Nghiên cứu bộ nhiễm sắc thể ở những cặp vợ chồng vô sinh nguyên phát

ĐẠI HỌC QUỐC GIA HÀ NỘI TRƯỜNG ĐẠI HỌC KHOA HỌC TỰ NHIÊN TRẦN CÚC ÁNH NGHIÊN CỨU BỘ NHIỄM SẮC THỂ Ở NHỮNG CẶP VỢ CHỒNG VÔ SINH NGUYÊN PHÁT LUẬN VĂN THẠC SĨ KHOA HỌC HÀ NỘI - 2012 ĐẠI HỌC QUỐC GIA HÀ NỘI TRƯỜNG ĐẠI HỌC KHOA HỌC TỰ NHIÊN TRẦN CÚC ÁNH NGHIÊN CỨU BỘ NHIỄM SẮC THỂ Ở NHỮNG CẶP VỢ CHỒNG VÔ SINH NGUYÊN PHÁT Chuyên ngành: Sinh học Thực nghiệm Mã số: 60 42 30 LUẬN VĂN THẠC SĨ KHOA HỌC NGƯỜI HƯỚNG DẪN KHOA HỌC: TS NGUYỄN VĂN RỰC HÀ NỘI - 2012 DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT CS : Cộng ISCN : An International System for Human Cytogenetic Nomenclature ICSI : Intra-Cytoplasmic Sperm Injection ITT : Ít tinh trùng KCTT : Khơng có tinh trùng NST : Nhiễm sắc thể PHA : Phytohemagglutinin WHO : World Health Organization GTMT : Giãn tĩnh mạch tinh LH : Luteinizing hormone FSH : Follicle-stimulating hormone Luận văn Thạc sỹ Khoa học MỤC LỤC MỞ ĐẦU Chương 1- TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 Lược sử nghiên cứu nhiễm sắc thể người 1.2 Các chế gây rối loạn nhiễm sắc thể người 1.2.1 Rối loạn số lượng 1.2.2 Rối loạn cấu trúc nhiễm sắc thể 1.3 Tình hình nghiên cứu vô sinh 10 1.3.1 Một số khái niệm vô sinh 10 1.3.2 Nguyên nhân vô sinh người vợ 10 1.3.2.1 Các nguyên nhân không yếu tố di truyền 10 1.3.2.2 Nguyên nhân yếu tố di truyền 13 1.3.3 Nguyên nhân vô sinh người chồng 13 1.3.3.1 Các nguyên nhân không yếu tố di truyền 13 1.3.3.2 Nguyên nhân yếu tố di truyền 16 1.4 Tình hình nghiên cứu nhiễm sắc thể cặp vợ chồng vô sinh nguyên phát 17 1.4.1 Trên giới 17 1.4.1.1 Tần số rối loạn nhiễm sắc thể cặp vợ chồng vô sinh nguyên phát 17 1.4.1.2 Tần số rối loạn nhiễm sắc thể người vợ người chồng 19 1.4.1.3 Các kiểu rối loạn nhiễm sắc thể người vợ người chồng 20 1.4.2 Ở Việt Nam 25 Chương 2- ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 27 2.1 Đối tượng nghiên cứu 27 2.1.1 Tiêu chuẩn chọn đối tượng 27 2.1.2 Tiêu chuẩn loại trừ 27 2.2 Phương pháp nghiên cứu 28 2.2.1 Lập hồ sơ bệnh án 28 Trần Cúc Ánh Cao học K18-Sinh học Luận văn Thạc sỹ Khoa học 2.2.2 Phương pháp phân tích nhiễm sắc thể lập karyotyp 28 2.2.2.1 Nuôi cấy tế bào bạch cầu lympho máu ngoại vi theo phương pháp Hungerford D.A (1965) 28 2.2.2.2 Phương pháp làm tiêu nhiễm sắc thể 28 2.2.2.3 Phương pháp nhuộm tiêu băng G theo phương pháp Seabright M ( 1971) 29 2.2.2.4 Phương pháp phân tích nhiễm sắc thể lập karyotyp: theo tiêu chuẩn ISCN (2009) 30 2.2.3 Xử lý số liệu 31 Chương 3- KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 32 3.1 Tuổi cặp vợ chồng vô sinh nguyên phát 32 3.2 Nghề nghiệp cặp vợ chồng vô sinh nguyên phát 36 3.3 Tần số rối loạn nhiễm sắc thể cặp vợ chồng vô sinh nguyên phát 37 3.4 Tần số rối loạn nhiễm sắc thể người vợ người chồng cặp vợ chồng vô sinh nguyên phát 40 3.5 Các biểu rối loạn nhiễm sắc thể cặp vợ chồng vô sinh nguyên phát 41 3.5.1 Các biểu rối loạn nhiễm sắc thể người vợ cặp vợ chồng vô sinh nguyên phát 42 3.5.1.1 Các biểu rối loạn nhiễm sắc thể giới tính người vợ 42 3.5.1.2 Các biểu rối loạn nhiễm sắc thể thường người vợ 45 3.5.2 Các biểu rối loạn nhiễm sắc thể người chồng cặp vợ chồng vô sinh nguyên phát 52 3.5.2.1 Các biểu rối loạn nhiễm sắc thể giới tính người chồng 52 3.5.2.2 Các biểu rối loạn nhiễm sắc thể thường người