Nghiên cứu này được thực hiện nhằm đánh giá ảnh hưởng của chất kháng khuẩn trong phòng trị bệnh hoại tử gan tụy cấp tính trên tôm thẻ chân trắng. Tôm thẻ chân trắng có trọng lượng từ 2-3g được cho ăn poly- ß –hydroxybutyrate (PHB) hoặc chất chiết xuất từ thảo dược Sanocore và Aqua Apex trong 14 ngày sau đó được gây bệnh thực nghiệm với Vibrio parahaemolyticus.
VIỆN NGHIÊN CỨU NUÔI TRỒNG THỦY SẢN II ẢNH HƯỞNG CỦA CHẤT KHÁNG KHUẨN TRONG PHÒNG TRỊ BỆNH HOẠI TỬ GAN TỤY CẤP TÍNH Ở TƠM THẺ CHÂN TRẮNG Lê Hồng Phước 1*, Bùi Linh Tâm2, Cao Thành Trung , Đồn Văn Cường1, Nguyễn Thanh Trúc1 TĨM TẮT Nghiên cứu thực nhằm đánh giá ảnh hưởng chất kháng khuẩn phòng trị bệnh hoại tử gan tụy cấp tính tơm thẻ chân trắng Tơm thẻ chân trắng có trọng lượng từ 2-3g cho ăn poly- ß –hydroxybutyrate (PHB) chất chiết xuất từ thảo dược Sanocore Aqua Apex 14 ngày sau gây bệnh thực nghiệm với Vibrio parahaemolyticus Tỷ lệ tơm chết ghi nhận vịng 12 ngày sau gây nhiễm để đánh giá hiệu chất kháng khuẩn Kết thí nghiệm cho thấy cho tôm ăn PHB liều 1% thức ăn Sanocore (3g/kg thức ăn) Aqua Apex (4,5g/kg thức ăn) có khả phịng bệnh hoại tử gan tụy cấp tính (tỷ lệ chết nhóm thử nghiệm từ 25-40% so với đối chứng 65%) Việc kết hợp loại sản phẩm chưa thấy hiệu cộng hợp phòng bệnh Sử dụng chế phẩm vi sinh BioshrimpRIA2 đơn lẻ chưa thấy hiệu phòng bệnh rõ rệt kết hợp vi sinh chất kháng khuẩn cho thấy tỷ lệ chết giảm so với không dùng chế phẩm vi sinh Từ khóa: PHB, tơm thẻ chân trắng, Sanocore, Aqua Apex I ĐẶT VẤN ĐỀ Trong năm gần đây, nghề nuôi thủy sản phát triển mạnh tỉnh thuộc Đồng sông Cửu Long tơm sú tơm thẻ chân trắng xem hai đối tượng chủ lực quan tâm nhiều Cùng với phát triển đối tượng diện tích ni vấn đề dịch bệnh Trong năm 2015, người ni tơm gặp phải khó khăn thời tiết bất thường, giá bệnh gây chết hàng loạt tôm nuôi Các tháng đầu năm 2016 người nuôi tiếp tục gặp khó khăn hạn hán, nắng nóng kéo dài xâm nhiễm mặn làm ảnh hưởng đến mùa vụ thả ni khơng theo kế hoạch Ngồi bệnh đốm trắng xem bệnh nguy hiểm cho tôm nuôi từ trước đến nay, kể từ năm 2010 bệnh hoại tử gan tụy diễn biến phức tạp gây thiệt hại lớn cho người nuôi Theo Loc Tran ctv., (2013) bệnh hoại tử gan tụy cấp tính Vibrio parahaemolyticus nhiễm thể thực khuẩn (bacteriophage) Kết nghiên cứu bước đầu cho thấy có phương pháp gây nhiễm cách ngâm hay nuôi chung tôm bệnh tôm khỏe thấy lây nhiễm AHPND Hơn nữa, có V parahaemolyticus phân lập từ dày tôm bệnh gây bệnh thực nghiệm cho tỷ lệ chết dấu hiệu bệnh lý AHPND xuất ngồi tự nhiên Bằng phương pháp nghiên cứu mơ bệnh học cho thấy giai đoạn sớm bệnh có gan tụy bị ảnh hưởng vi khuẩn phân lập từ gan tụy khơng có khả gây bệnh ngồi tự nhiên Nhóm tác giả cho dày tôm bệnh nguồn chứa tác nhân gây bệnh Như đề cập trên, trước nhóm tác Trung tâm quan trắc mơi trường & Bệnh thủy sản Nam Bộ, Viện Nghiên cứu Nuôi trồng Thủy sản II