trích ly glucoside và ứng dụng giới thiệu về glucoside Tách chiếc glycoside hoạt chất glycoside từ cây cỏ ngọtGlucosid timQui trình tách chiếc stevioside từ cỏ ngọtMột số phương pháp khác trích ly glucoside từ stevia
BỘ CÔNG THƯƠNG TRƯỜNG ĐẠI HỌC CÔNG NGHIỆP TP.HCM VIỆN CÔNG NGHỆ SINH HỌC & THỰC PHẨM - - BÁO CÁO TIỂU LUẬN HÓA HỌC THỰC PHẨM Đề tài: TRÍCH LY GLUCOSIDE VÀ ỨNG DỤNG GVHD: Phạm Hồng Hiếu Lớp: DHDBTP14A Nhóm: Thành phố Hồ chí Minh, ngày 06 tháng 05 năm 2020 Danh sách nhóm Mục lục Mục lục Chương 1: Giới thiệu glucoside Tổng quan Hợp chất thiên nhiên (hay hợp chất tự nhiên) chất hóa học có nguồn gốc từ thiên nhiên người tách từ loại động vật, thực vật tự nhiên có hoạt tính sinh học có tác dụng dược học dùng để làm thuốc - Một glucoside glycoside có nguồn gốc từ glucose - Glucoside phổ biến thực vật động vật 1.1 Glucoside thực vật [1] Là dẫn xuất carbohydrate với hợp chất có chất hóa học khác carbohydrate Phần carbohydtate gọi aglycan ( Aglycan rượu, hợp chất thơm, alkaloid, ) + Cyanogenic glucoside Glucan Aglucan (HCN) (Đường) (Không phải đường) + Thioglycoside ( Goitrogenic glycoside) Glucan Aglucan (Thio) (Đường) (Không phải đường) + Solaninglucoside Glucan Aglucan (Solanin) (Đường) (Không phải đường) Những thực phẩm có chứa Cyanogenic Glycoside: - Cây khoai mì, măng tre, hạnh, đào, cỏ ba lá,…… Các glucoside đơn giản ete alkyl thu cách phản Phân ứng với axit clohydric dung dịch glucose rượu.loại glucoside 1.2 Phân loại Dựa vào phần hóa học có loại dẫn xuất glucoside: -Dẫn xuất etylen: Sinigrin, Sinalbin -Dẫn xuất benzen: Cellotropin ,Benzoyl-beta-D-glucoside, Arbutin , -Dẫn xuất styrolenr Coniferin, Syringin -Dẫn xuất anthracene: amygdalin , saponin, 1.3 Ứng dụng glucoside - Steviol glucoside có khả điều hòa miễn dịch tác dụng bảo vệ chống tăng đường huyết, tăng huyết áp, viêm, khối u tiêu chảy Ngồi ra, chúng tăng cường khả hịa tan epotoside, chất hóa lỏng, paclitaxel, curcuminoids, quercetin flavonoid cám lúa mì, làm tăng tính thấm chúng [2] - Cyanidin-3- O -glucoside (C3G) anthocyanin có haskap bao gồm khoảng 92% tổng hàm lượng anthocyanin 60% tổng số polyphenol Bằng chứng đáng ý cho thấy chất chống oxy hóa đáng kể, bảo vệ tim mạch, chống viêm, bảo vệ thần kinh, chống ung thư chống tiểu đường chế phẩm haskap giàu C3G [3] -Các thành phần hoạt chất C Orchioide phenolic glycoside chủ yếu bao gồm curculigoside, orcinol glucoside, curculigine A, anacardoside, v.v Thành phần orcinol glucoside có biên độ an tồn cao ứng dụng dược lý điều trị ung thư bao gồm chức sinh học dược lý có lợi khác , hoạt động chống oxy hóa, chống trầm cảm, thích nghi bảo vệ thần kinh [4] -2,3,5,4, -Tetrahydroxystilbene-2-O-β- D -glucoside (TSG) thành phần hoạt động Polygonum multiflorum , người ta phát hợp chất có hoạt động sinh học giá trị y học khác bao gồm