Đang tải... (xem toàn văn)
Bài viết nghiên cứu sự ảnh hưởng của các phương pháp chiết xuất khác nhau như chiết soxhlet với n-hexan, cất kéo hơi nước, chiết xuất bằng dung môi CO2 siêu tới hạn tới tính chất lý hóa của tinh dầu tỏi. Hiệu suất chiết xuất của các phương pháp chiết soxhlet, cất kéo hơi nước, chiết xuất bằng dung môi CO2 siêu tới hạn tương ứng lần lượt là 0,441; 0,124 và 0,465 %.
VNU Journal of Science: Medical and Pharmaceutical Sciences, Vol 36, No (2020) 49-56 Original Article The Effect of Different Extraction Procedures on Antioxidant Activity of Garlic (Allium sativum L.) Essential Oil Nguyen Van Khanh1,*, Do Thi Nhai1, Bui Thanh Tung1, Nguyen Thanh Hai1 VNU School of Medicine and Pharmacy, 144 Xuan Thuy, Cau Giay, Hanoi, Vietnam Received 23 February 2020 Revised 03 March 2020; Accepted 10 March 2020 Abstract: This paper studies the effect of different extraction procedures such as soxhlet extraction using n-hexane, distillation method and supercritical extraction (SFE) on the physicochemical properties of garlic essential oil The yield of garlic essential oil by soxhlet extraction, steam distillation and SFE-CO2 methods was approximately 0.441, 0.124 and 0.465 %, respectively The results of the oil analysis by gas chromatography/mass spectrometry method show the presence of five major compounds, including diallyl sulfide, diallyl disulfide, 3-vinyl-1,2-dithiacyclohex-4-ene, 3-vinyl-1,2-dithiacyclohex-5-ene and diallyl trisulfide The antioxidant activity of the essential oil obtained by the SFE-CO2 method was significantly higher than by the distillation method, but was lower than the acid ascorbic one Keywords: Garlic essential oil, SFE, GC-MS, antioxidant activity, extraction.* * Corresponding author E-mail address: khanha7k64dkh@gmail.com https://doi.org/10.25073/2588-1132/vnumps.4213 49 50 N.V Khanh et al / VNU Journal of Science: Medical and Pharmaceutical Sciences, Vol 36, No (2020) 49-56 Nghiên cứu chiết xuất đánh giá tác dụng chống oxy hóa tinh dầu tỏi từ củ tỏi (Allium sativum L.) Nguyễn Văn Khanh1,*, Đỗ Thị Nhài1, Bùi Thanh Tùng1, Nguyễn Thanh Hải1 Khoa Y Dược, Đại học Quốc gia Hà Nội, 144 Xuân Thủy, Cầu Giấy, Hà Nội, Việt Nam Nhận ngày 23 tháng 02 năm 2020 Chỉnh sửa ngày 03 tháng năm 2020; Chấp nhận đăng ngày 10 tháng năm 2020 Tóm tắt: Tỏi (Allium sativum L.) lồi có vai trị quan trọng chi hành (Allium) tiêu thụ tồn giới Các allicin (diallyl disulfid, diallyl trisulfid) có tinh dầu tỏi thể tác dụng kháng khuẩn chống oxy hóa tốt Mục đích nghiên cứu nghiên cứu ảnh hưởng phương pháp chiết xuất khác chiết soxhlet với n-hexan, cất kéo nước, chiết xuất dung môi CO2 siêu tới hạn tới tính chất lý hóa tinh dầu tỏi Hiệu suất chiết xuất phương pháp chiết soxhlet, cất kéo nước, chiết xuất dung môi CO siêu tới hạn tương ứng 0,441; 0,124 0,465 % Kết phân tích sắc ký khí ghép nối khối phổ cho thấy tinh dầu tỏi gồm chất diallyl sulfid, diallyl disulfid, 3-vinyl-1,2-dithiacyclohex4-en, 