Cố định hệ vi khuẩn nitrosomonas sp va nitrobacter sp trên bacterial cellulose (bc) và ứng dụng chuyển hóa ammonia nước ương ấu trùng tôm sú penaeus monodon

I H C QU C GIA THÀNH PH H CHÍ MINH TR NG I H C BÁCH KHOA LÊ TI N D NG C NH H VI KHU N Nitrosomonas sp VÀ Nitrobacter sp TRÊN BACTERIAL CELLULOSE (BC) VÀ NG D NG CHUY N HÓA AMMONIA N C NG U TRÙNG TÔM SÚ Penaeus monodon Chuyên ngành: CÔNG NGH SINH H C Mã s ngành: 604280 LU N V N TH C S Thành ph H Chí Minh, tháng n m 2010 CƠNG TRÌNH TR NG C HỒN THÀNH T I I H C BÁCH KHOA I H C QU C GIA TP H Cán b h CHÍ MINH ng d n khoa h c: Phó giáo s , Ti n s Nguy n cL ng Ký tên: …………………………….………………………………………… Cán b ch m nh n xét 1: …………………………………………………………………………… Ký tên: ……………………………………….…………………………………… Cán b ch m nh n xét 2: …………………………………………………………………………… Ký tên: ……………………………………….…………………………………… Lu n v n th c s H I TR NG cb ov t i NG CH M B O V LU N V N TH C S I H C BÁCH KHOA, ngày i tháng n m 2010 TR NG I H C BÁCH KHOA C NG HÒA XÃ H I CH! NGH A VI T NAM KHOA K" THU T HÓA H C #c L$p - T% Do - H&nh Phúc Tp HCM, ngày tháng n m 2010 NHI M V LU N V N TH C S H tên h c viên: LÊ TI N D NG Phái: Nam Ngày, tháng, n m sinh: 04/5/1964 N i sinh: Ti n Giang Chuyên ngành: Công ngh sinh h c MSHV: 03107108 1- TÊN ' TÀI: C nh h vi khu n Nitrosomonas sp Nitrobacter sp bacterial cellulose (BC) ng d ng chuy n hóa amonia n c ng u trùng tôm sú Penaeus monodon 2- NHI M V LU N V N: - C nh h vi khu n Nitrosomonas Nitrobacter bacterial cellulose (BC) b ng ph ng pháp b y-h p ph - !ng d ng ch" ph m BC c n c nh vi khu n chuy n hóa ammonia ng u trùng tơm sú Penaeus monodon 3- NGÀY GIAO NHI M V : Tháng 01/2010 4- NGÀY HOÀN THÀNH NHI M V : Tháng 6/2010 5- H VÀ TÊN CÁN B H NG D(N: PHÓ GIÁO S , TI N S# NGUY$N !C L N i dung c ng Lu n v n th c s ã NG c H i %ng chuyên ngành thông qua CÁN B H NG D(N CH! NHI M B MÔN QL CHUYÊN NGÀNH ii KHOA QL CHUYÊN NGÀNH L IC M Trong th&i gian theo h c t i Tr &ng Minh, ã N i h c Bách khoa Thành ph H% Chí c t o nh'ng i u ki n t t nh t h c t p, nghiên c u t( Ban Giám hi u, phòng t o sau i h c, khoa K) thu t hóa h c nh t t( b môn Công ngh sinh h c Tôi ã nh n c s* t n tình ch+ d n c,a Quý Th-y Cô B môn, s* chu áo c,a cán b , nhân viên n v c,a Tr &ng ây c/ng th&i k0 g1n bó giúp -y thi n chí c,a t p th b n bè l p Cao h c Công ngh sinh h c 2007, Tr &ng có c b n lu n v n th c s này, vô bi"t n Th-y Ch, nhi m b mơn - Phó giáo s , Ti"n s Nguy3n b i h c Bách khoa TPHCM cL ng ln t n tâm, h"t lịng nâng c cho nhi u th" h h c trò, ng &i ã g1n bó khơng m t m4i v i s* nghi p tr%ng ng &i, ã cho nhi u ý ki"n q báu q trình th*c hi n Tơi khơng qn lịng nhi t tình, sâu sát, lo l1ng, chia s5 cho m i ho t tài ng c,a l p, cho t(ng tâm t h c trị c,a Cơ giáo ch, nhi m - Ti"n s Nguy3n Thúy H ng Cô ã ng viên, giúp r t nhi u v t qua nh'ng khó kh n th&i gian theo h c Tôi c/ng mu n k "n Ban Giám hi u, %ng nghi p thành viên Tr &ng Trung h c Th,y s n ã quan