- Đặt vấn đề. - tổng quan - nguyên vật liệu và phương pháp nghiên cứu. - Kết quả và bàn luận - Kết luận và kiến nghị.
Trang 2Đặt vấn đề
Bỏng là một bệnh ngoại khoa khá quan trọng
Để điều trị bỏng các chế phẩm của sulfadiazin bạc có
nhiều u điểm đã đ ợc chứng minh trong lâm sàng.
Viêc cung ứng thuốc có khó khăn Các mục tiêu cụ thể của khóa luận :
3.ưNghiênưcứuưtácưdụngưkhángưkhuẩnưtrênưinưvitroưcóưsoưsánhưvớiưvớiưchếưphẩmưSilvirinư1%ư(ấnưĐộ).
Trang 32 Thuèc mì s¸t khuÈn ®iÒu trÞ vÕt báng t¹i chç
* Kem maduxin;* Mì cao vµng;* Damcream * ChÕ phÈm chøa ho¹t chÊt sulfadiazin b¹c nh :
Sivadene (Mü), Flammazin (Ph¸p), Silvirin (Ên §é), Slivin (Pakistan)…
Trang 43 chÕ phÈm thuèc mì cã ho¹t chÊt sulfadiazin b¹c.
Trang 5O(2) N(2)
H×nh 1 : C«ng thøc ho¸ häc cña sulfadiazin b¹c
Trang 6* sulfadiazin có tác dụng kìm khuẩn: do cạnh tranh ức chế với PABA.
* Ion bạc:
Ion bạc chuyển cầu nối giữa 2 nitơ thuộc 2 nhân
purin đối diện Do vậy đã làm mất khả năng
sinh sản phân đôi của vi khuẩn
Phối hợp: nhân pyrimidin sẽ dễ dàng làm vận chuyển ion bạc qua màng vi khuẩn.
* Cơ chế tác dụng khác với các hợp chất bạc khác, khác với sulfadiazin đơn độc.
3.2 Cơ chế tác dụng.
Trang 73.3 Tác dụng kháng khuẩn.
Bảng 1: Khả năng kháng khuẩn trên invitro của sulfadiazin bạc
Nồng độ sulfadiazin bạcHọ và loài
50 g/ml100 g/mlPs Aeruginosa130/130130/130
Klebsiella pneumoniae53/5454/54Escherichia coli63/6363/63S aureus100/101101/101S epidermidis51/5151/51Enterococus (nhóm D)52/5352/53
Trang 83.4 Hấp thu thuốc.
* Các nghiên cứu về hấp thu với Ag111 cho thấy hầu hết
thuốc tích tụ ở lớp biểu bì (có tác dụng tại chỗ)
Khoảng 10% l ợng sulfadiazin bôi tại chỗ đ ợc hấp thu
Để đo sulfadiazin và các chất chuyển hoá đặc hiệu cần
- Không gây rối loạn điện giải hay kiềm toan.- Không làm bẩn y phục hay vải trải gi ờng.
Trang 91 Vật liệu trang thiết bị
1.1 Vật liệu hoá chất.
- Bạc sulfadiazin đạt tiêu chuẩn USP 24
- Các tá d ợc cần thiết đạt tiêu chuẩn DĐVN III.- Các chất bảo quản, các chất chống ôxy hoá đạt tiêu chuẩn DĐVN III
- Các dung môi dùng cho SKLM, HPLC-pp.- Màng nhân tạo cellophan.
- Các hoá chất khác cần thiết.
Phần II
Vật liệu và ph ơng pháp nghiên cứu
Trang 101.2 Dụng cụ, trang thiết bị.
- Cân phân tích độ chính xác 0,1mg của Trung Quốc - Máy ly tâm của Nhật Bản
- Tủ điều nhiệt giữ đ ợc nhiệt độ ở 400C, Trung Quốc - Bản mỏng Silicagel 60 F254 ,VKN cung cấp.
- Đèn huỳnh quang soi ở b ớc sóng 254 nm.- Thạch Muller - Hinton.
- Các chủng vi khuẩn: S aureus, P aeruginosa, E coli.- Dụng cụ nghiên cứu khả năng giải phóng d ợc chất ra khỏi tá d ợc thuốc mỡ.
