BÁO CÁO TIẾN ĐỘ NGHIÊN CỨU SINH PHẦN I. BÁO CÁO TIẾN ĐỘ THỰC HIỆN LUẬN ÁN

TRƯỜNG ĐẠI HỌC DƯỢC HÀ NỘI PHÒNG ĐÀO TẠO SAU ĐẠI HỌC BÁO CÁO TIẾN ĐỘ NGHIÊN CỨU SINH PHẦN I BÁO CÁO TIẾN ĐỘ THỰC HIỆN LUẬN ÁN Họ tên NCS: Phạm Văn Hiển Năm trúng tuyển: 2016 Cơ quan công tác: Trung tâm Nghiên cứu ứng dụng sản xuất thuốc Học viện Quân y Tiến độ học tập a Những môn học bổ túc kiến thức (nếu có): Đã hồn thành 09 mơn học bổ sung b Môn học học phần tiến sĩ: hồn thành 04 mơn học học phần đào tạo TS Tên luận án: “Tổng hợp đánh giá tác dụng sinh học số hợp chất chứa khung adamantan” Chuyên ngành: Hóa dược Mục tiêu luận án: - Tổng hợp khoảng 40-50 chất chứa khung adamantan - Đánh giá tác dụng sinh học số hợp chất tổng hợp in vitro Nội dung dự kiến luận án - Tổng hợp hợp chất azomethin mang khung adamantan - Tổng hợp hợp chất benzylidenehydrazinecarbothioamid mang khung adamantan - Tổng hợp hợp chất carbohydrazid mang khung adamantan - Thử hoạt tính sinh học hợp chất mang khung adamantan tổng hợp được: tác dụng kháng vi sinh vật, tác dụng ức chế men AChE, tác dụng ức chế tế bào ung thư… Các kết đạt được: Đã tổng hợp 53 chất mang khung adamantan thử tác dụng kháng khuẩn, kháng nấm ức chế số dòng tế bào ung thư So sánh kết với kế hoạch đặt ra: hoàn thiện nội dung nghiên cứu theo đề cương Hiện chuẩn bị chuyên đế TS tiểu luận tổng quan để báo cáo PHẦN II BÁO CÁO TOÀN VĂN BÀI BÁO KHOA HỌC TỔNG HỢP VÀ THĂM DÒ TÁC DỤNG SINH HỌC MỘT SỐ HỢP CHẤT THIOSEMICARBAZON MANG KHUNG ADAMANTAN Phạm Văn Hiển1,2, Vũ Bình Dương2 Hướng dẫn khoa học: GS.TSKH Phan Đình Châu3, PGS.TS Phan Thị Phương Dung4 NCS, Trường Đại học Dược Hà Nội Trung tâm Nghiên cứu Ứng dụng Sản xuất thuốc, Học viện Quân y Viện Kỹ thuật Hóa học, Trường Đại học Bách Khoa Hà Nội Bộ mơn Hóa dược, Trường Đại học Dược Hà Nội Summary A new series of thiosemicarbazones containing adamantan skeleton was synthesized via the condensation of 4-(1-adamantyl)-3 thiosemicarbazide with substituted benzaldehydes and acetophenones Synthesized compounds structure was characterized by ESI-MS, 1HNMR and 13C-NMR The novel synthesized thiosemicarbazones were evaluated for their antimicrobial, anticancer All them showed the significant activity against tested Gram positive microbial with MIC of 12.5-100 μM and IC 50 of 4.12-47.89 μM; and good activity against C albicans with MIC of 6.25-25 μM and IC 50 of 3.22-7.89 μM Among them, compound 2d and 2h showed good activity against four tested cancer cell lines at concentration of 100 μM; compound 2g, 2j, 2k showed significant inhibition against two per four tested cancer cell lines Keywords: thiosemicarbazone, cytotoxicity 4-(1-adamantyl)-3 thiosemicarbazide, antimicrobial, I ĐẶT VẤN ĐỀ Các hợp chất chứa khung adamantan có nhiều tác dụng sinh học: kháng virus, kháng khuẩn, điều trị alzheimer Các dẫn xuất chứa khung adamantan năm gần quan tâm có nhiều bước phát triển Ngồi ra, hợp chất thiosemicarbazon có nhiều hoạt tính đáng quý giảm đau, chống viêm, chống co giật… bật tác dụng kháng khuẩn gây độc tế bào Nhằm mục đích tìm kiếm sàng lọc hợp chất có tác dụng kháng vi sinh vật gây bệnh gây động tế bào ung thư, mong muốn kết hợp hai hợp phần: khung adamantan với thiosemicarbazon để tạo hợp chất với tác dụng mạnh Trong nghiên cứu này, công bố số kết đạt II NGUYÊN LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 2.1 Nguyên vật liệu Các hóa chất sử dụng cho tổng hợp: 4-(1-Adamantyl)-3-thiosemicarbazide (TQ, 99,9%) đạt tiêu chuẩn nhà sản xuất (Hyperchem jsc.); Các dung môi methanol, ethanol, dichloromethan, cloroform, benzen, acid acetic, acid thioglycolic… cung cấp Fischer, Merck Sigma sử dụng trực tiếp mà tinh chế thêm Các máy móc, thiết bị: Máy đo điểm chảy BOETIUS-MK (Đức) Học viện Quân y; Hệ thống đo phổ cộng hưởng từ hạt nhân Brucker AC 500, máy đo quang phổ FT-IR 1000 (Varian, Mỹ), máy phổ khối 5989 B MS Viện Hóa học – Viện Hàn lâm Khoa học Công nghệ Việt Nam, thiết bị khác cần thiết cho thí nghiệm Trung tâm nghiên cứu ứng dụng sản xuất thuốc Học viện Qn y: bình nón, ống mao quản đo điểm chảy, phễu lọc, loại bình cầu… 2.2 Phương pháp nghiên cứu Con đường tổng hợp hợp chất thiosemicarbazon mang khung adamantan trình bày hình Hình Sơ đồ phản ứng tổng hợp Phản ứng tổng hợp Cho mmol dẫn chất benzaldehyd acetophenon mmol (0,23 g) 4(1adamantyl)-3-thiosemicarbazid 20 ml MeOH vào bình cầu cổ, đun nóng nhẹ để tan hết thành phần, thêm acid acetic băng để điều chỉnh pH hỗn hợp từ 4-5 đun