ĐÀO THỊ KHÁNH vân NGHIÊN cứu bào CHẾ TIỂU PHÂN NANO LIPID CHỨA BERBERIN KHÓA LUẬN tốt NGHIỆP dược sĩ

BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC DƯỢC HÀ NỘI ĐÀO THỊ KHÁNH VÂN NGHIÊN CỨU BÀO CHẾ TIỂU PHÂN NANO LIPID CHỨA BERBERIN KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP DƯỢC SĨ HÀ NỘI – 2020 BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC DƯỢC HÀ NỘI ĐÀO THỊ KHÁNH VÂN 1501541 NGHIÊN CỨU BÀO CHẾ TIỂU PHÂN NANO LIPID CHỨA BERBERIN KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP DƯỢC SĨ Người hướng dẫn: GS.TS Nguyễn Ngọc Chiến Nơi thực hiện: Viện Công nghệ Dược phẩm Quốc gia HÀ NỘI – 2020 LỜI CẢM ƠN Lời đầu tiên, em xin bày tỏ kính trọng biết ơn tới: GS.TS Nguyễn Ngọc Chiến Là người thầy tận tình dạy, định hướng khơi gợi niềm đam mê nghiên cứu khoa học em Em xin chân thành cảm ơn Ths Lê Thiện Giáp, Ths Trần Trọng Biên có lời khuyên, giúp đỡ, động viên em suốt q trình thực khố luận Em xin cảm ơn tới thầy cô giáo, anh chị kĩ thuật viên, bạn sinh viên nghiên cứu khoa học thực khoá luận tốt nghiệp Viện Công nghệ Dược phẩm Quốc gia, môn Công nghiệp dược, môn Bào chế, người giúp đỡ tạo điều kiện thuận lợi cho em q trình nghiên cứu để hồn thành khóa luận Em xin gửi lời cảm ơn tới Ban giám Hiệu nhà trường, Phòng Đào tạo Phịng ban khác, thầy cán nhân viên trường Đại học Dược Hà Nội dạy bảo, tạo điều kiện giúp đỡ em suốt năm học vừa qua Cuối cùng, em xin bày tỏ lịng biết ơn sâu sắc tới gia đình, người thân, bạn bè, người bên cạnh, động viên, ủng hộ em suốt năm tháng học tập rèn luyện mái trường Đại học Dược Hà Nội Hà Nội, ngày 22 tháng 06 năm 2020 Sinh viên Đào Thị Khánh Vân MỤC LỤC DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT DANH MỤC CÁC BẢNG DANH MỤC CÁC HÌNH VẼ, ĐỒ THỊ ĐẶT VẤN ĐỀ CHƯƠNG 1: TỔNG QUAN 1.1 Thông tin Berberin .2 1.1.1 Nguồn gốc .2 1.1.2 Cơng thức hố học 1.1.3 Tính chất lý hoá 1.1.4 Dược động học 1.1.5 Tác dụng dược lý 1.1.6 Một số chế phẩm thị trường 1.2 Đặc điểm hệ nano lipid 1.2.1 Vài nét hệ tiểu phân nano lipid rắn 1.2.2 Hệ mang lipid kích thước nano 1.2.3 Thành phần hệ mang lipid kích thước nano 1.2.4 Phân loại hệ mang lipid kích thước nano .8 1.2.5 Các phương pháp bào chế 1.2.6 Một số nghiên cứu liên quan Berberin 11 CHƯƠNG 2: ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU .13 2.1 Nguyên vật liệu, thiết bị 13 2.1.1 Nguyên vật liệu 13 2.1.2 Thiết bị 14 2.2 Nội dung nghiên cứu 15 2.2.1 Nghiên cứu ảnh hưởng thành phần cơng thức, thơng số quy trình đến đặc tính hệ nano lipid bào chế .15 2.2.2 Đánh giá số đặc tính tiểu phân nano bào chế 15 2.3 Phương pháp nghiên cứu 15 2.3.1 Phương pháp bào chế hệ mang lipid kích thước nano (NLC) 15 2.3.2 Phương pháp định lượng berberin clorid 16 2.3.3 Các phương pháp đánh giá tiểu phân nano berberin clorid bào chế 18 CHƯƠNG 3: THỰC NGHIỆM, KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN .23 3.1 Kết khảo sát phương