Khảo sát thành phần loài và mật độ vi khuẩn vibrio trong môi trường nước vùng nuôi tôm hùm lồng tại vịnh xuân đài, tỉnh phú yên

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC NHA TRANG VÕ VĂN TÂN KHẢO SÁT THÀNH PHẦN LOÀI VÀ MẬT ĐỘ VI KHUẨN VIBRIO TRONG MÔI TRƯỜNG NƯỚC VÙNG NUÔI TÔM HÙM LỒNG TẠI VỊNH XUÂN ĐÀI, TỈNH PHÚ YÊN LUẬN VĂN THẠC SĨ KHÁNH HÒA - 2019 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC NHA TRANG VÕ VĂN TÂN KHẢO SÁT THÀNH PHẦN LOÀI VÀ MẬT ĐỘ VI KHUẨN VIBRIO TRONG MÔI TRƯỜNG NƯỚC VÙNG NUÔI TÔM HÙM LỒNG TẠI VỊNH XUÂN ĐÀI, TỈNH PHÚ YÊN LUẬN VĂN THẠC SĨ Ngành: Nuôi trồng Thủy sản Mã ngành: 8620301 Mã học viên: 59CH276 Quyết định giao đề tài: 1154/QĐ-ĐHNT ngày 27/9/2018 Quyết định thành lập hội đồng: Ngày bảo vệ: Người hướng dẫn khoa học: TS NGUYỄN TẤN SỸ Chủ tịch Hội Đồng: Phòng Đào tạo Sau Đại học: KHÁNH HỊA - 2019 LỜI CAM ĐOAN Tơi xin cam đoan luận văn “Khảo sát thành phần loài mật độ vi khuẩn Vibrio môi trường nước vùng nuôi tôm hùm lồng Vịnh Xuân Đài, tỉnh Phú Yên” thực từ tháng 03/2018 đến tháng 06/2019, số liệu, kết trình bày luận văn trung thực xác Một phần nghiên cứu luận văn phần nội dung nghiên cứu thuộc Nhiệm vụ Quan trắc, cảnh báo giám sát môi trường vùng nuôi tôm nước lợ, nuôi tôm hùm tập trung số tỉnh Nam Trung Bộ, Trung tâm Quan trắc môi trường bệnh thủy sản miền Trung thực năm 2018 Tôi chủ nhiệm đề tài cho phép sử dụng kết nghiên cứu với tư cách thành viên nghiên cứu Nhiệm vụ Khánh Hòa, tháng năm 2019 Tác giả Võ Văn Tân iii LỜI CẢM ƠN Để hoàn thành luận văn, nhận giúp đỡ từ thầy cô, quan ban ngành quan nơi công tác Trước hết, xin chân thành bày tỏ lời biết ơn đến thầy cô trường khoa Nuôi Trồng Thủy Sản, Đại học Nha Trang giúp tơi có kiến thức chun ngành bản, quý báu cần thiết Chân thành cảm ơn TS Nguyễn Tấn Sỹ trực tiếp hướng dẫn, định hướng giúp đỡ suốt trình thực đề tài Chân thành cảm ơn tập thể cán Trung tâm Quan trắc môi trường bệnh thủy sản miền Trung - Viện Nghiên cứu Nuôi trồng Thủy sản III tạo điều kiện thuận lợi cho học tập thực đề tài; tạo điều kiện thuận lợi hóa chất , mơi trường trang thiết bị q trình phân tích mẫu Đồng thời phép kết hợp thực sử dụng số liệu phân tích thuộc nhiệm vụ Quan trắc giám sát môi trường năm 2018 thực Trung tâm Chân thành cảm ơn quan chức tỉnh Phú Yên bà ngư dân nuôi tôm hùm lồng vịnh Xuân Đài giúp đỡ thời gian điều tra thu mẫu Cuối xin gởi lời cảm ơn đến anh chị em đồng nghiệp bạn lớp cao học giúp đỡ suốt thời gian học tập Trân trọng cảm ơn./ Khánh Hịa, tháng năm 2019 Tác giả Võ Văn Tân iv MỤC LỤC LỜI CAM ĐOAN iii LỜI CẢM ƠN .iv MỤC LỤC .v DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT .vii DANH MỤC BẢNG viii DANH MỤC HÌNH .ix TRÍCH YẾU LUẬN VĂN x MỞ ĐẦU CHƯƠNG 1: TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1.1 Hệ thống phân loại 1.1.2 Đặc điểm hình thái, sinh lý, sinh hóa .3 1.1.3 Yếu tố gây độc 1.2 Đặc điểm dịch tễ vi khuẩn Vibrio 1.2.1 Đặc điểm phân bố 1.2.2 Ký chủ 1.2.3 Giai đoạn phát triển 1.2.4 Mùa vụ xuất bệnh 1.3 Các loài Vibrio gây bệnh thường