Tận dụng nguồn nguyên liệu rẻ tiền để sản xuất vi khuẩn lactic (probiotics) và xây dựng phương pháp bảo quản probitics

Đại Học Quốc Gia Thành Phố Hồ Chí Minh TRƯỜNG ĐẠI HỌC BÁCH KHOA Y Z NGUYỄN THỊ THANH THUỶ TẬN DỤNG NGUỒN NGUYÊN LIỆU RẺ TIỀN ĐỂ SẢN XUẤT VI KHUẨN LACTIC (PROBIOTICS) VÀ XÂY DỰNG PHƯƠNG PHÁP BẢO QUẢN PROBIOTICS Chuyên ngành: CÔNG NGHỆ SINH HỌC Mã số: 60 42 80 LUẬN VĂN THẠC SĨ TP HỒ CHÍ MINH, tháng 11 năm 2007 CÔNG TRÌNH ĐƯC HOÀN THÀNH TẠI TRƯỜNG ĐẠI HỌC BÁCH KHOA ĐẠI HỌC QUỐC GIA TP HỒ CHÍ MINH CÁN BỘ HƯỚNG DẪN KHOA HỌC: TS HOÀNG QUỐC KHÁNH CÁN BỘ CHẤM NHẬN XÉT 1: CÁN BỘ CHẤM NHẬN XÉT 2: Luận văn thạc só bảo vệ HỘI ĐỒNG CHẤM BẢO VỆ LUẬN VĂN THẠC SĨ – TRƯỜNG ĐẠI HỌC BÁCH KHOA THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH Ngày…… tháng…….năm…… LỜI CẢM ƠN Tận đáy lòng mình, em xin bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc đến TS Hoàng Quốc Khánh, hướng dẫn tận tình tạo điều kiện thuận lợi cho em để hoàn thành tốt luận văn Xin chân thành cảm ơn tất quý thầy cô trường Đại Học Bách Khoa TP Hồ Chí Minh truyền đạt kiến thức quý báu cho em suốt thời gian học tập trường Xin bày tỏ lòng biết ơn đến quý thầy cô, anh chị bạn làm việc Viện Sinh Học Nhiệt Đới TP Hồ Chí Minh quan tâm giúp đỡ suốt trình thực đề tài Xin chân thành cảm ơn TP Hồ Chí Minh, tháng 11 năm 2007 Nguyễn Thị Thanh Thuỷ i    MỤC LỤC DANH MỤC VIẾT TẮT DANH MỤC BẢNG DANH MỤC HÌNH LỜI MỞ ĐẦU Chương 1: TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 CÁC NGHIÊN CỨU TRONG NƯỚC VÀ NGOÀI NƯỚC 1.1.1 Nghiên cứu nước 1.1.2 Nghiên cứu nước 1.2 ĐẠI CƯƠNG VỀ VI KHUẨN ĐƯỜNG RUỘT 1.2.1 Số lượng vi sinh vật ruột người 1.2.2 Những nhân tố ảnh hưởng lên thành phần số lượng vi sinh vật đường ruột 1.2.3 Sự sống sót vi sinh vật suốt trình tiêu hoá 10 1.2.4 Chức vi sinh vật đường ruột 11 1.3 ĐẠI CƯƠNG VỀ VI KHUẨN LACTIC 12 1.3.1 Đặc điểm phân loại vi khuaån lactic 12 ii    1.3.1.1 Họ phụ Streptococcacae 13 1.3.1.2 Họ phụ Lactobacillacea 14 1.3.2 Vi khuaån Lactobacillus acidophilus 17 1.4 ĐẠI CƯƠNG VỀ PROBIOTIC 18 1.4.1 Định nghóa probiotic 18 1.4.2 Những tiêu chí chọn chủng probiotic 19 1.4.2.1 Những tiêu chí chọn giống 19 1.4.2.2 Những phương pháp nghiên cứu chọn chủng probiotic 22 1.4.2.3 Những khía cạnh an toàn probiotic 23 1.4.3 Cơ chế hoạt động probiotic 25 1.4.4 Vai troø cuûa probiotic 26 1.4.4.1 Sự không dung nạp lactose 26 1.4.4.2 Giảm tác nhân gây ung thư 26 1.4.4.3 Chữa trị tiêu chảy 27 1.4.4.4 Kích thích hệ thống miễn dịch 27 1.4.4.5 Giaûm cholesterol 28 1.4.4.6 Điều trị dị ứng số loại thực phẩm 28 iii    1.4.4.7 Ngăn chặn xử lý nhiễm khuẩn Helicobacter pylori 29 1.4.5 Probiotic khứ, tương lai 29 1.5 CÁC PHƯƠNG PHÁP BẢO QUẢN CHẾ PHẨM 31 1.5.1 Lịch sử kó thuật giữ bảo quản giống vi sinh vật 31 1.5.2 Những nhân tố giúp nâng cao tỉ lệ sống trình bảo quản 33 1.5.2.1 Pha phát triển mật độ tế bào 34 1.5.2.2 Môi trường phát triển 35 1.5.2.3 Môi trường sấy khô 35 1.5.2.4 Những phương