VAI TRÒ CỦA GENE MICB VÀ BAK1 TRONG C CHÉ BỆNH SINH SỐT DENGUE THẺ NẶNG T h s T rà n N gọc Đ ăng - S ộ m ôn Sức khỏe M ô i trườ ng, Đ ại học Y D ợ c TPHCM TS Iziim i N aka “ Trường Sau Đại học, Đại h ọ c Tokyo, Nhật Bản A re e t Sa-N gasang; S urapee A n an tap reech a; N uan ju n W ichukchinda Bộ m ôn Khoa h ọ c Ykhoa, Bộ Y tế, Thái Lan P athom S aw an p anyalert Đơn v ị Quản lý Thuốc Thực phẩm , Bộ Y tế, Thái Lan Jin tan a P atarapotỉkuí - Bộ m ôn Vi sinh M iễn dịch , Đại h ọ c Mẩhidoí, Thái Lan GS TS B S Naoyuki T su ch iya - Khoa Y, Đ ại học Tsukuba, Nhật Bản H ng dẫn: P G S TS Ju n ó h a s h i Trường Sau Đại học , Đ ại học Tokyo, Nhật Bản T Ó M TẮT Đặt vấn đề Mục tiêu nghiên cứu: s ố t dengue thể nặng bao gồm thể chính: thể shock (DSS), thề xuất huyết (DHF), đe dọa mạng sống cùa bệnh nhân nhiễm dengue Tuy nhiên, cốc gene liên quán đến chế bệnh sinh DSS DHF chưa rõ ràng Một nghiên cứu tương quan toàn nhiễm sắc thể (GWAS), phàt đa hình đơn nucleotide (SNPs): rs3132468 gen MICB, r$3765524 gen PLCE1 liên quan đến DSS quần thề bệnh nhân trẻ em nhiễm dengue Việt Nam Thêm vào đó, nghiên cứu GWWS khác, tìm thấy SNPs liên quan đến giảm tiểu cầu quần thể người khỏe mạnh Nhật Bản Trong nghiên cứu này, chúng tơi tìm hiếu mối liên quan SNPs với sốt dengue thể nặng quần thể bệnh nhân trẻ em nhiễm dengue Thái Lan Phương pháp nghiên cứu: SNPs (đó là, rs3132468 cửa MICB, rs3765524 PLCE1), với SNPs liên quan giảm tiểu cầu (bao gồm, rs6065 GP1BA, rs739496 SH2B3, rs385893 RCL1, rs6141 THPO, rs5745568 BAK1) xác định kiểu di truyền 917 bệnh nhân trẻ em nhiễm dengue Thài: 76 bệnh nhân DSS, 432 bệnh nhân DHF, 409 bệnh nhân DF Đề tìm hiểu mối liến quan cửa SNPs với sốt dengue thể nặng, so sánh tần số alen cùa SNPs hai nhóm: DSS vs khơng DSS SNPs MICB PLCE1, DHF vs DF SNPs liên quan giảm tiểu cầu Kết quả: rs3132468 MICB rs3765524 PLCE1 lẩn khẳng định mối liên quan với DSS bệnh nhân nhiễm dengue (P value = 0,0213, OR - 1,58 cho alen rs3132468-C; p value = 0,0252, OR = 1,49 cho rs3765524-C) Tuy nhiên có alen rs3132468-C thể mối liên quan có ý nghĩa với hàm lượng mRNA MICB (P value - 0,0267) Trong số SNPs liên quan giảm tiểu cầu, ch ỉ có alen ÍS5745568-G BAK1 liên quan với nguy DHF (P value = 0,005, OR = 1,32) Kết luận: MICB protein thường biểu cốc tế bào nhiễm dengue trình diện đến thụ thể NKG2D bề mặt cốc tế bào tiêu diệt tự nhiên, để từ hoạt hóa q trình tiêu diệt tế bào nhiễm Kết nghiên cứu gợi ý chế bệnh sinh liên quan tới DSS rs3132468 SNPs làm giảm biểu protein MICB từ giảm q trình tiêu diệt tế bào nhiễm dengue Đồng thời rs5745568 BAK1 giổn tiếp làm trầm trọng thêm tình xuất huyết chế bệnh sinh DHF Từ khóa: MICB gene, BAK1 gene, sốt dengue thể nặng, thể shock dengue, thể xuất huyết dengue SU M M A R Y THE ROLE OF MICB AND BAK1 GENE IN PA THOGENESIS OF SEVERE DENGUE MPH Tran Ngoc Dang Department o f Environmental Health, Faculty o f Public Health, University o f Medicine and Pharmacy, Ho Chi Minh City, Vietnam PhD Izumi Naka - Graduate School o f