Tiếp tục nghiên cứu thành phần hóa học, tác dụng sinh học và xây dựng tiêu chuẩn kiểm nghiệm phương thuốc tiêu dao tán

Tiếp tục nghiên cứu thành phần hóa học, tác dụng sinh học và xây dựng tiêu chuẩn kiểm nghiệm phương thuốc tiêu dao tán Tiếp tục nghiên cứu thành phần hóa học, tác dụng sinh học và xây dựng tiêu chuẩn kiểm nghiệm phương thuốc tiêu dao tán Tiếp tục nghiên cứu thành phần hóa học, tác dụng sinh học và xây dựng tiêu chuẩn kiểm nghiệm phương thuốc tiêu dao tán Tiếp tục nghiên cứu thành phần hóa học, tác dụng sinh học và xây dựng tiêu chuẩn kiểm nghiệm phương thuốc tiêu dao tán Tiếp tục nghiên cứu thành phần hóa học, tác dụng sinh học và xây dựng tiêu chuẩn kiểm nghiệm phương thuốc tiêu dao tán Tiếp tục nghiên cứu thành phần hóa học, tác dụng sinh học và xây dựng tiêu chuẩn kiểm nghiệm phương thuốc tiêu dao tán Tiếp tục nghiên cứu thành phần hóa học, tác dụng sinh học và xây dựng tiêu chuẩn kiểm nghiệm phương thuốc tiêu dao tán Tiếp tục nghiên cứu thành phần hóa học, tác dụng sinh học và xây dựng tiêu chuẩn kiểm nghiệm phương thuốc tiêu dao tán Tiếp tục nghiên cứu thành phần hóa học, tác dụng sinh học và xây dựng tiêu chuẩn kiểm nghiệm phương thuốc tiêu dao tán Tiếp tục nghiên cứu thành phần hóa học, tác dụng sinh học và xây dựng tiêu chuẩn kiểm nghiệm phương thuốc tiêu dao tán Tiếp tục nghiên cứu thành phần hóa học, tác dụng sinh học và xây dựng tiêu chuẩn kiểm nghiệm phương thuốc tiêu dao tán Tiếp tục nghiên cứu thành phần hóa học, tác dụng sinh học và xây dựng tiêu chuẩn kiểm nghiệm phương thuốc tiêu dao tán Tiếp tục nghiên cứu thành phần hóa học, tác dụng sinh học và xây dựng tiêu chuẩn kiểm nghiệm phương thuốc tiêu dao tán Tiếp tục nghiên cứu thành phần hóa học, tác dụng sinh học và xây dựng tiêu chuẩn kiểm nghiệm phương thuốc tiêu dao tán Tiếp tục nghiên cứu thành phần hóa học, tác dụng sinh học và xây dựng tiêu chuẩn kiểm nghiệm phương thuốc tiêu dao tán Tiếp tục nghiên cứu thành phần hóa học, tác dụng sinh học và xây dựng tiêu chuẩn kiểm nghiệm phương thuốc tiêu dao tán Tiếp tục nghiên cứu thành phần hóa học, tác dụng sinh học và xây dựng tiêu chuẩn kiểm nghiệm phương thuốc tiêu dao tán Tiếp tục nghiên cứu thành phần hóa học, tác dụng sinh học và xây dựng tiêu chuẩn kiểm nghiệm phương thuốc tiêu dao tán Tiếp tục nghiên cứu thành phần hóa học, tác dụng sinh học và xây dựng tiêu chuẩn kiểm nghiệm phương thuốc tiêu dao tán Tiếp tục nghiên cứu thành phần hóa học, tác dụng sinh học và xây dựng tiêu chuẩn kiểm nghiệm phương thuốc tiêu dao tán

BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC Dược HÀ NỘI

g& C Qe o

CẦM THI HÀ PHƯƠNG

TIẾP TỤC NGHIÊN c ứ u THÀNH PHẦN

HOÁ HỌC, TÁC DỤNG SINH HỌC VÀ XÂY DỤNG• 7 • • •

TIÊU CHUẨN KIỂM NGHIỆM PHƯƠNG

THUỐC TIÊU DAO TÁN

(KHOÁ LUẬN TỐT NGHIỆP D ược SỸ KHOÁ 2002- 2007)

Người hướng dẫn : TS LẠI QUANG LOb

TS VŨ THỊ TRÂM Nơi thực hiện : BỘ MÔN DƯỢC HỌC c ổ TRUYỀN Thời gian thực hiện : 02/2007-5/2007

Hà Nội, 05/2007

m

LỜI CẢM ƠN

Trong quá trình nghiên cứu để có kết quả báo cáo rigàỵ hôm naỵ tôi đã nhận được sự giúp đỡ, động viên rất nhiều từ thầy cô, gia đình và bạn bè.

