Nghiên cứu tối ưu hóa quá trình tách chiết piceatannlol trong quả sim và làm sạch dịch chiết

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ NÔNG NGHIỆP VÀ PTNT HỌC VIỆN NÔNG NGHIỆP VIỆT NAM - - PHẠM THỊ MAI NGHIÊN CỨU TỐI ƯU HĨA Q TRÌNH TÁCH CHIẾT PICEATANNOL TRONG QUẢ SIM VÀ LÀM SẠCH DỊCH CHIẾT LUẬN VĂN THẠC SĨ CHUYÊN NGÀNH: CÔNG NGHỆ SAU THU HOẠCH HÀ NỘI, NĂM 2014 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ NÔNG NGHIỆP VÀ PTNT HỌC VIỆN NÔNG NGHIỆP VIỆT NAM - - PHẠM THỊ MAI NGHIÊN CỨU TỐI ƯU HĨA Q TRÌNH TÁCH CHIẾT PICEATANNOL TRONG QUẢ SIM VÀ LÀM SẠCH DỊCH CHIẾT CHUYÊN NGÀNH: CÔNG NGHỆ SAU THU HOẠCH MÃ SỐ: 60.54.01.04 NGƯỜI HƯỚNG DẪN KHOA HỌC: PGS.TS NGUYỄN THỊ BÍCH THỦY HÀ NỘI, NĂM 2014 LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan cơng trình nghiên cứu riêng tơi, số liệu kết nghiên cứu luận văn trung thực chưa sử dụng học vị nghiên cứu Tôi cam đoan rằng, giúp đỡ cho việc thực luận văn cám ơn thông tin trích dẫn luận văn ghi rõ nguồn gốc Hà Nội, ngày tháng năm 2014 Học viên Phạm Thị Mai Học viện Nông nghiệp Việt Nam – Luận văn Thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp Page i LỜI CẢM ƠN Sau thời gian học tập Học viện Nông nghiệp Việt Nam, có q trình thực luận văn tốt nghiệp Trong thời gian này, nhận nhiều quan tâm, giúp đỡ, động viên thầy giáo, gia đình bạn bè Lời cảm ơn trân trọng nhất, xin gửi tới PGS TS Nguyễn Thị Bích Thủy, người thầy nhiệt tình giảng dạy suốt thời gian tơi học tập, người thầy tận tâm hướng dẫn tơi hồn thành luận văn Tơi gửi cảm ơn sâu sắc tới TS Lại Thị Ngọc Hà, người dành nhiều công sức để trực tiếp hướng dẫn tơi q trình thực luận văn Tôi xin gửi lời cảm ơn chân thành tới thầy cô giáo Khoa Công nghệ Thực phẩm, thầy mơn Hóa sinh – Cơng nghệ sinh học thực phẩm tạo điều kiện giúp đỡ truyền đạt kiến thức quý báu suốt thời gian học tập trường Một lời cảm ơn đặc biệt dành cho người thầy thầm lặng, người giúp tin rằng: “Con đường đến với tri thức bao la không dễ dàng”, nhờ tơi có thêm động lực để hồn thành khóa học luận văn Xin bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc tới gia đình bạn bè thân thiết tơi, cảm ơn bạn lớp CNSTH K21 Cảm ơn người thân yêu bên, động viên, hỗ trợ tơi suốt q trình học tập thực luận văn Trân trọng cảm ơn! Hà Nội, ngày tháng Học viên năm 2014 Phạm Thị Mai Học viện Nông nghiệp Việt Nam – Luận văn Thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp Page ii MỤC LỤC Lời cam đoan i Lời cảm ơn ii Mục lục iii Danh mục chữ viết tắt ký hiệu vi Danh mục bảng vii Danh mục hình viii MỞ ĐẦU 1.1 Đặt vấn đề 1.2 Mục đích yêu cầu 2 TỔNG QUAN TÀI LIỆU 2.1 Giới thiệu Sim 2.1.1 Đặc điểm thực vật học 2.1.2 Thành phần hóa học 2.2 Giới thiệu polyphenol 2.2.1 Định nghĩa, phân loại 2.2.2 Vai trò polyphenol 2.3 Giới thiệu piceatannol 10 2.3.1 Đặc điểm hóa học 10 2.3.2 Nguồn piceatannol 11 2.4 Một số nghiên cứu piceatannol 12 2.4.1 Một số nghiên cứu khả dược lý piceatannol 12 2.4.2 Một số nghiên cứu chiết xuất hợp chất tự nhiên có piceatannol 15 VẬT LIỆU, NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 20 3.1 Vật liệu nghiên