Science, The University o f Tokyo, Tokyo, Japan Areerat Sa-Ngasang; Surapee Anantapreecha; Nuanjun Wichukchinda Department o f Medical Sciences, Ministry o f Public Health, Nonthaburi, Thailand Pathom Sawanpanyalert Food and drug Administration, Ministry o f Public Heath, Nonthaburi, Thailand Jintana Patarapotikul Department o f Microbiology and Immunology, Faculty o f Tropical Medicine, Mahidol University, Bangkok, Thailand Prof MD PhD Naoyuki Tsuchiya - Faculty o f Medicine, University o f Tsukuba, Tsukuba, Japan Supervisor Associate Prof PhD Jun Ohashi Graduate School o f Science, The University o f Tokyo, Tokyo, Japan Background and Purposes: Dengue shock syndrome (DSS), and Dengue haemorrhagic fever (DHF) am severe life-threatening forms o f dengue infection However, little is known about genetic factors in the host that 441 associated with DSS and DHF in patients with dengue A recent genome wide association study (GWAS) identified two SNPs, rs3132468 o f major histocompatibility complex class I polypeptide-related sequence B (MICB) and rs3765524 o f phospholipase c, epsilon (PLCE1), associated with DSS in Vietnamese children In addition, another GWAS o f haematological and biochemical traits identified six SNPs associated with low platelet count in healthy subjects in a Japanese population In this study, we aim to examine the association o f above mentioned SNPs with DSS and DHF in patients with dengue in Thai population Materials and Methods: Two SNPs in MICB (i.e rs3132468, and rs3765524), and SNPs associated with low platelet count (i.e rs6065 in GP1BA, rs739496 in SH2B3, rs385893 in RCL1, rs6141 in THPO, and ĨS5745568 at BAK1) were genotyped in 917 Thai children with dengue: 76 patients with DSS, 433 DHF, and 409 DF To assess the association o f each SNP with severe dengue, allele frequencies were compared using a Chi-square test between the two groups (i.e DSS vs non DSS in MICB SNPs, and DHF vs DF in platelet SNPs) Results: The reported DSS-risk alleles were significantly associated with DSS in Thai patients with dengue (one-sided p - 0.0213 and odds ratio [OR] = 1.58 forrs3132468-C and one-sided p - 0.0252 and OR - 1.49 for rs3765524-C) The ÍS3132468-C allele showed a significant association with lower mRNA level o f MICB (P 0.0267), whereas the rs3765524-C allele did not Among the five platelet SNPs, the G allele o f rs5745568 in BAK1 was significantly associated with a risk for DHF [P = 0.005 and crude odd ratio (OR) - 1.32] Conclusions: These results imply that the escape o f dengue virus-infected cells with lower MICB expression from the natural killer group member D (NKG2D)-mediated killing by NK cells may mediate the pathogenesis of DSS The low-level constitutive production o f platelets caused by the G allele ofrs5745568 seems to increase the risk o f bleeding in dengue infection Our results suggest that BCL-2 homologous antagonisưkiller (BAK) protein, encoded by BAK1, plays a crucial role in the pathogenesis