Trước hết tôi xin bàỵ tỏ lòng biết ơn chân thành tới TS Lại Quang

Long, giám đốc trung tâm kiểm nghiệm dược quân đội- người thầy trực tiếp

hướng dẫn, đã tận tình dìu dắt và tạo điều kiện cho tôi có cơ hội dể làm đề

tài khoa học này.

Nhân dịp nàỵ tôi củng xin được bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc tới TS

Vũ Thi Trâm, chủ nhiệm bộ môn dược ìý đã tậrì tình giúp đỡ tôi hoàn

thành khoá luận này.

Tận đáy lòng mình tôi xin gửi lời cẩm ơn chân thành uà sâu sắc tới

TS Nguyễn Thái An, người thầy đã tận tình chỉ bảo uà hướng dẫn tôi

trong suốt quá trình ỉàm khoá luận này.

Xin chân thành cảm ơn các íhầy cô giáo, các cán bộ trong Bộ môn

Dược học cổ truyền, Bộ mồn dược lý, đã rìhiệt tình truyền thụ cho tôi

những kiến thức ƯÔ cùng quí báu trong suốt quá trình học tập ưà làm luận văn.

Xin gửi lời cảm ơn chân thành tới Ban Giám hiệu, Đảng uỷ Nhà

Trường cùng toàn thể các thầy cô giáo Trường Đại học Dược Hà Nội

đã luôn tạo điều kiện tốt nhốt cho tôi trong quá trình học tập, nghiên cứu

và ìàm luận văn.

Cuối cùng tôi xin bờy tỏ lòng biết ơn vô hạn tới gia đình và những

bạn bè thân yêu đă luôn là chỗ dựa tinh thẩn, là nguồn động viên to lớn

đối với tôi trong cuộc sống.

Hà Nội, ngàỵ 15 tháng 5 năm 2007

Sinh viên Cầm Thị Hà Phương

MỤC LỤC

ĐẶT VẤN Đ Ể 1

PHẦN 1: TỔNG QUAN 2

1.1 Vài nét về phương thuốc TDT 2

1.2 Các vị thuốc trong phương TDT 3

1.2.1 Sài hồ bắc 3

1.2.2 Đương quy 5

1.2.3 Bạch thược 8

1.2.4 Bạch truật 10

1.2.5 Bạch phục linh 12

1.2.6 Cam thảo bắc 13

PHẦN II: THỰC NGHIỆM VÀ KẾT QUẢ 17

2.1 Nguyên liệu, súc vật và phương pháp nghiên cứu 17

2.1.1 Nguyên liệu 17

2.1.2 Phương tiện nghiên cứu 17

2.1.3 Súc vật thí nghiệm 18

2.1.4 Phương pháp nghiên cứ u 18

2.2 Kết quả thực nghiệm và nhận x ét 21

2.2.1 Bào chế phương TDT 21

2.2.2 Nghiên cứu về hoá h ọ c 21

2.2.3 Nghiên cứu về dựơc lý 33

2.2.4 Xây dựng tiêu chuẩn cơ sở phương Tiêu dao tá n 36

BÀN LUẬN 39

PHẦN III: KẾT LUẬN VÀ ĐỂ XUÂT 40

3.1 Kết lu ận 40

3.2 Đề xuất 41

Ethylacetat

Công ty dược liệu

Nhà xuất bản Methanol

ĐẬT VẤN ĐỀ

Lịch sử Y học cổ truyền Việt Nam đã được hình thành cùng với tiến trình phát triển của dân tộc Việt Nam Bắt đầu bằng việc đi tìm thức ăn, tổ tiên chúng ta đã tiếp xúc với cỏ cây, hoa lá, chim muông, đất đá và cũng thông qua việc sử dụng cây cỏ của dã thú và bản thân con người mà họ đã phát hiện được nhiều loài cây ăn được và nhiều loại cây quý dùng để trị bệnh Những kinh nghiệm tích luỹ qua bao đời đấu tranh liên tục với thiên nhiên và bệnh tật đã góp phần giữ gìn sức khoẻ và bảo vệ giống nòi suốt bốn nghìn năm lịch sử Trên cơ sở kế thừa kho tàng lí luận và kinh nghiêm trong lĩnh vực y học cổ truyền của ổng cha, Đảng và nhà nước đã có chính sách công nghiệp hoá, hiện đại hoá nền Y học cổ truyền nước nhà Trong đó việc làm sáng tỏ các phương thuốc theo hướng hiện đại là vô cùng quan trọng

