Xác định ochratoxin trong thực phẩm bằng phương pháp sắc ký lỏng khối phổ( LC MS MS)

ĐẠI HỌC QUỐC GIA HÀ NỘI TRƢỜNG ĐẠI HỌC KHOA HỌC TỰ NHIÊN - Nguyễn Thị Hà Bình XÁC ĐỊNH OCHRATOXIN TRONG THỰC PHẨM BẰNG PHƢƠNG PHÁP SẮC KÝ LỎNG KHỐI PHỔ (LC-MS/MS) LUẬN VĂN THẠC SĨ KHOA HỌC Hà Nội - 2013 ĐẠI HỌC QUỐC GIA HÀ NỘI TRƢỜNG ĐẠI HỌC KHOA HỌC TỰ NHIÊN - Nguyễn Thị Hà Bình XÁC ĐỊNH OCHRATOXIN TRONG THỰC PHẨM BẰNG PHƢƠNG PHÁP SẮC KÝ LỎNG KHỐI PHỔ (LC-MS/MS) Chuyên ngành: Hóa phân tích Mã số: 60440118 LUẬN VĂN THẠC SĨ KHOA HỌC NGƯỜI HƯỚNG DẪN KHOA HỌC: HDC: TS LÊ THỊ HỒNG HẢO HDP: PGS.TS NGUYỄN XUÂN TRUNG Hà Nội - 2013 Luận văn thạc sĩ Nguyễn Thị Hà Bình LỜI CẢM ƠN Lời cho em gửi lời cảm ơn sâu sắc tới thầy PGS.TS Nguyễn Xuân Trung, Trường Đại học Khoa học tự nhiên – ĐHQGHN cô Lê Thị Hồng Hảo, Viện Kiểm nghiệm an toàn vệ sinh thực phẩm Quốc gia – Bộ Y tế tận tình hướng dẫn, đóng góp ý kiến q báu, tạo điều kiện giúp đỡ em suốt trình thực đề tài viết luận văn Em xin bày tỏ lịng biết ơn tới thầy giáo giảng dạy khoa Hoá học, đặc biệt thầy mơn Hố Phân Tích, cho em kiến thức quý giá, tạo điều kiện cho em học tập nghiên cứu môi trường đại Tôi xin gửi lời cảm ơn chân thành tới ban lãnh đạo Viện kiểm nghiệm An toàn vệ sinh thực phẩm Quốc gia tạo điều kiện thuận lợi để học tập hồn thành đề tài Tơi xin gửi lời cảm ơn tới đồng nghiệp labo Hóa – Viện kiểm nghiệm An toàn vệ sinh thực phẩm Quốc gia giúp đỡ tơi nhiều q trình làm thực nghiệm Cuối xin gửi lời cảm ơn tới gia đình bạn bè ln động viên, chia sẻ khó khăn tơi Hà Nội, năm 2013 Học viên Nguyễn Thị Hà Bình Luận văn thạc sĩ Nguyễn Thị Hà Bình MỤC LỤC MỞ ĐẦU……………………………………………………………………………1 Chƣơng 1: TỔNG QUAN……………………………………………………… 1.1 Giới thiệu chung [14-15]……………………………………………………….4 1.1.1 Định nghĩa……………………………………………………………… 1.1.2 Tính chất hóa lý Ochratoxins……………………………………… 1.1.3 Giới hạn tồn dƣ tối đa cho phép (MRL)………………………………7 1.2 Các phƣơng pháp xác định………………………………………………… 1.2.1 Phƣơng pháp ELISA (enzyme-linked immunosorbent assay)……….8 1.2.2 Phương pháp sắc ký khí (Gas chromatography-GC) ……………………9 1.2.3 Phƣơng pháp sắc ký lỏng hiệu cao (HPLC) cột lực miễn dịch (IAC)……………………………………………………………………….9 1.2.4 Phƣơng pháp sắc ký lỏng khối phổ……………………………………10 Chƣơng 2: ĐỐI TƢỢNG VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU…………… 12 2.1 Đối tƣợng nội dung nghiên cứu………………………………………….12 2.1.1 Đối tƣợng nghiên cứu…………………………………………………12 2.1.2 Nội dung nghiên cứu……………………………………………………12 2.2 Phƣơng pháp nghiên cứu………………………………………………… 12 2.2.1 Phƣơng pháp tách chiết mẫu………………………………………….12 2.2.2 Phƣơng pháp sắc ký lỏng khối phổ…………………………………….13 2.2.2.1 Hệ thống sắc ký lỏng hiệu cao…………………………… 13 2.2.2.2 Khối phổ (Mass Spectrometry) ……….