Đang tải... (xem toàn văn)
Bài viết trình bày kết quả chế tạo thành công nano berberin bằng phương pháp nghiền quay với bi Zirconium có tiềm năng ứng dụng tạo các sản phẩm sử dụng trong phòng và trị bệnh do nấm Candida albicans gây ra.
Khoa học Y - Dược Chế tạo nano berberin đánh giá khả kháng nấm Candida albicans Nguyễn Hữu Tuyển1*, Phan Thị Kim Ngân1, Mai Ngọc Tuấn Anh1, Hoàng Thùy Dương1, Lâm Hoàng Anh Thư1, Phạm Tiến Dũng1, Phạm Thanh Hồng2, Ngô Võ Kế Thành1 Trung tâm Nghiên cứu triển khai, Khu Cơng nghệ cao TP Hồ Chí Minh Trường Đại học Văn Lang Ngày nhận 2/3/2020; ngày chuyển phản biện 5/3/2020; ngày nhận phản biện 3/4/2020; ngày chấp nhận đăng 20/4/2020 Tóm tắt: Berberin akaloid thực vật có tác dụng kháng khuẩn, kháng viêm, kháng ung thư, hạ đường huyết… Tuy nhiên, việc ứng dụng berberin dược phẩm hạn chế tan nước sinh khả dụng thấp Trong nghiên cứu này, nhằm cải thiện sinh khả dụng tăng tiềm ứng dụng berberin dược phẩm; nano berberin tạo phương pháp nghiền quay với hỗ trợ bi Zirconium Tính chất hạt nano berberin tạo khảo sát phương pháp chụp FE-SEEM, TEM, DLS XRD Hoạt tính kháng nấm Candida albicans đánh giá điều kiện invitro Kết cho thấy, nano berberin tạo với kích thước hạt trung bình khoảng 60 nm sau 120 nghiền quay nồng độ ức chế tối thiểu (MIC) ghi nhận nấm Candida albicans 1024 µg/ml Từ khóa: berberin, Candida albicans, kháng sinh thực vật, phương pháp nghiền quay Chỉ số phân loại: 3.4 Fabrication of berberine nanoparticles and evaluation of antifungal activity on Candida albicans Huu Tuyen Nguyen1*, Thi Kim Ngan Phan1, Ngoc Tuan Anh Mai1, Thuy Duong Hoang1, Hoang Anh Thu Lam1, Tien Dung Pham1, Thanh Hong Pham2, Vo Ke Thanh Ngo1 Saigon Hi-Tech Park Research Laboratories Van Lang University Received March 2020; accepted 20 April 2020 Abstract: Berberine is a plant alkaloid with antibacterial, anti-inflammatory, anti-cancer, and hypolipidemic activities, etc However, the application of berberine in pharmaceuticals has still limited due to its less solubility in water and poor bioavailability In this study, to improve the bioavailability and increase the potential application of berberine in medicine, berberine nanoparticles were fabricated by roll milling method with the support of zirconium balls The characterisation of berberine nanoparticles was evaluated by Field-Emission Scanning Electron Microscopy (FESEM), Transmission Electron Microscopy (TEM), Dynamic Light Scattering (DLS) and X-ray diffraction (XRD) The anti-Candida albicans activity was tested in-vitro The results showed that the average particle size of berberine nanoparticles was about 60 nm after 120 hours roll milling and the minimal inhibitory concentration on Candida albicans was 1024 µg/ml Keywords: berberine, Candida albicans, plant antibiotics, roll milling method Classification number: 3.4 Đặt vấn đề nhà khoa học quan tâm Berberin alkaloid thuộc Ngày nay, bên cạnh việc nghiên cứu sử dụng