Phương tiêu dao tán (TDT) với tác dụng sơ can giải uất, kiện tỳ dưỡng huyết đã được nhân dân ta sử dụng chữa các chứng ngực sườn đầy tức, đau mạng sườn, ợ hơi, ợ chua, ngũ tâm phiền nhiệt, nóng trong xương, nóng về chiều

Năm 2006, phương thuốc TDT đã được tiến hành nghiên cứu về đặc điểm

vi học và hoá học [19] Nhằm mục đích xây dựng tiêu chuẩn kiểm nghiệm cho phương thuốc đồng thời chứng minh tác dụng sinh học của phương thuốc

trong YHCT, đề tài: “Tiếp tục nghiên cứu thành phần hoá học, tác dụng

sinh học và xây dựng tiêu chuẩn kiểm nghiêm phương thuốc tiêu dao” được

tiếp tục tiến hành với các nội dung sau:

- Định lượng flavonoid, coumarin, polysaccharid có trong các vị

thuốc và bài thuốc nghiên cứu.

- Nghiên cứu một số tác dụng sinh học của phương Tiêu dao tán.

- Xây dựng tiêu chuẩn cơ sở của phương Tiêu dao tán.

Bạch truật (Rhizoma Atractylodis macrocephalae)

Đương quy {Radix Angelicae sinensis)

Cam thảo bắc chích (Radix Glycyrrhizae)

Sài hô bác (Radix Bupleuri)

40g40g40g40g

2 0 g

40g

*** Cách dùng: Tán bột, uống mỗi lần 8 g với nước gừng và bạc hà [5], [16].Đây là bài thuốc có tác dụng sơ can giải uất, kiện tỳ dưỡng huyết, dùng để chữa các bệnh do can khí uất kết làm ảnh hưởng tới sự thăng giáng khí ở tỳ vị: ngực sườn dầy tức, đau mạng sườn, ợ hơi, ợ chua [5]

Theo “Tuyển tập phương thang Đông y”: TDT dùng để trị phụ nữ bị huyết nhiệt, hư lao, ngũ tâm phiền nhiệt cơ thể đau nhức, ngực sườn đau, kinh nguyệt không đều [27],

♦> Phân tích phương thuốc TDT [5]:

- Sài hồ bắc: Công năng sơ can giải uất, đóng vai trò vị quân

- Bạch thược: Công năng bổ huyết, dưỡng can, đóng vai trò là vị thần.

Đương quy: Công năng bổ huyết, dưỡng can, đóng vai trò là vị thần

- Bạch truật: Công năng kiện tỳ, tiêu thực, đóng vai trò là vị tá

- Bạch phục linh: Công năng kiện tỳ, đóng vai trò là vị tá

- Cam thảo bắc: Công năng ích khí dưỡng khí, bổ tỳ vị, điều hoà các vịthuốc, đóng vai trò là vị tá

- Gừng nướng: Giúp cho Bạch thược, Đương quy, điều hoà khí huyết,đóng vai trò là vị sứ

- Bạc hà: Giúp cho Sài hồ sơ can giải uất, đóng vai trò vị sứ

1.2 Các vị thuốc trong phương TDT

1.2.1 Sài hồ bác (Radix Bupleuri)

Vị thuốc là rễ phơi hay sấy khô của cây Sài

hồ bắc Bupleurum sinense DC., họ hoa tán

Apiaceae [3], [23], [30], [31], [35], [36].

• Thành phần hoá học

Sài hồ bắc có chứa các nhóm hợp chất như

saponin, tinh dầu, íìavonoid [10], [30], [31]

Trong đó có khoảng 0,5% saponin, thuộc

nhóm triterpen Hàm lượng saponin toàn phần

trong thân và lá là 0,29%, còn trong rễ là

1,69% Hàm lượng này cao hay thấp tuỳ theo

kích thước của rễ Người ta đã phân lập Hình 1.1 Ảnh vị thuốc Sài hồ bắc

được một triterpen saponin từ bộ phận trên mặt đất có cấu trúc là 3-0-(a- L- arabinopyranosyl (l->3)- O- P- D- glucuronopyranosyl)- oleanolic acid P-D- glucopyranosyl ester [6 ], [10], [30], [31]

OH3- O- (a- L- arabinopyranosyl ( 1 —>3)- O- ị3- D- glucuronopyranosyl)-

oleanolic acid P- D- glucopyranosyl ester

3

Trong rễ cũng có hợp chất alcol: Bupleurumola (C3 2H6 40 2) có nhiệt độ nóng chảy là 163- 164 và phytosterola (C3oH4 8 0 2) [23].

Rễ sài hồ chứa 2 polysaccharid có hoạt tính sinh học là bupleuran 2IIb và

2\\c [231.

