Luận văn nghiên cứu quy trình xử lý mẫu nước tiểu để phân tích một số chất ma túy tổng hợp nhóm ATS bằng phương pháp CE c4d

ĐẠI HỌC QUỐC GIA HÀ NỘI TRƯỜNG ĐẠI HỌC KHOA HỌC TỰ NHIÊN - TẠ THÙY LINH NGHIÊN CỨU QUY TRÌNH XỬ LÝ MẪU NƯỚC TIỂU ĐỂ PHÂN TÍCH MỘT SỐ CHẤT MA TÚY TỔNG HỢP NHÓM ATS BẰNG PHƯƠNG PHÁP CE-C4D LUẬN VĂN THẠC SĨ KHOA HỌC H Nộ i ĐẠI HỌC QUỐC GIA HÀ NỘI TRƯỜNG ĐẠI HỌC KHOA HỌC TỰ NHIÊN - TẠ THÙY LINH NGHIÊN CỨU QUY TRÌNH XỬ LÝ MẪU NƯỚC TIỂU ĐỂ PHÂN TÍCH MỘT SỐ CHẤT MA TÚY TỔNG HỢP NHĨM ATS BẰNG PHƯƠNG PHÁP CE-C4D Chun ngành: Hóa phân tích Mã số: 60440118 LUẬN VĂN THẠC SĨ KHOA HỌC NGƯỜI HƯỚNG DẪN KHOA HỌC: HD 1: TS Nguyễn Thị Ánh Hường HD 2: TS Nguyễn Xuân Trường Hà Nội MỞ ĐẦU Tệ nạn ma túy hiểm họa cho toàn xã hội, gây tổn hại sức khỏe, làm suy thối nịi giống, phẩm giá người, phá hoại hạnh phúc gia đình, gây ảnh hưởng nghiêm trọng đến trật tự, an toàn xã hội an ninh quốc gia Nguy hiểm nữa, việc tiêm chích ma túy cịn ngun nhân lan truyền bệnh nguy hiểm HIV/AIDS [2] Hiện nay, việc sản xuất, vận chuyển, buôn bán sử dụng ma túy ngày tinh vi, phức tạp khó kiểm sốt Các cán phải làm giám định nhiều loại chất chế phẩm chúng, phải sử dụng phương pháp khoa học đòi hỏi phải nhanh hơn, xác đặc hiệu Kết giám định phải tin cậy đáp ứng yêu cầu quan thực thi luật pháp nước Do vậy, việc xác định đối tượng có sử dụng ma túy thơng qua giám định mẫu phẩm sinh học (nước tiểu) đối tượng cần thiết Ở Việt Nam, việc giám định ma túy mẫu phẩm sinh học thực nhiều phương pháp như: phân tích miễn dịch, sắc ký khí (GC), sắc ký khí – khối phổ (GC-MS), sắc ký lỏng hiệu cao (HPLC) với khả phát tốt Tuy nhiên, loại thiết bị đòi hỏi đầu tư ban đầu lớn đồng thời quy trình kèm theo phức tạp giá thành phân tích cao, thường triển khai phịng thí nghiệm tuyến Trung ương Trong đó, nhu cầu phân tích giám định chất ma túy phịng thí nghiệm hình tuyến địa phương lớn Do đó, việc nghiên cứu phát triển phương pháp phân tích đơn giản, chi phí thấp nhằm hỗ trợ điều tra phịng thí nghiệm phân tích ma túy tuyến địa phương cần thiết Trước tình hình thực tế đó, nhóm nghiên cứu nghiên cứu bước đầu thành công việc xác định số chất ma túy tổng hợp nhóm ATS nước tiểu phương pháp điện di mao quản sử dụng detector độ dẫn không tiếp xúc (CE-C4D) với kết quả: tối ưu điều kiện phân tích để tách đồng thời chất ma túy MA, MDA, MDMA MDEA; giới hạn phát MA sau chiết trước chiết 10ppb 500ppb [29] Tuy nhiên, mẫu nước tiểu thường phức tạp, chứa nhiều chất khác ezym, vitamin, axit amin, hợp chất hữu khác đặc biệt lượng lớn ion như: Na+, NH4+, Mg2+, Cl-, SO42-,… Hơn nữa, hàm lượng chất ma túy tổng hợp thấp nên thành phần khác mẫu gây khó khăn cho phương pháp phân tích