Mục tiêu chính của nghiên cứu là xác định các bệnh thường gặp ở phong lan giống Dendrobium và Phalaenopsis. Qua mô tả hình thái, phân loại nấm và vi khuẩn gây bệnh bằng phương pháp hình thái học.
TẠP CHÍ KHOA HỌC CƠNG NGHỆ VÀ MƠI TRƯỜNG 18 KHOA HỌC KỸ THUẬT Phân lập số loại nấm, vi khuẩn gây bệnh phong lan giống Dendnobium giống phalaenopsis VÕ THỊ BÍCH THƯƠNG, NGUYỄN THỊ THÁI HÀ Phân hiệu Trường Đại Học Nông Lâm TP HCM Gia Lai Mục tiêu nghiên cứu xác định bệnh thường gặp phong lan giống Dendrobium Phalaenopsis Qua mơ tả hình thái, phân loại nấm vi khuẩn gây bệnh phương pháp hình thái học Kết cho thấy bệnh vi khuẩn nấm hai giống phong lan Dendrobium Phalaenopsis phân lập chủng nấm (Alternaria sp.,Curvularia sp.,Collectotrichum sp.,Colletotrichum graminicola (Colletotrichum cereale), Colletotrichum gloeosporioides, Fusarium sp.) chủng vi khuẩn (Erwinia sp.) gây nên bệnh khác Đặt vấn đề Hoa Lan (Orchidaceae) biết đến loài hoa quý phái, hoa bậc vua chúa vương giả Ngoài vẻ đẹp rực rỡ màu sắc, quyến rũ hình dáng, hoa lan cịn sử dụng để tách chiết phục vụ cho số ngành cơng nghiệp mỹ phẩm có nhiều giá trị định y học Trong giống phong lan phổ biến Việt Nam nay, Hoàng Lan (Dendrobium) Hồ Điệp (Phalaenopsis) hai giống cho hoa đẹp, phù hợp với thị hiếu người tiêu dùng nên thị trường nước ưa chuộng Hiện nay, Hoàng Lan (Dendrobium) Hồ Điệp (Phalaenopsis) nhân giống theo cơng nghệ ni cấy mơ hồn thiện quy trình chăm sóc vào năm 2008 Tuy nhiên, nguyên nhân làm suy giảm chất lượng tính thẩm mỹ chậu lan thương phẩm vấn đề sâu bệnh hại Cho nên việc trọng đến nghiên cứu bệnh hai giống lan Dendrobium Phalaenopsis cần thiết để đưa giải pháp phịng điều trị bệnh thích hợp Vật liệu phương pháp nghiên cứu 2.1 Nguyên vật liệu môi trường Các mẫu bệnh giống Dendrobium Phalaenopsis (đối với loại bệnh ta thu thập 20 bệnh) thu thập Mẫu sau thu thập giữ túi giấy kín vận chuyển phịng thí nghiệm Mẫu dùng ngày để phân lập Môi trường phân lập nấm gồm có: Mơi trường thạch nước cất (WA), mơi trường thạch đường khoai tây (PDA), môi trường Czapek, môi trường chọn lọc Phytophthora (PSM), môi trường PDA phần tư độ mạnh có bổ sung kháng sinh Mơi trường phân lập vi khuẩn: Môi trường King’s B (KbM) 2.2 Phương pháp nghiên cứu Phân lập nấm gây bệnh Quy trình phân lập nấm gây bệnh: Lau buồng cấy vi sinh cồn êtyl 900 Nhúng dụng cụ (kẹp, kéo dao mổ) cồn êtyl 900 hơ khô lửa đèn cồn Rửa mẫu thân: rửa nước vô trùng để loại bỏ đất, bụi tạp chất khác; rễ: rửa nước vô trùng lần lọ nhỏ Thêm giọt thuốc tẩy vào lọ lần rửa Khử trùng bề mặt mô thân cách dùng giấy mềm (giấy ăn) nhúng cồn êtyl 700 lau mặt cách nhúng