Hàm lượng tinh dầu là 0,16% trong rễ và 0,05% trong thân [23], [31]

Lá có chứa flavonoid: Kaempferitin và kaempferol-7- rhamnosid [23]

Ngoài ra thân và lá còn có chứa rutin (C 2oH 300 16) [23]

• C hế biến

Sài hồ thường được chích giấm hoặc dùng sống (thái phiến, phơi khô)

L6 J

• Tác dụng dược lý

Toàn cây chủ yếu là rễ được dùng làm thuốc trị sốt, thương hàn: Vị thuốc

cỏ tác dụng hạ nhiệt trên thỏ thí nghiệm đã được gây sốt [3], [8 ], [23], [30],

Ngoài ra sài hồ còn có tác dụng kháng khuẩn: ức chế sự sinh trưởng của ký

sinh trùng sốt rét và trực khuẩn lỵ Sh.shỉga [3], [23].

Saponin thô từ sài hồ bắc làm trung hoà chức năng gan ở chuột cống trắng

[31], [34]

• Tính vị, quy kinh

Sài hổ có vị đắng tính hơi hàn, quy vào các kinh: can, đởm, tâm bào lạc và tam tiêu [6 J, [11], [21], [24], [25]

Ngoài ra còn có tác dụng kiện tỳ, bổ trung ích khí, thăng dương khí: chữa chứng bụng đầy trướng, nôn lợm, sa giáng [3], [6 ], [23].

Một số nhà nghiên cứu cho rằng hàng ngày uống 40g thuốc sắc sài hồ

có thể chữa sốt rét rất tốt [3], [6 ], [23]

1.2.2 Đương quy (Radix Angelica sinensis)

Là rễ củ đã phơi hoặc sấy khô của cây Đương quy Angelica sinensis (Oliv.) Diels., họ hoa tán Apiaceae [6 ], [7], [10], [18], [23], [29], [31], [34], [35], [37]

• Thành phần hoá học

a - terpinen, di- n- butylphtalat và thành phần có tác dụng sinh học được chú

ý là: ligustilid khoảng hơn 5% [7], [10], [18], [21], [23], [31], [37]

C1 2H80 4, p- cymen, terpinen 4- ol, Hình 1.2 Ánh vị thuốc Đương quy

Ngoài ra còn có: coumarin, polyacetylen, sterol, nguyên tố vi lượng, vitamin Bl, vitamin E, vitamin B12, acid amin, acid hữu cơ, polysaccharid có M*3000, đường tự do [10], [18], [23], [34], [37].

Theo các nhà nghiên cứu hoá học, đương quy Nhật Bản: Có 0,26% tinh dầu chứa ligustilid 0,1941%, n-butylphtalid 0,0244%, n-butylidenphtalid 0,1762%, enidilid, p-cymen Ngoài ra còn có: coumarin, polysaccharid, acid amin, polyacetylen, sterol [31]

Theo giáo sư Đỗ Tất Lợi, tinh dầu Đương quy có tác dụng hạ huyết áp và

ức chế hô hấp trên chó đã được gây mê, nhưng phần không bay hơi lại làm co mạch máu tăng huyết áp [23], [34]

Ngoài ra Đương quy còn có tác dụng điều hoà nhịp tim tương tự Quinidin , tác dụng kiểu Vitamin E [18], [23]

Thúc đẩy tổng hợp protein và acid nucleic trong tế bào gan, tăng cường miền dịch, kháng bổ thể [18], [34], bảo vệ gan do thành phần polysaccharid

Nước sắc đương quy có tác dụng ức chế ngưng kết tiểu cầu (do thành phần acid ferulic [18], [31], [34]

COOH

n- valerophenon O- carboxy- acid c 1 2h 1 4o3

[6 ], [10], [23], [31], [34]

[26]

Người ta đã chứng minh phtalid là thành phần có tác dụng chống hen và chống co thắt [31].

Giảm tác dụng phụ của thuốc chống ung thư [10], [18], [31], chống thiếu máu ác tính

R ễ đương quy có tác dụng chống viêm đối với cả hai giai đoạn cấp tính và mạn tính của phản ứng viêm thực nghiệm và không có tác dụng gây thu teo tuyến ức chuột non Như vậy có tác dụng chống viêm tương tự các thuốc chống vicm phi steroid [18]

Ngoài ra rể đương quy có tác dụng trong điều trị lupus ban đỏ hệ thống [34],

Một thành phần chủ yếu của đương quy là ligustilis được phân lập từ rễ đương quy Trung Quốc có tác dụng chống hen chống co thắt [31]

Năm 1950, Lưu Quốc Thanh đã báo cáo nước sắc đương quy có tác dụng kháng sinh đối với: trực khuẩn dịch hạch, trực khuẩn biến hình, trực khuẩn thương hàn, phó thương hàn, phẩy khuẩn tả [3], [10], [23]