Vì thế, để có kết phân tích tốt việc làm làm giàu mẫu cần thiết Do đó, chúng tơi thực đề tài “Nghiên cứu quy trình xử lý mẫu nước tiểu để phân tích số chất ma túy tổng hợp nhóm ATS phương pháp CE-C4D” thiết bị đo mà không khảo sát lại điều kiện tối ưu, nhằm nâng cao khả ứng dụng phương pháp CEC4D phân tích ma túy nói riêng nhóm chất khác nói chung, đáp ứng nhu cầu thực tế CHƯƠNG 1: TỔNG QUAN 1.1 Giới thiệu chung ma túy tổng hợp nhóm ATS Ma túy chất gây nghiện có nguồn gốc tự nhiên ho ặc nhân t ạo [2], đưa vào thể sống làm thay đổi hay nhiều chức tâm - sinh lý thể Sử dụng ma túy nhiều lần bị lệ thuộc v ề thể chất lẫn tâm lý, gây hậu nghiêm trọng cho cá nhân, gia đình xã hội Ma túy tổng hợp dạng Amphetamine (Amphetamine - ATS amphetamine-type-stimulans) chất ma túy tổng hợp từ hóa chất ban đầu (tiền chất) Chúng có tác dụng kích thích thời hệ thống thần kinh trung ương gây hưng phấn ảo giác hoang tưởng Ngoài Amphetamine, Methamphetamine (MA) MDMA (cịn gọi Ecstasy) nhóm cịn có nhiều chất khác nhau, quy định Công ước quốc tế năm 1971 sác chất hướng thần như: MDA, MDE, MDEA, PMA, MMDA Chúng có cấu trúc hóa học tương tự sở khung Amphetamine, có tác dụng dược lý giống Đặc điểm dạng dùng: Khác với heroine chất ma túy khác chất có hiệu lực tác dụng tối đa, gây cảm giác đê mê đưa trực tiếp vào thể qua đường máu Nếu sử dụng hình thức uống chúng bị dịch tiêu hóa phân hủy làm giảm tác dụng đáng kể Vì vậy, thực tế Heroine chất ma túy khác có nguồn gốc thuốc phiện thấy sử dụng qua đường tiêm, chích hút, hít mà khơng sử dụng đường uống Các chất ATS có hiệu lực tác dụng đưa vào thể đường trực tiếp vào máu đường tiêu hóa Chính thế, ngồi hình thức sử dụng chất ma túy khác, ma túy tổng hợp sử dụng hình thức uống Trong thực tế, số trường hợp gặp chất ma túy tổng hợp ATS dạng ống tiêm hay bột để pha tiêm, hút, hít, hình thức phổ biến dạng viên nén, viên nhộng để uống với nhiều hình dáng, kích thước, màu sắc ký hiệu khác 1.2 Tình hình sử dụng ma túy tổng hợp nhóm ATS gi ới v Việt Nam 1.2.1 Trên giới Theo báo cáo UNDOC số người sử dụng ma t cho hay, tồn cầu có từ 172 đến 250 triệu người sử dụng ma tuý trái phép lần năm 16 đến 51 triệu người sử dụng duợc chất ma tuý thuộc nhóm amphetamin; 12 đến 24 triệu người sử dụng ma tuý t h ợp estasy Những số tính người lần thử qua ma tuý (có thể chưa nghiện) Cịn số người nghiện ma tuý kinh niên, UNODC ước tính vào khoảng 18 đến 38 triệu người Hằng năm có khoảng 200.000 người chết ma túy Thực tế cho thấy ma túy có ảnh hưởng xấu đến kinh tế, văn hóa tồn giới Vì v ấn đề nghiêm trọng nên ngày 26/6 hàng năm Liên Hợp Quốc chọn làm “Ngày quốc tế phòng, chống lạm dụng ma túy” [10] Methamphetamine thống