Nghiên cứu sản xuất β glucan thô từ tế bào nấm men saccharomyces cerevisiae

BỘ GIÁO DỤC ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC NHA TRANG ĐỖ THỊ ÁNH HỊA NGHIÊN CỨU SẢN XUẤT β-GLUCAN THƠ TỪ TẾ BÀO NẤM MEN SACCHAROMYCES CEREVISIAE LUẬN VĂN THẠC SĨ KHÁNH HÒA - 2018 iii BỘ GIÁO DỤC ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC NHA TRANG ĐỖ THỊ ÁNH HÒA NGHIÊN CỨU SẢN XUẤT β-GLUCAN THÔ TỪ TẾ BÀO NẤM MEN SACCHAROMYCES CEREVISIAE LUẬN VĂN THẠC SĨ Ngành: Công nghệ Thực phẩm Mã số: 8540101 Quyết định giao đề tài: 781/QĐ-ĐHNT ngày 6/7/2018 Quyết định thành lập HĐ: 1514/QĐ-ĐHNT ngày 20/12/2018 Ngày bảo vệ: 12/1/2019 Người hướng dẫn khoa học: TS NCVC NGUYỄN DUY NHỨT Chủ tịch Hội đồng: PGS.TS VŨ NGỌC BỘI Phịng ĐT Sau Đại học: KHÁNH HỊA - 2018 KHÁNH HÒA - 2018 iv LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan kết đề tài: “ Nghiên cứu sản xuất β-glucan thô từ tế bào nấm men Saccharomyces cerevisiae” cơng trình nghiên cứu cá nhân, hoàn thành tài trợ đề tài “Nghiên cứu quy trình cơng nghệ tổng hợp sulfate β-glucan từ men bánh mì nhằm tạo nguồn nguyên liệu hỗ trợ điều trị ung thư” - VAST 04 04/17 – 18 chưa công bố cơng trình khoa học khác Khánh Hịa, ngày 22 tháng 10 năm 2018 Tác giả luận văn Đỗ Thị Ánh Hòa v LỜI CẢM ƠN Trước hết, xin chân thành cảm ơn tới Ban Giám Hiệu Trường Đại học Nha Trang, Phòng Đào tạo Sau Đại học tạo điều kiện thuận lợi cho thực luận văn Tơi xin bày tỏ lịng biết ơn sâu sắc tới TS NCVC Nguyễn Duy Nhứt (Giám đốc Trung tâm Ứng dụng Công nghệ - Viện Nghiên cứu Ứng dụng Công nghệ Nha Trang) tài trợ kinh phí tận tình hướng dẫn tơi suốt q trình hồn thành luận văn Tơi xin chân thành cảm ơn tới PGS TS Vũ Ngọc Bội, thầy cô Khoa Công nghệ Thực phẩm, cán quản lý Phịng thí nghiệm, Trung tâm Thí nghiệm Thực hành, Trường Đại học Nha Trang thầy cô Viện Nghiên cứu Ứng dụng Công nghệ Nha Trang giúp đỡ, tạo điều kiện thuận lợi cho tôi, giúp đỡ suốt thời gian học tập thực luận văn Cuối cùng, xin chân thành cảm ơn gia đình, người thân bạn bè nhiệt tình động viên, giúp đỡ tơi q trình học tập hồn thiện luận văn Tơi xin chân thành cảm ơn! Khánh Hịa, ngày 22 tháng 10 năm 2018 Tác giả luận văn Đỗ Thị Ánh Hòa vi MỤC LỤC LỜI CAM ĐOAN iii LỜI CẢM ƠN .vi MỤC LỤC vii DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT x DANH MỤC BẢNG xi DANH MỤC HÌNH xii TRÍCH YẾU LUẬN VĂN xiv MỞ ĐẦU 1 Tính cấp thiết đề tài Mục tiêu đề tài 3 Nội dung nghiên cứu Ý nghĩa khoa học ý nghĩa thực tiễn đề tài nghiên cứu 4.1 Ý nghĩa khoa học 4.2 Ý nghĩa thực tiễn CHƯƠNG TỔNG QUAN 1.1 TỔNG QUAN NẤM MEN 1.1.1 Hình thái kích thước tế bào nấm men 1.1.2 Cấu tạo tế bào nấm men .4 1.1.3 Phân loại nấm men .7 1.1.4 Men bánh mì .9 1.2 TỔNG QUAN BETA - GLUCAN 13 