Chiết xuất, phân lập một số hợp chất trong lá trà hoa vàng Cúc Phương (Camellia cucphuongensis Ninh & Rosmann)

an dP rm ac y, KHOA Y DƯỢC VN U ĐẠI HỌC QUỐC GIA HÀ NỘI ine TRẦN THỊ THƠM ed ic CHIẾT XUẤT, PHÂN LẬP MỘT SỐ HỢP CHẤT M TRONG LÁ TRÀ HOA VÀNG CÚC PHƯƠNG ho ol of (Camellia cucphuongensis Ninh & Rosmann) NGÀNH DƯỢC HỌC Co py rig ht @ Sc KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC HÀ NỘI - 2019 VN U ĐẠI HỌC QUỐC GIA HÀ NỘI dP rm TRẦN THỊ THƠM ac y, KHOA Y DƯỢC CHIẾT XUẤT, PHÂN LẬP MỘT SỐ HỢP CHẤT an TRONG LÁ TRÀ HOA VÀNG CÚC PHƯƠNG ed ic ine (Camellia cucphuongensis Ninh & Rosmann) KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC ho ol of M NGÀNH DƯỢC HỌC KHÓA : TS VŨ ĐỨC LỢI PGS TS ĐỖ THỊ HÀ Co py rig ht @ Sc NGƯỜI HƯỚNG DẪN : QHY 2014 HÀ NỘI 2019 LỜI CẢM ƠN VN U Trong thời gian thực khóa luận này, em nhận nhiều quan tâm giúp đỡ từ thầy cô Khoa Y Dược – Đại học Quốc gia Hà Nội, ac y, anh chị Khoa Hóa Thực vật – Viện Dược liệu, bạn bè người thân dP rm Lời đầu tiên, em xin chân thành cảm ơn TS Vũ Đức Lợi – Chủ nhiệm Bộ môn Dược liệu – Dược học cổ truyền, Khoa Y Dược - Đại học Quốc gia Hà Nội, PGS TS Đỗ Thị Hà, Khoa Hóa Thực Vật - Viện Dược liệu tận tình hướng dẫn, tạo điều kiện thuận lợi để em thực hồn thành khóa an luận ine Em xin chân thành cảm ơn tới ThS Phạm Thị Thúy anh chị chun viên Phịng Hóa Thực vật II - Viện Dược liệu trực tiếp hướng ed ic dẫn tận tình dạy em q trình thực hồn thành khóa luận M Em xin gửi lời cảm ơn tới thầy cô giảng viên Khoa Y Dược - Đại học Quốc gia Hà Nội, người thân gia đình, bạn bè truyền of dạy kiến thức, kỹ năng, tạo điều kiện, quan tâm, giúp đỡ, động viên em ho ol năm học trường Cuối cùng, em xin kính chúc thầy ln mạnh khỏe, hạnh phúc Sc thành công sống, giữ vững nhiệt huyết @ đường truyền đạt tri thức mình! Co py rig ht Em xin chân thành cảm ơn! Hà Nội, ngày 30 tháng 05 năm 2019 Sinh viên Trần Thị Thơm VN U MỤC LỤC DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU, CÁC CHỮ VIẾT TẮT DANH MỤC CÁC BẢNG ac y, DANH MỤC CÁC HÌNH VẼ, SƠ ĐỒ ĐẶT VẤN ĐỀ dP rm CHƯƠNG 1: TỔNG QUAN 1.1 Về thực vật 1.1.1 Vị trí phân loại chi Camellia L lồi Camellia cucphuongensis 1.1.2 Đặc điểm thực vật phân bố chi Camellia L an 1.1.3 Đặc điểm thực vật phân bố loài Camellia cucphuongensis ine 1.2 Thành phần hóa học 1.2.1 Thành phần hóa học chi Camellia ed ic 1.2.1.1 Nhóm polyphenol 1.2.1.2 Nhóm saponin M 1.2.1.3 Nhóm polysaccarit 1.2.1.4 Nhóm sterol tinh dầu of 1.2.1.5 Nhóm acid amin vitamin 10 ho ol 1.2.2 Thành phần hóa học lồi Trà hoa vàng 10 1.2.2.1 Nhóm polyphenol 10 1.2.2.2 Nhóm saponin 12 Sc 1.2.2.3 Nhóm tinh dầu 12 @ 1.2.2.4 Nhóm acid amin 13 1.3 Tác dụng sinh học 14 ht 1.3.1 Tác dụng chống oxi hóa 14 rig 1.3.2 Tác dụng chống ung thư 14 py 1.3.3 Tác dụng kháng khuẩn 15 Co 1.3.4 Tác dụng giảm cân làm đẹp 15 1.3.5 Tác dụng theo y học cổ truyền 16 CHƯƠNG 2: ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 