pháp định lượng berberin clorid 23 3.1.1 Độ đặc hiệu 23 3.1.2 Độ tuyến tính 23 3.1.3 Độ tương thích hệ thống .24 3.2 Kết bào chế hệ mang lipid kích thước nano chứa berberin clorid 24 3.2.1 Khảo sát ảnh hưởng thơng số quy trình 24 3.2.2 Khảo sát ảnh hưởng yếu tố công thức 27 3.3 Kết số đánh giá đặc tính tiểu phân NLC chứa berberin clorid 34 3.3.1 Kích thước tiểu phân phân bố kích thước tiểu phân 34 3.3.2 Hiệu suất nano hoá dược chất tỷ lệ dược chất nano hoá tiểu phân NLC chứa BER .35 3.3.3 Kết chụp SEM 35 3.3.4 Phân tích phổ hồng ngoại 35 3.3.5 Phân tích nhiệt vi sai 36 3.3.6 Đánh giá khả giải phóng thuốc in vitro .37 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ .39 TÀI LIỆU THAM KHẢO PHỤ LỤC DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT BER Berberin clorid CT Công thức DCM Dicloromethan DĐVN Dược điển Việt Nam DSC Phân tích nhiệt vi sai - Differential scanning calorimetry D/N Dầu nước EE Hiệu suất nano hoá dược chất - Encapsulation Efficiency FT-IR Quang phổ hồng ngoại - Fourier-transform infrared spectroscopy HLB Chỉ số cân dầu nước - Hydrophilic Lipophilic Balance HPLC Sắc kí lỏng hiệu cao - High-performance liquid chromatograph KTTP Kích thước tiểu phân trung bình LC Tỷ lệ dược chất nano - Loading Capacity Log P Hệ số phân bố octanol/nước N/D Nước dầu N/D/N Nước dầu nước NLC Hệ mang lipid kích thước nano - Nanostructured Lipid Carrier MeOH Methanol TCCS Tiêu chuẩn sở PDI Chỉ số đa phân tán - Polydispersity index SLN Nano lipid rắn - Solid Lipid Nanoparticles SEM Kính hiển vi điện tử quét - Scanning Electron Microscope DANH MỤC CÁC BẢNG Bảng 1.1 Một số chế phẩm chứa berberin thị trường Bảng 2.1 Nguyên liệu sử dụng trình thực nghiệm 13 Bảng 3.1 Mối tương quan diện tích pic nồng độ BER pha động 23 Bảng 3.2 Kết khảo sát độ tương thích hệ thống 24 Bảng 3.3 Kết KTTP, PDI mẫu nano thay đổi công suất siêu âm .25 Bảng 3.4 Kết KTTP, PDI mẫu nano thay đổi thời gian siêu âm .26 Bảng 3.5 Công thức bào chế kết khảo sát ảnh hưởng lipid rắn tới KTTP, PDI tiểu phân nano BER 27 Bảng 3.6 Công thức bào chế kết khảo sát ảnh hưởng lipid lỏng tới KTTP, PDI tiểu phân nano BER 28 Bảng 3.7 Kết KTTP, PDI mẫu khảo sát loại chất diện hoạt 29 Bảng 3.8 Ảnh hưởng tỉ lệ dược chất/ lipid tới đặc tính tiểu phân nano 30 Bảng 3.9 Kết KTTP, PDI mẫu khảo sát tỉ lệ lipid rắn/ lipid lỏng 31 Bảng 3.10 Đặc tính tiểu phân nano BER nồng độ Tween 80 khác .32 Bảng 3.11 Thành phần công thức lựa chọn cuối thơng số quy trình bào chế 33 DANH MỤC CÁC HÌNH VẼ, ĐỒ THỊ Hình 1.1 Sơ đồ cấu trúc tiểu phân nano lipid rắn hệ mang lipid kích thước nano [17] Hình 2.1 Sơ đồ quy trình bào chế hệ mang lipid kích thước nano chứa BER 16 Hình 3.1 Mối tương quan diện tích pic nồng độ BER pha động 23 Hình 3.2 Ảnh hưởng cơng suất siêu âm tới KTTP, PDI tiểu phân nano BER .25 Hình 3.3 Ảnh hưởng thời gian siêu âm tới KTTP, PDI tiểu phân nano BER 26 Hình 3.4 Ảnh hưởng