HÓA CHẤT – QUY TRÌNH THỬ NGHIỆMĐỘC CẤP TÍNH THEO ĐƯỜNG MIỆNG –PHƯƠNG PHÁP PHÂN LOẠI ĐỘC CẤP TÍNH

TCVN TIÊU CHUẨN QUỐC GIA DỰ THẢO TCVN :2019 Xuất lần HĨA CHẤT – QUY TRÌNH THỬ NGHIỆM ĐỘC CẤP TÍNH THEO ĐƯỜNG MIỆNG – PHƯƠNG PHÁP PHÂN LOẠI ĐỘC CẤP TÍNH Chemicals – Testing for acute oral toxicity – Acute toxic class method HÀ NỘI – 2019 TCVN .:2019 TCVN .:2019 Lời nói đầu TCVN… :2019 xây dựng sở tham khảo tài liệu Tổ chức hợp tác phát triển kinh tế (OECD) Environmental Health and Safety Monograph Series on Testing and Assessment No 423 (2001), Guideline for the testing of chemicals – Acute oral toxicity – Acute toxic class method; TCVN .:2019 Viện Kiểm nghiệm an toàn vệ sinh thực phẩm quốc gia biên soạn, Bộ Y tế đề nghị, Tổng cục Tiêu chuẩn Đo lường Chất lượng thẩm định, Bộ Khoa học Công nghệ công bố TCVN .:2019 Lời giới thiệu Phương pháp phân loại độc cấp tính [1] nêu tiêu chuẩn quy trình bước, sử dụng ba động vật giới tính bước Tùy thuộc vào tỷ lệ tử vong và/hoặc tình trạng hấp hối động vật, cần trung bình từ hai đến bốn bước để đánh giá độc cấp tính chất thử nghiệm Quy trình có tính lặp lại, sử dụng động vật xếp hạng chất theo cách tương tự với phương pháp thử nghiệm độc cấp tính tính khác (OECD 420 OECD 425) Phương pháp phân loại độc cấp tính dựa đánh giá sinh trắc học [2] [3] [4] [5] với liều cố định, tách biệt hồn tồn để chất xếp hạng cho mục đích phân loại đánh giá rủi ro Phương pháp xác nhận rộng rãi thể sống với liệu LD50 thu từ Tài liệu tham khảo [6] [7] Hướng dẫn việc lựa chọn phương pháp thử nghiệm thích hợp cho mục đích định nêu Tài liệu tham khảo [8] Tài liệu tham khảo [8] có thơng tin cách tiến hành diễn giải tiêu chuẩn TCVN .:2019 TIÊU CHUẨN QUỐC GIA TCVN :2019 Hóa chất – Quy trình thử nghiệm độc cấp tính theo đường miệng – Phương pháp phân loại độc cấp tính Chemicals – Testing for acute oral toxicity – Acute toxic class method CẢNH BÁO – Người sử dụng tiêu chuẩn cần có kĩ phân tích phịng thử nghiệm Tiêu chuẩn không đưa hết tất vấn đề an toàn liên quan đến việc sử dụng chúng Người sử dụng tiêu chuẩn phải tự thiết lập thao tác an tồn thích hợp xác định khả áp dụng giới hạn quy định trước sử dụng tiêu chuẩn Phạm vi áp dụng Tiêu chuẩn quy định phương pháp thử nghiệm độc cấp tính qua đường miệng chuột nhắt trắng áp dụng chất thử nghiệm hóa chất Tài liệu viện dẫn Các tài liệu viện dẫn sau cần thiết cho việc áp dụng tiêu chuẩn Đối với tài liệu viện dẫn ghi năm công bố áp dụng phiên nêu Đối với tài liệu viện dẫn khơng ghi năm cơng bố áp dụng phiên nhất, bao gồm sửa đổi, bổ sung (nếu có) Thuật ngữ định nghĩa Trong tiêu chuẩn này, áp dụng thuật ngữ định nghĩa sau đây: 3.1 Độc cấp tính theo đường miệng (acute oral toxicity) Những tác dụng phụ xảy sau uống liều chất thử nhiều liều đưa vòng 24 h 3.2 Liều lượng/liều (dose) Lượng chất thử dùng TCVN .:2019 CHÚ THÍCH: Liều biểu thị khối lượng chất thử