Đang tải... (xem toàn văn)
Trắc nghiệm, bài giảng pptx các môn chuyên ngành Y dược hay nhất có tại “tài liệu ngành Y dược hay nhất”; https://123doc.net/users/home/user_home.php?use_id=7046916. Slide kiểm nghiệm seminar về sắc ký hiện đại ppt dành cho sinh viên ngành Y dược. Trong bộ sưu tập có trắc nghiệm kèm đáp án chi tiết các môn, giúp sinh viên tự ôn tập và học tập tốt môn kiểm nghiệm seminar về sắc ký hiện đại bậc cao đẳng đại học ngành Y dược và các ngành khác
PHÁT TRIỂN VÀ THẨM ĐỊNH PHƯƠNG PHÁP UPLC – MS/MS TRONG PHÁT HIỆN ĐỒNG THỜI FOTAGLIPTIN VÀ HAI CHẤT CHUYỂN HÓA CỦA NÓ TRONG HUYẾT TƯƠNG VÀ NƯỚC TIỂU Tác giả: Zhenlei Wang, Ji Jiang, Pei Hu & Qian Zhao 10.4155/bio-2016-0243 Nội dung thuyết trình TỔNG QUAN TỔNG QUAN 1.1 Fotagliptin • Fotagliptin thuốc dùng điều trị đái tháo đường týp II • Thuộc nhóm chất ức chế dipeptidyl peptidase IV (DPP-4) • Đang phát triển lâm sàng Trùng Khánh Fhol Pharma C 17 H 19 FN O TỔNG QUAN 1.2 Chất chuyển hóa fotagliptin • Hai chất chuyển hóa M1 M2-1 • Nồng độ hai chất chuyển hóa huyết tương lớn nồng độ fotagliptin chuột chó • Cần định lượng chất chuyển hóa để biết rõ dược động học đặc tính tiết fotagliptin Sử dụng phương pháp UPLC-MS/MS để định lượng fotagliptin chất chuyển hóa huyết tương nước tiểu THÍ NGHIỆM THÍ NGHIỆM 2.1 Vật liệu thuốc thử Vật liệu – Hóa chất Nguồn cung cấp Chất chuẩn bao gồm: fotagliptin, chất chuyển hóa M1 M2-1, chất nội chuẩn Cơng ty Dược Shenzhen Salubris (Trung Quốc) Acetonitril metanol loại HPLC Honeywell Burdick & Jackson (Mỹ) Acid formic acid trifluoroacetic Sigma Aldrich (Mỹ) Dung dịch amoniac amoni acetat Sinopharm (Trung Quốc) Nước khử ion Hệ thống Millipore’s Milli-Q (Mỹ) Huyết tương nước tiểu người khơng chứa thuốc tình nguyện viên khỏe mạnh không dùng thuốc tuần THÍ NGHIỆM 2.2 Thiết bị • Các mẫu phân tích hệ thống UPLC-MS/MS • Hệ thống Acquity UPLC-MS/MS (Waters Co., MA, USA) bao gồm: - Bộ lấy mẫu tự động - Lò cột - Hệ thống quản lí dung mơi dịng - Dữ liệu có máy khối phổ tứ cực API 5500 (Applied Biosystems, CA, USA) - Phần mềm phân tích v1.4.2 THÍ NGHIỆM 2.3 Điều kiện sắc ký lỏng khối phổ THÍ NGHIỆM 2.3 Điều kiện sắc ký lỏng khối phổ • Q trình rửa giải: Mẫu trắng huyết tương (E) LLOQ (F) M1 Mẫu trắng huyết tương (G) LLOQ (H) M2-1 • Mẫu trắng nước tiểu (A) LLOQ (B) Fotagliptin • Mẫu trắng nước tiểu (C) LLOQ (D) IS • Mẫu trắng nước tiểu (E) LLOQ (F) M1 • Mẫu trắng nước tiểu (G) LLOQ (H) M2-1 KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN 3.2 Thẩm định Phương pháp Độ – Độ xác Phương pháp có độ đúng, độ xác độ tái lập đạt yêu cầu KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN 3.2 Thẩm định Phương pháp Độ phục hồi – Hiệu ứng Độ phục hồi mẫu huyết tương: Hiệu chiết tách