dược chất có nguồn gốc hóa tổng hợp việc nghiên cứu sử dụng hợp chất có nguồn gốc từ thiên nhiên ngày nhóm isoquinoline chiết xuất dễ dàng từ thực vật * hay tổng hợp hóa học Trong tự nhiên, berberin chiết xuất từ loại thuộc chi Berberis, Hydrastis candensis, Tác giả liên hệ: Email: tuyen.nguyenhuu@shtplabs.org 62(7) 7.2020 12 Khoa học Y - Dược Coptis với hàm lượng khoảng 1,5-3% [1] Berberin sử dụng rộng rãi y học cổ truyền, thường dùng nhiều để trị bệnh đường ruột, bệnh gan mật, bệnh da… Berberin thu hút ý năm gần có tác dụng dược lý chống ung thư, kháng virus, kháng khuẩn chống viêm [2, 3] Mặc dù có nhiều ưu điểm berberin bị hạn chế sử dụng lâm sàng tan nước, khó hấp thu qua ruột đặc biệt tính sinh khả dụng thấp (chỉ khoảng 5%) [4] Hướng nghiên cứu bào chế berberin thành dạng kích thước nano cải thiện độ tan, tốc độ hịa tan, từ nâng cao sinh khả dụng hướng quan tâm nghiên cứu Trong dược liệu, có phương pháp để tạo hạt nano thuốc: phương pháp từ lên (bottum-up) phương pháp từ xuống (top-down) Phương pháp bottum-up sử dụng cần phải hịa tan dược liệu dung mơi hữu khó phân bố kích thước hẹp Phương pháp top-down sử phổ biến với kỹ thuật nghiền bi, đồng hóa, đồng hóa áp suất cao Trong đó, kỹ thuật nghiền bi có nhiều ưu điểm nghiền hạt có kích thước tiểu phân bé, trì trạng thái vơ khuẩn ngun liệu [5] Đã có nhiều nghiên cứu chế tạo nano berberin với nhiều phương pháp khác như: gắn berberin nano polymer, silica từ tính, lipid, gắn vào dendrimer, graphene hay nano vàng, nano bạc…[3] nhằm giúp tăng khả phân tán chúng, tạo điều kiện cho thể hấp thụ tốt hoạt chất berberin để phát huy hết tác dụng dược lý chúng Candida albicans mầm bệnh nấm hội, đặc biệt quan sát thấy bệnh nhân suy giảm miễn dịch Candida albicans chiếm 50-70% trường hợp nhiễm nấm candida xâm lấn phần lớn sở lâm sàng [6] Đối với Candida albicans, berberin tác động làm suy giảm chức ty thể, tạo phản ứng oxy hóa đặc biệt, ảnh hưởng đến đường toàn vẹn vách tế bào yếu tố phiên mã sốc nhiệt HSF1 [7, 8], từ ức chế tiêu diệt nấm (hình 1) Đã có nhiều nghiên cứu cơng bố với tiềm lớn berberin việc kiểm soát điều trị bệnh viêm nhiễm Candida albicans gây [6, 7, 9] Trên sở đó, nghiên cứu thực nhằm tạo sản phẩm berberin kích thước nano đánh giá hiệu ức chế nấm Candida albicans, kết nghiên cứu tiền đề cho trình tạo sản phẩm thương mại ứng dụng phòng điều trị bệnh nấm Candida albicans gây Đối tượng phương pháp Vật liệu Nấm Candida albicans - thu nhận từ mẫu bệnh phẩm cung cấp Viện Pasteur TP Hồ Chí Minh Môi trường sử dụng nuôi cấy chủng nấm - Sabouraud: D-glucose 40 g, peptone 10 g, agar 20 g, nước cất vừa đủ lít Chỉnh pH 6,2 Berberin 95% chuẩn dược phẩm cung cấp Công ty Cổ phần dược phẩm Vĩnh Kim - số 186 Định Cơng Hạ (Định Cơng, Hồng Mai, Hà Nội) Bi Zirconium: kích thước hạt 0,4-0,6 mm, 95% ZrO2, 5% Y2O5 Độ cứng 1000 Hv Tỷ lệ hạt cầu 95% Phương pháp chế tạo nano berberin Nano berberin chế tạo phương pháp nghiền quay với bi