chồng 57 KẾT LUẬN 60 KIẾN NGHỊ 62 TÀI LIỆU THAM KHẢO…………………………………………………………….63 PHỤ LỤC PHỤ LỤC Trần Cúc Ánh Cao học K18-Sinh học Luận văn Thạc sỹ Khoa học DANH MỤC BẢNG Bảng Sự phân bố theo tuổi cặp vợ chồng vô sinh nguyên phát 32 Bảng Sự phân bố nghề nghiệp cặp vợ chồng vô sinh nguyên phát 36 Bảng Tỷ lệ rối loạn nhiễm sắc thể cặp vợ chồng vô sinh nguyên phát số tác giả giới 39 Bảng Sự phân bố biểu rối loạn nhiễm sắc thể cặp vợ chồng vô sinh nguyên phát 42 Bảng Sự phân bố biểu rối loạn nhiễm sắc thể giới tính người vợ 43 Bảng Sự phân bố biểu rối loạn nhiễm sắc thể thường người vợ 45 Bảng Sự phân bố biểu rối loạn nhiễm sắc thể giới tính người chồng 52 Bảng Sự phân bố biểu rối loạn nhiễm sắc thể thường người chồng 55 Trần Cúc Ánh Cao học K18-Sinh học Luận văn Thạc sỹ Khoa học DANH MỤC HÌNH Hình Tỷ lệ rối loạn NST cặp vợ chồng vô sinh nguyên phát 38 Hình Tỷ lệ rối loạn NST người vợ người chồng cặp vợ chồng vô sinh nguyên phát 40 Hình Karyotyp bệnh nhân Nguyễn Thị Thúy Th 45, XX, t(13q; 15q) 47 Hình Karyotyp bệnh nhân Triệu Thị Như Q 46, XX, del(16)(q22) 49 Hình Karyotyp bệnh nhân Đào Thị Quế P 46, XX, inv(12)(p13q13) 51 Hình Karyotyp bệnh nhân Nguyễn Tư C 46, XY, del(Y)(q11.2) 56 Hình Karyotyp bệnh nhân Nguyễn Chí C 46, XY, t(1;2)(p22;q21) 59 Trần Cúc Ánh Cao học K18-Sinh học Luận văn Thạc sỹ Khoa học MỞ ĐẦU Trong sống người, gia đình nguồn hạnh phúc đáng động lực trường tồn nòi giống Khi cặp vợ chồng thực chức sinh sản họ phải đối mặt với nhiều áp lực gia đình xã hội Chẩn đốn điều trị cặp vợ chồng muộn vấn đề mang lại tính nhân văn lớn, mang lại hạnh phúc cho cá nhân, gia đình có ý nghĩa xã hội sâu sắc Theo định nghĩa tổ chức Y tế giới (WHO), cặp vợ chồng gọi vơ sinh sống vịng năm không dùng biện pháp tránh thai mà khơng có Theo thống kê tác giả giới, tỷ lệ vô sinh chiếm khoảng 15% cặp vợ chồng [39] Ở Việt Nam theo thống kê từ năm 80, có khoảng 7-10% cặp vợ chồng độ tuổi sinh đẻ bị vô sinh Hiện nay, vô sinh chiếm tỷ lệ 12-13% tổng số cặp vợ chồng, tương đương với gần triệu cặp vợ chồng [10] Vậy vô sinh cặp vợ chồng người vợ hay người chồng? Từ xưa kể nước phát triển, người ta cho nguyên nhân vô sinh thường người vợ Đó cảm tính, người vợ thấy chồng quan hệ tình dục với bình thường khơng có lí ngun nhân vơ sinh chồng Thật khả hoạt động tình dục khả sinh tinh trùng hồn tồn khác Có người đàn ông liệt dương tinh trùng khoẻ, ngược lại có đàn ơng hoạt động tình dục khoẻ lại khơng có tinh trùng Như vơ sinh người vợ, chồng hay vợ chồng Các nghiên cứu gần cho thấy tỷ lệ vô sinh vợ chiếm khoảng 40%, chồng chiếm 40%, vợ chồng chiếm 10% không rõ nguyên nhân chiếm 10% [79] Vơ sinh nhiều ngun nhân khác Hiện nay, ảnh hưởng nhân tố môi trường sống, dịch bệnh… nên tỷ lệ cặp vợ chồng vô sinh ngày tăng Trong cặp vợ chồng người vợ tử cung bị dị dạng, u xơ tử cung; tử cung nhi tính, viêm lộ tuyến cổ tử cung…; ống dẫn trứng bị chít hẹp hay Trần Cúc Ánh Cao học K18-Sinh học Luận văn Thạc sỹ Khoa học buồng trứng đa nang vấn đề nội tiết…; cịn người chồng tinh hồn khơng xuống bìu hay viêm tinh hồn, bất thường hormon sinh dục… gây khơng có tinh trùng tinh trùng Tuy nhiên nguyên nhân quan trọng gây vô sinh người vợ chồng rối loạn vật chất di truyền Hiện nay, di truyền học người lĩnh vực phát triển nhanh, mạnh có nhiều thành tựu Đặc biệt với tiến