pháp sấy khoâ 36 1.5.2.4a Saáy phun 36 1.5.2.4b Đông khô 38 1.5.2.5 Phương pháp đóng gói bảo quản 39 1.5.3 So sánh phương pháp đông khô phương pháo sấy phun 39 1.5.3.1 Giống 39 1.5.3.2 Khaùc 39 1.5.4 Phương pháp xác định tỉ lệ sống tế bào vi khuẩn 40 iv    1.6 NGUỒN NGUYÊN LIỆU TỰ NHIÊN CHO SỰ PHÁT TRIỂN CỦA VI SINH VẬT 41 Chương 2: VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP 44 2.1 VẬT LIỆU 45 2.1.1 Đối tượng nghiên cứu 45 2.1.2 Duïng cuï thiết bị 45 2.1.2.1 Duïng cuï 45 2.1.2.2 Thiết bị 45 2.1.3 Vật liệu hoá chất 46 2.1.4 Môi trường 46 2.1.4.1 Môi trường MRS 46 2.1.4.2 Môi trường LB 47 2.1.4.3 Moâi trường thử khả lên men nguồn carbonhydrat47 2.1.4.4 Thuốc thử Uphenmen 48 2.1.4.5 Môi trường Carbonat agar 48 2.1.4.6 Môi trường nước chiết đậu nành 48 2.1.4.7 Môi trường nước chiết cà rốt 48 v    2.1.4.8 Môi trường nước chiết cải thảo 49 2.1.4.9 Môi trường nước chiết bắp 49 2.2 CÁC PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 49 2.2.1 Sơ đồ nghiên cứu 49 2.2.2 Thuyết minh sơ đồ nghiên cứu 51 2.2.3 Các phương pháp sử dụng trình nghiên cứu 51 2.2.3.1 Phương pháp phân lập chọn lọc giống vi khuẩn L acidophilus khiết 51 2.2.3.2 Khảo sát đặc điểm hình thái, sinh lí, sinh hoá giống vi khuẩn L acidophilus 52 2.2.3.2a Phương pháp xác định hình thái nhuộm gram 52 2.2.3.2b Thử nghiệm khả sinh acid môi trường CaCO3 53 2.2.3.2c Thử nghiệm khả sinh acid lactic 53 2.2.3.2d Thử nghiệm khả lên men nguồn carbonhydrat 54 2.2.3.2e Quan hệ với oxi 54 2.2.3.2f Ảnh hưởng cuûa pH 55 2.2.3.2g Ảnh hưởng nhiệt độ 55 2.2.3.2h Khảo sát khả kháng vi khuẩn gây bệnh E.coli 56 vi    2.2.3.3 Phương pháp đếm khuẩn lạc 57 2.2.3.4 Phương pháp tối ưu hoá qui hoạch thực nghiệm môi trường nước chiết sữa đậu nành 58 2.2.3.4a Nguyên tắc 58 2.2.3.4b Cách tiến hành 58 2.2.3.5 Phương pháp xác định đường cong tăng trưởng 59 2.2.3.5a Trong môi trường MRS 59 2.2.3.5b Trong môi trường nước chiết sữa đậu nành 60 2.2.3.6 Phương pháp xác định nồng độ đường tiêu hao hàm lượng acid lactic sinh môi trường nuôi cấy theo thời gian 60 2.2.3.6a Phương pháp xác định hàm lượng acid lactic 60 2.2.3.6b Phương pháp xác định hàm lượng đường tổng số 61 2.2.3.7 Phương pháp bảo quản L acidophilus 62 2.2.3.7a Phương pháp ñoâng khoâ 62 2.2.3.7b Phương pháp sấy phun 64 2.2.3.8 Xác định độ ẩm mẫu sấy phun 65 Chương 3: KẾT QUẢ VÀ BIỆN LUẬN 66 vii    3.1 ĐẶC ĐIỆM HÌNH THÁI CỦA VI KHUẨN LACTOBACILLUS ACIDOPHILUS 67 3.1.1 Hình dạng khuẩn lạc 67 3.1.2 Hình dạng tế bào L acidophilus 67 3.2 CÁC ĐẶC TÍNH SINH LÝ, SINH HOÁ CỦA VI KHUẨN L ACIDOPHILUS 68 3.2.1 Khả sinh acid 68 3.2.2 Khả sinh acid lactic 69 3.2.3 Khả lên men nguồn carbonhydrat 70 3.2.4 Quan hệ với oxi 72 3.2.5 Khả tăng trưởng pH khác 73 3.2.6 Khả tăng trưởng nhiệt độ khác 74 3.3 KHẢ NĂNG TĂNG TRƯỞNG CỦA l ACIDOPHILUS TRÊN MÔI TRƯỜNG MRS 75 3.4 KHẢO SÁT MÔI TRƯỜNG TỰ NHIỆN THÍCH HP CHO KHẢ NĂNG TẠO SINH KHỐI CỦA CHỦNG VI KHUẨN L ACIDOPHILUS 77 3.5 TỐI ƯU HOÁ MÔI TRƯỜNG 