Người ta cũng nhận thấy Đương quy Nhật Bản (Angelica acutiloba Kit

Apiaceae) có tác dụng kiểu oestrogen và progesterone, chống viêm tương tự

các thuốc chống viêm phi steroid, tăng sức đề kháng, ức chế ngưng kết tiểu cầu, kéo dài thời gian đông máu [31]

Trong YHCT Trung Quốc và Nhật Bản đương quy có tác dụng hoạt huyết, giải uất kết: Do vừa bổ huyết vừa hoạt huyết nên thích hợp với trường hợp thiếu máu, kèm theo ứ tích của phụ nữ có kinh bế, vô sinh, kinh nguyệt không đều, đau bụng kinh, đau cơ do ít huyết, đau đầu dữ dội [3], [6 ], [15].

Ngoài ra đương quy còn có tác dụng hoạt tràng thông tiện, giải độc, giảm đau, dùng cho trường hợp huyết hư, huyết táo bón, mụn nhọt, đinh độc lâu liền miệng do khí huyết hư đau [3], [6 ]

1.2.3 Bạch thược (Radix Paeoniae)

Là rễ phơi hay sấy khô của cây thược dược Paeonia lactiflora Pall

(Paeonia albiflora Pall.), họ Mao lương Ranunculaceae [3], [5], [6 ], [23], [31], [34], [35]

• Thành phần hoá học

Rễ bạch thược có hoạt chất chính

là paeoniflorin C y Ị^ O n , là một *

monoterpen glycosid, chiếm khoảng

Trong rễ còn có 7 hợp chất triterpenoid chiếm 0,025% [31]

Các flavonoid từ lá (1,06%) gồm kaempferol- 3- O- p- D- glucosid và kaempferol- 3, 7- di- O- |3- glucosid [18], [31]

Ngoài ra còn có: tinh bột, tanin, canxioxalat, một ít tinh dầu, nhựa, chất béo, 1,07% acid benzoic [23]

Acid benzoic trong bạch thược có tác dụng trừ đờm, trừ ho [23].

Nước sác bạch thược có tác dụng trên sự co bóp ống tiêu hoá: Nồng độ thấp

có tác dụng ức chế, nồng độ cao lúc đầu có tác dụng hưng phấn sau ức chế [23],

Ngoài ra hợp chất paeoniflorin có tác dụng kháng cholin nên được dùng chõng co ihát, chống tiêu chảy, giảm đau, chống viêm [31], [36]

Cao nước bạch thược có tác dụng kháng khuẩn trên: Vi trùng lỵ, thổ tả, tụ cầu, trực trùng, thương hàn, phế cầu, bạch cầu [23], [31]

Các nhà nghiên cứu cũng nhận thấy bạch thược có khả năng chống đông máu, giãn động mạch vành, giãn mạch ngoại vi [34], [36]

• Tính vị quy kinh

Bạch thược có vị đắng, chua, tính hơi hàn quy vào các kinh: can, tỳ, phế [6 ], [11], [15], [23],

9

• Công năng, chủ trị

Bạch thựơc bổ huyết, cầm máu nên thường dùng trong các trường hợp chảy máu cam, ho ra máu, nôn ra máu, chảy máu trong ruột, băng lậu, bạch đới, mồ hôi trộm [3], [6 ], [7], [23]

Bạch thược thường có nhiều trong các bài thuốc chữa kinh nguyệt không đều, huyết hư [3], [6 ], [7], [23]

Thư cân giảm đau: Dùng khi can khí uất kết dẫn đến đau bụng, đau ngực, chân tay co quắp, tả lỵ [3], [6 ], [7], [23]

Bình can: Dùng trong các chứng đau đầu hoa mắt [3], [6 ], [7], [23]

1.2.4 Bạch truật (Rhizoma Atractylodis macrocephalae)

Là thân rễ phơi hay sấy khô của cây Bạch truật Atractylodes macrocephala Koidz., họ Cúc Asteraceae [3], [6 ], [10], [31], [35]

• Thành phần hoá học

Trong rễ củ bạch truật có 1,4% tinh dâu

Thành phần chính của tinh dầu gồm

atractylon, hydroxyatractylon,

acetoxyatractylon atractylat kali [7], [23],

[31]

Ngoài ra còn có các sesquiterpen: a-

eudesmol, ị3- eudesmol Các dẫn chất lacton

như atractynolid I, II, III [31]