gặp nuôi trồng thủy sản 1.3.1 Loài V parahaemolyticus .7 1.3.2 Loài V alginolyticus 1.3.3 Loài V cholera .9 1.3.4 Loài V vulnificus 1.3.5 Loài V fluvialis 10 1.3.6 Loài V anguillarum 10 1.4 Tình hình nuôi tôm hùm lồng giới nước ta 10 1.4.1 Tình hình nuôi tôm hùm lồng giới 10 1.4.2 Tình hình ni tơm hùm lồng Việt Nam 12 1.5 Tình hình nghiên cứu bệnh vi khuẩn Vibrio gây tôm hùm 12 1.5.1 Tình hình nghiên cứu giới bệnh Vibrio gây tôm hùm 12 1.5.2 Tình hình nghiên cứu nước ta bệnh Vibrio gây tôm hùm 14 1.6 Vị trí địa lý, đặc điểm mơi trường trạng nuôi trồng thủy sản vịnh Xuân Đài 15 v CHƯƠNG 2: PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 17 2.1 Đối tượng phạm vi nghiên cứu 17 2.2 Sơ đồ khối nội dung nghiên cứu 17 2.3 Phương pháp điều tra xác định thực trạng nuôi bệnh tôm hùm lồng vịnh Xuân Đài, tỉnh Phú Yên 18 2.4 Phương pháp xác định số lượng Vibrio tổng số môi trường nước theo vùng, vị trí thời gian thu mẫu vịnh Xuân Đài, tỉnh Phú Yên 18 2.4.1 Phương pháp thu, bảo quản vận chuyển mẫu 18 2.4.2 Phương pháp định lượng vi khuẩn Vibrio tổng số 19 2.5 Phương pháp xác định thành phần lồi Vibrio mơi trường nước theo vùng, vị trí thời gian thu mẫu vịnh Xuân Đài, tỉnh Phú Yên 20 CHƯƠNG 3: KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 22 3.1 Thực trạng nuôi bệnh tôm hùm nuôi lồng vịnh Xuân Đài 22 3.2 Kết khảo sát số lượng Vibrio môi trường nước vùng nuôi tôm hùm lồng vịnh Xuân Đài 25 3.2.1 Số lượng Vibrio nước theo vùng địa lý khác vịnh Xuân Đài 25 3.2.2 Số lượng Vibrio nước vị trí thu mẫu khác theo mặt cắt ngang vịnh Xuân Đài 28 3.2.3 Số lượng Vibrio nước theo thời gian thu mẫu vịnh Xuân Đài 30 3.3 Kết định danh Vibrio môi trường nước vùng nuôi tôm hùm lồng vịnh Xuân Đài 32 3.3.1 Kết định danh Vibrio môi trường nước vùng nuôi tôm hùm lồng vịnh Xuân Đài 32 3.3.2 Tỷ lệ xuất lồi Vibrio theo vùng, vị trí thời gian thu mẫu 36 CHƯƠNG 4: KẾT LUẬN VÀ KHUYẾN NGHỊ 39 4.1 Kết luận 39 4.2 Khuyến nghị 39 DANH MỤC TÀI LIỆU THAM KHẢO 40 vi DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT API : Analytical Profile Index CFU : Colony Forming Units - Đơn vị khuẩn lạc KN : Khu nuôi tôm hùm PN : Phía ngồi khu ni TSA : Tryptone Soya Agar TCBS : Thiosulfate Citrate Bile Salts TCVN : Tiêu chuẩn Việt Nam UBND : Ủy ban nhân dân VB : Ven bờ vii DANH MỤC BẢNG Bảng 2.1 Địa điểm số lượng mẫu nước thu vịnh Xuân Đài năm 2018 (từ tháng – 8/2018) 19 Bảng 2.2 Số lượng, vị trí thời gian thu mẫu nước phân tích thành phần lồi Vibrio vịnh Xuân Đài 20 Bảng 3.1 Các thông số kỹ thuật lồng nuôi tôm hùm vịnh Xuân Đài 22 Bảng 3.2 Mùa vụ thả giống tôm hùm vịnh Xuân Đài 23 Bảng 3.3 Mật độ ni tơm hùm theo kích cỡ tơm ni 23 Bảng 3.4 Các bệnh thường gặp tôm hùm nuôi lồng (vịnh Xuân Đài) tác hại 24 Bảng 3.5 Các biện pháp phòng bệnh tôm hùm nuôi lồng vịnh Xuân Đài 25 Bảng 3.6 Kết khảo sát số lượng vi khuẩn Vibrio nước vùng nuôi tôm hùm lồng tập trung thuộc vịnh Xuân Đài năm 2018 25 Bảng 3.7 Kết khảo sát số lượng vi khuẩn Vibrio nước vùng ni tơm hùm vị trí thu mẫu khác theo mặt cắt ngang