Đại học Nông Lâm, Tp Hồ Chí Minh * Email: lehongphuoc@yahoo.com 54 TẠP CHÍ NGHỀ CÁ SÔNG CỬU LONG - SỐ - THÁNG 9/2016 VIỆN NGHIÊN CỨU NUÔI TRỒNG THỦY SẢN II giả có đề cập đến V parahaemolyticus mang thể thực khuẩn kết nghiên cứu tiếp cho thấy thể thực khuẩn khơng có liên quan đến bệnh hoại tử gan tụy cấp tính Năm 2014, dịch bệnh hoại tử gan tụy cấp tính xảy 226 xã, 58 huyện thuộc 22 tỉnh/ thành phố phạm vi nước Theo kết tổng hợp từ Cục Thú Y (2015) cho thấy tổng diện tích tơm ni bị bệnh 5.463,38 Trong tổng diện tích ni theo hình thức thâm canh bán thâm canh bị thiệt hại 4.830 ha, cịn lại hình thức nuôi quảng canh, quảng canh cải tiến tôm lúa Bệnh xảy tôm sú tôm thẻ chân trắng có độ tuổi từ 10-100 ngày sau thả nuôi Trong 11 tháng đầu năm 2015 bệnh hoại tử gan tụy cấp tính xảy 29 xã, 76 huyện, thị xã thuộc 22 tỉnh/thành phố Tổng diện tích bị thiệt hại 9.103,43 So sánh kỳ năm 2014 số diện tích tơm bệnh hoại tử gan tụy cấp tính tăng Việc phịng trị bệnh kháng sinh mang lại hiệu định để lại nhiều hậu vi khuẩn kháng thuốc truyền gen kháng thuốc làm ảnh hưởng đến sức khỏe người tiêu thụ Điều quan trọng ảnh hưởng trực tiếp đến tôm xuất Dư lượng kháng sinh rào cản lớn làm ảnh hưởng đến tiêu thụ sản phẩm phạm vi nước Hợp chất cao phân tử ß-hydroxy shortchain fatty acids (polyhydroxyalkanoates) quan tâm quan trọng poly- ß -hydroxybutyrate (PHB) Defoirdt ctv., 2007 tìm thấy bổ sung 1000 mg/l PHB dạng hạt 107 tế bào/ml vi khuẩn bất hoạt Brachymonas có chứa PHB vào nước ni Artemia giúp cho việc kháng lại Vibrio campbellii Theo Nhan ctv., 2010 việc bổ sung PHB thông qua thức ăn tươi sống làm tăng tỷ lệ sống gấp lần ấu trùng tôm xanh (Macrobrachium rosenbergii) Hơn nữa, mật độ Vibrio ruột giảm đáng kể so với đối chứng Sản phẩn chiết xuất từ thảo dược Sanocore®GM có tính chất tĩnh khuẩn sát khuẩn vi khuẩn gây bệnh có tiềm gây bệnh Ngồi sản phẩm cịn làm gián đoạn phân tử tín hiệu vi khuẩn nồng độ nồng độ ức chế tối thiểu Thí nghiệm điều kiện phịng thí nghiệm cho thấy sản phẩm làm tăng 20% tăng trọng tuần Tác dụng diệt khuẩn làm gián đoạn phân tử tín hiệu kiểm tra tơm ni bán thâm canh Panama Trong nghiên cứu thử nghiệm hiệu phòng trị bệnh chất kháng khuẩn nhằm tìm giải pháp thích hợp phịng trị bệnh hoại tử gan tụy cấp tính cho tôm nuôi II VẬT LIỆU, PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 2.1 Vật liệu Chủng vi khuẩn gây bệnh hoại tử gan tụy cấp tính phân lập từ mẫu tơm bệnh thu tỉnh Sóc Trăng (huyện Vĩnh Châu, tỉnh Sóc Trăng) Tôm thẻ chân trắng cỡ PL15 2-3g dùng cho thí nghiệm phịng trị bệnh Mơi trường ni cấy tăng sinh vi khuẩn cho thí nghiệm: TCBS (Thiosulfate Citrate Bile Succrose), NB (Nutrient Broth) thiết bị nuôi cấy tăng sinh vi khuẩn (tủ cấy vô trùng, tủ ấm, ly tâm lạnh…) Các thiết bị dụng cụ dùng cho thí nghiệm tơm: bể kính, bể composite, máy sục khí,… Các chất kháng khuẩn chế phẩm vi sinh