Chẩn đoán trước sinh bệnh thalassemia bằng kỹ thuật lai phân tử ngược trên màng lai

α- và β- thalassemia là các rối loạn di truyền đơn gen phổ biến nhất trên toàn thế giới cũng như tại Việt Nam. Nghiên cứu được tiến hành trên 88 trường hợp thai của các cặp vợ chồng có nguy cơ cao đẻ con mắc Thalassemia.

SẢN KHOA TỔNG – SƠQUAN SINH HOÀNG THỊ NGỌC LAN, NGUYỄN THỊ VÂN ANH, LÊ PHƯƠNG THẢO, NGÔ THỊ TUYẾT NHUNG, ĐỒN THỊ HUYỀN CHẨN ĐỐN TRƯỚC SINH BỆNH THALASSEMIA BẰNG KỸ THUẬT LAI PHÂN TỬ NGƯỢC TRÊN MÀNG LAI Hoàng Thị Ngọc Lan, Nguyễn Thị Vân Anh, Lê Phương Thảo, Ngơ Thị Tuyết Nhung, Đồn Thị Huyền Bệnh viện Phụ Sản Trung ương Từ khóa: thalassemia, kỹ thuật lai phân tử ngược, đột biến gen globin, chẩn đoán trước sinh Keywords: thalassemia, reverse hybridization, prenatal diagnosis Tóm tắt α- β- thalassemia rối loạn di truyền đơn gen phổ biến toàn giới Việt Nam Nghiên cứu tiến hành 88 trường hợp thai cặp vợ chồng có nguy cao đẻ mắc Thalassemia Các thai phụ chọc ối xét nghiệm phân tử bệnh thalasemia nhằm phát dạng đột biến gen thalassemia tế bào ối kỹ thuật lai phân tử ngược (Reverse hybridization) Trung tâm Chẩn đoán trước sinh, Bệnh viện Phụ Sản Trung ương năm 2017 Kết cho thấy 64/88 trường hợp mang gen đột biến chiếm 72,7% Trong đó, có 51/64 thai bị đột biến α – thalassemia (79,7%), 8/64 thai bị đột biến β – thalassemia (12,5%) 5/64 mang đồng thời đột biến α ( SEA)và β – thalassemia (dị hợp tử CD41/42 dị hợp tử CD 17) CD 26 (7,8%) Đột biến ( SEA) gen α globulin chiếm tỉ lệ 100% thai bị đột biến α – thalassemia Trong đó, 47% mang kiểu gen bệnh α – thalassemia dạng đồng hợp tử Chẩn đoán trước sinh kỹ thuật lai phân tử ngược giúp đưa định thai nhi tư vấn di truyền trước hôn nhân trường hợp phát dị hợp tử bệnh thalasemia Từ khóa: thalassemia, kỹ thuật lai phân tử ngược, đột biến gen globin, chẩn đoán trước sinh Abstract Tập 16, số 01 Tháng 05-2018 PRENATAL DIAGNOSIS OF THALASSEMIA BY REVERSE HYBRIDIZATION 42 Tác giả liên hệ (Corresponding author): Hoàng Thị Ngọc Lan, email: hoangthingoclan@hmu.edu.vn Ngày nhận (received): 02/04/2018 Ngày phản biện đánh giá báo (revised): 02/04/2018 Ngày báo chấp nhận đăng (accepted): 27/04/2018 The alpha and beta thalassemia are the most common inherited single-gene disorders in Vietnam Objective: to detect the gene mutations that cause thalassemia in amniotic cells by Reverse hybridization techniques Method: For 88 pregnancies of high-risk couples with Thalassemia The fetuses were prenatal diagnosed the mutation alleles by Reverse hybridization in Prenatal Diagnosis Center at National Hospital of Obstetrics and Gynecology in 2017 1 Đặt vấn đề phân tử ngược màng lai (Reverse hybridization) cải tiến sở kỹ thuật lai phân tử phát lúc nhiều đột biến khác gen Tại Việt Nam, kỹ thuật áp dụng, chưa sử dụng rộng rãi, tiến hành nghiên cứu:“Sàng lọc trước sinh bệnh Thalassemia kỹ thuật lai phân tử ngược” nhằm phát dạng đột biến gen gây bệnh Thalassemia