cứu 20 3.1.1 Đối tượng nghiên cứu 20 Học viện Nông nghiệp Việt Nam – Luận văn Thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp Page iii 3.1.2 Thiết bị, dụng cụ, hóa chất 20 3.1.3 Địa điểm nghiên cứu 21 3.2 Nội dung nghiên cứu 21 3.2.1 Khảo sát ảnh hưởng số yếu tố công nghệ đến khả chiết polyphenol tổng số, piceatannol khả kháng oxy hóa dịch chiết từ sim 21 3.2.2 Mơ hình hóa tối ưu hóa q trình tách chiết piceatannol từ sim 21 3.2.3 Nghiên cứu khả làm dịch chiết piceatannol từ sim phương pháp phân tách lỏng rắn 21 3.3 Bố trí thí nghiệm 21 3.3.1 Sơ đồ chiết xuất từ mẫu sim 21 3.3.2 Khảo sát ảnh hưởng số yếu tố công đến khả chiết polyphenol tổng số, piceatannol khả kháng oxy hóa dịch chiết từ sim 22 3.3.3 Mơ hình hóa tối ưu hóa q trình tách chiết piceatannol từ sim 24 3.3.4 Nghiên cứu khả làm dịch chiết piceatannol từ sim phương pháp phân tách lỏng rắn 26 3.4 Phương pháp nghiên cứu 26 3.4.1 Các phương pháp phân tích hóa lý 26 3.4.2 Phương pháp tiến hành mơ hình hóa tối ưu hóa q trình tách chiết piceatannol 3.4.3 30 Phương pháp xác định tỷ lệ thu hồi độ tương đối chất phân đoạn 30 3.4.4 Phương pháp phân tích số liệu 31 4.1 Khảo sát ảnh hưởng số yếu tố công nghệ đến khả chiết polyphenol tổng số, piceatannol khả kháng oxy hóa 4.1.1 dịch chiết từ sim 32 Ảnh hưởng nồng độ ethanol 32 Học viện Nông nghiệp Việt Nam – Luận văn Thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp Page iv 4.1.2 Ảnh hưởng tỷ lệ dung môi/ nguyên liệu đến khả chiết polyphenol tổng số, piceatannol khả kháng oxy hóa dịch chiết từ sim 4.1.3 35 Ảnh hưởng nhiệt độ chiết đến khả chiết polyphenol tổng số, piceatannol khả kháng oxy hóa dịch chiết từ sim 4.1.4 38 Ảnh hưởng thời gian chiết đến khả chiết polyphenol tổng số, piceatannol khả kháng oxy hóa dịch chiết từ sim 41 4.2 Mơ hình hóa tối ưu hố q trình tách chiết piceatannol từ sim 44 4.2.1 Mơ hình hố tối ưu hố 44 4.2.2 Kiểm tra mơ hình 50 4.3 Nghiên cứu làm dịch chiết piceatannol từ sim phương pháp phân đoạn lỏng rắn 51 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 55 5.1 Kết luận 55 5.2 Kiến nghị 56 TÀI LIỆU THAM KHẢO 57 PHỤ LỤC 61 Học viện Nông nghiệp Việt Nam – Luận văn Thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp Page v DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT VÀ KÝ HIỆU DPPH : Diphenylpicryhydrazyl EDTA : Ethylenediaminetetraacetic acid GAE : Gallic Acid Equivalent TE : Trolox Equivalent CK : Chất khô HPLC : Hight Performance Liquid Choromatography PIC : Piceatannol Học viện Nông nghiệp Việt Nam – Luận văn Thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp Page vi DANH MỤC BẢNG STT Tên bảng Trang 3.1 Ma trận thực nghiệm 25 4.1 Ảnh hưởng nồng độ ethanol đến khả chiết polyphenol tổng số, piceatannol khả kháng oxy hóa dịch chiết từ sim 4.2 32 Ảnh hưởng tỷ lệ dung môi/nguyên liệu đến khả chiết polyphenol tổng số, piceatannol khả kháng oxy hóa dịch chiết từ sim 4.3 35 Ảnh hưởng nhiệt độ đến khả chiết polyphenol tổng số, piceatannol khả kháng oxy hóa dịch chiết từ sim 4.4 38 Ảnh hưởng thời gian đến khả chiết polyphenol tổng số, piceatannol