…………………………15 2.3 Phƣơng tiện nghiên cứu…………………………………………………… 20 2.3.1 Thiết bị, dụng cụ……………………………………….……………20 2.3.1.1 Thiết bị……………………………………………………………20 2.3.1.2 Dụng cụ………………………………………………………… 21 2.3.2 Dung mơi, hóa chất…………………………………………………….21 2.3.3 Lấy mẫu………………………………………………………………….22 Chƣơng 3: KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN……………………………………….23 Luận văn thạc sĩ Nguyễn Thị Hà Bình 3.1 Tối ƣu điều kiện chạy máy LC-MS/MS……………………………… 23 3.1.1 Tối ưu điều kiện chạy máy khối phổ MS/MS………………… 23 3.1.1.1 Khảo sát ion mẹ ion con……………………………………… 23 3.1.1.2 Tối ưu điều kiện MS………………………………………… 24 3.1.2 Tối ƣu điều kiện chạy sắc ký lỏng hiệu cao (HPLC)……….26 3.1.2.1 Pha tĩnh……………………………………………………………26 3.1.2.2 Khảo sát thành phần pha động………………………………… 27 3.1.2.3 Khảo sát tốc độ pha động 29 3.1.2.4 Chọn chương trình chạy gradient……………………………….…30 3.2 Tối ƣu quy trình xử lý mẫu…………………………………………………33 3.2.1 Chọn quy trình xử lý mẫu………………………………………………33 3.2.2 Khảo sát thể tích (số lần chiết) dung mơi chiết…………………… 36 3.2.3 Chọn cột chiết pha rắn………………………………………………….36 3.2.4 Khảo sát tốc độ qua cột chiết pha rắn 37 3.2.5 Khảo sát thể tích dung mơi rửa giải………………………………….38 3.2.6 Khảo sát ảnh hưởng pH trình chiết mẫu 38 3.3 Thẩm định phƣơng pháp phân tích………………………………………….42 3.3.1 Tính đặc hiệu / chọn lọc………………………………………………42 3.3.2 Giới hạn phát (LOD), giới hạn định lƣợng (LOQ)………………44 3.3.3 Xác định khoảng tuyến tính……………………………………………45 3.3.4 Xây dựng đƣờng chuẩn…………………………………………………47 3.3.5 Độ xác (accuracy) phƣơng pháp phân tích (độ độ chụm) [9]………………………………………………………………………48 3.4 Phân tích mẫu thực tế……………………………………………………….52 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ………………………………………………… 57 TÀI LIỆU THAM KHẢO 59 PHỤ LỤC……………………………………………………………… …… .63 Luận văn thạc sĩ Nguyễn Thị Hà Bình Luận văn thạc sĩ Nguyễn Thị Hà Bình DANH MỤC TỪ VIẾT TẮT Ký hiệu CE EI ESI EU HPLC Tiếng Collisi Electro Eelect Europ High p chrom Interna Applie Limit Limit Metha Maxim Primar Relativ solid p Interna cancer Ultral chrom spectro Fluore IUPAC LOD LOQ MeOH MRL PSA RSD SPE IARC UPLCMS/MS RF Luận văn thạc sĩ Nguyễn Thị Hà Bình DANH MỤC CÁC BẢNG Bảng 1.1: Mức dư lượng tối đa cho phép ochratoxin A Việt