hồi lưu Trong trình phản ứng, kiểm tra sắc ký lớp mỏng (hệ dung môi cloroform:aceton, 95:5; phát vết soi ánh sáng đèn tử ngoại bước sóng 254 nm, sau kiểm tra thuốc thử Dragendoff) Đến hết 4-(1-adamantyl)-3-thiosemicarbazid, hỗn hợp phản ứng bốc dung môi thu hỗn hợp chất rắn Chất rắn rửa MeOH lạnh để loại phần benzaldehyd chưa tham gia phản ứng Chất rắn thu sau rửa đưa kết tinh lại MeOH, rửa tinh tinh thể MeOH lạnh sấy nhẹ nhiệt độ 50°C đến khối lượng không đổi thu sản phẩm Phương pháp xác định độ tinh khiết sản phẩm Phương pháp sắc ký lớp mỏng: chấm sản phẩm mỏng silicagen F 254 tráng sẵn, khai triển sắc ký với hệ dung môi n-hexan: aceton (4:1), màu đèn tử ngoại bước sóng 254 nm thuốc thử Dragendoff Nhiệt độ nóng chảy: xác định máy đo điểm chảy MP50 Melting point (Mettler Toledo) Phương pháp xác định cấu trúc hợp chất tổng hợp Cấu trúc chất xác định qua phổ khối lượng MS đo máy SCIEX X500 QTOF, phổ cộng hưởng từ hạt nhân 1H-NMR 13C-NMR Viện Hóa học – Viện Hàn lâm Khoa học Công nghệ Việt Nam máy Bruker AC 500, dung mơi DMSO, chuẩn nội tetramethylsilan Phương pháp thăm dị số tác dụng sinh học Tác dụng kháng số vi sinh vật gây bệnh Hoạt tính kháng vi sinh vật kiểm định thực dựa phương pháp pha loãng đa nồng độ [2] Đây phương pháp thử hoạt tính kháng VSVKĐ nấm nhằm đánh giá mức độ kháng khuẩn mạnh yếu mẫu thử thơng qua giá trị thể hoạt tính MIC (nồng độ ức chế tối thiểu) Mẫu ban đầu pha loãng DMSO dải nồng độ giảm dần: 100mM, 50μM, 25μM, 12,5 μM, 6.25 μM, 3.125 μM, 1.5625 μM 0.78125 μM với số thí nghiệm lặp lại N=3 Chuẩn bị dung dịch vi khuẩn nấm với nồng độ 2×105CFU/ml Tiến hành thử: lấy µl dung dịch mẫu thử có nồng độ 100mM vào hàng có chứa 100µl mơi trường LB pha lỗng nối tiếp giảm ½ nồng độ vào hàng có chứa 50µl đạt nồng độ 0.78125µM, thêm 50 µl dung dịch vi khuẩn nấm nồng độ 2×105 CFU/ml, ủ 37oC Sau 24h xác định sơ giá trị MIC quan sát Giá trị MIC xác định giếng có nồng độ chất thử thấp gây ức chế hoàn toàn phát triển vi sinh vật sau 24 ni cấy xác định xác dựa số liệu đo độ đục tế bào máy quang phổ Bioteck phần mềm Raw data Chất đối chứng kháng sinh Streptomycin cho chủng vi khuẩn, cyclohexamide cho nấm Tác dụng ức chế số dịng tế bào ung thư Tế bào ni cấy 48 môi trường RPMI 1640 DMEM 37 oC, 5% CO2 với 10% FBS, penicillin (100 units/mL) streptomycin (100µg/mL) Sau chúng ni cấy giếng phiến 96 với thể tích 200 µl, mật độ 2-5 x 10 tế bào/giếng (tuỳ loại tế bào) Sau 24 giờ, chúng thử với hợp chất pha sẵn nồng độ khác DMSO Sau 72h, cho phản ứng với 0.5 mg/mL µl MTT, ủ 4h 37 oC 5% CO2 Sau hút bỏ hết mơi trường bề mặt, kết tủa formazan hòa tan isopropanol Độ hấp thụ đo 570 nm Camptothecin sử dụng làm đối chứng dương % tế bào sống sót (CS%) tính theo cơng thức Với OD mật độ quang, σ: độ lệch chuẩn III KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU 3.1 Kết tổng hợp hóa học Tiến hành phản ứng theo mô tả mục phương pháp nghiên cứu Kết thu 21 hợp chất thiosemicarbazon mang khung adamantan 3.1.1 Kết xác định tính chất lý hóa Bảng Một số đặc tính lý hóa hợp chất tổng hợp Hợp chất R1 R2 2a 2b 2c 2d 2e 2f 2g 2h 2i 2j 2k 3a 3b 3c 3d 3e 3f 3g 3h 3i 3j H H H H H H H 2-OH 3-NO2 3-NO2 2-CH3 H H H H H 3-NO2 H H 3-NO2 3-NO2 H 3-NO2 4-OCH3 2-OH 4-NO2 4-OC2H5 4-Cl 5-CH3 4-OC2H5 4-Cl 5-CH3 H 3-NO2 4-Br 4-OH 4-NO2 4-Br 4-Cl 4-CH3 4-OCH3 4-Cl Hiệu suất (%) 97,0 92,7 95,7 95,7 91,3 95,6 89,6 91,0 61,2 78,5 92,5 91,8 67,0 65,5 44,3 90,4 17,5 94,0 73,5 69,3 49,8 m.p (°C) CTPT (MW) Rf 210,1-212,2 244,2-246,1 224,5-227,7 203,8-205,6 258,1-260,1 232,2-233,6 238,9-239,7 241,6-242,5 218,7-220,7 252,8-254,0 212,4-213,8 231,2-232,7 251,7-253,5 240,9-242,9 272,8-273,5 266,5-268,9 224,5-225,3 235,0-236,3 230,3-232,2 224,6-226,3 250,9-252,4 C18H23N3S (313,46) C18H22N4O2S (358,46) C19H25N3OS (343,49) C18H23N3OS (329,46) C18H22N4O2S (358,46) C20H27N3OS (357,52) C18H22ClN3S (347,91) C19H25N3OS (343,49) C20H26N4O3S (402,51) C18H21ClN4O2S (392,90) C20H27N3S (341,52) C19H25N3S (327,49) C19H24N3O2S (372,49) C19H24BrN3S (406,39) C19H25N3OS (343,49) C19H24N4O2S (372,49) C19H23BrN4O2S (451,38) C19H24ClN3S (361,93) C20H27N3S (341,52) C20H26N4O3S (402,51) C19H23ClN4O2S (406,93) 0,46 0,38 0,50 0,46 0,43 0,54 0,68 0,54 0,64 0,53 0,68 0,46 0,47 0,46 0,53 0,50 0,53 0,58 0,36 0,45 0,54 3.1.2 Kết xác định cấu trúc phân tích phổ N-(adamantan-1-yl)-2-benzylidene)hydrazine-1-carbothioamid (2a): 1H-NMR (500 MHz, DMSO-d6, δ ppm): 11,29 (1H, s, -CS-NH-N); 8,08 (1H, s, N=CH); 7,67-7,66 (2H, dd, J1= 2,0 Hz, J2= 7,5 Hz, H3, H5); 7,49 (1H, s, C-NH-CS); 7,43-7,44 (1H, m, H4); 7,42-7,41 (2H, m, H2, H6); 2,80 (6H, m, CH2-ad); 2,08 (3H, m , CH-ad); 2,80 (6H, m, CH2-ad); 13C-NMR (500 MHz, DMSO-d6, δ ppm): 174,6 (1C, CS); 141,4 (1C, CH=N); 133,8 (1C, C1); 129,9 (1C, C4); 128,8 (2C, C3, C5); 126,9 (2C, C2, C6); 53,0 (1C, C-N); 40,9 (3C, CH 2-Ad); 35,9 (3C, CH2-Ad); 29,0 (3C, CH-Ad) HR-MS (m/z): [M+1]+= 314,1676 N-(adamantan-1-yl)-2-(3-nitro benzylidene)hydrazine-1-carbothioamid (2b): 1HNMR (500 MHz, DMSO-d6, δ ppm): 11,50 (1H, s, -CS-NH-N); 8,43 (1H, t, J1= 1,5 Hz, J2= 8,5 Hz, N=CH); 8,21-8,23 (1H, dd, J1= 2,0 Hz, J2= 7,5 Hz, H1); 8,15-8,18 (2H, m, H4, H6); 7,73-7,70 (1H, t, J1= 8,0 Hz, J2= 16,0 Hz, H5); 7,56 (1H, s, C-NH-CS); 2,29 (6H, m, CH2-ad); 2,09 (3H, m , CH-ad); 1,68 (6H, m, CH2-ad) 13C-NMR (500 MHz, DMSO-d6, δ ppm): 174,8 (1C, CS); 148,2 (1C, C3); 139,0 (1C, CH=N); 135,8 (1C, C1); 132,7 (1C, C6); 130,3 (1C, C5); 124,0 (1C, C4); 121,3 (1C, C2); 53,2 (1C, C-N); 40,7 (3C, CH2-Ad); 35,9 (3C, CH2-Ad); 29,0 (3C, CH-Ad) ESI-MS (m/z): [M+1]+= 358,9; [M-1]- = 356,9 N-(adamantan-1-yl)-2-(4-methoxy benzylidene)hydrazine-1-carbothioamid (2c): 1HNMR (500MHz, DMSO-d6, δ ppm): 11,16 (1H, s, -CS-NH-N); 8,02 (1H, s, N=CH); 7,62-7,60 (2H, d, J= 9,0 Hz, H2, H6); 7,44 (1H, s, C-NH-CS); 6,99-6,97 (2H, d, J = 8,5 Hz, H3, H5); 3,79 (3H, s, OCH3); 2,27 (6H, m, CH2-ad); 2,08 (3H, m , CH-ad); 1,67 (6H, m, CH 2-ad) 13CNMR (500MHz, DMSO-d6, δ ppm): 174,4 (1C, CS); 160,7 (1C, C4); 141,4 (1C, CH=N); 128,5 (2C, C2, C6); 126,4 (1C, C1); 114,3 (2C, C3, C5); 55,2 (1C, OCH3); 52,9 (1C, C-N); 41,0 (3C, CH2-Ad); 35,9 (3C, CH2-Ad); 29,0 (3C, CH-Ad) ESI-MS [m/z]: [M+1]+= 343,9; [M-1]- = 341,9 N-(adamantan-1-yl)-2-(2-hydroxy benzylidene)hydrazine-1-carbothioamid (2d): 1HNMR (500MHz, DMSO-d6, δ ppm): 11,23 (1H, s, -CS-NH-N); 9,97 (1H, s, OH); 8,37 (1H, s, N=CH); 7,68-7,67 (1H, d, J = 7,5 Hz, H6); 7,46 (1H, s, C-NH-CS); 7,23-7,20 (1H, t, J1 = 7,5Hz; J2 = 15,0 Hz, H4); 6,88-6,87 (1H, d, J = 7,5 Hz, H3); 6,85-6,82 (1H, t, J1 = 7,5 Hz; J2 = 15,0 Hz, H5); 2,27 (6H, m, CH2-ad); 2,07 (3H, m , CH-ad); 1,66 (6H, m, CH2-ad) 13C-NMR (500 MHz, DMSO-d6, δ ppm): 174,5 (1C, CS); 156,5 (1C, C2); 138,5 (1C, CH=N); 131,0 (1C, C4); 125,9 (1C, C6); 120,3 (1C, C5); 119,3 (1C, C1); 116,1 (1C, C3); 52,9 (1C, C-N); 41,0 (3C, CH2-Ad); 35,9 (3C, CH2-Ad); 29,0 (3C, CH-Ad) HR-MS [m/z]: [M+1]+= 330,0; [M-1]- = 327,9 N-(adamantan-1-yl)-2-(4-nitro benzylidene)hydrazine-1-carbothioamid (2e): 1HNMR (500MHz, DMSO-d6, δ ppm): 11,56 (1H, s, -CS-NH-N); 8,25-8,23 (2H, d, J = 8,5 Hz, H3, H5); 8,15 (1H, s, N=CH); 7,95-7,93 (2H, d, J = 9,0 Hz, H2, H6); 7,57 (1H, s, C-NH); 2,29 (6H, m, CH2-ad); 2,09 (3H, m , CH-ad); 1,66 (6H, m, CH2-ad) 13C-NMR (500MHz, DMSOd6, δ ppm): 174,8 (1C, CS); 147,6 (1C, C4); 140,3 (1C, CH=N); 138,8 (1C, C1); 127,8 (2C, C2, C6); 123,9 (2C, C3, C5); 53,3 (C-NH); 40,7 (3C, CH2-Ad); 35,9 (3C, CH2-Ad); 29,0 (3C, CH-Ad) ESI-MS [m/z]: [M+1]+= 358,9; [M-1]- = 356,9 N-(adamantan-1-yl)-2-(4-ethoxy benzylidene)hydrazine-1-carbothioamid (2f): 1HNMR (500MHz, DMSO-d6, δ ppm): 11,16 (1H, s, -CS-NH-N); 8,01 (1H, s, N=CH); 7,60-7,58 (2H, d, J = 8,6 Hz, H2,H6); 7,43 (1H, s, C-NH); 6,97-6,95 (2H, d, J = 8,5; H3, H5); 4,07-4,05 (2H, d, J = 7,0 Hz, OCH2); 2,27 (6H, m, CH2-ad); 2,08 (3H, m , CH-ad); 1,66 (6H, m, CH2-ad); 1,35-1,32 (3H, t, J1 = 7,0 Hz, J2 = 14,0 Hz, CH2-CH3) 13C-NMR (500MHz, DMSO-d6, δ ppm): 174,4 (1C, CS); 160,0 (1C, C4); 141,5 (1C, CH=N); 128,5 (2C, C2, C6); 126,2 (1C, C1); 114,7 (2C, C3, C5); 63,2 (1C, OCH2); 52,8 (C-NH); 41,0 (3C, CH2-Ad); 35,9 (3C, CH2-Ad); 29,0 (3C, CH-Ad); 14,5 (1C, CH2CH3) ESI-MS [m/z]: [M+1]+= 358,0; [M-1]- = 355,9 N-(adamantan-1-yl)-2-(4-chloro benzylidene)hydrazin-1-carbothioamid (2g): 1HNMR (500MHz, DMSO-d6, δ ppm): 11,34 (1H, s, -CS-NH-N); 8,05 (1H, s, N=CH); 7,70 (2H, d, J = 8,5 Hz, H2, H6); 7,47 (2H, d, J = 8,5 Hz, H3, H5); 7,48 (1H, s, NH-C); 2,28 (6H, m, CH2-ad); 2,08 (3H, m , CH-ad); 1,66 (6H, m, CH2-ad) 13C-NMR (500MHz, DMSO-d6, δ ppm): 174,7 (1C, CS); 140,1 (1C, CH=N); 134,3 (1C, C4); 132,8 (1C, C1); 128,8 (2C, C2, C6); 128,6 (2C, C3, C5); 53,1 (C-NH); 40,9 (3C, CH2-Ad); 35,9 (3C, CH2-Ad); 29,0 (3C, CH-Ad) ESIMS [m/z]: [M+1]+= 347,9; [M-1]- = 345,9 N-(adamantan-1-yl)-2-(2-hydroxy 5-methyl benzylidene)hydrazine-1-carbothioamid (2h): H-NMR (500MHz, DMSO-d6, δ ppm): 11,20 (1H, s, -CS-NH-N); 9,73 (1H, s, OH); 8,34 (1H, s, N=CH); 7,45 (1H, s, C-NH); 