vịnh Xuân Đài năm 2018 28 Bảng 3.8 Đặc điểm sinh hóa chủng Vibrio phân lập mơi trường nước vùng nuôi tôm hùm lồng vịnh Xuân Đài 34 Bảng 3.9 Tần suất tỷ lệ lồi Vibrio mơi trường nước vùng nuôi tôm hùm lồng thu vịnh Xuân Đài năm 2018 36 Bảng 3.10 Tần suất tỷ lệ bắt gặp loài Vibrio nước vị trí thu mẫu khác theo mặt cắt ngang (ven bờ - khu ni – phía ngồi) vịnh Xuân Đài 37 Bảng 3.11 Tần suất tỷ lệ bắt gặp loài Vibrio nước theo vùng khảo sát (Xuân Phương, Xuân Thành, Xuân Yên) 37 Bảng 3.12 Tần suất tỷ lệ bắt gặp loài Vibrio nước vịnh Xuân Đài theo thời gian thu mẫu (từ tháng – 8/2018) 37 viii DANH MỤC TÀI LIỆU THAM KHẢO TÀI LIỆU TIẾNG VIỆT Nguyễn Đức Ái, Trịnh Thế Hiếu (2001), Về số đặc điểm trầm tích tầng mặt đáy vịnh Xuân Đài, tỉnh Phú Yên Tuyển tập Nghiên cứu biển, 2001, tập 11, 79-88 Đỗ Thị Vân Anh (2015), Phân lập xác định đặc tính sinh học vi khuẩn Vibrio parahaemolyticus gây bệnh hoại tử gan thận số lồi cá biển vùng biển Hải Phịng, Khóa luận tốt nghiệp, Viện Đại học Mở Hà Nội, Hà Nội Bộ Thủy sản (2004), Qui trình chẩn đốn bệnh vi rút đốm trắng lồi thuộc họ tơm he kỹ thuật polymerase chain reaction, Danh mục tiêu chuẩn ngành thủy sản 28 TCN 202:2004 Huỳnh Văn Cánh (2010), Hiện trạng kỹ thuật ương nuôi bệnh tôm hùm (Panulirus spp) giống (≤5g/con) Phú Yên Bình Định Luận văn Thạc sĩ, trường Đại học Nha Trang Thái Ngọc Chiến (2012), Bảo vệ, khai thác hợp lý phát triển nguồn lợi tôm hùm giống vùng biển Xuân Đài An Chấn, tỉnh Phú Yên, Báo cáo tổng kết đề tài cấp tỉnh, Viện Nghiên cứu Nuôi trồng Thủy sản III Nguyễn Văn Duy, Nguyễn Thị Cẩm Ly (2012), “Phân lập xác định gen độc tố Vibrio parahaemolyticus hải sản tươi sống Nha Trang”, Tạp chí Khoa học – Công nghệ thủy sản, Đại học Nha Trang, Số 2/2012 Dự án nguồn lợi ven biển phát triển bền vững (CRSD – Cr.5113-VN, 2016), Quy hoạch nuôi trồng thủy sản nước lợ, mặn vùng ven biển tỉnh Phú Yên đến năm 2025, tầm nhìn đến năm 2030 Nguyễn Thị Đấu, Nguyễn Thùy Linh, Hồ Thị Việt Thu Hà Thanh Toàn (2014), “Tỷ lệ nhiễm đề kháng kháng sinh vi khuẩn Vibrio spp phân lập từ huyết heo, nghêu phân bệnh nhân tiêu chảy tỉnh Trà Vinh”, Tạp chí Khoa học, Trường Đại học Cần Thơ, Phần B: Nông nghiệp, Thủy sản Công nghệ Sinh học: 33 (2014): 61-67 Đỗ Thị Hòa (1996), Nghiên cứu số bệnh chủ yếu tôm sú (Penaeus monodon Fabricus, 1978) nuôi khu vực Nam Trung Bộ, Luận văn Phó tiến sĩ Khoa học nông nghiệp, Đại học Thủy sản 10 Đỗ Thị Hòa, Bùi Quang Tề, Nguyễn Hữu Dũng Nguyễn Thị Muội (2004), Bệnh học Thủy sản, NXB Nông nghiệp, Tp Hồ Chí Minh 40 11 Võ Văn Nha (2003), Kết bước đầu nghiên cứu số bệnh thường gặp tôm hùm nuôi lồng vùng biển Sông Cầu, Phú Yên Thông tin khoa học công nghệ kinh tế Thủy sản, 02, tr 16-18 12 Võ Văn Nha (2004), "Hiện trạng nghề nuôi bệnh tôm hùm Việt Nam Hướng nghiên cứu tôm hùm tương lai", Tuyển tập hội thảo toàn quốc nghiên cứu ứng dụng công nghệ NTTS (22-23/12/2004) Vũng Tàu, pp 615-626 Nxb Nông nghiệp 13 Võ Văn Nha (2005) Nghiên cứu số bệnh thường gặp vi khuẩn, ký sinh trùng gây tôm Hùm Bông nuôi lồng vùng biển Phú