78 3.5.1 Thực nghiệm yếu tố toàn phần 78 [25] Carvalho, A.S., Silva, J., Ho, P., Teixeira, P., Malcta, F.X., & Gibbs, P " Relevant factors for the preparation of freeze-dried lactic acid bacteria", International dairy Journal [26] Chikai T., nakao H., Uchida K "Deconjugation of bile acids by human intestinal bacteria implanted in germ-free rats" Lipids 22, 669-671, 1987 [27] Claeson.M., Merson M H "Global progress in the control of diarrheal disease" Pediatr Infect Diseases.9, 345-355, 1990 [28] Cleasson M.J., Sinderen> D V and O’toole P W, "The genus lactobacillus-a genomic basis for understanding its diversity" FEMS Microbiol Lett 269, 22-28, 2007 [29] Collado MC; Hernandez; Sanz Y, " production of bacteriocin-like inhibitory compounds by human fecal Bifidobacterium strains" J Food Prot 68, 1034-1040, 2005 [30] Collado MC; Hernandez; Sanz Y ; salminen S, "Adhesion proerties and competitive pathogen exclusion ability of bifidobacteria with acquired acid resistance" J Food Prot; in press, 2006 [31] Corcoran B.M., Ross R.P., Fitzgerald G F., Stanton C"Comparative survival of probiotic lactobacilli spray-dried in the presence of prebiotic substances" Journal of Applied Microbiology 96, 1024-1039, 2004 [32] Dai D., & Walker, W.A, " Protective nutrients and bacterial colonization in the immature human gut" Advances in Pediatrics 46, 353-382, 1999 [33] Favier CF, Vaughan EE, de vos WM & Akkermans ADL "Molecular monitoring of succession of bacterial communities in human neonates" Applied and environmental Microbiology.68: 219-226, 2002 [34] Fernandes C F; Shahani K.M " Anticarcinogenic and immunological properties of dietary lactobacilli" J.Food Prot 53, 704-710, 1990 [35] Fuller R " Probiotics in man and animals" Journal of applied bacteriology, 66, 365-378, 1989 [36] Gilat T., Russo S., Gelman-Malachi E and Aldor T A, "Lactose in man: A non –adaptable enzym" Gastroenterology 102, 1269-1277, 1972 [37] Guiemonde M; Delgado S; Mayo B; Ruas-Madiedo P; Margolles A; de los Reyes-Gavilan CG "Viability and diversity of probiotic lactobacillus and Bifidobacterium populations included in commercial fermanted milks" Food Res Int.37, 89-850, 2004 [38]Guimende M; Jalonen L; He F; Hiramatsu M; Salminen S, "Adhension and competitive inhibition and displacement of human enteropathogens by selected lactobacilli" Food Res Intl, in press, 2006 [39] Guimende M; Noriega L; margolles A; de los Reyes-Gavilan CG; Salminen S, " Ability of Bifidobacterium strains with acquired resistant to bile to adhere to human intestinal mucus" Int J Food Microbiol 101,341-346, 2005 [40] Gilliland S.E; Speck M.L; Nauyok J; Giesbecht.F.G, " Influence of consuming nonfermented milk containing lactobacillus acidophilus on fecal flora of healthy males" J Dairy Sci 61, 1-10, 1978 [41] Giulio.D.B, Orlando.P;barba.G; Coppola.R; Rosa De M; Sada.A; Prisco De P.P; Nazzaro.F, "Use of alginat and cryo-protective sugars to