ofDHF Keyw ords: MICB, BAK1, severe dengue, dengue shock syndrome, dengue haemorrhagic fever Đ Ă T V Á N Đ È V À M Ụ C TIẾ U Sot dengue bệnh muỗi truyền gây virus dengue Virus dengue có tuýp huyết thanh: DEN1, DEN2, D EN 3, DEN4 Khoảng gần 2,5 tỉ người toàn cầu sổng vùng có nguy lây truyền virus dengue, Đơng Nam A khu vực bị ảnh hưởng nghiêm trọng Sốt dengue thể nặng bao gịm the chính: thề shock (D SS), thể xuẩt huyết (D H F), đe dọa mạng sống bệnh nhân nhiễm dengue [1], Tuy nhiên, gene liên quan đến chế bẹnh sinh D SS D H F chưa rõ ràng Một nghiên cứu tương quan toàn nhiễm sắc thể (G W AS), phát đa hình đơn nucleotide (SNPs): rs3132468 gen MICB, vả rs3765524 cùa gert PLCE1 iiên quan đến D S S quần thể bệnh nhân trẻ em nhiễm dengue Việt Nam [2] Thêm vào đó, nghiên cứu G W A S khác, tỉm thấy S N P s liên quan đến giảm tiều cầu quần thể người khỏe mạnh Nhật Bản [3] Trong nghiên cứu này, chúng tơi tìm hiểu mối liên quan SNPs với sốt dengue thể nặng quần thể bệnh nhân trè em nhiễm dengue Thái Lan Đ Ố I TƯỢNG VÀ PHƯƠNG P H Á P N G H IÊ N c ứ u Đ ố i tư ợ ng Nghiên cứu bao gồm bệnh nhân tuổi S15 nhiễm dengue điều trị hai bệnh viện Ratchaburi Lampang, Thái Lan tư 1999 đến 2004 Bệnh nhân phân thành nhóm: sốt dengue khơng đặc hiệu (DF) gồm người, sốt dengue xuất huyết (D HF) độ độ gồm người, D H F độ (hay gọi shock dengue, D SS ) gồm 76 người, dựa theo tiêu chuẩn phân loại W H O năm 1997 [4] Nghiên cứu Hội đồng Y đức Bộ Y tế Thái Lan, Hội đồng Y đức Trường Đại học Mahidol, Trường Đại học Tsukuba cho phép tiến hành P hư ng pháp x c định kiều d i tru y ề n S N P s S N P s (rs3132468 MICB, rs3765524 PLCE1), với S N P s liên quan giảm tiểu cầu (bao gồm, rs6065 GP1BA, rs739496 SH2B3, rs385893 RCL1, rs6141 T H P O , rs5745568 BAK1) xác định kiểu di truyền phương pháp J a q M a n ® S N P Genotyping Assay SỐ liệu m ứ c đ ộ biểu m R N A Số liệu mức độ biểu m R NA tương ứng với rs3132468 MICB rs3765524 PLCE1 thu thập từ sở liệu G E N E V A R [5, 6] Phan tích th ổ ng kể Đ ể tìm hiểu mối liên quan cùa S N P s kể với sốt dengue thể nặng, so sánh tần số alen SNPs giưa hai nhóm: D S S (D H F độ 3,4) vs không D SS (D F + D HF độ 2) S N P s MICB P LC E 1, D H F (D H F độ 1,2,3 ) vs D F SNPs liên quan giảm tiểu cầu sử dụng phép kiểm Chỉ bình phương (Chi2) Sau đó, mơ hình hồi quy logistic đa biển (kiềm sốt cho yeu tổ như: tuổi, giới, bệnh viện, tuýp virus) sử dụng để tính tỉ số số chênh (OR) alén nguy M ức ý nghĩa thống kê p value < 0,05 K ẾT Q U Ả Bảng miêu tả đặc điểm dân số quần thể nghiên cứu Theo số bệnh nhân nhiễm dengue nam nhiều nữ (489 vs 428) s ố bệnh nhân bệnh viện Ratchburi nhiều gần gấp đôi số bệnh nhân bệnh viện Lampang (611 vs 306) Tuýp virus DEN1 DEN2 chiếm đa so so với íoại khác Khơng có khác biệt đáng kể tuổi nhóm bệnh nhân sốt dengue Bảng Đ ặc đ ề m quằn thề nghiên cừu _ Bệnh nhân nhiếm dengue Đặc điểm DF DHF DSS (n = 409) (n =432) (n = 76) Tuổi (năm) 9(1, 15) 10(0, 15) 9(3, 15) 442 Giới: Nam Nữ Bệnh viện: Ratchaburi Lampang Tuýp virus: DEN-1 DEN-2 DEN-3 DEN-4 DEN-3 + DEN-4 213 196 235 197 41 35 237 172 322 110 52 24 153 109 92 54 136 158 73 64 15 39 16 Hỉnh bên thể mối liên quan alen nguy D SS M IC B PLCE1 với mức độ biểu mRNA Có thể thấy số alien rs3132468-C cao mức độ biểu m RNA MICB thấp, mối lỉên quan có ý nghĩa thống kê với p value = 0,0267 hệ số tương quan = -0 ,1 Trong khí mổi liên quan rs3765524-C với mRNA PLCE1 khơng có ý nghĩa thống kê, với p value = 0,0863 and partial hệ số tương quan = 0,0209 (a) a Trung vị (min,max) Bảng sò sánh tan số alien rs3132468-C MICB and alien rs3765524-C PLCE1 hai nhóm DSS (DHF độ 3,4) khơng D S S (D F + D H F độ 2) SNPs cho thấy mối liên quan có ý nghĩa thống kê với D SS bệnh nhân nhiễm dengue (P value = 0,0213, O R = 1,58 cho alen rs3132468-C; P Alien (gene) rs3132468-C iỊyilCB) rs3765524-C (PLCE1) Bệnh nhân dengue nonDSS DSS One-sided P-value OR 0,217 0,149 0,0213 1,58 0,763 0,684 0,0252 1,49 95% Cl 1,022,40 1,002,26 PLCE1 Ị « f I I 9.2-1 1) Z 9.0'I < j £M ị I 6.0 i « 8.6 í 1 N I ị 8.4 -1 Ị 5.9 - o 8.2 Ị Z 8.0 L TT (68) thuộc đặc điểm dân số quần thể nghiên cứu (như íà: tuổi, giới, bệnh viện, virus) mơ hình hồi quy logistic đa biến (P value = 0,01547 OR =1,57 cho rs3132468-C; p value = 0,0226, O R = 1,48 cho rs3765524-C) Bảng Mối liên quan M IC B rs3132468 PLCE1 rs3765524 với D SS (6 ) MÍCB CT (15} CC (5) rs3132468 5.8- í TT{4) CT(35) CC(50) «3765524 Hỉnh Mức độ biểu mRNA kiểu di truyền SNP (a) Mức độ biểu mRNA cùa MỈCB SNP rs3132468 (b) Mức độ biểu mRNA PLCE1 với SNP rs3765524 Bảng so sánh tần số alien nguy SNPs liên quan giảm tiểu cầu hai nhóm D HF (D H F độ 1,2,3 4) vs DF Trong số SNPs liên quan giảm tiểu cầu có rs5745568 BAK1 liên quan có ý nghĩa thống kê với D H F (P value = 0,005, O R thô = 1,32) Mối liên quan không thay đỗi hiệu Chĩnh cho yếu tố thuộc đặc tính dân sổ (P vaiue = 0,008, O R hiệu chỉnh = 1,31) xác SNP id (gene) rs5745568 (BAK1) rs6141 (THPO) rs6065 (GP1BA) rs739496 (SH2B3) rs385893 (RCL1) Kiễu di truyèn (Alien) TT GT GG G-ailele TT CT cc C-alỉele TT CT cc c-allele AA AG GG A-allele TT CT cc T-aileie Bệnh nhân nhiém denque DHF DF 48 47 191 187 265 173 721 (71,5%) 533 (65,5%) 82 70 260 189 164 148 588 (58,1%) 485 (59,6%) 37 42 467 366 971 (96,0%) 774 (94,9%) 18 12 137 114 350 281 173(17,1%) 138(17,0%) 49 39 200 165 258 205 298 (29,4%) 243 (29,7%) 443 Phép kiếm Chi2 OR thô P-vaỉue Hồi quy logistic OR hiệu chỉnh P-va!ue 1,32 0,005’ 1,31 0,008* 0,94 0,523 0,96 0,739 1,28 0,263 1,5 0,084 1,01 0,921 0,95 0,743 0,98 0,882 1,00 0,953 BÀN LUẬN V trò cu a M IC B tron g c ch ế bệnh sinh s ố t deng u e th ề nặng (H ìn h 2) K/IICB protein thường biểu tế bào nhiễm dengue trình diện đến thụ thể N K G 2D bề mặt tể bào tiêu diệt tự nhiên, tế bào T C D 8+, để từ hoạt hóa q trình tiêu diệt tế bào nhiễm Kết nghiên cửu với kểt nghiên cứu trước [2,7] gợi ý chế bệnh sinh Hên quan tới sốt dengue thể nặng ià rs3132468 SNPs gene MICB làm giảm biểu protein M IC B từ giảm n tiả trìn h tiê > < H ị p t c ỏ Q t ả h n n h ịậ rp H