lĩnh thị trường loại ma túy tổng hợp tồn cầu mở rộng Đơng Á Đông Nam Á Sử dụng methamphetamine dạng tinh thể ngày tăng khu vực thuộc Bắc Mỹ châu Âu Hiện nay, ATS chất ma túy chủ y ếu s d ụng Nhật Ngoài ra, số nguời sử dụng ATS Thụy S ĩ 8%, Đức 2,8%, Tiệp Khắc 1,6%, Brazil 5% Tại Úc 25% nam 12% nữ tuổi t 20- 24 thử dùng ATS Số lượng vụ bắt giữ ATS kể từ năm 2009 – tăng gần gấp đôi mức 144 năm 2011 2012, m ức độ cao vào năm 2013 – cho thấy thị trường ATS mở rộng nhanh chóng tồn cầu Cho đến tháng 12 năm 2014, có tổng cộng 541 lo ại ch ất kích thần (NPS) có tác động tiêu cực đến sức khỏe phát báo cáo 95 quốc gia vùng lãnh thổ - gia t ăng 20% so v ới s ố lượng 450 loại năm ngoái 1.2.2 Ở Việt Nam Tại Việt Nam, tình hình bn bán, vận chuyển ma túy ngày phức tạp Cuộc chiến chống buôn lậu ma túy diễn 30 năm qua, ngày trở lên khốc liệt Bọn tội phạm ma túy tự trang bị vũ khí quân dụng, ngày hăng, dùng phương tiện để vận chuyển ma túy vào Việt Nam hay cảnh từ Việt Nam nước khác Trong vài năm gần đây, hai tuyến biên giới Việt nam - Lào Việt - Trung lực lượng ch ức phát hi ện, b gi ữ gần 5.340 vụ (chiếm 30% tổng số vụ bị bắt giữ toàn quốc) Điều đáng lưu ý số vụ lượng ma túy tổng hợp (chủ yếu ma túy đá) bị phát hiện, bắt giữ gia tăng nhanh chóng Các hình thức vận chuyển, cất giấu tinh vi, xảo quyệt cất giấu hàng hóa, th ể, h ành lý để vận chuyển qua đường hàng không, Theo thống kê Bộ Công an, tháng đầu năm 2013, nhiều loại ma túy bị b gi ữ, có t ới 46 kg v 140 nghìn viên ma túy tổng hợp [10] Trong năm 2014, tình hình mua bán, sử dụng ma túy t h ợp, nh ất ma túy tổng hợp dạng “đá” tiếp tục gia tăng, đặc biệt gi ới tr ẻ; s ố lượng ma túy tổng hợp thu giữ năm 2014 nhiều 147,7 kg ma túy tổng hợp so với năm 2013 Nguồn ma túy tổng hợp t ại Việt Nam chủ yếu từ Trung Quốc vận chuyển qua biên giới thuộc tỉnh Qu ảng Ninh Lạng Sơn vào nội địa Bên cạnh đó, đối tượng phạm tội ti ếp t ục tìm cách sản xuất ma túy tổng hợp để tiêu thụ nội địa N ăm 2014, Lực lượng Cảnh sát điều tra tội phạm ma túy phối h ợp v ới lực lượng chức phát hiện, bắt giữ 19195 vụ với 28880 đối t ượng liên quan đến tội phạm ma túy; thu giữ 573,2 kg heroin; 19,3 kg cocain; 28,8 kg thuốc phiện; 1536 kg cần sa; 231,2 kg 165314 viên ma túy t hợp nhiều phương tiện, tài sản, vật chứng khác Một nghiên cứu thực trạng sử dụng ma túy tổng hợp th ành phố lớn cho thấy thuốc lắc (MDMA) loại ATS phổ biến thành phố, cao thành phố Hồ Chí Minh với gần 80% đối t ượng nghiên cứu báo cáo có sử dụng loại ATS Methamphetamin loại ATS sử dụng phổ biến Hà nội thành phố Hồ Chí Minh (61,00% 87.12%) Theo nhóm tuổi, loại ATS thuốc lắc hay methamphetamin sử dụng phổ biến tất nhóm tuổi (xấp xỉ từ 