nhanh dày vào cồn êtyl 700 giây, rửa lại nước vô trùng để khô giấy thấm vô trùng Đối với rễ: nhúng rễ cồn êtyl 700, rửa nhanh nước vô trùng để khô giấy thấm khử trùng Dùng dụng cụ khử trùng cắt miếng cấy nhỏ (2 x 2mm) từ phần ranh giới mô khỏe mô bệnh (lá), miếng dài - 2mm phần ranh giới mô bệnh mô khỏe (rễ) Sau cấy lên mơi trường nghèo dinh dưỡng thạch nước cất (WA) môi trường chọn lọc, đặt miếng cấy gần mép đĩa Ấn nhẹ miếng cấy để chúng tiếp xúc tốt với mặt thạch Đặt đĩa cấy nhiệt độ khoảng 250C, lí tưởng điều kiện ánh sáng Kiểm tra đĩa cấy ngày, tản nấm phát triển từ miếng cấy, cấy truyền chúng (chú ý cắt mép tản nấm) sang mơi trường PDA hay WA có chứa miếng mô khử trùng Các miếng mô khử trùng kích thích hình thành bào tử, giúp cho việc giám định tác nhân gây bệnh Làm nấm cách cấy đơn bào tử nảy mầm cấy đỉnh sinh trưởng sợi nấm Dùng kéo hấp vô trùng cắt bệnh thành nhiều phần nhỏ, cho vào bình tam giác có chứa 100ml nước cất vô trùng Lắc cho vi khuẩn phân tán từ vết bệnh môi trường nước Chuẩn bị ống nghiệm có đánh số theo thứ tự 10-1, 10-2, 10-3, 10-4, 10-5, 10-6 Dùng micropipet cho vào ống nghiệm 9ml nước cất vô trùng Dùng micropipet hút 1ml dung dịch mẫu bệnh từ bình tam giác cho vào ống nghiệm 10-1, lắc Tiếp tục dùng micropipet hút 1ml dung dịch từ ống nghiệm 10-1 cho vào ống nghiệm 10-2 Làm tương tự đến ống nghiệm 10-6 Dùng micropipet hút 0,1ml dung dịch từ ống nghiệm 10-5 ống nghiệm 10-6 cho vào đĩa petri chứa môi trường KbM WA Dùng que gạt Drigalxki gạt dung dịch bề mặt đĩa petri Đặt đĩa cấy nhiệt độ từ 25 - 300 C - ngày Sau - ngày, chọn khuẩn lạc đặc trưng mọc rời rạc đĩa petri để cấy truyền Đối với loại nấm sản sinh du động bào tử Phytophthora phân lập từ giá thể cách bẫy sau: Cho khoảng 100g giá thể vào cốc nhựa Đổ nước vô trùng vào cốc cho ngập khoảng - 10cm Thả vào cốc mẫu phận tươi trồng mẫn cảm với bệnh, vật liệu bẫy mặt nước Đặt cốc nguyên vị trí - ngày Nấm sau - ngày từ mép vết bệnh phát triển vật liệu bẫy Rửa nước vô trùng khử trùng bề mặt, dùng môi trường chọn lọc để phân lập Đặt đĩa cấy nhiệt độ từ 25 - 300 C ngày Cấy truyền khuẩn lạc đơn mọc từ đĩa cấy sang ống nghiệm chứa môi trường King’s B đổ nghiêng Đây mẫu Phân lập vi khuẩn gây bệnh Quy trình phân lập vi khuẩn gây bệnh: Dùng que cấy đầu tròn khử trùng chạm vào khuẩn lạc chọn cấy lên môi trường King’s B phương pháp cấy ria góc cấy ria liên tục theo hình sau: Lây bệnh nhân tạo Để kiểm tra chủng nấm vi khuẩn phân lập có phải tác nhân gây bệnh, ta tiến hành lây bệnh nhân tạo Có thể tiến hành sau: Dùng que cấy hay kim tiêm tạo viết thương trên thân Gắn miếng thạch nhỏ từ mẫu tác nhân