7,44 (1H, s, H6); 7,04-7,02 (1H, dd, J1 = 2,0 Hz, J2 = 8,5 Hz, H4); 6,78-6,76 (1H, d, J = 7,5 Hz, H3); 2,27 (6H, m, CH 2-ad); 2,21 (3H, s, CH3); 2,08 (3H, m , CH-ad); 1,66 (6H, m, CH2-ad) 13C-NMR (500MHz, DMSO-d6, δ ppm): 174,5 (1C, CS); 154,4 (1C, C2); 138,9 (1C, CH=N); 131,8 (1C, C4); 127,8 (1C, C5); 125,9 (1C, C6); 119,8 (1C, C1); 116,0 (1C, C3); 52,8 (C-NH); 40,9 (3C, CH2-Ad); 35,9 (3C, CH2-Ad); 28,9 (3C, CH-Ad); 20,0 (1C, CH3) ESI-MS [m/z]: [M+1]+= 344,0; [M-1]- = 341,9 N-(adamantan-1-yl)-2-(3-nitro 4-ethoxy benzylidene)hydrazine-1-carbothioamid (2i): H-NMR (500MHz, DMSO-d6, δ ppm): 11,34 (1H, s, -CS-NH-N); 8,16 – 8,15 (1H, d, J = 2,5 Hz, H2); 8,05 (1H, s, N=CH); 7,93-7,91 (1H, dd, J1 = 2,0 Hz, J2 = 8,5 Hz, H6); 7,48 (1H, s, C-NH); 7,39-7,37 (1H, d, J = 8,5 Hz, H5); 4,28-4,24 (2H, dd, J1 = 7,0 Hz; J2 = 14,0 Hz, OCH2); 2,28 (6H, m, CH2-ad); 2,08 (3H, m , CH-ad); 1,66 (6H, m, CH2-ad); 1,35-1,33 (3H, t, J1 = 7,0; J2 = 14,0 Hz, CH3) 13C-NMR (500MHz, DMSO-d6, δ ppm): 174,6 (1C, CS); 151,7 (1C, C4); 140,0 (1C, CH=N); 139,2 (1C, C3); 132,2 (1C, C6); 126,5 (1C, C1); 122,8 (1C, C2); 115,3 (1C, C5); 65,3 (1C, OCH2); 53,1 (C-NH); 40,8 (3C, CH2-Ad); 35,9 (3C, CH2-Ad); 29,0 (3C, CH-Ad); 14,2 (1C, CH3) ESI-MS [m/z]: [M+1]+= 403,0; [M-1]- = 400,9 N-(adamantan-1-yl)-2-(3-nitro 4-chloro benzylidene)hydrazine-1-carbothioamid (2j): 1H-NMR (500 MHz, DMSO-d6, δ ppm): 11,53 (1H, s, -CS-NH-N); 8,36 (1H, d, J = 1,0 Hz, N=CH); 8,09 (1H, s, H2); 8,0 (1H, d, J=8,0 Hz, H6); 7,79 (1H, d, J = 8,5 Hz, H5); 7,54 (1H, s, NH-C); 2,28 (6H, m, CH2-ad); 2,08 (3H, m , CH-ad); 1,66 (6H, m, CH2-ad) 13C-NMR (500 MHz, DMSO-d6, δ ppm): 174,8 (1C, CS); 148,1 (1C, C4); 137,9 (1C, CH=N); 134,7 (1C, C6); 131, (1C, C1); 131,3 (1C, C4); 125,0 (1C, C5); 123,2 (1C, C2); 53,3 (C-NH); 40,7 (3C, CH2-Ad); 35,9 (3C, CH2-Ad); 28,9 (3C, CH-Ad) ESI-MS [m/z]: [M+1]+= 392,9; [M-1]- = 390,9 N-(adamantan-1-yl)-2-(2,5 dimethyl benzylidene)hydrazin-1-carbothioamid (2k): H-NMR (500 MHz, DMSO-d6, δ ppm): 11,21 (1H, s, -CS-NH-N); 8,33 (1H, s, N=CH); 7,49 (1H, s, H6); 7,42 (1H, NH-C); 7,12 (1H, d, J = 8,0 Hz; H3; 7,11 (1H, d, J = 8,5 Hz, H4); 2,35 (3H,s, CH3); 2,29 (6H, m, CH2-ad); 2,27 (3H, s, CH3); 2,08 (3H, m , CH-ad); 1,66 (6H, m, CH213 C-NMR (500 MHz, DMSO-d6, δ ppm): 174,5 (1C, CS); 141,2 (1C, CH=N); 135,1 (1C, ad) C5); 133,7 (1C, C2); 131,5 (1C, C3); 130,9 (1C, C4); 130,3 (1C, C6); 127,0 (1C, C1); 52,9 (C-NH); 40,9 (3C, CH2-Ad); 35,8 (3C, CH2-Ad); 29,0 (3C, CH-Ad) ESI-MS [m/z]: [M+1]+= 342,0; [M-1]- = 340,0 N-(adamantan-1-yl)-2-(1- phenyl ethyliden) hydrazin-1-carbothioamid (3a) 1HNMR (500 MHz, DMSO-d6, δ ppm): 9,77 (1H, s, -CS-NH-N); 7,69 (2H, d, J = 8,5 Hz, H2, H6); 7,63 (1H, s, H4); 7,59 (2H, d, J = 8,5 Hz, H3, H5); 2,50 (3H, s, CH3); 2,29 (6H, s, CH-ad); 2,09 (3H,s , CH-ad); 1,68 (6H, s, CH2-ad) 13C-NMR (500 MHz, DMSO-d6, δ ppm): 175,5 (1C, CS); 147,1 (1C, N=C); 137,7 (1C, C1); 129,2 (1C, C4); 128,4 (2C, C2, C6); 126,0 (2C, C3, C5); 52,9 (C-NH); 40,8 (3C, CH2-Ad); 35,8 (3C, CH2-Ad); 28,9 (3C, CH-Ad); 14,2 (1C, CH3) ESI-MS [m/z]: [M+1]+= 325,9; [M-1]- = 328,0 N-(adamantan-1-yl)-2-(1-(3-nitro phenyl) ethyliden) hydrazin-1-carbothioamid (3b): H-NMR (500 MHz, DMSO-d6, δ ppm): 10,22 (1H, s, -CS-NH-N); 8,49 (1H, s, H2); 8,23 (1H, dd, J1=1,5 Hz, J2 = 8,0 Hz, H6); 8,19 (1H, d, J = 8,0 Hz, H4); 8,73 (1H, s, N H-C); 7,70 (1H, d, J = 8,0 Hz, H5); 2,37 (3H, s, CH3); 2,28 (6H, brs, CH-ad); 2,08 (3H, brs , CH-ad); 1,66 (6H, brs, CH2-ad) 13C-NMR (500 MHz, DMSO-d6, δ ppm): 175,7 (1C, CS); 148,1(1C, N=C); 144,8 (1C, C1); 139,5 (1C, C6); 132,4 (1C, C3); 130,2 (1C, C2); 123,6 (1C; C4); 120,5 (1C; C5); 53,2 (C-NH); 40,8 (3C, CH2-Ad); 35,9 (3C, CH2-Ad); 29,0 (3C, CH-Ad); 14,3 (1C, CH3) ESI-MS [m/z]: [M+1]+= 372,9; [M-1]- = 370,9 N-(adamantan-1-yl)-2-(1-(4-bromo phenyl) ethyliden) hydrazin-1-carbothioamid (3c): H-NMR (500 MHz, DMSO-d6, δ ppm): 9,77 (1H, s, -CS-NH-N); 7,70-7,68 (2H, d, J = 8,5 Hz, H2, H6); 7,63 (1H, s, NH-C); 7,60-7,59 (2H, d, J = 8,5 Hz, H3, H5); 2,29 (3H, s, CH3); 2,28 (3H, s, CH3); 2,09 (3H, m , CH-ad); 1,67 (6H, m, CH2-ad) 13C-NMR (500 MHz, DMSO-d6, δ ppm): 175,5 (1C, CS); 146,2 (1C, C=N); 136,9 (1C, C1); 131,4 (2C, C3, C5); 128,2 (2C, C2, C6); 122,7 (1C, C4); 53,1 (C-NH); 40,8 (3C, CH2-Ad); 35,9 (3C, CH2-Ad); 29,0 (3C, CH-Ad); 14,1 (1C, CH3) ESI-MS [m/z]: [M+1]+= 407,9; [M-1]- = 405,8 N-(adamantan-1-yl)-2-(1-(4-hydroxy phenyl) ethyliden) hydrazin-1-carbothioamid (3d): 1H-NMR (500 