improve the viability of lactic acid bacteria after freezing and freeze-drying" Journal of microbiology & biotechnology 21, 739-746, 2005 [42] Hasagawa T, "History and evolution of culture maintenance and preservation techniques" in maintaining cultures for Biotechnology and Industry, Academic Press, Harcourt Brace Jovanovich Publishers, 15-27, 1996 [43] Havenaar.R; Huis in’t Veld JHJ, " Selection of strains for probiotic use" In: Fuller R Editor Probiotics, the Scientific Basis London: Chapm an & hall.pp, 209224, 1992 [44] Heymann.M and Menard S, "Review Probiotic microorganism: how they effect intestinal pathophysiology" Cellular & Molecular Life Science 59, 1-15, 2002 [45] Holzapfel W H., Haberer.P., Geisen.R., Bjorkroth J and Schillinger U, " Taxonomy and important features of probiotic microorganism in food and nutrition" Am J Clin Nurtr, vol 73, 365-375, 2001 [46] Hubalek Z, " Protectants used in the cryopreservation of microorganisms" Crybiology 46, 205-229, 2003 [47] Ichikawa T, "Functional foods in Japan" In Functional Foods, DesignerFoods, Pharmafoods, Neutraceuticals, (Goldberg, I., editor), Chapman & hall Pblishers (New York), 1994 [48] Isolauri E; Juntunen M; Rautenan T ; Sillanaukee P ; Koivula T, " A human Lactobacillus strain (Lactobacillus casei sp Strain GG) promotes recovery from acute diarrhea in children" Pediatrics 88, 90-97, 1991 [49] Jose Luis Balcazar; Ignacio de Blas; Imanol Ruiz-Zazuela; david Cunningham; Daniel Vendrell; Jose Luis Muzquiz, " The role of probiotics in aquaculture" Veterinary Microbiology, 178, 173-186, 2006 [50] Kopp-hoolihan L, " Porphylactic and therapeutic uses of probiotics" A review Journal of American Dietetic Association, 101, 229-238, 2001 [51] Kretchmer N, "Lactose and lactase" Sci Amer, 227:71, 197 [52] Lam Emily K.Y., Woo Patrick C Y and Cho C H, " Probiotic and gastrointestinal disorders" Pharmacologyonline 1, 88-147, 2005 [53] Lankaputhra WEV; Shah NP, " Survival of lactobacillus acidophilus and Bifidobacterium spp in the presence of acid and bile salts" Cult Dairy Prod J, 30:27, 1995 [54] Langrish T A G; Chan W C; Kota K, " Comparison of maltodextrin and skimmilk wall deposition rates in a pilot-scale spray dryer" Power technology, 2007 [55] Leslie, S.B., Israeli,E., Lighthart, B., Crowe, J.H., Crowe, L M, " Trehalose and sucrosr protect both membranes and proteins in intact bacteria during drying" Applied and environmental microbiology 61(10), 3592-3597, 1995 [56] Lim HJ; Kim SY Lee WK, " Isolation of cholesterol-lowering lactic acid bacteria from human intestine for probiotic use" J Vet Sci, 5: 391-5, 2004 [57] Lilly DM & Stillwell RH " Growth promoting factors produced by microorganisms" Science, 147:747-748, 1965 [58] Mackie R I., Sghir, A., Gaskins, H.R, " Developmental microbial ecology of the neonatal gastrointestinal tract" American Journal of Clinical Nutrition, 69, 1035S-1045S, 1999 [59] Malik K