1.2.1 Giới thiệu glucan 13 1.2.2 Cấu trúc beta – glucan 13 1.2.3 Tính chất β-glucan 15 1.2.4 Nguồn nguyên liệu chứa beta – glucan 15 1.2.5 Tác dụng β-glucan 16 1.2.7 Ứng dụng β-glucan 17 1.2.8 Các phương pháp phá vỡ tế bào nấm men 20 1.2.9 Phương pháp thủy phân thành tế bào nấm men 23 1.3 TÌNH HÌNH NGHIÊN CỨU TRONG VÀ NGỒI NƯỚC 24 vii 1.3.1 Tình hình nghiên cứu nước 24 1.3.2 Tình hình nghiên cứu nước 25 CHƯƠNG ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 27 2.1 VẬT LIỆU, HÓA CHẤT, THIẾT BỊ VÀ DỤNG CỤ NGHIÊN CỨU 27 2.1.1 Vật liệu nghiên cứu 27 2.1.2 Hóa chất, thiết bị dụng cụ nghiên cứu 27 2.2 PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 28 2.2.1 Quy trình lên men thu nhận sinh khối Sacchcharomyces cerevisiae 28 2.2.2 Nghiên cứu thu nhận β-glucan thô từ sinh khối nấm men theo phương pháp tự phân 30 2.2.3 Nghiên cứu quy trình thu nhận β-glucan thơ theo phương pháp hóa học 39 2.2.4 Bố trí thí nghiệm tối ưu hóa điều kiện thủy phân thành tế bào nấm men phương pháp bề mặt đáp ứng 48 2.2.5 Nghiên cứu sử dụng chất lỏng ion để điều chế beta-glucan tinh từ nấm men Saccharomyces cerevisiae 52 2.3 PHƯƠNG PHÁP PHÂN TÍCH 52 2.3.1 Xác định lượng thành tế bào nấm men thu sau trình tự phân xử lý hóa học 52 2.3.2 Xác định hiệu suất khử protein 52 2.3.3 Xác định hàm lượng tổng carbohydrate 52 2.3.4 Xác định hàm lượng protein tổng số 53 2.3.5 Xác định β-glucan thô phương pháp phổ hồng ngoại (FT – IR) 53 2.3.6 Xác định cấu trúc β-glucan phương pháp phổ cộng hưởng từ hạt nhân NMR 53 2.3.7 Xác định hàm lượng đường glucose 53 2.3.8 Xác định tiêu vi sinh 53 2.4 PHƯƠNG PHÁP XỬ LÝ SỐ LIỆU 54 CHƯƠNG KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ THẢO LUẬN 55 3.1 LÊN MEN VÀ THU NHẬN SINH KHỐI S CEREVISIAE 55 3.2 NGHIÊN CỨU THU NHẬN β-GLUCAN THÔ TỪ THÀNH TẾ BÀO NẤM MEN THEO PHƯƠNG PHÁP TỰ PHÂN 56 3.2.1 Nghiên cứu tách thành tế bào từ sinh khối nấm men S cerevisiae theo phương pháp tự phân 56 viii 3.2.2 Nghiên cứu thu nhận β-glucan thô từ thành tế bào nấm men theo phương pháp tự phân 57 3.3 NGHIÊN CỨU THU NHẬN β-GLUCAN THÔ TỪ THÀNH TẾ BÀO NẤM MEN THEO PHƯƠNG PHÁP HÓA HỌC 69 3.3.1 Nghiên cứu tách thành tế bào từ sinh khối nấm men S cerevisiae theo phương pháp hóa học 69 3.3.2 Nghiên cứu thu nhận β-glucan thô từ thành tế bào nấm men theo phương pháp hóa học 71 3.4 TỐI ƯU HÓA ĐIỀU KIỆN THỦY PHÂN THÀNH TẾ BÀO BẰNG PHƯƠNG PHÁP BỀ MẶT ĐÁP ỨNG 83 3.5 ĐỀ XUẤT QUY TRÌNH THU NHẬN β-GLUCAN THÔ TỪ THÀNH TẾ BÀO NẤM MEN S CEREVISIAE THEO PHƯƠNG PHÁP TỰ PHÂ 87 3.6 SẢN XUẤT THỬ VÀ ĐÁNH GIÁ CHẤT LƯỢNG BETA-GLUCAN THÔ 89 3.7 SỬ DỤNG CHẤT LỎNG ION ĐỂ ĐIỀU CHẾ BETA-GLUCAN TINH SẠCH TỪ NẤM MEN SACCHAROMYCES CERRVISIAE 92 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 