loại lipid rắn tới KTTP, PDI tiểu phân nano BER .27 Hình 3.5 Ảnh hưởng loại lipid lỏng tới KTTP, PDI tiểu phân nano BER .29 Hình 3.6 Ảnh hưởng loại CDH tới KTTP, PDI tiểu phân nano BER 30 Hình 3.7 Ảnh hưởng nồng độ lipid tới KTTP, PDI tiểu phân nano BER 31 Hình 3.8 Ảnh hưởng tỷ lệ lipid rắn lipid lỏng tới KTTP, PDI tiểu phân nano berberin clorid 32 Hình 3.9 Ảnh hưởng nồng độ Tween 80 tới đặc tính tiểu phân nano BER 33 Hình 3.10 Kết kích thước tiểu phân PDI hệ NLC BER CT 22 34 Hình 3.11 Hình ảnh chụp SEM NLC BER CT 22 35 Hình 3.12 Phổ hấp thụ FT-IR 36 Hình 3.13 Phổ DSC .37 Hình 3.14 Đồ thị giải phóng bererin clorid từ NLC BER .38 ĐẶT VẤN ĐỀ Berberin alcaloid thuộc nhóm isoquinolin có nhiều rễ, vỏ thân thuộc chi Coptis, Berberis, Coscinium [2] Cho đến có khơng nghiên cứu cho thấy tác dụng dược lý phong phú từ berberin: tác dụng chống lại tổn thương tế bào thần kinh, hạ huyết áp, hạ lipid máu, điều trị đái tháo đường, kháng khuẩn, chống viêm, chống virut [8], [18], [20], [21] Berberin sử dụng cho tình trạng bệnh lý da khác giảm tổn thương vảy nến, điều trị viêm miệng tái phát, điều trị vết thương bỏng, điều trị ung thư da [6], [35] Berberin clorid có đặc tính thân nước, tính thấm qua da có hệ số phân bố octanol/ nước thấp (logP = -1,5) nên khiến cho việc ứng dụng berberin clorid điều trị chỗ cịn gặp nhiều khó khăn Hệ tiểu phân nano lipid bao gồm nano lipid rắn (Solid Lipid Nanoparticles – SLN) hệ mang lipid kích thước nano (Nanostructured Lipid Carrier – NLC) cho thấy nhiều lợi áp dụng cho đường dùng da Lợi tiểu phân nano lipid kể đến cải thiện ổn định dược chất, chất mang lipid tương thích sinh học cao, tăng diện tích bề mặt tiếp xúc tiểu phân nano với lớp sừng da, chất mang lipid vừa có vai trị lưu giữ hệ thuốc da, vừa tăng tính thấm dược chất Bào chế tiểu phân berberin clorid kích thước nano sử dụng chất mang lipid với mong muốn cải thiện độ tan mức độ hồ tan, tăng tính thấm dược chất Chính vậy, đề tài “Nghiên cứu bào chế tiểu phân nano lipid chứa berberin” tiến hành nghiên cứu với mục tiêu sau: Xây dựng công thức xác định số thơng số quy trình bào chế tiểu phân nano chứa berberin clorid Đánh giá số đặc tính tiểu phân nano bào chế CHƯƠNG 1: TỔNG QUAN 1.1 Thông tin Berberin 1.1.1 Nguồn gốc Berberin loại alcaloid benzylisoquinolin, có màu vàng [27] Berberin tổng hợp dễ dàng chiết xuất từ thực vật Trong tự nhiên, Berberin thường có rễ, thân rễ vỏ thân thuộc chi Coptis, Berberis, Coscinium với hàm lượng khoảng 1,5 - 3% [2] Trong thực hành lâm sàng, berberin clorid berberin sulfat dạng muối berberin thường sử dụng (liều dùng 100 mg, 3-4 lần/ngày) [10] 1.1.2 Cơng thức hố học Công thức phân tử berberin clorid: C20H18NO4Cl.2H2O Phân tử lượng: 407,9 g/mol Tên khoa học: 9,10-dimethoxỵ-5,6-dihydro[l,3]dioxolo[4,5-g]isoquino[3,2-a] isoquinolin-7-ium clorid dihydrat [1] 1.1.3 Tính chất lý hố  Lý tính: - Cảm quan: tinh thể hay bột kết