Nghiên cứu sự biểu hiện mRNA của gen CIZ1b, VEGF và đột biến EGFR với nhiễm virus merkel cell ở bệnh nhân ung thư phổi không tế bào nhỏ

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ QUỐC PHÒNG HỌC VIỆN QUÂN Y N VĂN HOÀN HỒ VĂN SƠN NGHIÊN CỨU SỰ BIỂU HIỆN mRNA CỦA GEN CIZ1b, VEGF VÀ ĐỘT BIẾN EGFR VỚI NHIỄM VIRUS MERKEL CELL Ở BỆNH NHÂN UNG THƯ PHỔI KHÔNG TẾ BÀO NHỎ LUẬN ÁN TIẾN SĨ Y HỌC HÀ NỘI – 2020 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ QUỐC PHÒNG HỌC VIỆN QUÂN Y NGUYỄN VĂN HOÀN HỒ VĂN SƠN N VĂN HOÀN NGHIÊN CỨU SỰ BIỂU HIỆN mRNA CỦA GEN CIZ1b, VEGF VÀ ĐỘT BIẾN EGFR VỚI NHIỄM VIRUS MERKEL CELL Ở BỆNH NHÂN UNG THƯ PHỔI KHÔNG TẾ BÀO NHỎ Chuyên ngành: Khoa học y sinh Mã số: 72 01 01 LUẬN ÁN TIẾN SĨ Y HỌC HƯỚNG DẪN KHOA HỌC: GS.TS Nguyễn Lĩnh Tồn TS Ngơ Tất Trung HÀ NỘI – 2020 LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan luận án cơng trình nghiên cứu riêng thân tôi, tất số liệu luận án hồn tồn trung thực chưa cơng bố cơng trình TÁC GIẢ Hồ Văn Sơn LỜI CẢM ƠN Đầu tiên xin gửi lời cảm ơn chân thành đến Đảng ủy, Ban Giám đốc Học viện Quân y, Bộ môn Sinh lý Bệnh, Phòng Sau Đại học, Học viện Quân y tạo điều kiện thuận lợi, giúp đỡ tơi q trình học tập nghiên cứu Tôi xin trân trọng cảm ơn Đảng ủy, Ban giám đốc Bệnh viện Quân y 175, Trung tâm tư vấn di truyền sàng lọc ung thư (CGC), Trung tâm nghiên cứu y học Việt Đức (VG-CARE), Khoa Sinh học phân tử (C17) bệnh viện Trung ương Quân đội 108 quan chức tạo điều kiện cho học tập thực luận án Tơi xin bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc với GS.TS Nguyễn Lĩnh Toàn TS Ngô Tất Trung, hai thầy hướng dẫn khoa học, tận tụy dành thời gian, trí tuệ, cơng sức giúp đỡ tơi q trình thực hồn chỉnh luận án Tôi chân thành cảm ơn Trung tâm chẩn đoán điều trị ung bướu, Khoa Sinh hoá Bệnh viện Quân y 175 giúp đỡ trình thực đề tài Nhân dịp chân thành cảm ơn bạn bè, đồng nghiệp ủng hộ, động viên tơi q trình thực đề tài Tơi dành tình cảm biết ơn sâu sắc tới gia đình, bố mẹ vợ ln động viên, giúp đỡ q trình học tập, nghiên cứu để hồn thành luận án TP Hồ Chí Minh 03/2020 Hồ Văn Sơn MỤC LỤC LỜI CAM ĐOAN MỤC LỤC DANH MỤC CÁC TỪ VIẾT TẮT DANH MỤC BẢNG DANH MỤC HÌNH ĐẶT VẤN ĐỀ CHƯƠNG TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1.1 Tình hình ung thư phổi giới 1.1.2 Tuổi giới 1.1.3 Tỷ lệ tử vong 1.1.4 Tình hình ung thư phổi Việt Nam 1.1.5 Nguyên nhân gây ung thư phổi 1.2.1 Gen gây ung thư (oncogene) ung thư phổi 1.2.2 Gen ức chế khối u 1.3 Các dấu ấn phân tử chẩn đoán, tiên lượng ung thư phổi