẠI HỌC KHOA HỌC TỰ NHIÊN TRẦN THỊ SAO MAI NGHIÊN CỨU TẠO QUE THỬ ĐỂ PHÁT HIỆN NHANH MỘT SỐ ĐỘC TỐ RUỘT CỦA TỤ CẦU KHUẨN TRONG THỰC PHẨM Chuyên ngành : Vi sinh vật học Mã số : 62 42 01 07 LUẬN ÁN TIẾN SĨ SINH HỌC Cán hƣớng dẫn: PGS.TS Nguyễn Thị Khánh Trâm TS Lê Quang Hòa HÀ NỘI, 2015 LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan cơng trình nghiên cứu riêng tơi dƣới hƣớng dẫn tập thể nhà khoa học hƣớng dẫn luận án Các số liệu kết thí nghiệm trình bày luận án trung thực chƣa đƣợc công bố công trình khác Hà Nội, ngày tháng 05 năm 2015 NGHIÊN CỨU SINH Trần Thị Sao Mai LỜI CẢM ƠN Hồn thành Luận án này, tơi xin bày tỏ lịng biết ơn sâu sắc tới người thầy hướng dẫn: Thầy thuốc nhân dân, PGS.TS BS Nguyễn Thị Khánh Trâm, Cục An toàn Thực phẩm, Bộ Y tế, TS Lê Quang Hịa, Viện Cơng nghệ Sinh học Cơng nghệ Thực phẩm, Trường Đại học Bách khoa Hà Nội, tận tình định hướng, dẫn tạo điều kiện cho tơi q trình nghiên cứu thực Luận án Tơi xin bày tỏ lịng biết ơn tới PGS.TS Bùi Thị Việt Hà thầy cô giáo, cán Bộ môn Vi sinh vật học, thầy cô giáo Khoa Sinh học, Trường Đại học Khoa học Tự nhiên, Đại học Quốc gia Hà Nội tận tình trang bị kiến thức cho suốt năm qua Tôi xin cảm ơn tới thầy cô lãnh đạo cán bộ, nghiên cứu viên Viện Công nghệ Sinh học Công nghệ Thực phẩm, Trường Đại học Bách khoa Hà Nội tạo điều kiện giúp sở vật chất để thực thí nghiệm cho Luận án Trong thời gian học tập nghiên cứu, nhận hỗ trợ động viên thầy cô giáo lãnh đạo cán viên chức Trường Đại học Kỹ thuật Y tế Hải Dương, tạo điều kiện cho thời gian vật chất, tinh thần để tơi hồn thành khóa học, tơi xin cảm ơn giúp đỡ quí báu Tôi xin gửi lời cảm ơn đến Ban Chủ nhiệm khoa Sinh học, Phòng Sau đại học Ban Giám hiệu Trường Đại học Khoa học Tự nhiên tận tình giúp tơi hồn thành hồ sơ suốt trình học tập bảo vệ luận án Trong suốt năm qua, nhận động viên, giúp đỡ vật chất tinh thần gia đình, người thân, đồng cảm bạn bè, đồng nghiệp, nguồn động lực lớn giúp tơi hồn thành khóa học Luận án Tơi xin trân trọng biết ơn giúp đỡ quí báu Hà Nội, ngày tháng 04 năm 2015 NGHIÊN CỨU SINH Trần Thị Sao Mai MỤC LỤC MỤC LỤC .1 DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU, CÁC CHỮ VIẾT TẮT .5 DANH MỤC HÌNH ẢNH DANH MỤC BẢNG CHƢƠNG TỔNG QUAN TÀI LIỆU NGHIÊN CỨU .14 1.1.TỤ CẦU KHUẨN 14 1.1.1 Đặc điểm sinh học tụ cầu vàng 14 1.1.2 Những yếu tố ảnh hƣởng tới sản sinh độc tố ruột tụ cầu 15 1.1.3 Tình hình ngộ độc thực phẩm tụ cầu 17 1.1.3.1 Tình hình ngộ độc thực phẩm độc tố ruột tụ cầu giới 17 1.1.3.2 Tình hình ngộ độc thực phẩm Việt Nam .18 1.2 ĐỘC TỐ RUỘT CỦA TỤ CẦU .20 1.2.1 Đặc điểm sinh hóa, hóa lý di truyền độc tố ruột tụ cầu 20 1.2.2 Cấu trúc phân tử độc tố ruột tụ cầu 23 1.2.3 Hoạt tính sinh học độc tố ruột tụ cầu 24 1.2.3.1 Hoạt tính siêu kháng nguyên .25 1.2.3.2 Hoạt tính gây nôn .26 1.2.3.3 Cơ chế gây viêm dày - ruột độc tố tụ cầu 27 1.3 CÁC PHƢƠNG PHÁP PHÁT HIỆN ĐỘC TỐ RUỘT TỤ CẦU .29 1.3.1 Phép thử sinh học 29 1.3.2 Phƣơng pháp sinh học phân tử 29 1.3.3 Phƣơng pháp miễn dịch 30 1.3.3.1 Phương pháp khuếch tán gel (Microslide Double Diffusion ) 30 1.3.3.2 Phương pháp miễn dịch phóng xạ - RIA (Radio Immunoassay) 30 1.3.3.3 Ngưng kết hạt latex (Reversed Passive Latex Aggulutination - RPLA) 31 1.3.3.4 Các phương pháp dựa kỹ thuật ELISA 31 1.4 KỸ THUẬT SẮC KÝ MIỄN DỊCH VÀ ỨNG DỤNG 33 1.4.1 Kỹ thuật sắc ký miễn dịch 33 1.4.1.1 Các hợp phần hệ thống sắc ký miễn dịch 34 1.4.1.2 Nguyên tắc phương pháp sắc ký miễn dịch 37 1.4.1.3 Phân loại que thử nhanh ứng dụng kỹ thuật sắc ký miễn dịch 37 1.4.2 Một số nghiên cứu tạo que thử phát độc tố ruột tụ cầu thực phẩm 40 1.5 CHẾ TẠO KHÁNG THỂ LÒNG ĐỎ TRỨNG VÀ ỨNG DỤNG CỦA IGY 42 1.5.1 Kháng thể lòng đỏ trứng IgY 42 1.5.2 Sản xuất kháng thể IgY 45 1.5.3 Các phƣơng pháp tinh chế kháng thể IgY 47 1.5.4 Ứng dụng IgY chẩn đoán miễn dịch 48 1.6 CÁC PHƢƠNG PHÁP SẢN XUẤT ĐỘC TỐ RUỘT TỤ CẦU 49 1.6.1 Sản xuất độc tố ruột tụ cầu trực tiếp từ S aureus 49 