Xây dựng qui trình sản xuất vắc xin mẫu chuẩn quốc gia BCG

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC NHA TRANG NGUYỄN THÀNH TÍN XÂY DỰNG QUI TRÌNH SẢN XUẤT VẮC XIN MẪU CHUẨN QUỐC GIA BCG LUẬN VĂN THẠC SĨ KHÁNH HÒA – 2019 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC NHA TRANG NGUYỄN THÀNH TÍN XÂY DỰNG QUI TRÌNH SẢN XUẤT VẮC XIN MẪU CHUẨN QUỐC GIA BCG LUẬN VĂN THẠC SĨ Ngành: Công nghệ Sinh học Mã số: 60420201 Quyết định giao đề tài: 551/QĐ-ĐHNT ngày 21/06/2017 Quyết định thành lập HĐ: 1140/QĐ-ĐHNT ngày 10/09/2019 Ngày bảo vệ: 26/09/2019 Người hướng dẫn khoa học: PGS.TS.BS LÊ VĂN BÉ PGS.TS NGÔ ĐĂNG NGHĨA Chủ tịch Hội đồng: TS.NGUYỄN ĐỨC TÂN Khoa sau đại học: KHÁNH HỊA - 2019 LỜI CAM ĐOAN Tơi xin cam đoan kết đề tài:“Xây dựng quy trình sản xuất vắc xin mẫu chuẩn quốc gia BCG” cơng trình nghiên cứu riêng tơi với giúp đỡ thầy hướng dẫn đồng nghiệp Viện Vắc xin Sinh phẩm Y tế (IVAC) hợp tác Viện Kiểm định Quốc gia Vắc xin Sinh phẩm y tế (NICVB) Các số liệu, kết nghiên cứu trình bày đề tài trung thực chưa công bố cơng trình khoa học thời điểm Khánh Hòa, ngày 15 tháng năm 2019 Tác giả luận văn Nguyễn Thành Tín iii LỜI CẢM ƠN Để hồn thành luận văn này, tơi xin chân thành cảm ơn Ban Giám hiệu Trường Đại học Nha Trang, Khoa Sau đại học, Ban lãnh đạo thầy cô Viện Công nghệ Sinh học Môi trường lời cảm ơn, kính trọng, niềm tự hào học tập năm qua Chân thành cảm ơn Ban Giám đốc Viện Vắc xin Sinh phẩm Y tế tạo điều kiện giúp đỡ suốt thời gian học tập thực luận văn Tơi xin bày tỏ lịng biết ơn lời cảm ơn sâu sắc đến: PGS.TS.BS Lê Văn Bé - Nguyên Viện trưởng Viện Vắc xin Sinh phẩm Y tế, PGS.TS Ngô Đăng Nghĩa - Nguyên Viện trưởng Viện Công nghệ Sinh học Môi trường Những người thầy trực tiếp hướng dẫn, chỉnh sửa luận văn, hỗ trợ truyền đạt kiến thức kinh nghiệm nghề nghiệp cho tơi suốt q trình học tập nghiên cứu Trân trọng cảm ơn hợp tác Viện Kiểm định Quốc gia Vắc xin Sinh phẩm y tế (NICVB), bạn đồng nghiệp Phòng Sản xuất Vắc xin BCG, Phòng Kiểm định thuộc Viện Vắc xin Sinh phẩm Y tế (IVAC) hỗ trợ giúp đỡ tơi q trình thực luận văn Cuối cùng, xin gửi tình cảm thân thương tới gia đình người thân giúp đỡ động viên tơi q trình nghiên cứu hồn thành luận văn Khánh Hịa, ngày 15 tháng năm 2019 Tác giả luận văn Nguyễn Thành Tín iv MỤC LỤC LỜI CAM ĐOAN iii LỜI CẢM ƠN iv MỤC LỤC v DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT x DANH MỤC BẢNG xiii DANH MỤC HÌNH xv TRÍCH YẾU LUẬN VĂN xvi MỞ ĐẦU CHƯƠNG TỔNG QUAN TÀI LIỆU .4 1.1 Bệnh lao 1.2 Vắc xin phòng lao 1.2.1 Lịch sử nghiên cứu vắc xin phòng lao 1.2.2 Vắc xin BCG 1.3 Đặc điểm sinh học chủng BCG 10 1.3.1 Hình thể BCG 10 1.3.2 Cấu trúc kháng nguyên 10 1.3.3 Đặc tính tăng trưởng 11 1.4 Hiệu lực vắc xin BCG triển vọng cho vắc xin hệ 13 1.4.1 Hiệu lực vắc xin BCG 13 1.4.2 Những triển vọng cho vắc xin BCG hệ 15 1.5 Tá chất dùng vắc xin BCG 16 1.5.1 Tá chất 16 1.5.2 Vai trò tá chất 17 1.5.3 Cơ chế hoạt động tá chất 17 1.5.4 Phân loại tá chất 17 1.5.5 Tính an tồn vấn đề lựa chọn tá chất 17 1.5.6 Các tá chất sử dụng cho pha chế đông khô vắc xin BCG 18 1.5.7 Tá chất glutamat natri 19 v 1.5.7.1 Danh pháp .19 1.5.7.2 Tính chất vật lý .19 1.5.7.3 Cấu trúc hóa học 19 1.6 Miễn dịch phòng lao chuyển dị ứng tuberculin 20 1.6.1 Miễn dịch phòng lao 20 1.6.2 Mối liên quan miễn dịch BCG chuyển dị ứng tuberculin .21 1.7 Nhu cầu vắc xin phòng lao 22 1.7.1 Nhu cầu vắc xin BCG giới 22 1.7.2 Nhu cầu sử dụng vắc xin phịng lao chương trình TCMR Việt nam 23 1.8 Công nghệ sản xuất vắc xin BCG IVAC 23 1.8.1 Cơ sở sản xuất vắc xin BCG 23 1.8.2 Quy trình chung sản xuất vắc xin BCG .24 1.8.2.1 Chủng dùng sản xuất 24 1.8.2.2 Nuôi cấy 24 1.8.2.3 Gặt nghiền pha chế vắc xin 25 1.8.2.4 Đông khô 25 1.8.2.5 Hàn ống chân không .27 1.8.2.6 Bao bì, đóng gói bảo quản 27 1.9 Vắc xin mẫu chuẩn .27 1.9.1 Vắc xin mẫu chuẩn quốc tế 27 1.9.1.1 Vắc xin mẫu chuẩn quốc tế BCG Tokyo 172 - Nhật Bản 28 1.9.1.2 Vắc xin mẫu chuẩn quốc tế BCG Danish 1331- Đan Mạch .29 1.9.1.3 Vắc xin mẫu chuẩn quốc tế BCG Russian - Bungari 29 1.9.1.4 Vắc xin mẫu chuẩn quốc tế BCG Moreau-RJ - Braxin 30 1.9.2 Vắc xin mẫu chuẩn quốc gia 30 1.9.3 Một số nguyên tắc sản xuất vắc xin mẫu chuẩn 31 CHƯƠNG VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 33 2.1 Địa điểm thời gian nghiên cứu 33 2.1.1 Địa điểm nghiên cứu 33 vi 2.1.2 Thời gian nghiên cứu 33 2.2 Vật liệu .33 2.2.1 Chủng sản xuất .33 2.2.2 Vắc xin mẫu chuẩn 33 2.2.3 Động vật thí nghiệm 33 2.2.4 Hóa chất 33 2.2.5 Nhà xưởng, thiết bị dụng cụ .34 2.2.5.1 Nhà xưởng 34 2.2.5.2 Thiết bị .34 2.2.5.3 Dụng cụ .34 2.3 Phương pháp nghiên cứu 35 2.3.1 Nghiên cứu xác định thông số sản xuất yếu quan trọng quy trình sản xuất vắc xin mẫu chuẩn quốc gia BCG 35 2.3.1.1 Nghiên cứu ảnh hưởng nồng độ glutamat