Nam Bảng 2.1: Bảng pha dung dich chuẩn chạy máy Bảng 3.1: Ion mẹ chất Bảng 3.2: Các thông số tối ưu cho ESI-MS/MS Bảng 3.3: Các thơng số tối ưu MS/MS Bảng 3.4: Chương trình chạy gradient Bảng 3.5: Kết khảo sát thành phần pha động Bảng 3.6: Khảo sát chương trình gradient Bảng 3.7: Chương trình gradient tối ưu Bảng 3.8: Khảo sát quy trình xử lý mẫu Bảng 3.9 : Khảo sát thể tích dung mơi chiết Bảng 3.10: Khảo sát cột chiết pha rắn Bảng 3.11: Ảnh hưởng tốc độ rửa giải tới hiệu suất trình chiết mẫu Bảng 3.12: Kết khảo sát thể tích dung dịch rửa giải Bảng 3.13: Ion mẹ hai ion chất nhóm ochratoxins Bảng 3.14: Kết xác định LOD, LOQ ochratoxin A, B Bảng 3.15: Sự phụ thuộc diện tích píc vào nồng độ Bảng 3.16: Kết đánh giá độ xác phương pháp Luận văn thạc sĩ Nguyễn Thị Hà Bình DANH MỤC HÌNH VẼ Hình 1.1: Cấu trúc ochratoxins Hình 2.1: Mơ hình hệ thống LC-MS Hình 2.2: Sơ đồ đơn giản hệ thống sắc ký lỏng Hình 2.3: Sơ đồ cấu trúc máy khối phổ MS Hình 2.4: Bộ nguồn ion hố Hình 2.5: Bộ phân tích tứ cực Hình 2.6: Mơ hình phận phân tích rứ cực chặp ba Hình 3.1: Sắc đồ tỷ lệ ion ochratoxins Hình 3.2: Sắc đồ ochratoxin A, B nồng độ 10 ppb dung dung mơi pha động CH3COONH4 10mM Hình 3.3: Sắc đồ rửa giải chất tốc độ dịng 0,8 ml/phút Hình 3.4: Sắc đồ rửa giải chất tốc độ dịng 1,0 ml/phút Hình 3.5: Sắc đồ rửa giải chất tốc độ dòng 1.2 ml/phút Hình 3.6: Sắc đồ chạy sắc ký chương trình gradient Hình 3.7: Quy trình xử lý mẫu dự kiến Hình 3.8: Đồ thị phụ thuộc diện tích píc vào giá trị pH chiết mẫu Hình 3.9: Quy trình xử lý mẫu tối ưu Hình 3.10: Sắc đồ mẫu trắng Hình 3.11: Sắc đồ mẫu trắng thêm chuẩn 2.5ppb Hình 3.12: Sắc đồ ochratoxins LOD Hình 3.13: Đồ thị biểu diễn phụ thuộc diện tích píc vào nồng độ OTA Hình 3.14: Đồ thị phụ thuộc diện tích píc vào nồng độ OTB Hình 3.15: Đường chuẩn OTA Hình 3.16: Đường chuẩn OTB Hình 3.17: Sắc đồ OTs mức thêm chuẩn 2,5 ppb Hình 3.18: Sắc đồ mẫu rượu khơng có ochratoxin A,B Hình 3.19: Sắc đồ mẫu ngơ khơng có ochratoxin A,B Hình 3.20: Sắc đồ mẫu lạc khơng có ochratoxin A,B Hình 3.21: Sắc đồ mẫu lạc có ochratoxin A Hình 3.22: Sắc đồ mẫu ngơ có ochratoxin A,B Luận văn thạc sĩ Nguyễn Thị Hà Bình MỞ ĐẦU Vấn đề an tồn vệ sinh thực phẩm ngày quan tâm liên quan trực tiếp tới sức khỏe tất người tiêu dùng Thời gian vừa qua nước liên tiếp phát vụ ngộ độc thực phẩm có vụ ngộ độc mycotoxin đặc biệt nghiêm trọng …đã gây tâm lý lo ngại cho người tiêu dùng lựa chọn thực phẩm sử dụng thực phẩm cách Theo thống kê Cục An