Từ năm 2016-2018, bệnh thán thư đã phát sinh gây hại mạnh trên cây Sâm Ngọc Linh ở các vùng trồng tại Tu Mơ Rông- Kon Tum. Bệnh thường xuất hiện vào đầu mùa mưa từ tháng 6- 8 hàng năm, tại một số vườn trồng Sâm Ngọc Linh, tỷ lệ bệnh gây hại lên tới trên 70%. Theo dõi quy luật phát sinh gây hại và sử dụng một số loại thuốc phòng trừ nấm C. acutatum hiệu quả góp phần giảm thiệt hại, nâng cao năng suất và chất lượng Sâm Ngọc Linh đã được Viện Bảo vệ thực vật thực hiện trong 2 năm 2019-2020.
Kết nghiên cứu Khoa học BVTV – Số 2/2020 MỘT SỐ KẾT QUẢ PHÒNG TRỪ BỆNH THÁN THƯ HẠI SÂM NGỌC LINH (Panax vietnamensis Ha and Grushv.) TẠI TU MƠ RÔNG-KON TUM Control of Anthracnose Diseases of Vietnamese Ginseng (Panax vietnamensis Ha and Grushv.) in Tumorong, Kon Tum Province Trịnh Xn Hoạt1*, Mai Văn Qn1, Hồng Quỳnh Nga2, Ngơ Quang Huy1, Nguyễn Thành Chung3, Vũ Văn Long3, Lê Quang Mẫn1, Nguyễn Mạnh Hùng1, Ngày nhận bài: 25.4.2020 Ngày chấp nhận: 05.5.2020 Abstract Anthracnose disease in Vietnamese Ginseng (Panax vietnamensis Ha and Grushv.), caused by Colletotrichum acutatum, is widespread and responsible for serious economic losses in Viet Nam The efficacy of some active ingredients were evaluated for suppression of C acutatum in vitro and field conditions In in vitro, propiconazole + difenoconazole at 50ppm and azoxystrobin + difenoconazole at 50 ppm significantly inhibited the mycelial growth of C acutatum after days of treatment Meanwhile, Bacillus subtilis 50% w/w and Bacillus subtilis 109 CFU/ml at the recommended concentration also completely suppressed the development of C acutatum after days of treatment In the field conditions, application of Antracol 70WP (propineb 700g/kg) in combination with Amistar Top 325SC (azoxystrobin 200 g/l + difenoconazole 125 g/l) significantly decreased disease incidence and disease severity in comparision to other treatments Its efficacy was 74.27% after days of treatment, reached up to 77.92% after days of treatment but decreased to 64.64% after 14 days of treatment Among the tested bio-products, efficacy of MicroTech-1(NL) (B subtilis 109 CFU/ml) was 63.49% after days of treatment, increased up to 69.47% after days of treatment but decreased thereafter The most effective treatment was single application of two chemical fungicides Antracol 70W and Amistar Top 325SC or single application of MicroTech-1(NL), which significantly reduced the disease incidence and disease severity of anthracnose disease of Vietnamese Ginseng Keywords: Colletotrichum acutatum, Vietnamese gingseng, Anthracnose disease, Panax vietnamensis Ha et Grush ĐẶT VẤN ĐỀ * Nấm Colletotrichum acutatum gây hại quan trọng nhiều loại trồng vùng ôn đới nhiệt