95 TÀI LIỆU THAM KHẢO 97 TIẾNG VIỆT 97 TIẾNG ANH 98 PHỤ LỤC ix DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT MSDS Material Safety Data Sheet FDA Food and Drug Administration DMSO Dimethyl sulfoxide TNM Thành tế bào nấm men PT Protein thô TC Tổng carbohydrate TCVN Tiêu chuẩn Việt Nam β-glucan Beta-glucan NL Nguyên liệu TN Thí nghiệm PA Phương án DD Dung dịch RSM Phương pháp bề mặt đáp ứng KPH Không phát x DANH MỤC BẢNG Bảng 1 Các β-glucan có hoạt tính sinh học thường dùng 14 Bảng 1.2 Các thành phần thành tế bào Saccharomyces cerevisiae 15 Bảng 1.3 Ứng dụng β-glucan thực phẩm 17 Bảng 2.1 Điều kiện thí nghiệm chọn – M1 50 Bảng 2.2 Ma trận quy hoạch thực nghiệm theo phương pháp quy hoạch trực giao bậc 2, hai yếu tố (phương án cấu trúc có tâm) với biến thực biến mã hóa (M1) 50 Bảng 3.1 Kết lên men thu nhận sinh khối nấm men 55 Bảng 3.2 Kết tách thành tế bào từ tế bào nấm men theo phương pháp tự phân 56 Bảng 3.3 Hàm lượng protein thô hàm lượng tổng carbohydrate sinh khối nấm men thành tế bào nấm men theo phương pháp tự phân 57 Bảng 3.4 Kết tách thành tế bào từ tế bào nấm men theo phương pháp hóa học 70 Bảng 3.5 Hàm lượng protein thô hàm lượng tổng carbohydrate sinh khối nấm men thành tế bào nấm men theo phương pháp hóa học 70 Bảng 3.6 Thơng số q trình thuỷ phân, hàm lượng PT TC mẫu M1 M2 83 Bảng 3.7 Ma trận quy hoạch thực nghiệm theo phương pháp quy hoạch 85 Bảng 3.8 Ảnh hưởng biến độc lập đến hàm lượng carbohydrate 85 Bảng 3.9 Hàm lượng carbohydrate β-glucan thô theo hồi quy theo thực nghiệm 87 Bảng 10 Kết phân tích hóa học mẫu β-glucan thơ 90 Bảng 3.11 Kết phân tích tiêu vi sinh mẫu β-glucan thô 90 Bảng 3.12 Hàm lượng beta-glucan sản phẩm mẫu V1 V2 94 xi DANH MỤC HÌNH Hình 1.1 Hình dạng nấm men Hình 1.2 Cấu tạo tế bào nấm men Hình 1.3 Cấu trúc thành tế bào nấm men Hình 1.4 Nấm men Saccharomyces cerevisiae 12 Hình 1.5 Men khơ màu men tươi Five stars – Cty liên doanh SAF – VIỆT 13 Hình Cấu trúc không gian β-glucan 15 Hình 2.1 Men bánh mì cơng ty Saf-Viet® 27 Hình 2.2 Quy trình lên men thu nhận sinh khối Sacchcharomyces cerevisiae 29 Hình 2.3 Sơ đồ bố trí thí nghiệm thu nhận β-glucan thơ theo phương pháp tự phân 31 Hình 2.4 Sơ đồ bố trí thí nghiệm xác định ảnh hưởng NaOH đến hàm lượng protein thô tổng carbohydrate – M1 34 Hình 2.5 Sơ đồ bố trí thí nghiệm xác định ảnh hưởng tỷ lệ nguyên liệu/ dung dịch NaOH đến hàm lượng protein thô tổng carbohydrate – M1 35 Hình 2.6 Sơ đồ bố trí thí nghiệm xác định ảnh hưởng nhiệt độ đến hàm lượng protein thô tổng carbohydrate – M1 37 Hình 2.7 Sơ đồ bố trí thí nghiệm xác định ảnh hưởng thời gian đến hàm lượng protein thô tổng carbohydrate – M1 38 Hình 2.8 Quy trình thu nhận β-glucan thơ theo phương