Tài liệu và câu hỏi tuyển dụng vị trí: Kỹ thuật y trung cấp chuyên ngành xét nghiệm (kiến thức chuyên ngành)

- Lấy 2ml máu tĩnh mạch trực tiếp từ người bệnh (theo quy trình lấy máu tĩnh mạch), cho vào ống chống đông, lắc đều hoặc nhận ống máu người bệnh do điều dưỡng lấy sẵn (mẫu máu phải đạt [r]

Trang 1

TÀI LIỆU VÀ CÂU HỎI KIỂM TRA, SÁT HẠCH

KIẾN THỨC CHUYÊN NGÀNH Tuyển dụng vị trí: Kỹ thuật y trung cấp chuyên ngành xét nghiệm

I TÀI LIỆU

- Quy trình kỹ thuật khám bệnh, chữa bệnh chuyên ngành Huyết Truyền máu-Miễn dịch-Di truyền ban hành kèm theo Quyết định số 4401/QĐ- BYT ngày 09/11/2012 của Bộ Y tế.

học Hướng dẫn quy trình kỹ thuật chuyên ngành Huyết họchọc Truyền máuhọc Miễn dịch-Di truyền- Sinh học phân tử, ban hành kèm theo Quyết định số 2017/QĐ-BYT ngày 09/6/2014 của Bộ Y tế.

máu Thông tư số 26/2013/TTmáu BYT ngày 16/9/2013 của Bộ trưởng Bộ Y tế

về hướng dẫn hoạt động truyền máu.

- Thông tư 01/2013/TT-BYT ngày 11 tháng 1 năm 2013 của Bộ Y tế về hướng dẫn thực hiện quản lý chất lượng xét nghiệm tại cơ sở khám bệnh, chữa bệnh.

- Hướng dẫn quy trình kỹ thuật chuyên ngành Hóa sinh, ban hành kèm theo Quyết định số 320/QĐ- BYT ngày 23/01/2014 của Bộ Y tế.

- Giáo trình Vi sinh vật Y học, Bộ môn Vi sinh vật - Trường Đại học Y DượcHuế, 2008

BỘ Y TẾ

- CỘNG HÒA XÃ HỘI CHỦ NGHĨA VIỆT NAM Độc lập - Tự do - Hạnh phúc

Số: 25/2012/TT-BYT Hà Nội, ngày 29 tháng 11 năm 2012

-

THÔNG TƯ

BAN HÀNH QUY CHUẨN KỸ THUẬT QUỐC GIA VỀ THỰC HÀNH VÀ AN TOÀN

SINH HỌC TẠI PHÒNG XÉT NGHIỆM

BỘ Y TẾ CỘNG HOÀ XÃ HỘI CHỦ NGHĨA VIỆT NAM

Số : 43 /2011/TT-BYT Độc lập - Tự do - Hạnh phúc

Hà Nội, ngày 05 tháng 12 năm 2011

Trang 2

THÔNG TƯ Quy định chế độ quản lý mẫu bệnh phẩm bệnh truyền nhiễm

II CÂU HỎI, ĐÁP ÁN

Câu số 1: Anh (chị) hãy nêu các loại kính hiển vi?

Đáp án:

Kính hiển vi quang học thường: Thường được dùng tại các

phòng thí nghiệm để xét nghiệm với mục đích quan sát hình

Kính hiển vi nền đen: Là loại kính hiển vi quang học nhưng

bộ phận tụ quang được thay thế bằng một cấu trúc khác để tạo

nền tối, hay sử dụng để quan sát sự di động của vi khuẩn 12

Kính hiển vi đối pha: Cũng là kính hiển vi quang học nhưng

Kính hiển vi huỳnh quang: Là kính hiển vi quang học nhưng

có nguồn sáng là đèn huỳnh quang, thường dùng để quan sát

Kính hiển vi điện tử: Ra đời từ năm 1940, hoạt động theo

nguyên lý là các bộ phận được đặt trong một trụ kính và tạo

chân không bằng một bơm hút Trong chân không, hoạt động

của điện tử không bị cản trở Các điện tử bắn xuyên qua mẫu

vật, được các vật kính và thị kính bằng từ trường lam tản rộng

ra (phân kỳ), sau cùng hiện lên màn huỳnh quang có bộ máy

Kính hiển vi gồm có giá kính, hệ thống chỉnh nhanh và tinh và

- Thân kính có hình cong để cầm và di chuyển dễ dàng 5

- Ống kính mang thị kính, có thể cố định hoặc quay lúc nới

- Bàn kính dùng để mang tiêu bản, có 2 ốc để di chuyển tiêu

bản theo những chiều thẳng góc với nhau, có kẹp để cố định

Trang 3

b Hệ thống điều chỉnh nhanh và tinh

Cần thiết để điều chỉnh tiêu bản Hệ thống gồm 2 ốc đặt trên

cùng một trục Ốc lớn (ốc vĩ cấp) điều chỉnh nhanh làm cho

hình ảnh hiện ra, ốc nhỏ (ốc vi cấp) điều chỉnh chậm và tinh

nhằm điều chỉnh cho ảnh thật rõ Chỉ khi nào ảnh hiện ra khi

điều chỉnh ốc lớn rồi mới vặn ốc nhỏ để làm rõ ảnh.

đại mẫu vật quan sát Nó gồm một số thấu kính, thấu kính

ngoài cùng hướng vào vật quan sát gọi là thấu kính trực diện.

Có 2 loại vật kính:

+ Vật kính khô: Có độ phóng đại nhỏ, đường kính thấu kính

tương đối lớn như vật kính 10, vật kính 40.

+ Vật kính dầu: Có độ phóng đại lớn, hay dùng là vật kính

100, thấu kính có đường kính nhỏ Vì vậy chỉ một phần của

chùm tia sáng chiếu lọt vào vật kính, một phần ánh sáng bị

khúc xạ ra ngoài nên ảnh không rõ, muốn có ảnh rõ phải đặt

vào giữa mẫu vật và vật kính một giọt dầu.

5

- Kính tụ quang gồm có một hệ thống thấu kính tập trung ánh

sáng và một hệ thống chắn sáng có nhiệm vụ giảm bớt góc

của hình nón ánh sáng thế nào để sau khi qua mẫu vật và đến

vật kính thì nó không vượt qua đường kính của thấu kính trực

diện

5

- Đèn chiếu đặt ngay dưới tụ quang cung cấp một nguồn sáng

- Gương phản chiếu: Lúc không có điện thì sử dụng ánh sáng

mặt trời bằng gương phản chiếu, gương có một mặt phẳng và

một mặt lõm Mặt phẳng được sử dụng để phản chiếu ánh

sáng mặt trời con mặt lõm được dùng để phản chiếu ánh sáng

nhân tạo như đèn neon

5

Câu số 3: Anh (chị) hãy nêu cách sử dụng và bảo quản kính hiển vi? Đáp án:

1 Các bước để soi bằng vật kính dầu

- Nhỏ giọt dầu lên chỗ quan sát của tiêu bản di chuyển tiêu

bản để giọt dầu nằm giữa vòng tròn của bàn kính 5

- Mắt nhìn vào vật kính, vặn ốc vĩ cấp để nâng tiêu bản từ từ

- Bật đèn chỉnh tụ quang để có ánh sáng phù hợp 5

Trang 4

- Mắt nhìn vào thị kính, vặn ốc vĩ cấp để hạ bàn kính từ từ

xuống cho đến khi nhìn thấy ảnh Dùng ốc vi cấp để chỉnh

ảnh cho thật rõ Nếu không nhìn thấy ảnh thì tiếp tục nâng

bàn kính lên rồi hạ bàn kính xuống

5

- Mắt nhìn vào thị kính, một tay vặn ốc vi cấp để điều chỉnh

khi cần, tay kia vặn ốc của bàn kính để quan sát tiêu bản 5

2 Ghi tọa độ của một điểm ở trên tiêu bản

Để có thể tìm trở lại một điểm cần quan sát ở trên tiêu bản

thì phải ghi tọa độ của điểm đó, muốn thế đọc hoành độ và

tung độ ở trên thước chia mm di động đồng thời với tiêu bản

và 2 du xích cố định 2 thước di động cũng như 2 du xích cố

định thẳng góc với nhau

5

3 Cách bảo quản kính hiển vi

Sau khi sử dụng, kính hiển vi phải được bảo quản tốt để sử

dụng lâu dài, cần thực hiện đầy đủ các bước sau:

- Lúc sử dụng xong, phải hạ bàn kính rồi mới lấy tiêu bản ra

khỏi bàn kính

5

- Dùng khăn đặc biệt để lau vật kính, nhúng một góc khăn

với ít xilen rồi lau vật kính dầu, xong lau khô với góc kia

- Đặt vật kính có độ phóng đại nhỏ nhất ở trên trục quang

- Điều chỉnh xe tiêu bản, tụ quang, bàn kính….đến các vị trí

mà đường trượt tiếp xúc ít nhất với bụi ở phía trên 5

- Lúc di chuyển đỡ đế kính bằng một tay, cầm chân kính ở

tay kia để giữ kính ở vị trí thẳng đứng như lúc đặt kính trên

Câu số 4: Anh (chị) hãy trình bày hình thể của vi khuẩn, cho ví dụ?

Đáp án:

1 Cầu khuẩn: Là những vi khuẩn hình cầu, hình trứng hay

Đơn cầu: Là những cầu khuẩn xếp hàng đều hoặc không đều,

đó là những tạp khuẩn tìm thấy trong nước và không khí 4 Song cầu: Là những cầu khuẩn xếp thành đôi phân chia trong

một mặt phẳng Ví dụ: phế cầu, lậu cầu, cầu khuẩn màng não 4

Tứ cầu: Các cầu khuẩn hợp thành 4, phân chia theo 2 mặt

Bát cầu: Các cầu khuẩn xếp thành 8-16 con, phân chia theo 3

Liên cầu: Là những cầu khuẩn xếp thành chuỗi dài hoặc ngắn,

ví dụ như Steptococcus pyogenes thuộc nhóm A của 4

Trang 5

Tụ cầu: Các cầu khuẩn hợp thành đám như chùm nho, một số

gây bệnh cho người và thường phát triển nhanh chóng tính đề

2 Trực khuẩn: Là những vi khuẩn có hình que thẳng. 7

Bacteria: Là những trực khuẩn hiếu khí, không sinh nha bào

Bacilli: Là những trực khuẩn hiếu khí tuyệt đối tạo nha bào

Clostridia: Là những trực khuẩn kỵ khí Gram dương sinh nha

bào như trực khuẩn uốn ván, trực khuẩn ngộ độc thịt 4

Phẩy khuẩn: Chỉ có một phần của hình xoắn nên có hình như

Xoắn khuẩn: Có nhiều vòng xoắn như xoắn khuẩn giang mai,

- Làm đông huyết tương người và thỏ, chống đông với Natri

citrat hoặc oxalat natri Coagulase làm dính tơ huyết vào bề

mặt vi khuẩn tạo ra cục máu đông xung quanh tế bào vi khuẩn

do đó cản trở sự thực bào

5

- Có 2 loại coagulase: 1 loại tiết ra môi trường gọi là

coagulase tự do, 1 loại bám vào vách tế bào gọi là coagulase

Coagulase dùng để phân biệt S.aureus với các tụ cầu khác như

S.epidermidis, S.saprophyticus không có men coagulase 5

2 Các enzym khác:

- Staphylokinase: Là một fibrinolysin làm tan tơ huyết 7

Klebsiella pneumoniae là loại vi khuẩn gây bệnh cơ hội, xảy

ra chủ yếu trong môi trường bệnh viện và trên những bệnh 15

Trang 6

nhân suy kiệt, suy giảm miễn dịch

Nhiễm trùng đường hô hấp dưới như viêm phổi thường gặp ở

trẻ sơ sinh, viêm phế quản phổi thứ phát sau cúm, sau sởi, sau

Nhiễm trùng đường máu: Thường gặp những bệnh nhân suy

- Phân lập xác định tụ cầu là việc cần thực hiện và không mấy

khó khăn Bệnh phẩm là máu, mủ, phân, đờm, dịch não tủy

E.coli là vi khuẩn chiếm nhiều nhất trong số các vi khuẩn hiếu

Tuy là vi khuẩn sống cộng sinh với người nhưng E.coli có thể

Nhiễm khuẩn quan trọng nhất là viêm dạ dày ruột ở trẻ em 13

Có thể gây ỉa chảy: Có nhiều cơ chế trong đó có 1 cơ chế do

Enterotoxin làm hút nước và chất điện giải vào lòng ruột gây

Trang 7

Tổng 65 Câu số 9: Anh (chị) hãy trình bày khả năng gây bệnh của vi khuẩn

E.coli?

Đáp án:

E.coli là vi khuẩn chiếm nhiều nhất trong số các vi khuẩn hiếu

Tuy là vi khuẩn sống cộng sinh với người nhưng E.coli có thể

Nhiễm khuẩn quan trọng nhất là viêm dạ dày ruột ở trẻ em 13

Có thể gây ỉa chảy: Có nhiều cơ chế trong đó có 1 cơ chế do

Enterotoxin làm hút nước và chất điện giải vào lòng ruột gây

Câu số 10: Anh (chị) hãy trình bày kỹ thuật nhuộm gram? Kết quả

nhuộm?

Đáp án:

Bước 1: Nhỏ dung dịch tím gentian len tiêu bản đã cố định

cho tác dụng một phút Nghiêng tiêu bản đổ thuốc nhuộm, rửa

Bước 2: Nhỏ dung dịch lugol lên tiêu bản cho tác dụng một

phút Nghiêng tiêu bản đổ dung dịch lugol, rửa nước nhẹ 12

Bước 3: Nhỏ vài giọt cồn len tiêu bản, nghiêng phiến kính

qua lại dể giọt cồn chảy trên phiến kính bên này sang bên kia,

mắt quan sát màu tím, khi nào vết bôi mất màu tím thì rửa

nước ngay

12

Bước 4: Nhỏ dung dịch safranin lên tiêu bản cho tác dụng một

phút Nghiêng tiêu bản đổ dung dịch, rửa nước nhẹ Thấm

Kết quả nhuộm cho thấy vi khuẩn gram dương bắt màu tím,

Câu số 11: Anh (chị) hãy trình bày kỹ thuật nhuộm Ziehl- Neelsen cổ

điển bằng nhiệt và kết quả soi kính ?

