Nghiên cứu xây dựng tiêu chuẩn dược liệu và cao dược liệu từ cây lá diễn

ĐẠI HỌC QUỐC GIA HÀ NỘI KHOA Y DƯỢC NGÔ THỊ QUỲNH NGHIÊN CỨU XÂY DỰNG TIÊU CHUẨN DƯỢC LIỆU VÀ CAO DƯỢC LIỆU TỪ CÂY LÁ DIỄN (Dicliptera chinensis (L.) Ness) KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC NGÀNH DƯỢC HỌC HÀ NỘI – 2017 ĐẠI HỌC QUỐC GIA HÀ NỘI KHOA Y DƯỢC NGÔ THỊ QUỲNH NGHIÊN CỨU XÂY DỰNG TIÊU CHUẨN DƯỢC LIỆU VÀ CAO DƯỢC LIỆU TỪ CÂY LÁ DIỄN (Dicliptera chinensis (L.) Ness) KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC NGÀNH DƯỢC HỌC KHÓA I Người hướng dẫn: PGS.TS.TRẦN VIỆT HÙNG ThS.NGUYỄN THÚC THU HƯƠNG HÀ NỘI – 2017 LỜI CẢM ƠN Sau thời gian thực đề tài với nhiều nỗ lực cố gắng, thời điểm hồn thành khóa luận lúc tơi xin phép bày tỏ lịng biết ơn chân thành với người dạy dỗ, hướng dẫn giúp đỡ suốt thời gian qua Trước hết, tơi xin chân thành bày tỏ lịng kính trọng biết ơn sâu sắc tới PGS.TS.Trần Việt Hùng – Viện Kiểm nghiệm thuốc TP.HCM, TS.Vũ Đức Lợi - Giám đốc trung tâm khảo thí, Chủ nhiệm mơn Dược liệu Dược học cổ truyền Khoa Y Dược, ĐHQGHN, ThS.Nguyễn Thúc Thu Hương – giảng viên môn Dược liệu Dược học cổ truyền Khoa Y Dược, ĐHQGHN,đã hướng dẫn tận tình, động viên giúp đỡ tơi suốt q trình thực khóa luận Tơi xin gửi lời cảm ơn tới thầy cô, kỹ thuật viên môn Dược liệu Dược học cổ truyền, Hóa dược Kiểm nghiệm thuốc, Bào chế Công nghệ dược phẩm – Khoa Y Dược, ĐHQGHN giúp đỡ tơi suốt q trình làm thực nghiệm trường Xin cảm ơn Ban giám hiệu, Phòng đào tạo, phòng ban tạo điều kiện giúp tơi hồn thành khóa luận Cám ơn thầy Khoa Y Dược, ĐHQGHN quan tâm dìu dắt truyền kiến thức cho năm học vừa qua Cuối cùng, xin gửi lời cảm ơn tới gia đình bạn bè ln ủng hộ, động viên khích lệ tơi q trình học tập làm khóa luận Hà Nội, tháng năm 2017 Sinh viên Ngô Thị Quỳnh CTCT DCP DĐVN IV DMN EtOH HF HPLC NMR MeOH MS PL PTN r SKLM TT DANH MỤC CÁC BẢNG Tên bảng Bảng 1.1: Công thức cấu tạo chất có Lá diễn Bảng 2.1: Cách pha dãy chuẩn quercetin để đo quang Bảng 3.1: Bảng kết định tính chất có dược liệu từ Lá diễn DANH MỤC CÁC HÌNH VẼ, ĐỒ THỊ Tên hình, đồ thị Hình 1.1: Bộ phận mặt đất Lá diễn Hình 3.1: Thân, lá, hoa Lá diễn Hình 3.2: Hình ảnh vi phẫu thân Lá diễn Hình 3.3: Hình ảnh vi phẫu Lá diễn Hình 3.4: Đặc điểm vi phẫu bột dược liệu từ Lá diễn Hình 35: Đường chuẩn phụ thuộc độ hấp thụ A theo nồng độ quercetin MỤC LỤC MỞ ĐẦU…………………………………………………………………… CHƯƠNG 1: TỔNG QUAN………………………………………………… 1.1 TỔNG QUAN VỀ TÌNH HÌNH XÂY DỰNG TIÊU CHUẨN DƯỢC LIỆU VÀ CAO DƯỢC LIỆU 1.1.1 Cách thức xây dựng tiêu chuẩn 1.1.2 Phương pháp xây dựng tiêu chuẩn sở nói chung 1.2 TỔNG