chống lão hóa, chống oxy hóa, chống tăng huyết áp, chống xơ vữa động mạch, chống viêm, bảo vệ gan chống khối u [5] - Cyanogen (chất độc) có nhiều loại thực vật khả giải phóng HCN độc hại chúng cung cấp phản ứng bảo vệ hóa học động vật ăn cỏ mầm bệnh gây tổn thương mô thực vật [6] -Arbutin hoạt động chất khử trùng lợi tiểu [7] Chương 2:Tách glycoside hoạt chất glycoside từ cỏ Đặt vấn đề Hiện nay, nước ta hay toàn giới tỉ lệ mắc bệnh tiểu đường, tim mạch, xơ vững động mạch,…ngày tăng cao sử dụng loại “ đường hóa học”, để giải vấn đề nan giải người ta tìm loại chất tạo an tồn từ thiên nhiên “ cỏ ngọt”, hương vị ngào từ gọi stevioside Đặc tính quan trọng glucoside làm cho loại thức ăn đồ uống mà không gây độc hại cho người 2.1 Giới thiệu cỏ -Cây cỏ “Stevia rebaudiana bertoni” phát vào năm 1908, đến năm 1931 Briel Lavielle xác định steviozit chất tạo nên độ -Cỏ hay gọi cỏ mật, có đường Cỏ cịn có tên gọi khác như: sugar leaf (Anh), estevia (Tây Ban Nha), sweet honey leaf (Úc) … Tên có nghĩa cỏ hay gọi thay đường Lá Stevia chứa (% chất khô) 6,2% protein, 5,6% chất béo, 52,8% từ carbohydrate, 15% Stevioside khoảng 42% chất hòa tan nước Stevioside Ưu điểm: - Khả tạo tốt - An toàn cho sức khỏe, khơng chứa calo, hoạt chất cỏ hồn tồn lành tính, khơng gây nóng đường saccarozo - Tác dụng với sức khỏe: ổn định huyết áp, ngăn ngừa máu chảy chân răng,… - Phù hợp với đối tượng Nhược điểm: - Còn mẻ với người tiêu dùng, mẻ với người tiêu dùng - Giá thành đắt đường mía - Khơng bày bán rộng rãi 2.1.1 Nguồn gốc cỏ - Cỏ có nguồn gốc tự nhiên vùng Đông Bắc Paraguay, biêt đến vị đa từ kỷ thứ XVI [8] - Năm 1988, cỏ biết đến trồng mùa vụ Nam Mỹ - Cây cỏ đưa vào nước ta năm 1988 từ Achentina, sau hạt giống nhân qua Viện nghiên cứu trồng toàn Liên Bang Nga mang tên Vavilov (VIR), Liên hiệp sản xuất củ cải đường Ucraina kiều bào Việt Nam Canada gửi - Hoạt tính cỏ glycoside tên steviol, có độ gấp 300 lần so với đường mía 2.1.2 Thành phần dinh dưỡng cỏ ( tính 100mg khối lượng khơ) Thành phần dinh dưỡng Hàm lượng sấp xỉ Hàm lượng ẩm (g) Năng lượng (kcal) Chất đạm (g) Chất béo (g) Chất bột đường (g) Chất tro (g) Chất xơ thô (g) Khoáng chất Canxi (mg) Photpho (mg) Sắt (mg) Natri (mg) Kali (mg) Anti-Nutritional Factors Acid Oxalic (mg) Tannins (mg) Trên 100mg 7.0 270.0 10.0 3.0 52.0 11.0 18.0 464.4 11.4 55.3 190.0 1800.0 2295.0 0.0 2.1.3 Đặc điểm thực vật - Stevia loài photoblastic cần ánh sáng để nảy mầm, hạt khơng nảy mầm chúng bao phủ đất Mặc dù stevia chịu nhiệt - độ khác nhau, phát triển tối ưu nhiệt độ từ 15 đến 30 độ C Hạt giống bắt đầu nảy mầm trung bình từ bảy đến mười ngày ngâm nước sẵn sang để cấy vào khoảng 45 đến 60 ngày sau gieo Rồi thu hoạch cách cắt mặt đất phép đủ nút phục hồi cho vụ thu hoạch tương lai Ở vùng khí hậu phía Bắc nơi khơng thể có mùa phát triển 180 ngày, stevia trồng thu hoạch lần trước sương giá Vụ mùa kéo dài bảy đến tám năm, với gia tăng suất bốn năm đầu tiên, suy giảm năm Stevia chịu nhiệt độ khác môi trường sống tự nhiên độ cao 200 500 m trải qua nhiệt độ từ -6 đến 43 độ C.