Nghiên cứu quy trình xử lý mẫu nước tiểu để phân tích một số chất ma túy tổng hợp nhóm ATS bằng phương pháp CE c4d

ĐẠI HỌC QUỐC GIA HÀ NỘI TRƢỜNG ĐẠI HỌC KHOA HỌC TỰ NHIÊN - Tạ Thùy Linh NGHIÊN CỨU QUY TRÌNH XỬ LÝ MẪU NƢỚC TIỂU ĐỂ PHÂN TÍCH MỘT SỐ CHẤT MA TÚY TỔNG HỢP NHÓM ATS BẰNG PHƢƠNG PHÁP CE-C4D LUẬN VĂN THẠC SĨ KHOA HỌC Hà Nội – 2016 ĐẠI HỌC QUỐC GIA HÀ NỘI TRƢỜNG ĐẠI HỌC KHOA HỌC TỰ NHIÊN - Tạ Thùy Linh NGHIÊN CỨU QUY TRÌNH XỬ LÝ MẪU NƢỚC TIỂU ĐỂ PHÂN TÍCH MỘT SỐ CHẤT MA TÚY TỔNG HỢP NHĨM ATS BẰNG PHƢƠNG PHÁP CE-C4D Chun ngành: Hóa phân tích Mã số: 60440118 LUẬN VĂN THẠC SĨ KHOA HỌC NGƢỜI HƢỚNG DẪN KHOA HỌC: HD 1: TS Nguyễn Thị Ánh Hƣờng HD 2: TS Nguyễn Xuân Trƣờng Hà Nội - 2016 LỜI CẢM ƠN Với lịng biết ơn sâu sắc, tơi xin chân thành cảm ơn TS Nguyễn Thị Ánh Hƣờng TS Nguyễn Xuân Trƣờng Thầy, cô giao đề tài, tận tình hƣớng dẫn tạo điều kiện thuận lợi giúp tơi hồn thành luận văn Tôi xin chân thành cảm ơn công ty 3Sanalysis (http://www.3sanalysis.vn/) hỗ trợ trang thiết bị cho nghiên cứu Tơi xin cảm ơn hỗ trợ kinh phí Đại học Quốc gia Hà Nội đề tài QG.15.15: “Quy trình phân tích số chất ma túy nhóm ATS (MA; MDA; MDMA; MDEA) thƣờng sử dụng Việt Nam mẫu bị bắt giữ mẫu nƣớc tiểu phƣơng pháp điện di mao quản sử dụng detector độ dẫn không tiếp xúc CE-C4D” Tôi xin chân thành cảm ơn thầy, giáo khoa Hóa, trƣờng Đại học Khoa học Tự nhiên dạy dỗ, bảo động viên tơi suốt q trình học tập nghiên cứu trƣờng Tôi xin cảm ơn CN Nguyễn Thị Liên SV Lê Thị Hƣơng Giang phối hợp thực nghiên cứu Tôi xin cảm ơn anh, chị Trung tâm giám định ma túy – Viện Khoa học hình nhƣ đồng nghiệp đội giám định Hóa học – phòng PC54 – CATP Hà Nội giúp đỡ, tạo điều kiện để tơi hồn thành luận văn Cuối cùng, xin gửi lời cảm ơn sâu sắc tới gia đình, bạn học viên sinh viên Bộ mơn Hóa phân tích ln hỗ trợ, động viên, chỗ dựa vững giúp hoàn thành luận văn Hà Nội, ngày 01 tháng năm 2016 Học viên Tạ Thùy Linh MỤC LỤC MỞ ĐẦU CHƢƠNG TỔNG QUAN 1.1 Giới thiệu chung ma túy tổng hợp nhóm ATS 1.1.1 Nguồn gốc, tổng hợp MA, MDA, MDMA MDEA 1.1.2 Vai trò tác dụng ma túy tổng hợp 1.1.3 Cơ chế hoạt động 1.2 Tình hình sử dụng ma túy tổng hợp nhóm ATS giới Việt Nam 1.2.1 Trên giới 1.2.2 Ở Việt Nam 10 1.3 Một số phƣơng pháp xác định ma túy tổng hợp nhóm ATS 11 1.3.1 Phƣơng pháp điện hóa 11 1.3.2 Phƣơng pháp ELISA 12 1.3.3 Các phƣơng pháp sắc ký 12 1.3.3.1 Phƣơng pháp sắc ký khí 12 1.3.3.2 Phƣơng pháp sắc ký lỏng 14 1.3.4 Các phƣơng pháp điện di mao quản 15 1.4 Các phƣơng pháp xử lý mẫu phẩm sinh học 18 1.4.1 Phƣơng pháp chiết lỏng - lỏng 18 1.4.2 Phƣơng pháp chiết pha rắn 20 CHƢƠNG THỰC NGHIỆM 24 2.1 Mục tiêu nội dung nghiên cứu 24 2.1.1 Mục tiêu nghiên cứu 24 2.1.2 Nội dung nghiên cứu 24 2.2 Phƣơng pháp nghiên cứu 24 2.2.1 Phƣơng pháp phân tích 