Zirconium Chuẩn bị hỗn dịch với 2,4 g beberine; 0,6 g tween 80; g etanol tuyệt đối nước cất vô trùng vừa đủ 60 g tổng khối lượng Cho tiếp 120 g bi Zirconium vào lọ đặt máy quay trục lăn tốc độ 2000 vòng/phút 120 Mẫu lọc loại bi thu hỗn dịch chứa berberin kích thước nano Thu nhận nano berberin dạng bột cách đông khô 48 -55°C điều kiện chân khơng Phương pháp phân tích mẫu nano berberin Các mẫu nano berberin phân tích phương pháp chụp ảnh FE-SEM (Hitachi S-4800, Nhật Bản) TEM (JEM-1400, Nhật Bản): thực cách nhỏ giọt mẫu lưới đồng đường kính mm, để khơ nhiệt độ phịng tiến hành phân tích điện 10 kV với FE-SEM 100 kV với TEM Hình Các đường tác động berberin đến Candida albicans [8] 62(7) 7.2020 Phương pháp DLS (Horiba SZ-100, Nhật Bản): phương pháp này, mẫu pha loãng dung mơi nước tiến hành phân tích góc 90o 13 Khoa học Y - Dược Mẫu bột nano berberin sau đơng khơ phân tích XRD (Bruker D8-Advance, Đức) góc quét từ 4-40° Kết thảo luận Chế tạo nano berberin Phương pháp phân tích mẫu nano berberin Phương pháp xác định hàm lượng berberin mẫu Các mẫu nano berberin phân tích phương pháp chụp ảnh FEnano berberin SEM (Hitachi S-4800, Nhật Bản) TEM (JEM-1400, Nhật Bản): thực đường chuẩn cân 10kính mg bột nguyên cách Dựng nhỏ giọt mẫu lướiberberin: đồng đường mm, để liệu khơ nhiệt độ phịng tiến berberin (chuẩn HPLC Sigma) hịa tan hồn tồn hành phân tích điện 10 kV với FE-SEM 100 kV với TEM 10 ml metanol Từ dung dịch tiến hành pha loãng Phương pháp DLS (Horiba SZ-100, Nhật Bản): phương pháp này, mẫu nồng độ 0,5 mg/ml, 0,25 mg/ml, 0,1 mg/ml, 0,05 mg/ pha loãng dung mơi nước tiến hành phân tích góc 90o ml 0,025 mg/ml Đo độ hấp thụ dung dịch chuẩn Mẫu bộtcực nano saumẫu trắng đơng làkhơ phân tích 2.XRD (Bruker Kết DLS củaD8mẫu nano berberin bước sóng đại berberin 430 nm với metanol, sử Hình Advance, Đức) góc qt từ 4-40° dụng cuvet thạch anh với độ dày cm Kết DLS cho thấy nồng độ 4% berberin, trình Phương pháp xác định hàm lượng berberin mẫu nanovới berberin va chạm bi Zirconium tạo hạt chủ yếu phân bố Đo nồng độ berberin mẫu nano berberin: hòa tan khoảng 180-300 nm (hình 2) Tiếp tục phân tích mẫu Dựng chuẩn cânđơng 10 khơ mg bột ngun liệu berberin (chuẩn hồn toàn đường lượng bột nano berberin: berberin sau 10 phương pháp chụp HPLC - Sigma) hoàn 10 ml metanol Từ dung dịch tiến FE-SEEM cho thấy kích thước ml metanol Lấy hịa mltan dung dịchtồn pha loãng 19 ml hạt chủ yếu khoảng 50-70 nm (hình 3) Kích hành pha lỗng nồng độ 0,5 mg/ml, 0,25 mg/ml, 0,1 nano mg/ml, 0,05 mg/ml metanol (pha loãng 20 lần) Tiến hành đo độ hấp thụ thước hạt nano berberin ghi nhận phân tích DLS 0,025 mg/ml Đo độ hấp thụ dung dịch chuẩn bước sóng cực đại 430 vàKết FE-SEEM khác biệt Lý giải cho việc dung dịch nano berberin tương tự dung dịch chuẩn DLS có nm với mẫu trắng metanol, sử dụng cuvet thạch anhHình với độ dày cm.của mẫu nano berberin phương pháp DLS dung hạtvới bi Kết DLS cho thấythực nồng độ đo 4%trong berberin, qdịch