tâm t o i u ki n, giúp 2, c/ng nh s* ti"p s c chân tình hi u qu t( gia ình nh4 c,a tơi Xin c bày t4 s* tri ân t n áy lịng tơi "n t t c m i ng &i./ iii TĨM T)T N c ni th,y s n ch a ammonia trình phân h,y th c n d th(a, phân… gây h i cho th,y s n q trình ni làm phú d 2ng, t o c phát tri n c th i mơi tr &ng C nh vi khu n nitrate hóa Nitrosomonas Nitrobacter vào ch t mang bacterial cellulose (BC) ng d ng chuy n hóa ammonia b nghiên c u c n ng u trùng tôm sú b c -u cho nh vi khu n chuy n hóa tách nit kh4i mơi tr &ng c Nghiên c u nh m kh o sát môi tr &ng dinh d 2ng, pH, nhi t , ch" l1c nuôi sinh kh i Nitrosomonas, Nitrobacter, th&i gian h p ph h vi khu n vào BC K"t qu nghiên c u cho th y Nitrosomonas S5 pH 8,2, nhi t 28 C, l1c 160rpm ngày th 8; Nitrobacter 28 C, l1c 160rpm tm t tm t c nuôi môi tr &ng cao nh t 8x108CFU/ml c nuôi môi tr &ng N5 pH 8,0, nhi t cao nh t 5x108CFU/ml ngày th M u BC ch a vi khu n h p ph 24, 48, 72 96 gi& ho t l*c chuy n hóa ammonia erlen ch a n l ng BC so v i n c ki m tra c bi n ti t trùng v i c bi n 1/10 K"t qu , m u BC ch a vi khu n h p ph 72 gi& có kh n ng gi m ammonia trung bình 48,2% nitrite 94,5% so v i i ch ng Ki m tra ho t l*c chuy n hóa ammonia c,a BC h p ph 72 gi& b v ib ng u trùng tôm sú, ammonia gi m 51,1%, nitrite gi m 32,7% so i ch ng Qua k"t qu nghiên c u, Nitrosomonas Nitrobacter ch t mang BC có th t o thành ch" ph m x6 lý n cc nh c trình ng u trùng tơm sú C-n có nh'ng nghiên c u sâu h n kh o sát t+ l BC c nh so v i th tích n c b ng t "n gi i h n an tồn cho tơm; c thêm vi khu n khác có kh n ng chuy n hóa nitrat n l ng nit môi tr &ng nuôi c ch t mang khác iv gi m nh Nitrosomonas, Nitrobacter có c s ánh giá hi u qu c vi khu n c nh nh c,a BC i v i hai ABSTRACT Aquaculture water contains ammonia due to decomposite of food abundance, distribution harm to fish in the breeding and rich nutrition, toxic algal development being discharged into the environment Immobilize Nitrosomonas and Nitrobacter brought into bacterial cellulose (BC) and apply ammonia metabolism in the prawn larvae tank is intitialy for the study of bacterial nitrogen metabolism, separate from the wastewater environment In the thesis, we studied growth media, pH, temperature, shaking in mass culure of Nitrosomonas, Nitrobacter, adsorpted time bacteria in BC The results illustrated that Nitrosomonas S5 media at pH 8.2, temperature 28 C, 160rpm shaking, 8x108CFU/ml are the highest on the eighth; whereas, Nitrobacter N5 media at pH 8.0, temperature 280C, 160rpm shaking, 5x108CFU/ml are the highest on the seventh Bacterial cellulose samples are adsorpted at 24, 48, 72 and 96 hours to test metabolized ammonia in seawater erlens which are pasteurized, the proportion BC and volume is 1/10 We saw that there are some differents between the study and evident samples, BC samples which are adsopted at 72 hours are reduced ammonia and nitrit are 48,2% and 