đơn vị khối lượng động vật thử nghiệm (ví dụ: mg/kg) 3.3 Hệ thống phân loại hài hịa tồn cầu chất hỗn hợp hóa học (Globally Harmonised Classification System for Chemical Substances and Mixtures) GHS Hoạt động chung Tổ chức hợp tác phát triển kinh tế - OECD (về sức khỏe người môi trường), Ủy ban Liên hợp quốc chuyên gia vận chuyển hàng hóa nguy hiểm (về thuộc tính hóa lý), Tổ chức Lao động quốc tế - ILO (về thông tin nguy hiểm) điều phối Chương trình tổ chức quản lý an tồn (Sound Management of Chemicals) hóa chất – IOMC 3.4 Cái chết đến gần (impending death) trạng thái hấp hối chết đoán trước trước thời gian quan sát dự định CHÚ THÍCH: Các dấu hiệu cho thấy tình trạng lồi gặm nhấm bao gồm co giật, vị trí bên, bị rạp run, xem thêm Tài liệu tham khảo [9] 3.5 Liều uống trung bình gây chết (median lethal oral dose) LD50 Liều có nguồn gốc thống kê chất dự kiến gây tử vong 50 % số động vật dùng đường uống CHÚ THÍCH: Giá trị LD50 biểu thị theo khối lượng chất thử đơn vị khối lượng động vật thử nghiệm (mg/kg) 3.6 Liều giới hạn (limit dose) Liều giới hạn thử nghiệm (2 000 000 mg/kg) 3.7 Tình trạng hấp hối (moribund status) tình trạng chết khơng có khả sống sót, điều trị CHÚ THÍCH: Xem thêm Tài liệu tham khảo [9] 3.8 Cái chết dự đoán (predictable death) diện dấu hiệu lâm sàng biểu tử vong thời điểm biết tương lai trước kết thúc kế hoạch thử nghiệm, ví dụ: khơng có khả tiếp cận nước thực phẩm CHÚ THÍCH: Xem thêm Tài liệu tham khảo [9] TCVN .:2019 Xem xét ban đầu 4.1 Không sử dụng chất thử nghiệm liều lượng cho gây đau đớn rõ rệt hoạt động ăn mòn có kích thích nghiêm trọng Động vật hấp hối động vật đau có dấu hiệu đau nghiêm trọng kéo dài phải bị giết lý nhân đạo, xem xét việc diễn giải kết thử nghiệm giống động vật chết thử nghiệm Tiêu chí đưa định giết chết động vật hấp hối đau đớn hướng dẫn việc cơng nhận chết dự đốn chết đến gần nêu Tài liệu hướng dẫn [9] 4.2 Phương pháp sử dụng liều xác định trước kết cho phép chất xếp hạng phân loại theo GHS để phân lớp hóa chất gây ngộ độc cấp tính [10] 4.3 Về ngun tắc, phương pháp khơng nhằm tính tốn LD50 xác cho phép xác định phạm vi, tỷ lệ chết động vật điểm Đồng thời phương pháp cho phép xác định giá trị LD50 hai liều dẫn đến tỷ lệ tử vong lớn % nhỏ 100 % Việc sử dụng liều xác định trước, chất thử nghiệm, với phân loại rõ ràng gắn liền với số lượng động vật quan sát thấy trạng thái khác cải thiện hội cho phòng thử nghiệm báo cáo cách qn có trình tự 4.4 Phịng thử nghiệm cần xem xét thơng tin có sẵn chất thử trước tiến hành nghiên cứu Những thông tin bao gồm nhận diện cấu trúc hóa học chất; tính chất hóa lý; kết thử nghiệm độc tính in vivo in vitro; liệu độc học chất liên quan đến cấu trúc; dự đoán cách sử dụng chất thử Thông tin cần thiết để đáp ứng tất lo ngại phép thử có liên quan đến việc bảo vệ sức khỏe người giúp lựa chọn liều khởi đầu thích hợp Nguyên tắc Phép thử dựa quy trình bước với việc sử dụng số lượng động vật tối thiểu bước, thông tin đầy đủ thu dựa độc cấp tính chất thử nghiệm để tiến hành phân loại Chất đưa vào qua đường miệng đến nhóm động vật thử nghiệm với liều lượng định Chất thử nghiệm cách sử dụng quy trình bước, bước sử dụng ba động vật giới (thường giống cái) Việc có hay khơng hợp chất liên quan đến số động vật tử vong định lượng bước định bước tiếp theo, nghĩa là; – không cần thử nghiệm thêm, – liều tương tự với ba động vật bổ sung, – liều lượng ba động vật bổ sung mức cao thấp TCVN .:2019 Các chi tiết quy trình thử mơ tả Phụ lục A Phương pháp cho phép đánh giá việc phân loại chất thử nghiệm thành loạt nhóm độc tính xác định giá trị điểm cắt cố định LD50 Mô tả phương pháp 6.1 Chọn loài động vật Đối tượng thử nghiệm thường chọn chuột, sử dụng lồi gặm nhấm khác, thơng thường giống [9] CHÚ THÍCH: Giống thường chọn sở lý thuyết thử nghiệm LD50 thông thường cho thấy, có khác biệt độ nhạy giới, trường hợp khác nữ giới thường nhạy cảm chút [11] Tuy nhiên, hiểu biết độc tính hóa chất liên quan đến cấu trúc giống đực nhạy cảm cần sử dụng giới tính Khi thử nghiệm tiến hành giống đực, cần có biện minh đầy đủ Cần sử dụng động vật trưởng thành, trẻ khỏe mạnh, từ loài thường dùng phịng thử nghiệm Con chưa sinh đẻ khơng mang thai Lúc bắt đầu dùng thuốc, vật phải từ đến 12 tuần tuổi khối lượng cần giới hạn ± 20% khối lượng trung bình tất động vật sử dụng liều trước 6.2 Điều kiện ni dưỡng Nhiệt độ phịng thí nghiệm động vật cần khoảng 22 oC ± oC Độ ẩm tương đối không nhỏ 30 % tốt hết không lớn 70%, q trình làm phịng cần đạt từ 50 % đến 60 % Cần sử dụng ánh sáng nhân tạo, trình tự 12 sáng, 12 tối Có thể sử dụng chế độ ăn uống thơng thường phịng thử nghiệm khơng hạn chế nguồn cung cấp nước uống Động vật nhóm theo liều lượng sử dụng, số lượng động vật lồng không cản trở quan sát rõ ràng vật 6.3 Chuẩn bị động vật Các động vật chọn ngẫu nhiên, đánh dấu phép nhận dạng riêng, giữ lồng chúng ngày trước dùng thuốc để thích nghi với điều kiện phịng thử nghiệm 6.4 Chuẩn bị liều Các chất thử nghiệm nên dùng với thể tích khơng đổi phạm vi liều dùng kiểm tra cách thay đổi nồng độ chuẩn bị liều lượng Tuy nhiên, sử dụng chất thử nghiệm khơng pha lỗng, tức nồng độ khơng đổi, điều phù hợp với đánh giá rủi ro chất TCVN .:2019 yêu cầu số quan quản lý Trong hai trường hợp, khơng dùng q thể tích liều tối đa Do đó, thể tích tối đa chất lỏng dùng lúc phụ thuộc vào kích thước động vật thí nghiệm Đối với lồi gặm nhấm, thể tích khơng nên vượt q mL/100 g khối lượng thể, nhiên cân nhắc trường hợp dung dịch nước mL/100 g khối lượng thể Đối với công thức xác định liều lượng, sử dụng dung dịch nước/huyền phù/nhũ tương có thể, ưu tiên sử dụng dung dịch/huyền phù/nhũ tương dầu (ví dụ: dầu ngơ), dùng dung dịch với dung môi khác Đối với loại dung mơi khơng phải nước, cần biết rõ đặc