Nghiên cứu kết quả một số thông số hóa sinh nước tiểu bằng các phương pháp khác nhau

ĐẶT VẤN ĐỀ Xét nghiệm nước tiểu test sàng lọc thường quy, định phần quy trình khám lâm sàng Xét nghiệm nước tiểu giúp phát bất thường nước tiểu, sở có giá trị hỗ trợ bác sĩ lâm sàng việc chẩn đoán, theo dõi bệnh, đánh giá hiệu phương pháp điều trị cung cấp thông tin cần thiết sức khỏe người bệnh Bên cạnh đó, việc lấy mẫu nước tiểu tương đối đơn giản (trừ trường hợp lấy mẫu nước tiểu 24h), khơng địi hỏi áp dụng thủ thuật, giá tương đối rẻ nên người bệnh dễ dàng chấp nhận, xét nghiệm nước tiểu tiến hành thuận lợi, dễ dàng Tổng phân tích nước tiểu xét nghiệm nước tiểu sử dụng phổ biến nay, test thử 10 thông số cho biết: tỷ trọng nước tiểu, pH, số bạch cầu, nitrit, protein, glucose, thể cetonic, urobilinogen, bilirubin hồng cầu nước tiểu Đây xét nghiệm có độ đặc hiệu cao, giúp đánh giá nhanh, xác yếu tố sinh hóa nước tiểu; thường định để chẩn đoán bệnh lý nhiễm trùng hệ thống thận - tiết niệu để chẩn đốn bệnh lý khơng thuộc hệ thống thận - tiết niệu song có gây thay đổi thành phần nước tiểu Mặc dù vậy, kết thu từ xét nghiệm tổng phân tích mang tính chất tương đối Trong trường hợp bác sĩ lâm sàng muốn theo dõi chẩn đoán điều trị bệnh nhân cần phải tiến hành xét nghiệm định lượng Do vậy, tiến hành đề tài “Nghiên cứu kết số thơng số hóa sinh nước tiểu phương pháp khác nhau” với hai mục tiêu là: So sánh kết thông số protein, glucose, bạch cầu hồng cầu nước tiểu phương pháp bán định lượng máy phân tích nước tiểu tự động phương pháp định lượng Tìm hiểu mối tương quan số hai phương pháp Chương TỒNG QUAN TÀI LIỆU Nước tiểu (Urine) Nước tiểu dịch suất quan trọng chứa phần lớn chất cặn bã thể Những thay đổi số hóa lý đặc biệt thay đổi thành phần hóa học nước tiểu phán ánh rối loạn chuyển hóa [1] Sự tạo thành nước tiểu Nước tiểu tạo thành liên tục đơn vị chức thận nephron Ở người, thận có khoảng 1triệu nephron Mỗi nephron gồm bó bao mạch bọc bao Bowman( cầu thận) ống thận( bao gồm ống lượn gần, quai helle, ống lượn xa, ống góp) Sự tiết nước tiểu nhờ trình siêu lọc tái hấp thu.[1] Sự lọc cầu thận Mao mạch cầu thận cho nước chất có phân tử nhỏ máu qua lại dễ dàng màng chắn phân tử lớn Các phân tử lớn protein TLPT 70.000 khơng qua Vì nước tiểu ban đầu (nước tiểu bao Bowman) có nồng độ chất huyết tương trừ protein.[1] Màng lọc cầu thận[2] Dịch từ lòng mao mạch vào bọc Bowman phải qua màng lọc gồm lớp: - Lớp tế bào nội mô mao mạch: tế bào có lỗ thủng (fenestra) có đường kính 160 A0 - Màng đáy: màng lưới sợi collagen proteoglycan, có lỗ nhỏ đường kính 110 A0, tích điện âm - Lớp tế bào biểu mô (lá trong) bao Bowman: lớp tế bào biểu mơ có chân, tua nhỏ có khe nhỏ có đường kính khoảng 70-75 A0 Hình 1: Cấu tạo màng lọc cầu thận Màng lọc màng có tính thấm chọn lọc cao Những chất có đường kính < 70 A0 (TLPT~ 15.000 Dalton) qua màng; chất có