Định lượng nồng độ kháng thể kháng PGL-I trên 202 mẫu huyết thanh được lấy vào các thời điểm trước, trong và sau khi hoàn thành MDT của 56 bệnh nhân phong, bằng kỹ thuật ELISA; đồng thời theo dõi thời điểm xảy ra phản ứng phong của những bệnh nhân nói trên trong quá trình điều trị MDT liệu trình 12 tháng.
NGHIÊN CỨU KHOA HỌC / ( (12/, / 2/,3, , / , ( (2 2, 7,(1 / ,(8 75 (1 21 Nguyễn Phúc Như Hà*1, Trần Lê Minh Đức1, Trần Duy Thạch1, Nguyễn Thị Thời Loạn1, Nguyễn Thanh Tân1, Trần Xuân Việt1, Yuji Miyamoto2, Masanori Kai2, Vũ Tuấn Anh1 TÓM TẮT Định lượng nồng độ kháng thể kháng PGL-I 202 mẫu huyết lấy vào thời điểm trước, sau hoàn thành MDT 56 bệnh nhân phong, kỹ thuật ELISA; đồng thời theo dõi thời điểm xảy phản ứng phong bệnh nhân nói trình điều trị MDT liệu trình 12 tháng Kết cho thấy: Nồng độ kháng thể kháng PGL-I khác cá thể, xu hướng chung giảm dần theo thời gian trình điều trị, thời điểm tháng điều trị MDT mức kháng thể trung bình giảm 50,2% thời điểm kết thúc điều trị giảm 33,7% so với mức kháng thể ban đầu; Trong số trường hợp mức kháng thể kháng PGL-I thời điểm ban đầu mức cao và/hoặc có gia tăng mức kháng thể q trình MDT có liên quan đến khả xảy PƯP Nồng độ kháng thể kháng PGL-I giảm nhanh bệnh nhân có phản ứng phong xảy trước điều trị hay bệnh nhân can thiệp đồng thời điều trị phản ứng phong MDT chẩn đoán Lượng giá kháng thể kháng PGL-I ELISA tiên lượng khả xảy phản ứng phong nhằm điều trị kịp thời phản ứng phong điều trị bệnh phong hiệu Từ khóa: PGL-I, Mycobacterium leprae, bệnh phong, phản ứng phong ĐẶT VẤN ĐỀ Kháng nguyên PGL-I, kháng nguyên đặc hiệu Mycobacterium leprae, sử dụng rộng rãi huyết học chẩn đoán nghiên cứu bệnh phong Nhiều ứng dụng nhằm Bệnh viện Phong Da liễu Trung Ương Quy Hòa, Việt Nam Trung tâm nghiên cứu Phong, Viện Quốc Gia bệnh nhiễm khuẩn Nhật Bản *Tác giả chính: Nguyễn Phúc Như Hà Địa chỉ: Bệnh viện Phong Da liễu Trung Ương Quy Hòa Số Chế Lan Viên, thành phố Quy Nhơn, Bình Định Điện thoại: 0914462762 Email: nguyenphucnhuha@gmail.com sàng lọc người tiếp xúc có nguy mắc bệnh phong cộng đồng, để phát sớm điều trị dự phòng [1,2] Các nghiên cứu ứng dụng lâm sàng, theo dõi lượng kháng thể kháng PGL-I đánh giá hiệu điều trị tìm thấy mối liên quan mức kháng thể khả tồn lưu vi khuẩn phong người bệnh, nghiên cứu đặt câu hỏi tồn dai dẳng kháng nguyên vi khuẩn phong hay gia tăng mức kháng thể nguyên nhân xảy phản ứng phong (PƯP) [3,4], biến chứng thường gặp q trình điều trị bệnh phong để lại tàn tật, dị hình PƯP khơng phát sớm, điều trị kịp thời phù hợp Số 26 (Tháng 08/2018) DA LIỄU HỌC NGHIÊN CỨU KHOA HỌC Sử dụng kỹ thuật ELISA định lượng nồng độ lấy mẫu sau so với lần lấy mẫu đầu tiên; Đánh giá kháng thể kháng PGL-I huyết bệnh bệnh nhân, đánh giá toàn bệnh nhân phong, đánh giá thay đổi theo thời gian nhân nghiên cứu, đánh giá