đới giới Bệnh gây hại dâu tây (Fragaria ananassa), cà chua (Lycopersicon esculentum), táo (Malus pumila), cà phê (Coffea arabica), ổi (Psidium guajava), ô liu (Olea europea) Tại Việt Nam, nấm Colletotrichum acutatum gây bệnh thán thư Sâm Ngọc Linh Tu Mơ Rông – Kon Tum (Mai Văn Quân CS, 2020) Triệu chứng ban đầu bị vàng, sau rụng dần theo tầng rời Trên cuống thân vết bệnh kéo dài màu nâu, khô héo, xuất ổ bào tử nấm phận bị bệnh Gặp điều kiện mưa ẩm kéo dài thân bị thối nhũn Từ năm 2016-2018, bệnh thán thư phát sinh gây hại mạnh Sâm Ngoc Linh vùng trồng Tu Mơ Rông- Kon Tum Bệnh thường xuất vào đầu mùa mưa từ Viện Bảo vệ thực vật Học viện Nông nghiệp Việt Nam Công ty Lâm Nghiệp Đắk Tô tháng 6- hàng năm, số vườn trồng Sâm Ngọc Linh, tỷ lệ bệnh gây hại lên tới 70% Theo dõi quy luật phát sinh gây hại sử dụng số loại thuốc phòng trừ nấm C acutatum hiệu góp phần giảm thiệt hại, nâng cao suất chất lượng Sâm Ngọc Linh Viện Bảo vệ thực vật thực năm 2019-2020 VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 2.1 Vật liệu nghiên cứu Cây Sâm Ngọc Linh trồng Tu Mơ RôngKon Tum, nấm C acutatum gây bệnh thán thư phân lập Sâm Ngọc Linh, loại thuốc hóa học sinh học phịng trừ bệnh thán thư trồng 2.2 Thời gian địa điểm nghiên cứu + Thời gian nghiên cứu: 2019-2020 + Địa điểm nghiên cứu: vùng núi Ngọc Linh, huyện Tu Mơ Rông-Kon Tum, Viện Bảo vệ thực vật 2.3 Phương pháp nghiên cứu Kết nghiên cứu Khoa học BVTV – Số 2/2020 2.3.1 Diễn biến phát sinh gây hại nấm C acutatum gây bệnh thán thư Sâm Ngọc Linh Tu Mơ rông- Kon Tum Theo dõi diễn biến phát sinh gây hại nấm C acutatum gây bệnh thán thư Sâm Ngọc Linh Tu Mơ rông- Kon Tum theo phương TLB (%) = Số cây (bộ phận của cây)bị bệnh × 100 Tổng số cây (bộ phận của cây) điều tra 2.3.2 Nghiên cứu hiệu sử dụng thuốc BVTV đến nấm C acutatum gây bệnh thán thư Sâm Ngọc Linh năm 2020 - Đánh giá ảnh hưởng thuốc hóa học đến khả nảy mầm nấm C acutatum môi trường nhân tạo Các hoạt chất trừ nấm: propineb (Antracol 70WP), metalaxyl 40g/kg + mancozeb 640g/kg (Ridomil Gold 68WG), propiconazole 150 g/l + difenoconazole 150 g/l (Tilt super 300EC), azoxystrobin 200 g/l + difenoconazole 125 g/l (Amistar Top 325SC ) Trộn hoạt chất nồng độ 1, 3, 5, 10, 30 50 ppm mơi trường PDA, nhỏ 10µl dung dịch chứa bào tử nấm C acutatum nồng độ 103 bào tử/ml sau sử dụng bàn trang thủy tinh khử trùng trang dung dịch bào tử lên bề mặt môi trường PDA, để điều kiện 25oC Theo dõi nảy mầm nấm C acutatum qua kính hiển vi sau 4, 12 thí nghiệm - Đánh giá khả ức chế số loại thuốc đến phát triển nấm C acutatum môi trường nhân tạo Bốn loại hoạt chất trừ nấm propineb (Antracol 70WP), metalaxyl M 40g/kg + mancozeb 640g/kg (Ridomil Gold 68WG ), propiconazole 150 g/l + difenoconazole 150 g/l (Tilt Super 300 EC), azoxystrobin 200 g/l + difenoconazole 125 g/l (Amistar Top 325SC) Trộn hoạt chất nồng độ khác 5, 10, 30, 100, 300, 500 1000 ppm môi trường PDA Cấy mảnh nấm mm vào tâm đĩa petri có chứa thuốc trừ nấm, o để điều kiện 25 C Đo kích thước tản nấm sau ni cấy 3, ngày Tính hiệu lực ức chế nấm theo Abbott - Đánh giá khả ức chế số loại thuốc sinh học đến phát triển nấm C acutatum môi trường nhân tạo Ba thuốc trừ nấm sinh học kasugamycin 2g/l + ningnanmycin 80g/l (Nikasu 82SL), streptomyces lydicus (Acti No Vate 1SP), bacillus subtilis (Biobac 50WP) với nồng pháp nghiên cứu Viện Bảo vệ thực vật Vườn Sâm Ngọc Linh năm tuổi năm tuổi vùng núi Ngoc Linh thuộc tỉnh Kon Tum Mỗi loại vườn, chọn vườn đại diện, vườn điều tra 10 điểm chéo góc, điểm cây, điều tra định kỳ tháng lần Theo dõi tỷ lệ bệnh (%) độ 1/3 1/2 theo khuyến cáo Trộn thuốc trừ nấm sinh học nồng độ khác vào môi trường PDA, cấy mảnh nấm 4mm vào tâm đĩa petri có chứa thuốc trừ nấm, để o điều kiện 25 C Đo kích thước tản nấm sau 3, 5, ngày ni cấy Tính hiệu lực ức chế nấm theo Abbott 3.3 Đánh giá hiệu lực số loại thuốc bảo vệ thực vật bệnh thán thư điều kiện đồng ruộng 3.3.1 Hiệu lực số loại thuốc hóa học bệnh thán thư điều kiện đồng ruộng Các loại thuốc hóa học sử dụng phòng trừ bệnh thán thư bao gồm Tilt Super 300EC (propiconazole 150 g/l + difenoconazole 150 g/l), Antracol 70WP (propineb 700g/kg), Amistar Top 325SC (azoxystrobin 200 g/l + difenoconazole 125 g/l) Thí nghiệm bố trí theo khối ngẫu nhiên hồn chỉnh (RCB) gồm cơng thức, nhắc lại lần với diện tích thí nghiệm 50 m Theo dõi tỷ lệ bệnh sau 3, 5, 15 ngày sau xử lý Tính hiệu lực thuốc theo công thức Henderson-Tilton 3.3.2 Hiệu lực số loại thuốc sinh học bệnh thán thư điều kiện đồng ruộng Chế phẩm sinh học phòng trừ bệnh thán thư bao gồm: Biobac 50WP (Bacillus subtilis 50% w/w), Acti No vate 1SP (Streptomyces lydicus WYEC 108), Promot Plus WP (Trichoderma spp.), Mocabi SL (Chaetomium sp (NL) Trichoderma sp.), MicroTech-1 (Bacillus subtilis 10 CFU/ml)) Thí nghiệm bố trí theo khối ngẫu nhiên hồn chỉnh (RCB) gồm cơng thức, cơng thức nhắc lại lần, thí nghiệm 50 m Theo dõi tỷ lệ bệnh sau 3, 5, 15 ngày sau xử lý Tính hiệu lực thuốc theo công thức Henderson-Tilton 2.4 Phương pháp xử lý số liệu Xử lý số liệu thí nghiệm phần mềm Excell, Statistix Kết nghiên cứu Khoa học BVTV – Số 2/2020 KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 3.1 Diễn biến quy luật phát sinh gây hại nấm C acutatum gây bệnh thán thư Sâm Ngọc Linh Tu Mơ rông- Kon Tum Bệnh thán thư gây hại sâm Ngọc Linh làm cho bị vàng, sau rụng dần theo tầng rời Khi gặp điều kiện ẩm ướt kéo dài, thân bị thối nhũn, không cho hoa hạt Kết theo dõi diễn biến