3-vinyl-1,2-dithiacyclohex-5-en, diallyl trisulfid Tinh dầu chiết xuất sử dụng dung môi siêu tới hạn cho thấy tác dụng chống oxy hóa cao nhiều so với phương pháp cất kéo nước, thấp acid ascorbic Từ khóa: Tinh dầu tỏi, siêu tới hạn, sắc ký khí khối phổ, hoạt tính chống oxy hóa, chiết xuất Mở đầu* Từ lâu, tỏi (Allium sativum L.) sử dụng nhiều sống để điều trị số bệnh cảm lạnh, ho hen suyễn [1] Ngày nay, y học đại chứng minh tỏi có nhiều tác dụng sinh học tốt kháng khuẩn, kháng nấm, kháng vi rút, chống ung thư, chống oxy hoá, hạ cholesterol máu, chống kết tập tiểu cầu, hoạt động chống viêm ức chế tổng hợp cholesterol [2] Tinh dầu tỏi chứa diallyl trisulfid, diallyl disulfid, propyl disulfid nhiều hợp chất khác có tác dụng kháng khuẩn chống oxy hóa mạnh [3] chiết xuất từ củ tỏi nhiều phương pháp chiết xuất khác cất kéo * Tác giả liên hệ Địa email: khanha7k64dkh@gmail.com https://doi.org/10.25073/2588-1132/vnumps.4213 nước, chiết với dung môi hữu cơ, chiết dung môi siêu tới hạn [4] Trong nghiên cứu này, tiến hành chiết xuất tinh dầu tỏi phương pháp chiết xuất khác đánh giá số đặc tính tinh dầu tỏi hình thức, thành phần hóa học tác dụng chống oxy hóa tinh dầu chiết xuất Nguyên liệu phương pháp 2.1 Nguyên liệu Tỏi Kinh Môn (Hải Dương) thu hoạch vào tháng 1/2018; 1,1-diphenyl-2picrylhydrazyl; natri sulfat, methanol (Trung N.V Khanh et al / VNU Journal of Science: Medical and Pharmaceutical Sciences, Vol 36, No (2020) 49-56 Quốc), n-hexan, acid ascorbic (Đức), nước tinh khiết, khí CO2 (Việt Nam) Tá dược hóa chất đạt tiêu chuẩn dược dụng tinh khiết phân tích 2.2 Thiết bị Máy đo quang UV-2600 Shimadzu (Nhật Bản), cân phân kỹ thuật Shimadzu (Nhật Bản), cân phân tích AY 129 Shimadzu (Nhật Bản), hệ thống chiết xuất CO2 siêu tới hạn SFE 500 hãng Waters (Mỹ), bếp điện WHM 12012 Daihan (Hàn Quốc), hệ thống sắc kí khí ghép khối phổ GC-MS 2010 Plus Shimadzu (Nhật Bản), hệ thống cất quay Rovapor R- 210 Buchi (Đức) 2.3 Phương pháp nghiên cứu 2.3.1 Xử lý nguyên liệu Mẫu tỏi tươi Kinh Môn bóc vỏ, xay nhỏ máy xay sinh tố để chuẩn bị cho trình chiết xuất 2.3.2 Các phương pháp chiết xuất tinh dầu tỏi Chiết xuất tinh dầu tỏi dung môi CO2 siêu tới hạn (SCO2): Các yếu tố ảnh hưởng đến trình chiết nguyên liệu, áp suất chiết, nhiệt độ chiết, tỷ lệ dược liệu/ dung mơi, tốc độ dịng CO2, thời gian chiết Trong yếu tố thuộc nhiệt độ áp suất ảnh hưởng lớn tới độ hịa tan chất dung mơi CO2 siêu tới hạn [5] Tham khảo số nghiên cứu trước [6,7], tiến hành khảo sát chiết 200g tỏi dung môi CO2 siêu tới hạn điều kiện sau: - Áp suất: 100 - 300 bar - Nhiệt độ: 35 - 50 oC - Tốc độ dòng CO2: 10 g/phút - Thời gian chiết xuất: - 150 phút Tinh dầu chiết xuất bảo quản tủ lạnh 4oC Chiết xuất tinh dầu phương pháp cất kéo nước: 200 g tỏi cho vào nồi thêm 1000 mL nước sau lắp vào hệ thống chưng cất lôi nước Sau khoảng thời gian giờ, tắt bếp 51 để nguội, tinh dầu nhẹ nước nằm phía nên xả van để nước chảy trước sau thu tinh dầu Dùng muối Na2SO4 để làm khan phần nước lẫn tinh dầu để