Trên thế giới cũng đ có có một số công trình nghiên cứu được công bố, nhưng mới chỉ có các công trình nghiên cứu về xác định hệ thống phân loại và một số đặc điểm sinh học của loài này,
Trang 1TRƯỜNG ĐẠI HỌC NHA TRANG
BÁO CÁO CHUYÊN ĐỀ NGHIÊN CỨU MỘT SỐ ĐẶC ĐIỂM SINH SẢN CỦA ỐC ĐĨA
(Nerita balteata Reeve, 1855) TẠI QUẢNG NINH
Chủ nhiệm đề tài: TS Ngô Anh Tuấn
Quảng Ninh, tháng 12 năm 2012
Trang 21
MỤC LỤC
1 CHƯƠNG 1: TỔNG QUAN 4
1.1 Tình hình nghiên cứu động vật chân bụng trên thế giới và Việt Nam 4
1.1.1 Tình hình nghiên cứu trên thế giới 4
1.1.2 Tình hình nghiên cứu ở Việt Nam 5
1.2 Tình hình nghiên cứu ốc đĩa Nerita balteata trên thế giới và Việt Nam 6
1.2.1 Tình hình nghiên cứu trên thế giới 6
1.2.1.1 Nghiên cứu hệ thống phân loại 7
1.2.1.2 Đặc điểm hình thái 7
1.2.1.3 Đặc điểm phân bố 8
1.2.1.4 Đặc điểm sinh sản 9
1.2.1.5 Đặc điểm sinh trưởng 10
1.2.1.6 Đặc điểm dinh dưỡng 10
1.2.2 Tình hình nghiên cứu ốc đĩa trong nước 10
1.3 Vị trí địa lý và điều kiện tự nhiên tỉnh Quảng Ninh 10
1.3.1 Vị trí địa lý 10
1.3.2 Địa hình 11
1.3.3 Khí hậu 11
2 CHƯƠNG 2: PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 13
2.1 Thời gian, địa điểm và đối tượng nghiên cứu 13
2.2 Nội dung nghiên cứu 13
2.1.1 Phương pháp thu mẫu 14
2.1.2 Phương pháp phân tích 14
2.1.2.1 Phương pháp xác định các chỉ tiêu hình thái bên ngoài 14
2.1.2.2 Phương pháp nghiên cứu một số đặc điểm sinh học sinh sản của ốc đĩa 14 2.2 Phương pháp phân tích và xử lý số liệu 18
2.2.1 Phương pháp thu thập số liệu sơ cấp 18
2.2.2 Phương pháp thu thập số liệu thứ cấp 18
Trang 32
2.2.3 Phương pháp xử lý số liệu 18
3 CHƯƠNG 3: KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ THẢO LUẬN 20
3.1 Giới tính và tỷ lệ đực cái 20
3.1.1 Giới tính 20
3.1.2 Tỷ lệ đực cái 20
3.2 Các giai đoạn phát triển tuyến sinh dục 24
3.3 Hệ số thành thục sinh dục 27
3.3.1 Hệ số thành thục sinh dục của ốc đĩa đực 27
3.3.2 Hệ số thành thục sinh dục của ốc đĩa cái 28
3.4 Sức sinh sản 30
3.5 Mùa vụ sinh sản 31
3.6 Kích thước thành thục sinh dục lần đầu 33
4 KẾT LUẬN VÀ ĐỀ XUẤT Ý KIẾN 36
4.1 KẾT LUẬN 36
4.2 ĐỀ XUẤT Ý KIẾN 37
5 TÀI LIỆU THAM KHẢO 38
Trang 43
DANH MỤC BẢNG
Bảng 1: Biến động tỷ lệ đực : cái của ốc đĩa theo thời gian 21
Bảng 2: Các ếu tố m i trường tại i phân ố ốc đĩa 22
Bảng 3: Biến động tỷ lệ đực: cái của ốc đĩa theo nhóm kích thước 23
Bảng 4: Hệ số thành thục sinh dục trung bình của ốc đĩa đực 27
Bảng 5: Hệ số thành thục sinh dục trung bình của ốc đĩa cái 28
Bảng 6: Sức sinh sản tuyệt đối và sức sinh sản tương đối của ốc đĩa 30
Bảng 7: Tỷ lệ các giai đoạn phát triển tuyến sinh dục của ốc đĩa 32
Bảng 8: Tỷ lệ ốc thành thục sinh dục theo nhóm kích thước 34
DANH MỤC HÌNH Hình 1: Hình dạng, cấu tạo ngoài của ốc đĩa 8
Hình 2: Sơ đồ khối nội dung nghiên cứu 13
Hình 3: Tuyến sinh dục của ốc đĩa đực và cái 20
Hình 4: Tỷ lệ đực cái theo phân nhóm kích thước 23
Hình 5: Tuyến sinh dục ốc đĩa giai đoạn I 24
Hình 6: Tuyến sinh dục ốc đĩa giai đoạn II 25
Hình 7: Tuyến sinh dục ốc đĩa giai đoạn III 25
Hình 8: Tuyến sinh dục ốc đĩa giai đoạn IV 26
Hình 9: Tuyến sinh dục ốc đĩa giai đoạn V 26
Hình 10: Trứng ốc đĩa soi tươi có các giai đoạn khác nhau trên một cơ thể 31
Hình 11: Kích thước (mm) thành thục lần đầu của ốc đĩa 34
Trang 54
1 CHƯƠNG 1: TỔNG QUAN 1.1 Tình hình nghiên cứu động vật chân bụng trên thế giới và Việt Nam 1.1.1 Tình hình nghiên cứu trên thế giới
Lớp chân bụng là lớp lớn nhất trong ngành động vật thân mềm, bao gồm các loài ốc biển và ào ngư Đa số các loài ốc biển có giá trị kinh tế rất cao Theo Thái Trần Bái (2001) động vật thân mềm nói chung có số lượng loài rất lớn khoảng 130.000 loài có khu vực phân bố rộng và m i trường sống khác nhau nên có tính
đa dạng rất cao Trên thế giới đ có rất nhiều công trình nghiên cứu thành công về các loài thuộc lớp chân bụng này Một số loài tiêu biểu để làm nền tảng cho các
nghiên cứu về ốc đĩa như: ốc hương Babylonia areolata, ốc nhảy Strombus
canarium
Nateewathana (1995) đ có c ng trình nghiên cứu về sự phân bố của ốc hương
Babylonia areolata trên thế giới Kết quả cho thấy loài này có khu vực phân bố chủ