1.6.2 Sản xuất độc tố ruột tụ cầu phƣơng pháp tái tổ hợp 50 CHƢƠNG ĐỐI TƢỢNG, VẬT LIỆU VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 53 2.1 ĐỐI TƢỢNG NGHIÊN CỨU 53 2.2 VẬT LIỆU NGHIÊN CỨU 54 2.2.1 Vi sinh vật plasmid Error! Bookmark not defined 2.2.2 Hóa chất sinh phẩm 54 2.2.3 Máy, thiết bị 55 2.3 PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 56 2.3.1 Phƣơng pháp sản xuất độc tố ruột tụ cầu SEC1 tái tổ hợp 56 2.3.1.1 Tách chiết DNA tổng số từ vi khuẩn S aureus 56 2.3.1.2 Khuế ch đại gen sec kỹ thuật PCR 57 2.3.1.3 Tinh sản phẩm PCR 58 2.3.1.4 Xây dựng vector biểu mang gen sec1 58 2.3.1.5 Biến nạp plasmid pGS-21a-sec1 vào tế bào E coli BL 21 59 2.3.1.6 Biểu protein SEC1 tái tổ hợp 60 2.3.1.7 Tinh protein tái tổ hợp SEC1 .60 2.3.1.8 Phương pháp điện di biến tính protein (SDS-PAGE) .61 2.3.1.9 Phương pháp định lượng protein đo mật độ quang 61 2.3.1.10 Kiểm tra tính kháng nguyên protein SEC1 tái tổ hợp kỹ thuật Western blot 62 2.3.2 Phƣơng pháp sản xuất kháng thể IgY kháng BSA kháng thể IgY kháng loại độc tố SE (A+B+C1+D+E) 62 2.3.2.1 Gây miễn dịch .63 2.3.2.2 Tinh kháng thể IgY từ lòng đỏ trứng 65 2.3.3 Chế tạo que thử phát nhanh số độc tố ruột tụ cầu 67 2.3.3.1 Thiết kế que thử nhanh phát số độc tố ruột (SEA, SEB, SEC1, SED SEE) tụ cầu 67 2.3.3.2 Xác định giới hạn phát tính ổn định que thử 70 2.3.4 Sử dụng que thử nhanh phát độc tố ruột tụ cầu số nhóm mẫu thực phẩm gây nhiễm độc tố SE Error! Bookmark not defined 2.3.5 PHƢƠNG PHÁP Xử LÝ Số LIệU 72 CHƢƠNG KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ BÀN LUẬN .73 3.1 SẢN XUẤT VÀ TINH CHẾ ĐỘC TỐ RUỘT TỤ CẦU SEC1 TÁI TỔ HỢP 73 3.1.1 Tách chiết DNA tổng số từ S aureus 73 3.1.2 Khuếch đại gen sec1 kỹ thuật PCR 74 3.1.3 Xây dựng vector biểu pGS-21a mang gen sec1 75 3.1.4 Kết biểu gen mã hóa cho protein SEC1 tái tổ hợp 77 3.1.5 Xác định điều kiện biểu gen sec1 thích hợp E.coli 80 3.1.6 Tinh protein SEC1 tái tổ hợp 83 3.1.7 Kiểm tra tính kháng nguyên protein SEC1 tái tổ hợp phản ứng Western Blot 85 3.2 CHẾ TẠO KHÁNG THỂ LÒNG ĐỎ TRỨNG IgY .86 3.2.1 Lựa chọn lồi gà cách chăm sóc gà 86 3.2.2 Cách gây miễn dịch thu hoạch trứng 87 3.2.3 Kết tách chiết tinh kháng thể IgY 88 3.3 CHẾ TẠO QUE THỬ .90 3.3.1 Thiết kế que thử nhanh phát số độc tố ruột tụ cầu (SEA, SEB, SEC1, SED SEE) 90 3.3.3.1 Tối ưu hóa lượng kháng thể cần cố định lên vạch kiểm chứng .90 3.3.3.2 Tối ưu hóa lượng kháng thể cần cố định lên vạch thử nghiệm .91 3.3.3.3 Tối ưu hóa lượng kháng nguyên cộng hợp cần sử dụng 92 3.3.2 Xác định giới hạn phát tính ổn định que thử 94 3.3.2.1 Xác định giới hạn phát que thử với độc tố ruột SEA, SEB, SEC1, SED SEE 94 3.3.2.2 Xác định tính ổn định que thử 99 3.4 SỬ DỤNG QUE THỬ ĐỂ PHÁT HIỆN MỘT SỐ ĐỘC TỐ RUỘT TỤ CẦU TRÊN THỰC PHẨM ĐƢỢC GÂY NHIỄM THỰC NGHIỆM .99 3.4.1 Sử dụng que thử để phát số độc tố ruột tụ cầu (SEA, SEB, SEC1, SED SEE) sữa đƣợc gây nhiễm thực nghiệm 99 3.4.1.1 Xác định độ pha loãng sữa để thử nghiệm .99 3.4.1.2 Sử dụng que thử để phát số độc tố ruột (SEA, SEB, SEC1, SED SEE) sữa gây nhiễm thực nghiệm 100 3.4.2 Sử dụng que thử để phát số độc tố ruột tụ cầu (SEA, SEB, SEC1, SED SEE) thịt đƣợc gây nhiễm thực nghiệm 104 3.4.2.1 Xác định độ pha loãng thịt để thử nghiệm 104 3.4.2.2 Kết phát số độc tố ruột (SEA, SEB, SEC1, SED SEE) thịt gây nhiễm thực nghiệm 105 KẾT LUẬN VÀ KHUYẾN NGHỊ 108 KẾT LUẬN 108 DANH MỤC CÁC CƠNG TRÌNH NGHIÊN CỨU 110 LIÊN QUAN ĐẾN LUẬN ÁN 110 TÀI LIỆU THAM KHẢO 112 DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU, CÁC CHỮ VIẾT TẮT {tc "DANH M?C CÁC KÝ HI?U, CÁC CH? VI?T T?T" \f C \l 1} Ký hiệu Tên đầy đủ tiếng Anh Tên đầy đủ tiếng Việt - APC - Antigen Presenting Cell - Tế bào trình diện kháng nguyên - BSA - Bovine Serum Albumin - Albumin huyết bò - CFU - Colony forming unit - Đơn vị hình thành khuẩn lạc - CNS - Coagulase negative staphylococci - Tụ cầu không sinh coagulase - ELISA - Enzyme Linked Immunosorbent Assay - Phƣơng pháp miễn dịch hấp phụ gắn enzym - Fab - Fragment of antigen binding - Mảnh gắn kháng nguyên - Fc - Fragment crystalizable - Mảnh kết tinh - FCA - Freud’s Complete Adjuvant - Tá dƣợc Freud hoàn toàn - FIA - Freud’s Incomplete Adjuvant - Tá dƣợc Freud khơng hồn tồn - GALT - Gut Associated Lymphoid Tisue - Mô limpho ruột - GI - Gastrointestinal - Dạ dày-ruột - GST - Glutathione-S-Transferase - HPLC - High-Performance Liquid - Sắc ký lỏng cao áp Chromatography - HLA-DR1 - Human Leukocyte Antigen serotype DR1 - HTSKMD - Hệ Thống Sắc Ký Miễn Dịch - IPTG -IsoPropyl-β-D-ThioGalactopyranoside - kDa - Kilo Dalton - MCP-1 - Monocyte Chemoattractant Protein - MHC-II - Major histocompatibility complex - NĐTP - Phức hợp tƣơng thích mơ - Ngộ độc thực phẩm - PBS - Phosphate Buffered Saline- - Muối đệm phosphate - PCR - Polymerase Chain Reaction - PEG - Polyetylen Glycol - RNA - Ribonucleic acid - Axit ribonucleic - RPLA -Reversed Passive Latex Aggulutination - Kỹ thuật ngƣng kết hạt latex - SE - Staphylococcal Enterotoxin - Độc tố ruột tụ cầu - SPA - Staphylococcus aureus Protein A - Protein A tụ cầu - TCR - T-Cell antigen Receptor - Thụ thể tế bào T - TNF - Tumor Necrosis Factor - Yếu tố hoại tử khối u - TSST - Toxic Shock Syndrome Toxin - TSST-1 - Toxic Shock Syndrome Toxin-1 - VSATTP - Độc tố gây hội chứng sốc độc - Vệ Sinh An Toàn Thực Phẩm 10 Đặng Đức Trạch (1984), Miễn dịch học, University of Amsterdam TIẾNG ANH 11 Agro-Bio (2011), Protocol for the production of chicken polyclonal antibodies specific IgY, Version 2011/01 12 Antonina A Votintseva, Rowena Fung, Ruth R Miller, Kyle Knox, Heather Godwin, David H Wyllie, Rory Bowden, Derrick W Crook, A Sarah Walker (2014), Prevalence of Staphylococcus aureus protein A (spa) mutants in the community and hospitals in Oxfordshire, BioMed Central, United Kingdom 13 Antonsson, P., Wingren, A.G., Hansson, J., Kalland, T., Varga, M., Dohlsten, M (1997), “Functional Characterization of the Interaction Between the Superantigen Staphylococcal Enterotoxin A and the TCR” Journal of Immunology 158, pp 4245–4251 14 Asao, T., Kumeda, Y., Kawai, T., Shibata, T., Oda, H., Haruki, K., Nakazawa, H., Kozaki, S (2003), “An extensive outbreak of staphylococcal food poisoning due to low-fat milk in Japan: Estimation of enterotoxin A in the incriminated milk and powdered skim milk’’, Journal of Epidemiology Infectionous 130, 33– 40 15 Asenjo, J.A and B.A Andrews (2009), “Protein purification using chromatology: selection of type, modelling and optimization of operating condition”, Journal of Molecular Recognit 22(2), pp 65-76 16 Atanmassova V, Meindl A Ring C (2001), “Prevalence of Staphylococcus aureus and staphylococci enterotoxin in raw pork and uncooked smoked ham – a comparison of classical culturing detection and RFLP-PCR”, International Journal of Food Microbiology 68: 105-113 17 Audrey W Jarvis, R C Lawrence, and G G Pritchard (1973), “Production of Staphylococcal enterotoxins A, B and C under conditions of controlled pH and aeration”, Journal of Infection and Immunity 7(6), pp 847-854 113 18 Balaban N, Rasooly A (2000), “Staphylococcal enterotoxins”, Internatinal Journal of Food Microbiology 61(1): 1-10.rnatio 19 Bergdoll, M.S., Crass, B.A., Reiser, R.F., Robbins, R.N., Davis, J.P (1981), “A New Staphylococcal Enterotoxin, Enterotoxin F, Associated with Toxic-ShockSyndrome Staphylococcus aureus Isolates”, Lancet 1, pp 1017–1021 20 Boyle T., Njoroge JM., Jones RL Jr., Principato M (2010), “Detection of staphylococcal enterotoxin B in milk and milk products using immunodiagnostic lateral flow devices”, Journal of AOAC International 93, pp 569-575 21 Cameron, S.B., Nawijn, M.C., Kum, W.W., Savelkoul, H.F., Chow, A.W (2001), “Regulation of Helper T Cell Responses to Staphylococcal Superantigens”, European Cytokine Netw (12), pp 210-222 22 Casman E.P., (1965), “Staphylococcal enterotoxin”, Annals of the New York Academy of Sciences 128, pp 124–131 23 Cha J.O., Lee J.K., JungY.H., Yoo J.I., Park Y.K., Kim B.S., Lee Y.S.