tính độc học Các liều phải chuẩn bị trước sử dụng, trừ cần giữ ổn định trước sử dụng Cách tiến hành 7.1 Quản lý liều Chất thử dùng với liều cách sử dụng ống dày ống đặt nội khí quản thích hợp Trong trường hợp bất thường khơng thể dùng liều nhất, chia liều thành phần nhỏ khoảng thời gian không 24 h Động vật cần cho nhịn ăn trước dùng thuốc (ví dụ: chuột lớn, thức ăn ngoại trừ nước cần thải hồi qua đêm, chuột nhỏ hơn, thức ăn ngoại trừ nước cần thải hồi vòng h đến h) Sau thời gian nhịn ăn, vật cần cân cho sử dụng chất thử nghiệm Sau sử dụng chất này, thức ăn thải hồi h đến h sau loài chuột lớn h đến h chuột nhỏ Khi liều dùng theo phần nhỏ khoảng thời gian, việc cung cấp cho động vật thức ăn nước uống tùy thuộc vào độ dài chu kỳ 7.2 Số lượng động vật mức liều dùng Ba động vật sử dụng cho bước Liều lượng sử dụng làm liều khởi đầu lựa chọn từ bốn mức cố định: 5, 50, 300 2000 mg/kg khối lượng thể (thể trọng) Mức liều khởi đầu cần phải mức có nhiều khả gây tử vong số động vật định lượng Biểu đồ q trình mơ tả quy trình cần áp dụng cho liều khởi đầu nêu Phụ lục A Khi thơng tin có sẵn cho thấy tỷ lệ tử vong liều khởi đầu không mức cao (2000 mg/kg thể trọng), cần phải tiến hành phép thử giới hạn Khi khơng có thơng tin chất thử nghiệm, lý an sinh động vật (phúc lợi động vật), cần phải sử dụng liều khởi đầu 300 mg/kg thể trọng Khoảng thời gian nhóm điều trị xác định khởi đầu, trình mức độ nghiêm trọng dấu hiệu độc hại Cần trì hỗn việc điều trị động vật liều có khẳng định việc động vật định lượng trước sống sót Đặc biệt , xem xét việc sử dụng liều lượng bổ sung cao 5000 mg/kg thể trọng (xem Phụ lục B) chứng minh hoàn cảnh cụ thể theo quy định Vì lý an sinh động vật, việc thử nghiệm động vật phạm vi hạng GHS (từ 2000 mg/kg đến 5000 mg/kg) khơng khuyến TCVN .:2019 khích xem xét có khả chắn rằng, kết thử nghiệm có liên quan trực tiếp đến việc bảo vệ sức khỏe người, sức khỏe động vật môi trường 7.3 Phép thử giới hạn Phép thử giới hạn chủ yếu sử dụng tình mà người thử nghiệm có thơng tin rằng: chất thử nghiệm có khả khơng độc hại, tức có độc tính liều giới hạn quy định Thơng tin độc tính chất thử nghiệm thu từ kiến thức hợp chất thử nghiệm tương tự hỗn hợp sản phẩm kiểm tra tương tự, xem xét nhận dạng tỷ lệ thành phần có ý nghĩa độc tính Trong tình có khơng có thơng tin độc tính chất thử nghiệm, chất thử nghiệm cho độc hại, lần thử nghiệm cần thực Phép thử giới hạn mức liều 2000 mg/kg thể trọng thực với sáu vật (ba động vật bước) Cá biệt, phép thử giới hạn mức liều 5000 mg/kg thực với ba động vật (xem Phụ lục A) Nếu có tử vong liên quan đến chất thử nghiệm, cần thực việc kiểm tra thêm cấp độ thấp Quan sát động vật 8.1 Khái quát Động vật quan sát riêng lần sau dùng liều 30 đầu tiên, định kỳ 24 h đầu, với ý đặc biệt h hàng ngày sau đó, tổng số 14 ngày, trừ chúng tìm thấy chết cần bị loại bỏ khỏi nghiên cứu kết thúc sống