tế bào ối kỹ thuật lai phân tử ngược giúp chẩn đoán trước sinh tư vấn hướng di truyền cho bệnh thalassemia Đối tượng phương pháp 2.1 Đối tượng 88 trường hợp thai nhi cặp vợ chồng có nguy cao sinh mắc Thalassemia (đã chẩn đốn có mang gen đột biến α-/β- có tiền sử sinh con/mang thai chẩn đoán mắc bệnh Thalassemia) chọc hút ối chẩn đoán trước sinh bệnh thalassemia Trung tâm Chẩn đoán trước sinh, Bệnh viện Phụ Sản Trung ương Thời gian nghiên cứu: từ ngày 1/1/2017 đến ngày 31/12/2017 2.2 Phương pháp Thiết kế nghiên cứu Thiết kế ghiên cứu mơ tả cắt ngang Quy trình kỹ thuật nghiên cứu Nghiên cứu sử dụng Kit: Thalassemia Gene Diagnostic Kit (Code: HBGA-THAL a5-b16) xuất xứ Hồng Kơng có chứng CE/IVD Quá trình thực trải qua bước sau: Tập 16, số 01 Tháng 05-2018 Bệnh Thalassemia bệnh di truyền gen lặn nhiễm sắc thể thường, nguyên nhân đột biến gen gây giảm không tổng hợp protein globin tham gia cấu tạo Hb, dẫn đến thiếu hụt Hb hồng cầu [1] Tại Việt Nam (2015), có khoảng 10 triệu người mang gen bệnh bị bệnh Thalassemia, khoảng 20000 bệnh nhân cần điều trị năm có khoảng 2000 trẻ sinh bị bệnh [2] Bệnh Hb Bart’s (thể nặng bệnh α– thalassemia) thường gây phù rau thai, thai chết lưu tử cung chết sớm sau sinh Bệnh nhân β – thalassemia thể nặng có đồng hợp tử dị hợp tử kép đột biến khác nhau, thường có biểu thiếu máu nặng dần sau - tháng tuổi Phương pháp điều trị chủ yếu bệnh Thalassemia truyền máu, thải sắt, cắt lách điều trị biến chứng [1],[3] Mặc dù hậu bệnh nặng nề giới, nhà khoa học chưa tìm phương pháp điều trị khỏi cho người mắc bệnh Do đó, xét nghiệm, tư vấn di truyền chẩn đoán trước sinh đóng vai trị quan trọng việc đưa định cá nhân chun mơn phịng ngừa, điều trị bệnh Ở Việt Nam, sàng lọc chẩn đoán bệnh Thalassemia trước sinh thường sử dụng phương pháp multiplex PCR, ARMS-PCR giải trình tự vùng gen globin Tuy nhiên, phương pháp phát thấy đột biến đơn lẻ Kỹ thuật lai TẠP CHÍ PHỤ SẢN - 16(01), 42 - 46, 2018 Results: There were 64/88 fetuses having mutation (72,7%) Among those, 51 cases had α – thalassemia mutations (79,7%), fetuses were β – thalassemia mutations (12,5%) and fetuses inherited both α ( SEA) and β – thalassemia or α- and CD 26 (7,8%) The ( SEA) alleles were found on 51 out of 51 fetuses having α – thalassemia mutations, 24/51(47%) of these were homozygous genotype Prenatal diagnosis by Reverse Hybridization could be able to help the couple in making the decisions for the fetus Prenatal diagnosis of thalassemia is useful for genetic counseling Keywords: thalassemia, reverse hybridization, prenatal diagnosis 43 Tập 16, số 01 Tháng 05-2018 SẢN KHOA TỔNG – SƠQUAN SINH HOÀNG THỊ NGỌC LAN, NGUYỄN THỊ VÂN ANH, LÊ PHƯƠNG THẢO, NGƠ THỊ TUYẾT NHUNG, ĐỒN THỊ HUYỀN 44 Bước 1: Tách chiết ADN + ADN tách chiết từ mẫu dịch ối phương pháp tách cột Kit QIAGEN (Đức) + Kiểm tra nồng độ độ tinh ADN tách chiết phương pháp đo quang máy NanoDrop: Nồng độ ADN 300-380ng/ ml, đánh giá độ tinh