(2006), “Molecular analysis of Staphylococcus aureus isolates associated with staphylococcal food poisoning in South Korea”, Journal of Applied Microbiology 101, pp 864–871 24 Chang HC, Bergdoll MS (1979), “Purification and some physicochemical properties of staphylococcal enterotoxin D”, Journal of Biochemistry 18 (10), pp 1937–1942 25 Chen T.R., Chiou, C.S., Tsen H.Y (2004), “Use of Novel PCR Primers Specific to the Genes of Staphylococcal Enterotoxin G, H, I for the Survey of Staphylococcus aureus Strains Isolated From Food-Poisoning Cases and Food Samples in Taiwan”, International Journal of Food Microbiology 92, pp 189– 197 26 Christopher Marcq, André Théwis, Daniel Portetelle, Yves Beckers (2013), “Refinement of the production of antigen-specific hen egg yolk antibodies (IgY) intended for passive dietary immunization in animals A review”, Biotechnology Agron Society Environment 17 (3), pp 483-493 114 27 Concordia R Borja , Merlin S Bergdoll (1967), “Purification and Partial Characterization of Enterotoxin C Produced by Staphylococcus aureus Strain 137”, Journal of Biochemistry (5), pp 1467–1473 28 Cook M.E and Trott D.L (2010), “IgY–immune component of eggs as a source of passive immunity for animals and humans”, world's poultry science journal 66, pp 215-225 29 Crowle A.J (1961), Immunodiffusion, New York: Academic Press 30 David F Capenter and Gerald J Silverman (1974), “Staphylococcal enterotoxin B and nuclease production under controlled dissolved oxygen conditions”, Journal of Applied Microbiology 28 (4), pp 628-637 31 De Buyser M.L., Dufour B., Maire M., Lafarge V (2001), “Implication of milk and milk products in food-borne diseases in France and in different industrialised countries”, International Journal of Food Microbiology 67, pp 1–17 32 Desouza I.A., Hyslop S., Franco-Penteado, C.F., Ribeiro-DaSilva, G (2001), “Mouse Macrophages Release a Neutrophil Chemotactic Mediator Following Stimulation by Staphylococcal Enterotoxin Type A”, Journal of Inflammation Research 50, pp 206– 212 33 Desouza I.A., Hyslop S., Franco-Penteado C.F., Ribeiro-DaSilva, G (2002), “Evidence for the Involvement of a Macrophage-Derived Chemotactic Mediator in the Neutrophil Recruitment Induced by Staphylococcal Enterotoxin B in Mice”, Toxicon 40, pp 1709-1717 34 Diana Pauly, Pablo A Chacana, Esteban G Calzado, Bjorn Brembs, Rudiger Schade (2011), “IgY Technology: Extraction of Chicken Antibodies from Egg Yolk by Polyethylene Glycol (PEG) precipitation”, Journal of Visualized Experiments (51), pp 1-5 35 Dinges M.M., Orwin P.M., Schlievert P.M (2000), “Exotoxins of Staphylococcus aureus”, Clinical Microbiology Reviews 13, pp 16–34 36 Do Carmo, L S., Cummings, C., Linardi, V R., Dias, R S., De Souza, J M., Sena, M J., Dos Santos, D A., Shupp, J U., Poreira, R K., Jett, M (2004), A 115 case study of a massive staphylococcal food poisoning incident Foodborne Pathogens and Disease 1, pp 241-246 37 Edward J Schantz , William G Roessler , Jack Wagman , Leonard Spero , David A Dunnery , Merlin S Bergdoll (1965), “Purification of Staphylococcal Enterotoxin B*” , Journal of Biochemistry (6), pp 1011–1016 38 Evenson M.L., Hinds M.W., Bernstein R.S., Bergdoll M.S (1998), “Estimation of Human Dose of Staphylococcal Enterotoxin A From a Large Outbreak of Staphylococcal Food Poisoning Involving Chocolate Milk”, International Journal of Food Microbiology 7, pp 311–316 39 Evin K., Brunner G., My A and Wong C (1992), “Staphylococcus aureus growth and enterotoxin production in mushrooms”, Journal of Food Science 57(3), pp 700–703 40 Goshorn SC, Schlievert PM (1988), “Nucleotide sequence of streptococcal pyrogenic exotoxin type C”, Journal of Microbiology Immunology and Infection 56, pp 2518-2520 41 Hamal KR., Burgess SC., Pevzner