trìnhvàvacác chạm Tínhnồng tốn nồng độ berberin mẫu nanoberberin: berberin sau Đo độ berberin mẫu nano hịa tan hồn tồn lượng bột có kích thước khoảng 60 nm kết tụ lại với tạo thành Zirconium tạo hạt chủ yếu phân bố khoảng 180-300 nm (hình 2) đơng khô: sau đông khô 10 ml metanol Lấy nano berberin mlphân dung dịch trênkhoảng pha 300 khối vớitích kích thước phương Tiếp1 tục mẫu phương pháp nm chụpTrong FE-SEEM choởthấy kích thước pháp FE-SEM, mẫu sấy khơ nên quan sát lỗng Ctrong= 19 ml metanol (pha loãng 20 lần) Tiến hành đo độ hấp thụ dung C xa hạt nano chủ yếu khoảng 50-70 nm (hình 3) Kích thước hạt nano berberin nano mẫu đo hạt nano khốivàkết tụ có quanbiệt sát Lý dịch nano berberin tương tự dung dịch chuẩn ghi nhận nhỏ phân tích DLS FE-SEEM cóthể khác giải cho Trong đó: Cnano nồng độ berberin mẫu nano hạt nano rời việc phương pháp DLS thực đo dung dịch hạt có kích Tính tốn nồng độ berberin mẫu nano berberin sau đông khô: berberin sau đông khô (mg/ml); Cmẫu đo nồng độ berberin thước khoảng 60 nm kết tụ lại với tạo thành khối với kích thước khoảng Kết cho thấy, chế tạo thành cơng mẫu nano 300 mẫu đo tính từ phương trình đường chuẩn nm Trong phương phápberberin FE-SEM, ban mẫuđầu đượclàsấy khôSonên thể quan berberin vớiở hàm lượng 4% vớicómột sát hạt nano khối kết tụ vànghiền quan đượcnghiên hạt nano berberin a làhệnồng số pha trongtrong trình TrongHPLC; đó: Cnano độlỗng berberin mẫu đo nano berberin saunhỏ đơng khô số nghiên cứu khác, phương pháp quaysát (a=20) Cmẫu đo nồng độ berberin mẫu đo rời củatừchúng tơi đãtrình cho thấy hiệu tốt q (mg/ml); tính cứu phương trình tạođo hạt(a=20) berberin kích thước nano Năm 2018, Sahibzada đường chuẩn berberin HPLC; a hệ số pha lỗng q trình Tính toán hiệu suất thu nhận berberin từ mẫu nano Kết cho thấy, chế tạo thành công mẫu nano berberin với hàm lượng ban cộng sựlàđã phương phápnghiền berberin đầu 4%.bào So chế với nano sốberberin nghiên cứu khác, phương pháp Tính tốn hiệu suất thu nhận berberin từ mẫu nano berberin: berberin: kết tủa baycứu hơicủa dung (EPN) hiệu kết tủa tốt quay nghiên chúngmôi cho thấy hơnthay đổi q trình dung mơi (APSP) Kết cho thấy hạt nano berberin tạo hạt berberin kích thước nano Năm 2018, Sahibzada cộng có bào chế H= kích thước phân pháp 71,53 102,62 nmmơi (lần(EPN) lượt đốikết tủa nano berberin bằngtiểu phương kết tủavàbay dung với EPN vàKết APSP) [10] Năm Wang thay đổi dungpháp môi (APSP) cho thấy hạt 2015, nano berberin có kích Trong đó: Cngun liệu nồng độ berberin ban đầu trước khiphương nghiền quay Trong đó: Cnguyên liệu nồng độ berberin ban đầu trước sử dụng phương áp suất thước cộng tiểu phân 71,53 102,62 pháp nm (lầnđồng lượt đối vớihóa phương phápcao EPN Phương pháp đánh giá khả kháng nấm Candida albicans tạoNăm hạtWang nanovàberberin vớidụng kíchphương thướcpháp trung APSP)đã[10] 2015, cộng sử đồngbình hóa nghiền quay Khả kháng nấm Candida albicans dung dịch berberin khoảng 72,4 nmhạt [11] áp