tổng hợp và xây dựng tiêu chuẩn tạp c lisinopril – tạp d lisinopril làm chất đối chiếu

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO ĐẠI HỌC Y DƯỢC THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH ĐỖ TRƯỜNG THANH MINH TỔNG HỢP VÀ XÂY DỰNG TIÊU CHUẨN TẠP C LISINOPRIL – TẠP D LISINOPRIL LÀM CHẤT ĐỐI CHIẾU LUẬN VĂN THẠC SĨ DƯỢC HỌC Thành phố Hồ Chí Minh – 2020 BỘ Y TẾ BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ ĐẠI HỌC Y DƯỢC THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH ĐỖ TRƯỜNG THANH MINH TỔNG HỢP VÀ XÂY DỰNG TIÊU CHUẨN TẠP C LISINOPRIL – TẠP D LISINOPRIL LÀM CHẤT ĐỐI CHIẾU Chuyên ngành: Kiểm nghiệm Thuốc – Độc chất Mã số: 8720210 LUẬN VĂN THẠC SĨ DƯỢC HỌC Hướng dẫn khoa học: PGS.TS TRẦN VIỆT HÙNG PGS.TS TRƯƠNG NGỌC TUYỀN Thành phố Hồ Chí Minh – 2020 Master’s Thesis – Academic course: 2018 – 2020 Specialty: Drug Quality Control & Toxicology – Code: 8720210 SYNTHESIS AND STANDARDIZATION OF LISINOPRIL IMPURITY C LISINOPRIL IMPURITY D FOR ESTABLISHING IMPURITY REFERENCE STANDARDS Đo Truong Thanh Minh Supervisor: Assoc Prof Dr Tran Viet Hung, Assoc Prof Dr Truong Ngoc Tuyen Keywords: S,S,S-diketopiperazine, acid (2S)-2-[(3S, 8aS)-3-(4-aminobutyl)-1,4dioxohexahydropyrrolo[1,2-a]pyrazin-2(1H)-yl]-4-phenylbutanoic, lisinopril impurity C; R,S,S-diketopiperazine, acid (2S)-2-[(3S, 8aR)-3-(4-aminobutyl)-1,4dioxohexahydropyrrolo[1,2-a]pyrazin-2(1H)-yl]-4-phenylbutanoic, lisinopril impurity D Introduction: In Vietnamese pharmacopoeia and other pharmacopoeias, there are many monographs requiring impurity tests in pharmaceutical substances as well as corresponding finished products such as telmisartan, losartan, irbesartan, candesartan valsartan… Meanwhile, some impurity reference standards are not available in Vietnam or have to import with high price Therefore, the aim of this study was to synthesis and standardize: acid (2S)-2-[(3S, 8aS)-3-(4-aminobutyl)-1,4dioxohexahydropyrrolo[1,2-a]pyrazin-2(1H)-yl]-4-phenylbutanoic (lisinopril impurity C), acid (2S)-2-[(3S, 8aR)-3-(4-aminobutyl)-1,4-dioxohexahydropyrrolo [1,2-a]pyrazin-2(1H)-yl]-4-phenylbutanoic (lisinopril impurity D), as reference substances for impurity test of lisinopril Materials and methods Objects of study: impurity C and D Methods: In this study, lisinopril impurity C and lisinopril impurity D were successfully synthesized by ring closure of lisinopril in acidic medium Then, the products were purified by column chromatography and crystallization, determined chemical structure by means of spectral data, and purity by HPLC Finally, impurity C and D were evaluated and established impurity reference standard Results: Impurity C and D were successfully synthesized by ring closure of lisinopril in acidic medium, with yield of C and D impurity were approximately 41,6% and 67,3%, respectively By using HPLC-PDA, their chromatographic purity was determined over 98% on the basis, conforming fully to establish reference substance for lisinopril impurities testing Moreover, a HPLC method for purity determination of impurity