Có tác giả nói trong Bạch truật có

Atractylola C1 5H 160 và Atractylon C1 4H 180 Hình 1.4 Ảnh vị thuốc Bạch truật

• Chế biến

Bạch truật thường dùng sống (sắc hoặc tán thành bột), sao cháy Ngoài

ra còn có thể chích hoàng thổ, chích mật, chích rượu sao với cám (chữa bệnh phổi) hoặc chích sữa (chữa bệnh thận), chích nước đất [31]

• Tác dụng dược lý

Bạch truật được xem là một loại thuốc bồi dưỡng và được dùng chữa viêm: Bạch truậl có tác dụng ức chế rõ loét shay, loét do nhịn đói, không có tác dụng VỚI loét do histamin Bạch truật có tác dụng làm giảm lượng dịch vị nhưng không ảnh hưởng đến độ acid tự do của dịch vị [31]

Việc nghiên cứu ảnh hưởng đối với chức năng ngoại tiết của gan đã chứng minh bạch truật không gây biến đổi về lưu lượng mật nhưng làm tăng hàm lượng căn khô trong mật và như vậy đã tăng lượng chất thải trừ qua mật [31].Nước sắc Bạch truật có tác dụng lợi niệu, và duy trì khả năng bài tiết điện giải natri [3],

Nuoài ra bạch truật còn có tác dụng chống viêm, kích thích hô hấp nhưng lam giám nhịp tim [23], [31],

Theo tài liệu cổ bạch truật có tác dụng kiện vị tiêu thực: Dùng trong trường hợp công năng của tỳ hư nhược, bụng đầy trướng, đau, buồn nôn [3], [6 ], [10], [23], [31].

Bạch Iruật còn có tác dụng cố biểu liễm hãn, an thai, chỉ huyết, dùng điều trị bệnh mồ hôi trộm [3], [6 ], [10], [23], [31]

11

1.2.5 Bạch phục linh (Poria)

Thể quả nấm đã phơi và sấy khô của nấm phục linh Có tên khoa học là

Poria cocos (Schw.) Wolf., họ Nấm lỗ Polyporaceae [6 ], [7], [10], [31]

+ Acid 3P- hydroxylanosta -7,9 (II),

24- trien, 21- oic Hình 1.5 Ảnh vị thuốc Bạch phục linh

- Đường đặc biệt của phục linh: Pachyman (75%) Ngoài ra còn có:

Ergosterol, cholin, histidin, và rất ít men proteaza [23]

• Tác dụng dược lý

Bạch phục linh có tác dụng lợi niệu, hạ đường huyết, có tác dụng cường tim trên tim ếch cô lập Tác dụng trấn tĩnh, chống nôn cho các hợp chất saponin triterpenoid [3], [34]

Tác dụng kháng khuẩn: ức chế tụ cầu vàng, trực khuẩn đại tràng, trực khuẩn biến hình [3], [31]

Ngoài ra còn có tác dụng chống ung thư [31]

• Tính vị quy kinh

Bạch phục linh có vị ngọt nhạt, tính bình quy vào các kinh: tỳ, phế, thận,

vị, tâm, phế [3], [6 ], [23], [31]

• Công năng, chủ trị

Theo tài liệu cổ bạch phục linh có tác dụng:

Lợi thuỷ, thẩm thấp: Dùng trong các bệnh tiểu tiện bí, đái buốt, nhức, nứơc tiểu đỏ hoặc đục, người bị phù thũng [3], [6 ], [23], [31]

Kiện tỳ: Dùng trong bệnh của tạng tỳ hư nhược gây ỉa lỏng [3], [6 ], [23], [31]

Còn dùng làm thuốc an thần: Trị tâm thần bất an, tim loạn, hồi hộp, mất ngủ, hay quên, hay sợ hãi, di tinh [3], [6 ], [23], [31]

1.2.6 Cam thảo bắc (Radix Glycyrrhizae)

Vị thuốc là rễ phơi hay sấy khô của 3 loài Cam thảo (Glycyrrhiza uralensis Fisch.; Glycyrrhiza inflate Bat.; Glycyrrhiza Glabra L.), họ Đậu Fabaceae [4],

[6 ], [7], [10], [23], [31]

1 3

• Thành phần hoá học

(Glycyrrhiza glabra L)

Trong rễ có 25-30% tinh bột, 3-8%

glucose và saccharose [4], [7], [23]

Hoạt chất chính trong cam thảo là

glycyrrhizin là một saponin thuộc

nhóm olean hàm lượng 10 -14% có vị

ngọt gấp 60 lần đường saccharose [4],

[1 ], [23], [31]

Các flavonoid chiếm 3- 4%, trong

đó có 27 chất đã được biết, quan trọng nhất là liquiritin C2|H2 209 (nhóm flavanon) và isoliquiritin (nhóm chalcon) Ngoài ra còn có glabridin (nhóm isoflavan), glabron (nhóm isoflavon), glabren (nhóm isoflaven) [4], [10], [23], [36]

Một số coumarin: umbelliferon, hemiarin, liqcoumarin [4], [10],

Ngoài ra còn có chất đắng (glycyramarin) [31], Các hợp chất oestrogen có nhân sterol với hàm lượng thấp [4], [7], [10]

Glycyrrhinzin

Bảo vệ gan trong viêm gan mãn tính và bài tiết mật [31].