Yên, Khánh Hồ biện pháp phịng trị, Báo cáo tổng kết khoa học kỹ thuật đề tài, Viện Nghiên cứu Nuôi trồng Thuỷ sản III, Nha Trang 14 Võ Văn Nha (2007), Nghiên cứu xây dựng giải pháp bảo vệ phát triển nguồn lợi tôm hùm, Báo cáo tổng kết khoa học kỹ thuật đề tài, Viện Nghiên cứu Nuôi trồng Thủy sản III, Nha Trang 15 Võ Văn Nha, Trần Thị Hương (2014), “Ảnh hưởng Vibrio Vibrio mang Phage lên hậu ấu trùng (Postlarvae) tôm sú tơm thẻ chân trắng điều kiện thí nghiệm”, Tạp chí Khoa học - Cơng nghệ Thủy sản, Trường Đại học Nha Trang, Số 4/2014 16 Đặng Thị Hoàng Oanh, Đoàn Nhật Phương, Nguyễn Thị Thu Hằng Nguyễn Thanh Phương (2006), “Xác định vị trí phân loại khả kháng thuốc kháng sinh vi khuẩn Vibrio phát sáng phân lập từ hậu ấu trùng tôm sú (Penaeus monodon), Tạp chí Nghiên cứu Khoa học, Trường Đại học Cần Thơ, 2006: 42-52 17 Viên Đại Phúc (2011), Tìm hiểu tác nhân gây bệnh lở loét cá chẽm (Lates calcarifer) nuôi lồng biển Nha Trang - Khánh Hòa, Báo cáo Luận văn Thạc sĩ, Viện nghiên cứu Nghiên cứu nuôi trồng thủy sản III, Khánh Hòa 18 Quyết định 2383/QĐ-BNN-NTTS ngày 06/08/2008 Bộ NN&PTNT, ban hành quy định tạm thời nuôi tôm hùm lồng 19 Sở Nông nghiệp Phát triển nông thôn tỉnh Phú n (2011-2015), Tình hình sản xuất, ni trồng thuỷ sản từ năm 2011-2015, Phú Yên 20 Nguyễn Thu Tâm, Nguyễn Phúc Khánh Phan Thị Hồng Nhung (2014), “Tình hình nhiễm vi khuẩn Vibrio spp tơm bạc (Penaeus merguiensis), tôm sú (Penaeus monodon), tôm rảo đất (Metapenaeus ensis) số chợ thược quận Ninh Kiều, thành phố Cần Thơ”, Tạp chí Khoa học, Trường Đại học Cần Thơ, Số chuyên đề: Nông nghiệp (2014) (2): 111-115 41 21 TCN 101:1997, Quy trình kiểm dịch động vật thuỷ sản sản phẩm động vật thuỷ sản 22 TCVN 5998:1995 (ISO 5667-9: 1992) chất lượng nước - lấy mẫu - hướng dẫn lấy mẫu nước biển 23 TCVN 6663-6:2008 ISO 5667-6:2005 Chất lượng nước - Lấy mẫu 24 Tổng Cục thủy sản (2014), Báo cáo tổng kết hàng năm số liệu thống kê ngành thủy sản tỉnh miền Trung năm giai đoạn 2010-2014, Hà Nội 25 Tổng cục Thủy sản (2018), Báo cáo trạng nuôi tôm hùm Việt Nam định hướng phát triển đến năm 2025, Hội nghị chuyên đề thủy sản tỉnh Phú Yên (ngày 06/04/2018), Phú Yên 26 Lê Thị Nam Thuận, Hoàng Thị Hà Giang (2017), Một số dẫn liệu môi trường dịch bệnh vùng nuôi trồng thủy sản vịnh Xuân Đài, tỉnh Phú Yên, Hội nghị Khoa học toàn quốc sinh thái tài nguyên sinh vật lần thứ 7, Sở Tài nguyên môi trường tỉnh Phú Yên 27 Trần Linh Thước (2008), Phương pháp phân tích vi sinh vật nước, thực phẩm mỹ phẩm, Nhà xuất Giáo dục 28 Nguyễn Thanh Tùng (2015), Quy hoạch phát triển nuôi trồng thủy sản tỉnh miền Trung đến năm 2020 định hướng đến năm 2030, Báo cáo tổng hợp, Viện Kinh tế Quy hoạch thủy sản 29 Võ Thị Ngọc Trâm (2014), Xây dựng giải pháp quản lý, kiểm sốt khống chế bệnh sữa tơm hùm tỉnh Phú Yên, Khánh Hòa, Báo cáo tổng kết kết nhiệm vụ khoa học công nghệ cấp Bộ, Viện Nghiên cứu Nuôi trồng Thủy sản III 30 Huỳnh Ngọc Trưởng, Trần Thị Ngọc Thanh, Nguyễn Tiến Dũng (2015), “Tình hình nhiễm tỷ lệ kháng thuốc Vibrio spp phân lập