tinh màu vàng, không mùi, vị đắng [1] - Độ tan: Dạng base tan chậm nước, tan ethanol, khó tan chloroform, ether [1] Dạng muối clorid tan nước (1 – mg/ml 25 oC), dễ tan nước nóng, tan ethanol, thực tế không tan chloroform, ether [10], [35] - Phương pháp đồng nóng sử dụng Phương pháp bào chế lượng siêu âm kết hợp khuấy từ - Tốc độ nhỏ giọt 3,0 ml/phút - Công suất siêu âm: 130W - Thời gian siêu âm: phút - Nhiệt độ phối hợp pha: 65oC - 70oC 3.3 Kết số đánh giá đặc tính tiểu phân NLC chứa berberin clorid 3.3.1 Kích thước tiểu phân phân bố kích thước tiểu phân Tiến hành bào chế NLC theo CT22 bảng 3.11, kết đánh giá kích thước tiểu phân phân bố kích thước tiểu phân trình bày hình 3.10 Hình 3.10 Kết kích thước tiểu phân PDI hệ NLC BER CT 22 Hình 12 Kết đo kích thước tiểu phân NLC berberin clorid cho thấy tiểu phân thu có kích thước nhỏ (145,3 ± 1,2 nm), khoảng phân bố kích thước tiểu phân hẹp (PDI = 0,197 ± 0,004), khơng có tiểu phân 1000 nm 34 3.3.2 Hiệu suất nano hoá dược chất tỷ lệ dược chất nano hoá tiểu phân NLC chứa BER Tiến hành xác định EE LC NLC berberin clorid CT22 theo mục 2.3.3.2 thu hiệu suất nano hoá EE = 16,53 ± 0,73 %, tỷ lệ dược chất nano hoá LC = 2,64 ± 0,25% 3.3.3 Kết chụp SEM Hình thái tiểu phân nano lipid BER CT 22 xác định kính hiển vi điện tử quét (SEM) theo mục 2.3.3.6 thu kết sau: Hình 13 Hình 3.11 Hình ảnh chụp SEM NLC BER CT 22 Nhận xét: Hình ảnh SEM công thức cho thấy tiểu phân nano hình cầu, phân bố tương đối đồng vi trường, kích thước trung bình khoảng 140 nm phù hợp với kích thước tiểu phân ghi nhận phương pháp tán xạ ánh sáng DLS 3.3.4 Phân tích phổ hồng ngoại Tiến hành quét phổ FT-IR mẫu nguyên liệu BER, hỗn hợp tá dược, hỗn hợp vật lý BER tá dược, mẫu nano BER CT22 đông khô mục 2.3.3.4 Kết thể qua hình 3.14 sau: 35 Hình 3.12 Phổ hấp thụ FT-IR Hình 14 Nhận xét: Phổ FT-IR berberin clorid cho thấy tồn nhóm chức đặc trưng: nhóm -OCH3 (tại đỉnh 2844 cm-1 ), liên kết C=N+ (tại đỉnh 1635 cm-1 ), vòng thơm liên hợp (tại đỉnh 1569 cm-1 ), vòng dioxolan C3H6O2 (tại đỉnh 1505 cm-1 ) [35] Phổ FT-IR hỗn hợp tá dược (Precirol ATO acid oleic) có đỉnh 1740 cm-1 đặc trưng cho nhóm COO- Trên phổ mẫu nano có đỉnh đặc trưng phổ hồng ngoại tá dược nguyên liệu BER, chứng tỏ có có mặt berberin clorid mẫu nano 3.3.5 Phân tích nhiệt vi sai Tiến hành xác định trạng thái vật lý dược chất tiểu phân nano thiết bị phân tích nhiệt vi sai nêu mục 2.3.3.5, đánh giá mẫu: nguyên liệu BER, mẫu hỗn hợp tá dược, hỗn hợp vật lý BER tá dược, mẫu nano BER đông khô Kết thể qua hình 3.15 sau: 36 1- BER nguyên liệu - Hỗn hợp tá dược - Hỗn hợp vật lý - NLC berberin clorid CT22 Hình 3.13 Phổ DSC Hình 15 Nhận xét: Kết đo DSC cho thấy mẫu nguyên liệu BER xuất đỉnh thu nhiệt rõ nét, có pic 84,96oC 127,76oC bay nước, pic thu nhiệt thứ ba quan sát thấy 198,56 oC chuyển trạng thái rắn sang trạng thái lỏng BER Đỉnh toả nhiệt thứ tư xuất 205,48oC