lý an sinh động vật Tuy nhiên, thời gian quan sát không nên cố định cách cứng nhắc Thời gian phải xác định phản ứng độc hại, thời gian bắt đầu thời gian phục hồi, kéo dài cần thiết Thời gian mà dấu hiệu độc tính xuất biến quan trọng, đặc biệt dấu hiệu độc hại có chiều hướng trì hỗn [12] Tất quan sát ghi lại có hệ thống với hồ sơ cá nhân sử dụng cho vật 8.2 Quan sát bổ sung Các quan sát bổ sung cần thiết động vật tiếp tục có dấu hiệu độc tính Quan sát cần bao gồm thay đổi da lông; mắt niêm mạc; hệ thống hô hấp, tuần hoàn, hệ thần kinh tự chủ hệ thần kinh trung ương; tập tính chuyển động thể Cần ý đến quan sát tình trạng run, co giật, tiết nước bọt, tiêu chảy, ngủ hôn mê Cần xem xét nguyên tắc tiêu chí tóm tắt Tài liệu tham khảo [9] Động vật tình trạng hấp hối động vật có đau dội dấu hiệu lâu dài bệnh trầm trọng cần giết nhân đạo Khi động vật chết bị giết lý nhân đạo, thời gian chết cần ghi lại xác 10 TCVN .:2019 8.3 Khối lượng thể Khối lượng cá thể động vật phải xác định trước thử nghiệm hàng tuần sau Thay đổi khối lượng cần tính ghi lại Vào cuối thử nghiệm, động vật sống sót cân trước bị giết nhân đạo 8.4 Bệnh học Tất động vật thử nghiệm (bao gồm vật chết trình thử nghiệm bị loại khỏi nghiên cứu lý an sinh động vật) cần mổ tử thi tổng thể Tất thay đổi bệnh lý phải ghi lại cho vật Kiểm tra kính hiển vi quan cho thấy chứng bệnh lý tổng thể động vật sống sót 24 h nhiều cần xem xét mang lại thơng tin hữu ích Dữ liệu báo cáo thử nghiệm 9.1 Dữ liệu Dữ liệu cá nhân động vật cần cung cấp Ngoài ra, tất liệu cần tóm tắt dạng bảng, nhóm thử nghiệm cần cho thấy số lượng động vật sử dụng, số lượng động vật có dấu hiệu độc tính, số động vật chết q trình thử nghiệm giết chết lý nhân đạo, thời gian chết động vật, mô tả thời gian phản ứng độc hại, khả đảo ngược khám nghiệm xác chết 9.2 Báo cáo thử nghiệm Báo cáo thử nghiệm phải bao gồm thông tin sau, thích hợp: a) Chất thử nghiệm: – Bản chất vật lý, độ tinh khiết thông tin liên quan, tính chất lý hóa (kể đồng phân hóa); – Dữ liệu nhận diện, bao gồm số CAS b) Dung mơi (nếu thích hợp): – Chứng minh lựa chọn dung môi, nước c) Động vật thử nghiệm: – Loài chủng sử dụng; – Tình trạng vi sinh vật động vật, thời gian biết thông tin; 11 TCVN .:2019 – Số lượng, độ tuổi giới tính động vật (bao gồm thông tin hợp lý, lý sử dụng giống đực thay giống cái); – Nguồn gốc, điều kiện nuôi, chế độ ăn uống, v.v d) Điều kiện thử nghiệm: – Chi tiết công thức chất thử bao gồm thông tin dạng vật lý chất sử dụng; – Chi tiết việc sử dụng chất thử bao gồm thể tích định lượng thời gian dùng thuốc; – Chi tiết chất lượng thức ăn nước (bao gồm loại / nguồn gốc, nguồn nước); – Lý lựa chọn liều khởi đầu e) Kết quả: – Bảng liệu mức liều cho vật (tức động vật có dấu hiệu độc tính bao gồm tử vong; tính chất, mức độ nghiêm trọng thời gian tác động); – Bảng liệu khối lượng thể khối lượng thể thay