gây bệnh làm vào vị trí vết thương Dùng que cấy hay kim tiêm tạo viết thương trên thân đối chứng không gây bệnh Dùng 19 SỐ 06 NĂM 2019 KHOA HỌC KỸ THUẬT TẠP CHÍ KHOA HỌC CƠNG NGHỆ VÀ MƠI TRƯỜNG 20 KHOA HỌC KỸ THUAÄT nylon bọc vết thương lại Tưới ẩm ngày Kiểm tra so sánh lây bệnh đối chứng So sánh triệu chứng với triệu chứng quan sát mẫu bệnh trước Cũng sử dụng phương pháp phun dịch bào tử lên tưới dịch bào tử vào đất để lây bệnh nhân tạo cho Phân loại chủng vi sinh vật gây bệnh phương pháp hình thái học Các chủng nấm phân lập cấy đĩa thạch PDA Quan sát đặc điểm hình thái, màu sắc, bào tử, thể bình, giá sinh bào tử, định danh chúng khóa phân loại nấm sợi Robert A Samson (1984); Katsuhiko Ando (2002) thư viện hình ảnh nấm Mycology Online Các chủng vi khuẩn cấy môi trường King’s B, quan sát đặc điểm hình thái khuẩn lạc Sau nhuộm Gram, quan sát đặc điểm vi khuẩn kính hiển vi định danh Hình Triệu chứng bệnh cháy đen đầu lan Dendrobium (a) Vết bệnh ban đầu (b) Vết bệnh sau - tuần 3.1.1.2 Nguyên nhân gây bệnh: Phân lập bị bệnh, thu chủng nấm (kí hiệu Den1 Den2) Bảng 1: Đặc điểm khuẩn lạc chuẩn Den mơi trường PDA Hình dạng Có trịn tâm Kích thước Màu sắc hình Phủ kín đĩa Khuẩn lạc màu đồng petri 90 mm xanh lục, tạo 10 ngày vân tròn màu nâu đen mặt đĩa petri Hệ sợi khí sinh Khuẩn lạc chủng Den1 môi trường PDA Màu trắng, dài (ở khuẩn lạc), ngắn (ở rìa khuẩn lạc) Đặc điểm bào tử vơ tính sinh mơi trường PDA: Bào tử mọc từ đỉnh tế bào cành sinh bào tử, bao lớp màng Bào tử non phân cách vách ngăn ngang Bào tử trưởng thành có thêm vách ngăn dọc Khi chín thể nhiều nhân có vách ngang dọc Kết thảo luận 3.1 Các bệnh điều tra giống lan Dendrobium nguyên nhân gây bệnh 3.1.1 Bệnh cháy đen đầu 3.1.1.1 Triệu chứng bệnh Đầu tiên, đỉnh lan Dendrobium xuất đốm tròn màu nâu sậm, Đốm dần lan rộng làm toàn đỉnh chuyển sang màu nâu sậm Vết bệnh kéo dài chiếm 1/4 đến 1/3 chiều dài Ranh giới vết bệnh phần khỏe có màu vàng Sau khoảng - tuần, phần bị bệnh khô lại chuyển sang màu nâu đen chuyển sang đen Ranh giới phần bệnh phần khỏe có màu đen Bệnh gây hỏng đầu làm rụng sớm (a) (b) (a) (b) Hình Bào tử vơ tính Dend1 sinh môi trường PDA (x100) (a) Bào tử non nảy chồi từ đỉnh cành sinh bào tử (b) Bào tử trưởng thành (phía trên), bào tử nảy chồi từ bào tử khác (phía dưới) Định danh: Chủng Den1 xác định Alternaria sp Bảng 2: Đặc điểm khuẩn lạc chuẩn Den mơi tường PDA Hình dạng Kích thước Màu sắc Hình trịn Đường kính đồng tâm khuẩn lạc đạt 6cm sau tuần ni cấy Khuẩn lạc có màu xanh lục, tạo sắc tố xanh đen mặt đáy đĩa petri Hệ sợi khí Khuẩn lạc chủng Den2 sinh môi trường PDA Ở khuẩn lạc mọc cao thành