n g n o M rv n n fp g n n h ịố n { J l 'p t i t n p r V r * r f i n g r h | rằ r^ n tà i Ịm rv n n n ’l o w irttc dengue máu nhiều mức độ bệnh nặng [8] Làm suy giảm trìn h tiê u d iệ t t ế bào n hiễm của t ế bào tiê u d iệ t tự n hiên , t ế bào T CD8+ D o đ ó làm gia tăn g gánh nặng virus tro n g th ể Hình Vai trị gene MICB CO’ che bệnh sinh sôt dengue ỉhể nặng V trò củ a BAK1 tro n g c c h ế bệnh sin h số t d eng u e th ề nặng SNP rs5745568 nằm vùng gắn kết cùa yếu tố phiên mã gene BAK1 [9] Do SNP TS5745568 ảnh hưởng đến mức độ biểu BAK1 BAK protein thuộc họ gia đình protein có chức quy định trình tự chết tế bào BAK protein chứng minh ià có liên quan đến việc !y giải tiểu cầu chuột [10] Do đó, kết nghiên cứu gợi ý rs5745568-G cùa BAK1 đâ gián tiếp làm trầm trọng thêm tình xuất huyết che bệnh sinh DHF C ác phương pháp điều trị tương lai tỉm cách làm giảm mức độ biểu BAK protein để điều trị cho bệnh nhân DHF K Ế T LUẬN rs3132468-C MỊCB, rs3765524-C PLCE1, rs5745568-G BAK1 có iiên quan đến sốt dengue thể nặng MICB BAK1 có thề đóng vai trò quan trọng chế bệnh sỉnh sốt dengué thể nặng, kềt nghiên cứu mở hy 444 vọng đ ề u trị cho bệnh nhân sốt dengue thể nặng TÀ I LIỆU T H A M K H Ả O Anders KL, Nguyet NM, Chau NV, Hung NT, Thuy TT, Lien le B, Farrar J, Wills B, Hien TT, Simmons CP: Epidemiological factors associated with dengue shock syndrome and mortality in hospitalized dengue patients in Ho Chi Minh City, Vietnam Am J Trop Med Hyg 2011, 84: 127-134 Khor cc, Chau TN, Pang J, Davila s, Long HT, Ong RT, Dunstan SJ, Wilis B, Farrar J, Van Tram T, Gan TT, Binh NT, Tri le T, Lien le B, Tuan NM, Tham NT, Lanh MN, Nguyet NM, Hieu NT, Van NVinh Chau N, Thuy TT, Tan DE, Sakuntabhai A, Teo YY, Hibberd ML, Simmons CP: Genome-wide association study identifies susceptibility loci for dengue shock syndrome at M!CB and PLCE1 Nat Genet 2011, 43:1 -1 Kamatani, Y., et al., Genome-wide association sỉudy of hematoiogical and biochemical traits in a Japanese population Nat Genet, 2010 42(3): p 210-5 Chow VT: Molecular diagnosis and epidemiology of dengue virus infection Ann Acad Med Singapore 1997, 26: 820-826 Yang TP, Beazley c, Montgomery SB, Dimas AS, Gutierrez-Arcelus M, stranger BE, Deioukas p, Dermitzakis ET: Genevan a database and Java application for the analysis and visualization of SNP-gene associations in eQTL studies Bioinformatics 2010, 26: 2474-2476 Stranger BE, Nica AC, Forrest MS, Dimas A, Bird CP, Beazley c , ingle CE, Dunning M, Fiicek p, Koiler D, Montgomery s, Tavare s, Deloukas p, Dermitzakis ET: Population genomics of human gene expression Nat Genet 2007, :1 -1 2 Whitehorn J, Chau TN, Nguyet NM, Kien DT, Quyen NT, Trung DT, Pang J, Wilis B, Van Vinh Chau N, Farrar J, Hibberd ML, Khor cc, Simmons CP: Genetic variants of MICB and PLCE1 and associations with nonsevere dengue PloS One 2013, 8: e59067 Vaughn DW, Green s , Kalayanarooj s, Innis BL, Nimmannitya s, Suntayakorn s, Endy TP, Raengsakulrach B, Rothman AL, Ennis FA, Nisaiak