24 2.2.2 Phƣơng pháp xử lý mẫu 25 2.3 Hóa chất thiết bị 26 2.3.1 Hóa chất 26 2.3.1.1 Chất chuẩn 26 2.3.1.2 Hóa chất, dung mơi 26 2.3.1.3 Chuẩn bị dung dịch hóa chất 26 2.3.2 Thiết bị, dụng cụ 27 2.4 Các phƣơng pháp đánh giá độ tin cậy phƣơng pháp phân tích 28 2.4.1 Giới hạn phát (LOD) giới hạn định lƣợng (LOQ) 28 2.4.2 Độ chụm (độ lặp lại) phƣơng pháp 28 2.4.3 Độ (độ thu hồi) thiết bị, phƣơng pháp 29 CHƢƠNG KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 30 3.1 Xây dựng đƣờng chuẩn chất phân tích 30 3.1.1 Xây dựng đƣờng chuẩn 30 3.1.2 Đánh giá phƣơng trình hồi quy đƣờng chuẩn 33 3.2 Đánh giá phƣơng pháp phân tích 33 3.2.1.Giới hạn phát (LOD) giới hạn định lƣợng (LOQ) 33 3.2.2 Đánh giá độ chụm (độ lặp lại) thiết bị 35 3.3 Nghiên cứu, tối ƣu điều kiện trình chiết lỏng - lỏng nhằm xác định MA, MDA, MDMA, MDEA mẫu nƣớc tiểu 38 3.3.1 Khảo sát dung môi chiết 38 3.3.2 Khảo sát pH môi trƣờng chiết 39 3.3.3 Khảo sát thể tích dung mơi chiết 40 3.3.4 Đánh giá độ độ chụm phƣơng pháp chiết lỏng - lỏng 42 3.4 Nghiên cứu tối ƣu điều kiện trình chiết pha rắn nhằm xác định MA, MDA, MDMA, MDEA mẫu nƣớc tiểu 44 3.4.1 Khảo sát lựa chọn cột chiết 44 3.4.2 Khảo sát pH dung dịch đệm 47 3.4.3 Khảo sát thành phần dung dịch rửa tạp 48 3.4.4 Ảnh hƣởng thể tích dung dịch axit H3PO4 dùng để rửa tạp đến hiệu suất thu hồi chất phân tích 50 3.4.5 Khảo sát ảnh hƣởng dung môi rửa giải 52 3.4.6 Ảnh hƣởng thể tích rửa giải đến độ thu hồi chất phân tích 53 3.4.7 Đánh giá độ độ chụm phƣơng pháp chiết pha rắn 54 3.5 Phân tích mẫu thực tế 56 3.6 Phân tích đối chứng phƣơng pháp CE – C4D với phƣơng pháp GC/MS 60 KẾT LUẬN 62 TÀI LIỆU THAM KHẢO 63 PHỤ LỤC 68 DANH MỤC CÁC BẢNG Bảng 1.1 Thông tin chất phân tích (MA, MDA, MDMA, MDEA) Bảng 3.1 Sự phụ thuộc diện tích pic vào nồng độ MA, MDA, MDMA, MDEA 31 Bảng 3.2 Phƣơng trình hồi quy chất phân tích 32 Bảng 3.3 Kết so sánh giá trị a với giá trị phƣơng trình đƣờng chuẩn MA, MDA, MDMA, MDEA 33 Bảng 3.4 Giới hạn phát MA, MDA, MDMA, MDEA xác định phƣơng pháp điện di mao quản CE-C4D 34 Bảng 3.5 Giới hạn phát (LOD), giới hạn định lƣợng (LOQ) MA, MDA, MDMA, MDEA 35 Bảng 3.6 Kết xác định độ lặp lại thiết bị CE-C4D định lƣợng MA 35 Bảng 3.7 Kết xác định độ lặp lại thiết bị CE-C4D định lƣợng MDA 36 Bảng 3.8 Kết xác định độ lặp lại thiết bị CE-C4D định lƣợng MDMA 37 Bảng 3.9 Kết xác định độ lặp lại thiết bị CE-C4D định lƣợng MDEA 37 Bảng 3.10 Hiệu suất thu hồi dung môi pH= 7-11 39 Bảng 3.11 Kết khảo sát độ phƣơng pháp dựa thêm chuẩn MA 42 Bảng 3.12 Kết khảo sát độ phƣơng pháp dựa thêm chuẩn MDA 43 Bảng 3.13 Kết khảo sát độ phƣơng pháp dựa thêm chuẩn MDMA 43 Bảng 14 Kết khảo sát độ phƣơng pháp dựa thêm chuẩn MDEA 43 Bảng 3.15 Kết xác định độ lặp lại phƣơng pháp chiết lỏng-lỏng định lƣợng