B3-TN1- N3 -LTTCDHD11E

TRƯỜNG ĐẠI HỌC TÂY ĐÔ BỘ MÔN DƯỢC LIỆU – DƯỢC HỌC CỔ TRUYỀN BÀI BÁO CÁO GVHD: ThS TRÌ KIM NGỌC LỚP: LTTC-ĐHD 11E NHÓM: III TIỂU NHÓM: HỌ VÀ TÊN CÁC THÀNH VIÊN NHÓM: THỊ HẰNG ( 039.254.254 ) PHAN THANH TRANG (0946.183.941) NGUYỄN VŨ CA (0975.000.815) PHAN THANH NHUNG ( 0944.993.055) NGUYỄN THỊ THÙY TRANG (0982.545.030) A CƠ SỞ LÝ THUYẾT  Để định lượng alkaloid dược liệu phương pháp cân, người ta phải chiết kiệt alkaloid khỏi ngun liệu thực vật dung mơi thích hợp loại tạp tối đa dịch chiết  Sau xác định hàm lượng alkaloid cân cắn alkaloid sau loại bỏ dung môi Từ lượng cắn suy hàm lượng % alkaloid dược liệu  Tùy theo dược liệu mà áp dụng phương pháp chiết, dung mơi chiết phương pháp loại tạp thích hợp, thường chiết alkaloid baz môi trường kiềm tạp chất cách chuy ển qua lại alkaloid môi trường nước acid dung môi hữu B THỰC HÀNH Dung mơi, hóa chất, thuốc thử: Cồn 50%, cồn 96% Methanol, Cloroform Dung dịch HCl 1%, 2% Dung dịch NH4OH 10% Dung dịch NaOH 0,2N; 2N Na2SO4 khan Thuốc thử Valse – Mayer Dược liệu: Bình vơi ( Tuber Stephaniae ) Phương pháp tiến hành: Bước 1: Cân 2gram bột Bình Vơi cho vào Erlen 100ml Kiềm hóa NH4OH 10% 10 phút Bước 2: Cho thêm 50ml CHCl3 vào Erlen chứa bột Bình Vơi  đem đun bếp cách thủy 10 phút  lọc qua bông, thu dịch lọc vào cốc Bước 3: Cho tiếp thêm 20ml CHCl3 cho vào Erlen chứa bột Bình Vơi, đun 10 phút  lọc qua  thu dịch lọc vào cốc ( Chiết đến dịch chiết ( - ) với thuốc thử Valse – Mayer ) ** Theo nguyên tắc định lượng chiết đến khơng cịn th tủa hết alkaloid Tuy nhiên,do không đủ thời gian nên ta chiết lần Kết chiết lần ,thử thuốc thử lấn I tủa nhiều lần II Bước 4: Chuẩn bị lam kính đánh số I II hai đầu lam , khoanh vịng trịn, sau lặt mặt lam kính cho giọt dịch CHCl để khô, cho tiếp SỐ vào giọt HCl 2% giọt thuốc thử Valse- Mayer SỐ Kết Luận:Cốc nhiều tủa Cốc Vậy dịch chiết ( - ) với thuốc thử Valse – Mayer Bước 6: Cho cốc + cốc ( dịch CHCl3 ) vào bình lắng gạn + 20ml HCl 2%, lắc nhẹ Xả lớp dung môi cho vào cốc riêng, thu d ịch chiết l ại Dịch nước acid ( lớp cho vào Cốc 1’ trên) Dịch CHCl3 ( lớp ** Thu dịch chiết nước Acid Cốc 1’ Bước 7: Lấy cốc chứa dịch CHCl3 lại cho vào bình lắng gạn tiếp tục cho thêm 10ml HCl 2% vào bình lắc nhẹ Xả dung mơi lớp d ưới, l ph ần dịch nước acid  Cốc 2’ Bước 8: Nhỏ giọt dịch nước acid cốc 1’ cốc 2’ lame ( mẫu tách riêng biệt ) + thêm giọt thuốc th Valse – Mayer CỐC TỦA ĐỤC HƠN CỐC TỦA ÍT HƠN  Lưu ý : chiết đến dịch chiết (-) với thuốc thử Valse-Mayer.Nhưng khơng đủ thời gian nên chiết lần Theo nguyên tắc định lượng chiết đến khơng cịn thấy tủa Bước 9: Cốc 1’ + cốc 2’ cho vào cốc = 10  kiềm hóa NH4OH đđ pH PH = 10 Bước 10: Dịch sau kiềm hóa cho vào bình lắng gạn + 10ml CHCl  thu dịch CHCl3 vào cốc 1” ( lấy dịch lớp ) Bước 11: Cho thêm 10ml CHCl3 vào bình lắng gạn thu dịch cốc 1”, lắc nhẹ  thu dịch CHCl3 lần cho vào cốc 2” ( lấy dịch lớp dưới) Bước 12: Lấy giọt dịch chiết cốc 1”, cốc 2” nhỏ lame ( mẫu tách rời riêng biệt ), để khô Tiếp theo nhỏ giọt HCl 2% m ẫu, khuấy nhẹ tan đũa thủy tinh + giọt thuốc th Valse – Mayer vào mẫu CỐC CỐC Càng chiết nhiều lần nồng độ dịch chiết alkaloid giảm Do thời gian hạn chế nên chiết lần Dịch cốc 1’’ có tủa nhiều dịch cốc 2’’ Dịch chiết (-) với thuốc thử Valse – Mayer Bước 13: Lấy dịch CHCl3 cốc 1” + cốc 2” cho vào bình lắng gạn, rữa dịch chiết với 10ml nước cất Thu dịch chiết vào cốc khô ( lấy lớp dưới), làm khan dịch CHCl với Na2SO4 Sau đó, rữa muối lại với 10ml CHCl3 Bước 14: Chuẩn bị chén sứ sấy khô cân trừ bì M= 105.8591 Cho dịch CHCl3 vào chén sứ đem cô cắn, sấy nhiệt độ 1100C khoảng 15 – 20 phút  sấy xong làm nguội bình hút ẩm HÚT ẨM  Đem cân cắn đến khối lượng không đổi M= 105.8393  Khối lượng ban đầu < khối lượng cắn  khối lượng thay đổi NHƯ VẬY: m cắn 105.8393 – m ban đầu105.8591= -198 Tuy nhiên,sau cắn khối lượng lại thay đổi.Ngun nhân ảnh hưởng yếu tố môi trường, thời gian sấy chưa đủ khô cắn dẫn đến khối lượng thay đổi ** Hàm lượng alkaloid toàn phần / 100g mẫu Trong đó: a :m dược liệu h : độ ẩm d ược li ệu (= 13,0%) P : m cắn Alkaloid