natri đến độ sống tươi vắc xin BCG giai đoạn gặt nghiền sinh khối pha vắc xin BCG tươi 37 2.3.1.2 Nghiên cứu xác định thể tích đóng ống đến khả bảo vệ vắc xin BCG suốt q trình đơng khơ phù hợp với điều kiện thiết bị IVAC .39 2.3.1.3 Nghiên cứu ảnh hưởng nhiệt độ sau vắc xin BCG đến độ sống tính ổn định nhiệt vắc xin sau đông khô .42 2.3.2 Áp dụng thông số nghiên cứu xác định, sản xuất lô vắc xin MCQG.BCG liên tiếp để thẩm định quy trình sản xuất 44 2.3.3 Sản xuất lô vắc xin MCQG BCG, số lượng 1000 ống (5mg BCG/ống) Phối hợp liên phịng thí nghiệm Viện IVAC NICVB kiểm tra chất lượng hiệu chuẩn lô MCQG.BCG mẫu chuẩn quốc tế 46 2.3.4 Nghiên cứu tính ổn định chất lượng 48 2.4 Phương pháp kiểm định chất lượng 48 2.4.1 Nguyên tắc lấy mẫu kiểm định 48 2.4.2 Tiêu chuẩn chất lượng vắc xin MCQG.BCG 49 2.4.3 Các phương pháp kiểm định 50 2.4.3.1 Kiểm tra độ sống (công hiệu) 50 vii 2.4.3.2 Kiểm tra tính ổn định nhiệt 51 2.4.3.3 Kiểm tra an toàn đặc hiệu 51 2.4.3.4 Kiểm tra an tồn khơng đặc hiệu (an tồn chung) 52 2.4.3.5 Kiểm tra vô khuẩn .52 2.4.3.6 Kiểm tra mật độ quang 52 2.4.3.7 Kiểm tra độ phân tán .53 2.4.3.8 Kiểm tra chân không .53 2.4.3.9 Kiểm tra độ ẩm tồn dư 53 2.4.3.10 Kiểm tra cảm quan 54 2.4.3.11 Kiểm tra tốc độ tạo huyền dịch đồng 54 2.4.3.12 Kiểm tra nhận dạng .54 2.4.3.13 Kiểm tra tính đồng 55 2.5 Xử lý phân tích số liệu 55 CHƯƠNG KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN 56 3.1 Kết nghiên cứu xác định thông số quy trình sản xuất 56 3.1.1 Nghiên cứu ảnh hưởng nồng độ glutamat natri đến độ sống tươi vắc xin BCG giai đoạn gặt nghiền sinh khối pha vắc xin BCG 56 3.1.2 Nghiên cứu xác định thể tích đóng ống đến khả bảo vệ vắc xin BCG suốt trình đơng khơ phù hợp với điều kiện thiết bị có 58 3.1.3 Nghiên cứu ảnh hưởng nhiệt độ sau vắc xin BCG đến độ sống tính ổn định nhiệt vắc xin sau đông khô 61 3.2 Kết áp dụng thông số nghiên cứu xác định vào quy trình để sản xuất lô thẩm định vắc xin mẫu chuẩn quốc gia BCG 65 3.2.1 Kết mật độ quang, độ phân tán độ sống vắc xin tươi lô sản xuất thẩm định 67 3.2.2 Kết độ sống khô tỷ lệ ổn định nhiệt lô sản xuất thẩm định 67 3.2.3 Kết độ ẩm tồn dư, tốc độ tạo huyền dịch đồng cảm quan lô sản xuất thẩm định 68 3.3 Kết chất lượng lô vắc xin MCQG.BCG.02 69 3.3.1 Kết kiểm tra chất lượng lô vắc xin MCQG.BCG.02 70 viii 3.3.1.1 Kết mật độ quang, độ phân tán độ sống vắc xin tươi