tỉ lệ A(260nm)/ A(280nm) ≥ 1,8 Bước 2: Thực phản ứng PCR Rã đông α β Thalassemia PCR mix nhiệt độ phòng Ly tâm α β Thalassemia DNA Taq Polymer α β Thalassemia PCR mix 8000rpm/phút phút Sau cho vào ống tube PCR Quay nhẹ Chia hỗn hợp vào ống PCR Bổ sung μl DNA vào ống α-Thalassemia μl DNA mẫu vào ống β-Thalassemia, lắc nhẹ Đậy nắp, ly tâm nhẹ (mẫu lắng xuống đáy ống) chạy chương trình PCR Bước 3: Tiến hành lai sản phẩm PCR màng lai HybriMem (MEM-THAL) + Biến tính sản phẩm α β- Thalassemia PCR 950C phút Làm ấm dung dịch Hybridization Solution WB1 450C bể ổn nhiệt Bổ sung 800μl dung dịch Hybridization Solution làm ấm 420C, ủ phút Sau bổ sung lên tất sản phẩm PCR màng lai, ủ 30 phút Sau rửa màng với dung dịch WB1 lần Đưa nhiệt độ máy 250C + Bổ sung 500μl dung dịch Blocking Solution 300C ủ phút Sau bổ sung 500μl Enzyme Conjugate 250C, ủ phút Rửa màng với 800μl dung dịch Solution A Đưa nhiệt độ máy lên 360C + Bổ sung 500μl dung dịch NBT/BCIP (từ giếng cuối đến giếng đầu), ủ phút, đóng nắp Rửa màng với 800μl dung dịch Hybridization Solution, sau rửa với 2ml DI water Bước 4: Phân tích kết + Quan sát kết màng lai HybriMem( MEM-THAL) xác định loại đột biến sau: đột biến α: đột biến đoạn: SEA,-α3.7 -α4.2, đột biến điểm: CS, QS; 16 đột biến β: -28(A-G), -29(A-G), Cap(-AAAC), Int(T-G), CD14/15(+G), CD17(A-T), CD27/28(+C), βE(G-A), 1(-C), CD41/42(-TTCT), CD43(G-T), CD71/72(+A), IVS-I-1(G-T), IVS-I-1(G-A), IVS-I5(G-C), IVS-I-654(C-T) Kết 3.1 Tỉ lệ phát đột biến gen gây bệnh Thalassemia phương pháp Reverse hybridization Bảng Tỉ lệ phát đột biến Kết sàng lọc Không phát đột biến Phát có đột biến Bảng Tỉ lệ phát đột biến Tổng số Kết sàng lọc Từhiện bảng Không phát đột biến1 Tần số (n) Tần số (n) Tỉ lệ (%) 24 27,3 64 72,7 88 100 Tỉ lệ (%) cho thấy, tổng số2488 mẫu27,3 Phát cóối độtđược biến 64 dịch tiến hành lai phân tử ngược, phát72,7 Tổng số 88 100 64 mẫu có mang đột biến (một nhiều Từđột bảng biến) cho thấy,chiếm tổngtỉsố lệ 88 mẫu dịch ối tiến hành lai phân tử ngược, phát 72,7 % có 27,3% trường 64 mẫu có mang đột biến (một nhiều đột biến) chiếm tỉ lệ 72,7 % có 27,3% hợp khơng phát có đột biến trường hợp khơng phát có đột biến Hình Tỉ lệ phátHình hiện1.độtTỉbiến α vàhiện β- Thalassemia lệ phát đột biến α β- Thalassemia Trong 64 mẫu mang đột biến, có 51 mẫu đột biến α- Thalassemia (79,7%), trường Trong mẫu (12,5%) mangvàđột biến, mẫu làlà đột hợp đột biến β-64 Thalassemia kiểu hỗn hợp αcó 51 β- Thalassemia biến Thalassemia trường hợpα(7,8%) (79,7%), trường hợp đột α Tấtβcả 54 mẫu cho kết đột biến αThalassemia thuộc kiểu đột biến đoạn lớn Thalassemia trường hợp (7,8%) dạng Đơng Nam Á -SEA (100%) Trong đó, có 24/51 (47%) mang kiểu gen SEA 3.2 Kiểu gen mẫu chẩn dạng đồng hợp tử 27/51(53%) SEA dị hợp tử ( SEA) đoán mang đột biến α – thalassemia 3.3 Kiểu gen mẫu chẩn đoán mang đột biến β – thalassemia Tất 54 mẫu cho kết đột biến αTrong mẫu bệnh phẩm chẩn đốn thể β – thalassemia, có 7/8 mẫu