bệnh thán thư Sâm Ngọc Linh loại hình vườn (vườn năm tuổi năm tuổi) cho thấy bệnh thán thư gây hại mạnh bắt đầu mùa mưa từ tháng 6-9 giai đoạn hoa- đậu hạt với tỷ lệ bệnh từ 4,67-6,67% vườn năm tuổi 8,00 13,33% vườn năm tuổi Kết nghiên cứu tỉ lệ bệnh tỉ lê thuận với tuổi Vườn sâm năm tuổi tỉ lệ bệnh bị hại nặng vườn ươm tất kỳ theo dõi Hình Diễn biến bệnh thán thư Sâm Ngọc Linh Tu Mơ Rông- Kon Tum, năm 2019 Vào đầu mùa mưa (tháng 5-6) tỷ lệ bệnh thán thư vườn năm tuổi 4,67% tỷ lệ bệnh vườn năm tuổi 8,00% Về cuối giai đoạn sinh trưởng, bệnh thán thư gây hại mạnh loại hình vườn sâm theo dõi, tỷ lệ bệnh cao vườn năm tuổi 13,33% tỷ lệ bệnh vườn năm tuổi 6,67% Đến tháng 9, lượng mưa bắt đầu giảm Sâm kết thúc giai đoạn sinh trưởng năm, thu hoạch hạt bắt đầu rụng lá, bước vào giai đoạn ngủ đông 3.2 Đánh giá khả ức chế của số loại hoạt chất bảo vệ thực vật đến nấm C acutatum điều kiện phịng thí nghiệm 3.2.1 Nghiên cứu khả nảy mầm nấm C acutatum môi trường (PDA) chứa thuốc BVTV Các loại hoạt chất hóa học trừ nấm khác ảnh hưởng tới nảy mầm bào tử nấm C acutatum sau 4, 12 theo dõi Hoạt chất propineb 700g/kg, hỗn hợp metalaxyl M 40g/kg + mancozeb 640g/kg hỗn hợp azoxystrobin 200 g/l + difenoconazole 125 g/l có khả ức chế hoàn toàn nảy mầm bào tử nấm sau 4, 12 theo dõi Hỗn hợp hoạt chất propiconazole 150 g/l + difenoconazole 150 g/l có khả hạn chế bào tử nảy mầm so với đối chứng nồng độ hoạt chất thí nghiệm Nồng độ hỗn hợp hoạt chất cao có khả hạn chế bào tử nảy mầm lớn Sau thí nghiệm, hỗn hợp hoạt chất propiconazole 150 g/l + difenoconazole 150 g/l có tỷ lệ nảy mầm giảm dần từ 61,89-2,32% nồng độ hoạt chất tăng từ 1-30 ppm Trong bào tử nấm nảy mầm không sử dụng thuốc 80,17% Tuy nhiên, nồng độ hoạt chất 50 ppm ức chế hoàn toàn bào tử nấm nảy mầm Sau thí nghiệm bào tử nấm có khả nảy mầm tất nồng độ thí nghiệm với tỷ lệ bào tử nảy mầm giảm dần từ 99,05-80,97% nồng độ hoạt chất từ 1-50 ppm, bào tử nấm hồn tồn nảy mầm không sử dụng thuốc (đạt 100%) Sau 12 thí nghiệm tỷ lệ nảy mầm bào tử nấm tăng lên so với thí nghiệm 99,1-93,41% nồng độ hoạt chất thí nghiệm (Bảng 1) Bảng Ảnh hưởng số hoạt chất hóa học đến khả nảy mầm bào tử nấm C acutatum (Viện Bảo vệ thực vật, năm 2020) Thời gian theo dõi Nồng độ Hoạt chất Propineb 700g/kg Metalaxyl M 40g/kg, mancozeb 640g/kg Propiconazole 150 g/l + difenoconazole 150 g/l Tỷ lệ nảy mầm (%) nấm nồng độ hoạt chất (ppm) 10 30 50 - - - - - - 61,89 52,02 45,85 39,71 2,32 - Kết nghiên cứu Khoa học Thời gian theo dõi 12 Nồng độ Hoạt chất Azoxystrobin 200 g/l + difenoconazole 125 g/l Đối chứng Propineb 700g/kg Metalaxyl M 40g/kg, mancozeb 640g/kg Propiconazole 150 g/l + difenoconazole 150 g/l Azoxystrobin 200 g/l + difenoconazole 125 