MA, MDA, MDMA MDEA 44 Bảng 3.16 Hiệu suất thu hồi trình chiết sử dụng cột SCX cột C18 47 Bảng 3.17 Hiệu suất thu hồi chất phân tích pH khác đệm 48 Bảng 3.18 Hiệu suất thu hồi chất phân tích sử dụng dung dịch rửa tạp khác 50 Bảng 3.19 Hiệu suất thu hồi chất phân tích sử dụng thể tích dung dịch H3PO4 rửa tạp khác 51 Bảng 3.20 Hiệu suất thu hồi chất phân tích sử dụng dung mơi rửa giải khác 52 Bảng 3.21 Hiệu suất thu hồi chất phân tích sử dụng thể tích dung mơi rửa giải khác 53 Bảng 3.22 Kết khảo sát độ phƣơng pháp dựa thêm chuẩn MA 54 Bảng 3.23 Kết khảo sát độ phƣơng pháp dựa thêm chuẩn MDA, MDMA MDEA 55 Bảng 3.24 Kết xác định độ lặp lại phƣơng pháp CE-C4D định lƣợng MA, MDA, MDMA MDEA 55 Bảng 3.25 Thông tin mẫu nƣớc tiểu đƣợc phân tích 56 Bảng 3.26 Kết phân tích số mẫu nƣớc tiểu chứa ma túy 57 Bảng 3.27 Kết phân tích mẫu nƣớc tiểu H2 60 Bảng 3.28 Kết phân tích số mẫu thực phƣơng pháp GC/MS 61 DANH MỤC CÁC HÌNH Hình 1.1 Nguyên lý hoạt động cảm biến đo độ dẫn khơng tiếp xúc 16 Hình 1.2 Sơ đồ biểu diễn cấu trúc (A) mạch điện tƣơng đƣơng (B) cảm biến đo độ dẫn không tiếp xúc 16 Hình 2.1 Hệ thiết bị CE-C4D 25 Hình 3.1 Đƣờng chuẩn MA 32 Hình 3.2 Đƣờng chuẩn MDA 32 Hình 3.3 Đƣờng chuẩn MDMA 32 Hình 3.4 Đƣờng chuẩn MDEA 32 Hình 3.5 Điện di đồ xác định chất ma túy nhóm ATS với dung mơi chiết khác 39 Hình 3.6 Điện di đồ xác định chất ma túy nhóm ATS với dung mơi chiết etyl acetat pH khác 40 Hình 3.7 Đồ thị biểu diễn phụ thuộc hiệu suất thu hồi vào pH môi trƣờng chiết 40 Hình 3.8 Điện di đồ biểu diễn kết khảo sát với lƣợng dung môi chiết khác 41 Hình 3.9 Biểu đồ phụ thuộc hiệu suất thu hồi vào thể tích dung mơi chiết 41 Hình 3.10 Điện di đồ phân tích mẫu SPE sử dụng cột SCX cột C18 47 Hình 3.11 Điện di đồ xác định chất ma túy nhóm ATS với điều kiện pH đệm khác 48 Hình 3.12 Hiệu suất thu hồi chất phân tích pH khác đệm 49 Hình 3.13 Điện di đồ xác định chất ma túy nhóm ATS với dung dịch rửa tạp khác 50 Hình 3.14 Điện di đồ xác định chất ma túy nhóm ATS với thể tích H3PO4 rửa tạp khác 51 Hình 3.15 Điện di đồ xác định chất ma túy nhóm ATS với dung mơi rửa giải khác 52 Hình 3.16 Điện di đồ phân tích số mẫu nƣớc tiểu 58 Hình 3.17 Điện di đồ xác định MA mẫu nƣớc tiểu H2 mức nồng độ khác 59 Hình 3.18 Điện di đồ xác định MA mẫu nƣớc tiểu H12 mức nồng độ khác 60 10 mV MA pic l¹ Møc Møc 300 400 500 600 700 800 900 Thêi gian di chun (s) Hình 4.10 Điện di đồ xác định MA mẫu nƣớc tiểu H11 Mức 0: Không thêm chuẩn MA vào mẫu H11 pha loãng 10 lần Mức 1: Thêm chuẩn MA mức nồng độ 69,7ppm vào mẫu H11 pha loãng 10 lần cá c ion 10 mV MA Mức Møc 300 400 500 600 700 800 Hình 4.11 Điện di đồ xác định MA mẫu nƣớc tiểu H13 Mức 0: Không thêm chuẩn MA vào mẫu H13 Mức 1: Thêm chuẩn MA mức nồng độ 20ppm vo mu H13 cá c ion 10 mV pic