QUAN VỀ CAO DƯỢC LIỆU 1.2.1 Định nghĩa 1.2.2 Phân loại 1.3 TỔNG QUAN VỀ TIÊU CHUẨN THUỐC NHỎ MẮT 1.3.1 Tính chất: Thể chất lỏng 1.3.2 Độ 1.3.3 Kích thước tiểu phân 1.3.4 Giới hạn cho phép thể tích 1.3.5 Định tính 1.3.6 Định lượng .6 1.3.7 Độ vô khuẩn .6 1.3.8 Độ pH 1.3.9 Các yêu cầu kỹ thuật khác 1.4 TỔNG QUAN VỀ CÂY LÁ DIỄN 1.4.1 Đặc điểm thực vật 1.4.1.1 Vị trí phân loại chi Dicliptera 1.4.1.2 Đặc điểm thực vật chi Dicliptera 1.4.1.3 Số lượng loài phân bố loài thuộc chi Dicliptera 1.4.2 Thành phần hóa học 1.4.3 Tác dụng sinh học 11 1.4.3.1 Công dụng, định phối hợp dân gian .11 1.4.3.2 Tác dụng dược lý nghiên cứu .11 CHƯƠNG 2: ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU……… 13 2.1 Nguyên vật liệu thiết bị 13 2.1.1 Nguyên vật liệu 13 2.1.1.1 Dược liệu Lá diễn 13 2.1.1.2 Chiết xuất phân đoạn cao khô dược liệu Lá diễn 13 2.1.2 Đối tượng nghiên cứu 13 2.1.3 Hóa chất 13 2.1.4 Trang thiết bị, dụng cụ 14 2.2 Phương pháp nghiên cứu 14 2.2.1 Xây dựng tiêu chuẩn sở dược liệu từ Lá diễn 14 2.2.1.1 Mô tả 14 2.2.1.2 Vi phẫu .15 2.2.1.3 Bột : Làm tiêu , soi bột kính hiển vi 15 2.2.1.4 Mất khối lượng làm khô 15 2.2.1.5 Tro toàn phần 15 2.2.1.6 Kim loại nặng 15 2.2.1.7 Tỷ lệ vụn nát 15 2.2.1.8 Định tính 16 2.2.1.9 Định lượng 17 2.2.2 Xây dựng tiêu chuẩn sở cao khô dược liệu từ Lá diễn .17 2.2.2.1 Tính chất 17 2.2.2.2 Mất khối lượng làm khô 17 2.2.2.3 Độ mịn 17 2.2.2.4 Độ PH 18 2.2.2.5 Định tính 18 2.2.2.6 Định lượng 18 2.2.2.7 Tro toàn phần 21 2.2.2.8 Kim loại nặng (Pb) .21 2.2.2.9 Độ vô khuẩn .22 CHƯƠNG 3: KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN ……………………………… 23 3.1 Xây dựng tiêu chuẩn sở dược liệu từ Lá diễn 23 3.1.1 3.1.2 3.1.3 3.1.4 3.1.5 3.1.6 3.1.7 3.1.8 3.1.9 Mô tả 23 Vi phẫu 23 Bột 25 Mất khối lượng làm khô 26 Tro toàn phần 26 Kim loại nặng: không 10ppm 26 Tỷ lệ vụn nát .26 Định tính .27 Định lượng 27 3.2 Xây dựng tiêu chuẩn sở cao khô dược liệu từ Lá diễn .27 3.2.1 Tính chất .27 3.2.2 Mất khối lượng làm khô 27 3.2.3 Độ mịn 27 3.2.4 Độ PH 27 3.2.5 Định tính .27 3.2.6 Định lượng 27 3.2.7 Tro toàn phần 28 3.2.8 Kim loại nặng .28 3.2.9 Độ vô khuẩn 28 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ……………………………………………… 29 Kết luận 29 Kiến nghị 30 TÀI LIỆU THAM KHẢO………………………………………………… 31 MỞ ĐẦU Ngày giới, xu hướng tìm kiếm sử dụng sản phẩm chăm sóc sức khỏe có nguồn gốc tự nhiên ngày tăng Con người có khuynh hướng sử dụng nhiều thuốc có nguồn gốc từ thiên nhiên Việt Nam khơng nằm ngồi xu hướng Điều kiện tự nhiên ưu đãi cho đất nước ta có hệ sinh thái phong phú đa dạng, có tiềm to lớn tài nguyên thuốc Đất đai khí hậu