Liệu pháp CAR t trong điều trị ung thư

Nhóm Liệu Pháp CAR-T Trong Điều Trị Ung Thư GVHD: PGS.TS Trương Quốc Phong Mục lục • Giới thiệu chung liệu pháp CAR-T • Cấu trúc tế bào CAR-T • Quy trình sản xuất CAR-T lâm sàng • Ưu thế, hạn chế, hướng tương lai 1 Giới thiệu chung liệu pháp CAR-T Các tế bào ung thư xuất phát từ tế bào tự thân bị đột biến, giúp chúng tăng sinh khơng kiểm sốt khỏi chế điều hồ phát triển bình thường thể 1.Giới thiệu chung liệu pháp CAR-T Các tế bào lympho T sở hữu thụ thể tế bào T đặc hiệu, nhạy cảm liên tục tìm kiếm tín hiệu ung thư, qua kích thích đáp ứng miễn dịch liên tiếp xác định kháng nguyên ung thư Do vậy, tế bào T có khả giết tế bào ung thư tiềm tàng cách xác Tuy nhiên, tế bào T thơng thường công yếu ớt chống lại tế bào bị biến đổi 1.Giới thiệu chung liệu pháp CAR-T Liệu pháp miễn dịch CAR-T tên đầy đủ Chimeric Antigen Receptor T-Cell Immunotherapy, liệu pháp miễn dịch tế bào T thụ thể kháng nguyên dạng khảm Các tế bào T biến đổi gen để biểu cấu trúc nhân tạo, bao gồm TCR tổng hợp nhắm vào kháng nguyên xác định trước biểu tế bào khối u 1.Giới thiệu chung liệu pháp CAR-T T cell CAR-T cell Khi kháng thể nhận mục tiêu, chẳng hạn CD19 tìm thấy bệnh bạch cầu lymphocytic cấp tính tế bào B (ALL), tế bào CAR-T trở nên kích hoạt giết chết tế bào đích mang kháng nguyên Kĩ thuật khơng ngừng hồn thiện, trở thành “liệu pháp thứ 5” điều trị ung thư sau phẫu thuật, hóa trị, xạ trị điều trị trúng đích 2.Cấu trúc tế bào CAR-T CAR protein tổng hợp biến số chuỗi đơn chọn từ kháng thể đơn dòng cụ thể nhiều miền báo hiệu nội bào tế bào T CAR chuyển tín hiệu nhận dạng kháng nguyên thành thác truyền tín hiệu tác động lên chức đáp ứng tế bào T như: tiết nhân tố gây độc, cytokine tiền viêm Các thành phần quan trọng thụ thể CAR gồm: 1.Vùng nhận dạng kháng nguyên: -Tính đặc hiệu kháng nguyên CAR định vùng scFv ScFv phân tử nhận diện kháng nguyên kết hợp miền biến đổi chuỗi nhẹ nặng từ cấu trúc kháng thể đơn dòng -Ưu điểm việc sử dụng scFv làm vùng nhận dạng kháng nguyên CAR là: dễ ghép vào cấu trúc CAR chung tính đặc hiệu cao chúng tạo để gắn đặc hiệu kháng nguyên quan tâm 2.Cấu trúc tế bào CAR-T  2.Vùng chức lề xuyên màng: -Vùng chức lề linh động đoạn peptide ngắn giúp scFv tự biến đổi cấu hình, qua scFv tự bám với kháng ngun đích biểu tế bào ung thư Vùng sử dụng liên kết với vùng chức đệm để phóng scFv khỏi bề mặt tế bào T -Vai trò vùng chức xuyên màng tác động đến biểu CAR liên kết với protein màng nội sinh tế bào T 2.Cấu trúc tế bào CAR-T 3.Vùng chức đồng hoạt hố: Những cải tiến mang tính cách mạng nhằm tăng khả tăng sinh, tiết cytokine tiền viêm (IL-2, IL8), sống sót chức gây độc tế bào CAR-T bao gồm:  Thế hệ T1: có tín hiệu miền zeta (CD3ζ)  Thế hệ T2: chuỗi zeta (CD3ζ) CD28 Thế hệ T3: kết hợp thêm vùng chức truyền tín hiệu thứ 4-1BB (CD137), OX40 (CD134), ICOS CD27 Thế hệ thứ 4: CAR bảo vệ để tăng cường tính bền bỉ mơi trường khối u CAR không yêu cầu tham gia phức hợp peptide HLA nhận phân tử mục tiêu mà không cần xử lý peptide biểu HLA CAR có khả nhận kháng nguyên liên quan đến khối u tảng HLA Do CAR gắn sẵn thụ thể đặc hiệu giúp tế bào T nhận tế bào ung thư để tiêu diệt mà khơng cần HLA trình diện lên 3.Quy trình sản xuất CAR-T lâm sàng 3.Quy trình sản xuất CAR-T lâm sàng Thu nhận tế bào đơn nhân từ máu ngoại vi  Bước trình sản xuất tế bào CAR-T thu nhận tế bào máu đơn nhân từ máu ngoại vi người máy apheresis. Các tế bào CAR-T sản xuất từ máu bệnh nhân, từ máu người hiến khỏe mạnh  Bằng cách máu lấy khỏi người bệnh để thu nhận tế bào miễn dịch chứa tế bào T thành phần lại đưa trở lại hệ thống lưu thơng máu bệnh nhân 3.Quy trình sản xuất CAR-T lâm sàng 2.Tái lập trình tế bào T  Gen mã hóa cấu trúc CAR chèn vào gen tế bào T cách sử dụng vec tơ liệu pháp gen Hai vector phổ biến lentivirus gammaretroviruses  Khi vào tế bào, vectơ biểu thị thông tin di truyền CAR RNA, sau chép ngược thành DNA tích hợp vĩnh viễn vào gen tế bào T Gen mã hóa CAR sau cài vào hệ gen tế bào chủ biểu thành protein, tạo thụ thể CAR 3.Quy trình sản xuất CAR-T lâm sàng Tăng sinh tế bào CAR-T  Các tế bào nuôi cấy môi trường nuôi cấy với IL-2 để tạo hàng triệu tế bào T (một vài ngày hàng tuần)  Mục đích bước tạo lượng lớn tế bào CAR-T để tiêm trở lại bệnh nhân chúng tạo đủ hiệu kháng u Truyền tế bào CAR-T trở lại bệnh nhân  Một vài ngày trước truyền tế bào CAR-T, bệnh nhân phải hoá trị để làm giảm số tế bào lympho nội thân, điều cho phép tế bào CAR-T mọc ghép trải rộng tốt  Các tế bào CAR-T sau vượt qua đánh giá kiểm tra chất lượng truyền cho bệnh nhân  Người bệnh theo dõi chặt chẽ sau truyền CAR-T  Số lượng tế bào CAR-T đạt đỉnh khoảng đến tuần sau truyền Mức độ trải rộng tồn tế bào CAR-T yếu tố quan trọng để đánh giá hiểu liệu pháp CAR-T  Tế bào CAR-T có khả phát triển thành tế bào T nhớ Cụ thể hơn, tế bào CAR-T hướng đích CD19 tồn tới năm thể Ưu thế, hạn chế hướng tương lai  Ưu - Tính an tồn cao:Tế bào CAR-T nhận biết giết chết tế bào ung thư, làm tổn thương cho tế bào khỏe mạnh, tác dụng phụ, giảm đau đớn cho bệnh nhân - Tính nhắm trúng đích mạnh: xử lý triệt để khối u số bệnh nhân bế tắc điều trị ( Tế bào CAR-T thông qua công nghệ gen biến đổi tế bào T bệnh nhân, tận dụng chế tích hợp kháng ngun, tránh việc hình thành chế ẩn nấp trình kháng nguyên hoạt động) - Khả khai thác cao: Trong trình điều trị xuất phản ứng khơng tốt, thay đổi cải thiện phương án để tối ưu hóa việc điều trị, tích hợp phân tử đặc hiệu