ụ với màu nâu, rìa khuẩn lạc có màu trắng đến xanh lục nhạt Đặc điểm bào tử vô tính sinh mơi trường PDA: Bào tử mọc từ nách từ đỉnh cành sinh bào tử, có lớp màng tế bào Bào tử non trưởng thành có vách ngăn ngang (3 vách ngăn), khơng có vách ngăn dọc Bào tử trưởng thành có hình dạng cong tế bào thứ phát triển to tế bào lại 3.1.2.2 Nguyên nhân gây bệnh Qua phân lập bệnh, thu chủng nấm (kí hiệu Den3) Bảng 3: Đặc điểm khuẩn lạc Den3 mơi trường PDA Hình dạng Kích thước Có dạng Đường kính trịn đồng khuẩn lạc tâm đạt 7,4 cm sau 10 ngày nuôi cấy (a) (b) Hình Bào tử vơ tính Dend2 sinh môi trường PDA (x100) (a) Bào tử non mọc từ nách cành sinh bào tử Màu sắc Hệ sợi khí sinh Tạo sắc tố cam mặt mặt đáy đĩa petri Bông xốp, vùng trung tâm màu xanh lục, vùng rìa khuẩn lạc màu trắng Trên bề mặt khuẩn lạc hình thành hạt trịn màu xanh lục sẫm (đường kính - 2mm) Khuẩn lạc chủng Den3 môi trường PDA Đặc điểm bào tử hình thành mơi trường PDA: Bào tử hình thành từ cành bào tử phân sinh (hình thành sợi nấm) Bào tử dạng hình trụ đầu tù (giống dưa chuột), đơn bào, khơng có vách ngăn, màu sắc (b) Hình dạng bào tử trưởng thành Định danh: Chủng Den2 xác định Curvularia sp 3.1.2 Bệnh đốm vòng (thán thư) 3.1.2.1 Triệu chứng bệnh Ban đầu, xuất chấm nhỏ màu nâu vàng, sau tiếp tục phát triển rộng dần thành đốm trịn có màu nâu đậm Sau thời gian vết bệnh chuyển dần sang màu xám xuất vân tròn đồng tâm Trên vết bệnh xuất chấm lên màu nâu đen, đĩa bào tử Ranh giới vết bệnh phần khỏe thường có màu nâu sẫm đến đen Lá héo rụng nhanh chóng (a) (b) (c) Hình Triệu chứng bệnh đốm vịng (thán thư) lan Dendrobium Hình Bào tử Den3 hình thành mơi trường PDA (x100) Định danh: Chủng Den3 xác định Colletotrichum gloeosporioides 3.1.3 Bệnh thối nâu 3.1.3.1 Triệu chứng bệnh Đầu tiên, xuất đốm nhỏ sũng nước, tròn bầu dục, thường nằm gần Khi bệnh tiến triển, màu đốm thay đổi từ nâu nhạt tới nâu hạt dẻ đậm Đốm lan rộng phía, cuối làm thối tồn Nếu đốm xuất phần gốc làm thối hỏng hệ mạch dẫn, làm héo rụng nhanh (a) Vết bệnh xuất phát từ đỉnh với chấm nâu đen (đĩa bào tử) lên vết bệnh màu xám (b) Vết bệnh xuất phát từ mép với vân tròn rõ (c) Lá bệnh héo khơ nhanh chóng (a) (b) (c) Hình Triệu chứng bệnh thối nâu lan Dendrobium 21 SỐ 06 NĂM 2019 KHOA HỌC KỸ THUẬT TẠP CHÍ KHOA HỌC CƠNG NGHỆ VÀ MƠI TRƯỜNG 22 KHOA HỌC KỸ THUẬT (a) Vết bệnh xuất non làm héo vàng nhanh (b) Vết bệnh già với màu nâu sậm (c) Vết bệnh lan tới đỉnh sinh trưởng làm thối thành đốm lớn màu nâu đen Sau thời gian, trung tâm vết bệnh chuyển dần sang màu vàng xám Tại vết bệnh hình thành vân trịn đồng tâm nhăn nheo Ranh giới vết bệnh phần cịn lại thường