yếu ở vùng biển Ấn Độ - Thái Bình Dương Ngoài ra còn phân bố ở một số vùng biển Sri Lanka, Trung Quốc, Hồng K ng, Philippines, Đài Loan, Nhật Bản và Việt Nam Chúng sống trong những vùng nước sâu từ 5 – 20 m, nền đá là nền cát hoặc bùn cát pha lẫn vỏ động vật thân mềm Từ những kết quả đó cho iết được khu vực phân bố của ốc hương Raghunathan và cộng sự (1994) đ có nghiên cứu về tốc độ
sinh trưởng của ốc hương, sau 10 tháng nghiên cứu trên loài ốc hương B spirata đ
cho thấy rằng sự sinh trưởng của loài này thấp hơn so với 1 số loài chân bụng khác Đặc điểm sinh học, sinh sản và sản xuất giống nhân tạo ốc hương cũng đ tiến hành nghiên cứu trên nhiều nước Ở Ấn Độ, Raghunathan C và K Ayyakkannu
(1995) tiến hành nghiên cứu loài ốc hương B spirata trong phòng thí nghiệm Các
tác giả đ m tả được hoạt động đẻ trứng, hình thái và quá trình phát triển phôi, ấu trùng Kết quả cho thấy mỗi con ốc cái có chiều cao trung bình 5 -6 cm đẻ được 24 –
35 bọc trứng, mỗi bọc chứa khoảng 900 trứng Theo nghiên cứu của Shannmugaraj,
1997 cũng đ xác định được mùa vụ sinh sản của loài này kéo dài từ tháng 1 đến tháng 8 nhưng chủ yếu vào tháng 4 đến tháng 8 Ở Thái Lan, năm 1994 đ nghiên
cứu đặc điểm sinh sản và kỹ thuật nuôi ấu trùng loài B areolata Kết quả về hoạt động đẻ trứng, phát triển phôi, hình thái ấu trùng tương tự như loài B spirata Cá
Trang 65
thể thành thục có khả năng sinh sản quanh năm từ tháng 1 đến tháng 10 nhưng rộ nhất vào tháng 3 đến tháng 7 mà đỉnh cao là tháng 4 Trung bình mỗi con đẻ 25 bọc trứng/ lần đẻ, mỗi bọc chứa khoảng 400 trứng
Có nhiều công trình nghiên cứu về đối tượng ốc nhảy S canarium Năm 2005,
S amsul đ nghiên cứu sự kích thích sinh sản bằng phương pháp sốc nhiệt, thí nghiệm lấy những cá thể ốc mẹ thành thục ngoài tự nhiên cho vào những cái giỏ nhựa, dưới đá có phủ một lớp lưới và được treo trong bể xi măng có sục khí Qua quá trình nghiên cứu kết quả cho thấy trứng ốc đẻ ra dính vào lưới, cuộn lại thành từng búi Mỗi cá thể đẻ được 10 – 20 búi với số lượng trứng khoảng 5.000 – 7.000
trứng Betutu Segagau và cộng sự (2005) đ nghiên cứu các yếu tố quan trọng ảnh hưởng đến tỉ lệ nở của ốc nhảy S.canarium, thí nghiệm được tiến hành trên các mức
độ mặn khác nhau Kết quả nghiên cứu cho thấy ở độ mặn 30‰ cho tỷ lệ sống cao nhất khoảng 96,9% Trước đó năm 1998, Patchee và cộng sự đ c ng ố kết quả ương nu i thành c ng ấu trùng của loài này từ giai đoạn ấu trùng veliger đến giai đoạn tiền con giống Với mật độ 50 con/l, nuôi trong thùng nhựa 40l và đạt tỷ lệ sống cao nhất 97,7% Khoảng thích hợp cho ương nu i ấu trùng là 50 – 200 con/l
Ở Indonesia, Zaidi và cộng sự (2005) cho biết mùa vụ sinh sản của ốc nhảy tập trung vào khoảng cuối tháng 11 đến đầu tháng 3 năm sau
1.1.2 Tình hình nghiên cứu ở Việt Nam
Ở Việt Nam, nghiên cứu về các đối tượng trong lớp chân bụng thuộc ngành động vật thân mềm vẫn còn là những nghiên cứu mới mẻ, có rất ít công trình nghiên cứu vì vậy còn rất nhiều hạn chế Một số đối tượng đ được nghiên cứu
như ốc hương, ốc nhả , ào ngư Nghiên cứu được bắt đầu từ những khảo sát về
thành phần loài sinh vật đá ở một số đầm vịnh và vùng ven biển Việt Nam (Nguyễn Chính, 1996), trong đó có động vật thân mềm và đặc biệt là ốc hương Theo kết quả nghiên cứu của Nguyễn Chính (1996) cho biết ốc hương là những loài có vỏ mỏng nhưng chắc chắn, dạng bậc thang với tháp vỏ bằng 1/2 chiều dài
vỏ Trên vỏ có các phiến vân màu tím nâu hình chữ nhật hay hình thoi
Nguyễn Thị Xuân Thu và cộng sự (2000) tiến hành nghiên cứu thành c ng đối
tượng ốc hương B.areolata tại Viện nghiên cứu nuôi trồng thủy sản 3 Đâ được
Trang 7Dương Văn Hiệp và cộng sự (2006) đ nghiên cứu cho sinh sản nhân tạo ốc
nhảy Strombus canarium Tu nhiên do đối tượng nà được tiến hành thí nghiệm
khi các đặc điểm sinh học chưa được nghiên cứu, cơ sở vật chất hạn chế Vì vậy các thí nghiệm chưa đưa ra được kết quả, cần có nhiều nghiên cứu hơn nữa về đối tượng này
1.2 Tình hình nghiên cứu ốc đĩa Nerita balteata trên thế giới và Việt Nam
1.2.1 Tình hình nghiên cứu trên thế giới
Động vật thân mềm được xem là đối tượng thích hợp cho phát triển nuôi biển– một trong những xu thế của nuôi trồng thủy sản thế kỷ XXI Trong sản lượng nuôi trồng thủy sản hàng năm trên thế giới thì động vật thân mềm chiếm 30% về sản lượng và 19% về giá trị Vì vậy cần có nhiều công trình nghiên cứu nhằm góp phần phát triển nghề nu i động vật thân mềm ngà càng đi lên