đỉnh biến đổi tinh thể BER [35] Hỗn hợp tá dược gồm Precirol ATO acid oleic có đỉnh thu nhiệt 56,89oC Hỗn hợp vật lý có đỉnh thu nhiệt rõ nét 57,83oC có pic thu nhiệt nhỏ 158,12oC, hỗn hợp lipid chảy lỏng tương tác với BER làm giảm nhiệt độ nóng chảy BER Mẫu NLC CT22 xuất pic thu nhiệt hỗn hợp tá dược, BER tồn trạng thái vơ định hình 3.3.6 Đánh giá khả giải phóng thuốc in vitro Tiến hành đánh giá khả giải phóng thuốc in vitro với mẫu: hỗn dịch dược chất (HDDC), hỗn dịch nano CT22 mục 2.3.3.6 Kết thể hình 3.16 37 Tỷ lệ dược chất giải phóng (%) 120 100 80 60 40 20 0 10 12 Thời gian ( ) NLC CT22 Hình 16 HDDC Hình 3.14 Đồ thị giải phóng bererin clorid từ NLC BER Nhận xét: Mơ hình giải phóng NLC chứa BER CT22 in vitro thực môi trường đệm phosphat pH 7,4 12 Nhìn vào đồ thị giải phóng, NLC CT22 giải phóng ạt khoảng 55% đầu Nguyên nhân phân tử BER bề mặt tiểu phân NLC dễ dàng tiếp xúc với mơi trường hồ tan, sẵn sàng giải phóng mơi trường dẫn đến tượng giải phóng dược chất ạt thời điểm đầu Điều Wang cộng đánh giá khả giải phóng SLNs chứa berberin clorid môi trường pH 7,4 [36] Tại thời điểm lại (từ – 12 giờ), tốc độ giải phóng BER chậm lúc phân tử BER nằm sâu bên cốt lipid giải phóng mơi trường chế mài mịn cốt lipid hồ tan dược chất HDDC giải phóng dược chất gần hồn tồn sau 12 (98,25 ± 2,40 %), tỷ lệ giải phóng tích luỹ dược chất hệ nano BER 82,42 ± 3,27 % Như hệ mang lipid kích thước nano chứa berberin clorid giải phóng dược chất chậm so với hỗn dịch dược chất túi thẩm tích Việc làm chậm giải phóng BER tạo điều kiện để giảm tần suất sử dụng BER thường xuyên, điều có ý nghĩa việc điều trị lâu dài bệnh da mãn tính 38 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ KẾT LUẬN Qua trình nghiên cứu thực nghiệm, đã đạt số kết sau: Đã xây dựng công thức bào chế tiểu phân nano chứa berberin clorid Đã xây dựng công thức lựa chọn cuối thông qua q trình khảo sát số thơng số ảnh hưởng, công thức cụ thể gồm: Thành phần Số lượng Berberin clorid 50 mg Precirol ATO 140 mg Acid oleic 60 mg Diclomethan 2,5ml Methanol 0,5ml Tween 80 175 mg Nước cất 25 ml Điều kiện siêu âm công suất siêu âm 130W, thời gian siêu âm phút Đánh giá số đặc tính tiểu phân nano bào chế - Tiểu phân nano bào chế có kích thước trung bình 145,3 ± 1,203 nm, số đa phân tán 0,197 ± 0,004 - Hiệu suất nano hoá dược chất 16,53 ± 0,73 %, tỷ lệ dược chất nano hoá 2,64 ± 0,25% - Tiểu phân bào chế có hình cầu, tồn dạng vơ định hình cốt lipid - Kết phổ hồng ngoại FT- IR: chứng minh có mặt berberin clorid hỗn hợp lipid mẫu nano - Phần trăm BER giải phóng in vitro qua màng thẩm tích mơi trường đệm phosphat pH 7,4 sau 12 từ hệ nano đạt 82,42 ± 3,27 % KIẾN NGHỊ Để tiếp tục hướng nghiên cứu đề tài, xin đưa số kiến nghị sau: - Nghiên cứu độ ổn định hệ nano bào chế điều kiện khắc nghiệt - Nghiên cứu biện pháp để cải thiện hiệu suất nano hoá dược chất 39 TÀI LIỆU THAM KHẢO Tiếng Việt Bộ Y tế (2017), Dược điển Việt Nam V, Nhà xuất Y học., pp 142-144 Đỗ Tất Lợi (2004), Những thuốc vị thuốc Việt Nam, Nhà xuất Y học, pp 189-195 Đồng Quang Huy (2014), Nghiên cứu chiết xuất berberin từ vàng đắng dung dịch kiểm, Luận văn thạc sĩ dược học, Đại học Dược Hà Nội Nguyễn Minh Đức , Trương Công Trị (2010), "Tiểu phân nano – kỹ thuật bào chế, phân tích tính chất, ứng dụng ngành dược", Nhà xuất Y học Nguyễn Ngọc Chiến (2019), Công nghệ nano ứng dụng ngành Dược, Nhà xuất Y học Phạm Trịnh Quốc Khanh (2008), Điều trị tổn thương bỏng sâu bàn tay dung dịch kem Berberin clorid 0,1%, Tạp chí Y học thực hành, Vol 4, pp 36 - 42 Tiếng Anh Yin J., Hou Y., Yin Y , Song X (2017), "Selenium-coated nanostructured lipid carriers used for oral delivery of berberine to accomplish a synergic hypoglycemic effect", International journal of nanomedicine 12, pp 8671 Amin A H, Subbaiah T V , Abbasi K M (1969), "Berberine sulfate: antimicrobial activity, bioassay, and mode of action", Can J Microbiol 15 (9), pp 10671076 Babbar O , IB R (1982), "Effect of berberine chloride eye drops on clinically positive trachoma patients" 10 Battu S K., Repka M A., Maddineni S., Chittiboyina A G., Avery M A , Majumdar S (2010), "Physicochemical characterization of berberine chloride: a perspective in the development of a solution dosage form for oral delivery", AAPS PharmSciTech 11 (3), pp 1466-1475 11 Beck R., Guterres S , Pohlmann A (2011), Nanocosmetics and nanomedicines: new approaches for skin care, Springer 12 Cavalli R., Marengo E., Rodriguez L , Gasco M R (1996), "Effects of some experimental factors on the production process of solid lipid nanoparticles", European journal of pharmaceutics and biopharmaceutics 42 (2), pp 110-115 13 Chauhan I, Yasir M, Verma M , Singh A P (2020), "Nanostructured Lipid Carriers: A Groundbreaking Approach for Transdermal Drug Delivery", Adv Pharm Bull 10 (2), pp 150-165 14 Chen C.-C., Tsai T.-H., Huang Z.-R , Fang J.-Y (2010), "Effects of lipophilic emulsifiers on the oral administration of lovastatin from nanostructured lipid carriers: physicochemical characterization and pharmacokinetics", European journal of pharmaceutics and biopharmaceutics 74 (3), pp 474-482 15 Chun Y T, Yip T T, Lau K L, Kong Y C , Sankawa U (1979), "A biochemical study on the hypotensive effect of berberine in rats", Gen Pharmacol 10 (3), pp 177182 16 Das S , Chaudhury A (2011), "Recent advances in lipid nanoparticle formulations with solid matrix for oral drug delivery", AAPS PharmSciTech 12 (1), pp 62-76 17 Fang C L., Al-Suwayeh S A , Fang J Y (2013), "Nanostructured lipid carriers (NLCs) for drug delivery and targeting", Recent Pat Nanotechnol (1), pp 41-55 18 Hayash K, Minoda K, Nagaoka Y, Hayashi T , Uesato S (2007), "Antiviral activity of berberine and related compounds against human cytomegalovirus", Bioorg Med Chem Lett 17 (6), pp 1562-1564 