ối mang kiểu Thalassemia thuộc kiểu đột biến đoạn gen dị hợp tử (87,5%) Có mẫu mang đột biến dạng dị hợp tử kép, chiếm 12,5% (mắc lớn dạng Đông Nam Á SEA (100%) Trong bệnh β – thalassemia) đó, cócủa24/51 mang kiểu gen SEA 3.4 Kiểu gen mẫu mang(47%) đột biến hỗn hợp dạng vàdị27/51(53%) dị β hợp Trong mẫu đồng mẫuhợp cótử đột biến hợp SEA, kết hợp với SEA đột biến (dị kết hợp với dị hợp tử CD 26 (HbE) hợp tử CD41/42 dị hợp tử CD 17) tử ( SEA) 3.3 Kiểu gen mẫu chẩn đoán mang đột biến β – thalassemia Trong mẫu bệnh phẩm chẩn đoán thể β – thalassemia, có 7/8 mẫu ối mang kiểu gen dị hợp tử (87,5%) Có mẫu mang đột biến dạng dị hợp tử kép, chiếm 12,5% (mắc bệnh β – thalassemia) 3.4 Kiểu gen mẫu mang đột biến hỗn hợp Trong mẫu mẫu có đột biến dị hợp SEA, kết hợp với đột biến β (dị hợp tử CD41/42 dị hợp tử CD 17) kết hợp với dị hợp tử CD 26 (HbE) 3.2 Kiểu gen mẫu chẩn(12,5%) đoán mang độtvà biếnkiểu α – thalassemia biến β-củaThalassemia hỗn hợp Tập 16, số 01 Tháng 05-2018 Bệnh Thalassemia bệnh di truyền gen lặn nhiễm sắc thể thường, bệnh di truyền qua nhiều hệ nên việc xác định xác kiểu đột biến kiểu gen cho thai nhi bước quan trọng sở khoa học phát người lành mang gen bệnh thai nhi Kết nghiên cứu cho thấy 88 mẫu dịch ối thực xét nghiệm có tới 64 trường hợp phát có đột biến gen liên quan đến Thalassemia, chiếm 72,7% (Bảng 1) Tỉ lệ tương đồng với nghiên cứu Ngô Diễm Ngọc (2015) Đặng Thị Hồng Vân (2016) với tỉ lệ phát đột biến gen mẫu ối thai phụ định xét nghiệm 73,6% 75,7% [4],[5] Tỉ lệ phát đột biến nghiên cứu đạt mức cao, nghiên cứu thực trường hợp thai có nguy cao mắc bệnh Thalassemia truyền từ bố mẹ, cụ thể nghiên cứu là: thai phụ chồng chẩn đốn có mang gen đột biến α-/β; có tiền sử sinh con/mang thai chẩn đoán Thalassemia; thai phụ có tiền sử mang thai bị phù thai nhiều lần; theo dõi mang gen Thalassemia qua sàng lọc xét nghiệm công thức máu, điện di huyết sắc tố Với tỉ lệ phát đột biến nhóm có nguy tương đối lớn vậy, việc sàng lọc cho tất thai phụ cần thiết Vì sở để tiến hành chẩn đốn cho thai nhi Trong nhóm phát đột biến, thấy tỉ lệ loại đột biến bao gồm: α – thalassemia, β – thalassemia hỗn hợp hai thể 79,7%, 12,5% 7,8% (Hình 1) Sự chênh lệch tỉ lệ loại đột biến α – thalassemia loại đột biến β – thalassemia nghiên cứu cao so với kết nghiên cứu Nguyễn Khắc Hân Hoan (2011) Đặng Thị Hồng Vân (2016) Điều giải thích đa số cặp vợ chồng tham gia thực xét nghiệm chẩn đoán mang gen đột biến bệnh α – thalassemia, phù hợp với mơ hình dịch tễ khu vực Đơng Nam Á có tỉ lệ mắc α – thalassemia cao [5],[6] Mặt khác, đột biến gen β – thalassemia có tỉ lệ cao kiểu hình người lành mang bệnh khơng có dấu hiệu bất thường siêu âm nên bị bỏ sót việc gợi ý tư vấn đến thực chọc ối xét nghiệm Ngược lại, đột biến gen TẠP CHÍ PHỤ SẢN - 16(01), 42 - 46, 2018 Bàn luận α – thalassemia thường có tỉ lệ người mang gen có triệu chứng tiền sử phù thai/ sảy thai cao hơn, hội tham gia vào chương trình chẩn đốn