Ốc đĩa là một đối tượng mới Trên thế giới cũng đ có có một số công trình nghiên cứu được công bố, nhưng mới chỉ có các công trình nghiên cứu về xác định
hệ thống phân loại và một số đặc điểm sinh học của loài này, tuy nhiên những nghiên cứu này còn rất hạn chế
Nghiên cứu của Frey và Vermeij (2008) đ nghiên cứu về vị trí và đặc điểm nền đá nơi ốc đĩa phân ố Nhưng chưa xác định được điều kiện m i trường sống (nhiệt độ, độ mặn, pH….) và các loài sinh vật đá điển hình trong cùng khu vực phân bố với ốc đĩa
Trang 87
Công trình nghiên cứu của Fred (1993) đ có những nghiên cứu và kết quả về cấu tạo ngoài của ốc đĩa nhưng chưa m tả được vị trí và hình thái cấu tạo các hệ cơ quan của ốc đĩa
Một số nghiên cứu về đặc điểm sinh sản của Tan và Chou (2000), Tan và Lee (2009) đ m tả được một số đặc điểm sinh học sinh sản cơ ản của ốc đĩa nhưng chưa phân iệt được giới tính, cơ cấu giới tính, cấu tạo cơ quan sinh dục đực, cái, cũng như sức sinh sản, các giai đoạn phát triển phôi và ấu trùng… của ốc đĩa
Như vậ , đến nay trên thế giới chưa có c ng trình nghiên cứu khoa học nào về sản xuất giống nhân tạo ốc đĩa
1.2.1.1 Nghiên cứu hệ thống phân loại
Trên thế giới mới chỉ có các công trình nghiên cứu về xác định hệ thống phân loại và một số đặc điểm sinh học của ốc đĩa Theo Fre và Vermeij (2008), ốc đĩa
Nerita balteata Reeve, 1855 có hệ thống phân loại như sau:
Trang 98
Đầu: Lớp Gastropoda nói chung và ốc đĩa N balteata Reeve, 1855 nói riêng
có bộ phận đầu rất phát triển nằm ở phía trước cơ thể, có dạng hình ống tròn Đầu
có một đ i xúc tu, vị trí mắt nằm ở gốc của đ i xúc tu
Hình 1: Hình dạng, cấu tạo ngoài của ốc đĩa
1 Đỉnh vỏ, 2 Vân phóng xạ, 3 Đường xoắn ốc, 4 p ngoài miệng vỏ
5 Nắp vỏ, 6 p trong miệng vỏ, 7 Trục vỏ Chân: Nằm ở vị trí mặt bụng cơ thể, đế chân diện rộng thích nghi với đời sống bò lê trên nền đá Giữa chân có nếp nhăn dọc chia chân làm hai phần lúc
ốc di chuyển thì hai phần nà tha đổi động tác cho nhau giúp cho ốc di chuyển
dễ dàng
Màng áo: Màng áo bao bọc bộ phận thân mềm Phần đầu, chân, các lỗ bài tiết, sinh dục và hậu m n kh ng được bao bọc bởi màng áo mà trực tiếp đổ ra ngoài Nắp vỏ: Được tạo thành do đoạn cuối của chân phân tiết ra, nắp vỏ là cơ quan bảo vệ phần thân mềm của ốc lúc cơ thể ốc co rút vào trong vỏ Nắp vỏ của ốc đĩa được cấu tạo bằng chất sừng, có màu vàng nâu
1.2.1.3 Đặc điểm phân bố
Trên thế giới ốc đĩa được tìm thấy chủ yếu ở các nước vùng cận nhiệt đới như: Trung Quốc, Australia, Hồng Kông, Malaixia, Mauritania, Ôman, Singapore, Mỹ Riêng ở Việt Nam loài ốc này phân bố chủ yếu trong các vùng rừng cây ngập mặn tại Quảng Ninh và một số tỉnh phía Nam
Theo nghiên cứu của Frey và Vermeij (2008), giống Nerita bao gồm khoảng
70 loài ốc có phân bố chủ yếu tại vùng triều dọc theo các bờ biển vùng nhiệt đới
Năm 2007, Hurtado và cộng sự đ nghiên cứu về quy luật phân bố của hai loài N
Trang 109
scabricosta và N funiculata thuộc giống Nerita Kết quả cho thấ đâ là hai loài ốc
có vùng phân bố chính tại các i đá vùng triều ở vùng nhiệt đới phía đ ng Thái
Bình Dương, trong đó loài N scabricosta xuất hiện tới vùng phía nam của Ecuado còn loài N funiculata có phân bố mở rộng tới Pêru Ở phía Bắc hai loài này phân bố
từ vịnh California tới phía ngoài của án đảo Baja thuộc Thái Bình Dương
Sau 10 năm nghiên cứu về các loài động vật chân bụng phân bố tại Singapore, Tan và Clements (2008) đ c ng ố tại quốc gia này có 19 loài ốc thuộc họ ốc đĩa
Neritidae, trong đó có 11 loài phân bố đặc trưng trên các loại cây tại vùng rừng
ngập mặn và các i đá, ờ kênh vùng nước lợ
Riêng loài ốc đĩa N balteata được xác định phân bố nhiều ở xung quanh các
gốc cây trong vùng rừng ngập mặn tại các vùng triều cửa s ng, đầm, phá, đặc biệt hơn chúng phân ố với mật độ cao tại các bờ kè, ghềnh đá trong các kênh mương,
bờ đê của các vùng biển nhiệt đới
1.2.1.4 Đặc điểm sinh sản
Theo nghiên cứu của Tan và Chou (2000) cho biết tất cả các loài trong họ ốc đĩa đều là những loài thụ tinh trong, trứng trước khi đẻ được đi qua một hệ thống phức tạp có tác dụng đóng gói tạo thành các bọc, nhờ đó trứng đẻ ra được nằm trong bọc trứng bám trên vật ám Tu nhiên, đặc điểm sinh sản của các loài ốc khác nhau là khác nhau, chúng phụ thuộc vào đặc điểm của cơ quan sinh dục như:
cơ quan dữ trữ tinh trùng của con cái và cấu tạo cơ quan sinh sản của con đực