94,5% respectively We saw that there are some differents between the study and evident samples, BC samples which are adsopted at 72 hours are reduced ammonia and nitrit in the prawn larvae tank are 51,1% and 32,7% respectively In sum up, Nitrosomonas and Nitrobacter are carried on BC can be made BC products to treat wastewater in prawn larvae tank However, we need have more clear reseaches such as check the rate BC and wastewater volume to safe for shrimp Besides, we can immobilize many different bacteria who can reduce amount of nitrogen in the life environment of shrimp as well as we can use many different carriers to immobilize to assess the adventages of BC carriers with these bacteria v M CL C M7 8U T9NG QUAN TÀI LI:U c 2.1 S* chuy n hóa nit n 2.1.1 C ch" chuy n hóa nit .3 2.1.2 Q trình nitrate hóa 2.1.3 ;nh h ng c,a NH3, NO2– "n nuôi tr%ng th,y s n 2.2 NG PHÁP 39 3.1 a i m th&i gian nghiên c u 39 3.2 Hóa ch t, thi"t b 39 3.3 Gi ng vi sinh v t môi tr &ng nuôi c y 41 3.3.1 Gi ng vi sinh v t 41 3.3.2 Môi tr &ng ho t hóa Nitrosomonas 41 3.3.3 Môi tr &ng i v i Acetobacter xylinum 46 3.4 S % n i dung thí nghi m 47 3.4.1 Thí nghi m Kh o sát môi tr &ng ho t hóa Nitrosomonas 48 3.4.2 Thí nghi m Kh o sát mơi tr &ng ho t hóa Nitrobacter 48 3.4.3 Thí nghi m Kh o sát nh h ng c,a i u ki n nuôi c y "n sinh tr ng c,a Nitrosomonas 49 3.4.4 Thí nghi m Kh o sát nh h ng c,a i u ki n nuôi c y "n sinh tr ng c,a Nitrobacter 50 3.4.5 Thí nghi m Kh o sát nh h ng c,a th&i gian "n kh n ng h p ph c,a h vi khu n vào ch t mang BC 52 3.4.6 Thí nghi m Kh o sát k"t qu chuy n hóa ammonia c,a ch" ph m b ng u trùng 53 vi 3.5 Ph ng pháp phân tích 54 3.5.1 Các ph ng pháp vi sinh 54 3.5.2 Các ph ng pháp hóa sinh 54 3.5.3 Ph ng pháp x6 lý s li u 58 K T QU; VÀ TH;O LU=N 60 4.1 Kh o sát mơi tr &ng ho t hóa Nitrosomonas 60 4.2 Kh o sát môi tr &ng ho t hóa Nitrobacter 62 4.3 Kh o sát nh h ng c,a i u ki n nuôi c y "n sinh tr ng c,a Nitrosomonas 64 4.3.1 ;nh h ng c,a pH "n sinh tr ng c,a Nitrosomonas 64 4.3.2 ;nh h ng c,a nhi t "n sinh tr ng c,a Nitrosomonas 65 4.3.3 ;nh h ng c,a ch" l1c "n sinh tr ng c,a Nitrosomonas 66 4.3.4 &ng cong t ng tr ng c,a Nitrosomonas 67 4.4 Kh o sát nh h ng c,a i u ki n nuôi c y "n sinh tr ng c,a Nitrobacter 68 4.4.1 ;nh h ng c,a pH "n sinh tr ng c,a Nitrobacter 68 4.4.2 ;nh h ng c,a nhi t "n sinh tr ng c,a Nitrobacter 69 4.4.3 ;nh h ng c,a ch" l1c "n sinh tr ng c,a Nitrobacter 70 4.4.4 &ng cong t ng tr ng c,a Nitrobacter .71 4.5 Kh n ng h p ph h vi khu n vào ch t mang BC theo th&i gian 73 4.5.1 Chu n b ch t mang BC .73 4.5.2 C nh vi khu n lên màng BC, t o ch" ph m .75 4.5.3 M t t" bào ch" ph m 75 4.5.4 ;nh h ng th&i gian h p ph "n kh n ng chuy n hoá NH3 NO2- c,a vi khu n c nh .76 4.6 K"t qu chuy n hóa ammonia c,a ch" ph m b K T LU=N VÀ ? NGH@ ng u trùng82 86 5.1 K"t lu n 86 5.2 ngh 87 TÀI LI:U THAM KH;O 88 PHA LAC 95 LÝ L@CH TRÍCH NGANG ………………………………… 105 vii DANH