17 2.1 Nguyên liệu thiết bị 17 VN U 2.1.1 Đối tượng nghiên cứu 17 2.1.2 Nguyên vật liệu nghiên cứu 17 2.2 Phương pháp nghiên cứu 18 ac y, 2.2.1 Phương pháp định tính nhóm chất 18 2.2.2 Phương pháp chiết xuất phân lập 18 dP rm 2.2.3 Phương pháp xác định cấu trúc hợp chất 19 CHƯƠNG 3: THỰC NGHIỆM, KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN 20 3.1 Định tính nhóm chất hữu thường gặp phản ứng hóa học 20 3.1.1 Định tính nhóm chất dịch chiết ether dầu hỏa 20 3.1.2 Định tính nhóm chất dịch chiết cồn 20 an 3.1.3 Định tính nhóm chất dịch chiết nước 23 ine 3.1.4 Định tính nhóm chất khác khác 24 3.2 Chiết xuất phân lập chất 27 ed ic 3.2.1 Chiết xuất cao toàn phần cao phân đoạn 27 3.2.2 Chiết xuất phân lập hợp chất CC1 29 M 3.2.3 Chiết xuất phân lập hợp chất CC5 30 3.2.4 Xác định cấu trúc hợp chất phân lập 31 of 3.2.4.1 Hợp chất CC1 31 ho ol 3.2.4.2 Hợp chất CC5 32 3.3 Bàn luận 33 Sc KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 35 TÀI LIỆU THAM KHẢO Co py rig ht @ PHỤ LỤC 1 13 Phổ proton H-NMR Phổ cộng hưởng từ hạt nhân carbon-13 C-NMR AAPH CC CDCl3 d DEPT ESI-MS 10 FASN 11 GABA 12 IC50 13 IUPAC 14 LDL Lipoprotein trọng lượng phân tử thấp 15 ho ol 2,2'-Azobis (2-amidinopropan) MeOD Methanol D4 MIC Nồng độ ức chế tối thiểu MS Phổ khối lượng phân tử m/z Khối lượng/ điện tích NMR Phổ cộng hưởng từ hạt nhân s singlet 21 SKLM Sắc ký lớp mỏng 22 tonc Nhiệt độ nóng chảy 23 v/v Thể tích/ thể tích ht @ 18 rig 20 py dP rm Sắc ký cột chloroform doublet Sc 17 19 dihydrochlorid an Distortionless Enhancement by Polarization Transfer M ed ic ine Phổ khối ion hóa phun mù điện tử of 16 Co Tên đầy đủ Ký hiệu, chữ viết tắt ac y, STT VN U DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU, CÁC CHỮ VIẾT TẮT Fatty acid synthase Gamma-Aminobutyric Acid Nồng độ ức chế 50% International Union of Pure and Applied Chemistry VN U DANH MỤC CÁC BẢNG STT Tên bảng Bảng 1.1 Danh mục số loài Trà hoa vàng Việt Nam dược liệu Bảng 3.2 Bảng so sánh liệu phổ 1H, 13C-NMR CC1 kaempferol Bảng 3.3 Bảng so sánh liệu phổ 1H, 13C-NMR CC5 vanillin 4-7 25 - 27 31 32 - 33 an ac y, Bảng 3.1 Kết định tính sơ nhóm chất có dP rm Trang ine DANH MỤC CÁC HÌNH Tên hình ed ic STT Trang Hình 1.1 Một số polyphenol 11 Hình 1.2 Một số tinh dầu 12 Hình 1.3 Một số acid amin 13 Hình 2.1 Hình ảnh hoa Trà hoa vàng Cúc Phương Hình 2.2 Hình ảnh mẫu dược liệu of ho ol Hình 3.2 Sơ đồ phân lập hợp chất CC1 từ phân đoạn ethyl acetat Trà hoa vàng 17 17 19 28 29 rig ht Sc Hình 2.3 Sơ đồ phương pháp chiết xuất phân lập chất Hình 3.1 Sơ đồ chiết cao cồn 96% cao phân đoạn Trà hoa vàng @ M Hình 3.3 Sơ đồ phân lập hợp chất CC5 từ phân đoạn dichloromethan Trà hoa vàng 30 10 Hình 3.4 Cấu trúc hóa học hợp chất CC1 32 11 Hình 3.5 Cấu trúc hóa học hợp chất CC5 33 Co py VN U ĐẶT VẤN ĐỀ Những năm gần đây, vấn đề chống oxi hóa, chống lão hóa chống ung thư đề tài nóng nhiều người quan tâm Một xu hướng đầu sản phẩm bảo vệ sức khỏe có nguồn gốc từ thiên nhiên, loại thảo ac y, dược có lợi cho sức khỏe, tiểu biểu loại trà thuộc chi Camellia L Từ xa xưa, trà thức uống phổ biến yêu thích nhờ tác dP rm dụng có lợi cho sức khỏe Trong lồi trà Trà hoa vàng loại trà đặc biệt quý, mệnh danh nữ hoàng loài trà Các nghiên cứu từ y học cổ truyền phương Đông đến chứng khoa học đại tác dụng bật Trà hoa vàng chống oxi hóa, chống ung thư, chống nhiễm khuẩn, hạ an mỡ máu, giảm cân làm đẹp,…[44], [27], [41], [8] Hiện nay, Việt Nam trở thành trung tâm phân bố với ine 40 loài Trà hoa vàng cơng bố Lồi Camellia cucphuongensis Ninh & ed ic Rosmann giới lần viết Jean-Claude Rosmann vào năm 1995 tờ Jardins de France, Pháp, sau đăng tạp chí International M Camellia Journal [29] Đây loài đặc hữu Việt Nam, phát Vườn Quốc gia Cúc Phương, Ninh Bình Tuy nhiên, nghiên cứu nước hầu of tập trung vào phát mơ tả đặc điểm hình thái lồi mới, ho ol thành phần hóa học làm nên công dụng giá trị Trà hoa vàng chưa tìm hiểu sâu sắc tồn diện Về lồi Camellia cucphuongensis Ninh & Rosmann, nhóm nghiên cứu TS Nguyễn Đức Tùng, Đại học Dược Hà Nội Sc Viện Dược liệu nghiên cứu lần đầu tiên, mô tả chi tiết đặc điểm thực vật, đặc @ điểm sinh thái phân lập số thành phần hóa học lồi Chính vậy, đề tài “ Chiết xuất, phân lập số hợp chất trà ht hoa vàng Cúc Phương (Camellia cucphuongensis) ” - phần nghiên cứu rig trên, thực với mục tiêu: Co py Định tính số nhóm chất hữu Trà hoa vàng Cúc Phương Chiết tách, phân lập 1- hợp chất từ Trà hoa vàng Cúc Phương Xác định cấu trúc hợp chất phân lập CHƯƠNG 1: TỔNG QUAN VN U 1.1 Về thực vật 1.1.1 Vị trí phân loại chi Camellia L lồi Camellia cucphuongensis Vị trí chi Camellia L hệ thống phân loại thực vật Takhtajan ac y, (2009) [39] sau: Giới: Thực vật (Plantae) dP rm Ngành: Ngọc lan (Magnoliophyta) Lớp: Ngọc lan (Magnoliopsida) Phân lớp: Sổ (Dilleniidae) Bộ: Trà (Theales) Họ: Trà ( Theaceae) an Chi: Trà (Camellia) ine Loài Camellia cucphuongensis: Tên khoa học: Camellia cucphuongensis Ninh & Rosmann ed ic Tên Việt Nam: Trà hoa vàng Cúc Phương 1.1.2 Đặc điểm thực vật phân bố chi Camellia L M Cây bụi nhỏ thường xanh, cành nhẵn hay có lơng Lá thường có cuống; đơn, mọc cách, khơng có kèm, kích thước thay đổi, dài từ vài cm đến of 45 cm; chất thường dạng da, dày mỏng khác nhau, chất màng mỏng; chóp ho ol nhọn, có đầu nhọn kéo dài thành đi; gốc hình nêm hẹp, nêm rộng, trịn hay hình tim; mép có cưa nhọn hay tù Hoa đều, lưỡng tính, kích thước lớn nhỏ, mọc đơn độc tập trung 2-5 hoa nách đỉnh cành Hoa màu Sc đỏ, trắng hay màu vàng Cuống hoa ngắn gần không Lá bắc 2-10, mọc @ xoắn cuống hoa, tồn sớm rụng Lá đài thường phiến, tồn sớm rụng Cánh hoa 4-19, hợp phần gốc với vịng nhị ngồi Nhị nhiều, ht nhị ngồi thường dính thành chén hay ống phía gốc; vịng nhị rig phía rời nhau; nhị dài Bầu trên, 1-5 ơ; vịi nhụy 1-5, dạng sợi, rời py dính mức độ khác nhau, bầu vịi nhụy nhẵn hay