nhiệt đới gió mùa phù hợp với nhiều loại trồng, có nhiều lồi thuốc q Đây tiền đề tốt để ngành Dược phát triển thuốc từ Dược liệu [18] Cây Lá diễn (Dicliptera chinensis (L.) Ness) loài thực vật phổ biến số tỉnh Việt Nam Lá diễn không dùng làm thực phẩm ăn hàng ngày mà sử dụng làm thuốc với nhiều công dụng như: chữa cảm mạo, sốt, đau mắt đỏ, viêm họng sưng đau, làm mát gan… Tuy nhiên, nghiên cứu thành phần hóa học, tác dụng dược lý cịn hạn chế Hầu chưa có tiêu chuẩn đầy đủ để làm thước đo đánh giá chất lượng dược liệu này; xây dựng tiêu chuẩn để định danh, chống nhầm lẫn xác định hàm lượng thành phần có tác dụng dược lý dược liệu việc làm cần thiết, góp phần vào việc đầy lùi sai phạm trên, mà đảm bảo chất lượng nguồn nguyên liệu, chống sử dụng nhầm lẫn dược liệu giả tràn lan thị trường đồng thời ứng dụng làm thuốc hay sản xuất thuốc [19] Ngày với phát triển mạnh mẽ khoa học kỹ thuật công nghệ, dược liệu tổng hợp ứng dụng rộng rãi sử dụng ngày nhiều Vì vậy, để phát huy tiềm nguồn dược liệu đáp ứng yêu cầu chăm sóc sức khỏe nhân dân tiến hành nghiên cứu chiết xuất dược liệu Lá diễn thành dạng cao bột khô Một số vấn đề xây dựng tiêu chuẩn sở cho dược liệu đồng thời xây dựng tiêu chuẩn sở cho cao dược liệu Lá diễn Đây yếu tố cấp bách nhà nghiên cứu dược liệu Để sử dụng dược liệu làm ngun liệu làm thuốc địi hỏi cần phải xây dựng tiêu chuẩn chất lượng, đồng thời xây dựng phương pháp thử để đánh giá tiêu chuẩn [20] Lắc Sau khoảng 20 phút thêm nước cất vừa đủ 25ml, lắc đều, đem đo độ hấp thụ Chuẩn bị mẫu trắng: thay 1.0ml dung dịch thử 1.0ml nước cất bước lại tiến hành tương tự Tiến hành đo quang Quét phổ hấp thụ dung dịch thử, dung dịch chuẩn Từ kết phổ hấp thụ xác định bước sóng định lượng bước sóng cực đại Thực nghiệm cho thấy cực đại bước sóng 425nm, lựa chọn bước sóng định lượng 425nm Tiến hành đo độ hấp thụ dãy chuẩn bước sóng 425nm xây dựng đường chuẩn quercetin Tiến hành đo độ hấp thụ dung dịch thử bước sóng 425nm, dựa vào phương trình đường chuẩn tính nồng độ flavonoid tồn phần có mẫu tính theo quercetin Cách tính kết Đo độ hấp thụ dãy chuẩn từ xây dựng đường chuẩn quercetin Do độ hấp thụ mẫu chuẩn Xác định hàm lượng flavonoid tồn phần mẫu dược liệu theo cơng thức sau: Trong đó: F: hàm lượng flavonoid tồn phần có dược liệu (%) : nồng độ flavonoid toàn phần dung dịch thử tính theo quercetin (Giá trị phần mềm máy quang phổ UVVIS Cary 60 tính dựa vào đường chuẩn quercetin độ hấp thụ mẫu thử ) (mg/ml) độ ẩm dược liệu (Độ ẩm diễn xác định cân hàm ẩm là: 8.3 (%) h: m: khối lượng mẫu ban đầu (g) 50×10: độ pha lỗng 20 2.2.2.7 Tro toàn phần Cho - g bột đem thử vào chén sứ chén platin nung cân bì Nung nhiệt độ khơng q 450 oC tới khơng cịn carbon, làm nguội cân Bằng cách mà tro chưa loại hết carbon dùng nước nóng cho vào khối chất than hoá, dùng đũa thuỷ tinh khuấy đều, lọc qua giấy lọc không tro Rửa đũa thuỷ tinh giấy lọc, tập trung nước rửa vào dịch lọc Cho giấy lọc cắn vào chén nung nung đến thu tro màu trắng gần trắng Hợp dịch lọc vào cắn chén nung, đem bốc đến khô nung nhiệt độ không 450 oC đến khối lượng không đổi Tính tỷ lệ phần trăm tro tồn phần theo dược liệu làm khơ khơng khí 2.2.2.8 Kim loại nặng (Pb) Lấy 1.0 g chế phẩm, tiến hành theo phương pháp (Phụ lục 9.4.8, DĐVN IV) Dùng 1.0 ml dung dịch mẫu 10 phần triệu (TT) để chuẩn bị mẫu đối chiếu Lấy lượng chế phẩm thử dẫn chuyên luận (không nhiều g) cho vào chén nung silica Thêm ml dung dịch magnesi sulfat 25% acid sulfuric 1M (TT) Trộn đũa thuỷ tinh nhỏ đun nóng cẩn thận Nếu hỗn hợp chất lỏng làm bay từ từ cách thuỷ đến khơ Đốt để than hố, ý đốt nhiệt độ không cao 800oC, tiếp tục đốt thu cắn màu trắng hay xám nhạt Để nguội, làm ẩm cắn khoảng 0.2 ml dung dịch acid sulfuric 1M (TT), bốc đốt lại, sau để nguội Tồn thời gian đốt khơng nên q Hồ tan cắn, dùng lượng, lượng ml dung dịch acid hydrocloric 2M (TT) Thêm 0.1 ml dung dịch phenolphtalein (TT), cho giọt dung dịch amoniac đậm đặc (TT) đến có màu hồng Để nguội, thêm acid acetic băng (TT) đến màu dung dịch, thêm 0.5 ml Lọc cần, pha loãng dung dịch với nớc thành 20 ml Lấy 12 ml dung dịch thu cho vào ống nghiệm, thêm ml dung dịch đệm acetat pH 3.5, lắc Thêm 1.2 ml dung dịch thioacetamid (TT), lắc để yên phút So sánh màu ống thử với 21 màu ống mẫu chuẩn bị đồng thời điều kiện Màu ống thử không đậm màu ống mẫu Ống mẫu chuẩn bị sau: Lấy thể tích dung dịch chì mẫu 10 phần triệu Pb dẫn chuyên luận, cho vào chén nung silica, thêm ml dung dịch magnesi sulfat 25% acid sulfuric1M (TT), sau tiếp tục xử lý nh cách xử lý mẫu ghi trên, câu: “Trộn đũa thuỷ tinh nhỏ ” đến câu: “Lọc cần, pha loãng dung dịch với nớc thành 20 ml” Lấy ml dung dịch thu từ xử lý chế phẩm thử cho vào ống nghiệm, thêm 10 ml dung dịch thu từ xử lý dung dịch chì mẫu, ml dung dịch đệm acetat pH 3.5 Lắc đều, thêm 1,2 ml dung dịch thioacetamid (TT) L¾c ngay, để yên phút Dung dịch ion chì mẫu có mầu nâu sáng so sánh với dung dịch chuẩn bị điều kiện gồm 10 ml nớc ml dung dịch chế phẩm thử 2.2.2.9 Độ vô khuẩn: thử theo DĐVN IV phụ lục 13.7 Thí nghiệm đượcc tiến hành điều kiện vơ khuẩn Trong làm thí nghiệm, ý không lẫn chất khử khuẩn vào mẫu thử Đem chế phẩm sau hồ lỗng với dung mơi thích hợp lọc qua màng lọc, cắt màng