SÁCH HÌNH Hình 2.1 H vi sinh v t chuy n hóa nit n c Hình 2.2 Hai giai o n c,a trình nitrate hóa Hình 2.3 T" bào Nitrosomonas d i kính hi n vi quang h c 12 Hình 2.4 C u trúc t" bào thu c gi ng Nitrosospira 12 Hình 2.5 C u trúc t" bào thu c gi ng Nitrosovibrio 13 Hình 2.6 C u trúc t" bào thu c gi ng Nitrosolobus 13 Hình 2.7 C u trúc t" bào thu c gi ng Nitrosococcus 14 Hình 2.8 T" bào Nitrosomonas europaea d i kính hi n vi quang h c 14 Hình 2.9 T" bào Nitrosomonas europaea d i kính hi n vi i n t6 15 Hình 2.10 T" bào Nitrosomonas eutropha d i kính hi n vi i n t6 15 Hình 2.11 T" bào Nitrosomonas marina d i kính hi n vi i n t6 16 Hình 2.12 T" bào Nitrosomonas marina d i kính hi n vi i n t6 16 Hình 2.13 T" bào Nitrosomonas mobilis d i kính hi n vi i n t6 17 Hình 2.14 T" bào Nitrosomonas mobilis d i kính hi n vi i n t6 17 Hình 2.15 Vi khu n Nitrobacter winogradsky 18 Hình 2.16 Khu n l c Nitrobacter alkalicus 19 Hình 2.17 Tiên mao (F) Nitrobacter alkalicus d Hình 2.18 T" bào Nitrobacter alkalicus d i kính hi n vi 19 i kính hi n vi i n t6 20 Hình 2.19 Vi khu n Nitrobacter hamburgensis 20 Hình 2.20 T" bào Nitrobacter vulgaris 21 Hình 2.21 Phân lo i ch t mang c nh t" bào 23 Hình 2.22 H vi s i BC (a) th*c v t (b) 25 Hình 2.23 Mơ hình vi s i cellulose th*c v t (trái) vi s i BC (ph i) 25 Hình 2.24 BC c t o t( môi tr &ng t nh (a) môi tr &ng l1c (b) 26 Hình 2.25 Bu trùng Nauplius c,a tơm sú Penaeus monodon 30 Hình 2.26 Bu trùng Zoea c,a tôm sú Penaeus monodon 31 Hình 2.27 Bu trùng Mysis c,a tơm sú Penaeus monodon 31 Hình 2.28 H u u trùng Post larvae c,a tôm sú Penaeus monodon 32 viii Hình 4.1 Hình d ng khu n l c t" bào c,a ch,ng Nitrosomonas 61 Hình 4.2 Hình d ng khu n l c t" bào c,a ch,ng Nitrobacter 6363 Hình 4.3 S* phát tri n c,a Nitrosomonas ph thu c pH 64 Hình 4.4 S* phát tri n c,a Nitrosomonas ph thu c nhi t Hình 4.5 S* phát tri n c,a Nitrosomonas ph thu c ch" 65 l1c 66 Hình 4.6 S* phát tri n c,a Nitrosomonas theo th&i gian 67 nh h s t ng tr ng c,a Nitrosomonas 68 Hình 4.7 Xác Hình 4.8 S* phát tri n c,a Nitrobacter ph thu c pH 69 Hình 4.9 S* phát tri n c,a Nitrobacter ph thu c nhi t 70 Hình 4.10 S* phát tri n c,a Nitrobacter ph thu c ch" l1c 71 Hình 4.11 S* phát tri n c,a Nitrobacter theo th&i gian 72 nh h s t ng tr ng c,a Nitrobacter 72 Hình 4.12 Xác Hình 4.13 S n ph m BC lên men c p 73 Hình 4.14 S n ph m BC lên men c p 73 Hình 4.15 S n ph m BC sau q trình ni c y 74 Hình 4.16 Ch t mang BC sau x6 lý 74 Hình 4.17 Ch" ph m BC thu c sau 24, 48, 72.gi& c nh 75 Hình 4.18 N%ng ammonia th&i gian x6 lý 77 Hình 4.19 N%ng nitrite th&i gian x6 lý 79 Hình 4.20 N%ng nitrate th&i gian x6 lý 81 Hình 4.21 Ch" ph m cho vào b ng 82 Hình 4.22 Ch" ph m t p trung thành kh i sau tu-n b ng 83 Hình 4.23 L ng ammonia b ng u trùng tôm 84 Hình 4.24 L ng nitrite b ng u trùng tơm 84 Hình 4.25 L ng nitrate b ng u trùng tôm 85 ix 30 Dworkin M.; Falkow S.; Rosenberg E.; Schleifer K -H.; Stackebrandt E Proteobacteria Alpha and Beta Subclasses ed.; Springer 2006; Vol p 964 31 Engel M S and Alexander M Growth and autotrophic metabolism of nitrosomonas europaea Cornell University Ithaca New York April 28 1958 32 Esawy M A., Mahmoud D A R and Fattah A F A., Immobilisation of bacillus subtilis NRC33A Levansucrase and some studies on its properties Brazilian Journal of Chemical Engineering Accepted: January 18 2008 33 Gabriel Bitton Wastewater microbiology Third edition A John Wiley and Garrick J S Thorn Development of an Immobilized Nitrosomonas europaea Bioreactor for the Production of Methanol from Methane A Thesis Presented for the Degree of Master of Engineering in Chemical and Process Engineering University of Canterbury, Christchurch, New Zealand April 2002 34 Gundersen K Influence of Corn Steep Liquor on the Oxidation of Ammonia to Nitrite by Nitrosomonas europaea Lyngby Denmark 1958 Microbial 19 190-197 35 Ha Jiyeon Bioremediation of the organophosphate pesticide coumaphos, using microorganisms immobilized in calcium-alginate gel beads Submitted for the degree of Doctor of Philosophy Biological and Agricultural Engineering December 2005 36 Hagopian D S.; Riley J G A closer look at the bacteriology of nitrification Aquacultural Engineering 1998 223-244 37 Hunt Patrick G., Matheny Terry A., Ro Kyoung S., Stone Kenneth C and Vanotti Matias B Denitrification of agricultural drainage line water via immobilized denitrification sludge Journal of Environmental Science and Health Part A 2008 43, 1077–1084 38 Hargreaves John A and Tucker Craig S Managing Ammonia in Fish Ponds SRAC Publication No 4603 12-2004 91 39 Kearney Foundation of Soil Science American Society for Microbiology 1965 Vol 89 No 40 Kim Mia et al Aerobic Denitrification of Pseudomonas putida AD-21 at different C/N Ratios Journal of Bioscience and Bioengineering 2008 Vol 106 No 498-502 41 Klein J., Vorlop K D., Immobilization of whole cells Biotechnology focus I, Hansre Publishing New York 1988 42 Krystynowicz A., Czaja W., Wiktorowska– Jezierska A., Goncalves – Miskiewicz M., Turkiewicz M and Bielecki S Factors affecting the yield and properties of bacterial cellulose Journal of industrial Microbiology and Biotechnology 2002 43 Lewis R F and Pramer D Isolation of nitrosomonas in pure culture Agricultural Microbiology New Jersey May 30 1958 44 Lincheng Zhou, Guiying Li, Taicheng An, Jiamo Fu and Guoying Sheng Recent patents on immobilized microorganism technology and its engineering application in wastewater treatment Recent Patents on Engineering 2008 28-35 45 Mahmoud Abou Seoud and Rachida Maachi Biodegradation of Naphthalene by Free and Alginate Entrapped Pseudomonas sp Algeria 58c January 22 2003 46 Mailin Misson, Firdausi Razali Immobilization of phenol degrader pseudomonas sp in repeated batch culture using bioceramic and sponge as support materials Malaysia Jurnal