MHz, DMSO-d6, δ ppm): 9,83 (1H, s, -CS-NH-N); 7,64 (1H, s, NH-C); 7,59 (2H, d, J = 8,5 Hz, H2, H6); 6,79 (2H, d, J = 9,0 Hz, H3, H5); 2,24 (3H, s, CH3); 2,26 (6H, brs, CH-ad); 2,07 (3H, brs , CH-ad); 1,66 (6H, brs, CH2-ad) 13C-NMR (500 MHz, DMSO-d6, δ ppm): 175,3 (1C, CS); 158,8 (1C, C4), 147,7 (1C, N=C); 128,4 (1C, C1); 127,7 (2C, C2, C6); 115,3 (2C, C3, C5); 52,9 (C-NH); 41,0 (3C, CH2-Ad); 35,9 (3C, CH2-Ad); 29,0 (3C, CH-Ad); 14,1 (1C, CH3) ESI-MS [m/z]: [M+1]+= 344,0; [M-1]- = 341,9 N-(adamantan-1-yl)-2-(1-(4-nitro phenyl) ethyliden) hydrazin-1-carbothioamid (3e): 1H-NMR (500 MHz, DMSO-d6, δ ppm): 10,25 (1H, s, -CS-NH-N); 8,24 (2H, d, J = 9,0 Hz, H3, H5); 8,01 (2H, d, J = 9,0 Hz, H2, H6); 7,72 (1H, s, NH-C); 2,36 (3H, s, CH3); 2,28 (6H, brs, CH-ad); 2,09 (3H, brs , CH-ad); 1,66 (6H, brs, CH2-ad) 13C-NMR (500 MHz, DMSO-d6, δ ppm): 175,6 (1C, CS); 147,5 (1C, C4), 144,8 (1C, N=C); 144,0 (1C, C1); 127,3 (2C, C2, C6); 123.6 (2C, C3, C5); 53,3 (C-NH); 40,7 (3C, CH2-Ad); 35,9 (3C, CH2-Ad); 29,0 (3C, CH-Ad); 14,3 (1C, CH3) ESI-MS [m/z]: [M+1]+= 372,9; [M-1]- = 370,9 N-(adamantan-1-yl)-2-(1-(3-nitro 4-bromo phenyl) ethyliden) hydrazin-1carbothioamid (3f): 1H-NMR (500 MHz, DMSO-d6, δ ppm): 10,22 (1H, s, -CS-NH-N); 8,33 (1H, d, J = 1,5 Hz, H2); 7,95 (1H, dd, J1 = 1,5 Hz, J2 = 8,5 Hz, H6); 7,92 (1H, d, J =8,5 Hz, H5); 7,69 (1H, s, NH-C); 2,33 (3H, s, CH3); 2,28 (6H, s, CH-ad); 2,08 (3H, brs , CH-ad); 1,66 (6H, brs, CH2-ad) 13C-NMR (500 MHz, DMSO-d6, δ ppm): 175,5 (1C, CS); 149,9 (1C, C3); 143,9 (1C, N=C); 138,7 (1C; C6); 134,6 (1C; C1); 130,7 (1C; C5); 122,7 (1C; C2); 113,1 (1C, C4); 53,2 (C-NH); 40,6 (3C, CH2-Ad); 35,8 (3C, CH2-Ad); 28,9 (3C, CH-Ad); 14,0 (1C, CH3) ESI-MS [m/z]: [M+1]+= 452,9; [M-1]- = 450,8 N-(adamantan-1-yl)-2-(1- (4-chloro phenyl) ethyliden) hydrazin-1-carbothioamid (3g): H-NMR (500 MHz, DMSO-d6, δ ppm): 10,07 (1H, s, -CS-NH-N); 7,77 (2H, d, J = 8,5 Hz, H2, H6); 7,67 (1H, s, NH-C); 7,47 (2H, d, J = 8,5 Hz, H3, H5); 2,30 (3H, s, CH3); 2,28 (6H, s, CH-ad); 2,08 (3H,s , CH-ad); 1,66 (6H, s, CH2-ad) 13C-NMR (500 MHz, DMSO-d6, δ ppm): 175,5 (1C, CS); 146,0 (1C, N=C); 136,5 (1C, C1); 133,9 (1C, C4); 128,4 (2C, C2, C6); 127,9 (2C, C3, C5); 53,0 (C-NH); 40,8 (3C, CH2-Ad); 35,8 (3C, CH2-Ad); 28,9 (3C, CH-Ad); 14,1 (1C, CH3) ESI-MS [m/z]: [M+1]+= 361,9; [M-1]- = 359,9 N-(adamantan-1-yl)-2-(1- (4-methyl phenyl) ethyliden) hydrazin-1-carbothioamid (3h) H-NMR (500 MHz, DMSO-d6, δ ppm): 9,69 (1H, s, -CS-NH-N); 7,64 (2H, d, J = 7,5 Hz, H2, H6); 7,63 (1H, s, NH-C); 7,22 (2H, d, J = 7,0 Hz, H3, H5); 2,33 (3H, s, CH3); 2,29 (9H, s, CH3 & CH2-ad); 2,09 (3H, s , CH-ad); 1,68 (6H, s, CH2-ad) 13C-NMR (500 MHz, DMSO-d6, δ ppm): 175,6 (1C, CS); 147,1 (1C, N=C); 138,7 (1C, C4); 134,9 (1C, C1); 128,9 (2C, C3, C5); 125,8 (2C, C2, C6); 52,9 (C-NH); 40,9 (3C, CH2-Ad); 35,8 (3C, CH2-Ad); 28,9 (3C, CH-Ad); 20,5 (1C, CH3); 13,8 (1C, CH3) ESI-MS [m/z]: [M+1]+= 342,0 N-(adamantan-1-yl)-2-(1-(3-nitro methoxy phenyl) ethyliden) hydrazin-1carbothioamid (3i) 1H-NMR (500 MHz, DMSO-d6, δ ppm): 9,83 (1H, s, -CS-NH-N); 8,18 (1H, d, J = 2,0 Hz, H2); 8,02 (1H, dd, J1 = 2,0 Hz, J2 = 8,5 Hz, H6); 7,64 (1H, s, N H-C); 7,40 (1H, d, J = 9,0 Hz, H5); 2,32 (3H, s, CH3); 2,29 (6H, brs, CH-ad); 2,10 (3H, brs , CH-ad); 1,68 (6H, brs, CH2-ad) 13C-NMR (500 MHz, DMSO-d6, δ ppm): 175,4 (1C, CS); 152,3 (1C, C4); 144,9 (1C; N=C); 139,3 (1C; C3); 131,6 (1C, C6); 130,1 (1C, C1); 122,4 (1C, C2); 114,3 (1C, C5); 53,0 (C-NH); 40,7 (3C, CH2-Ad); 35,9 (3C, CH2-Ad); 28,9 (3C, CH-Ad); 14,0 (1C, CH3) ESI-MS [m/z]: [M+1]+= 403,0; [M-1]- = 400,9 N-(adamantan-1-yl)-2-(1-(4-chloro-3-nitrophenyl) ethyliden) hydrazin-1carbothioamid (3j) 1H-NMR (500 MHz, DMSO-d6, δ ppm): 10,22 (1H, s, -CS-NH-N); 8,38 (1H, d, J = 1,5 Hz, H2); 8,07-8,05 (1H, dd, J1 = 1,5 Hz, J2 = 8,5 Hz, H6); 7,8-7,9 (1H, d, J = 8,5 Hz, H5); 7,7 (1H, s, NH-C); 2,33 (3H, s, CH3); 2,28 (3H, s, CH3); 2,08 (3H, m , CH-ad); 1,66 (6H, m, CH2-ad) 13C-NMR (500 MHz, DMSO-d6, δ ppm): 175,5 (1C, CS); 147,8 (1C, C3); 143,8 (1C, C=N); 138,16 (1C, C6); 131,6 (1C, C1); 130,8 (1C, C4); 124,9 (1C, C5); 122,8 (1C, C2); 53,2 (C-NH); 40,6 (3C, CH2-Ad); 35,9 (3C, CH2-Ad); 28,9 (3C, CH-Ad); 14,0 (1C, CH3) ESI-MS [m/z]: [M+1]+= 406,9; [M-1]- = 404,9 3.2 Kết thăm dị hoạt tính sinh học 3.2.1 Hoạt tính kháng vi sinh vật gây bệnh Tiến hành thử hoạt tính kháng vi sinh vật hợp chất 2a-k 3a-j Các chủng vi sinh vật kiểm định chuẩn quốc tế ATCC: chủng vi khuẩn Gram – (Escherichia coli ATCC25922, Pseudomonas aeruginosa ATCC27853, Salmonella enterica ATCC12228), chủng Gram + (Enterococcuc faecalis ATCC13124, Stapphylococus aureus ATCC25923, Bacillus cereus ATCC 13245), chủng nấm men Candida albicans ATCC10231 cung cấp viện Kiểm nghiệm vệ sinh an toàn thực phẩm quốc gia Kết thử hoạt tính kháng vi sinh vật gây bệnh hợp chất tổng hợp nghiên cứu trình bày bảng Bảng Nồng độ ức chế tối thiểu (MIC, μM) hợp chất tổng hợp lên số chủng vi sinh vật gây bệnh Hợp chất Tên chủng Gram (+) Gram (-) Nấm men EF SA BC EC PA SE CA 2a 100 25 25 25 2b 25 50 25 6,25 2c 12,5 50 100 6,25 2d 25 100 100 25 2e 100 50 50 12,5 2f 50 50 50 25 2g 25 25 25 6,25 2h 50 25 50 100 12,5 2i 50 50 25 12,5 2j 50 50 50 25 2k 100 25 50 12,5 3a 25 25 50 12,5 3b 100 25 25 25 3c 100 100 100 25 3d 50 50 50 25 3e 25 25 25 6,25 3f 25 50 50 25 3g 25 100 100 25 3h 50 25 50 12,5 3i 50 50 50 25 3j 100 25 50 12,5 STM 350 350 175 44 350 175 NT CHX NT NT NT NT NT NT 114 EF: E faecalis ATCC29212; SA: S aureus ATCC25923; BC: B cereus ATCC13245; EC: E coli ATCC25922; PA: P.aeruginosa ATCC27853; SE: S enterica ATCC13076; CA: C albicans ATCC10231; STM: Streptomycin; CHX: cycloheximid Kết từ bảng cho thấy, tất hợp chất thử thể hoạt tính ức chế vi khuẩn gram dương nấm C albicans thử nghiệm Đối với vi khuẩn gram âm, có hai hợp chất 2e 2h thể hoạt tính kháng P aeruginosa Để có kết sâu hơn, chúng tơi tiếp tục đánh giá xác định nồng độ ức chế 50% hợp chất tổng hợp Kết cụ thể trình bày bảng Bảng Nồng độ ức chế 50% (IC50, μM) số hợp chất thiosemicarbazon mang khung adamantan tổng hợp chủng vi sinh vật gây bệnh Hợp chất Tên chủng Gram (+) Gram (-) Nấm men EF SA BC EC PA SE CA 2a 24,78 4,78 4,12 6,78 2b 10,78 8,99 12,45 3,57 2c 5,68 9,66 8,24 3,45 2d 4,89 25,22 24,67 5,35 2e 25,89 6,78 6,09 5,56 2f 12,78 7,88 7,82 6,35 2g 6,78 7,89 6,88 3,24 2h 11,67 6,24 7,56 27,45 4,57 2i 12,78 12,56 12,11 3,57 2j 6,88 22,67 22,12 4,34 2k 47,89 6,45 8,49 5,68 3a 6,34 6,99 12,33 3,67 3b 25,89 8,99 9,91 7,89 3c 28,99 50,22 40,45 5,67 3d 17,89 21,45 25,89 6,78 3e 4,67 9,23 10,11 3,22 3f 13,57 21,44 11,88 3,67 3g 4,78 35,67 32,11 5,34 3h 12,56 7,88 9,85 6,79 3i 12,57 15,67 25,62 7,89 3j 35,46 6,46 7,49 4,67 EF: E faecalis ATCC29212; SA: S aureus ATCC25923; BC: B cereus ATCC13245; EC: E coli ATCC25922; PA: P.aeruginosa ATCC27853; SE: S enterica ATCC13076; CA: C albicans ATCC10231 Kết từ bảng cho thấy, hợp chất tổng hợp được, nhiều hợp chất có tác dụng kháng khuẩn, kháng nấm tốt Trong đó, hợp chất 2a có tác dụng tốt chủng SA, BC với trị IC50 4.78 4.12 μM Hợp chất 2d, 3e 3g có tác dụng tốt chủng EF với giá trị IC50 4,89; 4,67 4,78 μM Ngoài ra, tất hợp chất tổng hợp cho thấy tác dụng đáng kể ức chế nấm C albicans với giá trị IC50 từ 3,22-7,89 μM Trong số đó, hợp chất 3e, 2g, 2c, 2b, 2i, 3a, 3f cho hoạt tính mạnh với giá trị IC50 nhỏ thua 4,0 μM 3.2.2 Hoạt tính gây độc số dịng tế bào ung thư Các hợp chất tổng hợp được, chúng tơi thử thăm dị tác dụng ức chế tế bào ưng thư chất tổng hợp gồm hợp chất 3, 4, 6, 7, 10 Các dòng tế bào ung thư đem thử gồm: tế bào ung thư phổi người A549, ung thư gan người Hep3B, ung thư cổ tử cung người Hela ung thư vú người MCF-7 Chất đối chứng dương camptothecin Kết đánh giá hoạt tính gây độc tế bào ung thư trình bày bảng 10 Bảng Hoạt tính gây độc tế bào ung thử hợp chất thiosemicarbazon tổng hợp Hợp chất 2a 2b 2c 2d 2e 2f 2g 2h 2i 2j 2k 3a 3b 3c 3d 3e 3f 3g 3h 3i N.độ 30µM 100 µM 30µM 100 µM 30µM 100 µM 30µM 100 µM 30µM 100 µM 30µM 100 µM 30µM 100 µM 30µM 100 µM 30µM 100 µM 30µM 100 µM 30µM 100 µM 30µM 100 µM 30µM 100 µM 30µM 100 µM 30µM 100 µM 30µM 100 µM 30µM 100 µM 30µM 100 µM 30µM 100 µM 30µM Hep3B 69,07 ± 1,37 64,47 ± 0,86 76,33 ± 1,79 70,72 ± 0,46 68,6 ± 2,74 59,84 ± 2,20 19,34 ± 2,54 16,82 ± 1,60 67,73 ± 1,34 68,2 ± 0,63 63,5 ± 1,47 54,53 ± 1,19 76,83 ± 2,31 70,25 ± 0,41 23,71 ± 0,88 21,86 ± 0,20 78,88 ± 2,63 76,06 ± 0,27 65,01 ± 2,17 62,83 ± 2,23 67,46 ± 1,69 46,78 ± 0,21 72,06 ± 1,92 67,93 ± 1,11 75,15 ± 0,36 71,76 ± 0,48 85,76 ± 2,42 68,37 ± 1,58 80,15 ± 1,68 72,57 ± 1,83 67,02 ± 1,37 53,79 ± 0,71 72,26 ± 1,01 65,95 ± 0,25 80,42 ± 1,16 70,65 ± 1,77 75,08 ± 1,11 67,16 ± 2,57 78,34 ± 0,71 TB sống sót (CS%) Hela A549 71,58 ± 1,49 75,40 ± 1,50 60,07 ± 0,97 70,38 ± 0,94 55,29 ± 1,10 83,32 ± 1,96 53,8 ± 1,41 77,2 ± 0,50 72,09 ± 2,30 76,36 ± 1,82 59,67 ± 1,43 65,32 ± 2,40 61,12 ± 1,91 21,11 ± 2,78 24,55 ± 1,85 18,37 ± 1,75 72,77 ± 2,42 73,94 ± 1,46 61,01 ± 1,16 