Nghiên cứu đặc điểm thực vật, thành phần hóa học và tác dụng sinh học của cây thông quan đằng ( marsdenia tenacissima ( roxb ) moon) ở hà giang

BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC DƯỢC HÀ NỘI PHẠM THỊ VÂN NGHIÊN CỨU ĐẶC ĐIỂM THỰC VẬT, THÀNH PHẦN HĨA HỌC VÀ TÁC DỤNG SINH HỌC CỦA CÂY THƠNG QUAN ĐẰNG (MARSDENIA TENACISSIMA (ROXB.) MOON) Ở HÀ GIANG KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP DƯỢC SĨ HÀ NỘI – 2020 BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC DƯỢC HÀ NỘI PHẠM THỊ VÂN MÃ SINH VIÊN: 1501545 NGHIÊN CỨU ĐẶC ĐIỂM THỰC VẬT, THÀNH PHẦN HÓA HỌC VÀ TÁC DỤNG SINH HỌC CỦA CÂY THÔNG QUAN ĐẰNG (MARSDENIA TENACISSIMA (ROXB.) MOON) Ở HÀ GIANG KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP DƯỢC SĨ Người hướng dẫn: ThS Nghiêm Đức Trọng Nơi thực hiện: Bộ môn Thực Vật – Trường Đại học Dược Hà Nội HÀ NỘI – 2020 LỜI CẢM ƠN Trong trình thực khóa luận này, tơi nhận nhiều quan tâm, động viên, giúp đỡ từ thầy cơ, gia đình bạn bè Với lịng kính trọng biết ơn sâu sắc, xin gửi lời cảm ơn chân thành tới ThS Nghiêm Đức Trọng, người thầy trực tiếp hướng dẫn, tận tình bảo tạo điều kiện tốt cho q trình tơi thực hồn thành khóa luận Bên cạnh đó, q trình thực khóa luận nhận giúp đỡ bảo tận tình thầy cơ, anh, chị khác Tơi xin bày tỏ lòng cảm ơn sâu sắc tới ThS Phạm Thị Linh Giang, ThS Lê Thiên Kim tất kỹ thuật viên Bộ môn Thực vật ln bảo, giúp đỡ tơi hồn thành khóa luận Tôi xin trân trọng cảm ơn Ban giám hiệu thầy cô Trường Đại học Dược Hà Nội dìu dắt tơi năm học qua Cuối cùng, tơi xin gửi lời cảm ơn tới gia đình, bạn bè chỗ dựa, động viên khó khăn, giúp tơi hồn thành khóa luận Hà Nội, ngày 14 tháng năm 2020 Sinh viên Phạm Thị Vân MỤC LỤC MỤC LỤC DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT DANH MỤC BẢNG DANH MỤC HÌNH ĐẶT VẤN ĐỀ Chương TỔNG QUAN 1.1 Tổng quan chi Marsdenia R Brown 1.1.1 Vị trí phân loại chi Marsdenia R Brown 1.1.2 Đặc điểm thực vật phân loại chi Marsdenia R Brown 1.2 Tổng quan loài Marsdenia tenacissima (Roxb.) Moon 1.2.1 Đặc điểm thực vật phân bố loài Marsdenia tenacissima (Roxb.) Moon 1.2.2 Thành phần hóa học 1.2.3 Sử dụng Y học cổ truyền 10 1.2.4 Tác dụng sinh học 10 1.2.5 Sử dụng lâm sàng 12 Chương ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 14 2.1 Nguyên liệu, thiết bị 14 2.1.1 Nguyên liệu 14 2.1.2 Thiết bị 14 2.1.3 Hóa chất 14 2.2 Nội dung, phương pháp nghiên cứu 15 2.2.1 Nghiên cứu đặc điểm thực vật 15 2.2.2 Nghiên cứu thành phần hóa học 16 2.2.3 Nghiên cứu tác dụng sinh học 20 Chương THỰC NGHIỆM VÀ KẾT QUẢ 22 3.1 Kết nghiên cứu đặc điểm thực vật 22 3.1.1 Đặc điểm hình thái 22 3.1.2 Đặc điểm vi phẫu 24 3.1.3 Đặc điểm vi phẫu thân 26 3.1.4 Đặc điểm bột 28 3.1.5 Đặc điểm bột thân 28 3.2 Kết nghiên cứu thành phần hóa học 29 3.2.1 Kết định tính phản ứng hóa học 29 