khả kháng oxy hóa dịch chiết từ sim 41 4.5 Các mức thí nghiệm 45 4.6 Ma trận thực nghiệm 45 4.7 Ma trận kết hàm lượng piceatannol 46 4.8 Giá trị ước lượng tham số 48 4.9 Kết thực nghiệm chiết piceatannol từ sim điều kiện tối ưu 51 4.10 Hàm lượng piceatannol độ tương đối phân đoạn 52 Học viện Nông nghiệp Việt Nam – Luận văn Thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp Page vii DANH MỤC HÌNH STT Tên hình Trang 2.1 Phân loại hợp chất polyphenol 2.2 Cơng thức hóa học piceatannol 10 3.1 Đường chuẩn axit galic 27 3.2 Đường chuẩn Trolox 28 4.1 Ảnh hưởng nồng độ ethanol đến khả chiết polyphenol tổng số từ sim 4.2 33 Ảnh hưởng nồng độ ethanol đến khả chiết piceatannol từ sim 4.3 33 Ảnh hưởng nồng độ ethanol đến khả kháng oxi hóa dịch chiết từ sim 4.4 34 Ảnh hưởng tỷ lệ dung môi/nguyên liệu đến khả chiết polyphenol tổng số từ sim 4.5 36 Ảnh hưởng tỷ lệ dung môi/nguyên liệu đến khả chiết piceatannol từ sim 4.6 36 Ảnh hưởng tỷ lệ dung môi/nguyên liệu đến khả kháng oxi hóa dịch chiết từ sim 4.7 37 Ảnh hưởng nhiệt độ đến khả chiết polyphenol tổng số từ sim 39 4.8 Ảnh hưởng nhiệt độ đến khả chiết piceatannol từ sim 39 4.9 Ảnh hưởng nhiệt độ đến khả kháng oxy hóa dịch chiết từ sim 4.10 4.11 40 Ảnh hưởng thời gian đến khả chiết polyphenol tổng số từ sim 42 Ảnh hưởng thời gian đến khả chiết piceatannol từ sim 42 Học viện Nông nghiệp Việt Nam – Luận văn Thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp Page viii mV Detector A Ch2:320nm Piceatannol 75 50 25 0.0 5.0 10.0 15.0 20.0 25.0 Hình 4.16 Sắc ký đồ dịch chiết ban đầu theo điều kiện tối ưu Piceatannol Hình 4.17 Sắc ký đồ dịch chiết phân đoạn 25% mV Detector A Ch2:320nm Piceatannol 0.0 5.0 10.0 15.0 20.0 25.0 Hình 4.18 Sắc ký đồ dịch chiết phân đoạn 50% Học viện Nông nghiệp Việt Nam – Luận văn Thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp Page 53 Từ kết sơ trên, thấy việc sử dụng phân tách lỏng rắn cột làm C18 có khả làm dịch chiết Ở phân đoạn với nồng độ ethanol 25% tỷ lệ thu hồi chất 84,0%, hàm lượng piceatannol tương đương 110,60 µg/ml tương ứng với độ tương đối 59,76% Với phân đoạn 50% hàm lượng piceatannol tương đương 19,65 µg/ml, độ tương đối phân đoạn 30,82% Ở phân đoạn 75% độ tương đối cao, hàm lượng piceatannol cịn lại phân đoạn cịn chất khác Ở phân đoạn cuối 100%, khơng có xuất peak piceatannol, phân đoạn gần khơng cịn tạp chất khác Khi sử dụng cột làm C18, sau hấp phụ chất dùng ethanol nồng độ 25% để rửa giải cột thu lại phân đoạn Ở phân đoạn tỷ lệ thu hồi piceatannol cao tương ứng 84,0%, hàm lượng piceatannol tương đương 110,60 µg/ml Đây phân đoạn có độ tương đối cao 59,76% Học viện Nông nghiệp Việt Nam – Luận văn Thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp Page 54 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 5.1 Kết luận Đã khảo sát ảnh hưởng yếu tố cơng nghệ đến q trình tách chiết piceatannol từ sim - Nồng độ ethanol 60% 80% có khả chiết tốt nhất, cho hàm lượng piceatannol cao nhất, polyphenol tổng số khả kháng oxy hóa cao - Tỷ lệ dung môi/nguyên liệu 20/1 cho hàm lượng piceatannol lớn - Nhiệt độ 80oC 90oC