không phụ thuộc nồng độ đạt yêu cầu cho phân tích định lượng Hiệu ứng nền: Phương pháp phân tích khơng bị ảnh hưởng chất nội sinh huyết tương nước tiểu KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN 3.2 Thẩm định Phương pháp Độ ổn định 15 °C – 24h Nhiệt độ phòng – 6h -30 °C – ngày Ba chu kỳ đóng băng -80 °C – 10 tháng KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN 3.2 Thẩm định Phương pháp Độ ổn định 15 °C – 36h Nhiệt độ phòng – 6h -30 °C – ngày Ba chu kỳ đóng băng -80 °C – tháng KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN 3.2 Thẩm định Phương pháp Độ ổn định Độ xác – Độ độ tin cậy pha lỗng: • Trong huyết tương: 0.9/ 0.7/ 1.8% – 95.7/ 100.3/ 109.7% • Trong nước tiểu: 1.2/ 3.0/ 3.4% – 96.5/ 102.2/ 93.4% (tương ứng Fotagliptin/M1/M2-1) Các mẫu ULOQ pha loãng 10 lần (huyết tương) 50 lần (nước tiểu) khơng ảnh hưởng đến độ xác độ phương pháp KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN 3.3 Áp dụng Phương pháp Phát triển áp dụng thành công nghiên cứu người Fotagliptin benzoate • Mục đích: Nghiên cứu DĐH huyết tương – nước tiểu Fotagliptin, M1 M2-1 • Đối tượng: 56 người Trung Quốc khỏe mạnh • Mơ hình: Nghiên cứu đơn liều ngẫu nhiên, mù đơi, kiểm sốt giả dược leo thang liều • Phê duyệt: Ủy ban Đạo đức Bệnh viện Đại học Y Liên minh Bắc Kinh • Số lượng mẫu: 840 mẫu huyết tương, 390 mẫu nước tiểu 25 đợt Không gặp phải vấn đề đáng kể suốt thời gian phân tích, chứng minh hữu hiệu phương pháp KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN 3.3 Áp dụng Phương pháp • Đường cong nồng độ trung bình huyết tương theo thời gian cho liều 12.5 mg Fotagliptin benzoate (viên nang) • Đường cong tỷ lệ thuốc tiết dạng không đổi qua nước tiểu theo thời gian cho liều 12.5 mg Fotagliptin benzoate (viên nang) KẾT LUẬN – TẦM NHÌN TƯƠNG LAI KẾT LUẬN – TẦM NHÌN TƯƠNG LAI 4.1 Kết luận • Phương pháp lần phát triển thẩm định • Quy trình thẩm định hoàn toàn theo hướng dẫn FDA Hoa Kỳ, EMA FDA Trung Quốc KẾT LUẬN – TẦM NHÌN TƯƠNG LAI 4.2 Tầm nhìn tương lai CÁM ƠN THẦY VÀ CÁC BẠN ĐÃ CHÚ Ý LẮNG NGHE ... TỔNG QUAN 1.2 Chất chuyển hóa fotagliptin • Hai chất chuyển hóa M1 M2-1 • Nồng độ hai chất chuyển hóa huyết tương lớn nồng độ fotagliptin chuột chó • Cần định lượng chất chuyển hóa để biết rõ... tiết fotagliptin Sử dụng phương pháp UPLC- MS/MS để định lượng fotagliptin chất chuyển hóa huyết tương nước tiểu THÍ NGHIỆM THÍ NGHIỆM 2.1 Vật liệu thuốc thử Vật liệu – Hóa chất Nguồn cung cấp Chất. .. – 10 tháng KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN 3.2 Thẩm định Phương pháp Độ ổn định 15 °C – 36h Nhiệt độ phòng – 6h -30 °C – ngày Ba chu kỳ đóng băng -80 °C – tháng KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN 3.2 Thẩm định Phương pháp