toàn thực phẩm vụ ngộ độc thực phẩm năm gần nước: - Năm 2009: Toàn quốc xảy 147 vụ ngộ độc thực phẩm, có 5026 người mắc; 3958 người nhập viện; 33 người tử vong - Năm 2010: Tình hình NĐTP năm 2010 phức tạp Tồn quốc xảy 175 vụ ngộ độc có 34 vụ ngộ độc 30 người làm 5664 người mắc 42 trường hợp tử vong, so sánh với số liệu trung bình năm giai đoạn 20062009, số vụ ngộ độc giảm 9,1%; số mắc giảm 17,6% số tử vong giảm 19,2% - Năm 2011: 148 vụ, 4700 người mắc, 27 người tử vong - Năm 2012: 168 vụ, 5541 người mắc, 34 người tử vong Theo TS Trần Quang Trung, Cục trưởng Cục An toàn thực phẩm - Bộ Y tế, tháng năm 2013, nước có 108 vụ ngộ độc thực phẩm làm 2.800 người mắc, có 18 ca tử vong Trong 40 vụ ngộ độc thực phẩm thống kê quý III nguyên nhân vi sinh vật 23 vụ, độc tố tự nhiên vụ, hóa chất vụ 11 vụ chưa xác định nguyên nhân Các vụ ngộ độc xảy khắp nơi, từ gia đình riêng đến tập thể Ochratoxin loại độc tố sinh chủng nấm mốc thuộc giống Aspergilus ochraceus Penicillium verrucusum loại độc tố có tiềm gây ung thư viêm thận người động vật Độc tố phát nhiều nông sản khác bao gồm ngũ cốc sản phẩm chúng Điều đáng lo ngại ăn phải thức ăn bị nhiễm ochratoxin khơng gây ngộ cn 10 y 0.5 i t 0.0 s XIC of -MRM (4 pairs): 368.000/324.000 Da ID: OTB1 from Sample (1174-1-5ml) of DataSET1.wiff (Turbo Spray) n25 pt se20 cn 15 I 10 y 0.5 i t 0.0 s XIC of -MRM (4 pairs): 402.000/358.000 Da ID: OTA1 from Sample (1174-1-5ml) of DataSET1.wiff (Turbo Spray) n 37 t e 30 I n 20 10 0.09 0.5 t y , c p s 0.0 s XIC of -MRM (4 pa irs): 368.000/324.000 Da ID: OTB1 from Sample (ngo-T H-03-5.23) of Da taS ET1.w i f (Turbo Spray) 9e4 2.sn pe 2.5e4 t 2.0e4 n 1.5e4c I, 1.0e4 y 5000.0 t 0.0 i 0.0 s XIC of -MRM (4 pairs): 368.000/324.000 Da ID: OTB1 from Sample (ngo-TH-03-5.23) of DataSET1.wiff (Turbo Spray) 2.9e4 0.5 sn 2.5e4 t 2.0e4pe n 1.5e4c ,I 1.0e4 y 5000.0 t 0.0 0.0 0.5 0.0 0.5 s XIC of -MRM (4 pairs): 402.000/358.000 Da ID: OTA1 from Sample (ngo-TH-03-5.23) of DataSET1.wiff (Turbo Spray) 8e4 1.n t e 1.5e4 n 1.0e4 5000.I 0.0 Hình P5.4 Sắc đồ mẫu Ngo-TH-03 có OTs 77 s p c , y t i s XIC of -MRM (4 pairs): 368.000/324.000 Da ID: OTB1 from Sample (LN-BG-03-5.12g) of DataSET1.wiff (Turbo Spray) 2.5e5sn 0e5 t 2.pe c 1.5e5 I, 1.0e5n y 5.0e4 0.0 0.5 0.0 0.5 0.0 0.5 i t 0.0 s XIC of -MRM (4 pairs): 368.000/324.000 Da ID: OTB1 from Sample (LN-BG-03-5.12g) of DataSET1.wiff (Turbo Spray) 2.5e5sn t pe 2.0e5 c 1.5e5 ,I 1.0e5n y 5.0e4 i t 0.0 s XIC of -MRM (4 pairs): 