SEMINAR xác định độ nhạy của các catechin trong trà bằng phương pháp HPLC (dược PHÂN TÍCH SLIDE)

Chuyên Đề  Xác định độ nhạy catechin trà phương pháp sắc ký lỏng cao áp HPLC Nội dung I.Giới thiệu II.Thực III.Kết luận IV.Tài liệu 1.Sơ lược nguyên liệu trà  Cây trà có tên khoa học Camellia sinensis (L.) O.Kuntze xếp hệ thống phân loại thực vật sau:  Ngành hạt kín Angiospermae  Lớp song tử điệp Dicotyledonae  Bộ trà Theales  Họ trà Theaceae  Chi trà Cameellia (Thea)  Loài Camellia (Thea) sinensis I Giới thiệu Trà cung cấp số lợi ích cho sức khỏe, giảm cholesterol béo phì, bảo vệ chống lại bệnh tim mạch ung thư Catechin chất chống oxy hóa mạnh tìm thấy trà cho để cung cấp số lợi ích sức khỏe Hình cho thấy cấu trúc catechin có nhiều trà Trắng Đen Trà Xanh Ô long Những loại trà Cơng trình mơ tả chất lỏng nhạy cảm, nhanh, xác hiệu suất cao sắc ký (HPLC) phương pháp để xác định catechins trà Phương pháp sử dụng độ phân giải cao silica cột 2.2 μm Acclaim® C18 RSLC bước sóng 280 nm để tách, phát định lượng catechins trà trắng, xanh, đen, pha trộn trà trắng trà xanh II Thực Thực nghiệm Sử dụng thiết bị sắc khí lỏng cao áp HPLC Hệ thống SRD – 3600 Bơm DGP 3600RS Tấm ngăn mẫu WPS-3000TRS Mẫu lặp, 25 Cột ngăn điều nhiệt TCC-3000RS Đầu dò huỳnh quang DAD-3000RS Dòng di động semi-Micro Điều kiện Cột: Acclaim 120 C18, 2.2 μm (2.1 × 150 mm) Tốc độ dịng: 0.450 mL/min Thể tích tiêm: 1.0 μl Nhiệt độ khay: Phát hiện: Hấp thụ, tia cực tím, 280 nm Nhiệt độ cột: 25 Dung môi: A: 0,1% TFA, 5% acetonitrile B: 0,1% TFA acetonitrile   Điều kiện Hệ thống Áp lực ngược: ~6025–6200 psi khoảng gradient Điều kiện Gradient: Thời gian (phút) A% B% 0.0 100.0 0.0 1.2 100.0 0.0 15.5 71.5 28.5 17.0 71.5 28.5 17.0 100.0 0.0 25.0 100.0 0.0 Chuẩn bị mẫu SRM 3255 Camellia sinensis (Green Tea) Extract, 5x1g/pack _ Mẫu đối chứng (NIST) SRM 3256 _ Mẫu trà thương mại cần kiểm tra Kết thảo luận Tiêu   chuẩn tách Catechins Tách catechin Dụng cụ: cột sắc ký 2.2 RSLC Acclaim 120 C18 (2.1*150 mm) Hình Biểu đồ sắc ký hỗn hợp chứa catechin chiếm ưu trà Tiêu chuẩn phù hợp *EGC, Catechin, EGCG, EC, GCG, and ECG at concentrations of 15, 1, 30, 1, 2, and μg/mL, respectively, were used for precision studies Phân tích mẫu Các LOD cho catechins xác định dựa vào nồng độ chất phân tích cung cấp chiều cao đỉnh 3× (S / N = 3) LOQ xác định nồng độ chất phân tích cung cấp chiều cao đỉnh 10× (S / N = 10) Các LOD dao động từ 0,20 mg/ml EC đến 1,17 mg/ml đ/v GC, LOQ dao động từ 0,59 mg / ml đ/v EC, 3,56 mg / ml đ/v GC Thời gian lưu độ xác tiêu chuẩn xuất sắc, với RSD dao động từ 0,02% đ/v ECG, đến 0.18% đ/v EGC Điều chứng minh độ xác nồng độ phân phối bơm DPG 3600RS Diện tích peak có độ xác dao động từ 1,00% đ/v EGCG, đến 1,51% EC Đỉnh cao độ xác dao động từ 0,25% đ/v EGC, đến 1,70% đ/v GC 30 chu trình Bạch trà Bạch trà chế biến, dự đốn có lượng catechin cao Hình cho thấy tách biệt catechins bạch trà Nồng độ dao động từ 2,73 mg/g đ/v EC, lên 42,6 mg/g đ/v EGCG.Tổng hàm lượng mẫu 98,5 mg/g Figure Separation of catechins in a 1:20 