đối tượng lớn Kết phát đột biến α – thalassemia nghiên cứu tương đồng với nghiên cứu Karnpean R cộng Thái Lan năm 2009 [7] Nghiên cứu cho thấy tỉ lệ nhóm mang đồng thời đột biến 5/64 (7,8%) Kết tương đồng với nghiên cứu Nguyễn Khắc Hân Hoan (2011) thực 290 thai nhi với tỉ lệ 6,9% mang đồng thời loại đột biến Các trường hợp xảy người cha và/hoặc mẹ người mang hai đột biến di truyền cho con, đối tượng cha mẹ thường chiếm tỉ lệ ít, nhiên chủ yếu gen đột biến người thường mang thể nhẹ hai bệnh Cụ thể hơn, nhóm mang đột biến α – thalassemia, kết 100% mẫu dịch ối chẩn đoán bệnh α – thalassemia mang đột biến dạng ( SEA), bao gồm đồng hợp dị hợp Tỷ lệ cao so với nghiên cứu Ngô Diễm Ngọc cộng (2015) 84,2% [4] Điều lý giải nghiên cứu Ngô Diễm Ngọc tiến hành cỡ mẫu lớn hơn, xác suất gặp loại allen đột biến khác cao Và nghiên cứu chúng tơi, thai phụ và/hoặc chồng chẩn đốn mang gen α- thalassemia, hầu hết mang đoạn gen đột biến dạng ( SEA) Tuy nhiên, nghiên cứu tỷ lệ đột biến dạng ( SEA) cao Giải thích dựa nghiên cứu trước thống kê có đến 60 triệu người thê giới mang kiểu gen đồng hợp ( SEA) tập trung chủ yếu khu vực Đông Nam Á, 90% kiểu gen thường gặp có chứa đoạn gen ( SEA) [1],[5],[8] Nghiên cứu phát 54 mẫu cho kết đột biến α- Thalassemia có gần nửa kiểu gen bệnh α – thalassemia thể đồng hợp tử ( SEA/ SEA) (47%) Kết cao so với nghiên cứu Ko T.M cộng với tỷ lệ 39% thể đồng hợp tử thực Đài Loan (1992) Sự khác biệt giải thích khác đặc điểm dịch tễ nhóm đối tượng nghiên cứu phương pháp chẩn đoán hai nghiên cứu [8] Đột biến gen (HbH) dẫn đến trẻ có biểu thiếu máu mức độ từ trung bình đến nặng trường hợp đột biến gen (Hb Bart’s) gây thai lưu trẻ tử vong 45 SẢN KHOA TỔNG – SƠQUAN SINH HOÀNG THỊ NGỌC LAN, NGUYỄN THỊ VÂN ANH, LÊ PHƯƠNG THẢO, NGƠ THỊ TUYẾT NHUNG, ĐỒN THỊ HUYỀN sau sinh Sản phụ bị cao huyết áp có nhiều nguy mắc tai biến sản khoa sinh Với tỉ lệ phát thể bệnh nặng trung bình cao, điều củng cố ý nghĩa phương pháp chẩn đoán trước sinh, giúp đưa lời khuyên di truyền sớm cho bệnh nhân, đặc biệt trường hợp thai lớn, mà Việt Nam phép đình thai nghén tuổi thai muộn 28 tuần Có 87,5% mẫu dịch ối chẩn đoán mang đột biến bệnh β – thalassemia dạng dị hợp tử (thể nhẹ), có 12,5% mang đột biến dị hợp tử kép (thể nặng) Lý gen đột biến bệnh di truyền theo quy luật alen lặn NST thường, theo lý thuyết, tỉ lệ trường hợp kiểu gen dị hợp tử thường chiếm tỉ lệ cao [1] Kết nghiên cứu tương đồng với kết nghiên cứu lĩnh vực Nguyễn Khắc Hân Hoan (2011) Đặng Thị Hồng Vân (2016) [5],[6] Tuy nhiên, thực tế, cặp vợ chồng người mang gen dị hợp tử lại thường người khơng có triệu chứng biểu lâm sàng, việc họ phát gen bệnh phần lớn có mắc bệnh tình cờ đến khám, thực xét nghiệm phát đột biến Do đó, cần tiến hành sàng lọc bệnh thalassemia cho thai phụ, lấy làm sở cho định chẩn đốn tìm đột biến bố mẹ, cuối phát đột biến thai, từ đưa tư vấn hợp Tập 16, số 01 Tháng 05-2018 Tài liệu tham khảo 46 Cappellini M.