IY., Erf GF (2006), “Maternal antibody transfer from dams to their egg yolks, egg whites, and chicks in meat lines of chickens”, Journal of Poultry Science 85(8), pp 1364- 1372 42 Haeghebaert S., Le Querrec F., Gallay A., Bouvet P., Gomez M., Vaillant V (2002), “Les toxi-infections alimentaires collectives en France en 1999 et 2000”, Bulletin Epidémiologique Hebdomadaire 23, pp 105-109 43 Harris TO, Grossman D, Kapp.ler JW, Marrack P, Rich RR, Betley MJ (1993), “Lack of complete correlation between emetic and T-cellstimulatory activities of staphylococcal enterotoxins”, Journal of Microbiology Immunology and Infection 61, pp 3175-3183 44 Hennekine Jacques-Antonie, Annick Ostyn, Florence Guillier, Sabine Herbin, AnneLaure Prufer and Sylviane Dragacc (2010), “How should Staphylococcal food poisoning outbreaks be characterized?”, Toxins (Basel) (2), pp 2106 – 2116 116 45 Hennekinne de Buyser and S Dragacci (2012), “Staphylococcus aureus and its food poisoning toxins: characterization and outbreak investigation”, FEMS Microbiology Reviews 36, pp 815–836 46 Le Quang Hoa, Tran Thi Sao Mai, Nguyen Thi Khanh Tram, To Kim Anh (2014), “Development of a Lateral Flow Immunoassay for the Rapid Detection of Staphylococcal Enterotoxin A in Milk”, VNU Journal of Science 30, pp 153-157 47 Hovde CJ, Marr JC, Hoffmann ML, Hackett SP, Chi YI, Crum KK, Stevens DL, Stauffacher CV, Bohach GA (1994), “Investigation of the role of the disulphide bond in the activity and structure of staphylococcal enterotoxin C1”, Journal of Molecular Microbiology 13, pp 897-909 48 Hu D.L., Omoe K., Shimoda Y., Nakane A., Shinagawa K (2003), “Induction of Emetic Response to Staphylococcal Enterotoxins in the House Musk Shrew (Suncus Murinus)”, Journal of Microbiology Immunology and Infection 71, pp 567–570 49 Hu D.L., Zhu G., Mori F., Omoe K., Okada M., Wakabayashi K., Kaneko S., Shinagawa K., Nakane A (2007), Enterotoxin Induces Emesis Through Increasing Serotonin Release in Intestine and It Is Downregulated by Cannabinoid Receptor 1, Cellular Microbiology 9, pp 2267–2277 50 Hu D.L., Omoe K., Sashinami H., Shinagawa K., Nakane A (2009), “Immunization with a Nontoxic Mutant of Staphylococcal Enterotoxin A, SEAD227A, Protects Against Enterotoxin-Induced Emesis in House Musk Shrews”, Journal of Infectious Diseases 199, pp 302–310 51 Jenny Schelin, Nina wallin-Carlquist, Marianne Thorup Cohn, Roland Lindqvist, Gary C Barker and Peter rådström (2011), “The formation of Staphylococcus aureus enterotoxin in food environments and advances in risk assessment”, Virulence Journal (6), pp 580-592 52 Jennifer Kovacs-Nolan and Yoshinori Mine (2012), “Egg Yolk Antibodies for Passvie Immunity”, Annual Review of Food Science and Technology 3, pp 163182 117 53 Jeremy M Berg, John L Tymoczko and Lubert Stryey (2002), Biochemistry, 5th edition, W.H Freeman, New York 54 Jhalka Kadariya, Tara C Smith and Dipendra Thapaliy (2014), Staphylococcus aureus and Staphylococcal Food-Borne Disease: An Ongoing Challenge in Public Health, BioMed Research International, Hindawi Publishing Corporation 55 Joseph F Metzger, Anna D Johnson, William S Collins II and Virginia McGann (1973), “Staphylococcusaureus Enterotoxin B release (excretion) under controlled condition of fermentation”, Journal of Applied Microbiology 25(5), pp 770-773 56 Kenneth Todar, Todar’s Online Textbook of Bacteriology University of Wisconsin-Madison Department of Bacteriology (Staphylococcus), Kenneth Todar University of Wisconsin-Madison Department of Bacteriology, 2005 57 Kerouanton A., Hennekinne J.A., Letertre C., Petit L., Chesneau O., Brisabois A., DeBuyser M.L (2007), “Characterization of Staphylococcus aureus strains associatedwith food poisoning outbreaks in France”, International Journal of Food Microbiology 115, pp 369–375 58 Koets M., Sander I., Bogdanovic J., Doekes G., Van Amerongen A.