từ thủy sản nước nuôi Tiền Giang”, Tạp chí Khoa học Đại học Sư phạm Thành phố Hồ Chí Minh, Số (67) 31 Nguyễn Tường Vy (2014), Nghiên cứu mức độ kháng kháng sinh Vibrio alginolytichs tôm hùm (Panulirus ornatus) bị bệnh đỏ thân nuôi lồng tạo tỉnh Phú Yên, Báo cáo Luận văn Thạc sĩ, Trường Đại học Nha Trang 42 TÀI LIỆU TIẾNG ANH 32 Abraham T J., Rahman Md K & Joseph M T L (1996), “Bacterial disease in cultured spiny lobster, Panulirus homarus (Linnaeus)”, J Aqua Trop., 11, pp 187-192 33 Aguirre-Guzmán G , H Mejia Ru›z and F Ascencio (2004), "A review of extracellular virulence product of Vibrio species important in diseases of cultivated shrimp", Aquac Res 35, pp 1395–1404 34 Alsina M., Martinez-Picado J., Jofre J and Blanch A R (1994), “American Society for Microbiology A Medium for Presumptive Identification of Vibrio anguillarum”, Department of Microbiology, University of Barcelona, 08028 Barcelona, Catalonia, Spain, May 1994, p 1681-1683 Vol 60, No 35 Austin B (2007), "Bacterial fish pathogens Disease of farmed and wild fish", Fourth Edition Springer 36 Barrow G.I & R.K.A Feltham (1993), Covan and Steel's manual for the identification of medical bacteria, 3nd edn, Cambridge University Press, Cambridge 37 Chowdhury G., Sarkar A., Pazhani G P., Mukhopadhyay A K., Bhattacharya M K., Ramamurthy T (2013), “An outbreak of foodborne gastroenteritis caused by dual pathogens, Salmonella enterica serovar Weltevreden and Vibrio fluvialis in Kolkata, India”, Foodborne Pathog Dis 10 904–906 38 Denis Saulnier, Phillipe Haffner, Cyrille Goarant, Peva Levy, Dominique Ansquer (2000), “Experimental infection models for shrimp Vibriosis studies: a review, Aquaculture”, 191: 133-144 DOI: 10.1016/S0044- 8486(00)00423-3 39 Diggles B K., Mos G A., Carson J & Anderson C D (2000), “Luminous vibriosis in rock lobster Jasus verreauxi (Decapoda: Palinuridae) phyllosoma larvae associated with infection by Vibrio harveyi”, Diseases of Aquatic Organisms, 43, pp 127-137 40 Esteve C., E G Biosca and C Amaro (1993), "Virulence of Aeromonas hydrophila and some other bacteria isolated from European eels Anguilla anguilla reared in fresh water Dis Aquat Org 16", pp 15–20 43 41 Evans L.H., and Brock, J.A (1994), “Disease of spiny lobster Spiny lobster Management”, Phillips B.F., Cobb J.S and Kittaka J (eds.), Fishing new books, Blackwell, London, p 461 – 472 42 Hickey ME, Lee J (2017), "A comprehensive review of Vibrio (Listonella) anguillarum: ecology, pathology and prevention" Reviews in Aquaculture 43 Hoa T.T.T, Oanh D.T.H and Phuong N.T (2001), "Characterization and pathogenicity of Vibrio Bacteria isolated from freshwater prawn (Macrobrachium rosenbergii) Harcheries", Part 1: Isolation and Identificationof Vibrio spp from Larval stages 44 Hörmansdorfer S., H Wentges, K Neugebaur-Büchler and J Bauer (2000), "Isolation of Vibrio alginolyticus from seawater aquaria, International Journal of Hygiene and Environmental Health Volume 203, Issue 2," pp 169-175 45 Imdad S., Chaurasia A K and