thu tinh dầu nguyên chất Tinh dầu bảo quản tủ lạnh 4oC Chiết xuất tinh dầu phương pháp chiết Soxhlet với dung môi n-hexan: 200 g tỏi cho vào giấy lọc gói lại cho vào bình chiết, thêm vào bình cầu 200 mL n-hexan sau lắp vào hệ thống chiết Soxhlet Sau giờ, tắt bếp để nguội, thu toàn dịch chiết đem cô quay áp suất giảm để loại bỏ n-hexan nhiệt độ 40oC Đem cân tính hàm lượng tinh dầu thu Tinh dầu bảo quản tủ lạnh 4oC 2.3.3 Phương pháp xác định hiệu suất chiết tinh dầu tỏi Hiệu suất chiết tinh dầu tỏi tính theo cơng thức sau [5,6]: Hiệu suất chiết (%)= Khối lượng tinh dầu x 100 Khối lượng mẫu Trong đó: khối lượng tinh dầu khối lượng chất chiết xuất (g) Khối lượng mẫu khối lượng tỏi đem chiết (g) Các phương pháp đánh giá tinh dầu: Hình thức: xác định màu sắc, độ mùi tinh dầu Phương pháp xác định thành phần hóa học tinh dầu: Thành phần hóa học tinh dầu tỏi xác định phương pháp sắc ký khí ghép nối đầu dị khối khổ (GC-MS): - Chuẩn bị mẫu: lấy xác 20 µl tinh dầu tỏi cho vào lọ, thêm 1000 µl n-hexan, lắc Sau lấy 500 µl dung dịch vừa pha cho vào lọ, thêm 2000 µl n-hexan, lắc tới đồng Dung dịch lọc qua màng lọc cellulose acetat 0,2 µm để chạy sắc ký - Điều kiện sắc ký: phân tích GC-MS tiến hành máy SHIMADZU GCMS-QP 2020 Cột SH-Rxi-5Sil MS (30m x 0,25µ x 0,25µ) Sử dụng helium làm khí mang với tốc độ dịng khí 1,61 ml/phút, áp suất 100 kPa Nhiệt độ 52 N.V Khanh et al / VNU Journal of Science: Medical and Pharmaceutical Sciences, Vol 36, No (2020) 49-56 buồng tiêm 250oC, tỷ lệ chia dòng 1/5, thể tích tiêm µl Chương trình nhiệt độ: Nhiệt độ đầu 50oC, tăng 8oC/phút đến 270oC giữ phút Ghi nhận khối phổ m/z khoảng từ 30 - 500, nhiệt độ nguồn ion: 200oC, nhiệt độ interface: 250oC Thư viện phổ NIST 11 sử dụng để định tính thành phần hóa học tinh dầu - Kết quả: hàm lượng % chất A mẫu phân tích có n thành phần với diện tích pic S1, S2, …Sn (A số n thành phần tinh dầu) tính theo công thức sau: SA %A= x 100 S1 +S2 +…+Sn Tác dụng chống oxy hóa DPPH: 1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl (DPPH) chất tạo gốc tự dùng để sàng lọc tác dụng chống oxy hóa chất nghiên cứu Hoạt tính chống oxy hóa thể qua việc làm giảm màu DPPH, xác định cách đo quang bước sóng λ = 517 nm Tiến hành pha dung dịch DPPH có nồng độ 0,24 mg/ml methanol (MeOH) Mẫu thử pha loãng MeOH theo dãy nồng độ 50 µg/ml; 37,5 µg/ml; 25 µg/ml; 12,5 µg/ml; 3,125 µg/ml (tinh dầu tỏi thu phương pháp SCO2) ; theo dãy nồng độ 500 µg/ml; 300 µg/ml; 250 µg/ml; 150 µg/ml; 125 µg/ml (tinh dầu tỏi thu phương pháp cất kéo nước) Lấy 450 µl DPPH 0,24 mg/ml pha với 2550 µl MeOH 100 µg/ml mẫu thử pha lỗng trộn lẫn, bọc giấy bạc, ủ bóng tối Để thời gian phản ứng 20 phút 250C, đọc mật độ hấp thụ DPPH chưa phản ứng máy đọc quang phổ Shimazhu UV-2600 bước sóng 517 nm Phần trăm quét gốc tự DPPH mẫu thử tính theo cơng thức sau: Ac -As % chống oxy hóa = × 100 Ac Trong đó: Ac độ hấp thụ quang mẫu chuẩn (abs), As độ hấp thụ quang cuả dung dịch mẫu thử/ chứng (abs) Mẫu chuẩn acid ascorbic