Thiết kế mồi cho tách dòng gen interleukin 2 ở người

Human resources slide BÁO CÁO TIN SINH HỌC Thiết kế mồi cho tách dòng gen interleukin-2 người OUTLINE Human resources slide Interleukin-2 Chương trình Cluster omega Primer- Blast PCR ảo Blast Tách dòng gen Interleukin-2 người - Là phân tử tín hiệu cytokine hệ thống miễn dịch kích hoạt tế bào: CD8+; CD4+; dendritic cell; natural kill cell bảo vệ thể - Có lách người - Tách dòng gen phục vụ cho y tế + Chọn loài tương đồng: tinh tinh; khỉ đột; chuột ; gà + Sử dụng sở liệu ncbi tìm trình tự gen lồi Chương trình cluster omega Xác định trình tự tương đồng, chọn thiết kế mồi vùng bảo thủ vị trí highlight Bốn trình tự Nu từ: khỉ đột; chuột; tinh tinh; gà Primer-Blast Human resources slide - Chương trình thiết kế mồi online - Khn ảo: lấy trình tự Nu tinh tinh gen giống với người - Xác định vùng bảo thủ gen để thiết kế mồi; điền vào - Chọn kích thước sản phẩm - Điều chỉnh thơng số khác tùy vào mục đích thiết kế mồi: nhiệt độ nóng chảy, tỉ lệ G-C 4 PCR ảo Sau thiết kế mồi đem chạy PCR ảo, dự đốn sản phẩm Khn ảo Mồi xi Mồi ngược Sản phẩm PCR ảo Blast - Sản phẩm PCR ảo đoạn trình tự nucleotide - Sử dụng Blast kiểm tra lại xem đoạn DNA có mã hóa cho tính trạng quan tâm hay khơng - Blast so sánh trình tự đầu vào với trình tự ngân hàng liệu - Đầu trình tự tương đồng biết tính trạng, xếp từ cao đến thấp - Dựa vào trình tự đầu ra, suy đốn tính trạng trình tự đầu vào Kết trả sau chạy Blast Để dự đốn tính trạng gen quan tâm, vào trình tự tương đồng đê cập bảng - Sinh vật có trình tự tương đồng với gen cần tách dịng, mã hóa interleukin-2 - Nếu nhóm trình tự tương đồng với gen cần tách dịng, có tính trạng giống nhau, ta dự đốn tính trạng gen đích mã hóa interleukin-2 Các bước tách dòng gen B1: Chọn vector tách dòng Chọn pCR2.1-TA B2: Gen đích Tách chiết mRNA mã hóa interleukin-2 người Tạo cDNA B3: Lựa chọn enzyme thích hợp: EcoRI; vị trí cắt: G/AATTC B4: Chèn cDNA đích vào vector tách dòng B5: Chọn tế bào chủ: E.coli DH5α B6: Sàng lọc tế bào mang vector tái tổ hợp, dựa biểu gen thị: kháng sinh, thị màu Human resources slide 10 Thank You ... đồng với gen cần tách dịng, có tính trạng giống nhau, ta dự đốn tính trạng gen đích mã hóa interleukin- 2 Các bước tách dòng gen B1: Chọn vector tách dòng Chọn pCR2.1-TA B2: Gen đích Tách chiết... trình tự Nu tinh tinh gen giống với người - Xác định vùng bảo thủ gen để thiết kế mồi; điền vào - Chọn kích thước sản phẩm - Điều chỉnh thơng số khác tùy vào mục đích thiết kế mồi: nhiệt độ nóng...OUTLINE Human resources slide Interleukin- 2 Chương trình Cluster omega Primer- Blast PCR ảo Blast Tách dòng gen Interleukin- 2 người - Là phân tử tín hiệu cytokine hệ thống miễn