A, " Maintenace of microorganisms by simple methods" in maintenance of microorganisms and cultured cells, Academic Press, Harcourt Brace Jovanovich Publishers, 121-132, 1991 [60] Marteau P., Pochart P., Bouhnik Y., rambaud J C, " Fate and effects of some transiting micro-organisms in the humn gastrointestinal tract" Word Rev Nutr Diet 74, 1-21, 1993 [61] Martin C, " The elixir of life? " Chemistry in Britain, 34-36, 1996 [62] Mattila- Sandholm T., Myllarinen P., Crittenden R., Mogensen G., Fonden R., Saarela.M, "Technological challenges for future probiotic foods" In international Dairy Journal 12, 173-182, 2002 [63] McIntosh G H, " Probiotics and colon cancer prevention" Asia Pac J Clin Nutr %, 48-52, 1996 [64] Mitsuoka T " The human gastrointestinal tract in: The lactic acid bacteria" Elsevier Appliied Science, New York, 69-114, 1992 [65] Millqvist –Fureby, A., Malmsten, M., Bergenstahl, B " An aqueous polymer two-phase system as carrier in the spray-drying of biological material" Journal of Colloid and Intersurface Science 225, 54-61, 2000 [66] Milton LP Espirito Santo; Luiz H Beirao; Ernani S Sant’Anna " Bacteriocinogenic effect of Lactobacillus sakei 2a on microbiological quality of fermented Sardinella brasiliensis" Brazilian Archives of Biology and technology, 46: 553-561, 2003 [67] Morgan C A; Herman N; White P.A, Vesey.G " Preservation of microorganism by drying" Journal of microbiological methods 66, 183-193, 2006 [68] Nielsen, O.H., Jorgensen, S., Pedersen.K., Justesen, T " Microbial evaluation of jejunal aspirates and faecal samples after oral administration of bifidobacteria and lactic acid bacteria" J Appl Bacteriol 76, 469-474, 1994 [69] Parker RB, " Probiotics, the orther half of the antibiotic story" Animal Nutrition and health, 29: 4-8, 1974 [70] Richardson D " Probiotics and product innovation" Nutr Food Sci 6, 27-33, 1996 [71] Robert R; Stickney, " Encyclopedia of aquaculture", 2000 [72] Rosemary J Young, MS, RN, & Shari Huffman, MN, RN, CPNP, " Probiotic use in children" Journal of Pediatric health care, 279, 277-283, 2003 [73] Saavedra J M; Bauman I O; Perman J.A; Yolken R H, " Feeding of Bifidobacterium bifidum and streptococcus thermophilus to infants in hospitals for the prevention of diarrhea and shedding of rotavirus" Lancet 344, 1046-1049, 1994 [74] Saarela M., Lahteenmaki L., Crittenden R., Salminen S., Mattila- Sandholm T, " Gut bacteria and health foods-the European perspective" In international Journal of Food Microbiology 78, 99-117, 2002 [75] Saarela M., mogensen G., Fonden R., Matto J., Mattila-Sandholm T, " Probiotic bacteria: safety, functional and technological properties" In Journal of Biotechnology 84, 197-215, 2000 [76] Salminen S; Bouley C; Boutron-Roault MC et al, " Gastrointestinal physiology and function –targets for functinal food development " British Journal of Nutrition, 80, 147-171, 1998 [77] Salminen S; Bouley C; Boutron-Roault