Trong số 6 loài ốc được nghiên cứu tại Singapore, bọc trứng của ốc đĩa N
balteata có kích thước khá lớn với đường kính lên tới 4mm và chiều cao là 500µm
Bọc trứng được đẻ dính vào các hốc trên vỏ các loại cây rừng nhập mặn, vì vậy chúng nằm ngang bằng với bề mặt của nền đá Bề mặt ngoài của bọc trứng được bao bọc bởi các tinh thể hình cầu và chia thành 2 nhóm có kích thước riêng biệt Đối với nhóm có kích thước đường kính nhỏ (10 - 20μm) các tinh thể có dạng hình cầu lõm, bề mặt mịn Còn đối với nhóm có kích thước lớn (30 - 70μm) các tinh thể
có dạng hình cầu dẹt, sáu cạnh và rắn Trong mỗi bọc trứng của ốc đĩa N balteata
có 154 phôi, chiếm số lượng lớn nhất trong số các loài ốc thuộc giống Nerita phân
bố tại Singapore (Tan và Lee, 2009) Trong giống Nerita số lượng phôi trong mỗi
Trang 1110
bọc trứng khác nhau tùy theo loài Các phôi này bám vào các khoang màng mỏng bên trong của bọc trứng và dễ dàng rời ra khi nó chuẩn bị thoát ra khỏi bọc trứng dưới tác động của áp suất bên trong bọc trứng Áp suất này gây ra do sự làm phồng hai lớp màng mỏng trong suốt ở mặt trong của vỏ và khung bọc trứng
1.2.1.5 Đặc điểm sinh trưởng
Ốc đĩa là loài có kích thước trung bình nhỏ (kích cỡ thương phẩm trung bình khoảng 1,5 x 2,5 cm) Ốc đĩa nở ra từ bọc trứng đều biến thái thành ấu trùng veliger
và trải qua giai đoạn sống trôi nổi trong khoảng thời gian từ vài tuần đến một tháng (Frey và Vermeij, 2008)
1.2.1.6 Đặc điểm dinh dưỡng
Theo nghiên cứu của Fred (1993), loài ốc đĩa N.balteata Reeve, 1855 cũng giống như các loài ốc khác trong họ Neritidae đều là những loài ăn thức ăn chủ yếu
là thực vật, chúng bắt mồi trên các nền đá đá, câ rừng ngập mặn, bùn hoặc cát, thức ăn chính là các loài tảo trong vùng triều nơi chúng phân ố
1.2.2 Tình hình nghiên cứu ốc đĩa trong nước
Hiện na , trong nước chưa có c ng trình nghiên cứu khoa học nào về đặc điểm sinh học và kỹ thuật sản xuất giống Đâ là đối tượng mới cần phải nghiên cứu đầy
đủ các đặc điểm sinh học đặc biệt là sinh học sinh sản và dinh dưỡng để từ đó có cơ
sở khoa học cho các nghiên cứu về khả năng sản xuất giống nhân tạo ốc đĩa
1.3 Vị trí địa lý và điều kiện tự nhiên tỉnh Quảng Ninh
1.3.1 Vị trí địa lý
Quảng Ninh là tỉnh ven biển thuộc vùng Đ ng Bắc Việt Nam Phía Tây giáp tỉnh Lạng Sơn và tỉnh Bắc Giang, phía Đ ng giáp vịnh Bắc Bộ, Phía Tây Nam giáp tỉnh Hải Dương và Thành Phố Hải Phòng, Phía bắc giáp huyện Phòng Thành và thị trấn Đ ng Hưng (tỉnh Quảng Tây, Trung Quốc) với cửa khẩu Móng Cái và Trinh Tường Đâ là một trọng điểm kinh tế vùng phía Bắc hội tụ những điều kiện thuận lợi cho phát triển kinh tế xã hội quan trọng trong tiến trình công nghiệp hóa, hiện đại hóa đất nước Quảng Ninh nằm trong dải hành lang biển lớn của Bắc Bộ, trên đó
có mạng lưới đường bộ, đường sắt và cảng biển lớn đang được mở rộng và phát triển
Trang 121.3.2 Địa hình
Là tỉnh nằm sát biển, địa hình chủ yếu là địa hình đồi núi, diện tích đồi núi chiếm 80% tổng diện tích của tỉnh, tập trung chủ yếu ở phía Bắc Tuy nhiên một phần năm diện tích ở phía Đ ng Nam tỉnh thuộc đồng bằng sông Hồng, cùng với kinh tế đặc biệt phát triển nên Chính phủ xếp Quảng Ninh vào nhóm các tỉnh đồng bằng sông Hồng
Quảng Ninh có rất nhiều đảo ven biển, vùng biển và hải đảo của tỉnh là một vùng địa hình độc đáo, đảo trải dài theo đường ven biển hơn 250 km chia thành nhiều lớp Trên các vùng ven biển và hải đảo có những bãi bồi phù sa và những bãi cát trắng tấp lên từ sóng biển
Địa hình đá iển Quảng Ninh không bằng phẳng, độ sâu trung bình là 20m,
có nhiều lạch sâu làm nơi cư trú của các rạn san hô Các dòng chảy nối với các lạch sâu đá iển tạo nên hàng loạt luồng lạch và hải cảng trên dải bờ biển khúc khuỷu kín gió nhờ những hành lang đảo che chắn, tạo nên 1 tiềm năng cảng biển và giao
th ng đường thủy rất lớn
1.3.3 Khí hậu
Khí hậu tỉnh Quảng Ninh nằm trong vùng nhiệt đới – gió mùa, tiêu biểu cho khí hậu các tỉnh miền Bắc Việt Nam Một năm có 4 mùa Xuân, Hạ, Thu, Đ ng Trong đó mùa Hạ và mùa Đ ng có n t đặc biệt hơn cả Mùa hạ nóng, ẩm, mưa nhiều, gió thịnh hành là gió Đ ng Nam ùa đ ng lạnh, kh hanh, ít mưa, chủ yếu
là gió Đ ng Bắc
Lượng mưa hàng năm lên tới 1.700 – 2.400 mm, số ngà mưa hàng năm từ
90 - 170 ngày Do nằm trong vùng nhiệt đới, Quảng Ninh có lượng bức xạ trung ình hàng năm 115,4 kcal/cm2