402.000/358.000 Da ID: OTA1 from Sample (LN-BG-03-5.12g) of DataSET1.wiff (Turbo Spray) n 2.0e4 t 1.5e4 n 1.0e4 I 5000.0 0.0 Time, In ten Hình P5.5: Sắc đồ mẫu LN-BG-03 6.34 cps File: "DataSET1.wiff" sity, Sample Name: "ruou-01-spike5-04" Sample ID: "" Peak Name: "OTB1" Mass(es): "368.000/324.000 Da" Comment: "" Annotation: "" Sample Name: "ruou-01-spike5-04" Sample ID: "" Peak Name: "OTB3" Mass(es): "368.000/220.000 Da" Comment: "" Annotation: "" File: "DataSET1.wiff" Sample Name: "ruou-01-spike5-04" Sample ID: "" Peak Name: "OTA1" Mass(es): "402.000/358.000 Da" Comment: "" Annotation: "" File: "DataSET1.wiff" 6.37 Sample Name: "ruou-01-spike5-05" Peak Name: "OTB1" Mass(es): "368.000/324.000 Da" cp s cps In te nsit y, cps Comment: "" 1000 nsity, 500 In te Intensity, Time, Sample Name: "ruou-01-spike5-05" Peak Name: "OTB3" Mass(es): "368.000/220.000 Da" s Comment: "" Comment: "" sity, cp Peak Name: "OTB1" Mass(es): "368.000/324.000 Da" Sample Name: "ruou-01-spike5-05" te n Sample Name: "ruou-01-spike5-06" Peak Name: "OTA1" Mass(es): "402.000/358.000 Da" cps In Comment: "" te n sity, Peak Name: "OTB3" Mass(es): "368.000/220.000 Da" Intensity, Sample Name: "ruou-01-spike5-06" Peak Name: "OTA1" Mass(es): "402.000/358.000 Da" cps Comment: "" Intensity, In ten Sample Name: "ruou-01-spike5-06" cp sity, s cps In Comment: "" Sample Name: "ruou-01-spike5-04" Sample ID: "" Peak Name: "OTA2" Mass(es): "402.000/166.900 Da" Comment: "" Annotation: "" File: "DataSET1.wiff" In te nsity, cp s 6.58 Sample Name: "ruou-01-spike5-05" Peak Name: "OTA2" Mass(es): "402.000/166.900 Da" In te nsity, cp s Comment: "" Sample Name: "ruou-01-spike5-06" Peak Name: "OTA2" Mass(es): "402.000/166.900 Da" Comment: "" Annotation: "" In ten sity, cp s 6.58 2000 1000 Time, Hình P5.6: Sắc đồ mẫu rượu thêm chuẩn mức ppb 78 Luận văn thạc sĩ File: "DataSET1.wiff" Sample Name: "ruou-01-spike 5" Sample ID: "" Peak Name: "OTB3" Mass(es): "368.000/220.000 Da" Comment: "" Annotation: "" File: "DataSET1.wiff" Sample Name: "ruou-01-spike 5" Sample ID: "" Peak Name: "OTA1" Mass(es): "402.000/358.000 Da" Comment: "" Annotation: "" cps Intensity, In ten sity, Intensity, cps cps Sample Name: "ruou-01-spike 5" Sample ID: "" Peak Name: "OTB1" Mass(es): "368.000/324.000 Da" Comment: "" Annotation: "" Nguyễn Thị Hà Bình Sample Name: "ruou-01-spike5-02" Peak Name: "OTB3" Mass(es): "368.000/220.000 Da" Comment: "" Sample Name: "ruou-01-spike5-02" Peak Name: "OTB1" Mass(es): "368.000/324.000 Da" Comment: "" cp s Comment: "" In te n sity, In te cp n sity, s cp s In te Peak Name: "OTA1" Mass(es): "402.000/358.000 Da" n sity, Sample Name: "ruou-01-spike5-02" Sample Name: "ruou-01-spike5-03" Peak Name: "OTB3" Mass(es): "368.000/220.000 Da" Comment: "" Sample Name: "ruou-01-spike5-03" Peak Name: "OTA1" Mass(es): "402.000/358.000 Da" Comment: "" Sample Name: "ruou-01-spike5-03" Intensity, In ten sity, cps cps Intensity, Comment: "" cps Peak Name: "OTB1" Mass(es): "368.000/324.000 Da" File: "DataSET1.wiff" Peak Name: "OTA2" Mass(es): "402.000/166.900 Da" Comment: "" Annotation: "" 6.58 Time, 1.20e4 1.10e4 1.00e4 Sample Name: "ruou-01-spike5-02" In te 9000.00 s Peak Name: "OTA2" Mass(es): "402.000/166.900 Da" cp Comment: "" File: "DataSET1.wiff" n sity, Sample Name: "ruou-01-spike 5" Sample ID: "" Peak Name: "OTA2" Mass(es): "402.000/166.900 Da" Comment: "" Annotation: "" In te 6.62 4000.00 In te n sity, cp s 3000.00 s 2000.00 1000.00 Time, nsity,cp 2000 1000 Sample Name: "ruou-01-spike5-03" Hình P5.7: Sắc đồ mẫu rượu trắng thêm chuẩn mức ppb Sample Name: "LN-BG-03-spike 5" Sample ID: "" Peak Name: "OTB1" Mass(es): "368.000/324.000 Da" Comment: "" Annotation: "" 1.3e5 1.2e5 1.1e5 1.0e5 8.0e4 ity 6.0e4 In 7.0e4 te n s , cp s 9.0e4 5.0e4 4.0e4 3.0e4 2.0e4 1.0e4 0.0 0.0 1.0 2.0 3.0 4.0 Time, Sample Name: "LN-BG-03-spike 5-02" Sample Name: "LN-BG-03-spike 5-02" Peak Name: "OTB3" Mass(es): "368.000/220.000 Da" Peak Name: "OTB1" Mass(es): "368.000/324.000 Da" Comment: "" Sample Name: "LN-BG-03-spike 5-03" Comment: "" Peak Name: "OTB1" Mass(es): "368.000/324.000 Da" In te n s ity s te n s ity In In te n s ity , cp ,c ps ,cp s Comment: "" Sample Name: "LN-BG-03-spike 5-02" Sample Name: "LN-BG-03-spike 5-02" Peak Name: "OTB3" Mass(es): "368.000/220.000 Da" Peak Name: "OTA1" Mass(es): "402.000/358.000 Da" Peak Name: "OTA2" Mass(es): "402.000/166.900 Da" Comment: "" Comment: "" Comment: "" cps n s ity , In In te n s te n sity, ity , In te cp s cps Sample Name: "LN-BG-03-spike 5-03" Sample Name: "LN-BG-03-spike 5-03" Peak Name: "OTA1" Mass(es): "402.000/358.000 Da" Comment: "" Sample Name: "LN-BG-03-spike 5-03" Peak Name: "OTA2" Mass(es): "402.000/166.900 Da" In In te te n s ity , n sity, cps cp s Comment: "" Hình P5.8: Sắc đồ mẫu LN-BG-03 thêm chuẩn mức 5ppb 79 Luận văn thạc sĩ Nguyễn Thị Hà Bình Sample Name: "LN-BG-03-spike 5-04" Sample ID: "" Peak Name: "OTB1" Mass(es): "368.000/324.000 