(2006), A rapid lateral flow immunoassay for the detection of fungal alpha-amylase at the workplace, Journal of Environmental Monitoring (2006) 942-6 59 Leenaars M and Hendriksen C.F (2005), “Criticalsteps intheproduction of polyclonaland monoclonal antibodies:evaluationand recommendations”, ILAR Journal 46, pp 269-279 60 Ler S.G., Lee F.K., Gopalakrishnakone P (2006), “Trends in Detection of Warfare Agents Detection Methods for Ricin, Staphylococcal Enterotoxin B and T-2”, Journal of Chromatography A1133, pp 1–12 61 Liben Chen, Shuang Li, Zhengfang Wang, Ruilong Chang, Jingliang Su and Bo Han (2012), “Protective effect of recombinant staphylococcal enterotoxin A entrapped in polylactic-co-glycolic acid microspheres against Staphylococcus aureus infection”, Veterinary Research 43 (20), pp 1-11 118 62 Lívia Silveira Munhoz, Gilberto D’Ávila Vargas, Geferson Fischer, Marcelo de Lima, Paulo Augusto Esteves, Silvia de Oliveira Hübner (2014), “Avian IgY antibodies: characteristics and applications in immunodiagnostic”, Ciência Rural 44 (1), pp 153-160 63 Marrack P., Kappler J (1990), “The staphylococcal enterotoxins and their relatives”, Science 248, pp 705-711 64 Maria de Lourdes Ribeiro de Souza da Cunha (2010), “Staphylococcal enterotoxins: Molecular aspects and detection methods”, Journal of Public Health and Epidemiology 2, pp 29-42 65 María Ángeles Argudín, María Carmen Mendoza and María Rosario Rodicio (2010), “Food poisoning and Staphylococcus aureus enterotoxins”, Toxins 2, pp 1751-1773 66 McCormick JK, Yarwood JM, Schlievert PM (2001), “Toxic shock syndrome and bacterial superantigens: an update”, Annual Review of Microbiology 55, pp 77-104 67 Miethke T, Wahl C, Heeg K, Echtenacher B, Krammer PH, Wagner H (1992), “T cell-mediated lethal shock triggered in mice by the superantigen staphylococcal enterotoxin B”, Critical role of tumor necrosis factor Journal of Experimental Medicine 175, pp 91-98 68 Márta D, Wallin-Carlquist N, Schelin J, Borch E, Radstrom P (2011), “Extended staphylococcal enterotoxin D expression in ham products”, International Journal of Food Microbiology 28, pp 617–620 69 Mead PS, Slutsket L., Dietz V., McCaig LF., Bresee JS., Shapiro C., Griffin PM., Tauxe RV (1999), “Food-related illness and death in the United States”, Emerging Infectious Diseases Journal 5, pp 607-25 70 Merlin S Bergdoll and Amy C Lee Wong (2006), “Staphylococcal intoxication”, Foodborne Infection and Intoxications, pp 523-551 71 Mihai Sandaran, Valentin Ordori, Ioanna Sisu, Horea Sandaran, Victor Lorin Purcarea, Mircea Pennescu (2010), “Obtaining High Purity antibodies with 119 therapeutic potential”, FARMACIA 58 (6), pp 686-694 72 Nandita P Agnihotri, ManglaBhide (2014), “Cloning and expession of sec2 gene of Staphylococcus aureus for antibody production”, Journal Biology Innovation (1), pp 49-62 73 Notermans, S and Heuvelman, C.J (1983), “Combined effects of water activity, pH, and suboptimal temperature on growth and enterotoxin production”, Journal of Food Science 48, pp 1832-1835 74 Novick, R.P (2000), “Pathogenicity factors and their regulation” In: Gram Positive Pathogens (Fischetti, V.A., Novick, R.P., Feretti, J.J., Portnoy, D.A and Rood, J.I., eds.) ASM Press, Washington, D.C., USA, pp 392-407 75 Oakley C.L and Fulthorpe A.J (1953), “Antigenic analysis by diffusion”, Journal of Pathology and Bacteriology 65, pp 49-60 76 O’Farrell B and Bauer J (2006), “Developing highly sensitive, more reproducible lateral flow assays”, Part 1: New approaches to old problems IVD Technology June issue, pp 41 77 Onoue, Y and Mori, M (1997), “Amino acid requirement for growth and enterotoxin production by Staphylococcus aureus in chemically defined media”, International Journal of Food Microbiology 36, pp 77-82 78 Ostyn A, De Buyser ML, Guillier F, Groult J, Felix B, Salah S, Delmas G, Hennekinne JA.