Teknologi 46(F) Jun 2007 51– 59 47 Manju N J.; Deepesh V.; Achuthan C.; Rosamma P.; Singh I S B Immobilization of nitrifying bacterial consortia on wood particles for bioaugmenting nitrification in shrimp culture systems Aquaculture 2009 294 65-75 48 Martin M., Mengs G., Plaza E., Garbi C., Sanchez M., Gibello A., Gutierrez F., and Ferrer E Propachlor Removal by Pseudomonas Strain GCH1 in an Immobilized-Cell System Applied And Environmental Microbiology 2000 Vol 66 No p 1190–1194 92 49 Matsumura Masatoshi, Yamamoto Tetsuya, Wang Pi-chao, Shinabe Kazuhiro, Yasuda Kimiaki Rapid nitrification with immobilized cell using macro-porous cellulose carrier Water Research Volume 31 Issue May 1997 Pages 1027-1034 50 Meiklejohn Jane The Isolation of Nitrosomonas europaea in Pure Culture Microbiolog Department Harpmderr Herwandhire 51 Park Joung-Kun and Youm Kyung-Ho Phemol degradation by immobilized Peudomonas putida in draft-tube three- phase fluidizedbed bioreator 1995 52 Prescoot L M., Microbiology ed.; McGraw−Hill New York 2002; p 1147 53 Princ Alenka Mahne Ivan, Paul Eldor A and Tiedje James M Effects of pH and Oxygen and Ammonium Concentrations on the Community Structure of Nitrifying Bacteria from Wastewater Applied and environmental microbiology Oct 1998 Vol 64 No 10 p 3584–3590 54 Priscilla C Sanchez Toshiomi Yoshida Marian A Pulido, Mikio Nakajima Fermentation conditions for high-cellulose production of Philippine strains of Acetobacter xylinum International Conference on Asian Network on Microbial Research Chiang Mai Thailan, 1999p 459-461 Production of biocellulose (bacterial cellulose) http://www res titech ac jp/~junkan/english/cellulose/index html 56 Rezaee Abbas et al Biological denitrification by Pseudomonas stutzeri immobilized on microbial cellulose World Journal of Microbiology and Biotechnology Volume 24, Number 11 November 2008 p 2397 57 Rezaee A , Godini H., Bakhtou H Microbial cellulose as support material for the immobilization of denitrifying bacteria Environmental Engineering and Management J.l Sep/Oct 2008 Vol No 589-594 58 Rezaee A., Godini H., Dehestani S., Yazdanbakhsh A., Mosavi G and Kazemnejad A Biological denitrification by Pseudomonas stutzeri immobilized on microbial cellulose World Journal of Microbiology and Biotechnology Volume 24 N 11 November 2008 p 2397-2402 93 59 Samejima Masahiro, Sugiyama Jungi, Igarashi Kijohiko, Eriksson KarlEril L Enjymatic hydrolysis of bacterial cellulose Carbohydrate Research 1998 305 60 Shan H.; Obbard J P., Ammonia removal from prawn aquaculture water using immobilized nitrifying bacteria Applied Microbiology and Biotechnology 2001 (57) 791-798 61 Son H J., Heo M S., Kim Y G., Lee S J Optimization of fermentation conditions for the production of bacterial cellulose by a newly isolated Acetobacter sp A9 in shaking cultures Biotechnol Appl 2001 Biochem 33, p 1-5 62 Suneetha Parameswarappa, Chandrakant