LÝ THUYẾT PHƯƠNG PHÁP đo QUANG (THỰC tập y tế CÔNG CỘNG)

LÝ THUYẾT PP ĐO QUANG NỘI DUNG Đại cương Cơ sở lý thuyết Kỹ thuật đo độ hấp thu dd Ứng dụng pp UV-Vis Thiết bị đo Bài tập ĐẠI CƯƠNG Định nghĩa:  PP hấp thu phân tử UV-VIS pp hấp thu quang học dựa tương tác chọn lọc chất cần xác định với lượng xạ thuộc vùng UV-VIS Hay: Chất cần xác định nước phản ứng với hóa chất để tạo màu sản phẩm Chất xuất tạo màu hấp thu bước sóng định vùng quang phổ ánh sáng trắng Máy quang phổ đo bước sóng bị ảnh hưởng nhiều mẫu màu Máy quang phổ đo cường độ ánh sáng bước sóng trước sau cuvette chứa mẫu Dữ liệu phương pháp lưu trữ máy tính dùng để tính tốn, hiển thị lập tài liệu nồng độ ĐẠI CƯƠNG Đặc trưng lượng miền phổ  Ánh sáng xạ điện từ có bước sóng khác hay dịng photon có lượng khác E = hν = h Trong đó: c λ - E: Năng lượng tính eV, kcal/mol - H: số Planck, h=6,62.10-34J.s - c: vận tốc ánh sáng chân không, c=3.108m/s − ν: tần số − λ: bước sóng ĐẠI CƯƠNG Đặc trưng lượng miền phổ  Trong quang phổ học: ánh sáng khả kiến, tia hồng ngoại, tia tử ngoại, tia Rơnghen, sóng radio gọi chung xạ Bước sóng số vùng phổ: Vùng phổ Bước sóng, nm Tử ngoại xa 100-190 Tử ngoại 190-400 Khả kiến 400-800 Hồng ngoại gần 800-2.500 Hồng ngoại 2.500-25.000 Mắt người cảm nhận vùng phổ điện từ nhỏ gọi vùng nhìn thấy (khả kiến) bao gồm xạ có bước sóng từ 396–760 nm ĐẠI CƯƠNG Đặc trưng lượng miền phổ Ánh sáng nhìn thấy bao gồm tất dải xạ có bước sóng từ 396-760 nm có màu trắng Khi cho ánh sáng trắng chiếu qua lăng kính, bị phân tích thành số tia màu (đỏ, da cam, vàng, lục, lam, chàm, tím) Mỗi tia màu ứng với khoảng bước sóng hẹp hơn.  Một chất hấp thụ hồn tồn tất tia ánh sáng thì ta thấy chất có màu đen Nếu hấp thụ xảy khoảng vùng khả kiến xạ khoảng cịn lại đến mắt ta gây cho ta cảm giác màu VD: chất hấp thụ tia màu đỏ (λ= 610–750ηm) ánh sáng cịn lại gây cho ta cảm giác màu lục (ta thấy chất có màu lục) Ngược lại, chất hấp thụ tia màu lục mắt ta có màu đỏ. Người ta gọi màu đỏ màu lục hai màu phụ nhau.  ĐẠI CƯƠNG Đặc trưng lượng miền phổ Liên hệ tia bị hấp thu màu sắc chất hấp thu Tia bị hấp thu λ (nm) Màu Tia lại (Màu chất hấp thu) 400 - 430 Tím Vàng lục 430 - 490 Xanh (chàm) Vàng cam 490 - 510 Lục (chàm) Đỏ 510 - 530 Lục Đỏ tía 530 - 560 Lục vàng Tím 560 - 590 Vàng Chàm 590 - 610 Da cam Chàm lục 610 – 750 Đỏ Lục ĐẠI CƯƠNG Sự tương tác vật chất xạ điện từ Ở điều kiện bình thường, phân tử mức lượng thấp, gọi trạng thái Khi chiếu xạ điện từ vào môi trường vật chất, xảy tượng các phân tử vật chất hấp thụ phát xạ lượng, hay gọi trạng thái kích thích Năng lượng mà phân tử phát hay hấp thụ vào là: - E1, E2: lượng phân tử trạng thái đầu trạng thái cuối - ν: tần số xạ điện từ bị hấp thụ hay phát xạ + ∆E > 0: hấp thụ xạ điện từ + ∆E