tiến hành tương tự mẫu thử với nồng độ µg/ml; µg/ml; 0,5µg/ml; 0,25µg/ml; 0,125µg/ml; 0,0625µg/ml IC50 tính theo giá trị % chống oxy hóa tương quan với nồng độ khác chất thử, thí nghiệm lặp lại với n = 3 Kết nghiên cứu 3.1 Khảo sát phương pháp chiết xuất tinh dầu tỏi Tiến hành chiết xuất tinh dầu tỏi (TDT) phương pháp cất kéo nước, chiết soxhlet với n-hexan chiết dung môi CO2 siêu tới hạn Kết thể Bảng Bảng Hình thức hiệu suất chiết xuất TDT với phương pháp chiết khác (n=3) Phương pháp Cất kéo nước Chiết soxhlet Chiết SCO2 Hình thức Màu vàng đậm, mùi hắc Màu vàng đậm, mùi hắc Màu vàng nhạt, mùi tươi tự nhiên Hiệu suất (%) 0,113 ± 0,003 0,441 ± 0,017 0,465 ± 0,012 Kết cho thấy chiết phương pháp khác hiệu suất tinh dầu thu thay đổi đáng kể, hiệu suất tinh dầu tỏi thu SCO2 cao (0,465%), thấp cất kéo nước (0,113%) Màu sắc mùi vị tinh dầu tỏi phương pháp khác nhau, chiết SCO2 tinh dầu có màu vàng nhạt, mùi tỏi tươi tự nhiên; hai phương pháp lại tinh dầu có màu vàng đậm, mùi giống tỏi nấu chín Ngun nhân chiết xuất cất kéo chiết soxhlet số thành phần tinh dầu không bền với nhiệt nên tinh dầu thu khơng cịn giữ mùi tươi tự nhiên Kết tương tự nghiên cứu Bottini cộng [8] Do phương pháp chiết xuất dùng dung môi CO2 siêu tới hạn sử dụng nghiên cứu N.V Khanh et al / VNU Journal of Science: Medical and Pharmaceutical Sciences, Vol 36, No (2020) 49-56 3.2.1 Khảo sát khoảng thời gian chiết xuất Tiến hành chiết TDT với thơng số quy trình sau khối lượng tỏi 200 g; nhiệt độ 40ºC; áp suất: 200 bar; tốc độ dòng CO2: 10g/phút; thời gian chiết: 30, 60, 90, 120, 150 phút Kết Hình Hiệu suất chiết tinh dầu tỏi thu (%) 0,6 0,465 0,485 0,5 0,4 0,251 0,3 0,185 0,2 0,105 0,1 0 50 100 150 Thời gian chiết (phút) 200 Hình Hiệu suất chiết tinh dầu tỏi thay đổi thời gian chiết Khi tăng thời gian chiết hiệu suất TDT tăng lên Tốc độ chiết tinh dầu tỏi giảm dần theo thời gian, lượng dầu chiết thời điểm 120 phút 150 phút tương đương 0,465 % 0,485 % Kết cho thấy sau 120 phút chiết xuất lượng tinh dầu tỏi gần chiết kiệt Nguyên nhân sau lượng tinh dầu tỏi đi, làm giảm tốc độ chiết TDT Do thời gian chiết xuất 120 phút lựa chọn Hiệu suất chiết tinh dầu tỏi thu (%) 3.2.2 Khảo sát ảnh hưởng áp suất chiết 0,312 0,255 100 0,285 0,188 200 3.2.3 Khảo sát ảnh hưởng nhiệt độ chiết Tiến hành chiết TDT với thơng số quy trình sau khối lượng tỏi 200g; nhiệt độ 35oC, 40ºC, 50ºC; áp suất 200 bar; tốc độ dòng CO2 10g/phút; thời gian chiết 120 phút Kết Hình 0,5 0,465 0,4 0,392 0,3 0,251 0,2 0,1 0 20 40 Nhiệt độ chiết (oC) 60 Hình Hiệu suất chiết tinh dầu tỏi thay đổi nhiệt độ chiết 0,465 0,5 0,4 0,3 0,2 0,1 Tiến hành chiết TDT với thơng số quy trình sau khối lượng tỏi 200 g, nhiệt độ 40ºC, áp suất: 100, 150, 200, 250, 300 bar; tốc độ dòng CO2 10g/phút, thời gian chiết 120 phút Kết trình bày Hình Kết cho thấy thay đổi áp suất chiết, hiệu suất tinh dầu tỏi thu thay đổi đáng kể (hiệu suất TDT 100, 150, 200, 250, 300 bar 0,255 %; 0,312 %; 0,465 %; 0,285 %; 0,188 %) cao 200 bar Khi giữ nhiệt độ 40oC, tăng dần áp suất chiết tỷ trọng CO2 tăng, tăng độ hịa tan tinh dầu dung môi [7] Tuy nhiên chiết áp suất lớn 200 bar ảnh hưởng áp suất chiết tới hiệu suất tinh dầu dung môi CO2 giảm Do áp suất chiết xuất 200 bar lựa chọn Hiệu suất chiết tinh dầu tỏi thu (%) 3.2 Khảo sát điều kiện chiết xuất phương pháp sử dụng dung môi CO2 siêu tới hạn 53 300 Áp suất chiết (Bar) 400 Hình Hiệu suất chiết tinh dầu tỏi thay đổi thời gian chiết Kết cho thấy hiệu suất chiết tinh dầu tỏi thu tăng tăng từ nhiệt độ 35oC (0,392%) lên 40ºC (0,465 %), sau giảm nhiệt độ 50ºC (0,251 %) Khi giữ áp suất chiết cao 200 bar, tăng nhiệt độ từ 40ºC lên 50ºC tỷ trọng CO2 giảm, độ tan tinh dầu dung môi tốc độ khếch tán CO2 vào tinh dầu giảm dẫn tới giảm hiệu suất chiết [9] Hơn nữa, 54 N.V Khanh et al / VNU Journal of Science: Medical and Pharmaceutical Sciences, Vol 36, No (2020) 49-56 tăng nhiệt độ từ 40ºC lên 50ºC ảnh hưởng tới thành phần tinh dầu mà bền với nhiệt Do nhiệt độ 40ºC lựa chọn Như vậy, điều kiện phương pháp chiết dung môi CO2 siêu tới hạn lựa chọn sau: áp suất: 200 bar, nhiệt độ: 40oC, tốc độ dòng CO2: 10 g/phút, thời gian chiết xuất: 120 phút 3.3 Xác định tỷ lệ thành phần tinh dầu tỏi Phân tích mẫu tinh dầu tỏi phương pháp sắc ký khí ghép nối khối phổ (GC-MS) Kết Bảng Kết cho thấy phương pháp chiết khác tỷ lệ thành phần tinh dầu khác thành phần mẫu TDT diallyl sulfid, diallyl disulfid, 3-vinyl- 1,2-dithiacyclohex-4-en, 3-vinyl-1,2dithiacyclohex-5-en diallyl trisulfid Phương pháp cất kéo nước chiết soxhlet chất tinh dầu diallyl disulfid diallyl trisulfid chiết xuất dung mơi CO2 siêu tới hạn 3-vinyl-1,2-dithiacyclohex5-en chiếm tỷ lệ nhiều TDT Nguyên nhân trình chiết xuất nhiệt độ cao allicin tỏi bị nhiệt phân hủy mạnh thành hợp chất diallyl sulfid, phương pháp SCO2 chiết xuất nhiệt độ 40oC nên tỷ lệ hợp chất diallyl sulfid chiếm nhiều [10,11] Ngồi chiết xuất SCO2 allicin bị chuyển hóa chủ yếu hợp chất 3vinyl-1,2-dithiacyclohex-5-en 3-vinyl-1,2dithiacyclohex-4-en, hợp chất tạo nên mùi thơm đặc trưng cho tinh dầu tỏi so sánh với phương pháp chiết xuất lại [12] Bảng Tỷ lệ thành phần tinh dầu tỏi phương pháp chiết khác Các chất tinh dầu tỏi Cất kéo nước Diallyl sulfid (%) Diallyl disulfid (%) 3-Vinyl-1,2-dithiacyclohex-4-en (%) 3-Vinyl-1,2-dithiacyclohex-5-en (%) Diallyl trisulfid (%) 4,23 32,48 2,77 10,54 13,77 3.4 Đánh giá tác dụng chống oxy hóa tinh dầu tỏi Bảng Giá trị IC50 mẫu tinh dầu acid ascorbic (n=3) Mẫu Cất kéo nước SCO2 Acid ascorbic Giá trị IC50 (µg/ml) 438,77 ± 7,43 37,68 ± 1,25 0,22 ± 0,01 Chiết SCO2 (200 bar, 40oC) 1,94 10,93 19,52 31,67 3,09 70 y = 0,7582x + 21,294 R² = 0,9973 60 % chống oxy hóa Tiến hành đánh giá tác dụng chống oxy hóa TDT chiết xuất từ cất kéo nước SCO2 với mẫu chứng dương acid ascorbic Kết Hình 4, và Bảng Chiết soxhlet với n-hexan 0,31 20,05 8,79 15,3 28,73 50 40 30 20 10 0 20 40 60 Nồng độ tinh dầu tỏi SCO2 (µg/ml) Hình Đồ thị biểu diễn khả chống oxy hóa TDT chiết phương pháp SCO2 