Đáp án:

- Bước 1: Phủ lên tiêu bản cố định một lớp fuchsin có phenol 15

Trang 8

hơ nóng dưới ngọn lửa cho đến khi khói trắng bốc lên để

nguội rồi tiếp tục làm lại như vậy 3 lần Rửa nước (chú ý

không để dung dịch thuốc nhuộm sôi hoặc khô)

- Bước 2: Ngâm tiêu bản vào dung dịch axít, cồn trong 3-5

phút cho đến khi tiêu bản không còn màu đỏ Rửa nước 15

- Bước 3: Phủ dung dịch xanh metylen kiềm cho tác dụng

* Kết quả soi kính: Vi khuẩn kháng axít như vi khuẩn lao,

BCG, vi khuẩn cùi bắt máu đỏ tươi Những vi khuẩn thông

thường tìm thấy trong đàm và các tế bào của tổ chức động vật,

bạch cầu, tế bào thượng bì bắt màu xanh Tất cả trên một nền

màu xanh nhạt

20

Câu số 12: Trình bày nguyên lý, các bước tiến hành, nhận định kết quả, những

sai sót và xử trí của xét nghiệm đường máu ( Glucose )?

Đáp án:

I NGUYÊN LÝ

Glucose là carbohydrate quan trọng nhất lưu hành trong máu ngoại vi Quá trình

đốt cháy glucose là nguồn chính cung cấp năng lượng cho tế bào

Glucose máu được định lượng theo phương pháp động học có sự tham gia của

Bệnh phẩm phải được lấy đúng kỹ thuật vào ống tiêu chuẩn Ly tâm trước khi

tiến hành kỹ thuật Có thể sử dụng huyết thanh hoặc huyết tương Bệnh phẩm

phải được ly tâm tách lấy huyết thanh, huyết tương ngay Bảo quản ở 15-25oC

trong vòng 8 giờ, ở 2-8oC được 72 giờ Rã đông một lần

Để bệnh phẩm, chuẩn, control ở nhiệt độ phòng (20-25oC) và lắc đều trước khi

20

Trang 9

tiến hành xét nghiệm.

2 Tiến hành kỹ thuật

- Máy móc, hóa chất đã được cài đặt và chuẩn trước khi thực hiện phân tích

Control nằm trong miền cho phép tùy thuộc vào kỹ thuật, thuốc thử của từng

công ty Thông thường chạy control- 2 miền: bình thường và bất thường Đối

chiếu với luật về nội kiểm chất lượng nếu đạt thì tiến hành phân tích mẫu

- Đưa bệnh phẩm vào phân tích theo protocol của máy Khi có kết quả thì phân

tích và đối chiếu với phiếu xét nghiệm và trả kết quả

III NHẬN ĐỊNH KẾT QUẢ

- Bình thường:

+ Người lớn: 3.9 - 6.4 mmol/l

+ Trẻ em: 3.3 - 5.6 mmol/l

+ Trẻ sơ sinh: 2.2 - 4.4 mmol/l

- Glucose máu tăng trong:

+ Đái tháo đường

+ Viêm tụy, ung thư tụy

+ U tủy thượng thận

+ Cường giáp

- Glucose máu giảm trong:

+ Suy tuyến yên, suy tuyến giáp

tâm và định lượng ngay gây

hiện tượng hủy đường

Làm giảm kết quả Sau 1 giờ giảm khoảng 7%

Sử dụng chất chống đôngNaF để tránh hủy đư

Lấy máu sau ănng Làm tăng kết quả Làm lại mẫu lúc đói

Trang 10

Nồng độ > dải đo (0,11-

41,6 mmol/L)

Sai lệch kết quả Rất ít gặp

Pha loãng bệnh phẩm

Câu số 13 Trình bày nguyên lý, các bước tiến hành, nhận định kết quả,

những sai sót và xử trí của đo hoạt độ ALT (Alanin transaminase).

Đáp án:

I NGUYÊN LÝ

Hoạt độ của enzym ALT trong máu của người bệnh được xác định theo phương

pháp động học enzyme dựa trên phản ứng:

Hoạt độ ALP được đo bằng sự giảm nồng độ NADH ở bước song 340 nm theo

thời gian

15

II CÁC BƯỚC TIẾN HÀNH

- Cài chương trình trên máy theo protocol của máy: chỉ làm khi bắt đầu triển khai

xét nghiệm trên máy và khi có thay đổi trong chương trình cài đặt

- Dựng đường chuẩn: được làm khi bắt đầu triển khai xét nghiệm trên máy, khi

thay đổi một trong các yếu tố: nồng độ chuẩn mới, thuốc thử mới, thay bóng đèn

hay thay cóng phản ứng, và khi thấy kết quả kiểm tra chất lượng không đạt

- Mẫu huyết thanh kiểm tra chất lượng, mẫu bệnh phẩm đo hoạt độ ALP được

phân tích trên máy phân tích sinh hóa tự động MODULAR, COBAS 6000,

COBAS 8000 (hãng Roche), hoặc các máy AU 480 (hãng Minh Tâm) theo

protocol của máy

- Mẫu bệnh phẩm chỉ được chạy trên máy phân tích khi kết quả kiểm tra chất

lượng đạt được độ chính xác và xác thực trong giới hạn cho phép và không vi

phạm các luật của quy trình kiểm tra chất lượng

- Kết quả sau khi được đánh giá sẽ được điền vào phiếu xét nghiệm, điền vào sổ

lưu trữ hoặc được chuyển vào phần mềm quản lý dữ liệu để in ra bằng máy

20

Trang 11

1 Trị số bình thường

 Nam: < 41 U/L

 Nữ: <31 U/L

2 ALT máu tăng trong

 Các bệnh gan: viêm gan cấp (tăng nhiều, gấp 50-150 lần bình thường) và mạn(tăng gấp 5- 6 lần bình thường), xơ gan, ung thư gan

 Các bệnh về tim: suy tim xung huyết, viêm màng ngoài tim, nhồi máu cơ tim

 Viêm túi mật

 Nhiễm độc rượu cấp

 Tai biến mạch máu não

 Viêm tụy cấp hoại tử

+ Đối chiếu kết quả với lời chẩn đoán

+ Kiểm tra lại thông tin ống máu, đối chiếu với thông tin trên phiếu yêu cầu xétnghiệm: họ tên người bệnh, tuổi, giường, khoa…

Nếu thấy không có gì bất thường, nên chạy lại kiểm tra lại lần nữa trên máy đócùng phối hợp với mẫu huyết thanh kiểm tra hoặc chuyển sang máy khác

- Các yếu tố góp phần làm thay đổi kết quả xét nghiệm:

+ Mẫu máu vỡ hồng cầu có thể thay đổi kết quả

+ Các thuốc có thể làm tăng hoạt độ ALT như: thuốc ức chế men chuyểnangiotensin, acetaminophen, thuốc chống co giật, một số loại kháng sinh, thuốcđiều trị tâm thần, benzodiazepin, estrogen, sulfat sắt, heparin, interferon, thuốc làmgiảm mỡ máu, thuốc chống viêm không phải steroid, salicylat, thuốc lợi tiểu loạithiazid

15

Trang 12

những sai sót và xử trí của đo hoạt độ AST (Aspatat transaminase).