lọc thành miếng nhỏ đem nhúng vào môi trường, ủ môi trường cấy chế phẩm cấy màng lọc thời gian qui định 22 CHƯƠNG 3: KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 3.1 Xây dựng tiêu chuẩn sở dược liệu từ Lá diễn Từ kết nghiên cứu, đề xuất tiêu chuẩn sở dược liệu Lá diễn (Dicliptera chinensis (L.) Ness) trình bày sau: Bộ phận thân tươi hay phơi khô, xay bột Lá diễn (Dicliptera chinensis (L.) Ness) 3.1.1 Mơ tả Hình 3.1: Thân, lá, hoa Lá diễn Cây thảo sống năm hay vài ba năm, cao 30-80cm Thân cành non có cạnh, có lơng tơ, mấu phình to tựa đầu gối Lá mọc đối màu xanh lục, phiến hình trứng thn, dài 2-7cm, rộng 2-4cm, đầu gốc nhọn, mặt có lơng Cụm hoa nhỏ ngọn, bao xung quanh cụm hoa có bắc khơng Đài 5, nhau, dính vào đến ½ Tràng màu tím, hồng hay trắng, ống dài mơi, mơi khía ba thùy nhị hai bao phấn tù Quả nang ngắn có lơng tơ phía đầu Hạt dẹt, hình thấu kính 3.1.2 Vi phẫu Phần gân lá: gân phía lồi, gân lồi nhiều Biểu bì hàng tế bào, hình trứng nhỏ, xếp đặn liên tục, biểu bì mang lông che chở đa bào cấu tạo 3-4 tế bào, xếp thẳng hàng có đầu lơng nhọn, dài, phía gốc ngắn Xếp sát biểu bì mơ dày, thường có 2-3 hàng, tế bào hình trịn, kích thước khơng đều, có thành dày phát triển nhiều góc Mơ mềm tế bào hình đa giác hay 23 hình trịn, thành mỏng có kích thước khơng Gân có cung libe ơm lấy cung gỗ Phần thân: hình trịn xẻ thùy, biểu bì lớp tế bào hình chữ nhật, bên ngồi phủ lớp cutin mỏng, có nhiều lơng che chở Hình 3.2: Hình ảnh vi phẫu thân Lá diễn Ghi chú: biểu bì Mơ dày Trụ bì hóa mơ cứng Mơ mềm Libe cấp Tầng sinh gỗ Gỗ cấp II Mơ mềm ruột Lơng che chở 24 Hình 3.3: Vi phẫu phần Lá diễn 3.1.3 Bột Bột (thân lá) có màu xanh lục, có mùi thơm nhẹ diễn, vị đắng Quan sát kính hiển vi thấy đặc điểm: Mảnh mơ mềm mỏng, tế bào hình đa giác, mảnh mang màu đỏ, nhiều tế bào mơ cứng hình khối, vách dày hóa gỗ nhiều, có tế bào đứng riêng lẻ tụ tập thành đám, lông che chở đa bào, mảnh mạch, mảnh biểu bì mang lơng che chở, mảnh biểu bì mang lỗ khí, lỗ khí, sượi đứng riêng lẻ xếp thành bó, thành dày, mảnh bần có tế bào hình đa giác, màu nâu đen 25 Hình 3.4: Đặc điểm vi phẫu bột dược liệu từ Lá diễn Ghi chú: Mảng biểu bì mang lỗ khí Lơng che chở đa bào Mảng mạch Mảng mơ mềm Biểu bì Tế bào mơ cứng Biểu bì chứa lơng che chở đơn bào Mảnh mạch xoắn 3.1.4 Mất khối lượng làm khơ: khơng q 12% 3.1.5 Tro tồn phần: không 10 % 3.1.6 Kim loại nặng: không 10ppm 3.1.7 Tỷ lệ vụn nát: không % 26 3.1.8 Định tính: Có phản ứng đặc trưng chất dược liệu, đặc biệt làm phản ứng định tính Flavonoid Nhóm chất Flavonoid Bảng 3.1: Bảng kết định tính chất có dược liệu từ Lá dễn 