[9] 2.2 Hợp chất gây - Các glycoside tìm thấy Stevia Rebaudioside A (2-10%), stevioside (2-10%) Rebaudioside C (1-2%) Các glycoside khác Rebaudioside B, D, E F, steviolbioside rubusoside tìm thấy mức độ thấp nhiều (khoảng 0-0,2%) [10] - Cac loại hợp chất gây glycosides từ cỏ chứa glycon chung steviol khác số lượng loại dư lượng carbohydrate vị trí C13 C19 [10] - Lượng stevioside từ cỏ khơ biến đổi lớn, vào khoảng 5-22% khối lượng khô tùy vào điều kiện thỗ nhưỡng chăm bón Stevioside tìm thấy hoa cỏ với hàm lượng thấp, khoảng 0.9% khối lượng khô (w/w) Bảng: Dữ liệu vật lý độ hòa tan cho tám glycoside từ stevia rabaudiana [8] Hợp chất (Compound) Stevioside Rebaudioside A Rebaudiosde B Rebaudiosde C Rebaudiosde D Rebaudiosde E Steviolbioside Dulcoside A Khối lượng phân tử (Molecular weight) 804 966 804 958 1128 966 642 788 Tính tan nước% ( Solubility in water) 0.13 0.80 0.10 0.21 1.00 1.70 0.03 0.58 Theo Kinghorn Soejarto hàm lượng hòa tan nước chất stevia khơ khoảng 42% Phần thành phần hình thành chất tạo hương vị suất stevia [11] Bảng:Hàm lượng stevioside rebaudioside A môt số quốc gia [12] Quốc gia Russia Ukraine South Korea China Paraguay Japan Canada VietNam Tỉ lệ 100g khô Stevioside 5.8 4.8 5.5 6.6 9.1 7.7 5.0 15.5 Rebaudioside A 1.2 1.3 2.5 3.7 3.8 1.9 0.3 3.8 2.3.1 Phương pháp tách thông thường Phương pháp mô tả Alvarez Couto (1984) Goto (1997) sử dụng 50g stevia cho vào lít nước, đun sơi nhiệt độ phịng ( 25 ℃30℃) Dịch chiết đưa lọc chân không, phễu tách dịch chiết trộn với iso-butanol (hoặc n-butanol), trì tỉ lệ 40:60 (v/v) Để yên đạt giai đoạn tách hoàn toàn Dịch chiết butanolic ly tâm tốc độ 3500 vịng/ phút 15 phút Dịch chiết làm nóng đến 80℃ , lọc qua lớp than hoạt tính ( 1g than hoạt tính cho 100ml dịch chiết) Dịch chiết cô đặc máy cô quay để 24 để tinh thể glycoside kết tinh Sau đó, rửa metanol sấy khơ lị tuần hồn khí.Nước kết tinh đặc trích ly bầngcetone Các tinh thể rửa acetone khan sấy khô lị tuần hồn khơng khí [13] 2.3.2 Phương pháp trích ly sử dụng dung môi CO2 siêu tới hạn ( Supercritical Fluid Extraction) Hình 1: Sơ đồ nguyên lý nhà máy SCFE quy mô thương mại E1: Máy chiêt xuất ST: Bể chứa E2: Máy chiết xuất PC: Bộ lọc E3: Máy chiết xuất SP: Bơm dung môi S1: Máy phân ly PH: Làm nóng S2: Máy phân ly H1,H2: Trao đổi nhiệt EV1, EV2: Van mở rộng G: Bình ngưng CP: Bơm Cosolvent Một lọc thường bơm trộn CO2 áp xuất cao để tăng cường cho dung môi tách thành phần định Việc phân tách thường thực giai đoạn cách trì điều kiện khác hai ba thiết bị phân tách để phân đoạn chiết xuất, tùy thuộc vào độ hòa