Ứng dụng của CNSH trong tạo nguồn hoa huệ sạch bệnh

Phần I. Mở đầu Phần II. Nội dung Giới thuệ về hoa huệ Tây Trắng Tạo cây sạch bệnh bằng phương pháp nuôi cấy vảy củ

Đề tài: “Ứng dụng của CNSH trong tạo nguồn hoa huệ sạch bệnh”

Giáo viên hướng dẫn: Lã Thị NguyệtSinh viên thực hiện : Nhóm6

Nguyễn Thị Gấm

Đàm Thị Thu Hương Đỗ Thị Hồng

Vũ Thị Thoa

Nguyễn Thị Tươi Nguyễn Thị Trà

Lớp: 9k3

Cây huệ trắng được trồng phổ biến ở Đồng Bằng Sông Cửu Long và mang lại thu nhập khá cao cho người trồng, đặc biệt là vào các dịp lễ, tết Người dân thường lấy giống bằng kỹ thuật nhân giống truyền thống, chủ yếu là tách lấy củ trồng Điều này đã làm lây lan các mầm bệnh có sẵn trong củ, giảm năng suất và phẩm chất hoa

Những năm gần đây, hoa huệ bị nhiễm bệnh chai bông nên cho hoa xấu hoặc hoa bị biến dạng, gây thiệt hại kinh tế khá lớn cho nông dân

Chính vì vậy các nhà chọn tạo giống đã “ Ứng

dụng CNSH tạo nguồn hoa huệ sạch bệnh bằng phương pháp nuôi cấy phân sinh mô chồi hoặc nuôi cấy vảy củ”

1.Giới thiệu về hoa huệ tây trắng

2 Tạo cây sach bệnh bằng phương pháp nuôi cấy vẩy củ2.1 Vật liệu và phương pháp nuôi cấy

2.1.1 Vật liệu nuôi cấy

2.1.2 Phương pháp nuôi cấy invitro

2.2 Nhân nhanh giống cây con bằng phương pháp tách vẩy củ

2.3 Tái sinh cây hoàn chỉnh

2.4 Đưa cây ra khỏi ống nghiệm và chế độ chăm sóc cây con

2.4.1 Đưa cây ra khỏi ống nghiệm 2.4.2 Chế độ chăm sóc cây con

3 Tạo cây sạch bệnh bằng phương pháp phục tráng giống

3.1 Phục hồi giống hoa huệ tây nhiễm bệnh chai bông bằng công nghệ tế bào nuôi cấy mô phân sinh chồi

*Hoa huệ tây (Lilium longiflorum, Liliaceae) là một

loại hoa có kích thước lớn, mùi thơm mát dịu, có nhiều màu sắc đẹp

*Ở Việt Nam, giống hoa Huệ tây trắng được trồng nhiều ở Đà Lạt, Hà Nội và một số tỉnh phía Bắc

*Mấy năm gần đây, hoa Huệ tây là mặt hàng xuất khẩu cho nên việc cung cấp giống hoa chất lượng tốt cho sản xuất trở thành một vấn đề quan tâm

*Do được nhập trồng ở Đà Lạt đã nhiều năm, không được định kỳ phục tráng giống nên hiện nay giống Huệ tây Đà Lạt đang trên đà thoái hoá trầm trọng do các bệnh virus gây ra, đặc biệt là các bệnh virus khảm lá

* Huệ tây hiện được trồng bằng củ nên tốc độ nhân giống chậm, cần nghiên cứu những phương pháp nhân nhanh gống Huệ tây bằng con đường nuôi cấy vẩy củ

2.1 Vật liệu và phương pháp nuôi cấy

2.1.1 Vật liệu nuôi cấy

- V t li u bao g m: V y c ật liệu bao gồm: Vảy củ ệu bao gồm: Vảy củ ồm: Vảy củ ảy củ ủ hoa hu tâyệu bao gồm: Vảy củ

Hình2: Củ Huệ Tây

2.1 V t li u và phật liệu bao gồm: Vảy củ ệu bao gồm: Vảy củ ương pháp nuôi cấyng pháp nuôi c yấy

2.1.2 Phương pháp nuôi cấy

Tách lấy vẩy của củ hoa Huệ, rửa sạch bằng xà phòng, sau đó rửa qua cồn 700 trong 40 giây, dùng nước cất vô trùng rửa lại từ 3 đến 6 lần và cuối cùng vẩy được khử trùng bằng HgCl2 (2%) trong 5 phút Trước khi sử dụng, dùng nước cất vô trùng rửa sạch vẩy để tránh chết mẫu

* Các mẫu vô trùng được đặt vào môi trường nuôi, đựng trong ống nghiệm đóng chặt bằng nút bông đã được khử trùng ở 1210C (1 atm)

*Điều kiện phòng nuôi cấy: ánh sáng (3000 lux), số giờ chiếu sáng: 16h/ngày, nhiệt độ từ 23 – 250C

* Sau khoảng thời gian nuôi các mẫu vẩy trong điều kiện từ 5 đến 8 tuần, chúng tôi nhận được từ 4-6 chồi trên một vẩy, các chồi này tiếp tục phát triển thành cây non với rễ phát triển mạnh

* Môi trường nuôi cấy là môi trường MS (Murashige-Skoog, 1962) đã được cải tiến, có thành phần như bảng 1

Thành phần

Nồng độ (mg/l)

Thành phần

Nồng độ (mg/l)

Thành phần

Nồng độ (mg/l)