Đáp án:

I NGUYÊN LÝ

Đo hoạt độ AST thường được làm cùng với ALT để xác định bệnh lý và theo dõi

tiến triển của gan hay tim mạch, Ngoài ra AST cũng được phối hợp với một số xét

nghiệm khác như GGT để theo dõi người bệnh nghiện rượu

Hoạt độ của enzym AST trong máu của người bệnh được xác định theo phương

pháp động học enzyme, theo phản ứng:

Hoạt độ AST được đo bằng sự giảm nồng độ NADH theo thời gian ở bước sóng

340 nm

15

- Cài chương trình trên máy theo protocol của máy: chỉ làm khi bắt đầu triển khai

xét nghiệm trên máy và khi có thay đổi trong chương trình cài đặt

- Dựng đường chuẩn: được làm khi bắt đầu triển khai xét nghiệm trên máy, khi

thay đổi một trong các yếu tố: nồng độ chuẩn mới, thuốc thử mới, thay bóng đèn

hay thay cóng phản ứng, và khi thấy kết quả kiểm tra chất lượng không đạt

- Mẫu huyết thanh kiểm tra chất lượng, mẫu bệnh phẩm đo hoạt độ AST được

phân tích trên máy phân tích sinh hóa tự động MODULAR, COBAS 6000,

COBAS 8000 (hãng Roche), hoặc các máy AU 480 (hãng Minh Tâm) theo

protocol của máy

- Mẫu bệnh phẩm chỉ được chạy trên máy phân tích khi kết quả kiểm tra chất

lượng đạt được độ chính xác và xác thực trong giới hạn cho phép và không vi

phạm các luật của quy trình kiểm tra chất lượng

- Kết quả sau khi được đánh giá sẽ được điền vào phiếu xét nghiệm, điền vào sổ

lưu trữ hoặc được chuyển vào phần mềm quản lý dữ liệu để in ra bằng máy

20

Trị số bình thường:

15

Trang 13

 Nam: < 37 U/L.

 Nữ: < 31 U/L

- AST máu tăng trong các nguyên nhân:

 Các bệnh gan (tỉ số AST/ALT <1): viêm gan do virut cấp, viêm gan do thuốc(rifampicin, INH, salicylat, heparin), Viêm gan nhiễm độc (CCl4, amanit phalloid),tắc mật do các nguyên nhân không phải ung thư, apxe gan

 Các bệnh gan (tỉ số AST/ALT >1): Xơ gan, Viêm gan do rượu, Xâm nhiễm gan(do di căn ung thư, nhiễm sarcoid, lao, u lympho, luput ban đỏ)

 Các bệnh về tim: suy tim mất bù (gan xung huyết), viêm cơ tim, nhồi máu cơtim, bóp tim ngoài lồng ngực, phẫu thuật tim, sau thông tim (tỉ số AST/ALT>1)

 Viêm túi mật

 Nhiễm độc rượu cấp

 Viêm tụy cấp hoại tử

 Viêm đa cơ, viêm da và cơ,

+ Mẫu máu bị vỡ hồng cầu

+ Các thuốc có thể làm tăng hoạt độ AST là: Acetaminophen, allopurinol, một số

15

Trang 14

loại kháng sinh, acid ascorbic, chlpropamid, cholestyramin, cholinergic, clofibrat,

codein, statin, hydralazin, isoniazid, meperidin

+ Các thuốc có thể làm giảm hoạt độ AST là; metronidazol, trifluoperazin

những sai sót và xử trí của định lượng ACID URIC.

Đáp án:

I NGUYÊN LÝ

Acid Uric là sản phẩm chuyển hóa cuối cùng của base có nitơ nhân purin

Acid Uric máu được định lượng theo phương pháp enzyme so màu

Sản phẩm màu được đo ở bước sóng 546nm

15

III CÁC BƯỚC TIẾN HÀNH

1 Lấy bệnh phẩm: bệnh phẩm phải được lấy đúng kỹ thuật vào ống tiêu chuẩn.

Ly tâm trước khi tiến hành kỹ thuật Có thể sử dụng huyết thanh hoặc huyết tương

chống đông bằng heparin Bảo quản ở 2-8oC trong vòng 5 ngày, ở - 20oC được 6

tháng Rã đông một lần

Để bệnh phẩm, chuẩn, control ở nhiệt độ phòng (20-25oC) và lắc đều trước khi tiến

hành XN

- Máy móc, hóa chất đã được cài đặt và chuẩn trước khi thực hiện phân tích.

Control nằm trong miền cho phép tùy thuộc vào kỹ thuật, thuốc thử của từng công

ty Thông thường chạy control 2 miền: bình thường và bất thường Đối chiếu với

luật về nội kiểm chất lượng nếu đạt thì tiến hành phân tích mẫu

20

IV NHẬN ĐỊNH KẾT QUẢ

- Bình thường:

15

Trang 15

 Nhiễm độc chì, thủy ngân

- Acid uric máu giảm trong:

tán, tăng lipid máu, đang sử

những sai sót và xử trí của đo hoạt độ PHOSPHATASE KIỀM (Alkaline

Trang 16

- Sau khi lấy máu, đem ly tâm tách lấy huyết thanh hoặc huyết tương.

- Bệnh phẩm chỉ rã đông 1 lần và phải để bệnh phẩm đạt nhiệt độ phòng trước khiphân tích Để tránh hiện tượng bay hơi, bệnh phẩm, chất chuẩn, chất kiểm tra chấtlượng nên phân tích trong vòng 2 giờ

- Máy phân tích cần chuẩn bị sẵn sàng để thực hiện phân tích mẫu: Máy đã đượccài đặt chương trình xét nghiệm ALP Máy đã được chuẩn với xét nghiệm ALP.Kết quả kiểm tra chất lượng với xét nghiệm ALP đạt yêu cầu không nằm ngoài dảicho phép và không vi phạm luật kiểm tra chất lượng

- Người thực hiện phân tích mẫu nhập dữ liệu về thông tin người bệnh và chỉ địnhxét nghiệm vào máy phân tích hoặc hệ thống mạng (nếu có)

- Nạp mẫu bệnh phẩm vào máy phân tích

- Ra lệnh cho máy thực hiện phân tích mẫu bệnh phẩm

- Đợi máy phân tích mẫu theo protocol của máy

- Khi có kết quả cần xem xét đánh giá kết quả sau đó in báo cáo hoặc ghi kết quảvào phiếu xét nghiệm để trả cho người bệnh

+ ALP máu tăng trong: Cường cận giáp, Thiếu Vitamin D, Bệnh xương (còi, mềm,

xơ cứng, ung thư, sarcom) Bệnh gan (Tắc mật ngoài gan, Viêm ống mật, K gan,

15

Trang 17

Abces gan), bệnh thận…

+ ALP máu giảm trong: giảm ALP gia đình, suy giáp, thiếu Vitamin C…

IV NHỮNG SAI SÓT VÀ XỬ TRÍ

+ Những yếu tố gây nhiễu cho kết quả xét nghiệm

Kết quả xét nghiệm không bị ảnh hưởng khi:

- Huyết thanh vàng: Bilirubin < 70 mg/dL hay 1197 µmol/L

- Tán huyết: Hemoglobin < 500 mg/dL

- Huyết thanh đục: Triglyceride <2000 mg/dL

Khắc phục: Có thể hòa loãng bệnh phẩm và thực hiện lại xét nghiệm sau đó nhân

kết quả với độ hòa loãng (Trường hợp có hòa loãng tự động trên máy thì kết quả

không cần nhân với độ hòa loãng do máy đã tự tính toán kết quả)

I NGUYÊN LÝ: Amylase là enzyme thủy phân tinh bột, có nguồn gốc từ tụy và

tuyến nước bọt Xét nghiệm amylase thường được chỉ định trong bệnh lý tuyến tụy

hoặc tuyến nước bọt…

Hoạt độ của enzym α Amylase trong máu của người bệnh được xác định theo

phương pháp động học enzym

α-amylase 5 ethylidene-G7PNP + 5 H2O < => 2 ethylidene-G5 + 2 G2PNP + 2

ethylidene-G4 + 2 G3PNP + ethylidene-G3 + G4PNP

α-glucosidase2 G2PNP + 2 G3PNP + G4PNP + 14 H2O < => 5 PNP + 14 G

Đậm độ màu sắc của PNP hình thành tỷ lệ thuận với hoạt độ amylase huyết thanh

và có thể đo được ở bước sóng 415 nm

15

1 Lấy bệnh phẩm

- Lấy 3 ml máu tĩnh mạch vào ống không có chất chống đông hay ống có chất

chống đông là Li, Na hay NH4-heparin hoặc EDTA (nếu dùng EDTA, kết quả

thấp hơn 5-10% so với huyết thanh) Máu không vỡ hồng cầu Bệnh phẩm ổn định

20

Trang 18

1 tháng ở 2-8oC, 7 ngày ở 20oC đến 25oC.