đổi; – Khối lượng cá thể động vật ngày dùng thuốc, khoảng thời gian hàng tuần sau đó, thời điểm tử vong hy sinh; – Ngày thời gian chết trước thời gian dự kiến; – Thời gian bắt đầu có dấu hiệu độc tính, liệu chúng đảo ngược cho vật hay không; – Phát mô bệnh học khám nghiệm tử thi cho vật, f) Thảo luận diễn giải kết g) Kết luận 12 TCVN .:2019 Phụ lục A (quy định) Quy trình thực sau liều khởi đầu A.1 Lưu ý chung Đối với liều khởi đầu, chương trình thử nghiệm tương ứng nêu Phụ lục gồm quy trình cần tn theo • Phụ lục A.2: Liều khởi đầu mg/kg thể trọng • Phụ lục A.3: Liều khởi đầu 50 mg/kg thể trọng • Phụ lục A.4: Liều khởi đầu 300 mg/kg thể trọng • Phụ lục A.5: Liều khởi đầu 2000 mg/kg thể trọng Tùy thuộc vào số lượng động vật chết bị giết lí nhân đạo, thủ tục thử nghiệm theo mũi tên định 13 A.2 Quy trình với liều khởi đầu mg/kg thể trọng TCVN .:2019 A.3 Quy trình với liều khởi đầu 50 mg/kg thể trọng 15 TCVN .:2019 A.4 Quy trình với liều khởi đầu 300 mg/kg thể trọng 16 TCVN .:2019 A.5 Quy trình với liều khởi đầu 2000 mg/kg thể trọng 17 TCVN .:2019 Phụ lục B (quy định) Tiêu chí phân loại chất thử với giá trị LD50 dự kiến vượt 000 mg/kg mà không cần thử nghiệm B.1 Tiêu chí Mối nguy loại nhằm xác định chất thử có nguy độc cấp tính tương đối thấp số trường hợp gây nguy hiểm cho quần thể dễ bị tổn thương Những chất dự đốn có LD50 qua miệng da khoảng từ 2000 mg/kg đến 5000 mg/kg liều tương đương cho tuyến đường khác Chất thử xếp vào loại nguy hiểm xác định bởi: 2000 mg/kg < LD50 < 5000 mg/kg (Loại GHS) trường hợp sau: a) Nếu chuyển đến loại theo chương trình thử nghiệm từ A.2 đến A.5, dựa tỷ lệ tử vong; b) Nếu chứng có sẵn đáng tin cậy cho thấy LD50 nằm phạm vi giá trị loại 5, nghiên cứu động vật khác tác động độc hại người cho thấy mối lo ngại sức khỏe người có tính chất cấp tính c) Thơng qua phép ngoại suy, ước tính đo lường liệu, việc gán cho hạng mục nguy hiểm không bảo đảm, • Thơng tin đáng tin cậy có sẵn cho thấy tác động độc hại đáng kể người, • Bất kỳ tử vong quan sát thấy kiểm tra lên tới giá trị Loại theo đường miệng, • Nơi phán xét chuyên gia xác nhận dấu hiệu lâm sàng đáng kể độc tính, thử nghiệm lên đến giá trị Loại 4, ngoại trừ tiêu chảy rụng lơng, • Nơi phán xét chun gia xác nhận thông tin đáng tin cậy, cho thấy tiềm tác động cấp tính đáng kể từ nghiên cứu động vật khác B.2 Thử nghiệm liều 2000 mg/kg Vì lý an sinh động vật, thử nghiệm phạm vi Hạng (5 000 mg/kg) khơng khuyến khích nên xem xét chắn kết phép thử có liên quan trực tiếp đến việc bảo vệ người sức khỏe động vật [10] Không cần thử nghiệm thêm liều lượng cao Khi thử nghiệm yêu cầu liều 5000 mg/kg, thực bước (tức ba động vật) Nếu động vật chết sử dụng liều 2000 mg/kg phù hợp với biểu đồ Phụ lục A Nếu động vật sống sót sử dụng liều hai động vật Nếu ba vật chết, giá trị LD50 dự kiến vượt 5000 mg/kg Nếu hai vật chết, liều dùng đạt 2000 mg/kg 