có màu đen, xung quanh viền đen phần bị héo vàng, tiếp đến phần khỏe màu xanh 3.1.3.2 Nguyên nhân gây bệnh Qua phân lập mẫu bệnh, thu chủng vi khuẩn (kí hiệu Den4) Bảng 4: Đặc điểm khuẩn lạc vi khuẩn Den4 môi trường King’s B (KbM) Hình dạng Màu sắc Trịn, lồi, nhầy, bóng, mép khuẩn lạc trịn nhẵn Khuẩn lạc có màu vàng nhạt Ở trung tâm có màu sậm so với rìa khuẩn lạc Khuẩn lạc vi khuẩn Den môi trường KbM sau ngày Đặc điểm hình thái vi khuẩn Den4: Bằng phương pháp nhuộm Gram quan sát kính hiển vi quang học bội giác x100 Vi khuẩn Den4 có đặc điểm sau: Den4 vi khuẩn Gram âm (bắt màu hồng nhuộm Gram) Có dạng hình que, nằm riêng lẽ hay dính thành cặp (a) (b) Hình Triệu chứng bệnh đốm vòng lan Phalaenopsis (a) Vết bệnh xuất phát từ mép (b) Vết bệnh xuất phát từ đỉnh 3.2.1.2 Nguyên nhân gây bệnh: Qua phân lập bệnh, thu chủng nấm sợi (kí hiệu Pha1) Bảng 5: Đặc điểm khuẩn lạc Pha1 môi trường PDA Hình dạng Kích thước Màu sắc Hệ sợi khí sinh Trịn đồng tâm, có nếp nhăn chạy dọc từ tâm rìa khuẩn lạc Đường kính đạt 7cm sau tuần ni cấy Khuẩn lạc có màu trắng sữa Mặt đáy đĩa petri có vân trịn xanh lục xen kẽ hồng nhạt Màu trắng hồng, xốp Trên bề mặt khuẩn lạc hình thành nhiều đốm đen kích thước nhỏ, tập trung nhiều vùng trung tâm Khuẩn lạc chủng Pha môi trường PDA Đặc điểm bào tử Pha1 hình thành mơi trường PDA: Bào tử đơn bào, khơng có vách ngăn, màu Hình thoi, cong đầu Mọc cuống bào tử đính hình trụ đơn bào, suốt Hình Vi khuẩn Den4 chụp hính hiển vi quang học (x100) Định danh: Chủng Den4 xác định vi khuẩn Erwinia sp Hình Bào tử Pha1 hình thành mơi trường PDA (x100) 3.2 Các bệnh điều tra giống lan Phalaenopsis nguyên nhân gây bệnh Định danh: Chủng Pha1 xác định Colletotrichum graminicola (Colletotrichum cereale) 3.2.1 Bệnh đốm vòng 3.2.1.1 Triệu chứng bệnh Ban đầu, xuất chấm nhỏ màu nâu, sau tiếp tục phát triển rộng dần 3.2.2 Bệnh héo Fusarium 3.2.2.1 Triệu chứng bệnh Đầu tiên, xuất triệu chứng héo, độ dày vốn có, trở nên mỏng, nhăn nheo, chuyển dần từ màu xanh sang vàng nhạt Cuối cùng, héo hồn tồn, có màu vàng sậm, xoắn lại rụng Bệnh thường xảy trước tiên với già phía lan dần đến phía (a) (b) 3.2.3 Bệnh đốm vàng 3.2.3.1 Triệu chứng bệnh Ban đầu xuất chấm nhỏ màu vàng, lan rộng dần theo hình trịn hình khơng Các chấm lõm xuống so với bề mặt Sau thời gian, đốm bệnh khơ lại chuyển sang màu nâu đen (c) Hình 10 Triệu chứng bệnh héo Fusarium lan Phalaenopsis (a) Triệu chứng bệnh ban đầu (b) Toàn bị héo vàng (c) Lá xoắn lại dễ rụng (lá phía dưới), phía bắt đầu xuất triệu chứng bệnh 3.2.2.2 Nguyên nhân gây bệnh : Qua phân lập bệnh, thu chủng nấm sợi (kí hiệu Pha2) Bảng 6: Đặc