tan thành phần thông số kĩ thuật mong muốn sản phẩm Tương tự, cách thay đổi áp suất, thay đổi công suất dung môi chất chiếc, hiệu ứng tương đương với việc thay đổi độ phân cực dung mơi chiết Do đó, nhà máy sản xuất có điều kiện hoạt động linh hoạt cho nhiều sản phẩm tự nhiên thu cấu hình sản phẩm khác từ vật liệu thực vật cách sử dụng dung môi nhất, cụ thể CO2 siêu tới hạn [14] 2.4 Qui trình tách stevioside từ cỏ làm chất chuẩn Việt Nam - Hiện nay, có nhiều phương pháp tách hợp chất từ cỏ chủ yếu tách hỗn hợp chất ngọt, stevioside, rebaudioside A - Mỗi quy trình có điều kiện yêu cầu đặc trưng riêng - Các quốc gia có quy trình tách khác nhau: Nhật Bản, Paraguay, Hàn Lá cành khô Bã Đun hồi lưu Lọc Dịch Loại dung môi Cao tổng W Thêm nước Khuấy lắcEtOAc Pha EtOAc Pha nước Hỗn hợp sệt Loại bớt dung môi Lắc với BuOH bão hịa nước Pha BuOH Cơ quay Pha BuOH Cao BuOH Chạy sắc ký cột Phân đoạn phù hợp Cho than hoạt tính vào Lọc, đặc chân khơng Rửa kết tinh nhiều lần MeOH lạnh Stevioside Thuyết minh quy trình: - Ngun liệu sau xử lí sơ bộ, đem đun hồi lưu lần với hệ dung môi (nước cồn) Hỗn hợp cho qua thiết bị lọc hút chân không để loại phần bã rắn, thu dịch màu vàng nâu - Tiến hành cô quay áp suất thấp để loại dung môi, thu dạng cao tổng màu nâu - Cao tổng thêm nước lắc với EtOAc (Ethyl Acetate) 10 phút.Sau tách lấy pha lỏng (nước) Tách lấy pha lỏng, tiếp tục đem cô quay với áp suất thấp để loại hết dung mơi - Sau lắc tiếp với BuOH (n-butanol) iso-butanol bão hịa nước Tiếp tục quay chân không loại BuOH, ta thu cao BuOH - Cao BuOH sau cho chạy sắc kí cột, lọc qua than hoạt tính ( 1g than hoạt tính cho 100ml dịch chiếc), dịch tiếp tục cô đặc máy quay để vịng 24h để tinh thể glycoside kết tinh hoàn toàn 2.5 Một số phương pháp khác trích ly glucoside từ stevia.[9] - a Trích ly q trình hịa tan chọn lọc hay nhiều cấu tử mẫu nguyên liệu cách cho nguyên liệu tiếp xúc với dung môi Glycoside đo lấy nút từ đỉnh cây, glycoside tích lũy với số lượng cao Mô sấy khô nghiền máy nghiền mơ trước phân tích Glycoside thực phép đo cách lấy tán từ bốn lô Lá từ giữ riêng biệt Sau chúng sấy khơ 60 ° C hai ngày sau nghiền thành bột mịn để phân tích Glycoside chiết xuất sau đo hiệu suất sắc ký lỏng phép đo phổ khối, phương pháp phổ biến sử dụng để định lượng glycoside Phương pháp soxhlet - Trong phương pháp này, mẫu đất mịn đặt túi xốp “thimble” làm từ giấy lọc cellulose mạnh, đặt buồng thimble máy Soxhlet Dung mơi chiết đun nóng bình đáy, hóa vào ống mẫu, ngưng tụ bình ngưng nhỏ giọt trở lại Khi hàm lượng chất lỏng đạt lượng định chất lỏng chảy xuống bình trình tiếp tục lặp lại Phương pháp địi hỏi lượng dung mơi nhỏ Tuy nhiên,Dung môi chiết sử dụng hệ thống chiết cần phải có độ tinh khiết cao Hình: Chiết nóng soxhlet b - - Phương pháp chiết chất lỏng điều áp (Pressurized liquid