18 TCVN .:2019 Thư mục tài liệu tham khảo [1] Roll R., Höfer-Bosse Th And Kayser D (1986) New Perspectives in Acute Toxicity Testing of Chemicals Toxicol Lett., Suppl 31, 86 [2] Roll R., Riebschläger M., Mischke U and Kayser D (1989) Neue Wege zur Bestimmung der akuten Toxizität von Chemikalien Bundesgesundheitsblatt 32, 336-341 [3] Diener W., Sichha L., Mischke U., Kayser D and Schlede E (1994) The Biometric Evaluation of the Acute-Toxic-Class Method (Oral) Arch Toxicol 68, 559-610 [4] Diener W., Mischke U., Kayser D and Schlede E (1995) The Biometric Evaluation of the OECD Modified Version of the Acute-Toxic-Class Method (Oral) Arch Toxicol 69, 729-734 [5] Diener W., and Schlede E (1999) Acute Toxicity Class Methods: Alternatives to LD/LC50 Tests ALTEX 16, 129-134 [6] Schlede E., Mischke U., Roll R and Kayser D (1992) A National Validation Study of the AcuteToxic-Class Method – An Alternative to the LD50 Test Arch Toxicol 66, 455-470 [7] Schlede E., Mischke U., Diener W and Kayser D (1994) The International Validation Study of the Acute-Toxic-Class Method (Oral) Arch Toxicol 69, 659-670 [8] OECD (2000) Guidance Document on Acute Oral Toxicity Environmental Health and Safety Monograph Series on Testing and Assessment No 24 [9] OECD (2000) Guidance Document on the Recognition, Assessment and Use of Clinical Signs as Humane Endpoints for Experimental Animals Used in Safety Evaluation Environmental Health and Safety Monograph Series on Testing and Assessment No 19 [10] OECD (1998) Harmonized Integrated Hazard Classification System For Human Health And Environmental Effects Of Chemical Substances as endorsed by the 28th Joint Meeting of the Chemicals Committee and the Working Party on Chemicals in November 1998, Part 2, p 11 [http://webnet1.oecd.org/oecd/pages/home/displaygeneral/0,3380,EN-documents-521-14-no-24no-0,FF.html] [11] Lipnick R L, Cotruvo, J A, Hill R N, Bruce R D, Stitzel K A, Walker A P, Chu I; Goddard M, Segal L, Springer J A and Myers R C (1995) Comparison of the Up-and Down, Conventional LD50, and Fixed Dose Acute Toxicity Procedures Fd Chem Toxicol 33, 223-231 [12] Chan P.K and A.W Hayes (1994 ) Chap 16 Acute Toxicity and Eye Irritancy Principles and Methods of Toxicology Third Edition A.W Hayes, Editor Raven Press, Ltd., New York, USA 19 .. .TCVN .:2019 TCVN .:2019 Lời nói đầu TCVN? ?? :2019 xây dựng sở tham khảo tài liệu Tổ chức hợp tác phát triển kinh tế (OECD) Environmental Health and Safety... liều khởi đầu mg/kg thể trọng TCVN .:2019 A.3 Quy trình với liều khởi đầu 50 mg/kg thể trọng 15 TCVN .:2019 A.4 Quy trình với liều khởi đầu 300 mg/kg thể trọng 16 TCVN .:2019 A.5 Quy trình với... khảo [8] Tài liệu tham khảo [8] có thơng tin cách tiến hành diễn giải tiêu chuẩn TCVN .:2019 TIÊU CHUẨN QUỐC GIA TCVN :2019 Hóa chất – Quy trình thử nghiệm độc cấp tính theo đường miệng – Phương