dùng thí nghiệm PHB (Metabolix, Đức), Sanocore, Aqua-Apex (Nutriad), chế phẩm vi sinh BioshrimpRIA2 TẠP CHÍ NGHỀ CÁ SƠNG CỬU LONG - SỐ - THÁNG 9/2016 55 VIỆN NGHIÊN CỨU NUÔI TRỒNG THỦY SẢN II 2.2 Phương pháp nghiên cứu 2.2.1 Tơm thí nghiệm điều kiện nuôi Tôm thẻ chân trắng trước thả nuôi thu mẫu đại diện 10% kiểm tra mầm bệnh thông thường gây bệnh tôm phương pháp PCR như: WSSV (White Spot Syndrome Virus), YHV (Yellow Head Virus), IMNV (Infectious Myonecrosis Virus), IHHNV (Infectious Hypodermal and Hematopoietic Necrosis), Vibrio phát sáng Vibrio parahaemolyticus Tơm thí nghiệm ni độ mặn 20 gL-1, pH từ 7,8-8,1 Cho tôm ăn 2,5% trọng lượng thể với thức ăn viên Lucky star từ cơng ty Đài Loan có thành phần đạm 55%, béo 8%, bơ 2,5%, tro 13%, độ ẩm 8% Tôm ni bể composite sau kiểm tra lại mầm bệnh nêu trên, chuyển lên bể kính 100 lít dưỡng tuần trước tiến hành thí nghiệm 2.2.2 Chuẩn bị vi khuẩn gây nhiễm Vibrio parahaemolyticus phân lập từ mẫu tôm bệnh hoại tử gan tụy cấp tính dùng cho thí nghiệm gây nhiễm Vi khuẩn giữ giống 20% glycerol giữ -80oC sau cấy mơi trường Thiosulfate Citrate Bile Succrose Agar (TCBS) ủ 28oC 24 Khuẩn lạc đơn chuyển sang môi trường Nutrient Broth + 2% NaCl tăng sinh qua đêm 28oC với tốc độ lắc 150 vòng/phút Vi khuẩn sau tăng sinh chuyển sang ống ly tâm ly tâm tốc độ 2.200 g 15 phút, bỏ dịch nổi, rửa cặn lần với nước muối sinh lý vô trùng Mật độ vi khuẩn xác định cách đo mật độ quang sau tính OD =1 tương ứng với 1,2 x 109 CFU/ml (việc tính tốn mật độ vi khuẩn dựa mật độ quang có so sánh với kết thu mẫu cấy trực tiếp đếm lượng khuẩn lạc mọc đĩa thạch) 2.2.3 Thí nghiệm gây nhiễm Nước biển ni tơm có độ mặn 20 gL-1 xử lý với 30 mgL-1 chlorine 56 ngày với sục khí mạnh sau trung hịa Na2S2O3 để loại trừ dư lượng chlorine Tùy theo mục đích thí nghiệm, sau tơm ni nghiệm thức khác tiến hành gây nhiễm với V parahaemolyticus để đánh giá khả phòng trị loại chế phẩm sử dụng Tôm gây nhiễm phương pháp ngâm với 106 CFU/ml V parahaemolyticus Sau gây nhiễm tiến hành theo dõi ghi nhận tượng tơm chết vịng 7-10 ngày để đánh giá hiệu hợp chất thử nghiệm bệnh hoại tử gan tụy cấp tính Tơm cho ăn bình thường sau gây nhiễm, hàng ngày theo dõi ghi chép biểu bất thường loại chết khỏi bể nuôi kịp thời để tránh trường hợp tôm chết lâu làm ảnh hưởng xấu đến chất lượng nước dẫn đến trường hợp tơm cịn lại chết hàm lượng NH3 tăng cao khơng phải chất độc lực vi khuẩn thí nghiệm gây 2.2.4 Phương pháp phân tích số liệu Số liệu tổng hợp phần mềm Excel xử lý phần mềm SPSS (Version16) 2.3 Bố trí thí nghiệm 2.3.1 Thử nghiệm liều khác PHB Thí nghiệm thực tôm thẻ chân trắng 2-3g cho ăn thức ăn trộn loại sản phẩm PHB (MD09-1401, MD09-1404) với liều cho ăn khác 0,1 1% thức ăn Mỗi nghiệm thức lặp lại lần với 20 tôm/bể, cho tôm ăn PHB liên tục 14 ngày sau gây nhiễm với V parahaemolyticus liều ngâm 107 CFU/ml Sau