Da" Comment: "" Annotation: "" 8.0e4 7.0e4 5.0e4 4.0e4 In te ns ity ,c p s 6.0e4 3.0e4 2.0e4 1.0e4 0.0 0.0 1.0 2.0 3.0 4.0 Time, Sample Name: "LN-BG-03-spike 5-05" Peak Name: "OTB3" Mass(es): "368.000/220.000 Da" Comment: "" Sample Name: "LN-BG-03-spike 5-05" Peak Name: "OTB1" Mass(es): "368.000/324.000 Da" Comment: "" cps In te n sity , cp s Peak Name: "OTB3" Mass(es): "368.000/220.000 Da" In te n s Sample Name: "LN-BG-03-spike 5-06" ity , c p s Time, In te n s ity , c p s Comment: "" Sample Name: "LN-BG-03-spike 5-06" Peak Name: "OTB1" Mass(es): "368.000/324.000 Da" Comment: "" Annotation: "" Peak Name: "OTA2" Mass(es): "402.000/166.900 Da" Comment: "" Comment: "" s Sample Name: "LN-BG-03-spike 5-05" Peak Name: "OTA1" Mass(es): "402.000/358.000 Da" In te n s ity In ,c te n s ity ps ,cps In te nsity, In cp te n sity, Sample Name: "LN-BG-03-spike 5-05" Time, Sample Name: "LN-BG-03-spike 5-06" Peak Name: "OTA2" Mass(es): "402.000/166.900 Da" Comment: "" Annotation: "" In te n s ity , c p s 6.58 Sample Name: "LN-BG-03-spike 5-06" Peak Name: "OTA1" Mass(es): "402.000/358.000 Da" Comment: "" Annotation: "" 4000.0 2000.0 Time, Hình P5.9: Sắc đồ mẫu lạc LN-BG-03 thêm chuẩn mức ppb Sample Name: "ngo-TH-03-spike 01" Sample ID: "" Peak Name: "OTB1" Mass(es): "368.000/324.000 Da" Comment: "" Annotation: "" 2.8e4 2.6e4 2.4e4 2.2e4 p s 2.0e4 ity 1.4e4 In te 1.6e4 ns ,c 1.8e4 1.2e4 1.0e4 8000.0 6000.0 4000.0 2000.0 0.0 0.0 1.0 2.0 3.0 4.0 Time, Sample Name: "ngo-TH-03-spike 02" Sample ID: "" File: "DataSET1.wiff" Peak Name: "OTB3" Mass(es): "368.000/220.000 Da" Comment: "" Sample Name: "ngo-TH-03-spike 02" Sample ID: "" File: "DataSET1.wiff" Peak Name: "OTA1" Mass(es): "402.000/358.000 Da" Comment: "" Sample Name: "ngo-TH-03-spike 02" Sample ID: "" File: "DataSET1.wiff" Peak Name: "OTA2" Mass(es): "402.000/166.900 Da" Comment: "" Sample Name: "ngo-TH-03-spike 02" Sample ID: "" File: "DataSET1.wiff" In te n , c p s sity In te n s ity , c p s Comment: "" In te n s ity , c p s Peak Name: "OTB1" Mass(es): "368.000/324.000 Da" Sample Name: "ngo-TH-03-spike 03" Sample ID: "" File: "DataSET1.wiff" Peak Name: "OTA2" Mass(es): "402.000/166.900 Da" Comment: "" Sample Name: "ngo-TH-03-spike 03" Sample ID: "" File: "DataSET1.wiff" Peak Name: "OTB3" Mass(es): "368.000/220.000 Da" Peak Name: "OTA1" Mass(es): "402.000/358.000 Da" Comment: "" Comment: "" In te n s ity , c p s te n sity, In te n sity, cp cp s s In te n s ity ,cp s Sample Name: "ngo-TH-03-spike 03" Sample ID: "" File: "DataSET1.wiff" In Sample Name: "ngo-TH-03-spike 03" Sample ID: "" File: "DataSET1.wiff" Peak Name: "OTB1" Mass(es): "368.000/324.000 Da" In te n s ity , cp s Comment: "" Hình P5.10: Sắc đồ mẫu ngo-TH-03 thêm chuẩn mức ppb 80 Luận văn thạc sĩ Nguyễn Thị Hà Bình Sample Name: "ngo-TH-03-spike 04" Sample ID: "" Peak Name: "OTB1" Mass(es): "368.000/324.000 Da" Comment: "" Annotation: "" 6.5e4 6.0e4 5.5e4 5.0e4 cp 3.5e4 3.0e4 In te n 4.0e4 sity s 4.5e4 2.5e4 2.0e4 1.5e4 1.0e4 5000.0 0.0 0.0 1.0 2.0 3.0 4.0 Time, Peak Name: "OTB3" Mass(es): "368.000/220.000 Da" Comment: "" Comment: "" ,c n s ity In te In te n s ity ,c ps ps In te In te n sity, n s ity , cp s Sample Name: "ngo-TH-03-spike 05" Sample ID: "" File: "DataSET1.wiff" Peak Name: "OTB1" Mass(es): "368.000/324.000 Da" cp s Sample Name: "ngo-TH-03-spike 05" Sample ID: "" File: "DataSET1.wiff" Sample Name: "ngo-TH-03-spike 06" Sample ID: "" File: "DataSET1.wiff" Peak Name: "OTB3" Mass(es): "368.000/220.000 Da" Sample Name: "ngo-TH-03-spike 06" Sample ID: "" File: "DataSET1.wiff" Peak Name: "OTB1" Mass(es): "368.000/324.000 Da" Comment: "" Comment: "" Sample Name: "ngo-TH-03-spike 05" Sample ID: "" File: "DataSET1.wiff" Sample Name: "ngo-TH-03-spike 05" Sample ID: "" File: "DataSET1.wiff" Peak Name: "OTA1" Mass(es): "402.000/358.000 Da" Peak Name: "OTA2" Mass(es): "402.000/166.900 Da" Sample Name: "ngo-TH-03-spike 06" Sample ID: "" File: "DataSET1.wiff" Comment: "" Sample Name: "ngo-TH-03-spike 06" Sample ID: "" File: "DataSET1.wiff" Peak Name: "OTA1" Mass(es): "402.000/358.000 Da" Peak Name: "OTA2" Mass(es): "402.000/166.900 Da" Comment: "" Comment: "" s s ity , c p In te n te n sity, te n In In te In s ity ,c p cp s n sity ,c ps s Comment: "" Hình P5.12 : Sắc đồ mẫu ngô-TH-03 thêm chuẩn mức ppb Hình P5.13: Sắc đồ tỷ lệ ion ochratoxins 81 ... định hàm lượng Ochratoxin thực phẩm phương pháp sắc ký lỏng hai lần khối phổ (LC- MS/ MS)? ?? Mục tiêu thực đề tài nghiên cứu là: Xây dựng phương pháp xác định hàm lượng Ochratoxin thực phẩm bao gồm:... khẳng định đắn chất cần phân tích 1.2.4 Phƣơng pháp sắc ký lỏng khối phổ Phương pháp sắc ký lỏng khối phổ, đặc biệt phương pháp sắc ký lỏng hai lần khối phổ kĩ thuật phát triển năm gần Về bản, phương. .. ĐẠI HỌC KHOA HỌC TỰ NHIÊN - Nguyễn Thị Hà Bình XÁC ĐỊNH OCHRATOXIN TRONG THỰC PHẨM BẰNG PHƢƠNG PHÁP SẮC KÝ LỎNG KHỐI PHỔ (LC- MS/ MS) Chun ngành: Hóa phân tích Mã số: 60440118 LUẬN VĂN