g/l Đối chứng Propineb 700g/kg Metalaxyl M 40g/kg, mancozeb 640g/kg Propiconazole 150 g/l + difenoconazole 150 g/l Azoxystrobin 200 g/l + difenoconazole 125 g/l Đối chứng BVTV – Số 2/2020 Tỷ lệ nảy mầm (%) nấm nồng độ hoạt chất (ppm) 10 30 50 - - - - - - - - - - - - - - - - - - 99,05 94,59 93,89 92,79 89,06 80,97 - - - - - - - - - - - - - - - - - - 99,1 98,96 98,41 97,87 94,75 93,41 - - - - - - 80,17 100 100 Ghi chú: - Tỷ lệ nảy mầm 0%, bào tử không nảy mầm 3.2.2 Khả ức chế số loại hóa học thuốc đối phát triển nấm C acutatum điều kiện invitro Sau ngày thí nghiệm, hỗn hợp hoạt chất propiconazole 150 g/l + difenoconazole 150 g/l azoxystrobin 200 g/l + difenoconazole 125 g/l ức chế hoàn toàn phát triển nấm nồng độ 50 ppm, nồng độ thí nghiệm 5- 10 ppm hỗn hợp propiconazole 150 g/l + difenoconazole 150 g/l azoxystrobin 200 g/l + difenoconazole 125 g/l ức chế nấm 84,53-86,19% 86,74-87,29%; hoạt chất propineb 700g/kg có hiệu ức chế phát triển nấm từ 23,7662,98% nồng độ từ 5-300 ppm, phát triển nấm bị ức chế hoàn toàn nồng độ 500 ppm; Khả ức chế hỗn hợp metalaxyl M 40g/kg + mancozeb 640g/kg nhất, nồng độ 5-500 ppm, hiệu úc chế phát triển nấm đạt từ 20,99-46,96% Sau ngày thí nghiệm, hoạt chất hóa học tiếp tục trì khả ức chế phát triển nấm nồng độ thí nghiệm Hiệu ức chế có xu hướng tăng lên sử dụng hoạt chất metalaxyl M 40g/kg + mancozeb 640g/kg, propiconazole 150 g/l + difenoconazole 150 g/l azoxystrobin 200 g/l + difenoconazole 125 g/l nồng độ thí nghiệm Tuy nhiên, hoạt chất propineb 700g/kg có hiệu ức chế giảm so với sau ngày thí nghiệm từ 22,19-57,95%, nồng độ 500ppm, hoạt chất tiếp tục trì khả ức chế hồn tồn phát triển nấm Sau ngày thí nghiệm, hỗn hợp azoxystrobin 200 g/l + difenoconazole 125 g/l trì khả ức chế hoàn toàn phát triển nấm nồng độ 50 ppm hỗn hợp propiconazole 150 g/l + difenoconazole 150 g/l ức chế hoàn toàn nấm phát triển nồng độ 100 ppm Khả ức chế phát triển nấm tiếp tục giảm dần sử dụng hoạt chất propineb 700g/kg, metalaxyl M 40g/kg + mancozeb 640g/kg Trong đó, hỗn hợp metalaxyl M 40g/kg + mancozeb 640g/kg có khả ức chế từ 14,9239,01% nồng độ 5-500 ppm Propineb 700g/kg có hiệu ức chế từ 17,02 -55,76% nồng độ 5-300 ppm, nồng độ 500 ppm hoạt chất propineb 700 g/kg khơng trì khả ức chế hoàn toàn nấm phát triển, khả ức chế nấm đạt 92,41% Trong điều kiện thí nghiệm, hỗn hợp hoạt chất propiconazole 150 g/l + difenoconazole 150 g/l khơng có khả ức chế bào tử nấm mầm sau 12 loại hoạt chất propineb 700g/kg, hỗn hợp metalaxyl M 40g/kg + mancozeb 640g/kg, hỗn hợp azoxystrobin 200 g/l + difenoconazole 125 g/l có khả ức chế hồn toàn nảy mầm bào tử nấm sau 12 Kết nghiên cứu Khoa học thí nghiệm hoạt chất khơng có khả ức chế phát triển sợi nấm nồng độ