gây nhiễm tiếp tục theo dõi ghi nhận số tôm chết 12 ngày đầu để đánh giá hiệu phòng bệnh sản phẩm (thời gian theo dõi 12 ngày đầu tình hình tơm thí nghiệm ngừng chết liên tục vài ngày) Bố trí thí nghiệm chi tiết trình bày Bảng TẠP CHÍ NGHỀ CÁ SƠNG CỬU LONG - SỐ - THÁNG 9/2016 VIỆN NGHIÊN CỨU NUÔI TRỒNG THỦY SẢN II Bảng Bố trí thí nghiệm thử liều khác PHB Nghiệm thức Tổng Nghiệm thức 0,1% MD09-1401 % MD09-1401 0,1% MD09-1404 % MD09-1404 Đối chứng dương Đối chứng âm Số tơm thí nghiệm 20 tơm/bể x bể 20 tôm/bể x bể 20 tôm/bể x bể 20 tôm/bể x bể 20 tôm/bể x bể 20 tôm/bể x bể 360 Ghi Gây nhiễm với VP Gây nhiễm với VP Gây nhiễm với VP Gây nhiễm với VP Gây nhiễm với VP Không gây nhiễm với VP VP: Vibrio parahaemolyticus 2.3.2 Thử nghiệm hiệu phòng trị bệnh PHB, Sanocore Aqua-Apex điều kiện khơng có chế phẩm vi sinh Thí nghiệm thực tôm thẻ chân trắng 2-3g cho ăn thức ăn trộn PHB, Sanocore va Aqua-Apex với liều phòng trị cụ thể Bảng Mỗi nghiệm thức lặp lại lần với 20 tôm/bể, cho tôm ăn PHB liên tục 14 ngày sau gây nhiễm với V parahaemolyticus liều ngâm 106 CFU/ml Sau gây nhiễm tiếp tục theo dõi ghi nhận số tôm chết 12 ngày để đánh giá hiệu phòng trị bệnh sản phẩm Bảng Bố trí thí nghiệm thử hiệu phịng trị bệnh PHB, Sanocore aqua-Apex điều kiện khơng có chế phẩm vi sinh STT Nghiệm thức PHB phịng Tơm thí nghiệm 20 tơm/bể x bể PHB trị 20 tôm/bể x bể San + Aqua 20 tơm/bể x bể phịng San + Aqua trị San + Aqua + 20 tôm/bể x bể PHB phịng San + Aqua + 20 tơm/bể x bể PHB trị Đối chứng 20 tôm/bể x bể dương Đối chứng âm 20 tôm/bể x bể Tổng 480 20 tôm/bể x bể Ghi Cho tôm ăn PHB liều 1% sau 14 ngày gây nhiễm với VP trì liều tương tự Cho tôm ăn PHB liều 1% sau 14 ngày gây nhiễm với VP cho ăn liều PHB gấp đôi Cho tôm ăn Sanocore (3,0g/kg thức ăn) Aqua Apex (4,5 g/kg thức ăn) sau 14 ngày gây nhiễm với VP trì liều tương tự Cho tơm ăn Sanocore (3,0g/kg thức ăn) Aqua Apex (4,5g/kg thức ăn) sau 14 ngày gây nhiễm với VP cho ăn liều tăng gấp đôi Cho tôm ăn Sanocore (3,0g/kg thức ăn), Aqua Apex (4,5g/kg thức ăn) PHB 1% sau 14 ngày gây nhiễm với VP trì liều tương tự Cho tôm ăn Sanocore (3,0g/kg thức ăn) Aqua Apex (4,5g/kg thức ăn) sau 14 ngày gây nhiễm với VP cho ăn liều tăng gấp đôi Thức ăn bình thường, gây nhiễm với VP Khơng gây nhiễm với VP VP: Vibrio parahaemolyticus; San: Sanocore; Aqua: Aqua Apex TẠP CHÍ NGHỀ CÁ SƠNG CỬU LONG - SỐ - THÁNG 9/2016 57 VIỆN NGHIÊN CỨU NUÔI TRỒNG THỦY SẢN II 2.3.3 Thử nghiệm hiệu phòng trị bệnh PHB, Sanocore Aqua-Apex điều kiện có chế phẩm vi sinh Thí nghiệm thực để kiểm tra ảnh hưởng chế phẩm vi sinh cho vào nước kết hợp với thức ăn trộn PHB, Sanocore va AquaApex với liều cụ thể Bảng Chế phẩm vi sinh BioshrimpRIA2 cho vào nước liều 1lít/3.000 m3 nước với định kỳ ngày/ lần Mỗi nghiệm thức lặp lại lần với 20 tôm/bể, cho tơm ăn chế phẩm phịng bệnh liên tục 14 ngày sau gây nhiễm với V parahaemolyticus