hàm lượng piceatannol, polyphenol tổng số khả kháng oxy hóa lớn - Trong điều kiện khảo sát, giá trị hàm lượng piceatannol tăng lên nhanh chóng từ ÷ 30 phút, sau giá trị tăng nhẹ Riêng với số polyphenol tổng số khả kháng oxy hố có xu hướng tăng nhanh phút 30 ÷ 60 Từ sau phút 60, hai giá trị tăng lên không đáng kể Đã xây dựng mơ hình hóa tối ưu hố q trình tách chiết piceatannol từ sim - Mơ hình tách chiết piceatannol từ bột sim Y = 2.010 + 0.090*XS1 + 0.362*XS2 + 0.249*XS3 – 0.024*XS12 – 0.141*XS22 – 0.167*XS32 – 0.063 *XS1*XS2 + 0.047*XS1*XS3 + 0.097*XS2*XS3 Mơ hình mơ tả 93,0% so với thực tế - Điều kiện tối ưu để tách chiết piceatannol polyphenol từ sim theo lý thuyết là: Nồng độ ethanol: 85%; Nhiệt độ: 94oC; Thời gian: 95 phút Khi hàm lượng piceatannol theo lý thuyết đạt cực đại là: 2,499 ± 0,425 mg/g CK - Kết thực nghiệm: Khi tiến hành chiết theo điều kiện tối ưu, hàm lượng piceatannol từ 2,591 ÷ 2,698 mg/g CK nằm khoảng giá trị lý thuyết mô hình Điều cho phép khẳng định tính đắn mơ hình Học viện Nơng nghiệp Việt Nam – Luận văn Thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp Page 55 Phương pháp phân tách lỏng rắn có khả làm dịch chiết piceatannol từ sim Dùng ethanol nồng độ 25% để rửa giải cột sau hấp phụ chất thu lại phân đoạn Ở phân đoạn tỷ lệ thu hồi piceatannol cao tương ứng 84,0%, hàm lượng piceatannol tương đương 110,60 µg/ml Đây phân đoạn có độ tương đối cao 59,76% 5.2 Kiến nghị Để khai thác tiềm sim, loài quen thuộc trồng nhiều trung du miền núi Việt Nam, để có chế phẩm piceatannol áp dụng dược học công nghệ thực phẩm, đề nghị nghiên cứu tiếp sau đây: - Thử nghiệm tách chiết piceatanol quy mô lớn - Tinh piceatannol sử dụng cột Sep-Pak Catridges phương pháp chạy gradient ethanol - Nghiên cứu thu nhận chế phẩm piceatannol - Khảo sát độ bền khả ứng dụng chế phẩm piceatannol Học viện Nông nghiệp Việt Nam – Luận văn Thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp Page 56 TÀI LIỆU THAM KHẢO Tài liệu tiếng Việt Võ Văn Chi (2004) Từ điển thực vật thông dụng tập Nhà xuất Khoa học kĩ thuật Lại Thị Ngọc Hà, Nguyễn Thị Na Lê Thị Trang, 2010, “Mơ hình hóa q trình chiết polyphenol từ sim thu hái Hịa Bình” Tạp chí dinh dưỡng thực phẩm, 6(3+4), 191-201 Nguyễn Thị Quỳnh Hoa, 2011, “Phân lập hợp chất phenolic từ số thực vật Việt Nam”, Hóa hữu cơ, Đại học Khoa học Tự nhiên Ngô Xuân Mạnh, Vũ Kim Bảng, Nguyễn Đặng Hùng Vũ Thị Thư (2006) Giáo trình Hóa sinh thực vật, Nhà xuất Nơng nghiệp Trần Xuân Ngạch (2007) Bài giảng Nguyên liệu sản xuất thực phẩm Trường Đại học Đà Nẵng Thái Duy Thìn, 2014 Nghiên cứu ứng dụng phương pháp sắc ký lỏng hiệu cao (HPLC) đo quang phổ UV-VIS để định tính định lượng hoạt chất số thuốc có từ đến thành phần Báo cáo kết nghiên cứu đề tài cấp Bộ Nguyễn Minh Thủy, Nguyễn Chí Dũng, Nguyễn Phú Cường, Nguyễn Thị Mỹ Tuyền Dương Kim Thanh, 2011 “Ảnh hưởng nguồn nguyên liệu hàm lượng tannin bổ sung đến chất lượng rượu vang sim” Tạp chí khoa học 2011, 48b 228-237 Lê Ngọc Tú (2003) Hóa học thực phẩm, Nhà xuất Khoa học kỹ thuật Lê Ngọc Tú (2010) Hóa sinh cơng nghiệp, Nhà xuất Khoa học kỹ thuật Tài liệu nước 10 Aggarwal, B.B., Bhardwaj, A., Aggarwal, R.S., Seeram, N.P., Shishodia, S., Takada Y., 2004 Role of resveratrol in prevention and therapy of cancer: preclinical and clinical studies Anticancer Res Sep-Oct; 24(5A):2783-840 11 Buiarelli, F., Coccioli, F., Jasionowska, R., Merolle, M., Terracciano, A., 2007 Analysis of some stilbenes in Italian wines by liquid chromatography/tandem mass spectrometry Rapid Commun Mass Spectrom.; 21(18):2955-64 12 Cicerale, S., Lucas, L.J., & Keast, R.s.j, 2012 Antimicrobial, antioxidant and antiinflammatory phenolic activities in extra virgin olive oil Current Opinion in Biotechnology, 23, 129 – 135 13 Cunningham, J., Haslam, E., Haworth, R.D., 1963 The constitution of piceatannol Journal of the Chemical Society, 2875-2883 14 Dai, J and Russell J Mumper Four, 2010 Plant Phenolics: Extraction, Analysis and Their Antioxidant and Anticancer Properties Molecules 2010, 15, 73137352 Học viện Nông nghiệp Việt Nam – Luận văn Thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp Page 57 15 Duarte1, N., Kayser, O., Abreu, P., 2008 Antileishmanial activity of piceatannol isolated from Euphorbia lagascae seeds Phytotherapy Research Volume 22, Issue 4, pages 455–457, April 2008 16 Farhan, H., Rammal, H., Hijazi, A., Hamad, H., and Badran, B., 2012 Phytochemical screening and extraction of polyphenol from stems and leaves of a Lebanese Euphorbia macrolada schyzoceras Boiss Annals of Biological Research, 2012, (1):149-156 17 Guerrero, R.F., Puertas, B., Jiménez, M.J., Cacho, J., and Cantos, E., 2010 Monitoring the process to obtain red wine enriched in resveratrol and piceatannol without quality loss Food Chemistry, Volume 122, Issue 1, Pages 195–202 18 Kehrer, J.P., & Smith, C.V., 1994 Free radicals in biology: Sources, reactivities, and roles in the etiology of human diseases Natural antioxidants, 25-62 19 Kim, Y,H., Kwon,,H.S., Cho, H.J., 2008 Piceatannol, a stilbene present in grapes, attenuates dextran sulfate sodium-induced colitis International Immunopharmacology, Volume 8, Issue 12, 10 December, Pages 1695–1702 20 Koffi E., Sea T., Dodehe Y.and Soro S, 2010 Effect of solvent type on extraction of polyphenols from twenty three Ivorian plants Journa lofAnimal & Plant Sciences, 2010 Vol.5, Issue 3: 550-558 21 Kumudavally, K.V., Phanindrakumor, H.S., Tabassun, S., Radhakrishna, K., Bawa, A.S., 2008 Green tea – A potential preservative for extendiny the shelf life of fresh muttion at ambient temperature (25 degrees Cielsius) Food chemistry, 107, 426 – 433 22 Kuo, P., Hsu, Y., 2008 The grape and wine constituent piceatannol inhibits proliferation of human bladder cancer cells via blocking cell cycle progression and inducing Fas/membrane bound Fas ligand-mediated apoptotic pathway Molecular Nutrition & Food Research Volume 52, Issue 4, pages 408–418, April 2008 23 Kwon, J Y.; Seo, S G.; Heo, Y.-S.; Yue, S.; Cheng, J.-X.; Lee, K W.; Kim, K.