50% đối tượng nhóm tuổi sử dụng), sử dụng phổ biến nhóm 40 tuổi [12] Như vậy, để thực đẩy lùi ma túy việc quan trọng phải có nguồn chứng kịp thời nhằm thực thi luật pháp điều trị ngộ độc, cai nghiện Do việc xây dựng phương pháp giám định ma túy nhanh, xác cần thiết 1.3 Một số phương pháp xác định ma túy tổng hợp nhóm ATS Việc phân tích ma túy tổng hợp nhóm ATS thực nhiều phương pháp khác phương pháp sắc ký, phương pháp điện hóa, phương pháp phân tích miễn dịch học, phương pháp điện di mao quản… 1.3.1 Phương pháp điện hóa E.M.P.J Garrido cộng [15] tiến hành nghiên cứu tính chất điện hóa amphetamin (A), methamphetamin (MA), methylenedioxyamphetamin (MDA) methylenedioxymethamphetamin (MDMA) dung dịch đệm khác phương pháp vơn ampe vịng, sóng vng, xung vi phân điện cực glassy carbon khoảng pH 1,2 đến 12,2 Với MA, sóng anot xuất pH 9, Ep = +0,92V Ở pH quan sát sóng anot MDA, Ep = +1,17V Gi ới h ạn phát giới hạn định lượng MDMA sử dụng phương pháp von ampe xung vi phân tương ứng 1,2 3,7 µM Các tác gi ả định l ượng MDMA mẫu huyết tương thêm chuẩn Kết thu hiệu suất thu hồi 99,5%; 100,6%; 100,2%, độ lệch chuẩn (RSD) 1,4; 0,9; 1,1 % tương ứng với mức hàm lượng thêm chuẩn 15; 30; 45µM 1.3.2 Phương pháp ELISA Nguyên tắc: Phương pháp ELISA có nhiều dạng mà đặc điểm chung dựa kết hợp đặc hiệu kháng nguyên kháng thể, kháng thể gắn với enzyme Khi cho thêm chất thích hợp (thường nitrophenol phosphate) vào phản ứng, enzyme thủy phân chất thành chất có màu Sự xuất màu ch ứng t ỏ xảy phản ứng đặc hiệu kháng thể với kháng nguyên thông qua cường độ màu mà biết nồng độ kháng nguyên hay kháng thể cần phát Marleen Laloup cộng [24] sử dụng phương pháp để xác định amphetamin, MDMA, MDA m ẫu máu nước bọt Ph ương pháp phân tích dự đốn diện hai amphetamin MDMA/MDA (MDMA sản phẩm chuyển hóa MDA) với độ nhạy đạt 98,3% độ đặc hiệu 100% Đây kỹ thuật sàng lọc nhanh xác để xác định amphetamin, MDMA/MDA mẫu nước bọt huyết tương dương tính 1.4 Các phương pháp xử lý mẫu phẩm sinh học Hàm lượng ma túy nhóm ATS m ẫu phẩm sinh h ọc th ường nhỏ việc nghiên cứu phương pháp để xử lý làm giàu m ẫu cần thiết Hiện có phương pháp chiết xuất thuờng dùng l chi ết l ỏng – lỏng chiết pha rắn 1.4.1 Phương pháp chiết lỏng – lỏng Chiết lỏng-lỏng phương pháp chiết dựa phân bố khác chất tan hai pha không trộn lẫn vào th ường m ột pha l nước pha lại dung môi hữu không tan hịa tan nước Q trình chiết q trình chuyển chất tan từ pha nước vào pha hữu thực qua bề mặt tiếp xúc hai pha nhờ tương tác hóa học tác nhân chiết chất cần chiết [8,9] Để có kết chiết tốt, q trình chiết phải có điều kiện chiết cần thiết Điều kiện chiết chất phân tích vào pha hữu cơ: + Dung mơi chiết