pháp hóa học 40 Hình 2.9 Sơ đồ bố trí thí nghiệm xác định ảnh hưởng NaOH đến hàm lượng protein thô tổng carbohydrate – M2 43 Hình 2.10 Sơ đồ bố trí thí nghiệm xác định ảnh hưởng tỷ lệ nguyên liệu/ dung dịch NaOH đến hàm lượng protein thô tổng carbohydrate – M2 44 Hình 2.11 Sơ đồ bố trí thí nghiệm xác định ảnh hưởng nhiệt độ đến hàm lượng protein thô tổng carbohydrate – M2 46 Hình 2.12 Sơ đồ bố trí thí nghiệm xác định ảnh hưởng thời gian đến hàm lượng protein thô tổng carbohydrate – M2 47 Hình 2.13 Sơ đồ bố trí thí nghiệm tối ứu hóa theo phương pháp bề mặt đáp ứng 51 Hình 3.1 Ảnh hưởng nồng độ NaOH đến hàm lượng protein thơ β-glucan thơ 58 Hình 3.2 Ảnh hưởng nồng độ NaOH đến hàm lượng carbohydrate β-glucan thơ 58 Hình 3.3 Ảnh hưởng tỷ lệ thành tế bào nấm men/ dung dịch NaOH đến hàm lượng protein thô β-glucan thô 61 Hình 3.4 Ảnh hưởng tỷ lệ thành tế bào nấm men/ dung dịch NaOH đến hàm lượng carbohydrate β-glucan thô 61 Hình 3.5 Ảnh hưởng nhiệt độ đến hàm lượng protein thô β-glucan thô 64 Hình 3.6 Ảnh hưởng nhiệt độ đến hàm lượng carbohydrate β-glucan thô 64 xii Bảng P 2.1.6 Ảnh hưởng nhiệt độ đến hàm lượng tổng carbohydrate (TC) β-glucan thô Nhiệt độ (M) 80 85 90 95 100 Lần 3 3 3 Hàm lượng carbohydrate (%) 17.23 17.82 18.92 20.55 18.55 20.3 23.32 23.88 25.7 34.12 33.96 35.42 41.18 40.96 42.12 19.3 21.02 20.45 GTTB 17.99 ± 0.86a 19.80 ± 1.09b 24.30 ± 1.24c 34.50 ± 0.80d 41.42 ± 0.62e 20.26 ± 0.88b 2.1.4 Xác định thời gian thích hợp cho q trình khử protein Bảng P 2.1.7 Ảnh hưởng thời gian đến hàm lượng protein thô β-glucan thô Thời gian (giờ) 1.0 1.5 2.0 Lần Hàm lượng protein thô (%) 32.16 35.48 33.25 5.81 6.04 6.67 3.92 3.33 3.85 1.52 1.71 1.77 GTTB 33.63 ± 1.69a 6.17 ± 0.45b 3.70 ± 0.32c 1.67 ± 0.13d Thời gian (giờ) 2.5 3.0 Lần Hàm lượng protein thô (%) 1.48 1.33 1.68 1.22 1.58 1.31 GTTB 1.50 ± 0.18d 1.37 ± 0.19d Bảng P 2.1.8 Ảnh hưởng thời gian đến hàm lượng tổng carbohydrate βglucan thô Thời gian (giờ) 1.0 1.5 2.0 2.5 3.0 Lần Hàm lượng carbohydrate (%) 17.23 18.01 18.92 21.93 23.31 21.58 23.98 25.08 26.22 41.18 40.96 42.12 29.55 30.05 28.5 25.78 25.32 23.86 GTTB 18.05 ± 0.85a 22.27 ± 0.91b 25.09 ± 1.12c 41.42 ± 0.62d 29.37 ± 0.79e 24.99 ±1.00c 2.2 Thu nhận β-glucan thô từ thành tế bào nấm men theo phương pháp hóa học 2.2.1 Xác định nồng độ NaOH thích hợp cho trình khử protein Bảng P 2.2.1 Ảnh hưởng nồng độ NaOH đến hàm lượng protein thô β-glucan thô Nồng độ NaOH (M) 0.25 0.5 0.75 1.0 1.25 1.5 Lần Hàm lượng protein thô (%) 9.45 9.01 9.63 3.75 4.18 3.56 4.43 3.72 4.36 4.75 4.72 5.02 6.22 5.85 5.92 5.11 5.73 6.15 5.62 5.25 5.72 GTTB 9.36 ± 0.32a 3.83 ± 0.32b 4.17 ± 0.39bc 4.83 ± 0.17c 6.00 ± 0.20d 5.66 ± 0.52d 5.53 ± 0.25d Bảng P 2.2.2 Ảnh hưởng