MC et al, " Functional food science and gastrointestinal physiology and function " British Journal of nutrition, 80: 147171, 1998 [78] Sampo J Lahtinen; Miguel Gueimonde; Arthur C Ouwehand; Johanna P Reinikainen; Seppo J Salminen, " Comparison of four methods to enumerate probiotic bifidobacteria in a fermented food product" Food microbiology, 23, 571577, 2006 [79] Salminen S., Isolauri E, " Intestinal colonization, microbiota, and probiotics" In Journal of Pediatrics, 2006 [80] Sampo J Lahtinen; Miguel Gueimonde; Arthur C Ouwehand; Johanna P Reinikainen; Seppo J Salminen, " Probiotic bacteria may become dormant during storage" American for microbiology, 1662-1663, 2004 [81] Shah, N.P Bifidobacterium spp, "Applications in fermented milks" In Encyclopaedia of Dairy Science, 147-151 London Academic press, 2002 [82] Shornikova A V; Isolauri E; Burkanova L ; Lukovnikova S ; Vesikari.T, " A trial in the Karelian republic of oral rehydration (sic) and latobacillus GG for treatment of acute diarrhea" Act Pediatr 86, 406-465, 1997 [83] Sloan A E, " Top 10 trends to watch and work on" Food tech 48(7), 89-100, 1994 [84] Suarez F L; Savaiano D A, " Diet, genetics and lactose intolerance" Foog tech 51, 74-76, 1997 [85] Temmerman R; Pot B; Huys G; Swings.J, " Identification and antibiotic susceptibility of bacterial isolates from probiotic products" Int J Food Microbiol, 81:1-10, 2003 [86] Teixeira P; Casreo H; & Kirby R, " Spray drying as a method for preparing contrentrated cultures of Lactobacillus bulgaricus" Journal of Applied Microbiology 78, 456-462, 1995 [87] Toumola E; Crittenden R, Playne M, Isolauri E, Salminen S, " Quality assurance criteria for probiotic bacteria" Am J clin Nutr, 73: 393S-398S, 2001 [88] vaughan E, de Vries M, Zoetendal E et al, " The intestinal LAB" Anthonie van Leeuwenhoek, 82 : 341-352, 2002 [89] Vamanu A ; Vamanu E ; Drugulescu M ; Popa O ; Campeanu G, " Identification of a lactic bacterium strain used for obtaining a Pollen –based Probiotic Product" Biochemistry and Biotechnology Center 77: 75-80, 2005 [90] Vesterlund S; Paltta J; Karp M; Ouwehand AC, " Measurement of bacterial adhesion invitro evaluation of different methods" J Microbiol met, 60: 225-233, 2005 [91] Verchuere; Geert Rombaut; Patrick Sorgeloos; Willy Verstraete, " Probiotic bacteria as biological control agents in aquaculture", 2000 [92] Yoon K.Y; Woodams E.E; hang Y.D, " Fermentation of beet juice by beneficial lactic acid bacteria " Lebansm-Wiss.u-Technol, 38, 73-75, 2005 [93] Zoetendal EG; von Wright A Vilpponen-Salmela T et al, " Mucosa-associated bacteria in the human gastrointestial tract are uniformly distributed along the colon and differ from the community recovered from feces" Applied and Environmental Microbiology 68: 3401-3407, 2002 [94] Zamora L M; Carretero C and Pares D, " Comparative survival rates of lactic acid bacteria isolated from blood, following spray-drying