dịch chiết hai pha không trộn lẫn, dung mơi phải có độ tinh khiết cao, đảm bảo khơng làm nhiễm b ẩn chất phân tích; + Hệ số tách α khác tốt + Cân chiết đạt nhanh thuận nghịch, phân lớp phải rõ ràng để giải chiết tốt + Phải chọn điều kiện chiết tối ưu bao gồm pH dung dịch, nồng độ tác nhân chiết, nồng độ thuốc thử, chất phụ gia… Phương pháp chiết lỏng – lỏng áp dụng cho chất bay hơi, chất lỏng rắn với ưu điểm thiết bị đơn giản, có nhiều dung mơi tinh khiết với độ hịa tan chọn lọc tốt, hòa tan m ẫu thuận lợi phù hợp với thiết bị sắc ký 1.4.2 Phương pháp chiết pha rắn Chiết pha rắn dạng sắc ký lỏng cải tiến thành hấp th ụ pha rắn với chế khác Kỹ thuật dựa nguyên tắc s ự phân bố chất tan hai pha không tan vào [8] Hiện chiết pha rắn sử dụng phổ biến lĩnh vực phân tích cho mục đích xác định chất vô hữu cơ, kim loại phi kim ưu điểm sau: + Hiệu suất thu hồi cao + Cân chiết đạt nhanh có tính thuận nghịch + Thích hợp cho mẫu lượng nhỏ phân tích lượng vết chất + Thao tác đơn giản, dễ sử dụng, tiến hành hàng loạt + Khả làm giàu làm chất phân tích lớn Như vậy, nhận thấy có nhiều phương pháp xác định chất ma túy phương pháp đòi hỏi trang thiết bị đại, yêu cầu kỹ thuật cao Tuy nhiên, phương pháp điện di mao quản cho thấy có tiềm phương pháp điện di mao quản sử dụng detector đo độ dẫn không tiếp xúc (CE10 C4D) phương pháp phân tích với ưu điểm như: thiết bị tương đối đơn giản, chi phí thấp, hoạt động đơn giản, tự động hóa triển khai phân tích trường với lượng nhỏ mẫu hóa chất phục vụ kịp thời q trình điều tra Do đó, chúng tơi tập trung nghiên cứu quy trình phân tích m ột số chất ma túy tổng hợp ATS thiết bị điện di mao quản s d ụng detector độ dẫn không tiếp xúc, kết nối kiểu tụ điện CHƯƠNG 2: THỰC NGHIỆM 2.1 Mục tiêu nội dung nghiên cứu 2.1.1 Mục tiêu nghiên cứu Mục tiêu luận văn là: Nghiên cứu quy trình xử lý mẫu nước tiểu để phân tích số chất ma túy tổng hợp nhóm ATS (gồm: MA, MDA, MDMA, MDEA) phương pháp điện di mao quản, sử dụng detector đo độ d ẫn không tiếp xúc theo kiểu kết nối tụ điện (CE-C4D) 2.1.2 Nội dung nghiên cứu Để đạt mục tiêu đề ra, nội dung nghiên cứu cần thực bao gồm: - Tổng quan tài liệu phương pháp khác để xác định đồng 11 số hợp chất ma túy tổng hợp nhóm ATS phương pháp x lý mẫu nước tiểu - Xây dựng đường chuẩn chất phân tích - Đánh giá phương pháp phân tích (xác định LOD, LOQ, độ đúng, độ chụm) - Nghiên cứu, tối ưu quy trình chiết lỏng chiết pha rắn để xử lý làm sạch, làm giàu mẫu nước tiểu - Áp dụng phân tích số mẫu nước tiểu Viện Khoa học hình Đội giám định hóa học – Phịng kỹ thuật hình - CATP Hà Nội cung cấp - Thực phân tích đối chứng số mẫu phương pháp GC/MS Viện Khoa học hình thực 2.2 Phương pháp