vượt bậc phương pháp nuôi cấy tế bào kỹ thuật nhuộm tiêu nhiễm sắc thể (NST), đặc biệt kỹ thuật nhuộm băng G ngày phát triển cải tiến không ngừng giúp cho nhà di truyền học phát biểu rối loạn số lượng cấu trúc NST đoạn, lặp đoạn, chuyển đoạn, đảo đoạn… Ở Việt Nam năm gần có nhiều phịng xét nghiệm di truyền tế bào Viện nhi Trung ương, Viện Sản Trung ương, phòng Di truyền tế bào bệnh viện Từ Dũ, phịng di truyền tế bào mơn Y sinh học – Di truyền trường Đại học Y Hà Nội làm xét nghiệm phân tích NST nhằm mục đích góp phần chẩn đốn bệnh nhân mắc bệnh liên quan đến rối loạn vật chất di truyền để có phương pháp điều trị thích hợp để đưa lời khuyên di truyền cho bệnh nhân Với mong muốn góp phần nhỏ vào cơng tác chăm sóc sức khỏe sinh sản giữ gìn hạnh phúc gia đình cho cặp vợ chồng, chúng tơi thực đề tài: “Nghiên cứu nhiễm sắc thể cặp vợ chồng vô sinh nguyên phát” nhằm mục tiêu: Phát trường hợp rối loạn nhiễm sắc thể cặp vợ chồng vô sinh nguyên phát Trần Cúc Ánh Cao học K18-Sinh học Luận văn Thạc sỹ Khoa học Chương 1- TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 Lược sử nghiên cứu nhiễm sắc thể người Bộ NST người đối tượng nghiên cứu tế bào di truyền học loài người Các nhà khoa học bắt đầu nghiên cứu NST người từ cuối kỷ XIX Năm 1842, Nageli phát NST đánh dấu cơng trình mở đầu Walther Flemming (1882) [24] Ông quan sát NST người kỳ phân bào tiêu tươi, cắt mảnh lấy từ tinh hoàn Trong thời gian đó, NST người vấn đề nhà di truyền học quan tâm, nghiên cứu đề tài đem tranh luận nhiều lần Tuy nhiên thời kỳ hạn chế kỹ thuật làm tiêu bản, mẫu vật không đáp ứng không phù hợp cho việc nghiên cứu chi tiết NST Ở người, số lượng NST nhiều, kích thước nhỏ thường tập trung thành đám, với kỹ thuật cắt mảnh, cố định nhuộm thông thường, nhà di truyền tế bào chưa thể đếm xác nên cho nhân tế bào người có 48 NST, gồm 23 cặp NST thường cặp NST giới tính [37] [58] Những năm thuộc thập kỉ 50 kỉ XX có phát quan trọng khai sinh chuyên ngành di truyền tế bào người, việc xử lý tế bào sốc nhược trương Hsu, T.C (1952), Ford, C.E Hamerton, J.L (1956) tiền xử lý tế bào nuôi cấy colchicine để tích lũy nhiều cụm kì Cơng trình Tjio, J.H Levan (1956) kết hợp xử lý nhược trương colchicine công bố nghiên cứu xác định lại NST 2n người 46 NST khơng phải 48 NST cơng trình Ford Hamerton khẳng định [25] Từ năm 1956 có nhiều phịng thí nghiệm tế bào di truyền xây dựng để nghiên cứu NST Các cơng trình công bố rối loạn NST liên quan với bệnh cơng trình Lejeune (1958-1959) hội chứng Down thừa NST 21 dạng trisomi 21, hội chứng Turner tế bào thể có 45 NST dạng 45,X thiếu NST giới tính X (Ford, 1959), hội chứng Klinefelter nam với 47 NST có ba NST giới XXY (Jacobs Strong, 1959) [35] Trần Cúc Ánh Cao học K18-Sinh học ... cặp vợ chồng vô sinh nguyên phát 32 3.2 Nghề nghiệp cặp vợ chồng vô sinh nguyên phát 36 3.3 Tần số rối loạn nhiễm sắc thể cặp vợ chồng vô sinh nguyên phát 37 3.4 Tần số rối loạn nhiễm. .. nhiễm sắc thể người vợ người chồng cặp vợ chồng vô sinh nguyên phát 40 3.5 Các biểu rối loạn nhiễm sắc thể cặp vợ chồng vô sinh nguyên phát 41 3.5.1 Các biểu rối loạn nhiễm sắc thể. .. bố theo tuổi cặp vợ chồng vô sinh nguyên phát 32 Bảng Sự phân bố nghề nghiệp cặp vợ chồng vô sinh nguyên phát 36 Bảng Tỷ lệ rối loạn nhiễm sắc thể cặp vợ chồng vô sinh nguyên phát số tác