nhóm bệnh nhân trước, sau hồn thành đa hóa trị liệu theo thời điểm xảy PƯP; phân tích mối liên quan bệnh phong (MDT), đồng thời theo dõi thời điểm thay đổi kháng thể kháng PGL-I thời xảy PƯP điều trị, tìm mối liên quan điểm xảy PƯP chúng để tiên lượng khả xảy Dữ liệu phân tích thuật tốn thống PƯP, nhằm điều trị PƯP kịp thời điều trị kê SPSS, biến định lượng, liệu mô bệnh phong hiệu tả điểm trung bình ± độ lệch chuẩn PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 2.1 Thiết kế nghiên cứu: Nghiên cứu mô tả kỹ thuật phịng thí nghiệm biến có phân phối chuẩn, trung vị (khoảng tứ phân vị) biến có phân phối lệch Mơ hình hồi quy tuyến tính đơn biến đánh giá thay đổi biến theo thời gian Mối tương quan phân tích theo OR 2.2 Bệnh nhân, mẫu nghiên cứu nội dung nghiên cứu 56 bệnh nhân phong mới, nhóm MB, có số BI ≥2+; điều trị MDT, liệu trình 12 tháng; Phát từ 4/2015 đến 6/2016 11 2.3 Kỹ thuật ELISA đo nồng độ kháng thể kháng PGL-I Thực khoa Xét nghiệm, bệnh viện Phong Da liễu Trung ương Quy Hòa tỉnh thuộc khu vực Miền Trung - Tây Nguyên, Việt Sử dụng kỹ thuật ELISA lượng giá kháng thể Nam (loại trừ bệnh phong có kèm bệnh nhiễm IgM kháng PGL-I có mẫu huyết mycobacteria khác) sản xuất đáp ứng miễn dịch dịch thể bệnh 202 mẫu huyết lấy từ 56 bệnh nhân nhân M leprae Bộ sinh phẩm Leprosy SD nói trên, lấy thời điểm: trước điều trị (T0) ELISA (Standard Diagnostic Inc Korea), gồm 56 mẫu; MDT tháng (T1) 47 mẫu, MDT đĩa vi lượng gắn kháng nguyên ND-O-BSA tháng (T6) 43 mẫu lúc kết thúc MDT 12 tháng (Natural Disaccharide - Octyl - BSA) Quy trình (T12) 56 mẫu; Mẫu huyết lưu giữ -20oC thực theo hướng dẫn nhà sản xuất Nồng để thực kỹ thuật ELISA độ kháng thể kháng PGL-I mật độ quang (OD: Thu thập thông tin lâm sàng thời điểm xảy PƯP Phân nhóm bệnh nhân theo thời điểm xảy PƯP: trước MDT, q trình MDT khơng có PƯP Định lượng mức kháng thể kháng PGL-I huyết bệnh nhân thời điểm nói Đánh giá thay đổi kháng thể theo tỉ lệ % lần DA LIỄU HỌC Số 26 (Tháng 08/2018) Optical Density - hay đơn vị ELISA) đo bước sóng 450 nm bước sóng tham chiếu 630 nm NGHIÊN CỨU KHOA HỌC KẾT QUẢ 3.1 Thay đổi mức kháng thể kháng PGL-1 bệnh nhân Biểu đồ Thay đổi mức kháng thể kháng PGL-1 bệnh nhân Mỗi đường biểu diễn cho thay đổi nồng độ kháng thể thời điểm bệnh nhân, mặc định mức kháng thể ban đầu 1=100%, thay đổi kháng thể biểu theo tỉ lệ % so với mức kháng thể ban đầu So với thời điểm T0 có 15/146 mẫu biểu tăng mức kháng thể, có 131/146 mẫu biểu giảm mức kháng thể 3.2 Xu hướng thay đổi mức kháng thể kháng PGL-I trung bình bệnh nhân phong thời điểm T0, T1, T6 T12 Bảng Sự thay đổi kháng thể kháng PGL-I trung bình trình điều trị Thời điểm lấy mẫu Mức kháng thể TB (Đơn vị OD) Thay đổi so với T0 (%) T0 0,562 ± 0,393 100 T1 0,457 ± 0,393 83,09 ± 7,33 T6 0,272 ± 0,393 48,06 ± 11,76 T12 0,159 ± 0,352 33,73 ±9,68 p