nồng độ NaOH đến hàm lượng tổng carbohydrate β-glucan thô Nồng độ NaOH (M) 0.25 Lần 3 Hàm lượng carbohydrate (%) 23.69 23.43 25.68 47.72 45.89 46.98 GTTB 24.27 ± 1.23a 46.86 ± 0.92b Nồng độ NaOH (M) 0.5 0.75 1.0 1.25 1.5 Lần 3 3 Hàm lượng carbohydrate (%) 39.31 40.12 41.62 35.22 36.05 37.66 30.82 31.96 32.96 27.18 26.92 24.87 17.05 14.17 15.1 GTTB 40.35 ± 1.17c 36.31 ± 1.24d 31.91 ± 1.07e 26.32 ± 1.27f 15.44 ± 1.47g 2.2.2 Xác định tỷ lệ nguyên liệu/ NaOH thích hợp cho trình khử protein Bảng P 2.2.3 Ảnh hưởng tỷ lệ nguyên liệu/ dung dịch NaOH đến hàm lượng protein thô β-glucan thô Tỷ lệ nguyên liệu/ dung dịch NaOH (g/ml) 1/20 2/20 3/20 4/20 Lần Hàm lượng protein thô (%) 3.62 3.48 3.8 3.75 4.11 3.62 4.18 4.26 3.96 4.28 4.72 4.42 GTTB 3.63 ± 0.16a 3.83 ± 0.25ab 4.13 ± 0.16bc 4.47 ± 0.22c Bảng P 2.2.4 Ảnh hưởng tỷ lệ nguyên liệu/ dung dịch NaOH đến hàm lượng tổng carbohydrate β-glucan thô Tỷ lệ nguyên liệu/ dung dịch NaOH (g/ml) Lần Hàm lượng carbohydrate (%) 28.12 30.05 27.98 47.72 45.89 46.98 38.04 36.02 35.22 32.2 34.1 33.7 1/20 2/20 3/20 4/20 GTTB 28.72 ± 1.16a 46.86 ± 0.92b 36.43 ± 1.45c 33.33 ± 1.00d 2.2.3 Xác định nhiệt độ thích hợp cho q trình khử protein Bảng P 2.2.5 Ảnh hưởng nhiệt độ đến hàm lượng protein thô β-glucan thô Nhiệt độ (M) 80 85 90 95 Lần 3 3 Hàm lượng protein thô (%) 17.65 16.58 16.42 5.82 5.16 6.13 4.96 4.32 5.11 3.75 4.11 3.62 4.02 3.89 3.52 GTTB 16.11 ± 0.67a 5.70 ± 0.50b 4.80 ± 0.42c 3.83 ± 0.25d 3.81 ± 0.26d Nhiệt độ (M) Lần Hàm lượng protein thô (%) GTTB 2.72 100 3.12 3.03 ± 0.28e 3.26 Bảng P 2.2.6 Ảnh hưởng nhiệt độ đến hàm lượng tổng carbohydrate β-glucan thô Nhiệt độ (M) 80 85 90 95 100 Lần 3 3 3 Hàm lượng carbohydrate (%) 25.12 26.12 23.11 31.18 30.91 28.95 30.16 32.88 31.42 47.72 45.89 46.98 40.58 39.03 38.18 36.91 35.41 34.82 GTTB 24.78 ± 1.53a 30.35 ± 1.22b 31.49 ± 1.36b 46.86 ± 0.92c 39.26 ± 1.22d 35.71 ± 1.08e 2.2.4 Xác định thời gian thích hợp cho q trình khử protein Bảng P 2.2.7 Ảnh hưởng thời gian đến hàm lượng protein thô β-glucan thô Thời gian (giờ) 1.0 1.5 Lần 3 Hàm lượng protein thô (%) 22.06 20.18 21.12 7.42 7.18 7.2 4.86 5.45 4.62 GTTB 16.21 ± 0.55a 7.27 ± 0.13b 4.98 ± 0.43c Thời gian (giờ) 2.0 2.5 3.0 Lần 3 Hàm lượng protein thô (%) 3.75 4.11 3.62 3.45 3.72 3.91 3.22 3.67 3.35 GTTB 3.83 ± 0.25d 3.69 ± 0.23d 3.41 ± 0.23d Bảng P 2.2.8 Ảnh hưởng thời gian đến hàm lượng tổng carbohydrate βglucan thô Thời gian (giờ) 1.0 1.5 2.0 2.5 3.0 Lần 3 3 3 Hàm lượng carbohydrate (%) 25.16 25.12 22.16 34.91 33.62 32.11 38.52 40.18 37.2 47.72 45.89 46.98 42.52 45.12 44.61 39.55 40.4 41.35 GTTB 24.15 ± 1.72a 33.55 ± 1.40b 38.63 ± 1.49c 46.86 ± 0.92d 44.08 ± 1.38e 40.43 ± 0.90c PHỤ LỤC 3: KẾT QUẢ XỬ LÝ SPSS 3.1 Thu