- Máy sắc ký lỏng cao áp hiệu năng cao Shimadzu.- Các dụng cụ cần thiết khác trong phòng thí nghiệm.
Trang 112 Ph ¬ng ph¸p nghiªn cøu.2.1 §Þnh tÝnh ho¹t chÊt
Trang 122.3 Các b ớc nghiên cứu mô hình kem Silver sulfa 1%.
Loạibớt CT có độ giải phóng kém
Hình 4: Các b ớc nghiên cứu mô hình kem Sliver sulfa 1%
Trang 14* Nghiªn cøu t×m chÊt chèng «xy ho¸
Ion b¹c trong c«ng thøc ho¹t chÊt rÊt dÔ bÞ «xy ho¸
-Nghiªn cøu víi 4 chÊt chèng «xy ho¸ sau:
Natri sulfit ,natri bisulfit,natri metasulfit,hydro quinon.- Hµm l îng : 0,05%; 0,10% vµ 0,15%
Trang 15Hình 5: Sơ đồ quy trình bào chế kem Silver sulfa 1%
Chuẩn bị d ợc chấtChuẩn bị tá d ợc
Kiểm nghiệm thành phẩm
Trang 162.3.2.ư(Bướcư2):ưNghiênưcứuưsơưbộưđộưbềnưvững.-ưưưĐiều kiện 1:
Ly tâm thuốc mỡ mới bào chế trong vòng 5 phút với tốc độ 600v/phút ở nhiệt độ 20 10C Quan sát sự phân lớp của thuốc mỡ.
- Điều kiện2:
Đặt thuốc mỡ ở 40 10C trong vòng 1 ngày đêm Quan sát sự thay đổi của thuốc mỡ.
-Lựa chọn ba công thức bền vững nhất nghiên cứu
độ giải phóng hoạt chất
Trang 17*Khuếch tán thuốc qua màng:- Ngăn trên : 3g thuốc mỡ
- Môi tr ờng khuếch tán : 25ml dung dịch NH4OH 2,5%
- Thời gian t1, t2, t3, t4 đã định sẵn.
* Định tính hoạt chất giải phóng: SKLM(DĐVN I)để
xác định đã có hoạt chất giải phóng và xác định t1.*Định l ợng nồng độ : ph ơng pháp HPLC.
- Với mỗi CT, ở 1 thời điểm t, khuếch tán 5 mẫu để tính l ợng hoạt chất giải phóng qua màng bằng ph ơng
Trang 18-ưưXâyưdựngưđườngưchuẩn: bằng ph ơng pháp bình
ph ơng tối thiểu.ư
+ Pha động là một hệ dung môi A: B = 28 : 72 với
Dung môi A là hỗn hợp : Acetolnitrile có H3PO4 (1/900).
Dung môi B là hỗn hợp : N ớc cất có H3PO4 (1/900).
+ Thể tích mẫu tiêm 50 l.+ Tốc độ dòng 1ml/phút.
+ Cột: RP18, Sopam (250 x 4,6mm,5m).+ Đo ở b ớc sóng 266nm.
Trang 19Sử dụng ph ơng pháp khuếch tán trên gel thạch:
Thạch Muller - Hinton đổ đĩa đ ờng kính 9cm, đục 2 lỗ đối xứng có đ ờng kính 1cm, 1 lỗ cho Silver sulfa 1%
(công thức có độ giải phóng hoạt chất tốt nhất tìm đ ợc ở b ớc 3), lỗ còn lại cho thuốc đối chứng Silvirin 1% Sử
dụng 3 đĩa thạch cho 3 chủng vi khuẩn S aureus; P
aeruginosa; E coli (theo quy định của DĐVN)
Trang 201 KÕt qu¶ x©y dùng c«ng thøc bµo chÕ.