N.V Khanh et al / VNU Journal of Science: Medical and Pharmaceutical Sciences, Vol 36, No (2020) 49-56 y = 0,1022x + 5,1572 R² = 0,9963 60 % chống oxy hóa 50 40 30 20 10 55 nhiệt nên tác dụng chống oxy hóa bị giảm Như tinh dầu tỏi chiết xuất dung mơi CO2 siêu tới hạn có hoạt tính chống oxy hóa tốt phương pháp cất kéo nước Tuy nhiên hoạt tính chống oxy hóa yếu so sánh với acid ascorbic, điều phù hợp với nghiên cứu Mohsen Barzegar cộng [15] 0 200 400 600 Nồng độ tinh dầu tỏi cất kéo nước (µg/ml) % chống oxy hóa Hình Đồ thị biểu diễn khả chống oxy hóa TDT thu cất kéo nước 90 80 70 60 50 40 30 20 10 y = 126,07x + 22,278 R² = 0,9554 0,2 0,4 0,6 Nồng độ acid ascorbic (µg/ml) Hình Đồ thị biểu diễn khả chống oxy hóa acid ascorbic Kết cho thấy giá trị IC50 TDT chiết SCO2 (37,68 µg/ml) thấp chiết cất kéo nước 11,64 lần (438,77 µg/ml) cao acid ascorbic (0,22 µg/ml) khoảng 171 lần Hoạt tính chống oxy hóa tinh dầu tỏi chiết xuất tinh dầu tỏi có chứa hợp chất chứa lưu huỳnh diallyl sulfid, diallyl disulfid, 3-vinyl-1,2-dithiacyclohex-4-en, 3-vinyl-1,2-dithiacyclohex-5-en diallyl trisulfide [13,14] Ngoài ra, mẫu TDT chiết xuất phương pháp SCO2 có khả chống oxy hóa tốt phương pháp cất kéo nước Nguyên nhân số thành phần có hoạt tính chống oxy hóa tinh dầu tỏi bị tác động, không bền với Kết luận Nghiên cứu chiết xuất tinh dầu tỏi, đặc biệt sử dụng phương pháp chiết SCO2 Khảo sát điều kiện tách chiết SCO2 xác định điều kiện chiết xuất hiệu quả: áp suất 200 bar, nhiệt độ 400C, tốc độ dòng 10g/phút, thời gian chiết giờ, hiệu suất chiết tinh dầu khoảng 0,465% Các thành phần mẫu tinh dầu tỏi diallyl sulfid, diallyl disulfid, 3-vinyl-1,2-dithiacyclohex-4-en, 3-vinyl-1,2dithiacyclohex-5-en diallyl trisulfid Khả chống oxy hóa tinh dầu tỏi chiết SCO2 cao gấp 11,64 lần so với phương pháp cất kéo nước, nhiên thấp so sánh với acid ascorbic Tài liệu tham khảo [1] R Lawrencea, K Lawrenceb, Antioxidant activity of garlic essential oil (Allium Sativum) grown in north Indian plains, Asian Pacific Journal of Tropical Biomedicine (2011) 51-54 https://doi.org/10.1016/S2221-1691(11)60122-6 [2] Dziri, H Casabianca, B Hanchi, K Hosni, Composition of garlic essential oil (Allium sativum L.) as influenced by drying method, Journal of Essential Oil Research 26 (2014) 91-96 https://doi.org/10.1080/10412905.2013.868329.R [3] Li, W Chen, W Wang, W Tian, X.Z Rrui, Extraction of essential oils from garlic (Allium sativum) using ligarine as solvent and its immunity activity in gastric cancer rat, Medicinal Chemistry Research 19 (2010) 1092-1105 https://doi.org/10.1007/s00044-009-9255-z [4] M.K Gafar, A.U Itodo, A A Warra, L Abdullahi, Extraction and Physicochemical Determination of Garlic (Allium sativum L) Oil, International Journal of Food and Nutrition science (2012) 4-7 56 N.V Khanh et al / VNU Journal of Science: Medical and Pharmaceutical Sciences, Vol 36, No (2020) 49-56 [5] A.P Sa´nchez-Camargo, J.A Mendiola, E Iba´n˜ez, M Herrero, Supercritical Fluid