điểm khuẩn lạc Pha2 môi trường PDA Hình dạng Kích thước Màu sắc Hệ sợi khí sinh Trịn đồng tâm, phân thành tầng Ở trung tâm, sợi nấm khí sinh mọc cao nhất, thấp vùng rìa khuẩn lạc Đường kính khuẩn lạc đạt 5,2cm sau tuần ni cấy Chất hịa tan tạo nên màu vàng sậm đáy đĩa petri Hệ sợi khí sinh phát triển mạnh có màu trắng vàng nhạt Khuẩn lạc chủng Pha môi trường PDA Đặc điểm bào tử Pha2 môi trường PDA: Quan sát kính hiển vi quang học, phát loại bào tử: Các bào tử lớn có màu trong, dạng hình thoi với đầu cong (1 đầu cong đầu cong nhiều hơn) Bào tử có vách ngăn ngang Các bào tử nhỏ có màu trong, dạng hình thoi trịn đầu, khơng có vách ngăn ngang (a) (b) Hình 12 Triệu chứng bệnh đốm vàng lan Phalaenopsis (a) Triệu chứng bệnh ban đầu (b) Đốm hóa nâu đen 3.2.3.2 Nguyên nhân gây bệnh: Phân lập bệnh, thu chủng nấm sợi (kí hiệu Pha3) Bảng 7: Đặc điểm khuẩn lạc Pha3 mơi trường PDA Hệ sợi khí Khuẩn lạc chủng Pha sinh mơi trường PDA Trịn khơng Đường kính Khuẩn lạc Màu trắng, đạt 8,2 cm có màu ngắn sau tuần trắng, mặt nuôi cấy đĩa petri màu trắng sữa Hình dạng Kích thước Màu sắc Đặc điểm bào tử Pha3 sinh môi trường PDA: Bào tử suốt, hình trụ bo trịn đầu Chiều dài gấp đơi chiều ngang Bào tử đơn bào, có nhân màu sậm Được giải phóng từ bọc bào tử Hình 11 Bào tử chủng nấm Pha2 môi trường PDA (x100) Hình13 Bào tử Pha3 mơi trường PDA (x100) Định loại: Chủng Pha2 xác định Fusarium sp Định danh: Chủng Pha3 xác định Collectotrichum sp 23 SỐ 06 NĂM 2019 KHOA HỌC KỸ THUẬT TẠP CHÍ KHOA HỌC CƠNG NGHỆ VÀ MƠI TRƯỜNG 24 KHOA HỌC KỸ THUẬT 3.2.4 Bệnh thối mềm 3.2.4.1 Triệu chứng bệnh Đầu tiên, xuất vết tròn hình dạng khơng cố định màu xanh nhạt, Các vết lan nhanh, vùng bị bệnh úa mềm, sũng nước có mùi Nếu vết bệnh xuất phát gần gốc lá, làm thối phần gốc lá, gây rụng sớm Nếu xuất phát từ đỉnh lá, làm thối tồn Hình 14 Triệu chứng bệnh thối mềm lan Phalaenopsis 3.2.4.2 Nguyên nhân gây bệnh: Qua phân lập mẫu bệnh, thu chủng vi khuẩn (kí hiệu Pha4) Đặc điểm khuẩn lạc vi khuẩn Pha4 môi trường King’s B (KbM): Hình dạng, có dạng hình trịn, lồi, nhầy, bóng, mép khuẩn lạc trịn nhẵn Màu sắc: khuẩn lạc có màu vàng nhạt Ở trung tâm có màu sậm so với ngồi rìa Đặc điểm hình thái vi khuẩn Pha4: Bằng phương pháp nhuộm Gram quan sát kính hiển vi quang học bội giác x100 Vi khuẩn Pha4 có đặc điểm sau: Pha4 vi khuẩn Gram âm (bắt màu hồng nhuộm Gram) Có dạng hình que, nằm riêng lẽ hay dính thành cặp Định danh: Chủng Pha4 xác định Erwinia sp Kết luận Bệnh vi khuẩn nấm hai giống phong lan Dendrobium Phalaenopsis diễn liên tục năm mức độ khác Trên hai giống lan Dendrobium Phalaenopsis phân lập chủng nấm (Alternaria