-H (2012) Piceatannol, Natural Polyphenolic Stilbene, Inhibits Adipogenesis via Modulation of Mitotic Clonal Expansion and Insulin Receptor-dependent Insulin Signaling in Early Phase of Differentiation Journal of Biological Chemistry 287 (14): 11566 – 78 24 Münzenberger, B., Heilemann, J., Strack, D., Kottke, I., Oberwinkler F., 1990 Phenolics of mycorrhizas and non-mycorrhizal roots of Norway spruce Planta August, Volume 182, Issue 1, pp 142-148 25 Lai, T.N.H., Herent, M.F., Leclercq, J.Q., Nguyen, T.B.T., Rogez, H., Yvan Larondelle, Y., Christelle M A., 2013, Piceatannol, a potent bioactive stilbene, as major phenolic component in Rhodomyrtus tomentosa, Food Chemistry, Volume 138, Issues 2–3, June 2013, Pages 1421–1430 26 Liu, S.Y., Lin, Z.Z., Wang, C.N., Wang, E.L., Wang, Y., Zhang, J.B., 2011 Supercritical fruid extraction of flavonoids from Maydis stigma and its nitritescavenging ability Food Bioprod Process 89, 333-339 Học viện Nông nghiệp Việt Nam – Luận văn Thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp Page 58 27 Matsui, Y., Sugiyama, K., Kamei, M., Takahashi, T., Suzuki, T., Katagata, Y., and Ito, T., 2010 Extract of Passion Fruit (Passiflora edulis) Seed Containing High Amounts of Piceatannol Inhibits Melanogenesis and Promotes Collagen Synthesis, J Agric Food Chem., 2010, 58 (20), pp 11112–11118, 28 Pierre, W., Michael, E., Muriel, C., Jean-Michel, M., Kinghorn, A., John, M., 2001 Potential Cancer-Chemopreventive Activities of Wine Stilbenoids and Flavans Extracted From Grape (Vitis vinifera) Cell Cultures Nutrition and Cancer, Volume 40, Issue 29 Piotrowska, H., Kucinska, M., Murias, M., 2012, Biological activity of piceatannol: Leaving the shadow of resveratrol Mutation Reseach 750, 60-82 30 Guerreroa, R.F., Puertasa, B., Jiméneza, M.J., 2010 Monitoring the process to obtain red wine enriched in resveratrol and piceatannol without quality loss Food Chemistry, Volume 122, Issue 1, September 2010, Pages 195–202 31 Rimando, A.M., Wilhelmina Kalt, James B Magee, Jim Dewey, 2004, Resveratrol, Pterostilbene, and Piceatannol in Vaccinium Berries J Agric Food Chem., 2004, 52 (15), pp 4713–4719 32 Rimando, A.M., Barney, D.L., 2005 Resveratrol and Naturally Occurring Analogues in Vaccinium Species Proc WOCMAP III, Vol.6: Traditional Medicine & Nutraceuticals 33 Rimando, A.M., Barney, D.L., 2005 Resveratrol and Naturally Occurring Analogues in Vaccinium Species Proc WOCMAP III, Vol.6: Traditional Medicine& Nutraceuticals 34 Robards, P.P., Ticket, G., and Glover, W., 1999 Phenolic compounds and their role in oxidative processes in fruit Food Chemistry, 66, 401-432 35 Rossi, M., Caruso, F., Opazo, C., and Salciccioli, J., 2008 Crystal and Molecular Structure of Piceatannol; Scavenging Features of Resveratrol and Piceatannol on Hydroxyl and Peroxyl Radicals and Docking with Transthyretin J Agric Food Chem., 56 (22), pp 10557–10566 36 Safizadeh, M.H., Thornton, B.M., 2003 Optimization in simulation experiments using response surface methodology Received 15 January 1983, Available online 26 February 2003 37 Salee, M., Kim, H.J., Ali, M.S., Lee, Y.S., 2005 Intake and bioaccessibility of total polyphenols in a whole diet Food