Tác dụng chữa Addison do glycyrrhizin [31]

Tác dụng chống ho lên trung tâm ho tương tự codein Tác dụng long đờm

do thành phần saponin [4], [7], [10], [23], [31]

Cam thảo và chất glycyrrhizin có tác dụng giải độc khi ngộ độc thức ăn và một số chất khác [3], [7], [23], [31]

Trong cam thảo có thành phần Liquiritigenin và isoliquitigenin có tác dụng

ức chế MAO, isoliquiritigenin có tác dụng mạnh hơn [4]

Glycyrrhizin và liquiritic có tác dụng chống viêm, chống loét, làm chóng lành sẹo [4], [7], [31]

Christopher H Costello đã báo cáo rằng trong cam thảo có chất tác dụng của nội tiết tố dục tính với âm đạo chuột bạch [4], [7]

Ngoài ra cam thảo còn có tác dụng nâng cao miễn dịch cơ thể [4],

• Công năng, chủ trị

Theo tài liệu cổ cam thảo có vị ngọt, tính bình, vào 12 đường kinh nên có lác dụng ích khí dưỡng khí, bổ tỳ vị, thanh nhiệt, giải độc, điều hoà các vị thuốc [6 J, [10], [15], [23],

Cam thảo sống (đồ mềm, sấy khô) có tác dụng giải độc, tả hoả Tẩm mật sao vàng (chích cam thảo) lại có tác dụng ôn trung, nhuận phế, điều hoà các vị thuốc 17], Ị 15], [31].

Công dụng: Cam thảo được dùng chữa cảm, ho mất tiếng, viêm họng, mụn nhọt, đau dạ dày, ỉa chảy, ngộ độc Cam thảo chích có tác dụng bổ, chữa tỳ hư nhược, ỉa lỏng, thân thể mệt mỏi, kém ăn [3], [6 ], [10], [23], [31]

Theo tài liệu nước ngoài, trong y học Trung Quốc cam thảo bắc dùng phối hợp với một số dược liệu khác có tác dụng chữa ho, tác dụng long đờm do thành phần saponin [4], [7], [10], [23], [31]

Cam thảo và chất glycyrrhizin có tác dụng giải độc khi ngộ độc thức ăn và một số chất khác [3], [7], [23], [31]

Liquiritigenin và isoliquirintigenin có trong cam thảo có tác dụng ức chế MAO Isoliquiritigenin có tác dụng mạnh hơn [4]

Trong y học dân gian Ấn Độ glycyrrhizin và liquiritic có tác dụng chống vicm, chống loét, làm chóng lành sẹo [4], [7], [31], [34]

Ngoài ra cam thảo bắc còn có tác dụng nâng cao miễn dịch của cơ thể, tác dụng của nội tiết tố dục tính (oestrogen) [4], [7], [34]

PHẦN II: THựC NGHIỆM VÀ KẾT QUẢ

2.1 Nguyên liệu, súc vật và phương pháp nghiên cứu

2.1.1 Nguyên liệu

Các vị thuốc dùng trong nghiên cứu gồm: Cam thảo bắc, sài hồ bắc, đương quy, bạch truật, bạch thược, bạch phục linh, được mua tại CTDL trung ương I Mediplantex

D: Bạch truật E: Bạch phục linh G: Sài hồ bắc

2.1.2 Phương tiện nghiên cứu

- Thuốc thử đạt tiêu chuẩn phân tích của DĐVNIII

- Các dụng cụ nghiền, xay dược liệu.

- Chophytol (viên) 50mg của hãng Roche

2.1.3 Súc vật thí nghiệm

- Chuột nhắt trắng chủng Swiss cả hai giống đực và cái đủ tiêu chuẩn kiểm nghiệm, trọng lượng 18-20g, số lượng 70 con, được cung cấp từ Viện Vệ sinh Dịch tễ Hà Nội

2.1.4 Phương pháp nghiên cứu

2.1.4.L Nghiên cứu thành phần hoá học

m: Khối lượng cắn thu được (g)

b: Khối lượng dược liệu đem định lượng (g)

p: Lượng nước (g) có trong b (g) dược liệu

Kết quả được đánh giá bằng phương pháp thống kê để tính hàm lượngtrung bình ( X ), độ lệch chuẩn (s), khoảng tin cậy (ịo,), với độ tin cậy 95%

Trong đó: T: Hàm lượng cắn phân đoạn C H C I 3 trong dược liệu (%).

m: Khối lượng cắn thu được (g)

b: Khối lượng dược liệu đem định lượng (g)

p: Lượng nước (g) có trong b (g) dược liệu

Kết quả được đánh giá bằng phương pháp thống kê để tính hàm lượng

trung hình ( T ), độ lệch chuẩn (s), khoảng tin cậy (|Li), với độ tin cậy 95%.