nhiệt độ kh ng khí trung ình hàng năm trên 22,9oC Độ ẩm không khí trung ình năm 82% Tu nhiên mưa chỉ tập trung vào
Trang 1312
mùa Hạ (hơn 85%), nhất là các tháng 7 và tháng 8, trong khi đó mùa đ ng chỉ mưa khoảng 150 đến 400 mm Diện tích tỉnh Quảng Ninh lớn lại có nhiều vùng địa hình nên khí hậu giữa các vùng cũng có sự khác nhau Tỉnh Quảng Ninh chịu ảnh hưởng gió mùa Đ ng Bắc mạnh hơn, nên so với các nơi cùng vĩ độ thường lạnh hơn 1-3oC
Trang 1413
2 CHƯƠNG 2: PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 2.1 Thời gian, địa điểm và đối tượng nghiên cứu
Thời gian thực hiện: Từ tháng 1/2012 đến tháng 12/2012
Địa điểm thu mẫu: Vùng biển Quảng Ninh (Hạ Long, Cẩm Phả, Vân Đồn, Tiên Yên, Đầm Hà)
Địa điểm phân tích mẫu: Phòng thực hành bệnh học, Trung tâm thí nghiệm thực hành - Trường Đại Học Nha Trang
Đối tượng nghiên cứu:
+ Tên khoa học: Nerita balteata Reeve, 1855
+ Tên tiếng việt: Ốc đĩa
2.2 Nội dung nghiên cứu
Toàn bộ nội dung nghiên cứu được biểu diễn qua sơ đồ khối sau:
Hình 2: Sơ đồ khối nội dung nghiên cứu
Nghiên cứu một số đặc điểm sinh sản của ốc đĩa
Các giai đoạn phát triển tuyến sinh dục
Mùa
vụ sinh sản
Kích thước thành thục sinh dục lần đầu
Kết luận và đề xuất ý kiến
Hệ số thành thục sinh dục
Mối tương quan giữa kích thước
và khối lượng
Phân biệt đực
cái, xác định tỷ
lệ đực: cái
Xác định sức sinh sản và mùa
vụ sinh sản
Xác định kích thước thành thục lần đầu
Phát triển tuyến sinh dục và tỷ lệ thành thục
Trang 1514
2.3 Phương pháp thu mẫu và phân tích mẫu
2.1.1 Phương pháp thu mẫu
Mẫu được thu ngẫu nhiên ở vùng biển tỉnh Quảng Ninh, bao gồm các địa điểm: Hạ Long, Cẩm Phả, Vân Đồn, Tiên Yên, Đầm Hà Đưa mẫu sống về phòng thí nghiệm để tiến hành các thao tác nghiên cứu
Tiến hành thu mẫu mỗi tháng một lần (tháng 1/2012 đến tháng 12/2012) và số mẫu thu hàng tháng ≥ 30 mẫu
Tổng số mẫu phân tích: 436 mẫu
Các dụng cụ dùng cho phân tích mẫu: Khay, panh kẹp, kéo, bộ dao phẫu thuật, cân điện tử Sartorius BP 110S, thước kẹp Palme, kính hiển vi quang học Olympus
và một số dụng cụ hỗ trợ khác
2.1.2 Phương pháp phân tích
2.1.2.1 Phương pháp xác định các chỉ tiêu hình thái bên ngoài
Đo kích thước ốc đĩa (đơn vị tính là mm): Dùng thước kẹp Palme có độ chính xác 0,1 mm để đo chiều rộng (R), chiều cao (H) Cách đo như sau:
+ Chiều rộng (R): Đo khoảng cách rộng nhất của tầng thân và vuông góc với chiều cao vỏ
+ Chiều cao (H): Đo khoảng cách từ đỉnh đến tận cùng mương trước
Cân khối lượng (đơn vị tính là gram): Dùng cân điện tử Sartorius BP 110S có
độ chính xác 0,001g, cân khối lượng toàn thân (W), khối lượng thân mềm (Wtm), khối lượng tuyến sinh dục (Wtsd)
+ Khối lượng toàn thân (W): Để mẫu ráo nước và cân nguyên mẫu
+ Khối lượng thân mềm (Wtm): Dùng úa đập tách vỏ, lấy phần thân mềm đem cân + Khối lượng tuyến sinh dục (Wtsd): Tách tuyến sinh dục ra và đem cân
2.1.2.2 Phương pháp nghiên cứu một số đặc điểm sinh học sinh sản của ốc đĩa
Các đặc điểm sinh học sinh sản của mỗi loài như mùa vụ sinh sản, kích thước tham gia sinh sản, sức sinh sản, tập tính sinh sản …được coi như là “chỉ số khoa học” để đánh giá sự phong phú của quần thể, khả năng ổ sung nguồn lợi hàng năm của loài, đặc biệt làm cơ sở cho những kế hoạch quản lý, khai thác và bảo vệ nguồn lợi các loài thủy sản có giá trị kinh tế ở mỗi vùng biển Đâ cũng là nội dung quan
Trang 1615
trọng nhất trong suốt thời gian nghiên cứu đề tài, làm cở sở cho những nghiên cứu
sâu hơn về sinh sản và sinh sản nhân tạo loài ốc đĩa nà
Giới tính và tỷ lệ đực cái
Xác định giới tính: Đối với loài ốc đĩa, giới tính kh ng được xác định bằng
cách dựa vào hình thái bên ngoài của chúng, mà dựa vào giải phẫu để quan sát tuyến sinh dục bên trong bằng mắt thường và trên kính hiển vi quang học Olympus
Tỷ lệ đực cái được xác định theo phương pháp của Pravdin (1973)
Công thức tính tỷ lệ đực cái như sau:
Các giai đoạn phát triển tuyến sinh dục
Các mẫu ốc đĩa được tiến hành đo kích thước chiều dài, chiều rộng, chiều cao
và cân khối lượng ằng cân điện tử Sartorius Sau đó dùng úa đập vỏ lấ phần thân mềm ên trong, quan sát phân iệt đực cái Sau khi quan sát xong, lấ một ít tu ến sinh dục hòa đều với ít nước iển quan sát ằng kính hiển vi quang học Ol mpus để xác định các giai đoạn phát triển của tu ến sinh dục