X©y dùng c«ng thøc:
CT 1:
Sulfadiazin b¹c 1,0gAcid stearic 24,0gTriethanolamin 1,0g
Trang 21CT 2
Sulfadiazin b¹c1,0g Sorbitan stearat1,4gPolysorbat 80 0,6gAlol cetostearic 6,5gTriglycorides 11,0gGlycrol 0,4gChÊt b¶o qu¶n 0,5gN íc tinh khiÕt v® 100ml
CT 3:
Sulfadiazin b¹c1,0gAlcol cetostearic8,0gGlycerin monostearat 0,4gVaselin 6,0gParaffin 0,5gTween 60 0,6g
CT 4:
Sulfadiazin b¹c 1,0gAlcol stearylic 15,0gS¸p ong 8,0gTween 80 3,8gSpan 80 1,2g
Sorbitol 8,0gChÊt b¶o qu¶n 0,2gN íc tinh khiÕtv® 100ml
CT 5:
Sulfadiazin b¹c 1,0gAlcol cetylic 3,0gDÇu paraffin20,0gGlycerol stearat 2,9gPolysorbat 80 3,1gGlycol propylen 7,0g
Trang 22Lùa chän chÊt chèng oxy ho¸.
Thêi ®iÓmHµm l îng
Trang 232 Kết quả nghiên cứu sơ bộ độ bền vững.
Trang 243 Kết quả đo giải phóng hoạt chất
3.1 Kết quả định tính hoạt chất giải phóng qua màng:
Trang 253.2.1 Kếtưquảưxâyưdựngưđườngưchuẩn.- Sắc ký đồ dung môi của cốt tá d ợc.
- Các đ ờng chuẩn:
+ Chuẩn 1: nồng độ hoạt chất 2,12g/ml.+ Chuẩn 2: nồng độ hoạt chất 5,30g/ml.+ Chuẩn 3: nồng độ hoạt chất 10,60g/ml.Kết quả đ ợc ph ơng trình tuyến tính
y = 5,9118.e - 0,06.x + 0.Hệ số t ơng quan r = 0,999833 1.
Cho thấy có sự t ơng quan khá chặt chẽ giữa diện tích pic và nồng độ.
Trang 26*Kếtưquảưtínhưnồngưđộưdượcưchấtưgiảiưphóngưquaưmàng:
Trang 27Bảng 5: Nồng độ d ợc chất giải phóng qua màng theo
thời gian của CT3(nư=ư5;SDư=ư0,0018)
*Tính tỷ lệ% d ợc chất giải phóng qua màng:
Công thức tính tỷ lệ% d ợc chất giải phóng qua màng:
250
Trang 28B¶ng 6: Tû lÖ % ho¹t chÊt ® îc gi¶i phãng qua mµng cña c¸c CT theo thêi gian
Trang 29CT2CT3CT5
Trang 30B¶ng7:TûlÖ%ho¹tchÊt®îcgi¶iphãngquamµngcñaSilvirin1%theothêigian(n = 5;SD = 0,0018)
t1 3,4606288193,0022,502
t2 3,3586576934,8314,026
t3 3,44810487325,0174,182
t4 3,44413289067,5446,287
Trang 31Nồng độ giải phóng quamàng (x%)
CT3Silvirin 1%
Tỷ lệ nồng độ giảiphóng qua màngCT3 / Silvirin 1%
Trang 325 KÕt qu¶ ®o kh¸ng khuÈn trªn invitro.
§ êng kÝnh vïng øc chÕ (mm)Vi khuÈn
Trang 33Kết luận
- Đã xây dựng đ ợc công thức kem Silver sulfa 1% (CT3) có hình thức cảm quan đạt yêu cầu, có độ ổn định bền vững trong điều kiện bình th ờng vì đã ổn định trong điều kiện khắc nghiệt.
- Khả năng giải phóng hoạt chất qua màng của CT3 và Silvirin 1% là t ơng đ ơng nhau Nh vậy kem Silver sulfa 1% có độ giải phóng hoạt chất tốt, cốt tá d ợc không cản trở khả năng giải phóng hoạt chất của kem
- Khả năng kháng khuẩn của CT3 là t ơng đ ơng với
Trang 34Kiến nghị.
Tiếp tục nghiên cứu các tính chất khác của kem Silver sulfa 1%:
* Nghiên cứu độ ổn định lâu dài.
* Nghiên cứu độ giải phóng hoạt chất và kháng khuẩn trên invivo.
* Nghiên cứu độc tính cấp và tr ờng diễn.* Nghiên cứu hiệu lực điều trị của kem.
Trang 35Xin chân thành cảm ơn các quý vị đại biểu
các thầy cô giáo
và toàn thể các bạn sinh viên!