suất caonano tạo nano berberin với kích thước trung bình khoảng 72,4 đánhpháp giá khả tán kháng kiểmPhương tra bằngpháp phương khuếch trênnấm đĩaCandida thạch.nm Chủng [11] nấm bệnh trải albicans đĩa Sabouraud với nồng độ 10 cfu/ml Dùng ống đục vô trùng (đường Sabouraud với nồng độ 10 cfu/ml Dùng ống đục vô trùng Kết thảo luậnđục tạo giếng đĩa (5 giếng/ (đường kính mm) đĩa).Chế Húttạo 100nano µl dịch nano berberin nồng độ 512 µg/ berberin 40 Tỷ lệ (%) kính Khả mm) tạonấm cácCandida giếng đĩa (5 dung giếng/đĩa) năngđục kháng albicans dịch Hút 100 µl dịch nano berberin nồng độ 512 µg/ml, 1024 µg/ml, 2048 µg/ml, 4096 µg/ml 8192 nano berberin kiểm tra phương pháp khuếch µg/ml cho vào giếng với đối chứng âm nước cất vô trùng đối chứng dương tán đĩa thạch Chủng nấm bệnh trải đĩa nystatin 200 µg/ml 34,615 30 23,077 19,231 20 10 3,846 7,692 7,692 30 40 50 60 70 80 Kích thước (nm) ml, 1024 µg/ml, 2048 µg/ml, 4096 µg/ml 8192 µg/ml cho vào giếng với đối chứng âm nước cất vô trùng đối Hình Hình Kết quả FE-SEEM vàvàđồ mẫu Kết FE-SEEM sựphân phânbố bốkích kích thước thước hạt hạt 4đồthịthịsự chứng dương nystatin 200 µg/ml nano berberin mẫu nano berberin 62(7) 7.2020 14 Khoa học Y - Dược Tiếp tục phân tích ảnh TEM (hình 4A), lần khẳng định kích thước hạt nano berberin ghi nhận phân tích DLS lớn chúng kết tụ lại với Kết đo XRD mẫu (hình 4B) cho thấy xuất peak có cường độ mạnh khoảng 9,5o peak có cường độ yếu khoảng 25,5o 26,5o Kết cho thấy mẫu nano berberin có cấu trúc tinh thể, điều ghi nhận nghiên cứu Sahibzada cộng [10]; Zou cộng [12] cách đo trực tiếp bột lưới đồng cho thấy mẫu bột sau đông khô tồn hạt có kích thước khoảng 60 nm với hình dạng rõ ràng Hình Mối tương quan độ hấp thụ nồng độ dung dịch berberin chuẩn (A); phổ UV-Vis mẫu nano berberin metanol (B) ảnh FE-SEM bột nano berberin sau đơng khơ (C) Hoạt tính kháng Candida albicans mẫu nano berberin Hình Kết chụp TEM (A) giản đồ XRD (B) mẫu nano berberin Hàm lượng berberin mẫu nano berberin Phổ UV-Vis mẫu nano berberin sau đơng khơ hịa tan lại metanol cho thấy diện đỉnh (peak) đặc trưng berberin bước sóng 430 nm với độ hấp thụ 0,49437 (hình 5B) Dựa vào phương trình nồng độ đường chuẩn berberin chuẩn HPLC (hình 5A) suy hàm lượng berberin mẫu nano berberin đạt 1,1874 mg/ml mẫu đo (tương đương 23,748 mg/ml mẫu sau đông khô) So với ban đầu chế tạo từ ngun liệu thơ 4%, hiệu suất berberin có mẫu nano sau đông khô đạt 59,37% Mặt khác, ảnh FE-SEM hình 5C, thực 62(7) 7.2020 Cơ chế tác động giết chết tế bào nấm Candida albicans berberin làm suy giảm chức ty thể, tạo phản ứng oxy hóa tái hoạt hóa, ảnh hưởng đến đường tồn vẹn vách tế bào yếu tố phiên mã sốc nhiệt HSF1 [7, 8] Hạt nano berberin bào chế nghiên cứu Sahibzada cộng ghi nhận hoạt tính kháng khuẩn kháng nấm [10] Ngồi ra, q trình tạo hạt nano berberin cịn nhiều nhà nghiên cứu ứng dụng việc tạo hệ thuốc ức chế phát triển khối u [13], trình điều trị tiểu đường [14]… Hoạt tính chế kháng