*1* Polysaccharid

- Định lượng bằng phương pháp cân [26]

- Hàm lượng polysaccharid được tính:

A(%) = - ^ - x l 0 0

b - pTrong đó: A: Hàm lượng polysaccharid toàn phần trong dược liệu (%),

m: Khối lượng cắn thu được (g)

b: Khối lượng dược liệu đem định lượng (g)

p: Lượng nước (g) có trong b (g) dược liệu

Kết quả được đánh giá bằng phương pháp thống kê để tính hàm lượng(rung bình ( A), độ lệch chuẩn (s), khoảng tin cậy (ụ,), với độ tin cậy 95%

2.1.4.2 Nghiên cứu về tác dụng dược lý

a Thử độc tính cấp [9], [11], [12], [14], [20], [25], [28], [32], 33].

- Xác định LD5 0 của cao TDT: Theo phương pháp Litchfield Wilcoxon

I ] 2 Ị

- Súc vật nghiên cứu: Chuột nhắt trắng có trọng lượng 18- 20g khoẻ mạnh

cả hai giống Cho từng chuột uống chế phẩm thử với liều tăng từ liều cao nhất gây chết súc vật đến liều thấp nhất không gây chết 100% súc vật Theo dõi chuột trong vòng 72h

+ Chí tiêu theo dõi:

19

■ Theo dõi tình trạng chung của chuột: ăn uống, hoạt động, thần kinh, tình trạng phân.

■ Tỷ lệ chuột chết

+ Phương pháp đánh giá

Nếu chuột bình thường, không có biểu hiện ngộ độc, không chết thì chế phẩm thử không có độc tính Nếu chuột có biểu hiện ngộ độc hoặc chết thì chế phẩm thử có độc tính cấp cần tìm LD50, nếu không có chuột chết coi như chế phẩm thử không có độc tính

b Thử tác dụng lợi mật [17], [33].

Thuốc thử:

+ Dịch chiết TDT

+ Chophytol viên 200mg

+ Nước muối sinh lý NaCl 0,9%

Phương pháp nghiên cứu: Thử tác dụng lợi mật theo phương pháp Ruti

- Cho chuột uống thuốc thử, sau khi cho chuột uống chế phẩm thử một giờ thì mổ bụng, thắt ống mật chủ ở đoạn đổ vào tá tràng, khâu vết mổ lại Sau

30 phút giết toàn bộ chuột, tách mật và đem cân

- Độ lợi mật được tính theo công thức:

m, - ĨĨI

L (%) = ' X 100

ra,

Trong đó: m,: lượng mật của mẫu thử

mc: lượng mật của mẫu chứng

Đánh giá sự thay đổi về khối lượng mật giữa lô thử và lô chứng theophương pháp thống kê y học sử dụng hàm TTEST bằng phần mềm MS Excell

Các vị thuốc sau khi chế biến, sấy khô ở 50°c đến độ ẩm dưới 5% Nghiền

thành bột, rây qua rây số 355 Trộn theo phương pháp trộn bột kép, sấy ở nhiệt

độ 70°c đến độ ẩm < 9%, cân và chia thành các phần khối lượng 16g, đóng gói 2 lần trong túi polyethylen

2.2.2 Nghiên cứu về hoá học

a Định lượng cắn phân đoạn ethylacetat (flavonoid)

Cân chính xác khoảng 20g dược liệu cho vào túi giấy lọc rồi cho vào dụng

cụ Soxhlet, thêm ether dầu hoả rồi đem chiết cách thuỷ trong 8 giờ để loại chất béo, chất màu Sau đó lấy túi dược liệu ra cho bay hoi hết ether dầu hoả, tiếp tục cho túi dược liệu vào dụng cụ Soxhlet và chiết flavonoid bằng MeOH đến khi dịch chiết cuối không còn phản ứng của flavonoid Dịch chiết MeOH thu được đem cô cách thuỷ hết dung môi, hoà tan cắn trong khoảng 15- 20 ml nước cất nóng, để lắng qua đêm, lọc qua giấy lọc Dịch lọc thu được lắc nhiều lần với EtOAc cho đến khi lớp EtOAc không còn flavonoid (thử bằng phản

-21