Kim K K (2018), “Identification and Validation of an Antivirulence Agent Targeting HlyU-Regulated Virulence in Vibrio vulnificus”, Journal List, Front Cell Infect Microbiol, v.8; 2018, PMC5958221 46 Josenhans C and S Suerbaum (2002), "The role of motility as a virulence factor in bacteria", International journal of medical Microbiology Volume 291, Issue 8, pp 605-614 47 Juinio-Menez M A & Estrella (1995), Note on the breeding of Panulirus ornatus Fabricius (Decapoda: Palinuridae) in captivity, Philscientist: Special Issue, Proc rd Nat.Symp.Mar.Sci., pp 58-65 48 Juinio-Menez M A & Gotanco R (2004) “Status of spiny lobster Resources of the Philippines”, Spiny Lobster ecology and exploitation in the South China Sea region (ed By Kevin C Williams), pp 3-6, proceeding of a Workshop help at the institute of Oceanography, Nha Trang, Viet Nam 49 Kristiansen T.S., Drengstig A., Berheim A., Drengstig T., Svensen R., Kollsgard I., Nostvold E., Farestveit E & Aardal L (2004), Development of methods for intensive farming of European in recirculated seawater Results from experiments conducted at Kvitsoy hatchery from 2000 to 2004 Stavanger, Norway 50 Liang P., Cui X., Du X., Kan B., Liang W (2013), “The virulence phenotypes and molecular epidemiological characteristics of Vibrio fluvialis in China”, Gut Pathog 10.1186/1757-4749-5-6 44 51 Larsen J.L & K Pedersen (1999), Diagnostic schemes for Vibrio species 52 Narjol G , G M Blackstone and A DePaola (2006), "Characterization of a Vibrio alginolyticus Strain, Isolated from Alaskan Oysters, Carrying a Hemolysin Gene Similar to the Thermostable Direct Hemolysin-elated emolysin Gene (trh) of Vibrio parahaemolyticus.", Applied and Environmental Microbiology, Dec 2006, Vol 72, No 12, pp 7925–7929 53 Frerichs G N (1984, 1993), Isolation and Identification of fish bacterial pathogens, Institute of Aquacuture University of Stirling Scotland 54 Philips B.F and Kittaka J (2000), "Spiny lobster fisheries and culture”, WileyBlackwell, pp 6-25 55 Philips B.F (2006), Lobster, Biology, Management, aquaculture and fisheries, Blackwell, Blackwell, UK 56 Ramamurthy T., Chowdhury G., Pazhani G P and Shinoda S (2014), “Vibrio fluvialis: an emerging human pathogen”, Front Microbiol, v.5, 2014, PMC3948065 57 Shanmugasundaram S., Mayavu P., Manikandarajan T., Suriya M., Eswar A., Anbarasu R (2015), “Isolation and identification of Vibrio sp in the Hepatopancreas of cultured white pacific shrimp (Litopenaeus vannamei)” International Letters of Natural Sciences, Online: 2015-09-11 ISSN: 23009675, Vol 46, pp 52-59 58 Shields J D., Behringer Jr D C (2004), A new pathogenis virus in the caribbean spiny lobster Panulirus argus from the Florida keys Dis Aquat Org., Vol 59, p 109-118 59 Snoussi M, Noumi E, Usai D, Sechi L.A, Zanetti S and Bakhrouf A (2008), "Distribution of some virulence related-properties of Vibrio alginolyticus strains isolated from Mediterranean seawater (Bay of Khenis, Tunisia): investigation of eight Vibrio cholerae virulence