nấm Candida albicans berberin nano berberin nhiều nhà khoa học nghiên cứu công bố [6, 9, 15] Trong nghiên cứu này, nano berberin ghi nhận hoạt tính kháng nấm Candida albicans Kết cho thấy hoạt tính kháng nấm nano berberin giảm dần theo nồng độ Điều thể qua bán kính vịng vơ nấm giảm từ 7±0,29 mm nồng độ 8192 µg/ml xuống 1,5±0,00 mm nồng độ 1024 µg/ml Ở nồng độ thấp (512 µg/ml) khơng ghi nhận vịng vơ nấm Nồng độ ức chế tối thiểu (MIC) ghi nhận 1024 µg/ml (hình 7) 15 cộng ghi nhận hoạt tính kháng khuẩn kháng nấm [10] Ngồi ra, q trình tạo hạt nano berberin cịn nhiều nhà nghiên cứu ứng dụng việc tạo hệ thuốc ức chế phát triển khối u [13], trình điều trị tiểu đường [14]… Hoạt tính chế kháng nấm Candida albicans berberin nano berberin nhiều nhà khoa học nghiên cứu công bố [6, 9, 15] Trong nghiên cứu này, nano berberin ghi nhận hoạt tính kháng nấm Khoa học Y - Dược Candida albicans Kết cho thấy hoạt tính kháng nấm nano berberin giảm dần theo nồng độ Điều thể qua bán kính vịng vô nấm giảm từ 7±0,29 mm nồng độ 8192 µg/ml xuống 1,5±0,00 mm nồng độ 1024 µg/ml Ở nồng độ thấp (512 µg/ml) khơng ghi nhận vịng vơ nấm Nồng độ ức chế tối thiểu (MIC) ghi nhận 1024 µg/ml (hình 7) [5] V Nekkanti, V Venkateswarlu, and R Pillai (2012), Drug Nanoparticles - An Overview, p.111-132 [6] N Zorić, I Kosalec, S Tomić, I Bobnjarić, M Jug, T Vlainić, and J Vlainić (2017), “Membrane of Candida albicans as a target of berberine”, BMC Complementary and Alternative Medicine, 17(1), doi: https://doi.org/10.1186/s12906-017-1773-5 [7] P Lam, S.H.L Kok, K.K.H Lee, K.H Lam, D.K.P Hau, W.Y Wong, Z Bian, R Gambari, and C.H Chui (2016), “Sensitization of Candida albicans to terbinafine by berberine and berberrubine”, Biomedical Reports, 4(4), pp.449-452 Hình Hoạt tính kháng nấm nano berberin nồng độ Hình Hoạt tính kháng nấm nano berberin nồng độ [8] S Dhamgaye, F Devaux, P Vandeputte, N.K Khandelwal, D Sanglard, G Mukhopadhyay, and R Prasad (2014), “Molecular mechanisms of action of herbal antifungal alkaloid berberine, in Candida albicans”, PLoS One, 9(8), pe.104554 [9] Y ZhaoDan, D Yan, J.-b Wang, P Zhang, and X Xiao (2010), “Antifungal effect of berberine on Candida albicans by microcalorimetry with correspondence analysis”, Journal of Thermal Analysis and Calorimetry, 102, pp.49-55 Hình Vịng vơ nấm đĩa môi trường thạch sabouraud Kết luận Trong nghiên cứu này, chế tạo thành công nano berberin phương pháp nghiền quay với bi Zirconium Kết kiểm tra phân tích DLS, FE-SEM, TEM XRD cho thấy hạt nano tạo có kích thước trung bình khoảng 60 nm Kiểm tra hoạt tính sinh học cho thấy nano berberin ức chế mạnh phát triển nấm Candida albicans với giá trị MIC ghi nhận nồng độ 1024 µg/ml Dịch nano berberin tạo nghiên cứu có tiềm ứng dụng tạo sản phẩm sử dụng phòng trị bệnh nấm Candida albicans gây TÀI LIỆU THAM KHẢO [1] Q Hou, W.J He, Y.S Wu, H.J Hao, X.Y Xie, and X.B Fu (2019), “Berberine: A traditional natural product with