Extraction, Reference Module in Chemistry, Molecular Sciences and Chemical Engineering (2014) 1-17 https://doi.org/10.1016/b978-0-12409547-2.10753-x [6] A Rafe, M S Nadjafi, Physicochemical characteristics of garlic (Allium sativum L.) oil: Effect of extraction procedure, International Journal of Nutrition and Food Sciences (2014) 1-5 https://doi.org/10.11648/j.ijnfs.s.2014030601.11 [7] J M del Valle, C Mena, M Budinich, Extraction of garlic with supercritical CO2 and conventional organic solvents, Brazilian Journal of Chemical Engineering, 25 (2008) 535-542 https://doi.org/10.1590/S0104-66322008000300011 [8] A.E Andreatta, G Foco, G Mabe, S.B Bottini, Extraction of garlic oil with quasi-critical solvents, 4th Mercosur Congress on Process Systems Engineering (2014) 1-9 [9] H Kamali, N Aminimoghadamfarouj, E Golmakani, A Nematollahi, The optimization of essential oils supercritical CO2 extraction from Lavandula hybrida through static-dynamic steps procedure and semi-continuous technique using response surface method, Pharmacognosy Res (2015) 57-65 https://doi.org/10.4103/09748490.147209 [10] L.D Lawson, Z.J Wang, B.G Hughes, Identification and HPLC quantitation of the [11] [12] [13] [14] [15] sulfides and dialk(en)yl thiosulfinates in commercial garlic products, Planta Med, 57 (1991) 363-370 https://doi.org/10.1055/s-2006-960119 E A O'Gara, D J Hill, D J Maslin, Activities of Garlic Oil, Garlic Powder, and Their Diallyl Constituents against Helicobacter pylori, Applied and Environmental Microbiology 66 (2000) 22692273 https://doi.org/10.1128/aem.66.5.22692273.2000 X Qiao, Molecular distillation separation and purification of essential oils of garlic, Food science Shandong (2007) 60 M Iranshahi, A review of volatile sulfurcontaining compounds from terrestrial plants: biosynthesis, distribution and analytical methods, The Journal of Essential Oil Research, 24 (2012) 393-434 https://doi.org/10.1080/10412905.2012.692918 M Corzo-Martı´nez, N Corzo, M Villamiel, Biological properties of onions and garlic, Trends in Food Science & Technology 18 (2007) 609-625 https://doi.org/10.1016/j.tifs.2007.07.011 K Khoshtinat, M Barzegar, M A Sahari, Z Hamidi, Comparison of Antioxidant and Antibacterial Activities of Free and Encapsulated Garlic Oil with Beta-cyclodextrin, Applied food biotechnology (2016) 254-268 https://doi.org/10.22037/afb.v3i4.12631 ... Pharmaceutical Sciences, Vol 36, No (2020) 49-56 Nghiên cứu chiết xuất đánh giá tác dụng chống oxy hóa tinh dầu tỏi từ củ tỏi (Allium sativum L.) Nguyễn Văn Khanh1,*, Đỗ Thị Nhài1, Bùi Thanh... có khả chống oxy hóa tốt phương pháp cất kéo nước Nguyên nhân số thành phần có hoạt tính chống oxy hóa tinh dầu tỏi bị tác động, không bền với Kết luận Nghiên cứu chiết xuất tinh dầu tỏi, đặc... theo giá trị % chống oxy hóa tương quan với nồng độ khác chất thử, thí nghiệm lặp lại với n = 3 Kết nghiên cứu 3.1 Khảo sát phương pháp chiết xuất tinh dầu tỏi Tiến hành chiết xuất tinh dầu tỏi