đường kính có trọng lượng phân tử lớn 80.000 Dalton globin khơng qua màng Các phân tử có kích thước trung gian mà mang điện tích âm khó qua màng phân tử không mang điện tích Các chất gắn với protein khơng qua màng Các chất bám vào màng bị thực bào Áp suất lọc (Filtration Pressure - PL)[1][2] Quá trình lọc trình thụ động, phụ thuộc vào chênh lệch áp suất, áp suất lọc tính theo công thức: PL = PH – (PK + PB) - PH áp suất thủy tĩnh cầu thận (chính áp suất mao động mạch có tác dụng đẩy nước vào bao Bowman) - PK áp suất keo huyết tương (có tác dụng hút nước từ bao Bowman vào mao mạch) - PB áp suất thủy tĩnh bao Bowman (đối lập với hút nước từ bao Bowman vào mạch) Bình thường: PH = 60 mmHg, PK = 32mmHg, PB = 18 mmHg PL = 10 mmHg Như để lọc P L= 10 mmHg, PL2500 ml/24h bệnh đái tháo đường, đái nhạt Lượng nước tiểu 750 ml/24h trường hợp thiểu niệu, vô niệu viêm cầu thận cấp, viêm ống thận cấp ngộ độc, máu, bỏng nặng[1] Tổng phân tích nước tiểu Nguyên lý hoạt động chung máy phân tích nước tiểu 10 thơng số[4] Máy phân tích nước tiểu 10 thơng số máy quang kế khúc xạ sử dụng để đo bán định lượng 10 thông số nước tiểu cách sử dụng nhúng nước tiểu Các bóng đèn cực (diod) phát ánh sáng sử dụng nguồn sáng thời gian đo tối ưu hóa để phản ứng hóa học tạo màu xảy vùng phản ứng thuốc thử Đầu đo máy chứa bóng đèn có bước sóng khác Que thử đặt vị trí cố định đầu đo di chuyển miếng đệm thuốc thử, vị trí “tham chiếu” – nơi hệ thống quang học bắt đầu hoạt động Trong q trình đo, máy kiểm tra vị trí thử đầu đo cách thực kiểm tra cách xác dịng ánh sáng khúc xạ đo Nếu que nhúng đặt thiếu xác đầu đo, máy thơng báo tín hiệu “lỗi” Giới thiệu 10 thơng số hóa sinh xét nghiệm tổng phân tích nước tiểu.[3] Tổng phân tích nước tiểu xét nghiệm thường sử dụng trả lời sơ cho bác sĩ lâm sàng biết tình trạng nước tiểu bệnh nhân, qua phản ánh phần chức đường tiết niệu chuyển hóa thể Lấy nước tiểu dòng làm xét nghiệm Một que thử (dipstick) nhúng vào nước tiểu cho chạy qua máy 10 thông số, kết trả bao gồm: - Tỷ trọng nước tiểu (SG) Thử nghiệm phản ánh nồng độ ion có nước tiểu Bình thường tỷ trọng nước tiểu vào khoảng 1,014-1,028 Đo tỷ trọng giúp đánh giá khả cô đặc nước tiểu thận - pH nước tiểu (pH) pH đánh giá tính acid kiềm nước tiểu thơng qua nồng độ ion H + tự có nước tiểu Bình thường nước tiểu có tính acid nhẹ, pH từ 5-6 - Các bạch cầu (LEU) Nhiễm trùng tiết niệu sinh tế bào có mủ, tế bào giải phóng enzym esterase Thử nghiệm phản ánh có mặt enzym esterase bạch cầu có hạt (granulocyte) Bình thường nước tiểu khơng có có bạch cầu - Nitrit (NIT) Bình thường nitrit khơng có nước tiểu, tạo thành vi khuẩn chuyển hóa nitrat có thức ăn thành nitrit Phản ứng thể có mặt nitrit, thơng qua phát cách gián tiếp vi khuẩn tạo nên nitrit có nước tiểu - Protein (PRO) Nước tiểu bình thường có lượng nhỏ protein khoảng 50-100 mg/24h, có 55-60% nguồn gốc huyết