lô vắc xin MCQG.BCG.02 .70 3.3.1.2 Kết độ sống khô tỷ lệ ổn định nhiệt lô vắc xin MCQG.BCG.02 71 3.3.1.3 Kết độ ẩm tồn dư, tốc độ tạo huyền dịch đồng cảm quan lô vắc xin MCQG.BCG.02 72 3.3.1.4 Kết đánh giá độ đồng lô vắc xin MCQG.BCG.02 73 3.3.1.5 Kết chân không, vô khuẩn, nhận dạng lô vắc xin MCQG.BCG.02 74 3.3.1.6 Kết an tồn đặc hiệu lơ vắc xin MCQG.BCG.02 75 3.3.1.7 Kết an tồn chung lơ vắc xin MCQG.BCG.02 76 3.3.2 Kết hiệu chuẩn lô MCQG.BCG.02 để xác định dải độ sống .77 3.3.2.1 Kết hiệu chuẩn độ sống IVAC 77 3.3.2.2 Kết hiệu chuẩn độ sống NICVB .79 3.3.2.3 Kết hiệu chuẩn độ sống IVAC NICVB 80 3.4 Kết tính ổn định theo thời gian lơ vắc xin MCQG.BCG.02 83 3.4.1 Kết độ sống theo thời gian bảo quản ≤ -20oC .83 3.4.2 Kết tính ổn định nhiệt theo thời gian bảo quản ≤ -20oC 85 3.4.2.1 Kết ổn định nhiệt lô vắc xin MCQG.BCG.02 sau 12 tháng .85 3.4.2.2 Kết ổn định nhiệt lô vắc xin MCQG.BCG.02 sau 24 tháng 86 3.4.2.3 Kết ẩm độ theo thời gian bảo quản nhiệt độ ≤ -20oC .86 3.4.2.4 Kết độ chân không, tốc độ tạo huyền dịch đồng nhất, vô trùng, cảm quan lô MCQG.BCG.02 theo thời gian bảo quản nhiệt độ ≤ -20oC .87 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 89 KẾT LUẬN .89 KIẾN NGHỊ 89 TÀI LIỆU THAM KHẢO 90 PHỤ LỤC ix DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT TIẾNG VIỆT DĐVN Dược điển Việt Nam ĐKPƯ Đường kính phản ứng ĐƯMD Đáp ứng miễn dịch ĐVS Đơn vị sống ĐVTN Động vật thí nghiệm MCQG Mẫu chuẩn quốc gia MCQT Mẫu chuẩn quốc tế QĐKN Quyết định kháng nguyên TCCS Tiêu chuẩn sở TCMR Tiêm chủng mở rộng TCYTTG Tổ chức Y tế Thế giới TLS Tỉ lệ sống TN Thí nghiệm VSDTTW Vệ sinh Dịch tễ Trung Ương TIẾNG ANH BCG Bacillus Calmette Guerin (Trực khuẩn Calmette Guerin hay gọi vắc xin phòng lao BCG ) BMRC British Medicine Research Council (Hội đồng nghiên cứu Y khoa Anh Quốc) FDA Food and Drug Administration (Cơ quan Quản lý Thực phẩm Dược phẩm Mỹ) GMP Good Manufacturing Practice (Thực hành sản xuất tốt) HIV Human Immunodeficiency Virus (Vi rút gây hội chứng suy giảm miễn dịch) x Phụ lục 2.3 Kết độ sống tươi lô sản xuất thẩm định vắc xin mẫu chuẩn quốc gia BCG Lô sản xuất TĐ*- BCG/01 Mẫu số 16,30 M2 15,84 M3 16,46 16,20 ± 0,322 M1 15,56 M2 16,22 M3 14,96 X ± SD TĐ- BCG/03 X ± SD *TĐ: Thẩm định (x 106đvs/mg) M1 X ± SD TĐ- BCG/02 Kết độ sống tươi 15,58 ± 0,630 M1 15,08 M2 16,10 M3 15,68 15,62 ± 0,513 Phụ lục 2.4 Kết tỉ lệ sống lô sản xuất thẩm định vắc xin mẫu chuẩn quốc gia BCG Đơn vị sống (x106đvs/mg) Lô sản xuất Mẫu số Tỉ lệ sống (%) Trước Sau đông khô đông khô M1 15,78 5,06 32,07 M2 16,28 5,86 36,00 M3 15,16 5,28 34,83 15,74 ± 0,561 5,40 ± 0,413 34,31 ± 2,018 M1 14,88 5,38 36,16 M2 16,18 5,96 36,84 M3 15,86 6,28 39,60 15,64 ± 0,677 5,87 ± 0,456 37,53 ± 1,822 M1 14,74 5,06 34,33 M2 15,58 6,36 40,82 M3 15,12 6,28 41,53 X ± SD 15,15 ± 0,421 5,90 ± 0,729 38,94 ± 3,97 Tiêu chuẩn 10 -25 2-8 ≥10 TĐ*- BCG/01 X ± SD TĐ- BCG/02 X ± SD TĐ- BCG/03 *TĐ: Thẩm định Phụ lục 2.5 Kết ổn định nhiệt lô sản xuất thẩm định vắc xin mẫu chuẩn quốc gia BCG Đơn vị sống (x106đvs/mg) Lô sản xuất TĐ*- BCG/01 Mẫu số 370C/4 tuần M1 6,36 3,36 52,83 M2 5,86 3,46 59,04 M3 5,48 2,87 52,37 5,90 ± 0,44 3,23±0,32 54,75 ± 3,73 M1 6,48 3,26 50,31 M2 5,54 3,25 58,66 M3 5,28 2,96 56,06 5,77 ± 0,63 3,16 ± 0,17 54,77 ± 4,28 M1 5,48 3,07 56,02 M2 5,54 3,16 57,04 M3 6,48 3,48 53,70 5,83± 0,56 3,24 ± 0,22 55,57 ± 1,71 2-8 NA ≥20 X ± SD TĐ- BCG/03 X ± SD Tiêu chuẩn *TĐ: Thẩm định nhiệt (%) 40C/4 tuần X ± SD TĐ- BCG/02 Tỉ lệ ổn định Phụ lục 2.6 Kết ẩm độ tồn dư lô sản xuất thẩm định vắc xin mẫu chuẩn quốc gia BCG Lô sản xuất TĐ*- BCG/01 Mẫu số Ẩm độ tồn dư (%) M1 1,37 M2 1,35 M3 1,39 1,37 ± 0,02 X ± SD TĐ- BCG/02 M1 1,43 M2 1,39 M3 1,42 X ± SD TĐ- BCG/03 1,41 ± 0,02 M1 1,40 M2 1,38 M3 1,37 X ± SD 1,38 ± 0,02 Tiêu chuẩn ≤3 *TĐ: Thẩm định Phụ lục 2.7 Kết tốc độ tạo huyền dịch đồng lô sản xuất thẩm định vắc xin mẫu chuẩn quốc gia BCG Tốc độ tạo huyền dịch Lô sản xuất TĐ*- BCG/01 Mẫu số M1 37 M2 35 M3 37 X ± SD TĐ- BCG/02 36 ±1,15 M1 35 M2 36 M3 34 X ± SD TĐ- BCG/03 đồng (giây) 35 ± 1,00 M1 36 M2 34 M3 35 X ± SD 35 ± 1,00 Tiêu chuẩn ≤60 *TĐ: Thẩm định Phụ lục 3: Kết hiệu chuẩn lô vắc xin MCQG.BCG.02 Phụ lục 3.1 Kết hiệu chuẩn độ sống lô vắc xin MCQG.BCG.02 IVAC Mẫu 10 11 12 X SD 2SD CV% Độ sống 4,02 3,78 6,60 6,72 5,20 3,84 3,72 6,28 4,74 4,10 6,48 5,60 5,09 1,20 2,40 23,58 X X -SD X +SD X -2SD X +2SD 5,09 5,09 5,09 5,09 5,09 5,09 5,09 5,09 5,09 5,09 5,09 5,09 3,89 3,89 3,89 3,89 3,89 3,89 3,89 3,89 3,89 3,89 3,89 3,89 6,29 6,29 6,29 6,29 6,29 6,29 6,29 6,29 6,29 6,29 6,29 6,29 2,68 2,68 2,68 2,68 2,68 2,68 2,68 2,68 2,68 2,68 2,68 2,68 7,50 7,50 7,50 7,50 7,50 7,50 7,50 7,50 7,50 7,50 7,50 7,50 Phụ lục 3.2 Kết hiệu chuẩn độ sống lô vắc xin MCQG.BCG.02 NICVB Mẫu 10 11 12 13 14 15 