phủ lơng mịn Quả nang hình cầu, hình cầu dẹt hình trứng, khô chẻ ô từ xuống thành 3, hay Co mảnh; có trụ hay khơng; vỏ dày hay mỏng, hoá gỗ Hạt thường đến nhiều hạt ơ, hình cầu, nửa cầu hay hình nêm; vỏ hạt màu nâu, nâu hạt giẻ nhạt VN U nâu hồng, phủ lông hay nhẵn [3] Có khoảng 280 lồi, phân bố chủ yếu Nhiệt đới Á nhiệt đới Ấn Độ, Trung Quốc, Vệt Nam, Thổ Nhĩ Kì, Brazil, Australia, Ở Việt Nam bắt gặp 58 ac y, loài Camellia [3], có 40 lồi có hoa màu vàng, tập trung khu vực phía Bắc (Thái Nguyên, Vĩnh Phúc, Quảng Ninh,…) phía Nam số tỉnh dP rm Lâm Đồng, Đồng Nai,…( xem bảng 1.1) 1.1.3 Đặc điểm thực vật phân bố loài Camellia cucphuongensis Cây gỗ nhỏ, cao - m Cành già màu nâu đậm, sần sùi Lá có cuống ngắn, dài 2,5 mm, có lơng Lá thn dài hình elip, dài 6-12 cm, rộng 2,7 – 4,5 cm, mỏng, gốc tròn nhẵn Hoa màu vàng, mọc đầu cành, đường kính nở 4,5 an – cm; cuống hoa nhẵn, dài – mm; bắc – lá, hình trứng, dài – mm; ine đài – lá, dài 0,4 – cm, có lơng Có 13 – 15 cánh hoa, hình trứng, dài 1,8 – 2,3 cm, rộng 1,5 cm, đầu trịn, mặt có lơng Nhị hoa dài 0,8 – 2,4 cm, nhị rời, ed ic có lơng Nỗn có ơ, có vịi nhụy, rời, dài khoảng 1,3 cm Quả hình cầu, dài 3,9 cm, đường kính 3,8 cm, màu đen gỗ khơ, có với – hạt ơ, M hạt hình nêm dài 1,2 – 1,4 cm [29] Mùa hoa kéo dài từ tháng 10 năm trước đến tháng năm sau [2] of Loài ưa ẩm mọc thung lũng rừng nhiệt đới độ cao 300- ho ol 400 m (khu vực gần hồ Mạc thuộc Vườn Quốc gia Cúc Phương) [2] Đây loài đặc hữu, phát Vườn quốc gia Cúc Phương, Ninh Bình Jean-Claude Sc Rosmann Tiến sĩ Trần Ninh Khoa Thực vật học, Đại học Quốc gia Hà Nội Co py rig ht @ [29] Kết luận Đề tài thực mục tiêu nội dung đặt sau: VN U KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ thu kết quả: • ac y, Định tính nhóm chất hữu thường gặp Trà hoa vàng Cúc Phương, Các nhóm chất có mặt mẫu dược liệu: Caroten, Sterol, Flavonoid, dP rm Saponin, Acid amin, Acid hữu cơ, Đường khử, Tanin • Các nhóm chất khơng có mặt mẫu dược liệu: Chất béo, Coumarin, Glycosid tim, Alcaloid, Anthranoid Chiết xuất, phân lập, xác định cấu trúc hai hợp chất từ Trà hoa vàng Cúc Phương: an • Từ cao chiết phân đoạn ethyl acetat phân lập hợp chất kaempferol ine (CC1) ed ic • Từ cao chiết phân đoạn dichloromethan phân lập hợp chất vanillin (CC5) Kiến nghị of M • Tiếp tục phân lập hợp chất khác từ loài Camellia cucphuongensis Ninh & Rosmann • Từ kết thành phần hóa học, tiến hành nghiên cứu tác dụng ho ol sinh học tiềm chống oxi hóa, chống ung thư, hỗ trợ bệnh nhân đái Co py rig ht @ Sc tháo đường, tim mạch,… 35 TÀI LIỆU THAM KHẢO VN U TÀI LIỆU TIẾNG VIỆT Võ Văn Chi (2012), Từ điển thuốc Việt Nam, Nhà xuất Khoa học kỹ thuật, tập 2, trang 1025 ac y, Ngô Thị Minh Duyên cộng (2011), "Đánh giá tình hình sinh trưởng học Lâm nghiệp số 4, trang 1954-1965 dP rm khả tái sinh trà hoa vàng số tỉnh phía Bắc", Tạp chí Khoa Trần Ninh Hakoda Naotoshi (2009), Các loại trà Vườn quốc gia Tam Đảo