extraction ) Kỹ thuật PLE u cầu lượng nhỏ dung mơi kết hợp áp suất cao nhiệt độ cung cấp khai thác nhanh Nhiệt độ chiết cao thúc đẩy độ hịa tan phân tích cao cách tăng hai độ hòa tan tốc độ truyền khối và, làm giảm Độ nhớt sức căng bề mặt dung môi, cải thiện tỷ lệ khai thác PLE hữu ích cho việc chiết xuất chất ô nhiễm hữu từ môi trường ổn định nhiệt độ mức cao So với chiết xuất soxhlet truyền thống PLE tốt giảm thời gian tiêu thụ sử dụng dung mơi 2.6 Một số nghiên cứu stevioside cỏ Hình: Liều độc tế bào phụ thuộc liều xuất stevia dòng tế bào ung thư Hela Mỗi giá trị đại diện cho sống sót trung bình tế bào SEM nồng độ chiết chọn (a) Mơ tả kính hiển vi tế bào Hela, nhóm đối chứng tế bào chiết xuất stevia (b) [15] Chương 3: Glucosid tim Tổng quan [1] Trong glycozit tim tồn hòa tan dung dịch tế bào Dưới tác dụng men axit loãng, glycozit → genin đường Glycozit tim tồn khoảng 10 họ thực vật, đặc biệt họ Apocynaceae họ Asclepiadaceae Phần genin: có cấu trúc vịng A, B, C, D, F Vòng F vòng lacton γ δ gắn với C17 Dựa vào vòng lacton người ta chia thành hai nhóm chính: – Cacdenolit (I), genin có vịng γ- lacton -α, β -khơng no ( cịn gọi butenolit) – Butadienolit (II), genin có vịng δ- lacton khơng no với nối đơi (cịn gọi pentenolit) Cấu trúc genin glycozit tim khác điểm: Cấu hình C3 , C5 C17 (α β) Có thể thêm nhóm chức chứa oxi, chủ yếu nhóm OH Tại C1 , C2 , C5 , C11 ,C12 , C15 , C16 , C19 Có thể có liên kết đơi khung, thường vịng B 3.1 Định nghĩa Glycoside tim glycoside steroid có tác dụng đặc biệt lên tim liều điều trị có tác dụng cường tim, chậm điều hịa nhịp tim Nếu q liều gây buồn nôn, chảy nước bọt, mờ mắt, yếu cơ, loạn nhịp tim, giảm sức co bóp tim cuối làm ngừng tim thời kì tâm thu tim ếch tâm trương động vật máu nóng Glycoside tim cịn gọi glycoside digitalic glycoside digitan(digitalis) dùng đấu tiên lâm sang để chữa bệnh tim 3.2 Nguồn gốc Glycoside tim có 45 lồi thực vật chủ yếu thuộc họ: apocynaceae, asclepiadaceae, tiliaceae(đay), celastraceae(dây gối),… số trùng, glycoside tim có phận lá, hoa, vỏ thân, rễ, nhựa mủ… • • - • • • 3.3 Cấu trúc hóa học phân loại Glucosid tim glucosid khác, có phần đường phần khơng đường 3.3.1 Phần khơng đường (aglycon) Phần khơng đường chia thành phần nhỏ : phần hydrocacbon mạch nhánh vòng lacton Phần hydrocacbon: dẫn chất 10,13dimetylxyclopentanopehydrophenantren Đính vào nhân cịn có nhóm chức chứa oxy Vòn lacton: phần aglycon glycoside tim ngồi khung hydrocacbon nói đặc biệt cịn có vịng lacton nối vào vị trí C-17 khung Vòng lacton coi mạch nhánh hầu hết chất có tác dụng dược lí có vịng lacton hướng b dựa vào vong lacton người ta chia glycoside tim thành nhóm: Nếu vịng lacton có 4C, có nối đơi vị trí a-b aglycon có 23 cacbon glycoside tim thuộc nhóm cardenolid Nếu vịng lacton có 5C, có hai nối đơi aglycon có 