thanh, khoảng 40% glycoprotein có nguồn gốc từ thận đường dẫn nước tiểu Với nồng độ xét phân tích nước tiểu tự động không tiến hành xét nghiệm định lượng làm cho glucose có nước tiểu bị giảm trình đường phân Qua ta thấy kết glucose niệu có xác hay khơng phụ thuộc nhiều vào thời gian làm xét nghiệm Từ biểu đồ 3.4 ta thấy rằng: có mối tương quan cao (r=0,8; p0,05) Mayo S cộng đánh giá phù hợp kết bạch cầu niệu từ 652 mẫu nước tiểu tươi máy Atlas Clinitek 10, Urisys 2400, IRIS iQ200, Sysmex UF-100 cho thấy : thống kê Spearman (p) cho thấy có phù hợp kết máy (iQ200 = 0,695; UF-100 = 0,761; Atlas = 0,684 ; Urisys = 0,620)[15] KẾT LUẬN Từ việc so sánh kết Protein niệu 100 mẫu nước tiểu, kết Glucose niệu 27 mẫu nước tiểu, kết Hồng cầu, Bạch cầu niệu 20 mẫu nước tiểu phương pháp bán định lượng (kết tổng phân tích) máy phân tích nước tiểu tự động urisys 2400 phương pháp định lượng ta có kết luận sau: Xét nghiệm TPT cho kết tương đối số protein, glucose, hồng cầu bạch cầu Có mối tương quan trung bình phương pháp bán định lượng định lượng số protein, hồng cầu, bạch cầu (r>0,4) Chỉ số glucose có mối tương quan cao phương pháp (r=0,8) KIẾN NGHỊ Nên có thêm định xét nghiệm định lượng protein niệu bệnh nhân cần theo dõi diễn biến protein niệu trình điều trị chẩn đốn, nhóm bệnh nhân có bệnh lý thận bệnh đa u tủy xương TÀI LIỆU THAM KHẢO Bộ mơn Hóa sinh – Trường đại học Y Hà Nội (2007) “ Hóa sinh” Nhà xuất Y học: 300-303, 290-294 Bộ môn Sinh lý học – Trường đại học Y Hà Nội (2012) “ Sinh lý học” Nhà xuất Y học: 272-273, 276-277, 101,116 Bộ y tế - Bệnh viện Bạch Mai (2013) “ Hóa sinh lâm sàng bản” Nhà xuất Y học: 87-94 Bộ mơn Hóa sinh – Trường đại học Y Hà Nội (2007) “ Thực tập hóa sinh” Nhà xuất Y học: 195-197 Shauna C Anderson, Susan Cookayne “ Nonprotein nitrogenous compouns and renal funtion” Clinical Chemistry Concepts and Application (1993);19: 366-377 Trịnh Phương Dung (2011) “ So sánh protein niệu 24h tỷ lệ protein/creatinine mẫu nước tiểu ngẫu nhiên bệnh nhi hội chứng thận hư” Khóa luận tốt nghiệp cử nhân y khoa Trường đại học Y Hà Nội Hà Nội: 16,20-21 Walter de Gruyter & Co “A Diagnostic Programme for Quantitative Analysis of Proteinuria” J Cltn Chem Clin Biochem.Vol 27, 1989, pp 589-600 Hoàng Thị Bích Ngọc (2001) “ Hóa sinh bệnh đái tháo đường” Nhà xuất Y học Hà Nội: 53 Trường đại học Y Hà Nội (2013) “ Hóa sinh lâm sàng” Nhà xuất Y học Hà Nội:46-47 10 Hoffbrand V, Moss P, Pettit J (2006) “Essential Haematology” (Essential) (5th ed.) Blackwell Publishing Professional p 218 11 Alto WA “No need for glycosuria/proteinuria screen in pregnant women” J Fam Pract 2005 Nov;54(11):978-83 12 Rotblatt MD, Koda-Kimble MA “Review of drug interference with urine glucose tests Diabetes Care” 1987 Jan-Feb;10(1):103-10 13 Lam MH “False 'hematuria' due to bacteriuria Arch Pathol Lab Med” 1995 Aug;119(8):717-21 14 Simerville