16 X SD 2SD CV% Độ sống 6,76 3,64 4,02 4,54 5,92 3,58 4,20 6,68 2,86 3,12 3,88 6,84 5,58 3,98 2,64 3,88 4,51 1,403 2,806 30,82 X X -SD X +SD X -2SD X +2SD 4,51 4,51 4,51 4,51 4,51 4,51 4,51 4,51 4,51 4,51 4,51 4,51 4,51 4,51 4,51 4,51 3,10 3,10 3,10 3,10 3,10 3,10 3,10 3,10 3,10 3,10 3,10 3,10 3,10 3,10 3,10 3,10 5,91 5,91 5,91 5,91 5,91 5,91 5,91 5,91 5,91 5,91 5,91 5,91 5,91 5,91 5,91 5,91 1,70 1,70 1,70 1,70 1,70 1,70 1,70 1,70 1,70 1,70 1,70 1,70 1,70 1,70 1,70 1,70 7,31 7,31 7,31 7,31 7,31 7,31 7,31 7,31 7,31 7,31 7,31 7,31 7,31 7,31 7,31 7,31 Phụ lục 3.3 Kết tổng hợp hiệu chuẩn độ sống lô vắc xin MCQG.BCG.02 IVAC NICVB Mẫu Độ sống X X -SD X +SD X -2SD X +2SD 4,02 3,78 6,60 4,76 4,76 4,76 3,43 3,43 3,43 6,09 6,09 6,09 2,10 2,10 2,10 7,42 7,42 7,42 6,72 5,20 4,76 4,76 3,43 3,43 6,09 6,09 2,10 2,10 7,42 7,42 3,84 4,76 3,43 6,09 2,10 7,42 3,72 6,28 4,76 4,76 3,43 3,43 6,09 6,09 2,10 2,10 7,42 7,42 10 11 12 13 14 15 16 4,74 4,10 6,48 5,60 6,76 3,64 4,02 4,54 4,76 4,76 4,76 4,76 4,76 4,76 4,76 4,76 3,43 3,43 3,43 3,43 3,43 3,43 3,43 3,43 6,09 6,09 6,09 6,09 6,09 6,09 6,09 6,09 2,10 2,10 2,10 2,10 2,10 2,10 2,10 2,10 7,42 7,42 7,42 7,42 7,42 7,42 7,42 7,42 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 5,92 3,58 4,20 6,68 2,86 3,12 3,88 6,84 5,58 3,98 2,64 4,76 4,76 4,76 4,76 4,76 4,76 4,76 4,76 4,76 4,76 4,76 3,43 3,43 3,43 3,43 3,43 3,43 3,43 3,43 3,43 3,43 3,43 6,09 6,09 6,09 6,09 6,09 6,09 6,09 6,09 6,09 6,09 6,09 2,10 2,10 2,10 2,10 2,10 2,10 2,10 2,10 2,10 2,10 2,10 7,42 7,42 7,42 7,42 7,42 7,42 7,42 7,42 7,42 7,42 7,42 28 3,88 4,76 3,43 6,09 2,10 X 4,76 1,331 2,662 27,97 4,76 3,43 6,09 2,10 7,42 7,42 SD 2SD CV% Phụ lục Bảng tổng hợp kết lô vắc xin MCQG.BCG.02 Phụ lục 4.1 Bảng tổng hợp kết lô vắc xin MCQG.BCG.02 (WHO.TRS 979, 2013 DĐVN V, 2017) STT Chỉ tiêu Phương pháp 02 Độ sống sau đơng khơ Tính ổn định nhiệt 03 An toàn đặc hiệu Tiêm chuột lang 04 An tồn chung Tiêm chuột nhắt 05 Tính vơ khuẩn Ni cấy trực tiếp 01 06 Mật độ quang 07 Độ phân tán 08 Độ chân không 09 Độ ẩm tồn dư 10 Cảm quan 11 Tốc độ tạo huyền dịch đồng Tiêu chuẩn chấp nhận Nuôi cấy - x 106 đvs/mg Ni cấy  20% Ít 2/3 số chuột khoẻ mạnh, lên cân Toàn chuột lang thí nghiệm khơng có biểu lao tiến triển sau tuần theo dõi Toàn chuột sống khỏe mạnh, lên cân khơng có biểu bệnh lý sau ngày Khơng có phát triển VSV sau 14 ngày theo dõi Đo quang (bước