24 cacbon glycoside tim thuộc nhóm butadienolid 3.3.2 Phần đường Phần đường nối vào OH C-3 aglycon Cho đến người ta biết khoảng 40 loại đường khác Ngoài nhựng đường thong7 thường Dglucose, L-glucose, D-fucose có gặp nhóm glycoside khác, cịn lại đường gặp glycoside tim 3.4 Tính chất Glycozit tim chất có tác dụng quang học, kết tinh vơ định hình, vị đắng… số glycozit tan nước, số không tan lại tan dung môi hữu Glycoside tim nhóm glycozit có cấu trúc steroid, có tác dụng đặc hiệu tim liều cao chúng trở nên gây độc nặng dẫn đến chết người Người dân thường dùng glycoside tim để tẩm vào cung tên q trình săn bắn thú rừng a • • b • • c • • d • • a • • b c - - 3.5 Một số chứa glycoside tim Digital tía ( dương địa hồng hoa tím ): cỏ, sống khoảng năm, mọc phổ biến tây âu đất silic Cơng dụng: dùng dạng bào chế dược liệu (bột cồn thuốc digital) nguyên liệu để chiết xuất glycoside tim (digitoxin, gitaloxin) Thành phần chủ yếu có lá: hoạt chất glycoside tim kiểu cardienilid với hàm lượng 0,1 – 0,4% , 5% nước hoạt chất dễ bị phân hủy, ngồi cịn có hợp chất flavonoid có luteolin, saponin sterolic digitanol – glycoside Nerium oleander L ( trúc đào): -Là cảnh, có hoa màu hồng trắng, mọc phổ biến vùng Địa Trung Hải vùng Tây Âu Thành phần hóa học chứa lá: 0,5% glycoside tim với hoạt chất neriolin với hàm lượng 0,08 – 0,15% Cơng dụng: neriolin có tác dụng với triệu chứng khó thở , có tác dụng trợ tim sau đến Thevetia peruviana K Schum (thơng thiên) Thành phần hóa học lá: có chứa glycoside tim(thevetin B) với hàm lượng thấp, hạt chứa hỗn hợp thevetin A(38%) thevetin B (61%) có thevetin B có tác dụng cường tim Cơng dụng: kích thích trơn bàng quang ruột, thơng tiểu, sử dụng liều cao gây lỏng, có tác dụng an thần Tiliaceae ( họ đay) Thành phần hóa học: hạt chứa khoảng 2,5% glycosid tim, 0.85% olitorisid, 1,75% corchorosid Công dụng: tác dụng cường tim, tăng tốc độ co bóp tim 3.6 Tác dụng dược lí glycosid tim Tác dụng lên tim Tăng co bóp: glycoside tim làm tăng lực tốc độ co bóp tim Tác động mức dẫn truyền: tác dụng giảm dẫn truyền cách làm giảm tốc độ dẫn truyền đến tiếp nối nhĩ thất, kéo dài thời gian trơ nút nhĩ thất Tác dụng lên hệ thần kinh trung ương: Kích thích trung tâm thị giác Tác dụng lên hệ tiết niệu: Tác dụng gián tiếp lợi tiểu tăng lưu lượng máu, làm tăng lọc cầu thận tiết nước tiểu 3.7 Sử dụng dược liệu chứa glycosid tim Độc tính: ngộ độc gây rối loạn nhịp tim với ngoại tâm thu tâm thất, gây chết người tim ngừng hoạt động, ngồi cịn gây phản ứng khơng dung nạp tiêu hóa( nơn mửa, ỉa chảy) Dạng bào chế: dùng để chiết xuất glucosid tim: digitoxin (ở digital tía), scillaren (ở urginea scilla), ouabain (ở strophanthus gratus) Chỉ định: trường hợp thiểu tim rối loạn nhịp tim Chú ý sử dụng: digoxin không dùng cho bệnh nhân thiểu thận, digitalin không dùng cho