3.1.9 Định lượng: Hàm lượng Flavonoid khơng 0.20 % tính theo dược liệu khô kiệt 3.2 Xây dựng tiêu chuẩn sở cao khô dược liệu từ Lá diễn Từ nghiên cứu dựa theo DĐVN IV đề xuất tiêu chuẩn sở cao khô phân đoạn dược liệu với định hướng làm nguyên liệu thuốc nhỏ mắt từ Lá diễn sau: 3.2.1 Tính chất: Khối bột khô tơi, đồng nhất, màu nâu đỏ, dễ hút ẩm có mùi thơm đặc trưng dược liệu, khơng có mùi nấm mốc, vị đắng 3.2.2 Mất khối lượng làm khô: không % 3.2.3 Độ mịn: Lấy 20g chế phẩm, khơng 95% phần tử qua rây số 180 không 40% qua rây số 125 3.2.4 Độ PH: cao khô dược liệu dùng làm nguyên liệu thuốc nhỏ mắt nên sau pha xong thuốc nhỏ mắt phải đạt PH từ 7-7.6 3.2.5 Định tính: Chế phẩm phải thể phép thử định tính Flavonoid từ Lá diễn 3.2.6 Định lượng Mẫu thử A= 0.667 (Abs) 27 Hình 3.5: Đường chuẩn phụ thuộc độ hấp thụ A theo nồng độ quercetin Từ phương trình đường chuẩn ta tính Cx= 42.45 (µg/ml) Hàm lượng Flavonoid toàn phần cao dược liệu là: F(%)= 5.78 % 3.2.7 Tro tồn phần: khơng q 5% 3.2.8 Kim loại nặng: không 10 ppm 3.2.9 Độ vô khuẩn: Tuyệt đối vô khuẩn với thuốc tiêm 28 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ Kết luận - Đã xây dựng tiêu chuẩn sở dược liệu diễn sau: + Mô tả: Cây thảo cao 30-80cm Thân cành non có cạnh, có lơng tơ Lá mọc đối, phiến hình trứng thn dài Cụm hoa nhỏ Quả nang ngắn có lơng tơ phía đầu Hạt dẹt, hình thấu kính ❖ Vi phẫu: Phần gân lá: gân phía lồi, gân lồi nhiều Phần thân: hình trịn xẻ thùy có nhiều lơng che chở + Bột: Màu xanh lục, có mùi thơm nhẹ diễn, vị đắng Quan sát kính hiển vi thấy đặc điểm: Mảnh mơ mềm mỏng, tế bào hình đa giác, lơng che chở đa bào, mảnh mạch, lỗ khí, mảnh bần… + Mất khối lượng làm khô: không 12% + Tro tồn phần: khơng q 10 % + Kim loại nặng: không 10ppm + Tỷ lệ vụn nát: khơng q % + Định tính: Có phản ứng đặc trưng Flavonoid + Định lượng: Hàm lượng Flavonoid khơng 0.20 % tính theo dược liệu khô kiệt + Đã xây dựng tiêu chuẩn sở cao khô phân đoạn từ dược liệu diễn sau: - Tính chất: Bột khơ tơi, đồng nhất, màu nâu đỏ, dễ hút ẩm, có mùi thơm đặc trưng dược liệu, vị đắng + Mất khối lượng làm khô: không % + Độ mịn: 180/125 khơng 95% phần tử qua rây số 180 không 40% qua rây số 125 + Độ pH: PH từ 7-7.6 + Định tính: Thể phép thử định tính Flavonoid từ Lá diễn + Định lượng: Hàm lượng Flavonoid tồn phần cao khơng 5.0 % + Tro tồn phần: khơng q 5% + Kim loại nặng: không 10 ppm + Độ vô khuẩn: Tuyệt đối vô khuẩn với thuốc tiêm + 29 ❖ Kiến nghị Tiếp tục nghiên cứu nâng cao tiêu chuẩn dược liệu cao dược liệu trên, cập nhật sửa đổi để phù hợp với phát triển khoa học kỹ thuật - Vận dụng tiêu chuẩn xây