nghiên cứu 2.2.1 Phương pháp phân tích Phương pháp phân tích phương pháp điện di mao quản sử dụng detector độ dẫn không tiếp xúc kết nối kiểu tụ điện (CE – C 4D) Thiết bị thiết kế chế tạo Công ty 3Sanalysis (http://www.3sanalysis.vn/) sở hợp tác với nhóm nghiên cứu GS Peter Hauser (Thụy Sỹ), thiết bị có nguồn cao lên đến 20kv, thực bán tự động (hình 2.1) Hệ thiết bị triển khai nghiên cứu hoàn thiện phát triển ứng dụng Bộ mơn Hóa Phân tích, Khoa Hóa học, Trường Đại học Khoa học Tự nhiên, Đại học Quốc gia Hà Nội [1] 12 Hình 2.1 Hệ thiết bị CE-C4D (1: Hộp an toàn, 2: Bộ điều khiển cao thế, 3: Cảm biến đo độ dẫn không tiếp xúc, 4: Ống dẫn dung dịch đệm, 5: Núm điều chỉnh , 6: Bộ phận điều khiển, 7: Bình khí nén) 2.3 Hóa chất thiết bị 2.3.1 Hóa chất Tất hóa chất sử dụng thuộc loại tinh khiết phân tích v pha chế nước deion 2.3.1.1 Chất chuẩn - MA (Lipomed, hàm lượng dạng bazơ =80,2%) - MDA (Lipomed, hàm lượng dạng bazơ = 82,8%) - MDMA (Lipomed, hàm lượng dạng bazơ = 83,71%) - MDEA (Lipomed, hàm lượng dạng bazơ = 84,66%) 2.3.1.2 Hóa chất, dung môi - L- Arginine (C6H14N4O2) (Fluka, hàm lượng > 99,5%) - Axit acetic (CH3COOH), (PA, Merck, Đức) - Axit clohydric (HCl), (PA, Merck, Đức) - Axit photphoric (H3PO4) (PA, Deajung, Hàn Quốc, 85%) 13 - Natri hydroxyd (NaOH), (PA, Merck, Đức) - Methanol (CH3OH), (PA, Merck, Đức) - Etyl axetat (CH3COOC2H5), (PA, Deajung, Hàn Quốc, >99,9%) - 2-propanol (C3H8O), (PA, Deajung, Hàn Quốc, >99,8%) - Diclometan (CH2Cl2), (PA, Deajung, Hàn Quốc, 99%) 2.3.1.3 Chuẩn bị dung dịch hóa chất * Pha dung dịch chuẩn gốc Cân xác chất phân tích cân phân tích (độ xác 0,1mg): 0,0125 g MA, 0,0121 g MDA, 0,0119 g MDMA, 0,0118 g MDEA chuyển vào bình định mức 10,0 mL, thêm mL Methanol v đem rung siêu âm 30 phút sau định mức đến vạch nước deion ta dung dịch chuẩn gốc 1000ppm Các dung dịch chuẩn nồng độ nhỏ pha lỗng nước deion theo tỉ lệ thích hợp từ dung dịch chuẩn gốc 1000 ppm tr ước phân tích * Pha dung dịch đệm điện di Dung dịch pha động điện di kết hợp Arginine axit acetic pha sau: Cân xác 0,0435g Arginine chuyển vào cốc có mỏ 50,0 mL rung siêu âm phút cho tan hết sau thêm t t axit axetic v đến pH dung dịch 4.5 (sử dụng máy đo pH) Dung dịch đệm pha hàng ngày 14 CHƯƠNG 3: KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN Phương pháp (CE-C4D) sử dụng để nghiên cứu tách xác định đồng thời số chất ma túy tổng hợp nhóm ATS [29] v b ước đầu đạt số kết điều kiện tối ưu phân tích chất ma túy MA, MDA, MDMA MDEA Tuy nhiên, mẫu nước tiểu phức tạp hàm lượng chất phân tích nước tiểu thường nhỏ nên việc xử lý mẫu cần thiết Trong nghiên cứu này, tập trung vào quy trình xử lý mẫu nước tiểu sở kỹ thuật chiết