(2010), “First evidence of a food poisoning outbreak due to staphylococcal enterotoxin type E”, France, Euro Surveillance 15 (13), pp 528 79 Ouchterlony O (1948), “Antigen-antibody reactions in gels”, Archiv fur Kemi, Mineralogi, och Geology 26B, pp 1-9 80 Oudin J (1952), “Techniques and analysis of the quantitative precipitin reaction B Specific precipitation in gels and its application to immunochemical analysis”, Methods in Medical Research 5, pp 335-378 81 Otero, A., Garcia, M.C., Garcia, M.L and Moreno, B (1988), “Effect of a commercial starter culture on growth of Staphylococcus aureus and 120 thermonuclease and enterotoxins (C1 and C2) production in broth cultures”, International Journal of Food Microbiology 6: 107-114 82 Parma Y.R., Chacana P.A et al (2012), “Detection of Shiga toxin- producing Escherichia coli by sandwich enzym-linked immunosorbent assay using chicken egg yolk IgY antibodies”, Frontiers in Cellular and Infection Microbiology 2012, pp 8492 83 Petr Hodek and Marie (2003), “Chicken Antibodies – Superior Alternative for Conventional Immunoglobulins”, Proceedings of the Indian National Science Academy B69 4, pp 461-468 84 Petr Hodek, Pavel Trefil, Jiri Simunek, Jiri Hudecek, Marie Stiborova (2013), “Optimized protocol of chicken antibody (IgY) purification providing electrophoretically homogenous preparations”, International Journal of Electrochemical Science 8, pp 113-114 85 Pinchuk I.V., Beswick E.J., Saada J.I., Suarez G., Winston J., Mifflin R.C., Di Mari J.F., Powell D.W., Reyes V.E (2007), “Monocyte Chemoattractant Protein1 Production by Intestinal Myofibroblasts in Response to Staphylococcal Enterotoxin a: Relevance to Staphylococcal Enterotoxigenic Disease” Journal of Immunology 178, pp 8097- 8106 86 Proft T, Fraser JD (2003), “Bacterial superantigens”, Journal of Clinical and Experience Immunology 133, pp 299-306 87 Plotz C.M and Singer J.M (1956), “The latex fixation test”, Application to the serologicdiagnosis of rheumatoid arthritis, American Journal of Medicine 21 (6), pp 888–892 88 Raphael C Wong, Harley Y Tse (2009), Lateral Flow Immunoassay, Springer, Humana Press, Springer Science and Business Media, New York, NY 10013, USA 89 Regassa, L.B., Novick, R.P and Betley, M.J (1992), “Glucose and nonmaintained pH decrease expression of the accessory gene regulator (agr) in Staphylococcus aureus”, Journal of Infectious Immunology 60, pp 3381-3388 121 90 Reginald W Bennett and Jennifer M Hait (2011), Bacteriological Analytical Manual- Chapter 13A Staphylococcal Enterotoxins: Micro-slide Double Diffusion and ELISA-based Methods 91 Richman DD., Cleverland PH., Oxman MN, Johnson KM (1982), “The binding of Staphylococcal protein A by the sera of different animal species”, Journal of Immunology 128 (5), pp 2300-2305 92 Roberts T A., Baird-Parker A C and Tompkin R B (1996), Staphylococcus aureus Microbiological specifications of food pathogens, International Commission on Microbiological Specifications for Foods, Blackie Academic, London 93 Rüdiger Schade, Esteban Gutierrez Calzado, Rodolfo Sarmiento, Pablo Anibal Chacana, Joanna Porankiewicz-Asplund and Horacio Raul Terzolo (2005), “Chicken Egg Yolk Antibodies (IgY-technology): A Review of Progress in Production and Use in Research and Human and Veterinary Medicine”, ATLA 33, pp 1–26 94 Ruth Robbins, Sara Gould, and Merlin Bergdoll (1974), “Detecting the Enterotoxigenicity of Staphylococcus aureus Strains”, Journal of Applied Microbiology 28 (6), pp 946-950 95 Sameshima T., Magome C., Takeshita K., Itoh M and Kondo Y (1998), “Effect of intestinal Lactobacillus starter cultures on the behaviour of Staphylococcus aureus in fermented sausage”, International Journal of Food Microbiology 41, pp 1-7 96 SchwarzkopfC., StaakC., BehnI.and ErhardM (2001), Chicken egg yolk antibodies, production and application: IgY technology, pp 25-64, Springer Publishcation 97 Shinagawa K,Ono H K, Omoe K, Imanishi K, 2008 “Identification and characterization of two novel staphylococcal enterotoxins types S and T”, Journal of Infectionous Immunology 76, pp 4999–5005 98 Taylor S.L., Schlunz L.R., Beery J.T., Cliver D.O., Bergdoll M.S (1982), “Emetic Action of Staphylococcal Enterotoxin A on Weanling Pigs”, Journal of Infectionous Immunology 36, pp 1263–1266 122 99 Thermo Fisher Scientific (2010), Thermo Scientific Pierce Antibody Production and Purification, Technical Handbook 2, pp 1-77 100 Thomas H.Kent, M.D (1965), “Staphylococcal enterotoxin gastroenteritis in Rhesus Monkeys”, The American journal of pathology 48(3), pp 387- 407 101 T Diraviyam, T Jeevitha, P Saravanan, A Michael and S Meenatchisundaram (2011), “Preparation of Enteric Infections in Poultry”, Journal of Microbiology and Biotechnology Research (4), pp 95-103 102 Van Den Bussche RA, Lyon JD, Bohach GA (1993), “Molecular evolution of the staphylococcal and streptococcal pyrogenic toxin gene family”, Molecular Phylogenetics and Evolution (4), pp 281-292 103 Vaitukaitis J.L., Braunstein G.D and Ross G.T (1972), “A radioimmunoassay which specifically measures human chorionic gonadotropin in the presence of human luteinizing hormone”, Journal of Obstetrics and Gynaecology 15, pp 751–758 104 Victor E Reyes et al (2010), “Staphylococcal enterotoxins”, Toxins 2, pp 21772197 105 Veerasami M., Singanallur N.B., Thirumeni N., Rana S.K., Shanmugham R., Ponsekaran S., Muthukrishnan M., Villuppanoor S.A (2008), “Serotyping of foot-and-mouth disease virus by antigen capture-ELISA using monoclonal antibodies and chicken IgY”, Microbiology News 31(4), pp 549-554 106 Xiao Y., Gao X., Taratula O., Treado S., Urbas A., Holbrook R.D., Cavicchi R.E., Avedisian C.T., Mitra S., Savla R., Wagner P.D., Srivastava S., He H (2009), “Anti-HER2 IgY antibody- functionalized single-walled carbon nanotubes for detection and selective destruction of breast cancer cells”, BMC Cancer 9, pp 351 107 Yves Le Loir, Florence Baron and Michel Gautier (2003), “Staphylococcus aureus and food poisoning”, Genetic and Molecular Research 2, pp 63-76 108 Walk G (2002), Protein pruification and characterizatio, Proteins Biochemistry and biotechnology, John Wiley Sons LTD, pp 99-116 123 109 Wanchun Jin, Keiko Yamada, Mai Ikami (2013), “Application of IgY to sandwich enzym-linked immunosorbent assays, lateral flow devices, and immunopillar chips for detecting staphylococcal enterotoxins in milk and dairy products”, Journal of Microbiological Methods 92, pp 323-331 110 Wang RF., Cao WW and Cerniglia CE (1997), “A universal protocol for PCR detection of 13 species of foodborne pathogens in foods”, Journal of Applied Microbiology 83, pp 727-736 111 Wieneke A.A., Roberts, D Gilbert, R.J (1993), “Staphylococcal food poisoning in the United Kingdom”, Journal of Epidemiology and Infection 110, pp 519531 112 http://www.chongdoc.org.vn/LinkClick.aspx?fileticket=J691bNddmOQ%3D&ta bid=66&language=vi-VN 113 http://www.doc.edu.vn/tailieu/staphylococcus-aureus-va-benhvien-dostaphylococcus-11353 124 PHỤ LỤC Hình 1: Gà Lerghor nở Hình 2: Ni gà thực nghiệm Hải Dương 125 Hình 3: Ni Gà thực nghiệm Hải Dương Hình4: Chuồng ni gà đẻ trứng thực nghiệm Hải Dương 126 Hình 5: Tiêm vắc xin cho gà thực nghiệm ức Hình 6: Tiêm vắc xin cho Gà thực nghiệm ức 127 ... sinh an toàn thực phẩm cho sản phẩm lƣu hành nƣớc sản phẩm thực phẩm xuất Từ thực tế trên, thực đề tài luận án: ? ?Nghiên cứu tạo que thử để phát nhanh số độc tố ruột tụ cầu khuẩn thực phẩm? ?? Mục tiêu... kháng nguyên 1.4.2 Một số nghiên cứu tạo que thử phát độc tố ruột tụ cầu thực phẩm Gần đây, số nghiên cứu phát triển que thử ứng dụng kỹ thuật sắc ký miễn dịch để phát SE thực phẩm đƣợc công bố... hiệu với loại độc tố tụ cầu phát triển đƣợc que thử sắc ký miễn dịch phát loại độc tố ruột tụ cầu phổ biến Trong luận án này, sử dụng ƣu điểm để tạo que thử phát loại độc tố ruột tụ cầu dựa kháng