liều ngâm 106 CFU/ml Sau gây nhiễm tiếp tục theo dõi ghi nhận số tôm chết 12 ngày để đánh giá hiệu phòng trị bệnh sản phẩm Bảng Bố trí thí nghiệm thử nghiệm hiệu phòng trị bệnh PHB, Sanocore Aqua-Apex điều kiện có chế phẩm vi sinh STT Nghiệm thức Tơm thí nghiệm PHB phịng 20 tơm/bể x bể Cho tôm ăn PHB liều 1% sau 14 ngày gây nhiễm với VP trì liều tương tự PHB trị 20 tôm/bể x bể Cho tôm ăn PHB liều 1% sau 14 ngày gây nhiễm với VP cho ăn liều PHB gấp đôi San + Aqua 20 tơm/bể x bể phịng Cho tơm ăn Sanocore (3,0g/kg thức ăn) Aqua Apex (4,5 g/kg thức ăn) sau 14 ngày gây nhiễm với VP trì liều tương tự San + Aqua trị 20 tôm/bể x bể Cho tôm ăn Sanocore (3,0g/kg thức ăn) Aqua Apex (4,5g/kg thức ăn) sau 14 ngày gây nhiễm với VP cho ăn liều tăng gấp đôi San + Aqua + 20 tôm/bể x bể PHB phịng Cho tơm ăn Sanocore (3,0g/kg thức ăn), Aqua Apex (4,5g/kg thức ăn) PHB 1% sau 14 ngày gây nhiễm với VP trì liều tương tự San + Aqua + 20 tôm/bể x bể PHB trị Cho tôm ăn Sanocore (3,0g/kg thức ăn) Aqua Apex (4,5g/kg thức ăn) sau 14 ngày gây nhiễm với VP cho ăn liều tăng gấp đôi Đối dương Thức ăn bình thường, gây nhiễm với VP Đối chứng âm 20 tôm/bể x bể Tổng 480 chứng 20 tôm/bể x bể III KẾT QUẢ 3.1 Thử nghiệm liều khác PHB Tại thời điểm 1-3 sau gây nhiễm có chênh lệch tỷ lệ chết nghiệm thức thí 58 Ghi Khơng gây nhiễm với VP nghiệm đối chứng khoảng 20% (Đồ thị 1) Tuy nhiên, khác biệt khơng có ý nghĩa thống kê đến cuối thí nghiệm (p < 0,05) Có lẽ liều gây nhiễm cao (107 CFU/ml) làm ảnh hưởng đến tỷ lệ chết cao khó thấy TẠP CHÍ NGHỀ CÁ SƠNG CỬU LONG - SỐ - THÁNG 9/2016 VIỆN NGHIÊN CỨU NUÔI TRỒNG THỦY SẢN II hiệu rõ rệt PHB mang lại Mặc dù có thí nghiệm thăm dị trước chất thí nghiệm gây nhiễm thường thay đổi tùy thuộc vào cỡ bể tơm thí nghiệm Tuy nhiên, nhìn chung theo diễn biến tỷ lệ chết theo ngày nghiệm thức 1401-1% cho tỷ lệ chết cộng dồn thấp suốt thời gian theo dõi sau gây nhiễm Từ kết thí nghiệm nên thí nghiệm bố trí với liều gây nhiễm thấp (106 CFU/ml) Đồ thị Kết thử nghiệm ảnh hưởng 0,1 1% PHB lên hiệu phòng bệnh hoại tử gan tụy cấp tính 3.2 Thử nghiệm hiệu phịng trị bệnh PHB, Sanocore Aqua-Apex điều kiện khơng có chế phẩm vi sinh Ở thí nghiệm ngồi việc thử nghiệm PHB thử nghiệm việc phối hợp loại sản phẩm khác thử nghiệm hợp chất có nguồn gốc từ thảo dược (Sanocore Aqua-Apex) Sanocore bao gồm hỗn hợp nhóm acid hữu cơ, thảo dược, men tiêu hóa hỗn hợp khống vi lượng Aqua-Apex gồm tập hợp hoạt chất chiết xuất từ nhiều loại thảo dược chọn lọc tinh dầu hương thảo, gừng, tỏi, xạ hương, quế Kết cho thấy nghiệm thức sử dụng 4,5g Apex 3g Sanocore cho tỷ lệ chết thấp (26%) Trong nhóm đối chứng dương cho tỷ lệ chết đến 65% (Đồ thị 2) Kết cho thấy hiệu phòng bệnh hợp chất chiết xuất từ thảo dược Ở hai nghiệm thức kết hợp PHB với Sanocore Aqua-Apex liều phòng trị không mang lại hiệu cộng hợp (tỷ lệ chết từ 40-41% so