sp., Curvularia sp., Collectotrichum sp., Colletotrichum graminicola (Colletotrichum cereale), Colletotrichum gloeosporioides, Fusarium sp.) chủng vi khuẩn (Erwinia sp.) gây nên bệnh khác nhau.Vi khuẩn Erwinia sp nguyên nhân gây bệnh thối hai giống lan Dendrobium Phalaenopsis Chi nấm Collectotrichum nguyên nhân bệnh đốm hai giống lan Dendrobium Phalaenopsis với bệnh gây loài khác Bệnh gây hại lớn lan Dendrobium bệnh cháy đen đầu nấm Alternaria sp Curvularia sp gây nên Bệnh gây hại lớn lan Phalaenopsis bệnh héo Fusarium nấm Fusarium sp gây nên TÀI LIỆU THAM KHẢO James H Blake, Meg Williamson, Kathy Ellingson (2006), Index of Plant Diseases in South Carolina, Clemson Extension J Duff (2002), Orchid Diseases in the Northern Territory, Department of Resources - Primary Industry, Northern Territory J.S Hu, S Ferreira, M Wang (1993), “Detection of Cymbidium Mosaic Virus, Odontoglossum Ringspot Virus, Tomato Spotted Wilt Virus, and Potyvirus Infexting Orchids in Hawaii”, Plant Disease, Vol (77), 464 - 468 Z Latiffah, M.Z Nur Hayati, S Baharuddin and Z Maziah (2009), “Indentification and Pathogenicity of Fusarium Species Associated with Root Rot and Stem Rot of Dendrobium”, Asian Journal of Plant Pathology, Vol (1), 14 - 21 John W Miller (1990), “Bacterial Brown Spot of Orchid causes by Pseudomonas cattleyae”, Plant Pathology Circular, No 330 Hình 15 Khuẩn lạc vi khuẩn Pha4 môi trường King’s B (KbM) S Tanaka, H Nishii, S Ito, and M Kameya-Iwaki (1997), “Detection of Cymbidium Mosaic Potexvirus and Odontoglossum Ringspot Tobamovirus from Thai Orchids by Rapid Immunofilter Paper Assay”, Plant Disease, Vol (81), 167 - 170 J.Y Uchida and M Aragaki (1991), “Phytophthora Diseases of Orchids in Hawaii”, Research extension series, Vol (129) J Y Uchida and M Aragaki (1991), “Fungal diseases of Dendrobium flowers”, Research extension series, Vol (133) Janice Uchida (1995), “Bacterial diseases of Dendrobium”, Research extension series, Vol (158) Hình 16 Vi khuẩn Pha4 kính hiển vi quang học (x100) ... chủng vi khuẩn (Erwinia sp.) gây nên bệnh khác nhau .Vi khuẩn Erwinia sp nguyên nhân gây bệnh thối hai giống lan Dendrobium Phalaenopsis Chi nấm Collectotrichum nguyên nhân bệnh đốm hai giống lan. .. phần gốc lá, gây rụng sớm Nếu xuất phát từ đỉnh lá, làm thối tồn Hình 14 Triệu chứng bệnh thối mềm lan Phalaenopsis 3.2.4.2 Nguyên nhân gây bệnh: Qua phân lập mẫu bệnh, thu chủng vi khuẩn (kí... định Erwinia sp Kết luận Bệnh vi khuẩn nấm hai giống phong lan Dendrobium Phalaenopsis diễn liên tục năm mức độ khác Trên hai giống lan Dendrobium Phalaenopsis phân lập chủng nấm (Alternaria