C, D was developed and validated according to ICH guidelines The method showed selectivity, wide linearity range, and high precision Conclusions: Impurity C and D were successfully standardized as reference substance for related impurity test of lisinopril Luận văn Thạc sĩ – Khóa 2018 – 2020 Chuyên ngành: Kiểm nghiệm thuốc & Độc chất – Mã số: 8720210 TỔNG HỢP VÀ XÂY DỰNG TIÊU CHUẨN TẠP C LISINOPRIL – TẠP D LISINOPRIL LÀM CHẤT ĐỐI CHIẾU Đỗ Trường Thanh Minh Thầy hướng dẫn: PGS.TS Trần Việt Hùng, PGS.TS Trương Ngọc Tuyền Từ khóa: S,S,S-diketopiperazin, acid (2S)-2-[(3S, 8aS)-3-(4-aminobutyl)-1,4dioxohexahydropyrrolo[1,2-a]pyrazin-2(1H)-yl]-4-phenylbutanoic, tạp C lisinopril; R,S,S-diketopiperazin, acid (2S)-2-[(3S, 8aR)-3-(4-aminobutyl)-1,4dioxohexahydropyrrolo[1,2-a]pyrazin-2(1H)-yl]-4-phenylbutanoic, tạp D lisinopril Mở đầu: Dược điển Việt Nam V Dược điển nước có nhiều chuyên luận yêu cầu phải kiểm tra tạp chất liên quan nguyên liệu thành phẩm tương ứng telmisartan, losartan, irbesartan, candesartan valsartan…Trong đó, số tạp chất chưa có Việt Nam phải mua từ nước với giá cao Do đó, việc nghiên cứu tổng hợp tiêu chuẩn hóa tạp chất góp phần nâng cao cơng tác kiểm tra chất lượng thuốc giảm chi phí cho việc nhập tạp chuẩn từ nước ngồi… Vì đề tài thực với mục tiêu tổng hợp tiêu chuẩn hóa hai tạp chất liên quan acid (2S)-2-[(3S, 8aS)-3-(4-aminobutyl)-1,4- dioxohexahydropyrrolo[1,2-a]pyrazin-2(1H)-yl]-4-phenylbutanoic (tạp C lisinopril), acid (2S)-2-[(3S, 8aR)-3-(4-aminobutyl)-1,4-dioxohexahydropyrrolo [1,2-a]pyrazin-2(1H)-yl]-4-phenylbutanoic (tạp D lisinopril) để làm chất đối chiếu kiểm nghiệm tạp chất liên quan lisinopril Đối tượng phương pháp nghiên cứu Đối tượng nghiên cứu: tạp C D lisinopril Phương pháp nghiên cứu: Tạp C D tổng hợp cách đóng vịng lisinopril mơi trường acid Sau đó, sản phẩm tinh chế sắc ký cột kết tinh Các tạp tổng hợp xác định cấu trúc kỹ thuật phổ nghiệm độ tinh khiết HPLC Sau đánh giá thiết lập chất đối chiếu Kết Tạp C D tổng hợp cách đóng vịng lisinopril mơi trường acid với hiệu suất tạp C D xấp xỉ 41,6% 67,3% Quy trình xác định độ tinh khiết tạp C D phương pháp HPLC-PDA độ tinh khiết xác định 98% nguyên trạng Thêm vào đó, phương pháp HPLC với điều kiện sắc ký thích hợp xây dựng thẩm định theo hướng dẫn ICH, có tính đặc hiệu, miền giá trị rộng độ xác cao Kết luận Tạp C D tổng hợp thành công để làm chất đối chiếu sử dụng kiểm nghiệm tạp chất liên quan lisinopril LỜI CAM ĐOAN Tôi cam đoan cơng trình nghiên cứu tơi Các số liệu, kết nêu luận văn trung thực chưa công bố cơng trình khác Đỗ Trường Thanh Minh i MỤC LỤC TRANG BÌA PHỤ LỜI CAM ĐOAN MỤC LỤC i DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU, CÁC CHỮ VIẾT TẮT iii DANH MỤC CÁC BẢNG v DANH MỤC CÁC HÌNH .vii DANH MỤC SƠ ĐỒ ix MỞ ĐẦU CHƯƠNG I TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 Tổng quan lisinopril 1.2 Tổng quan tạp C (S,S,S-diketopiperazin) 1.3 Tổng quan tạp D (R,S,S-diketopiperazin) 1.4 Kiểm nghiệm tạp C tạp D chế phẩm lisinopril theo số Dược điển tham chiếu 10 1.5 Xác định độ tinh khiết kỹ thuật đo