3.2.2 Kết định tính cắn tồn phần sắc kí lớp mỏng 31 3.3 Kết nghiên cứu tác dụng sinh học in vitro 33 Chương BÀN LUẬN 34 4.1 Về đặc điểm thực vật 34 4.2 Về thành phần hóa học 35 4.3 Về tác dụng sinh học 36 KẾT LUẬN 38 ĐỀ XUẤT 38 TÀI LIỆU THAM KHẢO Tài liệu Tiếng Việt Tài liệu Tiếng Anh PHỤ LỤC DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT M tenacisisma Marsdenia tenacissima Rf Hệ số lưu SKLM Sắc ký lớp mỏng STT Số thứ tự TT Thuốc thử UV254nm Đèn tử ngoại bước sóng 254nm UV365nm Đèn tử ngoại bước sóng 365nm PUHH Phản ứng hóa học PU Phản ứng TBUT Tế bào ung thư TCA Trichloracetic acid SRB Sulforhodamin a.formic Acid formic DANH MỤC BẢNG Bảng 1.1 Đặc điểm bật loài chi Marsdenia Bảng 3.1 Kết định tính nhóm chất hữu 30 Bảng 3.2 Giá trị Rf màu sắc vết sắc kí đồ 31 Bảng 3.3 Kết thử tác dụng gây độc tế bào ung thư 33 DANH MỤC HÌNH Hình 1.1 Cơng thức cấu tạo nhóm steroid Hình 1.2 Cơng thức cấu tạo số chất khác nhóm steroid Hình 3.1 Đặc điểm hình thái Thông quan đằng 23 Hình 3.2 Hình ảnh vi phẫu Thơng quan đằng 25 Hình 3.3 Hình ảnh vi phẫu thân Thơng quan đằng 27 Hình 3.4 Hình ảnh bột dược liệu Thông quan đằng 28 Hình 3.5 Hình ảnh bột dược liệu thân Thơng quan đằng 29 Hình 3.6 Hình ảnh sắc kí cắn tồn phần với hệ dung mơi 33 Hình 4.1 Hình ảnh Thông quan đằng mọc tự nhiên 35 ĐẶT VẤN ĐỀ Cây Thông quan đằng có tên khoa học Marsdenia tenacissima (Roxb.) Moon, thuộc họ Thiên lý (Asclepiadaceae) loại thảo dược nhiều quốc gia sử dụng Thông quan đằng đưa vào Dược điển Trung Quốc 2015 Trong y học cổ truyền, thân rễ sử dụng để điều trị ho, hen suyễn, viêm khí quản, viêm amidan, viêm họng, viêm bàng quang, viêm phổi sốt [9] Các nghiên cứu thành phần hóa học Thông quan đằng báo cáo từ lâu [23], [25], [27], [28], có khoảng 196 chất thuộc nhóm steroid, triterpen, acid hữu phân lập Dịch chiết thô hợp chất phân lập từ Thông quan đằng thể tác dụng dược lý khác như: gây độc tế bào ung thư, ức chế kháng thuốc, ức chế tạo mạch số tác dụng khác [26] Ngoài ra, sản phẩm thuốc tiêm từ dịch chiết Thông quan đằng bán thị trường Trung Quốc với tên thương mại Xiaoaiping [Phụ lục ], sử dụng kết hợp với hóa trị liệu để điều trị nhiều loại bệnh ung thư khác như: ung thư phổi, gan, thực quản, ruột [17], [20], [21], [22] Ở Việt Nam, Thơng quan đằng tìm thấy An Giang, Đắk Nông, Gia Lai với tên thường gọi Dây hàm liên, Hàm liên nam [1], [6] Tuy nhiên, chưa có nghiên cứu thành phần hóa học tác dụng dược lí lồi Để bước đầu xây dựng sở liệu đầy đủ Thông quan đằng Việt Nam, tiến hành đề tài “Nghiên cứu đặc điểm thực vật, thành phần hóa học tác dụng sinh học Thông quan đằng (Marsdenia tenacissima (Roxb.) Moon) Hà Giang” với mục tiêu: Mô tả đặc điểm thực vật Thông quan đằng Xác định thành phần hóa học: nhóm chất hữu thường gặp dược liệu Xác định hoạt tính gây độc tế bào