- Sau khi lấy máu, đem ly tâm tách lấy huyết thanh hoặc huyết tương

- Bệnh phẩm chỉ rã đông 1 lần và phải để bệnh phẩm đạt nhiệt độ phòng trước khiphân tích Để tránh hiện tượng bay hơi, bệnh phẩm, chất chuẩn, chất kiểm tra chấtlượng nên phân tích trong vòng 2 giờ

- Máy phân tích cần chuẩn bị sẵn sàng để thực hiện phân tích mẫu: Máy đã đượccài đặt chương trình xét nghiệm α Amylase Máy đã được chuẩn với xét nghiệm αAmylase Kết quả kiểm tra chất lượng với xét nghiệm α Amylase đạt yêu cầukhông nằm ngoài dải cho phép và không vi phạm luật kiểm tra chất lượng

- Người thực hiện phân tích mẫu nhập dữ liệu về thông tin người bệnh và chỉ địnhxét nghiệm vào máy phân tích hoặc hệ thống mạng (nếu có)

- Khi có kết quả cần xem xét đánh giá kết quả sau đó in báo cáo hoặc ghi kết quảvào phiếu xét nghiệm để trả cho người bệnh

+ Trị số bình thường: < 100 U/L

+ Amylase máu tăng trong: Bệnh tụy (viêm tụy cấp và mạn), Bệnh đường mật,Bệnh ổ bụng không phải bệnh tụy (loét thủng dạ dày, tắc ruột ), Quai bị, tắc tuyếnnước bọt, Tăng Amylase ở người bình thường (tăng Macro Amylase)

+ Amylase giảm khi tụy bị hoại tử lan rộng, ngoài ra nó còn giảm trong một sốbệnh lý như: Viêm tụy mạn tính Viêm tụy mạn tính tiến triển Xơ hóa ống dẫn tụytiến triển

- Huyết thanh đục: Triglyceride <1500 mg/dL

Khắc phục: Có thể hòa loãng bệnh phẩm và thực hiện lại xét nghiệm sau đó nhânkết quả với độ hòa loãng (Trường hợp có hòa loãng tự động trên máy thì kết quảkhông cần nhân với độ hòa loãng do máy đã tự tính toán kết quả)

15

Trang 19

Lưu ý: Nước bọt và mồ hôi có chứa α Amylase nên tránh để nhiễm những chất này

vào bệnh phẩm hay hóa chất

những sai sót và xử trí của định lượng CA 125 (Cancer antigen 125).

Đáp án:

I NGUYÊN LÝ

CA 125 được định lượng bằng phương pháp miễn dịch sandwich sử dụng công

nghệ hóa phát quang hay điện hóa phát quang CA 125 có trong mẫu thử đóng vai

trò kháng nguyên được kẹp giữa hai kháng thể, kháng thể thứ nhất là kháng thể

đơn dòng đặc hiệu kháng CA 125 đánh dấu biotin, kháng thể thứ hai là kháng thể

đơn dòng đặc hiệu kháng CA 125 đánh dấu ruthenium (chất có khả năng phát

quang) tạo thành phức hợp miễn dịch kiểu sandwich Cường độ phát quang tỷ lệ

thuận với nồng độ CA 125 có trong mẫu thử

15

chống đông là Li, Na, NH4-Heparin và K3-EDTA và Sodium Citrat Máu không

vỡ hồng cầu

- Sau khi lấy máu, đem ly tâm phút tách lấy huyết thanh hoặc huyết tương

- Bệnh phẩm ổn định 5 ngày ở 2-8oC, 3 tháng ở -20oC

- Bệnh phẩm chỉ rã đông 1 lần và phải để bệnh phẩm đạt nhiệt độ phòng trước khi

phân tích Để tránh hiện tượng bay hơi, bệnh phẩm, chất chuẩn, chất kiểm tra chất

lượng nên phân tích trong vòng 2 giờ

- Máy phân tích cần chuẩn bị sẵn sàng để thực hiện phân tích mẫu: Máy đã được

cài đặt chương trình xét nghiệm C 125 Máy đã được chuẩn với xét nghiệm C 125

Kết quả kiểm tra chất lượng với xét nghiệm C 125 đạt yêu cầu không nằm ngoài

dải cho phép và không vi phạm luật kiểm tra chất lượng

- Người thực hiện phân tích mẫu nhập dữ liệu về thông tin người bệnh và chỉ định

xét nghiệm vào máy phân tích hoặc hệ thống mạng (nếu có)

20

Trang 20

- Khi có kết quả cần xem xét đánh giá kết quả sau đó in báo cáo hoặc ghi kết quả

vào phiếu xét nghiệm để trả cho người bệnh

- Trị số bình thường: < 35 U/ml

- C 125 máu tăng trong: CA 125 tăng cao trong ung thư buồng trứng, nội mạc tử

cung, vú… và có giá trị nhất trong việc chẩn đoán ung thư buồng trứng; CA 125

còn tăng trong một số bệnh lành tính như viêm nội mạc, viêm phần phụ, viêm tụy

xơ gan

- C 125 máu giảm trong: Sự giảm nồng độ C 125 cũng có giá trị theo dõi hiệu quả

của phương pháp điều trị, sự tăng trở lại báo hiệu bệnh tái phát

+ Huyết thanh đục: Triglyceride < 2000 mg/dl

+ Biotin <35 ng/ml trường hợp người bệnh sử dụng Biotin với liều > 5 mg/ngày

cần lấy máu xét nghiệm ít nhất 8h sau khi sử dụng Biotin lần cuối

+ Không có hiệu ứng “high-dose hook” (Hiệu ứng mẫu bệnh phẩm có nồng độ

cao) khi nồng độ CA 125 tới 50 000 U/mL

+ RF <1200 IU/mL

- Khắc phục: Có thể hòa loãng bệnh phẩm và thực hiện lại xét nghiệm sau đó nhân

kết quả với độ hòa loãng (Trường hợp có hòa loãng tự động trên máy thì kết quả

không cần nhân với độ hòa loãng do máy đã tự tính toán)

15

những sai sót và xử trí của định lượng CHOLESTEROL toàn phần.