TÀI LIỆU TIẾNG ANH Ashihara H, et al (1998), "Biosynthesis and metabolism of purine alkaloids an in leaves of cocoa tea (Camellia ptilophylla)", Journal of Plant Research Axel M, et al (1996), "Determination of adenine, caffeine, theophylline and ed ic ine 111, pp 599–604 theobromine by HPLC with amperometric detection", Fresenius Journal of M Analytical Chemistry 356, pp 284–287 Ben Saad H, et al (2017), "Effects of vanillin on potassium bromate-induced of neurotoxicity in adult mice: impact on behavior, oxidative stress, genes ho ol expression, inflammation and fatty acid composition", Arch Physiol Biochem 123 (3), pp 165-174 Calderón-Monto JM , et al (2011), "A review on the dietary flavonoid Sc kaempferol", Mini Reviews in Medicinal Chemistry 11 (4), pp 298–344 Chen IJ, et al (2016), "Therapeutic effect of high-dose green tea extract on @ weight reduction: A randomized, double-blind, placebo-controlled clinical Chen JH, et al (1993), "The healthcare value of yellow Camellia", Study rig ht trial.", Clinical Nutrition 35 (3), pp 592-599 py Trace Elements Health 10 (51-52), pp 61 Co 10 Chen JH, et al (1993), "The wholesome function and trace elements of leaves in artificial asexual propagation of Camellia chrysantha (Hu) Tuyama (golden camellia).", Weiliang Yuansu Yu Jiankang Yanjiu 10, pp 51−52 11 Chen SS, et al (2012), "Advances in the treatment of ovarian cancer: a VN U potential role of antiinflammatory phytochemicals", Discovery Medicine 13 (68), pp 7-17 12 Cui C, et al (2018), "Triterpenoid Saponins from the Genus Camellia: ac y, structures, biological activities, molecular simulation for structureactivity relationship ", Food & Function (6), pp 3069–3091 Douglas AB, et al (1997), "The Chemistry of Tea Flavonoids", Critical dP rm 13 Reviews in Food Science and Nutrition 37 (38), pp 693-704 14 Dung VL, et al (2016), "Camellia thuongiana - a new yellow camellia species from vietnam", Dalat University journey of science (3), pp 338– 344 Dung VL, et al (2016 ), "Camellia Ninhii – A New Yellow Camellia Species an 15 ine from Vietnam", Proceedings of Dali International Camellia Congress pp 75-78 Grzesik M (2017), "Antioxidant properties of catechins: Comparison with ed ic 16 other antioxidants", Food Chemistry 241, pp 480-492 Huang XC (1994), "Development and prospect forecast of yellow Camellia", M 17 of Chinese Journal of Information on Traditional Chinese Medicine 1, pp 10– 11 Itokawa H, et al (1968), "Isolation of Camelliagenin A, B and C from the ho ol 18 Fruits of Camellia japonica L", Yakugaku zasshi : Journal of the 19 Sc Pharmaceutical Society of Japan 88, pp 1463-1466 Jaganathan SK, et al (2009), "Antiproliferative effects of honey and of its Khalil MI, et al (2010), "The potential role of honey and its polyphenols in ht 20 @ polyphenols: a review", Journal of Biomedicine & Biotechnology, pp 1-13 rig preventing heart diseases: a