với nghiệm thức đối chứng 65%) Điều cho thấy kết hợp hai loại sản phẩm TẠP CHÍ NGHỀ CÁ SƠNG CỬU LONG - SỐ - THÁNG 9/2016 59 VIỆN NGHIÊN CỨU NI TRỒNG THỦY SẢN II có nguồn gốc khác Ở nghiệm thức tăng liều PHB lên 2% cho tỷ lệ chết cao so với nghiệm thức PHB 1% điều cho thấy loại sản phẩm có liều dùng thích hợp Việc tăng liều q cao lúc mang lại hiệu tốt Đồ thị Kết thử nghiệm hiệu phòng trị bệnh PHB Sanocore, Aqua-Apex điều kiện khơng có chế phẩm vi sinh 3.3 Thử nghiệm hiệu phòng trị bệnh PHB, Sanocore Aqua-Apex điều kiện có chế phẩm vi sinh Ở thí nghiệm việc sử dụng đơn lẻ loại sản phẩm sử dụng kết hợp với chế phẩm vi sinh BioshrimpRIA2 Kết Đồ thị cho thấy nhóm đối chứng âm cho tỷ lệ chết 10%, đối chứng dương 62% 60 Các nhóm nghiệm thức khác cho tỷ lệ chết từ 25-35% nghiệm thức sử dụng kết hợp Sanocore, Aqua-Apex chế phẩm vi sinh nghiệm thực PHB phòng cho tỷ lệ chết thấp (20%) Cũng giống thí nghiệm trước, kết thí nghiệm cho thấy phần hiệu phòng bệnh loại sản phẩm thử nghiệm TẠP CHÍ NGHỀ CÁ SƠNG CỬU LONG - SỐ - THÁNG 9/2016 VIỆN NGHIÊN CỨU NUÔI TRỒNG THỦY SẢN II Đồ thị Kết thử nghiệm hiệu chế phẩm vi sinh với PHB, Sanocore Aqua-Apex IV THẢO LUẬN Poly-ß-hydroxybutyrate (PHB) hợp chất cao phân tử acid béo chuỗi ngắn ß- hydroxybutyrate (short chain fatty acidsSCFAs) Chất nhiều vi sinh vật tổng hợp diện tế bào dạng nguồn dự trữ lượng carbon Đã có nhiều quan tâm đến acid béo mạch ngắn chất ức chế vi sinh (Defoirdt ctv., 2006) Nhiều nghiên cứu cho SCFAs ức chế phát triển nấm men vi khuẩn đường ruột Salmonella typhimurium, Escherichia coli Shigella flexneri (Van Immerseel ctv., 2003) SCFAs chứng minh có khả ức chế phát triển Salmonella gà (Van Der Wielen ctv., 2000; Van Immerseel ctv., 2005) Vibrio gây bệnh phát sáng điều kiện in vitro (Defoirdt ctv., 2006) SCFAs cho thấy khả làm tăng tỷ lệ sống Nauplius Artemia Theo Defoirdt (2007) SCFA β–hydroxybutyrate có khả khống chế phát triển dòng vi khuẩn có độc lực Vibrio campbellii điều kiện in vitro SCFAs sử dụng trực tiếp mơi trường nước tốn Ngồi ra, sử dụng SCFAs trực tiếp làm xấu môi trường nước làm tăng lượng hữu mơi trường kích thích phát triển vi sinh vật kết làm giảm oxy hòa tan nước Trong nghiên cứu thấy việc sử dụng PHB1% thức ăn có hiệu việc phịng bệnh hoại tử gan tụy cấp tính Tuy nhiên, hiệu chữa bệnh chưa rõ rệt Có lẽ tơm bị nhiễm bệnh khả bắt mồi giảm, lượng chất kháng khuẩn thử nghiệm vào thể không đủ mạnh để kháng lại tác nhân gây bệnh Ngồi việc kết TẠP CHÍ NGHỀ CÁ SƠNG CỬU LONG - SỐ - THÁNG 9/2016 61 VIỆN NGHIÊN CỨU NUÔI TRỒNG THỦY SẢN II hợp hai loại sản phẩm có nguồn gốc khác khơng cho thấy hiệu cộng hợp Theo Schyver ctv., (2010) thử nghiệm cá chẽm với phần thức ăn có 5% PHB làm tăng khả tăng trưởng so với đối chứng pH ruột cá giảm từ 7,7 xuống 7,2 chứng tỏ sử dụng PHB thức ăn, vào ruột bị phân cắt thành acid béo mạch ngắn phát huy