nhận β-glucan thô từ thành tế bào nấm men theo phương pháp tự phân 3.1.1 Xác định nồng độ NaOH thích hợp cho q trình khử protein - Hàm lượng protein thô MauTNNhietdo N Subset for alpha = 0.05 0.5 2.313 0.75 3.153 3.153 3.45 3.45 1.5 4.19 Duncanaa 1.25 0.25 3 Sig 0.084 0.112 Means for groups in homogeneous subsets are displayed a Uses Harmonic Mean Sample Size = 3.000 3.45 4.19 4.667 7.947 0.066 37.16 1 - Hàm lượng tổng carbohydrate MauTNNongdoNaOH N Subset for alpha = 0.05 3.71 1.5 1.25 6.717 13.72 0.75 Duncanaa 0.25 0.5 Sig 1 Means for groups in homogeneous subsets are displayed a Uses Harmonic Mean Sample Size = 3.000 15.82 18.34 24.75 1 34.5 3.1.2 Xác định tỷ lệ nguyên liệu/ dung dịch NaOH thích hợp cho q trình khử protein - Hàm lượng protein thô MauTNTyleNL/DDNaOH Subset for alpha = 0.05 N Duncanaa 1/20 2.06 2/20 2.313 3/20 2.89 4/20 3.0633 Sig 0.19 0.356 Means for groups in homogeneous subsets are displayed a Uses Harmonic Mean Sample Size = 3.000 - Hàm lượng tổng carbohydrate MauTNTyleNLNaOH Duncanaa Subset for alpha = 0.05 N 1/20 19.84 4/20 29.297 3/20 29.913 2/20 Sig 34.5 0.52 Means for groups in homogeneous subsets are displayed a Uses Harmonic Mean Sample Size = 3.000 3.1.3 Xác định nhiệt độ thích hợp cho trình khử protein - Hàm lượng protein thơ MauTNNhietdo Duncanaa N Subset for alpha = 0.05 95 1.667 100 1.787 90 2.313 85 3.12 80 3.65 Sig Means for groups in homogeneous subsets are displayed a Uses Harmonic Mean Sample Size = 3.000 20.5 0.075 0.12 - Hàm lượng tổng carbohydrate MauTNNhietdo Subset for alpha = 0.05 N 80 19.8 100 20.26 85 90 95 Duncanaa Sig 17.99 24.3 34.5 41.42 0.571 1 Means for groups in homogeneous subsets are displayed a Uses Harmonic Mean Sample Size = 3.000 3.1.4 Xác định thời gian thích hợp cho q trình khử protein - Hàm lượng protein thô MauTNThoigian Duncanaa Subset for alpha = 0.05 N 1.37 2.5 1.497 1.667 1.5 giờ 3 3.7 6.173 33.63 Sig 0.647 1 Means for groups in homogeneous subsets are displayed a Uses Harmonic Mean Sample Size = 3.000 - Hàm lượng tổng carbohydrate MauTNThoigian Duncanaa Subset for alpha = 0.05 N 3 18.05 3 24.99 1.5 25.09 2.5 giờ Sig 22.27 29.37 41.42 1 Means for groups in homogeneous subsets are displayed a Uses Harmonic Mean Sample Size = 3.000 0.889 1 3.2 Thu nhận β-glucan thô từ thành tế bào nấm men theo phương pháp hóa học 3.1.1 Xác định nồng độ NaOH thích hợp cho q trình khử protein - Hàm lượng protein thô MauTNNhietdo Duncanaa Subset for alpha = 0.05 N 0.25 3.83 0.5 4.17 0.75 1.5 5.53 1.25 5.663 5.997 Sig 4.17 4.83 9.363 0.312 0.06 0.193 1 Means for groups in homogeneous subsets are displayed a Uses Harmonic Mean Sample Size = 3.000 - Hàm lượng tổng carbohydrate MauTNNhietdo Duncanaa