lỏng - lỏng chiết pha rắn nhằm nâng cao hiệu phân tích bốn chất ma túy nhóm ATS nêu phương pháp CE-C 4D Các nội dung nghiên cứu cụ thể bao gồm: xây dựng đánh giá lại đường chuẩn, giá trị LOD, LOQ thời điểm nghiên cứu; khảo sát điều kiện tối ưu xử lý mẫu nước tiểu sở kỹ thuật lỏng -lỏng chiết pha rắn (SPE) nhằm nâng cao hiệu phân tích; áp dụng phân tích số mẫu thực tế tiến hành đối chứng với phương pháp truyền thống (GC-MS) Viện Khoa học Hình thực 3.1 Xây dựng đường chuẩn chất phân tích 3.1.1 Xây dựng đường chuẩn Các dung dịch sử dụng để lập đường chuẩn có nồng độ khoảng 5÷120 với MA 10÷140ppm với MDA, MDAM, MDEA pha loãng từ dung dịch chuẩn gốc ban đầu Mỗi dung dịch bơm lần thực trình điện di thiết bị điện di mao quản sử dụng detector độ dẫn không tiếp xúc với điều kiện tối ưu sau: - Mao quản silica đường kính ID = 50 µm, tổng chiều dài: 60cm (chiều dài hiệu dụng 53cm) - Phương pháp bơm mẫu: Thủy động lực học kiểu xiphông độ cao 10 cm - Thời gian bơm mẫu: 45 s 15 - Dung dịch đệm điện di: Arg/Ace (10 mM) pH = 4,5 - Thế tách: 10 kV - Giá trị diện tích pic trung bình kết sử dụng để lập đường chuẩn Bảng 3.1 Phương trình hồi quy chất phân tích Chất phân Hệ số tương quan Phương trình hồi quy tích MA y (-0,9818±2,0367) + R2 0,9994 MDA (2,0003±0,0564)x y = (-0,9677±1,8107) + 0,9995 MDMA (1,0187±0,0251)x y = (-1,2708±2,0969) + 0,9989 MDEA (1,3137±0,0290)x y = (-0,8904±3,7057) + 0,9996 = (1,3182±0,0513)x Từ kết cho thấy hệ số tương quan R2 chất phân tích lớn 0,99 đồng thời giá trị P value 0,998 Giới hạn phát giới hạn định lượng MA 0,5 ppm 1,7 ppm, chất MDA, MDMA, MDEA 2,5 ppm 8,3 ppm Các giá tr ị CV % nh ỏ h ơn 3% nằm giới hạn cho phép - Tối ưu quy trình xử lý mẫu chiết lỏng – lỏng chiết pha rắn Phương pháp xử lý mẫu cho độ thu hồi chất nằm khoảng 95,5 ÷ 102,0 % Với quy trình này, giới hạn phát v gi ới h ạn định lượng mẫu nước tiểu đạt MA l 10 ppb v 23 34 ppb; chất MDA, MDMA, MDEA l 50 ppb v 166 ppb cho th phương pháp áp dụng phân tích mẫu thực tế - Phân tích 20 mẫu nước tiểu Viện Khoa học hình s ự v Đội giám định hóa học - Phịng kỹ thuật hình - CATP H Nội cung cấp K ết phân tích cho thấy hàm lượng MA m ẫu nước tiểu nằm khoảng từ 0,3 - 42,4 ppm - Đã tiến hành phân tích đối chứng 10 mẫu nước tiểu xác định hàm lượng MA phương pháp GC-MS Viện Khoa học hình s ự K ết qu ả cho thấy sai số phương pháp CE-C4D GC-MS dao động khoảng 1,97% - 14,4%, nằm khoảng sai số cho phép với cỡ hàm lượng ppm Điều cho thấy phương pháp CE-C4D đáng tin cậy Từ kết thu cho thấy phương pháp điện di mao quản tích hợp detector đo độ dẫn không tiếp xúc (CE - C4D ) phù hợp với vi ệc xác định đồng thời hàm lượng chất MA, MDA, MDMA, MDEA mẫu nước tiểu 24