Phương pháp làm tiêu ản m uồng trứng và tinh sào theo phương pháp Seckan và Hrapchack (1980)
+ Tu ến sinh dục được cố định ằng ằng Buoin từ 12 – 36 giờ Sau đó chu ển sang cồn Etanol 70% để ảo quản
+ Xử lý mẫu: ẫu được ngâm lần lượt trong cồn Etanol 95%, 100%, mỗi loại ngâm trong 4 giờ, sau đó ngâm trong eth l salic late từ 12 – 24 giờ
+ Đúc parafin: Đúc parafin tạo thành các khối parafin có chứa mẫu với kích thước khoảng 2x2x1
Trang 1716
+ Cắt mẫu: Cắt mẫu ằng má cắt icrotome Lát cắt dà 5-7 µm đưa vào trong nước ấm (40 – 50oC) có al umin khoảng 1 -2 phút để lát cắt gi n ra, kh ng ị nhăn + Tiêu ản nhuộm ằng thuốc nhuộm Hematoc lin – Mayer và Eoxin Làm mất parafin và làm trong mẫu ằng dung dịch xilen Làm no nước, mất nước mẫu ằng cồn Etanol với các nồng độ khác nhau (100%, 95%, 80%, 50%)
+ Tiêu ản được quan sát và chụp ảnh ằng kính hiển vi quang học Ol mpus với độ phóng đại 400 lần
Các giai đoạn phát triển của tu ến sinh dục ốc đĩa dựa theo thang 5 ậc của Qua le và Newkirk (1989) m ph i học thủ sản được chia thành 5 giai đoạn từ giai đoạn I đến giai đoạn V như sau:
+ Giai đoạn I: Tu ến sinh dục chưa phát triển, tu ến sinh dục có kích thước rất nhỏ kh ng rõ ràng, chưa có sự hiện diện của nang follicule, m le dig chiếm toàn
ộ tu ến sinh dục, ở giai đoạn nà chưa xác định được giới tính
+ Giai đoạn II: Tu ến sinh dục đang phát triển, có thể phân iệt đực cái th ng qua màu sắc của tu ến sinh dục Quá trình tạo giao tử ắt đầu với sự xuất hiện của các nang follicule chen lẫn trong các m le dig
+ Giai đoạn III: Giai đoạn ắt đầu thành thục, nang follicule phình to chiếm gần hết khối nội tạng, m le dig giảm nhanh
+ Giai đoạn IV: Giai đoạn chín (thành thục sinh dục) Nang tinh phồng lên và hầu hết chứa trứng và tinh trùng, vách nang mỏng dần, tu ến sinh dục ở trạng thái chín Trứng sẵn sàng thụ tinh và tinh trùng có khả năng hoạt động
+ Giai đoạn V: Giai đoạn sau khi đẻ và phóng tinh, uồng trứng và túi tinh rỗng Quan sát trên kính hiển vi thấ ên trong còn sót lại một ít tinh trùng và trứng Giai đoạn nà m sinh dục ị tha thế dần ởi m le dig
Sức sinh sản tuyệt đối và sức sinh sản tương đối: Sức sinh sản của thủy sinh
vật là khả năng đẻ của con cái trong một mùa sinh sản hay trong cả đời sống của nó
- Sức sinh sản tuyệt đối: (Fa) (số trứng/ cá thể) được xác định ằng cách đếm
số lượng trứng ở giai đoạn thành thục
Tổng số trứng của cá thể được tính theo c ng thức:
Fa = × Wtsd
Trang 1817
Trong đó:
Fa: Sức sinh sản tuyệt đối
a: Số lượng trứng đếm được
n: Khối lượng phần buồng trứng đem đếm (g)
Wtsd : Khối lượng buồng trứng (g)
- Sức sinh sản tương đối (F rg ): Số lượng trứng/gam cá thể
Frg1 (số lượng trứng/gam cá thể) =
Frg2 (số lượng trứng/gam tu ến sinh dục) =
W: Khối lượng toàn thân ốc đĩa (g)
Cách tiến hành: Sau khi đập vỏ ốc, lấ tu ến sinh dục đem cân ằng cân
Sartorius Sau đó, xác định đực cái ằng kính hiển vi quang học Ol mpus Trong
trường hợp là cá thể cái, lấ tu ến sinh dục pha với 15ml nước iển để tạo dung
dịch hu ền phù Sử dụng uồng đếm động vật để đếm số lượng trứng Lấ 1ml ra
để tính số lượng trứng Thao tác đếm trứng lặp lại 3 lần, tính số lượng trứng trung
ình/1ml mẫu rồi tính tổng số lượng trứng của cả uồng trứng
Mùa vụ sinh sản
ùa vụ sinh sản ốc đĩa được xác định dựa trên số mẫu phân tích sinh học hàng
tháng, tỷ lệ các cá thể chín mùi sinh dục và đang tham gia sinh sản (tu ến sinh dục
ở giai đoạn IV), cá thể đ đẻ xong (tu ến sinh dục ở giai đoạn V) Tháng có trên
50% số cá thể chín mùi sinh dục và đang tham gia sinh sản hoặc đ đẻ xong được
coi là mùa vụ sinh sản chính của ốc đĩa Mùa vụ sinh sản của ốc đĩa được xác định
trên cở sở phân tích mẫu kết hợp kết quả điều tra xác định mùa vụ xuất hiện của ốc
đĩa giống tại các i phân ố
Hệ số thành thục sinh dục (GSI):
Hệ số thành thục sinh dục được xác định theo phương pháp của Pravdin: Là tỷ
lệ phần trăm của khối lượng tu ến sinh dục trên khối lượng toàn thân (gồm cả tu ến
sinh dục) Hệ số thành thục sinh dục được tính theo c ng thức sau:
× 100%
Trang 1918
Trong đó:
GSI: Hệ số thành thục (%)
Wtsd: Khối lượng tu ến sinh dục (g)
W: Khối lượng toàn thân (g)
Kích thước thành thục sinh dục lần đầu