tác dụng ức chế vi khuẩn Thí nghiệm ương ni tơm xanh với Artemia làm giàu PHB, Nhân ctv., (2010) tìm thấy tăng tỷ lệ sống tốc độ tăng trưởng có ý nghĩa thống kê so với nhóm đối chứng Ngoài tổng số vi khuẩn tổng số Vibrio nước nuôi thấp so với nghiệm thức đối chứng không sử dụng PHB BioshrimpRIA2 loại chế phẩm sinh học Viện nghiên cứu nuôi trồng Thủy sản II nghiên cứu phân lập chủng vi khuẩn có khả phân hủy tín hiệu quorum sensing Đây cách tiếp cận đại nghiên cứu chế phẩm vi sinh ứng dụng ni trồng thủy sản Nhóm 62 nghiên cứu ứng dụng thành công trại sản xuất tôm giống việc phòng bệnh Vibrio Trong nghiên cứu kết thí nghiệm cho thấy sử dụng đơn lẻ chế phẩm sinh học BioshrimpRIA2 khơng đủ mạnh để phịng bệnh hoại tử gan tụy cấp tính Tuy nhiên kết hợp với chất kháng khuẩn mang lại hiệu tốt Có lẽ phần chế phẩm sinh học cạnh tranh với vi khuẩn khác cải thiện chất lượng nước làm ảnh hưởng tốt đến tơm thí nghiệm V KẾT LUẬN Kết khảo sát bước đầu cho thấy PHB sản phẩm chiết xuất từ thảo dược Aqua-Apex Sanocore có hiệu việc phòng bệnh hoại tử gan tụy cấp tính điều kiện phịng thí nghiệm Việc sử dụng chế phẩm vi sinh đơn lẻ chưa cho thấy rõ hiệu phòng bệnh hoại tử gan tụy cấp tính nhiên việc kết hợp chế phẩm vi sinh chất kháng khuẩn cho thấy tăng tỷ lệ sống TẠP CHÍ NGHỀ CÁ SƠNG CỬU LONG - SỐ - THÁNG 9/2016 VIỆN NGHIÊN CỨU NUÔI TRỒNG THỦY SẢN II TÀI LIỆU THAM KHẢO Defoirdt, T., Halet, D., Sorgeloos, P., Bossier, P., Verstraete, W., 2006 Short chain fatty acids protect gnotobiotic Artemia franciscana from pathogenic Vibrio campbellii Aquaculture 261: 804-808 Defoirdt, T., Halet, D., Vervaeren, H., Boon, N., Wiele, T.V., Sorgeloos, P., Bossier, P Verstraete, W , 2007 The bacterial storage compound poly–β–hydroxybutyrate protects Artemia franciscana from pathogenic Vibrio campbellii Environmental Microbiology 9, 445-452 Loc, T., Nunan, L., Redman, R.M., Mohney, L.L., Pantoja, C.R., Fitzsimmons, K., Logambal, S.M., Venkatalakshmi, S., Michael, R.D., 2013 Immunostimulatory effect of leaf extract of Ocimumsanctum L i n i n Oreochromis mossambicus ( P e t e r s ) Hydrobiologia 430:113-120 Nhan, D.T., Cam, D.T.V., Wille, M., Defoirdt, T., Bossier, P., Sorgeloos, P., 2010 Quorum quenching bacteria protect Macrobrachium rosenbergii larvae from Vibrio harveyi infection J Appl Microbiol 109: 1007-1016 Schryver, D.P, Sinha, A.K., Kunwar P.S., Baruah, K., Verstraete, W., Boon, N., De Boeck, G., Bossier P , 2010 Poly-beta-hydroxybutyrate (PHB) increases growth performance and intestinal bacterial range-weighted richness in juvenile European sea bass, Dicentrarchus labrax Appl Microbiol Biotechnol 86(5): 1535-41 Van Immerseel, F., Cauwerts, K., Devriese, L.A., Haesebrouck, F and Ducatelle, R., 2002 Feed additives to control Salmonella in poultry Worlds Poult Sci J 58: 501-513 Van