genes", Word J Microbiol Biotechnol 24, pp 2133-2141 60 Tall B D., Fall S., Preira M R., Ramos – Valle M., Curtis S K., Kothary M H., Chu D M T., Monday S R., Kornegay L., Donkar T., Prince D., Thunberg R L., Shangaraw K A., Hanes D E., Khambaty F M., Lampel K A., Bier J., & Bayer R C (2003), “Characterization of Vibrio fluvialis – Like Strains Implicated in Limp Lobster Disease”, Microbiology, Vol.69 No 12, pp 7435-7446 45 Applied and Environmental 61 UK Standards for Microbiology Investigations (2014), Identification of Vibrio species, Issued by the Standards Unit, Microbiology Services, PHE Bacteriology – Identification ID 19, Issue no: 2.2, Issue date: 11.03.14, Page: of 17 62 Vesth T, Wassenaar T M, Hallin P F, Snipen L, Lagesen K and Ussery D W (2010), “On the origins of a Vibrio species”, Microb Ecol, 59:1-13 63 Wang Q., Q Liu, Y Ma, H Rui and Y Zhang (2007), "LuxO controls extracellular protease, haemolytic activities and siderophore production in fish pathogen Vibrio alginolyticus, J Appl Microbiol 103", pp 1525–1534 64 William, K.C., 2004 Spiny lobster ecology and exploitation in the South China Sea region, Proceedings of wookshop held at the I.O, Nha Trang, Viet Nam, pp.40 65 West P.A & R.R Colwell (1984), Identification and classification of Vibrionaceae-an overview, Pp 285-363 in: R.R Colwell (edn), Vibrios in the environment, John Wiley & Sons, New York 66 Woo PT, Cipriano RC (2017), Fish Viruses and Bacteria: Pathobiology and Protection, CABI WEBSITE 67 https://www.tripadvisor.com.vn, truy cập ngày 10/05/2019 46 PHỤ LỤC 1: PHIẾU ĐIỀU TRA HIỆN TRẠNG NUÔI VÀ BỆNH TRÊN TÔM HÙM NUÔI LỒNG I THÔNG TIN CHUNG CỦA HỘ: Họ tên: ………………… Tuổi: ………… Nam (nữ) ……… Nơi ở: Thôn ………………… Xã ………………………………… Huyện ………………… Tỉnh …………………………… Trình độ học vấn chủ hộ: Cấp Cấp Cấp Không biết chữ Trung cấp Đại học đại học Trình độ chun mơn chủ hộ: Không cấp Sơ cấp Số năm kinh nghiệm: …………năm II HIỆN TRẠNG NI Hình thức ni Lồng cố định (lồng găm) Lồng di chuyển(lồng sắt) Bè Lồng ni: Loại lồng Thể tích lồng (m3) Số lượng lồng (cái) Khoảng cách lồng Độ sâu mực nước đặt lồng(m) Lồng cách đáy Ương giống trắng Giống bị cạp Tơm lứa Tơm thương phẩm Loại tơm nuôi nguồn giống (đánh dấu X vào ô chọn) Nguồn giống Loại tôm nuôi Nội tỉnh Tôm hùm Tôm hùm đá Tôm hùm tre Tôm hùm ma Tôm hùm khác ……………… Ngoại tỉnh Tự khai thác Nhập Mùa vụ thả ni chính: từ tháng………………… …đến tháng…………………………… Mùa vụ thả nuôi phụ: từ tháng………………… đến tháng……………………………… 10 Kích thướt giống mật độ thả giống Cỡ giống Giống trắng (0.2-3 g/con) Giống bị cạp (3-100 g/con) Tơm lứa Tôm thương phẩm (100-200g/con) Mật độ 11 Nguồn giống có kiểm tra bệnh hay khơng? Có Khơng Kiểm tra bệnh: ……………………………………………………………… 12 Loại thức ăn sử dụng nuôi tôm Thức ăn tươi sống Thức ăn chế biến 13 Thành phần thức ăn : Giáp xác loài - Thân mềm loài - % Cá Loài - % % 14 Tỷ lệ cho ăn Giống trắng (0.2-3 g/con) Giống bị cạp (3-100 g/con) Tơm lứa (100-200g/con) Tôm thương phẩm số lần cho ăn/ngày Thời gian cho ăn/ngày lượng thức ăn (kg/lồng/ngày) 15 Trong trình ni ơng/bà có kiểm tra lồng ni khơng? Có Khơng Nếu có định kỳ kiểm tra: ……………………………………………………… 16 Ơng bà cho biết biện pháp phịng, trị bệnh tơm hùm mà ơng bà sử dụng? Phịng bệnh: Vệ sinh lồng bè Dùng hóa chất, kháng sinh Trị bệnh: Dọn thức ăn thừa Treo túi vôi/chlorine Nhốt riêng đực, Chuyển lồng Dùng hóa chất, kháng sinh Thay lồng 17 Sau vụ ni ơng/bà có vệ sinh lại lồng bè khơng Có Khơng III TÌNH HÌNH BỆNH TƠM HÙM NI LỒNG 18 Trong q trình ni ơng/bà có gặp bệnh tơm hùm ni lồng bè khơng? Có Khơng Nếu có ông/bà ghi cụ thể bảng phía Tên bệnh Dấu hiệu bệnh lý Giai Tỉ lệ Tỉ lệ Có lây Tôm bị đoạn lồng bị chết lan bệnh tôm bị bệnh lồng tháng bệnh Năm bị bệnh Đỏ thân Bệnh sữa Đen mang 19 Khi bệnh xảy có vấn đề bất thường? Nắng nóng kéo dài mưa kéo dài Độ mặn giảm Độ giảm Vấn đề khác:…………………………………………………………………… 20 Ơng/bà có sử dụng kháng sinh phịng trị bệnh tơm hùm khơng? Có Khơng 21 Ơng/bà sử dụng thuốc kháng sinh năm rồi? ………………………… 22 Ông/bà thường sử dụng thuốc cho tôm vào thời điểm nào? Khi dich bệnh xảy Tơm có dấu hiêu bệnh Tơm bắt đầu chết rải rác Định kỳ 23 Trong q trình ni ơng/bà có sử dụng hóa chất để phịng trị bệnh cho tơm hùm lồng (bè) ni khơng? Có Khơng Nếu có đánh dấu vào loại hóa chấtđã dùng: Formol ChlorineH2O2 KMnO4 (thuốc tím) khác ………… Phương pháp sử dụng: ……………………………………………………………… Hiệu sử dụng: …………………………………………………………………… 24 Trong trình ni ơng/bà có sử dụng vitamin cho tơm hùm lồng (bè) ni khơng? Có Khơng Nếu có đánh dấu vào loại vitamin dùng: Vitamin C Vitamin B Vitamin tổng hợp Khác ………… Phương pháp sử dụng: ……………………………………………………………… Hiệu sử dụng: …………………………………………………………………… 25 Trong trình ni ơng/bà có sử dụng men vi sinh cho tơm hùm lồng (bè) ni khơng? Có Khơng Nếu có đánh dấu vào loại men vi sinh dùng: Navet-BiozymQM-PROBIOTIC BoRemid Aqua Khác ………… Phương pháp sử dụng: ……………………………………………………………… Hiệu sử dụng: …………………………………………………………………… Chủ hộ Điều tra viên (ký, ghi rõ họ tên) (ký, ghi rõ họ tên) PHỤ LỤC 2: MỘT SỐ HÌNH ẢNH QUÁ TRÌNH ĐIỀU TRA, THU MẪU TẠI VỊNH XUÂN ĐÀI Hình Vùng nuôi tôm hùm lồng phường Xuân Yên, vịnh Xuân Đài Hình Đi ghe thu mẫu nước vùng ni phía ngồi vùng ni xã Xn Phương, vịnh Xuân Đài Hình Thu mẫu gàu chuyên dụng PHỤ LỤC 3: MỘT SỐ HÌNH ẢNH PHÂN TÍCH MẪU TẠI PHỊNG THÍ NGHIỆM Hình Phân tích định lượng Vibrio mơi trường TCBS Hình Làm khuẩn lạc Vibrio TCBS Hình Hệ thống định danh kít API 20E IDS 14GNR ... dân nuôi tôm hùm lồng Xác định thành phần lồi vi khuẩn Vibrio mơi trường nước nuôi tôm hùm lồng Vịnh Xuân Đài, tỉnh Xác định mật độ vi khuẩn Vibrio tổng số môi trường nước nuôi tôm hùm lồng Vịnh. ..BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC NHA TRANG VÕ VĂN TÂN KHẢO SÁT THÀNH PHẦN LOÀI VÀ MẬT ĐỘ VI KHUẨN VIBRIO TRONG MÔI TRƯỜNG NƯỚC VÙNG NUÔI TÔM HÙM LỒNG TẠI VỊNH XUÂN ĐÀI, TỈNH PHÚ YÊN LUẬN VĂN... nuôi tôm hùm lồng vịnh Xuân Đài, tỉnh Phú Yên? ?? Mục tiêu đề tài Xác định thành phần loài mật độ vi khuẩn Vibrio môi trường nước vùng nuôi tôm hùm lồng vịnh Xuân Đài, tỉnh Phú Yên Nội dung nghiên