Kích thước thành thục sinh dục lần đầu được xác định là nhóm kích thước nhỏ nhất mà tại đó các cá thể có tu ến sinh dục phát triển ở giai đoạn III trở lên (giai đoạn tu ến sinh dục đang chín, đ chín và sau khi đẻ) chiếm tỷ lệ ≥ 50% trên tổng
số mẫu thu được
2.2 Phương pháp phân tích và xử lý số liệu
2.2.1 Phương pháp thu thập số liệu sơ cấp
Dựa trên cơ sở lý thu ết đ học, số liệu sơ cấp được thu thập th ng qua tìm hiểu và tiếp thu ý kiến của giáo viên hướng dẫn, cán ộ lỹ thuật và trong quá trình thực nghiệm…
2.2.2 Phương pháp thu thập số liệu thứ cấp
Số liệu thứ cấp được thu thập từ nhiều nguồn khác nhau như: các tài liệu, giáo trình, các áo cáo đ được c ng ố, các cơ quan, an ngành liên quan…
Trong đó : : Giá trị trung ình của mẫu
: giá trị của mẫu lần thứ i
n: số lượng mẫu
+ Độ lệch chuẩn: S =
Trang 2019
Trong đó: : Giá trị trung ình của mẫu
Xi: giá trị của mẫu lần thứ i
Trang 2120
3 CHƯƠNG 3: KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ THẢO LUẬN
3.1 Giới tính và tỷ lệ đực cái
3.1.1 Giới tính
Ốc đĩa Nerita balteata Reeve, 1855 là loài phân tính với tính đực cái được
phân iệt rõ ràng dựa trên đặc điểm, màu sắc của tu ến sinh dục Vị trí tu ến sinh dục nằm ở khối nội tạng, ở cận gan Tu nhiên, đối với giai đoạn I khó phân iệt được giới tính của ốc vì tu ến sinh dục chưa phát triển Từ giai đoạn II tu ến sinh dục mới ắt đầu có thể phân iệt dựa vào đặc điểm như sau:
Ốc đĩa đực: tu ến sinh dục có màu vàng nâu
Ốc đĩa cái: tu ến sinh dục có màu trắng sữa
a.Tu ến sinh dục ốc đĩa đực Tu ến sinh dục ốc đĩa cái
Hình 3: Tuyến sinh dục của ốc đĩa đực và cái
Ngoài ra, phần lớn các loài thuộc lớp chân ụng còn có thể phân iệt giới tính đực cái ằng cách dựa vào đặc điểm gai giao cấu Ở con cái có lỗ sinh dục và con đực có gai giao cấu nằm ở phần đầu phía sau xúc tu
3.1.2 Tỷ lệ đực cái
Trong một quần thể tỷ lệ giới tính phụ thuộc vào nhiều ếu tố, phụ thuộc vào tính di tru ền của loài, đồng thời cũng chịu sự kiểm soát của ếu tố m i trường mà trong đó ếu tố nhiệt độ ảnh hưởng rất lớn đến cấu trúc giới tính của quần thể Như
vậ sự cân ằng đực cái trong quần thể đảm ảo sức sống cho thế hệ sau tốt hơn vì nó
đ tạo nên sự kết hợp ch o các đặc tính di tru ền và góp phần làm giàu vốn gen
Trang 2221
* Tỷ lệ đực cái theo thời gian nghiên cứu
Tỷ lệ đực, cái của ốc đĩa được phân tích qua 12 tháng thu mẫu ngẫu nhiên với tổng số mẫu là 436 mẫu Qua phân tích chúng t i thấ sự iến động tỷ lệ đực cái theo thời gian nghiên cứu Kết quả phân tích mẫu trong các tháng được thể hiện qua ảng 1
Bảng 1: Biến động tỷ lệ đực : cái của ốc đĩa theo thời gian
Tháng
Tổng số
cá thể (con)
Số cá thể đực Số cá thể cái
Tỷ lệ đực : cái
Số cá thể (con) Tỷ lệ (%) Số cá thể
Ghi chú: s ốc kh ng xác định được giới tinh (kxđ) là 10 con
Bảng 1 cho thấ tỷ lệ ốc đĩa đực và ốc đĩa cái qua các tháng dao động kh ng đều nhau Đối với con đực, tỷ lệ dao động từ 28,21% - 57,58% Tỷ lệ đực theo xu hướng giảm dần theo các tháng từ tháng 1 đến tháng 5 Trong đó tỷ lệ cao nhất vào tháng 1 đạt 57,58%, đến tháng 5 giảm xuống thấp nhất chỉ còn 28,21% Tu nhiên, tháng 6 đến tháng 8 tăng dần (38,57-53,33%) và sau đó giảm dần đến tháng 12 (35,48%)
Trang 2322
Tỷ lệ cái dao động từ 36,66% - 71,79% Tỷ lệ cái thấp vào tháng 8 đạt 36,66%
và cao vào các tháng 4; 5 Tại tháng 5 tỷ lệ cái đạt 71,79%
Tỷ lệ phần trăm của ốc đĩa đực hầu như lu n thấp hơn ốc đĩa cái (Trung bình đực 41,75% ; cái 55,98%)
X t tỷ lệ đực : cái giao động từ 1 : 068 đến 1 : 1,72, trung bình 1 : 1,34 Nguyên nhân dẫn đến sự khác nhau về tỷ lệ đực và tỷ lệ cái giữa các tháng như vậ có thể là do quá trình thu mẫu tại nhiều địa điểm trên một vùng và trong các khoảng thời gian, điều kiện m i trường khác nhau ột số ếu tố m i trường được thể hiện trong ảng 2:
Bảng 2: Các yếu tố m i trường tại b i phân bố ốc đĩa Địa điểm Nhiệt độ ( C) Độ m n (S‰) pH
óng Cái 24,5 - 30
26,5 ± 7,5
22 - 30 25,5 ± 4,5
7,4 - 8,2 7,7 ± 1,0 Tiên Yên 25 - 30,5
28,5 ± 4,2
20 - 25
23 ± 2,8
7,0 - 8,2 7,8 ± 0,5 Vân Đồn 25 - 31
27,5 ± 5,2
27 - 31 26,5 ± 4,0
7,5 - 8,5 7,9 ± 1,0 Cẩm Phả 25 - 31,5
27,5 ± 5
26 - 30
27 ± 3,5
7,5 - 8,5 7,9 ± 1,5
26 ± 2,2
20,5 - 27 24,5 ± 5,5
7,2 - 8,1 7,5 ± 1,5 Quảng Yên 25 - 31,5
27 ± 2,5
22 - 29,5
24 ± 3,5
7,4 - 8,5 7,8 ± 1,0
Trung bình 28,5 ± 1,5 24,5 ± 2,0 7,8 ± 0,5
* Tỷ lệ đực cái theo nhóm kích thước