review", African Journal of Traditional, Complementary and Alternative Medicines (4), pp 315-321 Co py 21 Kim SH, et al (2013), "Anti-cancer Effect and Underlying Mechanism(s) of Kaempferol, a Phytoestrogen, on the Regulation of Apoptosis in Diverse Cancer Cell Models", Toxicological Research 29 (4), pp 229-234 22 Kujawskaa M, et al (2016 ), "Protective effect of yellow tea extract on N- VN U nitrosodiethylamine-induced liver carcinogenesis", Pharmaceutical Biology 54 (9), pp 1891–1900 23 Kurihara HKJ, et al (1991), "Oligostilbenes from Carex kobomugi", 24 ac y, Phytochemistry 30 (2), pp 649-653 Lee J, et al (2014), "Vanillin protects human keratinocyte stem cells against 25 dP rm ultraviolet B irradiation", Food Chem Toxicol 63 (7), pp 30 Li YF, et al (2008), "An improved HPLC method for simultaneous determination of phenolic compounds, purine alkaloids and theanine in Camellia species", Journal of Food Composition and Analysis 21, pp 559– 563 Lieu TN, et al (2018), "Two new species of Camellia (Theaceae) from an 26 27 ine Vietnam", Korean Journal of Plant Taxonomy 48 (2), pp 115-122 Lin JN, et al (2013), "Chemical Constituents and Anticancer Activity of ed ic Yellow Camellias against MDA-MB-231 Human Breast Cancer Cells ", Journal of Agricultural and Food Chemistry 61, pp 9638−9644 Ling-Ling D, et al (2016), "Tea Polysaccharides and Their Bioactivities", M 28 29 of Molecules 21 (11), pp 1449 Ninh T, et al (1998), "Camellia cucphuongensis: a new species of yellow 30 ho ol Camellia from Vietnam ", International Camellia Journal 1998, pp 71 - 72 Ninh T, et al (2012), "A New Species of Yellow Camellia (Sect Piquetia) 31 Sc from Vietnam ", International Camellia Journal 44, pp 161- 162 Ninh T, et al (2016), " General information about the Yellow Camellia @ species in Vietnam", Proceedings of Dali International Camellia Congress ht Dali, Yunnan, China, pp 76 - 84 Nöthlings U, et al (2007), "Flavonols and pancreatic cancer risk: the rig 32 Co py multiethnic cohort study", American Journal of Epidemiology 166 (8), pp 924-931 33 Orel G, et al (2010), "Camellia luteocerata sp nov and a new section of VN U Camellia (Dalatia) from Vietnam", Nordic Journal of Botany 28, pp 280284 34 Orel G, et al (2012), "Camellia cattienensis: a new species of Camellia (sect 35 ac y, Archaecamellia: Theaceae) from Vietnam", Kew Bulletin 66, pp 565-569 Orel G, et al (2012), "Camellia inusitata (Theaceae), a new species forming dP rm a new section (Bidoupia) from Vietnam", Edinburgh Journal of Botany 69, pp 347-355 36 Orel G, et al (2013), "Camellia oconoriana (Theaceae), a new species from Vietnam", Edinburgh Journal of Botany 70, pp 439-447 37 Pouységu L, et al (2010), "Hypervalent iodine-mediated oxygenative phenol Sahar R, et al (2016), "Evaluation of seven different drying treatments in ine 38 an dearomatization reactions", Tetrahedron, pp 5908-5917 respect to