điểm chảy 12 1.6 Chất đối chiếu 13 CHƯƠNG II ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 16 2.1 Nguyên vật liệu – Đối tượng nghiên cứu 16 2.2 Phương pháp nghiên cứu 18 CHƯƠNG III KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU 27 3.1 Tổng hợp tinh chế tạp C tạp D từ lisinopril 27 3.2 Tổng hợp, tinh chế xác định cấu trúc tạp C từ kết nghiên cứu 32 3.3 Tổng hợp, tinh chế xác định cấu trúc tạp D từ kết nghiên cứu 40 3.4 Thử tinh khiết sản phẩm tinh chế C D 47 3.5 Hiệu suất tổng hợp tinh chế 55 3.6 Xây dựng quy trình xác định độ tinh khiết tạp C tạp D HPLC 56 3.7 Xác định nhiệt độ nóng chảy tạp C tạp D 60 3.8 Xác định hàm ẩm tạp C tạp D phương pháp KF 60 ii 3.9 Đánh giá tạp C tạp D 61 3.10 Thiết lập chất đối chiếu 62 3.11 Kiểm tra tạp D tạp C chế phẩm lisinopril theo BP 2019 69 CHƯƠNG IV BÀN LUẬN 71 4.1 Tổng hợp tinh chế tạp C tạp D 71 4.2 Quy trình xác định độ tinh khiết tạp C tạp D HPLC 75 4.3 Thiết lập chất đối chiếu tạp C tạp D 75 4.4 Kiểm tra tạp C tạp D chế phẩm chứa lisinopril theo BP 2019 76 CHƯƠNG V KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 77 TÀI LIỆU THAM KHẢO PHỤ LỤC iii DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU, CÁC CHỮ VIẾT TẮT Ký hiệu, chữ Tiếng Anh Tiếng Việt viết tắt ASEAN Association of Southeast Asian Hiệp hội nước Đông Nations Nam Á ACE Angiotensin Converting Enzyme Ức chế men chuyển ACEI Angiotensin Converting Enzyme Thuốc ức chế men chuyển inhibitor ACN Acetonitrile Acetonitril BP British Pharmacopoeia Dược điển Anh CĐ Chuẩn độ CĐC Chất đối chiếu DĐVN Dược điển Việt Nam đđ đậm đặc GLP Good Laboratory Practice Thực hành tốt phịng thí nghiệm HCl Hydrochloric acid Acid hydrocloric HPLC High performance liquid Sắc ký lỏng hiệu cao chromatography ICH International Conference on Hội nghị hòa hợp quốc tế Harmonisation IR Infrared Hồng ngoại ISO International Organization for Tổ chức Quốc tế Tiêu Standardization chuẩn hóa International Union of Pure and Hiệp hội Quốc tế Hóa học Applied Chemistry túy ứng dụng Karl Fischer Hàm lượng nước IUPAC KF PL-118 PL-119 PL-120 Phiếu phân tích mẫu tạp chất D hai Khoa thuộc Viện Kiểm nghiệm thuốc TP Hồ Chí Minh kết phân tích ANOVA tạp D PL-121 PL-122 PL-123 PL-124 Phụ lục 15 Kết xác định giá trị ấn định hàm lượng tạp C PL-125 Phụ lục 16 Kết xác định giá trị ấn định hàm lượng tạp D PL-126 Phụ lục 17 Sắc ký đồ kiểm tra sản phẩm thị trường PL-127 PL-128 PL-129 PL-130 PL-131 PL-132 ... ? ?Tổng hợp xây d? ??ng tiêu chuẩn tạp C lisinopril – tạp D lisinopril làm chất đối chiếu? ?? th? ?c với mong muốn tổng hợp tiêu chuẩn hóa tạp chất liên quan C D lisinopril để sử d? ??ng tạp kiểm nghiệm tiêu tạp. .. khơng c? ??n so sánh với chất hóa h? ?c kh? ?c Chuẩn đối chiếu hóa h? ?c thứ c? ??p chất c? ? đ? ?c điểm định và/ hiệu chỉnh từ chất đối chiếu hóa h? ?c sơ c? ??p 1.6.3 Thiết lập chất đối chiếu Chọn hóa chất làm đối. .. anhydrid acetic 8: tetrahydrofuran D: Chuẩn tạp D; C: Chuẩn tạp C; C+ D: Chuẩn tạp D +Chuẩn tạp C 1: Thử đun giờ; 2: Thử đun giờ; 3: Thử đun 10 D+ T: Chuẩn tạp D + thử; C+ T: Chuẩn tạp C + thử; L: lisinopril