Ở trên, sự iến động tỷ lệ đực cái đ được phân tích qua các tháng Tu nhiên mẫu ốc đĩa được thu hàng tháng có nhiều kích cỡ khác nhau, có những cá thể đạt kích thước rất lớn nhưng cũng có những cá thể còn nhỏ Vì vậ cần phân tích tỷ lệ đực cái theo nhóm kích thước để thấ sự iến động đực cái qua các nhóm kích thước Kết quả phân tích 436mẫu được thể hiện ở ảng 3
Trang 24Tỷ lệ đực : cái
Tỷ lệ cái cao hơn tỷ lệ đực thể hiện rõ nhất ở nhóm kích thước 23 – 27mm và nhóm 28 – 32mm Trong đó nhóm 28 – 32 mm có tỷ lệ cái cao hơn tỷ lệ đực tới 32,64%
Hình 4: Tỷ lệ đực cái theo phân nhóm kích thước
X t trên toàn ộ các cá thể trong 12 tháng nghiên cứu, tỷ lệ trung ình ốc đực :
ốc cái là 1: 1,34 So sánh với tỷ lệ giới tính của ốc hương và ốc nhả , cho thấ giữa 3 loài này kh ng chênh lệch nhau nhiều Trong đó tỷ lệ giới tính trung ình của ốc
0 10
Trang 2524
hương là 1: 1,49 (Ngu ễn Thị Xuân Thu và cộng sự, 2000) và ốc nhả là 1: 1,27 (Lê
Thị Ngọc Hòa và cộng sự, 2009) Như vậ tỷ lệ giới tính trung ình của ốc đĩa Nerita
balteata Reeve, 1855 nằm trong tỷ lệ chung của đa số các loài thuộc lớp chân ụng
Qua 4 nhóm kích thước của ốc đĩa trong quá trình nghiên cứu, chúng t i
kh ng thấ hiện tượng tỷ lệ đực chiếm đa số trong những nhóm kích thước nhỏ Cũng như tỷ lệ đực giảm dần và tỷ lệ cái tăng dần theo chiều tăng kích thước như
qu luật chung của một số loài động vật thân mềm khác Đồng thời trong quá trình quan sát, giải phẩu và xem tiêu ản nhuộm màu, chúng t i chưa phát hiện hiện tượng lưỡng tính ở ốc đĩa, mặc dù hiện tượng nà cũng thường gặp ở một số động vật thân mềm như điệp seo, điệp quạt, nghêu Như vậ có thể kết luận ốc đĩa là loài
có tính đực cái phân iệt Tu nhiên cần có những nghiên cứu sâu hơn nữa về vấn
đề nà và thời gian nghiên cứu nhiều hơn để có kết luận chính xác
3.2 Các giai đoạn phát triển tuyến sinh dục
Quan sát tiêu bản mẫu tươi và mẫu tiêu bản mô tuyến sinh dục của các mẫu ốc qua 12 tháng cho thấy tuyến sinh dục của loài ốc đĩa nà gồm 5 giai đoạn phát triển Mỗi giai đoạn có những đặc điểm nổi bật khác nhau về hình dạng và kích thước để phân biệt từng giai đoạn phát triển của buồng trứng cũng như uồng sẹ Đặc điểm
cụ thể như sau:
Giai đoạn I: Tuyến sinh dục chưa phát triển, kích thước rất nhỏ nên rất khó
phân biệt được bằng mắt thường Các tế bào sinh dục mới hình thành chưa phân iệt được đực cái
Hình 5: Tuyến sinh dục ốc đĩa giai đoạn I
(Ảnh được chụp dưới kính hiển vi với độ phóng đại 400 lần)
Trang 2625
Giai đoạn II: Tuyến sinh dục đang phát triển, kích thước lớn hơn giai đoạn I
Có thể phân biệt đực cái thông qua màu sắc của tuyến sinh dục.Tuyến sinh dục đực
có màu vàng nhạt, tuyến sinh dục cái có màu trắng sữa Các tinh bào và noãn bào có dạng hình tròn, hình ovan, nhân màu sáng, bắt màu tím Tế bào sinh dục phát triển trên vách nang
a Cá thể đực b Cá thể cái Hình 6: Tuyến sinh dục ốc đĩa giai đoạn II
(Ảnh được chụp dưới kính hiển vi với độ phóng đại 400 lần)
Giai đoạn III: Giai đoạn bắt đầu thành thục Tuyến sinh dục đực có màu
vàng, các tế bào sinh dục có dạng ovan nhỏ dính kết với nhau thành từng đám, vách nang dày Tuyến sinh dục cái có màu trắng sữa, buồng trứng chứa các bao nang, kích thước kh ng đều nhau Quan sát trên tiêu bản cắt lát cho thấy tế bào có dạng hình cầu nhỏ, bắt đầu tích lũ no n hoàng
a Cá thể đực b Cá thể cái
Hình 7: Tuyến sinh dục ốc đĩa giai đoạn III
(Ảnh được chụp dưới kính hiển vi với độ phóng đại 400 lần)
Trang 2726
Giai đoạn IV: Giai đoạn chín (thành thục sinh dục) Tuyến sinh dục căng
phồng, kích thước lớn, màu sắc tuyến sinh dục đậm hơn giai đoạn III
a Cá thể đực b Cá thể cái
Hình 8: Tuyến sinh dục ốc đĩa giai đoạn IV
(Ảnh được chụp dưới kính hiển vi với độ phóng đại 400 lần)
Các tế bào sinh dục đực tập trung thành từng búi và rời nhau, tinh trùng bắt đầu rời khỏi các tế bào sinh dục Các tế bào sinh dục cái đ hoàn thành quá trình tích lũ vật chất dinh dưỡng và đạt kích thước tối đa Các tế bào trứng hình cầu, lớn và rời nhau
Giai đoạn V: Đâ là giai đoạn sau khi đẻ Tuyến sinh dục xẹp xuống, thể tích
giảm Tuyến sinh dục đực có các nang tinh rời nhau, túi tinh rỗng Tuyến sinh dục cái có màu sắc nhợt nhạt, loang lổ, đặc trưng ởi sự có mặt của các bào nang rỗng
và một số tế bào trứng còn sót lại
a Cá thể đực b Cá thể cái
Hình 9: Tuyến sinh dục ốc đĩa giai đoạn V
(Ảnh được chụp dưới kính hiển vi với độ phóng đại 400 lần)