19 Hua W., Ding L., Chen Y., Gong B., He J , Xu G (2007), "Determination of berberine in human plasma by liquid chromatography–electrospray ionization–mass spectrometry", Journal of pharmaceutical and biomedical analysis 44 (4), pp 931-937 20 Kong W., Wei J., Abidi P., Lin M., Inaba S., Li C., Wang Y., Wang Z., Si S , Pan H (2004), "Berberine is a novel cholesterol-lowering drug working through a unique mechanism distinct from statins", Nature medicine 10 (12), pp 1344-1351 21 Lee Y S, Kim W S, Kim K H, Yoon M J, Cho H J, Shen Y, Ye J M, Lee C H, Oh W K, Kim C T, Hohnen-Behrens C, Gosby A, Kraegen E W, James D E , Kim J B (2006), "Berberine, a natural plant product, activates AMP-activated protein kinase with beneficial metabolic effects in diabetic and insulin-resistant states", Diabetes 55 (8), pp 2256-2264 22 Li W, Ma Y, Yang Q, Pan Y , Meng Q (2017), "Moist exposed burn ointment for treating pressure ulcers: A multicenter randomized controlled trial", Medicine (Baltimore) 96 (29), pp e7582 23 Lin Yu-Hsin, Lin Jui-Hsiang, Shen-Chieh C., Chang Shu-Jen, Chung Chun-Chia, Chen Yueh-Sheng , Chang Chiung-Hung (2015), "Berberine-loaded targeted nanoparticles as specific Helicobacter pylori eradication therapy: in vitro and in vivo study", Nanomedicine 10 (1), pp 57-71 24 Liu D., Jiang S., Shen H., Qin S., Liu J., Zhang Q., Li R , Xu Q (2011), "Diclofenac sodium-loaded solid lipid nanoparticles prepared by emulsion/solvent evaporation method", Journal of Nanoparticle Research 13 (6), pp 2375-2386 25 Mehnert W , Mäder K (2012), "Solid lipid nanoparticles: production, characterization and applications", Advanced drug delivery reviews 64, pp 83-101 26 Mills S , Bone K (2000), Principles and practice of phytotherapy Modern herbal medicine, Churchill Livingstone 27 Minzhong Ye, Sheng Fu, Rongbiao Pi , Feng He (2009), "Neuropharmacological and pharmacokinetic properties of berberine: a review of recent research", Journal of Pharmacy and Pharmacology 61 (7), pp 831-837 28 Mukherjee S, Ray S , Thakur R S (2009), "Solid lipid nanoparticles: a modern formulation approach in drug delivery system", Indian J Pharm Sci 71 (4), pp 349-358 29 Müller R H., Radtke M , Wissing S A (2002), "Solid lipid nanoparticles (SLN) and nanostructured lipid carriers (NLC) in cosmetic and dermatological preparations", Advanced drug delivery reviews 54, pp S131-S155 30 Nguyen T X., Huang L., Liu L., Abdalla A M E., Gauthier M , Yang G (2014), "Chitosan-coated nano-liposomes for the oral delivery of berberine hydrochloride", Journal of Materials Chemistry B (41), pp 7149-7159 31 Poonia N., Kharb R., Lather V , Pandita D (2016), "Nanostructured lipid carriers: versatile oral delivery vehicle", Future Sci OA (3), pp FSO135 32 Pham C V., Van M C., Thi H P., Thanh C Đ., Ngoc B T., Van B N., Le Thien G., Van B N , Nguyen C N (2020), "Development of ibuprofen-loaded