novel biological activities”, Altern Ther Health Med., PMID: 31634873 [2] A.H Amin, T.V Subbaiah, and K.M Abbasi (1969), “Berberine sulfate: antimicrobial activity, bioassay, and mode of action”, Can J Microbiol., 15(9), pp.1067-1076 [3] E Mirhadi, M Rezaee, and B Malaekeh-Nikouei (2018), “Nano strategies for berberine delivery, a natural alkaloid of Berberis”, Biomed Pharmacother., 104, pp.465-473 [4] Z Wang, Y.S Wang, Z.M Chang, L Li, Y Zhang, M.M Lu, X Zheng, M Li, D Shao, J Li, L Chen, and W.F Dong (2017), “Berberine-loaded Janus nanocarriers for magnetic field-enhanced therapy against hepatocellular carcinoma”, Chem Biol Drug Des., 89(3), pp.464-469 62(7) 7.2020 [10] M.U.K Sahibzada, A Sadiq, H.S Faidah, M Khurram, M.U Amin, A Haseeb, and M Kakar (2018), “Berberine nanoparticles with enhanced in vitro bioavailability: characterization and antimicrobial activity”, Drug Design, Development and Therapy, 12, p.303 [11] Z Wang, J Wu, Q Zhou, Y Wang, and T Chen (2015), “Berberine nanosuspension enhances hypoglycemic efficacy on streptozotocin induced diabetic C57BL/6 mice”, Evidence-Based Complementary and Alternative Medicine, Article ID: 239749 [12] Q Zou, Y Li, L Zhang, Y Zuo, J Li, and J Li (2009), “Antibiotic delivery system using nano-hydroxyapatite/chitosan bone cement consisting of berberine”, Journal of Biomedical Materials Research Part A: An Official Journal of The Society for Biomaterials, The Japanese Society for Biomaterials, and The Australian Society for Biomaterials and The Korean Society for Biomaterials, 89(4), pp.1108-1117 [13] Y.-C Lin, J.-Y Kuo, C.-C Hsu, W.-C Tsai, W.-C Li, M.-C Yu, and H.-W Wen (2013), “Optimizing manufacture of liposomal berberine with evaluation of its antihepatoma effects in a murine xenograft model”, International Journal of Pharmaceutics, 441(1-2), pp.381-388 [14] T Wang, N Wang, H Song, X Xi, J Wang, A Hao, and T Li (2011), “Preparation of an anhydrous reverse micelle delivery system to enhance oral bioavailability and anti-diabetic efficacy of berberine”, European Journal of Pharmaceutical Sciences, 44(1-2), pp.127-135 [15] R Iwazaki, E Endo, T Ueda-Nakamura, C Nakamura, L Garcia, and B Filho (2010), “In vitro antifungal activity of the berberine and its synergism with fluconazole”, Antonie Van Leeuwenhoek, 97, pp.201-205 16 ... Phương pháp đánh giá khả kháng nấm Candida albicans tạoNăm hạtWang nanov? ?berberin vớidụng kíchphương thướcpháp trung APSP)đã[10] 2015, cộng sử đồngbình hóa nghiền quay Khả kháng nấm Candida albicans. .. đĩa) .Chế Húttạo 10 0nano µl dịch nano berberin nồng độ 512 µg/ berberin 40 Tỷ lệ (%) kính Khả mm) tạonấm cácCandida giếng đĩa (5 dung giếng/đĩa) năng? ?ục kháng albicans dịch Hút 100 µl dịch nano berberin. .. tạo sản phẩm berberin kích thước nano đánh giá hiệu ức chế nấm Candida albicans, kết nghiên cứu tiền đề cho trình tạo sản phẩm thương mại ứng dụng phòng điều trị bệnh nấm Candida albicans gây