l¹ MA Møc Møc 400 500 600 700 800 900 Thêi gian di chun (s) Hình 4.12 Điện di đồ xác định MA mẫu nƣớc tiểu H14 Mức 0: Không thêm chuẩn MA vào mẫu H12 pha loãng 20 lần Mức 1: Thêm chuẩn MA mức nồng độ 24,4 ppm vào mẫu H14 pha loãng 20 ln cá c ion 10 mV pic l¹ MA Møc Møc 300 400 500 600 700 800 Thêi gian di chun (s) Hình 4.14 Điện di đồ xác định MA mẫu nƣớc tiểu H15 Mức 0: Không thêm chuẩn MA vào mẫu H15 pha loãng 20 lần Mức 1: Thêm chuẩn MA mức nồng độ 24,4 ppm vào mẫu H15 pha loãng 20 ln 10 mV cá c ion pic lạ MA Møc Møc 300 400 500 600 700 800 Thêi gian di chun (s) Hình 4.15 Điện di đồ xác định MA mẫu nƣớc tiểu H16 Mức 0: Khơng thêm chuẩn MA vào mẫu H16 pha lỗng 10 lần Mức 1: Thêm chuẩn MA mức nồng độ 47,6 ppm vào mẫu H16 pha loãng 10 lần 10 mV cá c ion MA Mức Møc 400 500 600 700 800 Thêi gian di chun (s) Hình 4.16 Điện di đồ xác định MA mẫu nƣớc tiểu H17 Mức 0: Không thêm chuẩn MA vào mẫu H17 pha loãng 20 lần Mức 1: Thêm chuẩn MA mức nồng độ 24,4 ppm vào mẫu H17 pha lỗng 20 lần MA 10 mV c¸ c ion Mức Mức 400 500 600 700 800 Thêi gian di chun (s) Hình 4.17 Điện di đồ xác định MA mẫu nƣớc tiểu H18 Mức 0: Không thêm chuẩn MA vào mẫu H18 pha loãng 20 lần Mức 1: Thêm chuẩn MA mức nồng độ 24,4 ppm vào mẫu H18 pha loãng 20 ln cá c ion 10 mV MA Møc Møc 400 500 600 700 800 Thêi gian di chun (s) Hình 4.18 Điện di đồ xác định MA mẫu nƣớc tiểu H19 Mức 0: Không thêm chuẩn MA vào mẫu H19 Mức 1: Thêm chuẩn MA mức nồng độ 20ppm vào mẫu H19 10 mV cá c ion MA Mức Mức 300 400 500 600 700 800 Thêi gian di chun (s) Hình 4.19 Điện di đồ xác định MA mẫu nƣớc tiểu H20 Mức 0: Không thêm chuẩn MA vào mẫu H20 pha loãng 20 lần Mức 1: Thêm chuẩn MA mức nồng độ 69,7 ppm vào mẫu H20 pha loãng 20 lần *Một số sắc ký đồ xác định MA mẫu nƣớc tiểu đối chứng phƣơng pháp GC/MS (gồm mẫu H11, H12, H13, H14, H15, H16, H17, H18, H19 H20) Phụ lục 2: Kết phân tích đối chứng số mẫu thực phƣơng pháp GC/MS * Mẫu nước tiểu H11 MA MA * Mẫu nước tiểu H12 MA MA * Mẫu nước tiểu H13 * Mẫu nước tiểu H14 MA MA * Mẫu nước tiểu H15 MA MA * Mẫu nước tiểu H16 MA MA * Mẫu nước tiểu H17 MA MA * Mẫu nước tiểu H18 MA MA * Mẫu nước tiểu H19 * Mẫu nước tiểu H20 MA MA ... thế, để có kết phân tích tốt việc làm làm giàu mẫu cần thiết Do đó, chúng tơi thực đề tài ? ?Nghiên cứu quy trình xử lý mẫu nước tiểu để phân tích số chất ma túy tổng hợp nhóm ATS phương pháp CE- C4D? ??... - Tạ Thùy Linh NGHIÊN CỨU QUY TRÌNH XỬ LÝ MẪU NƢỚC TIỂU ĐỂ PHÂN TÍCH MỘT SỐ CHẤT MA TÚY TỔNG HỢP NHÓM ATS BẰNG PHƢƠNG PHÁP CE- C4D Chun ngành: Hóa phân tích Mã số: 60440118 LUẬN VĂN THẠC... dung nghiên cứu 2.1.1 Mục tiêu nghiên cứu Mục tiêu luận văn là: Nghiên cứu quy trình xử lý mẫu nƣớc tiểu để phân tích số chất ma túy tổng hợp nhóm ATS (gồm: MA, MDA, MDMA, MDEA) phƣơng pháp điện