Sig N 1.5 3 1.25 3 0.75 0.5 0.25 Subset for alpha = 0.05 15.44 24.267 26.32 31.91 36.3 40 46.86 0.268 Means for groups in homogeneous subsets are displayed a Uses Harmonic Mean Sample Size = 3.000 1 1 3.1.2 Xác định tỷ lệ nguyên liệu/ NaOH thích hợp cho q trình khử protein - Hàm lượng protein thơ MauTNTyleNL/NaOH Duncanaa Subset for alpha = 0.05 N 1/20 3.6333 2/20 3.8267 3/20 4/20 3 3.8267 4.1333 4.1333 4.4733 Sig 0.277 0.101 0.074 Means for groups in homogeneous subsets are displayed a Uses Harmonic Mean Sample Size = 3.000 - Hàm lượng tổng carbohydrate MauTNTyleNL/NaOH Duncanaa Subset for alpha = 0.05 N 1/20 4/20 3/20 2/20 3 28.7167 33.333 36.427 46.86 Sig 1 1 Means for groups in homogeneous subsets are displayed a Uses Harmonic Mean Sample Size = 3.000 3.1.3 Xác định nhiệt độ thích hợp cho trình khử protein - Hàm lượng protein thô MauTNNhietdo Duncanaa N Subset for alpha = 0.05 100 95 3.81 90 3.827 85 80 3 Sig 3.033 4.8 5.703 16.11 0.962 Means for groups in homogeneous subsets are displayed a Uses Harmonic Mean Sample Size = 3.000 1 - Hàm lượng tổng carbohydrate MauTNNhietdo Duncanaa Subset for alpha = 0.05 N 3 80 30.35 85 31.49 100 95 90 24.78 35.7 39.26 46.86 Sig 0.281 1 Means for groups in homogeneous subsets are displayed a Uses Harmonic Mean Sample Size = 3.000 3.1.4 Xác định thời gian thích hợp cho q trình khử protein - Hàm lượng protein thơ MauTNThoigian Duncanaa Subset for alpha = 0.05 N 3.413 2.5 3.693 3.827 1.5 giờ 3 4.977 7.27 16.21 Sig 0.313 1 Means for groups in homogeneous subsets are displayed a Uses Harmonic Mean Sample Size = 3.000 - Hàm lượng tổng carbohydrate MauTNThoigian Duncanaa Subset for alpha = 0.05 N giờ 1.5 38.6 40.4 2.5 giờ 24.15 Sig 33.55 44.08 46.86 Means for groups in homogeneous subsets are displayed a Uses Harmonic Mean Sample Size = 3.000 0.13 1 PHỤ LỤC 4: MỘT SỐ HÌNH ẢNH CỦA LUẬN VĂN Mẫu thành tế bào nấm men tự phân Mẫu thành tế bào nấm men hóa học Mẫu thành tế bào nấm men tự phân, hóa học chưa xay Mẫu thành tế bào nấm men tự phân, hóa học xay Sản phẩm β-glucan thô Sản phẩm β-glucan tinh – điều chế theo phương pháp ... phân thành tế bào nấm men thu nhận β- glucan thô 3) Đề xuất quy trình sản xuất β- glucan thơ từ thành tế bào nấm men 4) Sơ xác định có mặt β- glucan thô thu nhận từ thành tế bào nấm men 5) Sử dụng... thành tế bào nấm men Saccharomyces cerevisiae - Nghiên cứu thu nhận β- glucan thô từ thành tế bào nấm men phương pháp tự phân - Nghiên cứu thu nhận β- glucan thô từ thành tế bào nấm men theo phương... Sản xuất β- glucan thô từ nấm men Saccharomyces cerevisiae Nội dung nghiên cứu 1) Nuôi tạo thu nhận sinh khối nấm men Saccharomyces cerevisiae 2) Nghiên cứu thu nhận β- glucan thô từ thành tế bào