and freeze-drying" In food science technology, 12, 77-84, 2006 [95] Wilhelm H.H; Petra H; Johannes S; Ulrich S; Jos H.J>H in’t Veld, " Overview of gut flora and probiotics" International Journal of Food Microbiology 41, 85-101, 1998 TÀI LIỆU WEB [96] www.biology.kenyon.edu/ /florafiber.jpg [97] www.garynull.com/document/arthritis/friendly_bacteria.htm [98] www.dwb.unl.edu [99]www dalat.gov.vn/rauhoadl [100]www.bacninh.gov.vn PHỤ LỤC BẢNG KHẢ NĂNG TĂNG TRƯỞNG TRÊN CÁC pH KHÁC NHAU pH 2.5 3.0 3.5 4.0 4.5 5.0 5.5 6.0 6.5 7.0 7.5 8.0 OD 0.1065 0.2205 1.596 2.484 3.954 5.958 6.924 7.11 6.924 6.69 4.698 4.41 KHẢ NĂNG TĂNG TRƯỞNG TRÊN CÁC NHIỆT ĐỘ KHÁC NHAU Nhiệt độ(oC) 30 37 42 50 OD 6.888 7.422 7.218 0.933 ĐƯỜNG TƯƠNG QUAN TUYẾN TÍNH GIỮA OD VÀ MẬT ĐỘ TẾ BÀO OD 0.127 0.28 0.396 0.524 CFU/ml 1.2 x 107 3.6 x 107 5.5 x 107 7.6 x 107 ĐƯỜNG CONG TĂNG TRƯỞNG CỦA L ACIDOPHILUS TRÊN MÔI TRƯỜNG MRS Thời gian (h) 17 18 19 20 21 23 24 25 OD 0.421 0.456 1.512 3.402 4.298 7.28 7.322 7.336 7.084 7.028 7.168 7.098 6.832 TỐI ƯU HOÁ THEO QUI HOẠCH THỰC NGHIỆM Số thí nghiệm Taâm Taâm Taâm 10 11 12 CFU/ml 5.6 x 108 2.1 x 108 1.6 x 109 x 108 3.2 x 108 3.1 x 108 4.6 x 108 3.7 x 108 4.8 x 108 6.3 x 108 x 108 1.4 x 109 2.5 x 108 1.9 x 108 2.1 x 107 log 8.75 8.33 9.215 8.78 8.51 8.495 8.665 8.565 8.68 8.8 8.7 9.15 8.4 8.28 7.32 ĐƯỜNG CONG TĂNG TRƯỞNG CỦA L ACIDOPHILUS TRÊN MÔI TRƯỜNG NƯỚC CHIẾT ĐẬU NÀNH Thời gian (h) 16 24 30 48 54 72 CFU/ml 4.4 x 108 8.4 x 108 1.1 x 109 2.3 x 108 2.1 x 108 1.7 x 108 log 8.643 8.924 9.041 8.36 8.32 8.23 ĐƯỜNG CHUẨN NỒNG ĐỘ ĐƯỜNG Nồng độ đường (µg/l) 10 20 30 40 50 60 70 OD 0.1555 0.258 0.4265 0.532 0.653 0.791 0.913 KHẢ NĂNG SỬ DỤNG ĐƯỜNG CỦA VI KHUẨN L ACIDOPHILUS Thời gian (h) 16 24 30 48 54 72 OD 313.5 256.8 246.4 238.6 227.6 217.6 215.6 Nồng độ đường (g/l) 24.68 20.21 19.4 18.79 17.9 17.1 17.0 KHẢ NĂNG SINH ACID LACTIC CỦA VI KHUẨN L ACIDOPHILUS Thời gian (h) 16 24 30 48 54 72 VNaOH 0.4 1.4 1.7 2.4 2.8 3.4 4.2 MẬT ĐỘ TẾ BÀO TRƯỚC VÀ SAU ĐÔNG KHÔ Mẫu Trước đông khô (CFU/ml) Sau đông khoâ (CFU/ml) 2.9 x 109 2.9 x 109 1.1 x 109 1.3 x 109 1.7 x 109 4.5 x 108 5.6 x 108 5.3 x 108 9.7 x 108 7.1 x 109 MẬT ĐỘ TẾ BÀO TRƯỚC VÀ SAU SẤY PHUN Mẫu Trước sấy phun (CFU/ml) Sau saáy phun (CFU/ml) x 109 3.8 x 108 3.1 x 109 3.3 x 109 2.2 x 109 3.2 x 109 x 108 1.1 x 109 1.4 x 109 1.3 x 109 ... liệu rẻ tiền dễ kiếm Vi? ??t Nam để thu sinh khối vi khuẩn lactic, thực đề tài "Tận dụng nguồn nguyên liệu rẻ tiền để sản xuất vi khuẩn lactic (probiotics) xây dựng phương pháp bảo quản probiotics"... chí bảo quản nhiệt độ thấp 4oC 2 Nhằm mục đích tìm hiểu để khắc phục mặt hạn chế phương pháp bảo quản, thời gian bảo quản làm giảm tỉ lệ sống vi khuẩn lactic tận dụng nguồn nguyên liệu rẻ tiền. .. tế bào vi khuẩn sống thường bị giảm sau tiến hành phương pháp bảo quản sau bảo quản tế bào vi khuẩn bị đặt điều kiện bất lợi nhiệt độ, hoạt độ nước thấp sản phẩm probiotics thời gian bảo quản dài