74,45 ± 0,69 69,84 ± 1,85 69,32 ± 1,61 57,2 ± 2,90 59,53 ± 1,30 71,65 ± 2,01 83,87 ± 2,52 47,9 ± 2,03 76,69 ± 0,44 44,42 ± 2,35 25,88 ± 0,96 34,76 ± 1,36 23,86 ± 0,22 64,37 ± 1,47 86,11 ± 2,88 61,4 ± 0,17 83,03 ± 0,29 46,16 ± 0,38 70,97 ± 2,37 40,66 ± 1,04 68,59 ± 2,43 69,88 ± 2,12 73,64 ± 1,84 55,18 ± 2,92 51,06 ± 0,23 74,40 ± 1,07 78,67 ± 2,09 69,77 ± 0,35 74,16 ± 1,22 70,17 ± 1,90 82,04 ± 0,40 68,65 ± 2,51 78,34 ± 0,52 81,90 ± 2,11 93,62 ± 2,64 64,27 ± 2,47 74,63 ± 1,73 81,46 ± 1,60 87,5 ± 1,83 73,28 ± 2,50 79,22 ± 2,00 80,59 ± 1,39 73,17 ± 1,49 77,66 ± 0,29 58,72 ± 0,77 77,05 ± 2,19 78,89 ± 1,11 67,78 ± 1,64 71,99 ± 0,28 62,38 ± 0,71 87,79 ± 1,27 51,23 ± 0,49 77,13 ± 1,94 81,90 ± 1,04 81,96 ± 1,21 75,92 ± 1,60 73,31 ± 2,81 77,12 ± 2,03 85,52 ± 0,77 11 MCF-7 58,8 ± 1,23 49,35 ± 0,79 45,42 ± 0,91 43,31 ± 2,63 59,22 ± 1,89 49,02 ± 1,18 50,21 ± 1,57 20,17 ± 1,52 59,79 ± 1,99 50,12 ± 0,95 57,38 ± 1,52 47,00 ± 2,38 42,50 ± 2,35 39,35 ± 1,67 36,50 ± 1,93 28,55 ± 1,12 52,89 ± 1,21 50,45 ± 0,14 37,92 ± 0,31 33,40 ± 0,86 57,41 ± 1,74 45,33 ± 2,40 61,12 ± 0,88 57,32 ± 0,29 57,64 ± 1,56 56,40 ± 2,06 67,28 ± 1,74 52,80 ± 2,03 66,92 ± 1,31 60,20 ± 2,05 66,21 ± 1,14 63,80 ± 0,24 63,30 ± 1,80 55,68 ± 1,35 51,25 ± 0,58 42,09 ± 0,40 67,28 ± 0,85 62,37 ± 1,31 63,36 ± 1,67 Hợp chất N.độ 100 µM 30µM 3j 100 µM CPT* 0.3µM 14.4 µM *CPT: camptothecin Hep3B 74,04 ± 0,61 69,54 ± 2,39 61,25 ± 2,24 69,56 ± 1,27 37,65 ± 1,21 TB sống sót (CS%) Hela A549 56,81 ± 1,81 80,83 ± 0,67 87,18 ± 1,91 75,92 ± 2,61 74,51 ± 2,17 66,86 ± 2,45 57,06 ± 1,35 67,68 ± 1,88 18,61 ± 0,56 26,74 ± 2,16 MCF-7 46,67 ± 1,49 71,62 ± 1,57 61,21 ± 1,78 56,68 ± 0,68 28,89 ± 1,07 Kết từ bảng cho thấy, hợp chất thiosemicarbazon tổng hợp được, hợp chất 2d 2h có tác dụng tốt dòng tế bào ung thư thử nghiệm Trong hợp chất 2d nồng độ 100 μM cho thấy tác dụng diệt tế bào ung thư Hep3B A549 tốt (CS < 20%) Ngoài ra, số hợp chất khác cho thấy có tác dụng tốt dịng tế bào ung thư thử nghiệm như: hợp chất 2a, 2b, 2c, 2f, 3g 3i Các hợp chất 2g, 2j, 2k cho tác dụng ức chế dòng tế bào ung thư thử nghiệm Bàn luận Về tổng hợp hóa học, qua kết thực nghiệm cho thấy, thực phản ứng ngưng tụ 4-(1-adamantyl)-3-thiosemicarbazid (1) với dẫn chất benzaldehyd chứa nhóm khác nhân benzyl cho hiệu suất đạt cao (hầu hết >80%) Ngược lại, ngưng tụ hợp chất với dẫn chất acetophenon hiệu suất thấp nhiều Điều giải thích sau: chế phản ứng phản ứng cộng A N sau tách loại nước trình bày hình Hình Cơ chế dự kiến phản ứng ngưng tụ 4-(1-adamantyl)-3-thiosemicarbazid với keton Hợp chất electron tự nguyên tử nitơ cơng vào vị trí C giàu điện tích dương dẫn chất benzaldehyde acetophenon Ở hợp chất acetophenon nhóm R CH3 có hiệu ứng đẩy e phía liên kết C=O, làm giảm mật độ điện tích dương ngun tử C nhóm C=O Chính vậy, hiệu suất phản ứng thấp so với nhóm R H Điều phù hợp với nhiều nghiên cứu cơng bố Đối với hoạt tính gây độc tế bào ung thư, xét mối liên quan cấu trúc tác dụng cho thấy, hợp chất tạo thành nhờ ngưng tụ 4-(1-adamantyl)-3-thiosemicarbazid với dẫn 12 chất benzaldehyd, có nhóm 2-OH nhân benzyl làm tăng cường tác dụng gây độc tế bào ung thư Ngồi ra, có nhóm 4-Cl nhân benzyl cho thấy, tác dụng gây độc tế bào ung thư tăng lên đáng kể Kết luận Đã tổng hợp 21 hợp chất thiosemicarbazon mang khung adamantan đường ngưng tụ 4-(1-adamantyl)-3-thiosemicarbazid (1) với dẫn chất benzaldehyd acetophenon Cấu trúc hợp chất tổng hợp được xác nhận thông qua phân tích phổ 1H-NMR, 13C-NMR, ESI-MS Các hợp chất thử tác dụng sinh học gồm kháng khuẩn, kháng nấm gây độc tế bào số dòng tế bào ung thư Kết cho thấy, hợp chất tổng hợp có tác dụng ức chế đáng kể phát triển chủng vi khuẩn gram dương đem thử với giá trị MIC từ 12,5 -100 μM nồng độ ức chế 50% từ 4,12 – 47,89 μM Các hợp chất thiosemicarbazon mang khung adamantan cho thấy tác dụng kháng nấm C albicans tốt với giá trị MIC từ 6,26-25 μM; giá trị IC50 từ 3,22-7,89 μM Ngoài ra, hợp chất tổng hợp được kiểm tra khả gây độc số dòng tế bào ung thư Hai hợp chất 2d 2h có tác dụng tốt đối có khả gây độc tế bào ung thư Hợp chất 2d nồng độ 100 μM có tác dụng diệt hai dịng tế bào Hep3B A549 tốt Các hợp chất 2g, 2j, 2k cho tác dụng ức chế dòng tế bào ung thư thử nghiệm; Các hợp chất 2a, 2b, 2c, 2f, 3g 3i có tác dụng gây độc dịng tế bào ung thư thử nghiệm nồng độ 100μM TÀI LIỆU THAM KHẢO Al-Abdullah E S.; Al-Tuwaijri H M.; Hassan H M.; Haiba M E.; Habib E E.; ElEmam A A Antimicrobial and hypoglycemic activities