chemistry, 101 (2), 492 – 501 38 Silva, E M., Rogez, H., Larondelle, Y., 2007 Optimisation of extraction of phenolic from Inga edulis leaves using response surface methodology Separation and Purification Technology, 55, 381 – 387 39 Sing, V.L., and Rossi, J.A., 1965 Colorimetry of Total Phenolics with Phosphomolybdic-Phosphotungstic Acid Reagents Am J Enol Vitic, vol 16 no 144-158 40 Son, P., Park, S., Na, K., Jue, D., Kim, S., & Surh, Y., 2010 Piceatannol, a catechol-type polyphenol, inhibits phorbol ester-induced NF-kB activation Học viện Nông nghiệp Việt Nam – Luận văn Thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp Page 59 and cyclooxygenase-2 –expression in human breast epithelial cells: Cysteine 179 of IKKb as a potential target Carcinogenesis, 31(8), 1442-1449 41 Samatopoulos, K., Chatzilazarou, A and Katsoyannos, E., 2014 Optimization of Multistage Extraction of Olive Leaves for Recovery of Phenolic Compounds at Moderated Temperatures and Short Extraction Times Foods 2014, 3(1), 6681 42 Wieder, T., Prokop A., Bagci, B., Essmann, F., Bernicke, D., Schulze-Osthoff K., Dörken, B., Schmalz, HG., Daniel, PT., Henze, G., 2001, Piceatannol, a hydroxylated analog of the chemopreventive agent resveratrol, is a potent inducer of apoptosis in the lymphoma cell line BJAB and in primary, leukemic lymphoblasts Journal Article, Research Support, Non-U.S Gov't, Comparative Study [2001, 15(11):1735-1742] 43 Williamson, G., and Manach, C., 2005 Bioavailability and bioefficacy of polyphenols in humans II Review of 93 intervention studies The American Journal of Clinical Nutrition, 81(Suppl.), 243S – 255S 44 Wolter, F., Clausnitzer, A., Akoglu, B., and Stein, J., 2002 Piceatannol, a Natural Analog of Resveratrol, Inhibits Progression through the S Phase of the Cell Cycle in Colorectal Cancer Cell Lines1 J Nutr February 1, 2002 vol 132 no 298-302 45 Wu Yu, X., and Jing, H., 2011 Optimization of Phenolic Antioxidant Extraction from Wuweizi (Schisandra chinensis) Pulp Using Random-Centroid Optimazation Methodology International Journal of Molecular Sciences 2011, 12(9), 6255-626 Học viện Nông nghiệp Việt Nam – Luận văn Thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp Page 60 PHỤ LỤC Response Piceatannol Actual by Predicted Plot 2.5 Piceatannol Actual 1.5 0.5 1.0 1.5 2.0 2.5 Piceatannol Predicted P F F 0.0810 Max RSq 0.9818 Parameter Estimates Term Intercept EtOH(40,80) Temperature(45,85) Time(25,85) EtOH*Temperature EtOH*Time Temperature*Time EtOH*EtOH Temperature*Temperature Time*Time Estimate 2.0095464 0.0895041 0.361693 0.2488962 -0.062979 0.0470207 0.0970207 -0.024096 -0.140769 -0.167285 Std Error 0.110265 0.04758 0.04758 0.04758 0.061328 0.061328 0.061328 0.056646 0.056646 0.056646 t Ratio 18.22 1.88 7.60 5.23 -1.03 0.77 1.58 -0.43 -2.49 -2.95 Estimate 0.361693 0.2488962 -0.167285 -0.140769 0.0895041 0.0970207 -0.062979 0.0470207 -0.024096 Std Error 0.04758 0.04758 0.056646 0.056646 0.04758 0.061328 0.061328 0.061328 0.056646 t Ratio t Ratio 7.60 5.23 -2.95 -2.49 1.88 1.58 -1.03 0.77 -0.43 Prob>|t|