khác nhau, gia nhập gen điều khiển, điều tiết tính hài hịa tế bào CAR v…v - Miễn dịch lâu dài: Liệu pháp tế bào CAR-T tăng cường xây dựng lại chức miễn dịch thể để chống lại với ung thư thời gian lâu dài Ưu thế, hạn chế hướng tương lai  Hạn chế: - Là kỹ thuật phức tạp, địi hỏi độ xác cao, chun mơn giỏi…  - Chuẩn bị khó khăn: nhiều xét nghiệm, cố gắng tìm người cho phù hợp, hóa trị xạ trị bền bỉ trước ghép - Gây số tác dụng phụ nghiêm trọng: hội chứng giải phóng kích hoạt độc tố cytokine, hội chứng kích thích đại thực bào, rối loạn chức não( vấn đề với suy nghĩ, khó nói chuyện, co giật), hội chứng phân giải khối u, vấn đề trúng đích lạc đích, Thậm chí bệnh nhân chết tác dụng phụ Liệu pháp cấp phép để điều trị bệnh máu trắng ung thư hạch - Chi phí tốn kém: 300.000 USD-500.000 USD Ưu thế, hạn chế hướng tương lai  Hướng tương lai:  Chọn kháng nguyên đặc trưng cho tế bào ung thư dựa vào vài thông số như: mức độ phân bố loại kháng nguyên khối u độ ổn định kháng nguyên giai đoạn khác ung thư  Việc nhân rộng tế bào CAR-T bên thể người bệnh. Hiện chủ yếu quy trình tự ghép, tức lấy tế bào bệnh nhân, xử lý tiêm truyền lại vào cho bệnh nhân Việc thành lập ngân hàng liệu tế bào CAR-T điều cần thiết để tiết kiệm thời gian chi phí chữa bệnh - Xác định liều lượng thời gian tiêm truyền tế bào CAR-T để đạt hiệu cao giảm tác dụng phụ không mong muốn Ưu thế, hạn chế hướng tương lai • Cải tiến kỹ thuật di truyền để thiết kế tế bào CAR-T thông minh hơn như sử dụng phương pháp chỉnh sửa gene thay dùng virus để chuyển gene • Đối với loại khối u cứng, tế bào CAR-T cần phải có khả thâm nhập cao để tăng cường hiệu • Khối u biết tới với khả tiến hoá thích nghi cao, nên có khả tự phát triển nhiều hàng rào bảo vệ, chống lại tế bào CAR-T Vì nhiều phương án cịn thử nghiệm để tránh tượng Ưu thế, hạn chế hướng tương lai  Cuối cùng, cần phải nhấn mạnh lại rằng, liệu pháp tế bào CAR-T thử nghiệm, việc chữa trị kèm với nhiều nguy cho bệnh nhân Vì việc thử nghiệm chữa trị cần phải kèm với trình theo dõi sát để có can thiệp y tế kịp thời hiệu ... kháng ngun Kĩ thu? ?t khơng ngừng hoàn thiện, trở thành ? ?liệu pháp thứ 5” điều trị ung thư sau phẫu thu? ?t, hóa trị, xạ trị điều trị trúng đích 2.Cấu trúc t? ?? bào CAR- T CAR protein t? ??ng hợp biến... Giới thiệu chung liệu pháp CAR- T • Cấu trúc t? ?? bào CAR- T • Quy trình sản xu? ?t CAR- T lâm sàng • Ưu thế, hạn chế, hướng t? ?ơng lai 1 Giới thiệu chung liệu pháp CAR- T Các t? ?? bào ung thư xu? ?t ph? ?t từ... hiểu liệu pháp CAR- T  T? ?? bào CAR- T có khả ph? ?t triển thành t? ?? bào T nhớ Cụ thể hơn, t? ?? bào CAR- T hướng đích CD19 t? ??n t? ??i năm thể Ưu thế, hạn chế hướng t? ?ơng lai  Ưu - T? ?nh an t? ??n cao :T? ?? bào CAR- T