sóng 490nm) Đo quang (bước sóng 434nm 630nm) Kết 4,76 ± 2,66 x 106 đvs/mg 59,66 ± 6,50 Đạt Đạt Không phát  0,5 0,250 ± 0,002  0,9 1,43 ± 0,027 100% ống đạt chân Tesla- Coil không, phát màu tím đến trắng xanh Abderhalden ≤ 3% Dạng bột trắng khô, Kiểm tra bong không chứa tạp mắt thường chất Khi hoàn nguyên với nước muối sinh lý, dễ Kiểm tra tan, nhanh chóng tạo thành huyền dịch đồng mắt thường với thời gian  60 giây 100% 1,42 ± 0,03 Đạt 36 ± 0,84 12 13 Nhận dạng Tính đồng Trên mơi trường LJ, Cấy mơi khuẩn lạc khơ, xù xì trường màu trắng hay vàng Lowenstein - ngà Jensen Nhuộm Ziehl- Nelsen nhuộm Ziehl - trực khuẩn hình que, Nelsen mảnh, bắt màu đỏ xanh Độ lệch khối lượng Cân trọng ống trước lượng đông khô ≤ 5% sau đông khô ≤ 10% Đạt Trước đông khô: 0,524% Sau đông khô: 2,409% Phụ lục Hình 5.1 Quyết định Viện Kiểm định Quốc gia Vắc xin Sinh phẩm Y tế (NICVB) Phụ lục 6: HÌNH MƠ PHỎNG Q TRÌNH ĐƠNG KHƠ Đơng băng Đông khô cấp I Đông khô cấp II Vắc xin dạng nước 100 Thăng hoa Vắc xin đông băng Tách nước liên kết Nước liên kết Ẩm độ tồn dư Nước kết tinh Hình 6.1 Sự chuyển hóa nước q trình đơng khơ Phần khơ sinh phẩm Chuyển hóa nước thăng hoa Phần khơ sinh phẩm Áp lực giảm dần Tiết diện thăng hoa Chuyển hóa nhiệt (nhiệt độ kích) Phần đơng sinh phẩm Phần đơng sinh phẩm Vị trí sinh phẩm bị tan chảy Hình 6.2 Vai trị nhiệt lượng trình thăng hoa Phụ lục 7: MỘT SỐ HÌNH ẢNH TRONG SẢN XUẤT VÀ KIỂM ĐỊNH VẮC XIN MCQG.BCG MT.Sauton Nhân chủng Vi khuẩn BCG MT.Sauton Gặt thu sinh khối Cấy chuyển Nghiền sinh khối Vắc xin BCG Hàn ống chân không Kiểm tra vô trùng Phân ống Đông khô Kiểm tra độ sống Vi khuẩn BCG mơi trường LJ Vi khuẩn BCG kính hiển vi Kiểm tra an toàn đặc hiệu Đo mật độ quang Kiểm tra an toàn chung Kiểm tra chân không Vắc xin BCG.MCQG.02 ... tiêm vắc xin phịng lao (BCG) chương trình TCMR Quốc gia 1.8 Công nghệ sản xuất vắc xin BCG IVAC 1.8.1 Cơ sở sản xuất vắc xin BCG Nhà máy sản xuất vắc xin BCG IVAC xây dựng cho quy trình sản xuất. .. quy trình sản xuất vắc xin mẫu chuẩn quốc gia BCG thực cần thiết cấp bách Mục tiêu đề tài 2.1 Xây dựng quy trình sản xuất vắc xin mẫu chuẩn quốc gia BCG dây chuyền công nghệ thiết bị IVAC 2.2 Sản. .. nhiệt độ sau vắc xin, tiến hành sản xuất lô vắc xin mẫu chuẩn quốc gia BCG liên tiếp để thẩm định tính ổn định thơng số quy trình sản xuất, tiến tới sản xuất lô vắc xin mẫu chuẩn quốc gia BCG, ký