Đáp án:

Trang 21

Cholesterol toàn phần được tổng hợp ở nhiều mô khác nhau nhưng chủ yếu là ở

gan và tế bào thành ruột Nó được sử dụng để phát hiện nguy cơ vữa xơ động

mạch và để chẩn đoán và theo dõi điều trị các bệnh có liên quan đến nồng độ

cholesterol cũng như các rối loạn chuyển hóa lipid hay lipoprotein

Cholesterol toàn phần trong máu được định lượng theo phương pháp enzym so

màu

CE: Cholesterolesterase

CHOD: Cholesterol oxidase

POP: Peroxidas

1 Lấy bệnh phẩm: bệnh phẩm phải được lấy đúng kỹ thuật vào ống tiêu chuẩn

Ly tâm trước khi tiến hành kỹ thuật Có thể sử dụng huyết thanh hoặc huyết tương chống đông bằng Li-heparin Không sử dụng citrate, oxalate, fluorid Bảo quản ở 2-8oC trong vòng 7 ngày, ở - 20oC được 3 tháng Rã đông một lần

Để bệnh phẩm, chuẩn, control ở nhiệt độ phòng (20-25oC) và lắc đều trước khi tiếnhành xét nghiệm

- Máy móc, hóa chất đã được cài đặt và chuẩn trước khi thực hiện phân tích

Control nằm trong miền cho phép tùy thuộc vào kỹ thuật, thuốc thử của từng công

ty Thông thường chạy control 2 miền: bình thường và bất thường Đối chiếu với luật về nội kiểm chất lượng nếu đạt thì tiến hành phân tích mẫu

 Rối loạn chuyển hóa lipid

 Tiểu đường, tăng huyết áp

15

Trang 22

 Viêm thận, hội chứng thận hư

I NGUYÊN LÝ :Creatinin là sản phẩm của quá trình thoái hóa creatin phosphate và

creatin ở cơ Creatinin được đào thải chủ yếu qua thận

Creatinin máu được định lượng theo phương pháp Jaffe (đo điểm đầu và cuối)

15

1 Lấy bệnh phẩm: bệnh phẩm phải được lấy đúng kỹ thuật vào ống tiêu chuẩn Ly

tâm trước khi tiến hành kỹ thuật Có thể sử dụng huyết thanh hoặc huyết tương

chống đông bằng EDTA, heparin Bảo quản ở 2-8oC trong vòng 7 ngày, ở - 20oC

được 3 tháng Rã đông một lần

Để bệnh phẩm, chuẩn, control ở nhiệt độ phòng (20-25oC) và lắc đều trước khi tiến

20

Trang 23

hành xét nghiệm.

- Máy móc, hóa chất đã được cài đặt và chuẩn trước khi thực hiện phân tích Control

nằm trong miền cho phép tùy thuộc vào kỹ thuật, thuốc thử của từng công ty Thông thường chạy control 2 miền: bình thường và bất thường Đối chiếu với luật về nội

kiểm chất lượng nếu đạt thì tiến hành phân tích mẫu

- Đưa bệnh phẩm vào phân tích theo protocol của máy Khi có kết quả thì phân tích

và đối chiếu với phiếu xét nghiệm và trả kết quả

- Bình thường: Nam: 62- 106 μmol/L

Nữ: 44 - 88 μmol/LTrẻ em: 15 - 77 μmol/L

Bệnh tim mạch: tăng huyết áp vô căn, nhồi máu cơ tim …

- Giảm trong: có thai, sản giật …

Định lượng creatinin bằng phương pháp khác hoặc pha loãngbệnh phẩm hoặc điều trị tình trạngtăng bilirubin

Bệnh phẩm huyết tán, tăng

lipid máu, đang sử dụng

thuốc

Kết quả có thể bị ảnh hưởng

Trẻ sơ sinh, người lớn

có HbF > 60 m

/dLẢ

h hưởng kết quảKhông dung phương

15

Trang 24

pháp này để định lượng creatininNồng độ > dải đo (15-2200

Mục đích của xét nghiệm: Triglycerid thường được định lượng để giúp đánh giá tình

trạng cân bằng giữa trọng lượng lipid đưa vào và chuyển hóa lipid trong cơ thể

Định lượng Triglycerid trong máu của người bệnh theo phương pháp Enzym so màu

theo phương trình phản ứng sau:

LPL: Lipoprotein lipase

GK: Glycerol kinase

GPO: Glycerol phosphate oxidase

15

- Cài chương trình trên máy theo protocol của máy: chỉ làm khi bắt đầu triển khai xét

nghiệm trên máy và khi có thay đổi trong chương trình cài đặt

- Dựng đường chuẩn: được làm khi bắt đầu triển khai xét nghiệm trên máy, khi thay

đổi một trong các yếu tố: nồng độ chuẩn mới, thuốc thử mới, thay bóng đèn hay thay

20

Trang 25

cóng phản ứng, và khi thấy kết quả kiểm tra chất lượng không đạt.

- Mẫu huyết thanh kiểm tra chất lượng, mẫu bệnh phẩm định lượng Triglycerid đượcphân tích trên máy phân tích sinh hóa tự động MODULAR, COBAS 6000, COBAS

8000 (hãng Roche), hoặc các máy AU 480, AU 5800 (hãng Minh Tâm) theo

protocol của máy

- Mẫu bệnh phẩm chỉ được chạy trên máy phân tích khi kết quả kiểm tra chất lượng đạt được độ chính xác và xác thực trong giới hạn cho phép và không vi phạm các

luật của quy trình kiểm tra chất lượng

- Kết quả sau khi được đánh giá sẽ được điền vào phiếu xét nghiệm, điền vào sổ lưu trữ hoặc được chuyển vào phần mềm quản lý dữ liệu để in ra bằng máy

 Xơ gan do rượu

 Tăng lipoprotein máu có tính chất gia đình

- Nồng độ Triglycerid máu có thể giảm trong các nguyên nhân chính sau:

 Không có β-lipoprotein huyết bẩm sinh

 Cường giáp

 Suy dinh dưỡng

 Do chế độ ăn: Tỷ lệ mỡ thấp

 Hội chứng giảm hấp thu

 Nhồi máu não

15

Trang 26

 Bệnh phổi tắc nghẽ mạn tính.

- Khi thấy kết quả Triglycerid bất thường (cao hơn hoặc thấp hơn giá trị bình

thường) cần kiểm tra lại kết quả bằng cách:

+ Kiểm tra lại thông tin ống máu, đối chiếu với thông tin trên phiếu yêu cầu xét

nghiệm: họ tên người bệnh, tuổi, giường, khoa…

+ Nhấc ống máu để kiểm tra xem có đông dây hoặc bất thường gì không?

+ Đối chiếu kết quả với lời chẩn đoán

Nếu thấy không có gì bất thường, nên chạy lại kiểm tra lại lần nữa trên máy đó cùng

phối hợp với mẫu huyết thanh kiểm tra hoặc chuyển sang máy khác

+ Các chất có thể làm tăng nồng độ triglycerid máu: Rượu, thuốc chẹn beta giao

cảm, cholestyramin, corticosteroid, estrogen, thuốc ngừa thai uống, thuốc lợi tiểu

thiazid

+ Các chất có thể làm giảm nồng độ triglycerid máu: Acid ascorbic, asparaginase,

colestipol, clofibrat, dextronthyroxin, metformin, niacin

+ Có thai, hoặc người bệnh không nhịn ăn sẽ làm tăng nồng độ triglycerid máu

15

Câu số 22 Trình bày nguyên lý, các bước tiến hành, nhận định kết quả,

những sai sót và xử trí của xét nghiệm định lượng AFP

Đáp án:

I NGUYÊN LÝ

AFP được định lượng bằng phương pháp miễn dịch sandwich sử dụng công

nghệ hóa phát quang hay điện hóa phát quang AFP có trong mẫu thử đóng

vai trò kháng nguyên được kẹp giữa hai kháng thể, kháng thể thứ nhất là

kháng thể đơn dòng đặc hiệu kháng AFP đánh dấu biotin, kháng thể thứ hai là

kháng thể đơn dòng đặc hiệu kháng AFP đánh dấu ruthenium (chất có khả

năng phát quang) tạo thành phức hợp miễn dịch kiểu sandwich Cường độ

phát quang tỷ lệ thuận với nồng độ AFP có trong mẫu thử

15

Trang 27

- Máy phân tích cần chuẩn bị sẵn sàng để thực hiện phân tích mẫu: Máy đã

được cài đặt chương trình xét nghiệm AFP Máy đã được chuẩn với xét

nghiệm AFP Kết quả kiểm tra chất lượng với xét nghiệm AFP đạt yêu cầu

không nằm ngoài dải cho phép và không vi phạm luật kiểm tra chất lượng

- Người thực hiện phân tích mẫu nhập dữ liệu về thông tin người bệnh và chỉ định xét nghiệm vào máy phân tích hoặc hệ thống mạng (nếu có)

- Khi có kết quả cần xem xét đánh giá kết quả sau đó in báo cáo hoặc ghi kết quả vào phiếu xét nghiệm để trả cho người bệnh

- Trị số bình thường: < 7.0 ng/ml

- AFP máu tăng trong: Ung thư gan nguyên phát có mức tăng cao nhất, Ung

thư gan thứ phát mức tăng ít hơn cả về tần suất và nồng độ, U nguyên bào

phôi, Một số bệnh gan như viêm gan, xơ gan…., AFP cùng với βHCG và uE3

là bộ ba xét nghiệm dùng cho chẩn đoán trước sinh đối với bệnh Down và dị tật bệnh sinh như tật nứt đốt sống…

15

- Những yếu tố gây nhiễu cho kết quả xét nghiệm Kết quả xét nghiệm không

25

Trang 28

bị ảnh hưởng khi:

+ Huyết thanh vàng: Bilirubin < 65 mg/dL hay 1112 µmol/L

+ Tán huyết: Hemoglobin <2.2 g/dl

+ Huyết thanh đục: Triglyceride < 1500 mg/dl

+ Biotin <60 ng/ml trường hợp người bệnh sử dụng Biotin với liều > 5

mg/ngày cần lấy máu xét nghiệm ít nhất 8h sau khi sử dụng Biotin lần cuối

+ Không có hiệu ứng “high-dose hook” (Hiệu ứng mẫu bệnh phẩm có nồng

độ cao) khi nồng độ AFP tới 1 210 000 ng/mL

+ RF <1500 IU/mL

- Khắc phục: Có thể hòa loãng bệnh phẩm và thực hiện lại xét nghiệm sau đó

nhân kết quả với độ hòa loãng (Trường hợp có hòa loãng tự động trên máy thì

kết quả không cần nhân với độ hòa loãng do máy đã tự tính toán)

Beta hCG được định lượng bằng phương pháp miễn dịch kiểu sandwich sử

dụng công nghệ hóa phát quang hay điện hóa phát quang Beta hCG trong

mẫu thử đóng vai trò kháng nguyên được kẹp giữa 2 kháng thể: kháng thể đơn

dòng kháng hCG từ chuột gắn biotin, kháng thể đơn dòng kháng hCG từ

chuột được đánh dấu bằng ruthenium Chất đánh dấu có khả năng phát quang

Cường độ phát quang tỷ lệ thuận với nồng độ beta hCG có trong mẫu thử

15

Bệnh phẩm phải được lấy đúng kỹ thuật vào ống tiêu chuẩn Ly tâm trước khi

tiến hành kỹ thuật Có thể sử dụng huyết thanh hoặc huyết tương chống đông

bằng heparin hoặc EDTA Bảo quản ở 2-8oC trong vòng 3 ngày, ở -20oC được

12 tháng Rã đông một lần Để bệnh phẩm, chuẩn, control ở nhiệt độ phòng

(20-25oC) và lắc đều trước khi tiến hành xét nghiệm Để tránh những ảnh

20

Trang 29

hưởng đến kết quả, bệnh phẩm, chuẩn cũng như control phải được phân tíchngay trong vòng 2 giờ

Control nằm trong miền cho phép tùy thuộc vào kỹ thuật, thuốc thử của từngcông ty Thông thường dung control 3 miền: thấp, bình thường và cao Đốichiếu với luật về nội kiểm chất lượng nếu đạt thì tiến hành phân tích mẫu

- Đưa bệnh phẩm vào phân tích theo protocol của máy Khi có kết quả thì

phân tích và đối chiếu với phiếu xét nghiệm và trả kết quả

- Bình thường: < 1mIU/mL

- Tăng trong trường hợp:

Có thai Tăng cao hơn trong nhiễm độc thai và tăng cao nhất trong trường hợpchửa trứng, ung thư rau

βhCG cùng với αFP và E3 là bộ ba xét nghiệm dùng cho chẩn đoán trước sinhđối với bệnh Down và các dị tật bẩm sinh khác như tật nứt đốt sống …

- Giảm trong trường hợp:

Nồng độ βhCG thấp hoặc không tương xứng với tuổi thai thì có thể là thaichết lưu hoặc thiểu năng rau

Điều trị tình trạng bệnh lýhoặc ngừng dùng thuốc rồi định lượng lại

Pha loãng bệnh phẩm

15

Trang 30

Câu số 24 Trình bày nguyên lý, các bước tiến hành, nhận định kết quả, những sai sót và xử trí của định lượng BILIRUBIN TRỰC TIẾP (BIL D)

Đáp án:

I NGUYÊN LÝ

BIL.D trong máu của người bệnh được xác định theo phương pháp đo màu

Bilirubin + diazonium ion => Azobilirubin

Trong môi trường nước, Bilirubin trực tiếp tác dụng với thuốc thử diazonium

tạo phức hợp azobilirubin Đậm độ màu của phức hợp Azobilirubin tỷ lệ

thuận với nồng độ Bilirubin trực tiếp có trong mẫu thử, được đo ở bước sóng

546 nm

15

chống đông là Heparin hay EDTA Máu không vỡ hồng cầu Bảo quản bệnh

phẩm tránh ánh sáng Bệnh phẩm ổn định 7 ngày ở 2-8oC, 2 ngày ở 15-25oC, 6tháng ở -15oC đến - 25oC

- Bệnh phẩm chỉ rã đông 1 lần và phải để bệnh phẩm đạt nhiệt độ phòng trước

khi phân tích Để tránh hiện tượng bay hơi, bệnh phẩm, chất chuẩn, chất kiểm

tra chất lượng nên phân tích trong vòng 2 giờ

- Máy phân tích cần chuẩn bị sẵn sàng để thực hiện phân tích mẫu:Máy đã

được cài đặt chương trình xét nghiệm BIL.D Máy đã được chuẩn với xét

nghiệm BIL.D Kết quả kiểm tra chất lượng với xét nghiệm BIL.D đạt yêu

cầu không nằm ngoài dải cho phép và không vi phạm luật kiểm tra chất lượng

- Người thực hiện phân tích mẫu nhập dữ liệu về thông tin người bệnh và chỉ

định xét nghiệm vào máy phân tích hoặc hệ thống mạng (nếu có)

20

Trang 31

- Khi có kết quả cần xem xét đánh giá kết quả sau đó in báo cáo hoặc ghi kết

quả vào phiếu xét nghiệm để trả cho người bệnh

- Trị số bình thường: < 5.1 µmol/l

- BIL.D máu tăng trong: Tắc mật trong gan: viêm gan, xơ gan Tắc mật ngoài

gan: do sỏi, ung thư, hạch to

10

IV.NHỮNG SAI SÓT VÀ XỬ TRÍ

Những yếu tố gây nhiễu cho kết quả xét nghiệm Kết quả xét nghiệm cần điều

chỉnh ± 10% khi huyết thanh vàng Huyết thanh đục do tăng lipid máu hay tán

huyết đều ảnh hưởng tới kết quả xét nghiệm

Khắc phục: Có thể hòa loãng bệnh phẩm và thực hiện lại xét nghiệm sau đó

kết quả không cần nhân với độ hòa loãng do máy đã tự tính toán kết quả)