solid lipid nanoparticle-based hydrogel for enhanced in vitro dermal permeation and in vivo topical anti-inflammatory activity", Journal of Drug Delivery Science and Technology, pp 101758 33 Sahibzada Muhammad Umar Khayam, Sadiq Abdul, Faidah Hani S, Khurram Muhammad, Amin Muhammad Usman, Haseeb Abdul , Kakar Maria (2018), "Berberine nanoparticles with enhanced in vitro bioavailability: characterization and antimicrobial activity", Drug design, development and therapy 12, pp 303 34 Sut S, Faggian M, Baldan V, Poloniato G., Castagliuolo I., Grabnar I., Perissutti B., Brun P., Maggi F., Voinovich D., Peron G , Dall'Acqua S (2017), "Natural Deep Eutectic Solvents (NADES) to Enhance Berberine Absorption: An In Vivo Pharmacokinetic Study", Molecules 22 (11) 35 Torky A S., Freag M S., Nasra M M , Abdallah O Y (2018), "Novel skin penetrating berberine oleate complex capitalizing on hydrophobic ion pairing approach", International journal of pharmaceutics 549 (1-2), pp 76-86 36 Wang L., Li H., Wang S., Liu R., Wu Z., Wang C., Wang Y , Chen M (2014), "Enhancing the antitumor activity of berberine hydrochloride by solid lipid nanoparticle encapsulation", AAPS PharmSciTech 15 (4), pp 834-844 37 Wang Q.-s., Tang Q.-l , Zhang Li (2005), "MEBO for treating 47 cases of chronic ischemic ulcer in lower limb", The Chinese Journal of Burns Wounds & Surface Ulcers(4), pp 23 38 Wang R., Li L., Wang B., Zhang T , Sun L (2012), "FK506-loaded solid lipid nanoparticles: preparation, characterization and in vitro transdermal drug delivery", Afr J Pharm Pharmacol (12), pp 904-913 39 Wang Zhi-ping, Wu Junbiao, Chen Tong-sheng, Zhou Qun , Wang Yi-fei (2015), In vitro and in vivo antitumor efficacy of berberine-nanostructured lipid carriers against H22 tumor, Biophotonics and Immune Responses X, International Society for Optics and Photonics, pp 93240Y PHỤ LỤC Phụ lục 1: Sắc kí đồ Mẫu trắng Mẫu chuẩn 20 µg/ml Mẫu thử: Mẫu thử xác định lượng dược chất dạng phân tử tự CT 22 Mẫu thử xác định lượng dược chất toàn phần CT 22 Phụ lục 2: Phổ IR Berberin clorid nguyên liệu Hỗn hợp tá dược Hỗn hợp vật lý NLC berberin clorid Phụ lục 3: Phổ DSC Berberin clorid nguyên liệu Hỗn hợp tá dược Hỗn hợp vật lý NLC berberin clorid ...BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC DƯỢC HÀ NỘI ĐÀO THỊ KHÁNH VÂN 1501541 NGHIÊN CỨU BÀO CHẾ TIỂU PHÂN NANO LIPID CHỨA BERBERIN KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP DƯỢC SĨ Người hướng dẫn: GS.TS Nguyễn Ngọc... đặc tính tiểu phân NLC chứa berberin clorid 34 3.3.1 Kích thước tiểu phân phân bố kích thước tiểu phân 34 3.3.2 Hiệu suất nano hoá dược chất tỷ lệ dược chất nano hoá tiểu phân NLC chứa BER... tiểu phân nano lipid chứa berberin? ?? tiến hành nghiên cứu với mục tiêu sau: Xây dựng công thức xác định số thơng số quy trình bào chế tiểu phân nano chứa berberin clorid Đánh giá số đặc tính tiểu