NH4NO3825 KI 0,415 Thiamin 0,1

950 H3BO33,1 Các chất hữu cơ

CaCl2.2H2O 440 MnSO4.4H2O 11,5 Saccharose 20g/l MgSO4 7H2O 185 ZnSO4.7H2O 4,3 Thạch 8g/l KH2PO485 Na2MoO4.4H2O 0,125 pH = 5,6 - 6,0

CuSO4.5H2O0,0125 CoCl2.6H2O 0,0125 Na2EOTA 37,3 FeSO4.7H2O27,8

Bảng 1: Môi trường MS đã được cải tiến

Để tăng hệ số nhân giống cũng như làm sạch bệnh của cây cần tiếp tục tiến hành tách vẩy từ những cây con thu được trong ống nghiệm và cấy trong môi trường tương tự Môi trường nhân chồi là môi trường MS có bổ sung 0.5-1 ml IBA, và 30 g/l đường

Sau khi hình thành chồi thì cấy chuyển sang môi trường nhân chồi để nhân chồi với số lượng lớn.

Hình 3 : Kết quả sau quá trình nhân nhanh

Kết quả thu được nhiều cây con có đủ lá (Hình 3)

2.3 Tái sinh cây hoàn chỉnh

2.4.1 Đ a cây ra kh i ng nghi mưa cây ra khỏi ống nghiệmỏi ống nghiệm ống nghiệmệm

* Đ h n ch đ t r khi ra cây, nên gi m n ng đ ể hạn chế đứt rễ khi ra cây, nên giảm nồng độ ạn chế đứt rễ khi ra cây, nên giảm nồng độ ế đứt rễ khi ra cây, nên giảm nồng độ ứt rễ khi ra cây, nên giảm nồng độ ễ khi ra cây, nên giảm nồng độ ảy củ ồm: Vảy củ ộ th ch c a môi trạn chế đứt rễ khi ra cây, nên giảm nồng độ ủ ường nuôi cấy những cây chuẩn bị ng nuôi c y nh ng cây chu n b ấy ững cây chuẩn bị ẩn bị ị đ a ra đ t xu ng 7g/l ư ấy ống 7g/l

* Cây con l y t ng nghi m đấy ừ ống nghiệm được rửa nhẹ nhàng ống 7g/l ệu bao gồm: Vảy củ ược rửa nhẹ nhàng c r a nh nhàng ửa nhẹ nhàng ẹ nhàng b ng nằng nước sạch cho hết lớp thạch bám quanh gốc ước sạch cho hết lớp thạch bám quanh gốc c s ch cho h t l p th ch bám quanh g c ạn chế đứt rễ khi ra cây, nên giảm nồng độ ế đứt rễ khi ra cây, nên giảm nồng độ ớc sạch cho hết lớp thạch bám quanh gốc ạn chế đứt rễ khi ra cây, nên giảm nồng độ ống 7g/l

2.4.2 Chế độ chăm sóc cây con

* Để diệt các côn trùng hại củ, phải bơm thuốc Basudin, Furadan vào trong đất Trong 15 ngày đầu, cây con cần được che nắng và mỗi ngày được tưới một lần bằng dung dịch dưỡng Knôp pha loãng 50% (Knudson C)

* Theo dõi và phun thuốc trừ sâu bệnh

* Trong vòng 6 tháng, cây ra hoa và cho thu hoạch hoa đồng loạt.

* Cây được trồng vào khay đựng loại đất cát thịt hoặc đất pha cát, trộn lẫn với phân chuồng và phân hoá học

Phục hồi giống hoa huệ tây nhiễm bệnh chai bông bằng công nghệ tế bào nuôi cấy mô phân sinh chồi”

phải hết sức tỉ mỉ và công phu.

tách lấy củ huệ để phân lập sinh mô chồi Phân sinh mô chồi (còn gọi là đỉnh sinh trưởng) là nơi tận cùng của chồi hoặc rễ Khi phân sinh mô chồi phát triển, nó có thể phát sinh chồi, lá non hoặc hoa

* Để phân lập sinh mô chồi, các nhà khoa học đã dùng 2 biện pháp: phân lập trực tiếp từ chồi ngọn được lấy ngoài đồng và phân lập gián tiếp từ nuôi cấy mầm trong ống nghiệm Các phân sinh mô chồi sau khi phân lập, được nuôi cấy trong ống nghiệm với các chất điều hòa sinh trưởng và các chất dinh dưỡng để tạo ra cây con

mang ra trồng trực tiếp ở môi trường bên ngoài, tỷ lệ chết rất cao, do môi trường nuôi cấy mô và môi trường bên ngoài rất khác biệt.

Do đó, để tăng tỷ lệ sống của cây khi đem ra ngoài thì cây phải trải qua thời gian tập thích nghi dần với điều kiện môi trường mới Giai đoạn này được gọi là thuần dưỡng cây con Sau khi được thuần dưỡng trong nhà lưới, cây con được trồng thử nghiệm ở ngoài đồng.

* Quy trình nhân nhanh giống hoa Huệ tây bằng phương pháp nuôi cấy vẩy củ cho phép tạo ra được số lượng lớn cây giống trong thời gian ngắn, phục tráng giống hoa Huệ tây Đà Lạt đang trên đà thoái hoá hiện nay

giống theo từng thời vụ trong năm, để bảo quản giống khi cần thiết, đồng thời có thể thu hoạch hoa đồng loạt đáp ứng nhu cầu xuất khẩu

*Hiện nay ngoài loài hoa huệ tây đang được ưa chuộng thì còn có những loài hoa huệ khác ( họ của hoa huệ tây ) cũng được thị trường ưa chuộng và quan tâm như: hoa loa kèn, hoa lily

*Các loại hoa này đa dạng về chủng loại và phong phú về màu sắc

The end!