dựng kiểm soát chất lượng dược liệu, cao dược liệu - 30 TÀI LIỆU THAM KHẢO Tiếng việt 10 11 12 13 14 15 16 Bộ môn dược liệu (2010), Thực tập dược liệu, Trường đại học Dược Hà Nội Bộ y tế (2007), Dược liệu học, Tập 2, Nhà xuất y học, Hà Nội, tr.163-170 Bộ y tế (2007), Kiểm nghiệm dược phẩm, Nhà xuất y học, Hà Nội, tr.68-79 Bộ y tế (2009), Dược điển Việt Nam IV, Nhà xuất y học, Hà Nội, tr.857-862 Bộ y tế (2013), Sổ tay đăng kí thuốc (ban hành kèm theo định số 07/QD – QLD ngày 11/1 việc ban hành sổ tay hướng dẫn đăng kí thuốc), phục lục BYT (2010 ), Thông tư số 09/2010/TT Bộ Y tế Hướng dẫn việc quản lý chất lượng thuốc Bộ môn dược liệu (2004), Bài giảng dược liệu, Tập 1, Trung tâm thông tin - Thư viện Đại học Dược Hà Nội, Hà Nội Võ Văn Chi (2003), Từ điển thực vật thông dụng, NXB Khoa học kỹ thuật, tr.957 Đỗ Huy Bích, Đặng Quang Chung, Bùi Xuân Chương, Nguyễn Thượng Dong, Đỗ Trung Đàm, Phạm Văn Hiển, Vũ Ngọc Lộ, Phạm Duy Mai, Phạm Kim Mãn, Đoàn Thị Thu, Nguyễn Tập, Trần Toàn (2011), Cây thuốc động vật làm thuốc Việt Nam, Tập III, Nhà xuất Khoa học kỹ thuật, Hà Nội, tr.479-480 Đỗ Trung Đàm (2003), Sử dụng Microsoft Excel thống kê sinh học, Nxb Y học, Hà Nội, tr.15-24 Nguyễn Trọng Điệp, Nguyễn Minh Chính, Nguyễn Tùng Linh (2013), "Nghiên cứu chiết xuất flavonoid toàn phần từ Cúc hoa vàng (Chrysanthemum indicum L", Tạp chí y – dược học quân sự(9), tr 3845 Phạm Hoàng Hộ (1999), Cây cỏ Việt Nam, Tập 3, Nhà xuất trẻ, tr.73-74 Phạm Thanh Kỳ (2007), Dược liệu Tập 2, NXB Y học Giang Thị Sơn Phạm Hồng Thủy (1998), "Nghiên cứu thành phần hóa học diễn", Tạp chí dược học Lương y Huyên Thảo (2013), " Lá diễn nhuộm xôi vị thuốc chữa bệnh", Thuốc vườn nhà Ngô Vân Thu Trần Hùng (2011), Dược liệu tập 1, NXB Y học, Hà Nội 31 17 18 19 20 21 Nguyễn Hữu Lạc Thủy cộng (2011), " Định lượng flavonoid toàn phần trinh nữ hoàng cung" Nguyễn Văn Thành, Nguyễn Hoàng Thanh Đinh Hoa Lĩnh (2004), "Luận văn Nghiên cứu số thuốc, thuốc dân gian cộng đồng dân tộc thiểu số buôn Đrăng Phôk –vùng lõi vườn quốc gia Yokđôn –huyện Buôn Đôn –tỉnh Đaklak" Nông Thị Anh Thư, Đồng Văn Thành Trần Thị Phương Linh, "Nghiên cứu đặc điểm thực vật, thành phần hóa học khả nhuộm màu cẩm thu hái Thái Nguyên.", Khoa học công nghệ, tr 325 – 329 Phan Cảnh Trình (2014-2015), Xây dựng tiêu chuẩn Dược liệu Thuốc dịi, Đại học Y dược thành phố Hồ Chí Minh Viện Dược liệu (2006), Phương pháp nghiên cứu tác dụng dược lý thuốc từ thảo dược, NXB Khoa học kỹ thuật, tr.139-141 Tiếng anh 22 23 24 25 26 27 28 Ahmad Bushra, Khan MR, Shah NA, Khan RA.BMC (2013), "In vitro antioxidant potential of dicliptera