bệnh nhân thiểu gan đặc biệt phải có định bác sĩ 3.8 Ứng dụng glucoside steviol - Chất hòa tan tự nhiên: Một số yếu tố ảnh hưởng đến khả sinh học đường uống, bao gồm khả hịa tan nước, tính thấm thuốc vào tế bào, tốc độ hịa tan, chuyển hóa tiền hệ thống độ nhạy cảm với chế dòng chảy Độ hòa tan thuốc nước dẫn đến hấp thụ chậm thể quan sát thấy 70% ứng cử viên hoạt chất dược phẩm năm gần gây ảnh hưởng đến niêm mạc dày ruột [2] - Steviol glucosides có nhiều ứng dụng khác bao gồm việc sử dụng chúng loại đường thay cho thực phẩm, làm thành phần cho dược phẩm làm chất hịa tan Do đó, việc sản xuất hợp chất từ stevioside cách sử dụng glucoside cố định với suất chuyển đổi cao có tiềm lớn sử dụng ứng dụng công nghiệp [16] -Sử dụng y tế: Stevia chứa loạt chất làm tự nhiên có tiềm điều trị chống lại số bệnh đái tháo đường, nấm candida, tăng huyết áp, viêm, béo phì ung thư[17] - Sử dụng làm phân bón thức ăn chăn nuôi: tốt thu hoạch để uống trà để chiết xuất phận cịn lại thân, hạt, hoa chí khơng chọn thu thập chế biến thành thức ăn chăn ni phân bón[18] 3.9 Quy trình chiết xuất glycosid tim từ trúc đào Cân khoảng 10g Trúc đào khô tán nhỏ cho vào bình nón dung tích 250ml Thêm 100ml cồn 25% ngâm 24 Gạn dịch chiết vào cốc có mỏ dung tích 100ml Thêm vào dịch chiết 3ml chì acetat 30%, khuấy Lọc qua giấy lọc gấp nếp vào cốc có mỏ dung tích 100ml Nhỏ vài giọt dịch lọc vào ống nghiệm, thêm giọt chì acetat Nếu xuất tủa ngừng lọc, thêm khoảng 1ml chì acetat 30% vào dịch chiết, khuấy đều, lọc lại tiếp tục thử đến dịch lọc khơng cịn tủa với chì acetat Chuyển tồn dịch lọc vào bình gạn dung tích 100ml Chiết glycosid tim cách lắc với cloroform lần, lần 8ml Gạn lớp cloroform vào cốc có mỏ sấy khô Gộp dịch chiết chloroform loại nước natrisulfat khan Chia dịch chiết vào ống nghiệm nhỏ sấy khô Đặt ống nghiệm lên giá bốc nồi cách thủy đến khô Cắn thu đem tiến hành làm phản ứng định tính sắc ký lớp mỏng 10g trúc đào Thêm 100 ml cồn 25% Bình nón 250 ml Ngâm 24 h Thêm 3ml chì acetat 30% Gạn dịch chiếtđều Khuấy vào bình 100 ml Lọc Chiết cloroform lần ,mỗi lần ml Loại nước natrisulfat khan Dịch chiết ống nghiệm Tiến hành phản ứng định tính định lượng Tài liệu tham khảo 10 11 12 13 14 15 16 17 18 Belitz, I.H.-D and I.W Grosch, Food chemistry 2013: Springer Science & Business Media Nguyen, T.T.H., et al., Enzymatic production of steviol glucosides using β-glucosidase and their applications, in Enzymes in Food Biotechnology 2019, Elsevier p 405-418 Meng, L.-s., et al., Cyanidin-3-O-glucoside attenuates amyloid-beta (1–40)-induced oxidative stress and apoptosis in SH-SY5Y cells through a Nrf2 mechanism Journal of Functional Foods, 2017 38: p 474-485 Ge, J.