Bilirubin gián tiếp là bilirubin tự do, độc và ít tan trong nước, nó lên màu gián

tiếp với thuốc thử Diazonên gọi là Bilirrubin gián tiếp tiếp

Bilirubin gián tiếp (BIL.I) trong máu của người bệnh được tính toán trên cơ sở

số liệu thu được từ định lượng BIL T và BIL D của người bệnh

Người bệnh cần được giải thích về mục đích của việc lấy máu để làm xét

nghiệm

15

Trang 32

- Lấy 3 ml máu tĩnh mạch vào ống không có chất chống đông hay ống có chấtchống đông là Heparin hay EDTA Máu không vỡ hồng cầu Bảo quản bệnhphẩm tránh ánh sáng Bệnh phẩm ổn định 7 ngày ở 2-8oC, 2 ngày ở 15 - 25oC,

- Máy phân tích cần chuẩn bị sẵn sàng để thực hiện phân tích mẫu: Máy đãđược cài đặt chương trình xét nghiệm BIL T, BIL.D Máy đã được chuẩn vớixét nghiệm BIL T, BIL.D Kết quả kiểm tra chất lượng với xét nghiệm BIL

T, BIL.D đạt yêu cầu không nằm ngoài dải cho phép và không vi phạm luậtkiểm tra chất lượng

- Người thực hiện phân tích mẫu nhập dữ liệu về thông tin người bệnh và chỉđịnh xét nghiệm vào máy phân tích hoặc hệ thống mạng (nếu có)

- Khi có kết quả cần xem xét đánh giá kết quả sau đó in báo cáo hoặc ghi kếtquả vào phiếu xét nghiệm để trả cho người bệnh

- Nếu trên máy không cài đặt công thức tính BIL I thì tính toán theo côngthức sau: BIL I = BIL T - BIL D

Trang 33

chỉnh ± 10% khi huyết thanh vàng Huyết thanh đục do tăng lipid máu hay tán

huyết đều ảnh hưởng tới kết quả xét nghiệm

Khắc phục: Có thể hòa loãng bệnh phẩm và thực hiện lại xét nghiệm sau đó

Bilirubin là sản phẩm thoái hóa của hemoglobin Xét nghiệm bilirubin thường

được chỉ định trong bệnh về gan, máu, tắc mật, vàng da…

BIL.T trong máu của người bệnh được xác định theo phương pháp đo màu,

theo phản ứng:

Acid Bilirubin + diazonium ion => azobilirubin

Trong môi trường acid Bilirubin tác dụng với thuốc thử diazonium tạo phức

hợp azobilirubin Đậm độ màu của phức hợp Azobilirubin tỷ lệ thuận với

nồng độ BIL.T có trong mẫu thử được đo ở bước sóng 546 nm

15

chống đông là Li-heparin hay EDTA Máu không vỡ hồng cầu Bảo quản

bệnh phẩm tránh ánh sáng và cần phân tích sớm

- Máy phân tích cần chuẩn bị sẵn sàng để thực hiện phân tích mẫu: Máy đã

được cài đặt chương trình xét nghiệm BIL T Máy đã được chuẩn với xét

nghiệm BIL.T Kết quả kiểm tra chất lượng với xét nghiệm BIL.T đạt yêu cầu

20

Trang 34

không nằm ngoài dải cho phép và không vi phạm luật kiểm tra chất lượng.

- Người thực hiện phân tích mẫu nhập dữ liệu về thông tin người bệnh và chỉ

định xét nghiệm vào máy phân tích hoặc hệ thống mạng (nếu có)

- Khi có kết quả cần xem xét đánh giá kết quả sau đó in báo cáo hoặc ghi kết

quả vào phiếu xét nghiệm để trả cho người bệnh

- Trị số bình thường: <17.1 µmol/l

- BIL.T máu tăng trong: Tắc mật trong gan: viêm gan, xơ gan Tắc mật ngoài

gan: do sỏi, ung thư, hạch to Vàng da tiêu huyêt: thiếu máu tan huyết, sốt

+ Huyết thanh đục: Triglyceride <1000 mg/dL

- Khắc phục: Có thể hòa loãng bệnh phẩm và thực hiện lại xét nghiệm sau đó

Calcium là nguyên tố khoáng chiếm tỷ lệ cao nhất trong cơ thể 90% calcium

ở xương Phần còn lại phân bố ở các mô khác nhau và dịch ngoại bào

15

Trang 35

Calcium có vai trò quan trọng trong quá trình đông máu, duy trì tính thấm củamàng tế bào, dẫn truyền thần kinh cơ …

Calcium máu được định lượng theo phương pháp so màu

pH kiềm

1 Lấy bệnh phẩm: bệnh phẩm phải được lấy đúng kỹ thuật vào ống tiêu

chuẩn Ly tâm trước khi tiến hành kỹ thuật Có thể sử dụng huyết thanh hoặchuyết tương chống đông bằng Li-heparin Bảo quản ở 2-8oC trong vòng 3tuần, ở - 20oC được 8 tháng Rã đông một lần

Để bệnh phẩm, chuẩn, control ở nhiệt độ phòng (20-25oC) và lắc đều trướckhi tiến hành XN

Control nằm trong miền cho phép tùy thuộc vào kỹ thuật, thuốc thử của từngcông ty Thông thường chạy control 2 miền: bình thường và bất thường Đốichiếu với luật về nội kiểm chất lượng nếu đạt thì tiến hành phân tích mẫu

- Đưa bệnh phẩm vào phân tích theo protocol của máy Khi có kết quả thì

phân tích và đối chiếu với phiếu xét nghiệm và trả kết quả

 Ung thư (xương, vú, phế quản )

- Ca máu giảm trong:

 Nhược cận giáp

 Thiếu Vitamin D

10

Trang 36

tán, tăng lipid máu, đang sử

Kháng nguyên ung thư 19-9 (CA 19-9) là một glycoprotein được sản xuất bởi

các tế bào của khối u, tồn tại trên bề mặt của tế bào ung thư nhất định Do đó,

nó như dấu ấn khối u để theo dõi diễn tiến của ung thư Xét nghiệm CA 19-9

thường được sử dụng trong chẩn đoán và theo dõi điều trị ung thư tụy, dạ dày,

đường mật, đại tràng và có giá trị nhất trong việc chẩn đoán ung thư tụy

CA 19-9 được định lượng bằng phương pháp miễn dịch sandwich sử dụng

công nghệ hóa phát quang hay điện hóa phát quang CA 19-9 có trong mẫu

thử đóng vai trò kháng nguyên được kẹp giữa hai kháng thể, kháng thể thứ

nhất là kháng thể đơn dòng đặc hiệu kháng CA 19-9 đánh dấu biotin, kháng

thể thứ hai là kháng thể đơn dòng đặc hiệu kháng CA 19-9 đánh dấu

ruthenium (chất có khả năng phát quang) tạo thành phức hợp miễn dịch kiểu

sandwich Cường độ phát quang tỷ lệ thuận với nồng độ CA 19-9 có trong

15

Định dạng
Số trang	72
Dung lượng	299,21 KB