-D., Cohen A., Eleftheriou A cộng Genetic Basis and Pathophysiology, Thalassaemia International Federation; 2008 Nguyễn Anh Trí Thalassemia Việt Nam, tương lai, Hội nghị khoa học Thalassemia toàn quốc khu vực Châu Á - Thái Bình Dương 2015 Old J., Harteveld C.L., Traeger-Synodinos J cộng Prevention of Thalassaemias and Other Haemoglobin Disorders: Volume 2: Laboratory Protocols Thalassaemia International Federation, Nicosia, Cyprus; 2012 Ngô Diễm Ngọc, Lý Thị Thanh Hà, Ngô Thị Tuyết Nhung cộng Sàng lọc chẩn đoán trước sinh bệnh Alpha Beta Thalassemia thai phụ nguy cao Bệnh viện Nhi Trung Ương Tạp Chí Y Học Việt Nam; 2015 434, 83–92 lý cho thai phụ gia đình để họ có hướng sử lý phù hợp Với trường hợp thai mang loại đột biến dị hợp α ( SEA) β thalassemia α (-SEA) kết hợp CD 26 trường hợp thai tư vấn tiếp tục thai kỳ (thường khơng có biểu bệnh tan máu) trường hợp xây dựng gia đình khơng nên lấy người mang gen α β thalassemia đứa bị bệnh thalassemia Kết luận Áp dụng kỹ thuật lai phân tử ngược chẩn đoán trước sinh bệnh thalassemia 88 trường hợp thai nhi có nguy cao mắc bệnh, nhận thấy tỉ lệ phát đột biến gen liên quan đến bệnh đạt mức cao 72,7%, có 79,7% đột biến α – thalassemia, 12,5% β – thalassemia 7,8% thể hỗn hợp hai thể Đột biến - -SEA gen α globulin chiếm tỉ lệ 100% thai bị đột biến α – thalassemia Đa số thể bệnh β – thalassemia có kiểu hình gen dị hợp tử - người lành mang gen bệnh (87,5%) Sàng lọc trước sinh bệnh thalassemia có ý nghĩa to lớn việc phát trường hợp thai mang gen bệnh tương lai biểu lâm sàng, để từ người bác sĩ di truyền đưa lời khuyên tiền hôn nhân sớm cho tương lai đứa trẻ hệ sau Đặng Thị Vân Hồng, Lê Xuân Hải, Dương Quốc Chính Nghiên cứu chẩn đoán trước sinh bệnh THLASSEMIA mức độ phù hợp HLA thai nhi với anh/chị ruột bị bệnh Đại học Y Hà Nội; 2016 Nguyễn Khắc Hân Hoan, Phạm Việt Thanh, Trương Đình Kiệt cộng Chẩn đoán trước sinh bệnh Thalassemia 290 trường hợp thai Tạp Chí Nghiên Cứu Y Học; 2011 74(3), 1–7 Karnpean R., Fucharoen G., Fucharoen S cộng Accurate prenatal diagnosis of Hb Bart’s hydrops fetalis in daily practice with a double-check PCR system Acta Haematol; 2009 121(4), 227–233 Ko T.M., Tseng L.H., Hsieh F.J cộng Carrier detection and prenatal diagnosis of alpha-thalassemia of Southeast Asian deletion by polymerase chain reaction Hum Genet; 1992 88(3), 245–248  ... cứu:“Sàng lọc trước sinh bệnh Thalassemia kỹ thuật lai phân tử ngược? ?? nhằm phát dạng đột biến gen gây bệnh Thalassemia tế bào ối kỹ thuật lai phân tử ngược giúp chẩn đoán trước sinh tư vấn hướng... gen α β thalassemia đứa bị bệnh thalassemia Kết luận Áp dụng kỹ thuật lai phân tử ngược chẩn đoán trước sinh bệnh thalassemia 88 trường hợp thai nhi có nguy cao mắc bệnh, nhận thấy tỉ lệ phát... biến α-/β- có tiền sử sinh con/mang thai chẩn đốn mắc bệnh Thalassemia) chọc hút ối chẩn đoán trước sinh bệnh thalassemia Trung tâm Chẩn đoán trước sinh, Bệnh viện Phụ Sản Trung ương Thời gian