Karigar, Manjunath Nagenahalli Degradation of ethylbenzene by free and immobilized Pseudomonas fluorescens-CS2 Springer Science+Business Media B V 2007 63 Surma-clusarska B., Presler S., Danielewicz D Characteristics of bacterial cellulose obtained from Acetobacter xylinum culture for application in papermaking Fibres and Textiles in Eastern Europe 2008 Vol 16 No (69) pp 108-111 64 Wojnowska-Baryła I., Zieli^ska M Carbon and Nitrogen Removal by Biomass Immobilized in Ceramic Carriers Polish Journal of Environmental Studies Vol 11, No 2002 577-584 65 Yoshinaga F., Tonuochi N., Watanabe K Research progress in production of bacterial cellulose by areation and agitation culture and its application as a new industrial material Biosci Biotechnol Biochem 1997, 61 219-224 ''- Zhou Lincheng, Li Guiying, An Taicheng, Fu Jiamo and Sheng Guoying Recent Patents on Immobilized Microorganism Technology and Its Engineering Application in Wastewater Treatment Bentham Science Publishers Ltd Recent Patents on Engineering 2008, 28-35 94 PH L C S* phát tri n c,a Nitrosomonas giá tr pH khác Ph pH 7,0 7,2 7,4 7,6 7,8 8,0 8,2 8,4 8,6 8,8 M$t 2# t bào (x108 CFU/ml) 0,3 1,9 2,6 4,3 5,0 6,0 6,7 6,0 3,1 1,2 Ph l c S* phát tri n c,a Nitrosomonas pH 8.2 nhi t khác Nhi4t 2# (oC) 25 26 29 30 31 32 33 34 M$t 2# t bào (x107 CFU/mL) 1,3 2,3 4,3 6,8 6,7 6,1 5,3 3,8 3,2 1,3 27 28 S* phát tri n c,a Nitrosomonas pH 8,2, nhi t Ph 280C ch" l1c khác Ch 2# lAc (rpm) M$t 2# t bào (x108CFU/ml) 120 130 140 150 160 170 180 190 200 210 3,1 6,5 7,1 7,5 6,8 4,1 3,3 2,3 2,2 ;nh h ng c,a pH "n s* t ng tr ng c,a Nitrobacter Ph pH 7,0 7,2 7,4 7,6 7,8 8,0 8,2 8,4 8,6 8,8 M$t 2# t bào (x108 CFU/ml) 0,6 2,2 3,4 4,4 5,7 6,8 5,9 5,1 3,4 1,1 Ph ;nh h ng c,a nhi t "n s* t ng tr ng c,a Nitrobacter Nhi4t 2# (oC) 25 26 27 28 29 31 32 33 34 M$t 2# t bào (x108 CFU/ml) 2,4 3,9 5,1 7,1 6,3 5,1 4,3 3,9 3,4 1,1 95 30 Ph l c ;nh h ng c,a ch" Ch 2# lAc (rpm) M$t 2# t bào (x108CFU/ml) Ph l1c "n s* phát tri n c,a Nitrobacter 120 130 140 150 160 170 180 190 200 210 4,1 5,3 5,7 7,4 7,2 5,5 4,3 3,7 0,9 7,8 S* phát tri n c,a Nitrosomonas theo th&i gian Th@i gian (ngày) M$t 2# t bào (x107CFU/ml)) 1,6 1,8 3,3 3,8 24 40 76 80 66 10 48 11 26 12 22 96 Ph S* phát tri n c,a Nitrobacter theo th&i gian Th@i gian (ngày) M$t 2# t bào (x106CFU/ml) 2,1 2,6 39 72 82 102 200 500 490 460 10 72 11 43 12 36 Ph &ng chu n ammonia 97 Ph 10 &ng chu n nitrite Ph 11 &ng chu n nitrate 98 Ph 12 N%ng gian c ammonia môi tr &ng ch a vi khu n v i th&i nh khác Th@i gian x: lý (ngày) i ch ng N ng 2# ammonia môi tr @ng ch a vi khu=n c 28nh (mg/l) 24 gi& 48 gi& 72 gi& 96 gi& 2,6 2,2 1,9 2,6 3,2 2,6 2,5 2,5 2,8 3,8 11 2,5 2,6 2,3 2,4 3,6 13 2,4 2,8 2,2 2,6 3,9 15 2,8 2,5 1,8 2,4 4,4 17 2,8 2,3 1,9 2,9 4,2 19 2,9 2,5 2,2 2,5 4,7 21 2,9 2,7 1,9 2,5 4,8 23 2,8 2,8 2,4 2,7 4,4 25 2,7 2,1 2,8 4,6 Trung bình 4,16 2,7 2,59 2,12 2,62 99 Ph c 13 N%ng