A: Dengue viremia titer, antibody response pattern, and virus seroiype correlate with disease severity J infect Dis 2000, :2 -9 Xu, z and J.A Taylor: SNPinfo: integrating GWAS and candidate gene information into functional SNP selection for genetic association studies Nucleic Acids Res, 2009 37(Web Server issue): p W600-5 10 Mason, K.D., et al., Programmed anuciear cell death delimits platelet life span Ceil, 2007 128(6): p 1173-86 CHĂM SÓC PHỤ NỮ MANG THAI, SINH ĐẺ CỦA NGƯỜIDÂN TỘCTHIẺU SỐ VÀ MỌT SỐ RÀO CẢN VÈ TIẾP CẬN DỊCH VỤ Y TÉ TẠI GIA LAI Ths T rần Thị Đ iệ p 1, PG S T S Đ inh T h ị Phư ng H òa2 Ths T rần K hánh Lon g 1, P G S T S Trần Hữu Bích* Giảng viên, Trường Đại h ọ c Y tế công cộng Nguyên giảng viên, Trường Đại học Y tế công cọng TĨ M T Ắ T Mặc tíừ nước ta đẫ có nhiều thành cơng cải thiện sức khỏe phụ nữ thời gian mang thai sinh đẻ nhiều phụ nữ dân tộc vùng sâu, xa khó tiếp cận với cốc dịch vụ Các tập tục ảnh hưởng nặng nề đến sức khỏe bà mẹ tuồi sinh đè Vi vậy, nghiên cứu tiến hành với mục tiêu: Mô tả thực trạng rào cản chăm sóc sức khỏe bà mẹ mang thai sinh đẻ người Bana J ’rai tỉnh Gia Lai: Sử dụng phương pháp nghiên cứu định tính, thu thập số liệu từ 12 vấn sâu 12 thảo luận nhóm bà mẹ có tuổi Kểt bàn luận: Phụ nữ người dân tộc hiểu biết lợi ích khám thai sử dụng dịch vụ chăm sóc thời gian mang thai hạn chế Đẻ nhà phổ biến Câc bà mẹ sau sinh thường ăn kiêng kéo dài; đí làm nương/rẫy sớm thường mệt mỏi không đù sữa cho bú Ba rào cản cho việc tiếp cận chăm sóc sức khỏe 1) phụ nữ dàn tộc thiều số khơng hiểu hết thơng điệp truyền thơng hình thức truyền thơng chưa phù hợp 2) Tại gia đình, việc chăm sóc thai nghén, sinh đẻ phần lớn chồng bố, mẹ đmh 3) Kinh tế gia đình khó khăn càn trở lớn đến việc tiếp cận dịch vụ chăm sóc y tế Kết luận: Các can thiệp đồng cần tiếp tục tiên hành nhằm cải thiện sức khỏe bà mẹ mang thai, sinh đẻ cho cộng đồng Bana J ’rai Cần ưu tiên cho can thiệp truyền thơng, đặc biệt với nhóm đối tượng chồng, bà mẹ; tư vấn nhóm nhỏ cần sử dụng nhiều Từ khóa: Phụ nữ, mang thai sinh đẻ, dân tộc SUMMARY _ CARE OF ETHNIC MINORITY WOMEN DURING PREGNANCY AND A T BIRTH AND SOME BARRIERS ON ACCESS TO HEALTH CARE SERVICES IN GIA u \ i MS Tran Thi Diep1, Asso Prof Dinh Thi Phuong Hoa2, MS Tran Khanh Long1, Asso Prof Tran Huu Bich1 Lecturer, Hanoi School o f Public Health Former Lecturer, Hanoi School o f Public Health 445 ... rs5745568-G BAK1 có iiên quan đến sốt dengue thể nặng MICB BAK1 có thề đóng vai trò quan trọng chế bệnh sỉnh sốt dengué thể nặng, kềt nghiên cứu mở hy 444 vọng đ ề u trị cho bệnh nhân sốt dengue thể nặng. .. Hình Vai trị gene MICB CO’ che bệnh sinh sôt dengue ỉhể nặng V trò củ a BAK1 tro n g c c h ế bệnh sin h số t d eng u e th ề nặng SNP rs5745568 nằm vùng gắn kết cùa yếu tố phiên mã gene BAK1 [9]... SNPs với sốt dengue thể nặng quần thể bệnh nhân trè em nhiễm dengue Thái Lan Đ Ố I TƯỢNG VÀ PHƯƠNG P H Á P N G H IÊ N c ứ u Đ ố i tư ợ ng Nghiên cứu bao gồm bệnh nhân tuổi S15 nhiễm dengue điều