-F., et al., Orcinol glucoside produces antidepressant effects by blocking the behavioural and neuronal deficits caused by chronic stress European Neuropsychopharmacology, 2014 24(1): p 172-180 Qian, J., et al., A review on the extraction, purification, detection, and pharmacological effects of 2, 3, 5, 4’-tetrahydroxystilbene-2-O-β-d-glucoside from Polygonum multiflorum Biomedicine & Pharmacotherapy, 2020 124: p 109923 Bradbury, J.H and I.C Denton, Mild methods of processing cassava leaves to remove cyanogens and conserve key nutrients Food Chemistry, 2011 127(4): p 1755-1759 Jurica, K., et al., Arbutin and its metabolite hydroquinone as the main factors in the antimicrobial effect of strawberry tree (Arbutus unedo L.) leaves Journal of herbal medicine, 2017 8: p 17-23 Kinghorn, A.D., Stevia: the genus Stevia 2001: CRC Press Huber, B.M., Studies on Stevia (Stevia rebaudiana) 2017 Purkayastha, S., et al., Stevia composition to improve sweetness and flavor profile 2016, Google Patents Pasquel, A., M.O Marques, and M.A.A Meireles, Stevia (Stevia rebaudiana Bertoni) leaves pretreatment with pressurized CO2: an evaluation of the extract composition carbon, 1999 9(13): p 14 Kovylyaeva, G., et al., Glycosides from Stevia rebaudiana Chemistry of Natural Compounds, 2007 43(1): p 81-85 Pasquel, A., et al., Extraction of stevia glycosides with CO2+ water, CO2+ ethanol, and CO2+ water+ ethanol Brazilian Journal of Chemical Engineering, 2000 17(3): p 271-282 Mukhopadhyay, M., Natural extracts using supercritical carbon dioxide 2000: CRC press Yildiz-Ozturk, E., et al., A comparative study on extraction processes of Stevia rebaudiana leaves with emphasis on antioxidant, cytotoxic and nitric oxide inhibition activities Industrial Crops and Products, 2015 77: p 961-971 Ahmed, B., et al., A review on natural sweetener plant–Stevia having medicinal and commercial importance Agronomski glasnik: Glasilo Hrvatskog agronomskog društva, 2011 73(1-2): p 75-91 Ahmad, J., et al., Stevia rebaudiana Bertoni.: an updated review of its health benefits, industrial applications and safety Trends in Food Science & Technology, 2020 Hossain, M., et al., Cultivation and uses of stevia (Stevia rebaudiana Bertoni): a review African Journal of Food, Agriculture, Nutrition and Development, 2017 17(4): p 1274512757 ... Công dụng: tác dụng cường tim, tăng tốc độ co bóp tim 3.6 Tác dụng dược lí glycosid tim Tác dụng lên tim Tăng co bóp: glycoside tim làm tăng lực tốc độ co bóp tim Tác động mức dẫn truyền: tác dụng. .. tục cô đặc máy cô quay để vòng 24h để tinh thể glycoside kết tinh hoàn toàn 2.5 Một số phương pháp khác trích ly glucoside từ stevia.[9] - a Trích ly q trình hịa tan chọn lọc hay nhiều cấu tử mẫu... ,Benzoyl-beta-D -glucoside, Arbutin , -Dẫn xuất styrolenr Coniferin, Syringin -Dẫn xuất anthracene: amygdalin , saponin, 1.3 Ứng dụng glucoside - Steviol glucoside có khả điều hịa miễn dịch tác dụng bảo