of novel N-Mannich bases derived from 5-(1-adamantyl)-4-substituted-1,2,4-triazoline-3-thiones Int J Mol Sci 2014, 15, 22995-3010 Al-Abdullah, E S.; Al-Tuwaijri, H M.; Hassan, H M.; Al-Alshaikh, M A.; Habib, E E.; El-Emam, A A Synthesis, Antimicrobial and Hypoglycemic Activities of Novel N-(1-Adamantyl)carbothioamide Derivatives Molecules 2015, 20, 8125-43 Al-Omar M A.; Al-Abdullah E S.; Shehata I A.; Habib E E.; Ibrahim T M.; ElEmam A A Synthesis, antimicrobial, and anti-inflammatory activities of novel 5-(1adamantyl)-4-arylideneamino-3-mercapto-1,2,4-triazoles and related derivatives Molecules 2010, 15, 2526-50 Liu J.; Obando D.; Liao V.; Lifa T.; Codd R The many faces of the adamantyl group in drug design Eur J Med Chem 2011, 46, 1949-1963 Spasov A A.; Khamidova T V.; Bugaeva L I.; Morozov I S Adamantane derivatives: Pharmacological and toxicological properties (review) Pharmaceutical Chemistry Journal 2000, 34, 1-7 Lê Trung Sơn (2016), Nghiên cứu xây dựng quy trình tổng hợp amantadin hydrochlorid từ adamantan qua đường sulfat hóa, Luận văn thạc sĩ dược học, Học viện Quân y, Hà Nội Nguyễn Thị Hồng Thắm (2015), Nghiên cứu tổng hợp amantadin hydroclorid làm nguyên liệu sản xuất thuốc, Luận văn thạc sĩ dược học, Học viện Quân y, Hà Nội Phan Đình Châu; Nguyễn VănThịnh; Nguyễn Thị Hồng Thắm; Trần Thị Hiện; Vũ Bình Dương Nghiên cứu tổng hợp dẫn chất adamantan Phần I: Nghiên cứu tổng hợp amantadin hydroclorid Tạp chí Dược học 2016, 55, 36-40 Kizilcikli, I.; Kurt, Y.D.; Akkurt, B.; Genel, A.Y.; Birteksưz, S.; Ưtük, G.; Ülküseven, B Antimicrobial activity of a series of thiosemicarbazones and their Zn II and Pd II complexes Folia microbiologica 2007, 52, 15-25 13 10 11 12 13 14 15 16 17 Zhu, Y.J; Song, K.H.; Li, Z.C.; Pan, Z.Z.; Guo, Y.J.; Zhou, J.J.; Wang, Q.; Liu, B.; Chen, Q.X Antityrosinase and antimicrobial activities of trans-cinnamaldehyde thiosemicarbazone Journal of agricultural and food chemistry 2009, 57, 5518-5523 de Aquino, T.M.; Liesen, A.P.; da Silva, R.E.A.; Lima, V.T.; Carvalho, C.S; de Faria, A.R.; de Araujo, J.M.; de Lima, J.G.; Alves, A J.; de Melo, E J.T Synthesis, antiToxoplasma gondii and antimicrobial activities of benzaldehyde 4-phenyl-3thiosemicarbazones and 2-[(phenylmethylene) hydrazono]-4-oxo-3-phenyl-5thiazolidineacetic acids Bioorganic & medicinal chemistry 2008, 16, 446-456 Kolocouris, A.; Dimas, K.; Pannecouque, C.; Witvrouw, M.; Foscolos, G.B.; Stamatiou, G.; Fytas, G.; Zoidis, G.; Kolocouris, N.; Andrei, G New 2-(1adamantylcarbonyl) pyridine and 1-acetyladamantane thiosemicarbazones– thiocarbonohydrazones: cell growth inhibitory, antiviral and antimicrobial activity evaluation Bioorganic & medicinal chemistry letters 2002, 12, 723-727 Mohamed, N.A.; Mohamed, R.R.; Seoudi, R.S Synthesis and characterization of some novel antimicrobial thiosemicarbazone O-carboxymethyl chitosan derivatives International journal of biological macromolecules 2014, 63, 163-169 Halve, A.K; Bhashkar, B.; Sharma, V.; Bhadauria, R.; Kankoriya, A.; Soni, A.; Tiwari, K Synthesis and in vitro antimicrobial studies of some new 3-[phenyldiazenyl] benzaldehyde N-phenyl thiosemicarbazones Journal of enzyme inhibition and medicinal chemistry 2008, 23, 77-81 Aly, M.M.; Mohamed, Y.A.; El-Bayouki, K.A.M.; Basyouni, W.M.; Abbas, S.Y Synthesis of some new (3H)-quinazolinone-2-carboxaldehyde thiosemicarbazones and their metal complexes and a study on their anticonvulsant, analgesic, cytotoxic and antimicrobial activities–Part-1 European journal of medicinal chemistry 2010, 45, 3365-3373 Sayer J.M; Pinsky B.; Schonbrunn A.; Washtien W Mechanism of carbinolamine formation Journal of the American Chemical Society 1974, 96, 7998-8009 Cordes E.H.; Jencks W.P On the mechanism of Schiff base formation and hydrolysis Journal of the American Chemical Society 1962, 84, 832-837 14 ...PHẦN II BÁO CÁO TOÀN VĂN BÀI BÁO KHOA HỌC TỔNG HỢP VÀ THĂM DÒ TÁC DỤNG SINH HỌC MỘT SỐ HỢP CHẤT THIOSEMICARBAZON MANG KHUNG ADAMANTAN Phạm Văn Hiển1 ,2, Vũ Bình Dương2 Hướng dẫn khoa... đường sulfat hóa, Luận văn thạc sĩ dược học, Học viện Quân y, Hà Nội Nguyễn Thị Hồng Thắm (2015), Nghiên cứu tổng hợp amantadin hydroclorid làm nguyên liệu sản xuất thuốc, Luận văn thạc sĩ dược học,... MIC of 12.5-100 μM and IC 50 of 4.12-47.89 μM; and good activity against C albicans with MIC of 6.2 5-25 μM and IC 50 of 3.22-7.89 μM Among them, compound 2d and 2h showed good activity against