Immerseel, F., Boyen, F., Gantois, I., Timbermont, L., Bohez, L., Pasmans, F., Haesebrouck, F., Ducatelle, R., 2005 Supplementation of coated butyric acid in the feed reduces colonization and shedding of Salmonella in poultry Poultry Science 84, 1851–1856 Van Der Wielen, P., Biesterveld, S., Notermans, S., Hofstra, H., Urlings, B.A.P., Van Knapen, F., 2000 Role of volatile fatty acids in development of the cecal microflora in broiler chickens during growth Applied and Environmental Microbiology 66, 2536–2540 TẠP CHÍ NGHỀ CÁ SƠNG CỬU LONG - SỐ - THÁNG 9/2016 63 VIỆN NGHIÊN CỨU NUÔI TRỒNG THỦY SẢN II EFFECT OF ANTIBACTERIAL PRODUCTS IN PREVENTION AND TREATMENT OF ACUTE HEPATOPANCREATIC NECROSIS DISEASE IN Penaeus vannamei SHRIMP Le Hong Phuoc1*, Bui Linh Tam2, Cao Thanh Trung1, Doan Van Cuong1 ABSTRACT This study was conducted to evaluate the effect of antibacterial products in prevention and treatment of Acute Hepatopancreatic Necrosis Disease (AHPND) in Penaeus vannamei shrimp The juveniles of P vannamei shrimp (mean body weight = 2-3g) were fed with poly-ß–hydroxybutyrate (PHB) or herb extract products (Sanocore and Aqua Apex) during 14 days, and subsequently challenged by immersion with Vibrio parahaemolyticus Shrimp mortality was recorded during 12 days after challenge to evaluate the effect of these products It was found that the addition of PHB (10 g/ kg feed), Sanocore (3 g/kg feed) and Aqua Apex (4.5 g/kg feed) can protect shrimp from AHPND Cumulative mortalities in the treatment groups were 25-40% while 65% mortality was recoreded in the control group The combination of two products in the diet did not show any synergic effect Single application of probiotic (BioShrimp-RIA2) did not show any apparent effect in prevention of AHPND However, combination of probiotic and antibacterial products showed better survival compare to that of single treatments Keywords: PHB, Penaeus vannamei, Sanocore, Aqua Apex Người phản biện: TS Đinh Thị Thủy Ngày nhận bài: 06/9/2016 Ngày thông qua phản biện: 10/9/2016 Ngày duyệt đăng: 12/9/2016 Southern Monitoring Center for Aquaculture Environment and Epidemic, Research Institute for Aquaculture No2 Nong Lam university, HCMC * Email: lehongphuoc@yahoo.com 64 TẠP CHÍ NGHỀ CÁ SƠNG CỬU LONG - SỐ - THÁNG 9/2016 ... parahaemolyticus mang thể thực khuẩn kết nghiên cứu tiếp cho thấy thể thực khuẩn khơng có liên quan đến bệnh hoại tử gan tụy cấp tính Năm 2014, dịch bệnh hoại tử gan tụy cấp tính xảy 226 xã, 58 huyện... Sanocore có hiệu việc phòng bệnh hoại tử gan tụy cấp tính điều kiện phịng thí nghiệm Việc sử dụng chế phẩm vi sinh đơn lẻ chưa cho thấy rõ hiệu phịng bệnh hoại tử gan tụy cấp tính nhiên việc kết... khuẩn làm gián đoạn phân tử tín hiệu kiểm tra tôm nuôi bán thâm canh Panama Trong nghiên cứu thử nghiệm hiệu phòng trị bệnh chất kháng khuẩn nhằm tìm giải pháp thích hợp phịng trị bệnh hoại tử