roxburghiana", BMC complementary and alternative medicine 13(1), tr 140 Alessandra Braca cộng (2003), "Antioxidant and free radical scavenging activity of flavonol glycosides from different Aconitum species", Journal of ethnopharmacology 86(1), tr 63-67 Gao YT, XW Yang TM Ai (2006), "Studies on the chemical constituents in herbs of ethanolic extract from herbs of Dicliptera chinensis", Zhongguo Zhong yao za zhi= Zhongguo zhongyao zazhi= China journal of Chinese materia medica 31(12), tr 985-987 Jayanta kumar maji Shukla v.J (2012), "pharmacognosy and phytochemical study of trikarshika churna: a popular polyherbal antioxidant", nternational research journal of pharmacy, Jayanta kumar maji et al IRJP tr 183-189 Liviual Marghitas, Dezmirean, daniel, ARGHITAS, (2009), "Validated method for estimation of total flavonoids in Romanian propolis", Bulletin of University of Agricultural Sciences and Veterinary Medicine Cluj-Napoca Animal Science and Biotechnologies 64(1-2) Prasad Satyendra K and etal (2012), "Physicochemical standardization and evaluation of in-vitro antioxidant activity of Aconitum heterophyllum Wall", Asian Pacific Journal of Tropical Biomedicine 2(2), tr S526-S531 Teja Molakalapalli Lakshmi, M Chaitanya A Ravi Kumar (2014), "Pharmacognosy and study of trikarshika churna a popular polyherbal 32 29 30 antioxidant", Indian Journal of Research in Pharmacy and Biotechnology 2(4), tr 1345 Zhang Kefeng, Ya Gao, Mingli Zhong, Yourui Xu, etal (2016), "Hepatoprotective effects of Dicliptera chinensis polysaccharides on dimethylnitrosamine-induced hepatic fibrosis rats and its underlying mechanism", Journal of ethnopharmacology 179, tr 38-44 Zhang X, Zhang J, Jia L, Xiao S (2015), "Dicliptera Chinensis polysaccharides target TGF-β/Smad pathway and inhibit stellate cells activation in rats with dimethylnitrosamine-induced hepatic fibrosis", Cellular and molecular biology (Noisy-le-Grand, France) 62(1), tr 99103 33 Phụ lục 1: Phiếu giám định tên khoa học 34 ... Nghiên cứu xây dựng tiêu chuẩn dược liệu cao dược liệu từ Lá diễn? ?? với mục tiêu sau: Xây dựng tiêu chuẩn sở dược liệu từ Lá diễn Xây dựng tiêu chuẩn sở cao khô dược liệu từ Lá diễn CHƯƠNG 1:... dược liệu việc xây dựng tiêu chuẩn sở cho dược liệu sản phẩm từ dược liệu hạn chế số loại dược liệu cịn chưa có tiêu chuẩn cụ thể [5,6] 1.1.1 Cách thức xây dựng tiêu chuẩn Tiêu chuẩn sở xây dựng. .. liệu Lá diễn thành dạng cao bột khơ Một số vấn đề xây dựng tiêu chuẩn sở cho dược liệu đồng thời xây dựng tiêu chuẩn sở cho cao dược liệu Lá diễn Đây yếu tố cấp bách nhà nghiên cứu dược liệu