total flavonoid, phenolic, vitamin C content, chlorophyll, ed ic antioxidant activity and color of green tea (Camellia sinensis or C assamica) leaves", Journal of Food Science and Technology 53 (1), pp 721–729 Takhtajan (2009), Flowering plant 40 Veeresham C, et al (2014), "Aldose reductase inhibitors of plant origin", of M 39 Phytotherapy Research 28 (3), pp 317-333 Wang B, et al (2018), "Essential oils and ethanol extract from Camellia ho ol 41 nitidissima and evaluation of their biological activity", Journal of Food 42 Sc Science and Technology 55 (12), pp 5075-5081 Wang X, et al (2016), "Flavanols from the Camellia sinensis var assamica @ and their hypoglycemic and hypolipidemic activities", Acta Pharmaceutica ht Sinica B, pp 7(3):342-346 Wang X, et al (20217), "Fatty acid and sterol composition of tea seed oils: rig 43 py Their comparison by the "FancyTiles" approach", Food Chemistry 233, pp Co 44 302-310 Wei JB, et al (2015), "Characterization and determination of antioxidant components in the leaves of Camellia chrysantha (Hu) Tuyama based on compositioneactivity relationship approach", Journal of food and drug 45 Xiao TJ, et al ( 1991 VN U analysis 23 (1), pp 40-48 ), "Development and utilization of Camellia genus plant resources.", China's Wild Plant Resources 1, pp 44–45 Yang CS, et al (2002), "Inhibition of carcinogenesis by tea", Review of Pharmacology and Toxicology 42, pp 25–54 Yang XR, et al (2007), "Simultaneous analysis of purine alkaloids and dP rm 47 ac y, 46 catechins in Camellia sinensis, Camellia ptilophylla and Camellia assamica var kucha by HPLC", Food Chemistry 100, pp 1132–1136 48 Ye CX, et al (1997), "Isolation and analysis of purine alkaloids from Camellia ptilophylla Chang ", Acta Scientiarum Naturalium Universitatis Zheng XQ, et al (2002), "Theacrine (1,3,7,9- tetramethyluric acid) synthesis ine 49 an Sunyatseni 36, pp 30–33 in leaves of a Chinese tea, kucha (Camellia assamica var kucha)", Co py rig ht @ Sc ho ol of M ed ic Phytochemistry 60, pp 129–134 ac y, VN U PHỤ LỤC Phụ lục 1: Kết giám định tên khoa học dP rm Phụ lục 2: Bộ liệu phổ hợp chất CC1 Co py rig ht @ Sc ho ol of M ed ic ine an Phụ lục 3: Bộ liệu phổ hợp chất CC5 Co py rig ht @ Sc ho ol of M ed ic ine an dP rm ac y, VN U PHỤ LỤC 1: KẾT QUẢ GIÁM ĐỊNH TÊN KHOA HỌC U N ,V PHỤ LỤC 2: BỘ DỮ LIỆU PHỔ CỦA HỢP CHẤT CC1 m r a y c a h P d n a e l o o @ t h p o C g i r y h c S M f o ed n i ic U N ,V y c a m r a h P d n a e l o o @ t h p o C g i r y h c S M f o ed n i ic ht rig py Co @ ho ol Sc of M ine ed ic ac y, dP rm an VN U PHỤ LỤC 3: BỘ DỮ LIỆU PHỔ CỦA HỢP CHẤT CC5 m r a y c a h P d n a e l o o @ t h p o C g i r y h c S M f o ed n i ic U N ,V U N ,V y c a m r a h P d n a e l o o @ t h p o C g i r y h c S M f o ed n i ic U N ,V y c a m r a h P d n a e l o o @ t h p o C g i r y h c S M f o ed n i ic ht rig py Co @ ho ol Sc of M ine ed ic ac y, dP rm an VN U