ung thư in vitro dịch chiết thân Thông quan đằng CHƯƠNG TỔNG QUAN 1.1 Tổng quan chi Marsdenia R Brown 1.1.1 Vị trí phân loại chi Marsdenia R Brown Theo tài liệu [1], [4], [8] chi Marsdenia R Brown xếp vào họ Thiên lý (Asclepiadaceae) Trong hệ thống phân loại thực vật, vị trí chi Marsdenia R Brown tóm tắt đây: Ngành Ngọc lan – Magnoliophyta Lớp Ngọc lan – Magnoliopsida Phân lớp Bạc hà – Lamiidae Bộ Long đởm – Gentianales Họ Thiên lý – Asclepiadaceae Phân họ Bông tai - Asclepiadoideae Chi Hàm liên - Marsdenia 1.1.2 Đặc điểm thực vật phân loại chi Marsdenia R Brown 1.1.2.1 Đặc điểm hình thái Chi Marsdenia lần R Brown mơ tả vào năm 1810, có đặc điểm chung sau: Cây leo hay trườn, khơng có rễ phụ phát triển thân Lá mọc đối, không nạc Cụm hoa xim nách Hoa nhỏ Thuỳ đài nhỏ, thường hình trứng, đầu tù, gốc đài có tuyến mọc xen với đài, khơng có tuyến đài Tràng 5, hình hũ, thùy tràng khơng gập vào nụ, xoắn sang phải, họng tràng thường có lơng, mặt thùy tràng khơng dày lên (khơng có gờ) Tràng phụ đơn, dính với cột nhị nhụy, vảy tràng phụ thường ngắn, hình tam giác Chỉ nhị dính nhau; bao phấn ơ, có phần phụ đỉnh; hạt phấn dính thành khối phấn có sáp bao bên ngồi vách khối phấn, khối phấn khơng có mỏm đỉnh; quan truyền phấn có gót đính chi; khối phấn hướng lên; có khối phấn ô phấn Đầu nhụy phẳng, gồ ghề hay tạo thành hình mỏ chim; đỉnh bầu khơng thót lại thành hình vịi nhụy Quả dày, nhọn, gồm đại, mặt ngồi nhẵn hay có cánh, đơi vỏ ngồi có nước dịch Hạt có mào lơng đầu [1], [31] Ảnh tiêu M tenacissima lưu trữ Bộ môn Thực vật – Trường Đại học Dược Hà Nội Ảnh tiêu M tenacissima lưu trữ Bộ môn Thực vật – Trường Đại học Dược Hà Nội Ảnh tiêu M tenacissima lưu trữ Bộ môn Thực vật – Trường Đại học Dược Hà Nội Ảnh tiêu M tenacissima lưu trữ Bộ môn Thực vật – Trường Đại học Dược Hà Nội Ảnh tiêu M tenacissima lưu trữ Bộ môn Thực vật – Trường Đại học Dược Hà Nội Phụ lục Hình ảnh chồng phổ sắc kí dịch chiết thân Dịch chiết thân Dịch chiết Phụ lục Hình ảnh sắc kí đồ quan sát ánh sáng trắng bước sóng 365 nm A B A Sắc kí đồ quan sát ánh sáng trắng B sắc kí đồ quan sát bước sóng 365 nm Phụ lục Phiếu giám định tên khoa học Phụ lục Hình ảnh thuốc tiêm Xiao-ai-ping ... ĐẠI HỌC DƯỢC HÀ NỘI PHẠM THỊ VÂN MÃ SINH VIÊN: 1501545 NGHIÊN CỨU ĐẶC ĐIỂM THỰC VẬT, THÀNH PHẦN HÓA HỌC VÀ TÁC DỤNG SINH HỌC CỦA CÂY THÔNG QUAN ĐẰNG (MARSDENIA TENACISSIMA (ROXB.) MOON) Ở HÀ GIANG. .. cứu đặc điểm thực vật, thành phần hóa học tác dụng sinh học Thông quan đằng (Marsdenia tenacissima (Roxb.) Moon) Hà Giang? ?? với mục tiêu: Mô tả đặc điểm thực vật Thông quan đằng Xác định thành phần. .. thử tác dụng sinh học 37 KẾT LUẬN - Nghiên cứu đặc điểm thực vật Mô tả đặc điểm hình thái, đặc điểm vi phẫu, đặc điểm bột dược liệu thân Thông quan đằng Giám định tên khoa học mẫu nghiên cứu Marsdenia