diluted sample of white tea Phân tích mẫu Nồng độ catechin dao động từ 3,45 - 64,0 mg/g đ/v EGCG thương hiệu trà xanh A Trong thương hiệu B, nồng độ catechin dao động từ 3,57 - 60,6 mg/g đ/v EGCG Figure Comparison of catechins in a two different brands of green tea (diluted 1:20) Phân tích mẫu Các thành phần trà đen dao động từ 2,25 mg / g đ/v EC - 27,8 mg / g đ/v EGC Không giống loại trà khác nghiên cứu, trà đen nồng độ EGC cao EGCG Figure Separation of catechins in a 1:20 diluted sample of black tea Độ độ xác mẫu Đối với tất mẫu phân tích nghiên cứu này, RSD thời gian lưu ngày dao động từ 0,01% đ/v nhiều catechin, đến 0,36% đ/v GCG Trong ngày RDs vùng đỉnh dao động từ 0,25% đ/v EC 1,76% cho GCG Các RSDs vùng đỉnh ngày dao động từ 1,04% đ/v ECG, lên 2,15% EC III.KẾT LUẬN Cơng trình nghiên cứu mô tả phương pháp đơn giản, thích hợp để tách định lượng catechins khác trà thương mại có sẵn với dung mơi chiết xuất đơn giản Sử dụng HPLC độ hấp thụ Acclaim C18 có độ phân giải silica cao để tách phát catechins thời gian 20 phút lý tưởng cho việc kiểm tra định lượng catechins thường xuyên sản phẩm trà khác THẬN TRỌNG Trifluoroacetic acid (TFA) chất gây ăn mịn, gây bỏng nuốt, hít vào hấp thụ qua da Đọc tài liệu an toàn vật liệu (MSDS) trước xử lý liên hệ với tổ chức xử lý có phép để đảm bảo tất lý phù hợp với liên bang, tiểu bang, quy định môi trường địa phương IV Tài liệu than khảo Sensitive Determination of Catechins in Tea by HPLC_Application Note 25 Castro, J.; Pregibon, T.; Chumanov, K.; Marcus, R K Determination of Catechins and Caffeine in Proposed Green Tea Standards Reference Materials by Liquid Chromatography-Particle Beam/Electron Ionization Mass Spectrometry (LCPB/EIMS) Talanta 2010, 82 (5), 1687–95 Kajimoto, O.; Kajimoto, Y.; Yabune, M.; Nozawa, A.; Nagata, K.; Kakuda, T Tea Catechins Reduce Serum Cholesterol Levels in Mild and Borderline Hypercholesterolemia Patients J Clin Biochem Nutr 2003, 33,101–111 Bu-Tian, Ji et al Green Tea Consumption and the Risk of Pancreatic and Colorectal Cancers Int J Cancer 1997, 70, 255–258 Zuo, Y.; Chen, H.; Deng, Y Simultaneous Determination of Catechins, Caffeine and Gallic Acids in Green, Oolong, Black and Pu-erh Teas using HPLC with a Photodiode Array Detector Talanta 2002, 57, 307–316 Jian-Min, Yuan et al Urinary Biomarkers of Tea Polyphenols and Risk of Colorectal Cancers in the Shanghai Cohort Study Int J Cancer 2007, 120, 1344–1350 Thank you !!! ... cao sắc ký (HPLC) phương pháp để xác định catechins trà Phương pháp sử dụng độ phân giải cao silica cột 2.2 μm Acclaim® C18 RSLC bước sóng 280 nm để tách, phát định lượng catechins trà trắng,... for precision studies Phân tích mẫu Các LOD cho catechins xác định dựa vào nồng độ chất phân tích cung cấp chiều cao đỉnh 3× (S / N = 3) LOQ xác định nồng độ chất phân tích cung cấp chiều cao... minh độ xác nồng độ phân phối bơm DPG 3600RS Diện tích peak có độ xác dao động từ 1,00% đ/v EGCG, đến 1,51% EC Đỉnh cao độ xác dao động từ 0,25% đ/v EGC, đến 1,70% đ/v GC 30 chu trình Bạch trà