JA, Maxted WC, Pahira JJ (March 2005) "Urinalysis: a comprehensive review" American Family Physician 71 (6): 1153–62 15 Mayo S, Acevedo D, Quiñones-Torrelo C, Canós I, Sancho M “Clinical laboratory automated urinalysis: comparison among automated microscopy, flow cytometry, two test strips analyzers, and manual microscopic examination of the urine sediments” J Clin Lab Anal 2008;22(4):262-70 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC Y HÀ NỘI …… ***…… BỘ Y TẾ NGUYỄN THỊ PHƯƠNG NGHIÊN CỨU KẾT QUẢ MỘT SỐ THÔNG SỐ HÓA SINH NƯỚC TIỂU BẰNG CÁC PHƯƠNG PHÁP KHÁC NHAU KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP CỬ NHÂN Y KHOA KHÓA 2011-2015 Người hướng dẫn khoa học: TS.BS Đào Huyền Quyên Hà Nội – 2015 LỜI CẢM ƠN Nhân dịp hoàn thành khóa luận này, em xin chân thành cảm ơn: Ban giám hiệu, Phịng Đào tạo đại học, mơn Hóa sinh trường Đại học Y Hà Nội tạo điều kiện giúp em trình em thực đề tài Em xin bày tỏ lời cảm ơn chân thành sâu sắc đến: TS.BS Đào Huyền Qun - Cơ tận tình dạy dỗ, hướng dẫn giúp đỡ, bảo cho em, truyền đạt kinh nghiệm động viên em suốt trình em học tập thực đề tài PGS.TS.Phạm Thiện Ngọc - Trưởng khoa Khoa xét nghiệm sinh hóa Bệnh viện Bạch Mai Thầy giúp đỡ, chia sẻ truyền đạt kinh nghiệm cho em trình học tập thực đề tài Em xin chân thành cảm ơn thầy cô, bác sỹ, cử nhân, kỹ thuật viên khoa xét nghiệm Sinh hóa bệnh viện Bạch Mai tạo điều kiện cho em hồn thành khóa luận Con xin bày tỏ lịng biết ơn tới bố mẹ dành tình cảm u thương, chăm sóc tận tình động viên có kết học tập phấn đấu trưởng thành ngày hôm Em xin chân thành cảm ơn bạn tập thể lớp Y4K, người bên cạnh chia sẻ, động viên giúp đỡ em q trình học tập hồn thành khóa luận LỜI CAM ĐOAN Tơi Nguyễn Thị Phương, sinh viên tổ 36, lớp Y4K Tôi xin cam đoan thực kháo luận cách trung thực nghiêm túc Các số liệu kết thu trung thực, chưa công bố cơng trình khác, sử dụng vào mục đích nghiên cứu khơng sử dụng vào mục đích khác Hà Nội, ngày 02 tháng 06 năm 2015 Sinh viên Nguyễn Thị Phương DANH MỤC CÁC TỪ VIẾT TẮT TLPT Trọng lượng phân tử BĐL Bán định lượng ĐL Định lượng TCA 5% Acid tricloacetic 5% BT Bình thường ÂT Âm tính VCT Viêm cầu thận HCTH Hội chứng thận hư TPT Tổng phân tích KQ Kết HC Hồng cầu BC Bạch cầu MỤC LỤC DANH MỤC BẢNG DANH MỤC BIỂU ĐỒ ... hành đề tài ? ?Nghiên cứu kết số thơng số hóa sinh nước tiểu phương pháp khác nhau? ?? với hai mục tiêu là: So sánh kết thông số protein, glucose, bạch cầu hồng cầu nước tiểu phương pháp bán định... KQ TPT Khác BT 2.3 Phương pháp xác định số nghiên cứu 2.3.1 Xác định số protein, glucose, hồng cầu, bạch cầu nước tiểu máy phân tích nước tiểu tự động • Ngun lý 10 thơng số hóa sinh nước tiểu bán... nghiệm hóa sinh nước tiểu Những bệnh nhân có tình trạng bệnh lý cho kết xét nghiệm hóa sinh nước tiểu có trị số bất thường 2.1.2 Địa điểm nghiên cứu Khoa Hóa sinh - Bệnh viện Bạch Mai – Số 78