nitrite môi tr &ng ch a vi khu n v i th&i gian nh khác Th@i gian x: lý (ngày) i ch ng N ng 2# ammonia môi tr @ng ch a vi khu=n c 28nh (mg/l) 24 gi& 48 gi& 72 gi& 96 gi& 1,36 0,09 0,09 0,08 0,13 1,39 0,09 0,08 0,08 0,11 11 1,35 0,09 0,09 0,08 0,11 13 1,47 0,1 0,08 0,07 0,1 15 1,44 0,11 0,08 0,08 0,09 17 1,51 0,09 0,09 0,07 0,08 19 1,42 0,09 0,08 0,08 0,08 21 1,44 0,08 0,07 0,08 0,07 23 1,49 0,07 0,07 0,08 0,07 25 1,44 0,08 0,08 0,08 0,08 Trung bình 1,431 0,09 0,08 0,08 0,09 100 Ph c 14 N%ng nitrate môi tr &ng ch a vi khu n v i th&i gian nh khác Th@i gian x: lý (ngày) i ch ng N ng 2# ammonia môi tr @ng ch a vi khu=n c 28nh (mg/l) 24 gi& 48 gi& 72 gi& 96 gi& 14,5 2,8 2,4 2,3 3,8 14,3 2,5 2,2 3,7 11 14,9 2,7 2,5 3,6 13 15,5 2,7 2,4 2,2 3,5 15 14,2 2,4 2,6 1,8 3,3 17 14,6 2,2 2,4 1,9 3,2 19 13,7 2,4 2,3 3,1 21 14,1 2,7 2,4 1,6 23 14 2,6 2,6 1,9 2,8 25 14,3 2,6 2,4 2,1 2,6 Trung bình 14,41 2,61 2,45 3,26 Ph 15 N%ng NH4+ ammonia b ng u trùng tôm Sau ngày Sau ngày Sau ngày i ch ng 36 40 43 45 B thí nghi m 36 27 25 22 32.5 41.9 51.1 B TD l chuy n hóa (%) 101 Ph l c 16 N%ng NO2- nitrite b ng u trùng tôm Sau ngày Sau ngày Sau ngày i ch ng 1.55 1.66 1.62 1.53 B thí nghi m 1.5 1.22 1.11 1.03 26.5 31.5 32.7 B TD l chuy n hóa (%) Ph l c 17 N%ng NO3B i ch ng B thí nghi m nitrate b Sau ngày 12.1 12.8 15.3 15.8 12 2.6 2.2 1.9 79.7 85.6 88 TD l chuy n hóa (%) Ph l c 18 L ng u trùng tôm ng ammonia n nh 102 c Sau ngày Sau ngày c chuy n hóa b.i vi khu n c Ph l c 19 L ng nitrite n c c chuy n hóa b.i vi khu n c ng nitrate n c gi m so v i môi tr &ng nh Ph l c 20 L 103 i ch ng Ph l c 21 M t t" bào Nitrosomonas h p ph ch t mang theo th&i gian Ph l c 22 M t t" bào Nitrobacter h p ph ch t mang theo th&i gian 104 LÝ L CH TRÍCH NGANG H tên: LÊ TI N D NG Ngày, tháng, n m sinh: 04/5/1964 N i sinh: Ti n Giang a ch+ liên l c - C quan: Tr &ng Trung h c Th,y s n, 511 An D ng V ng - P.An L c A - Q Bình Tân – TPHCM - Nhà riêng: 28 Lê Sao - P Phú Th nh - Q Tân Phú - TPHCM + QUÁ TRÌNH ÀO T O - T( 8/1982 "n 7/1987: H c i h c, khoa Th,y s n Tr &ng ih c Nông Lâm TPHCM - T( 9/2007 Tr &ng "n nay: H c cao h c, ngành Công ngh sinh h c i h c Bách khoa TPHCM + Q TRÌNH CƠNG TÁC - T( 8/1987 "n 7/1989: Cán b k) thu t, TCng công ty Xu t kh u Th,y s n Vi t Nam SEAPRODEX - T( 8/1989 "n nay: Giáo viên Tr &ng Trung h c Th,y s n, TPHCM 105 ... tôm sú Penaeus monodon 30 Hình 2.26 Bu trùng Zoea c,a tơm sú Penaeus monodon 31 Hình 2.27 Bu trùng Mysis c,a tôm sú Penaeus monodon 31 Hình 2.28 H u u trùng Post larvae c,a tơm sú Penaeus. .. nh h vi khu n Nitrosomonas sp Nitrobacter sp bacterial cellulose (BC) ng d ng chuy n hóa amonia n c ng u trùng tơm sú Penaeus monodon 2- NHI M V LU N V N: - C nh h vi khu n Nitrosomonas Nitrobacter. .. nh t" bào vi sinh v t 28 2.4 K) thu t ng nuôi u trùng tôm sú Penaeus monodon 30 2.4.1 Các giai o n phát tri n c,a u trùng tôm sú 30 2.4.2 Quy trình k) thu t ng ni u trùng tôm sú .32