không tế bào nhỏ 1.3.1 Các dấu ấn protein 1.3.2 Tự kháng thể (Autoantibody) 1.3.3 Methyl hóa DNA 1.3.4 DNA khối ung thư máu (ctDNA) 1.3.5 RNA lưu hành máu ngoại vi 1.4 Yếu tố tăng trưởng nội mô mạch máu (Vascular Endothelial Growth Factor -VEGF) 1.4.1 Đặc điểm cấu trúc hoạt động chức VEGF 1.4.2 Hoạt động gen mã hóa cho VEGF 1.4.3 Mối liên quan VEGF ung thư 1.5 CIZ1 biến thể CIZ1b ung thư phổi 1.5.1 Đặc điểm cấu trúc hoạt động chức CIZ1 1.5.2 Hoạt động gen CIZ1 1.5.3 CIZ1b mối liên quan với ung thư phổi 1.6 Yếu tố tăng trưởng biểu bì (Epidermal growth factor receptor EGFR) ung thư phổi không tế bào nhỏ 1.6.1 Chức EGFR 1.6.2 Mối liên quan EGFR ung thư phổi không tế bào nhỏ 1.7 Virus Merkel cell ung thư phổi 1.7.1 Đặc điểm chung Virus Merkel Cell 1.7.2 Cơ chế gây ung thư virus Merkel cell 1.7.3 Mối liên quan virus Merkel cell ung thư phổi 1.8 Mối liên quan VEGF, CIZ1b, đột biến EGFR với nhiễm virus Merkel cell CHƯƠNG ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 2.1.1 Tiêu chuẩn chọn mẫu nghiên cứu 2.1.2 Tiêu chuẩn loại trừ 2.2.1 Thiết kế nghiên cứu 2.2.2 Địa điểm thời gian nghiên cứu 2.2.3 Phương pháp chọn mẫu 2.2.4 Phương pháp thu thập số liệu 2.3 Định lượng mRNA kỹ thuật real-time PCR 2.4.1 Lấy mẫu xét nghiệm 2.4.2 Vật liệu, hóa chất 2.4.3 Thiết bị, máy móc 2.4.4 Phương pháp tách chiết, tinh RNA 2.4.5 Phương pháp tổng hợp cDNA 2.4.6 Phương pháp đo quang phổ kế xác định nồng độ, độ tinh cDNA 2.4.7 Phương pháp xác định mức độ biểu mRNA gen CIZ1b VEGF huyết tương 2.5.1 Tách DNA từ mẫu sinh thiết đúc paraffin (FFPE) sinh phẩm Gene JET FFPE DNA Purification Kit 2.5.2 Thực phản ứng real-time PCR sinh phẩm EGFR Mutation Detection Kit 2.5.3 Phân tích kết 2.6 Phương pháp phát MCV 2.6.1 Phát MCV huyết tương mô phương pháp realtime PCR 2.7.1 Chẩn đoán ung thư phổi không tế bào nhỏ 2.7.2 Đánh giá mức độ biểu mRNA VEGF, mRNA CIZ1b, đột biến EGFR với tình trạng nhiễm virus Merkel nhóm bệnh ung thư phổi khơng tế bào nhỏ 2.9 Đạo đức nghiên cứu 2.10 Sơ đồ nghiên cứu CHƯƠNG KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU 3.1.1 Tuổi giới nhóm bệnh nhân ung thư phổi khơng tế bào nhỏ nhóm chứng 3.1.2 Triệu chứng lâm sàng bệnh nhân nhập viện 3.1.3 Tiền sử cá nhân bệnh nhân ung thư phổi không tế bào nhỏ 3.1.4 Một số đặc điểm cận lâm sàng nhóm bệnh nhân ung thư phổi không tế bào nhỏ 3.1.5 Một số đặc điểm cận lâm sàng nhóm người bình thường 3.4.1 Kết Ct phản ứng real-time PCR cho gen CIZ1b 3.4.2 Kết Ct phản ứng real-time PCR cho gen VEGF 3.4.3 Kết Ct phản ứng real-time PCR cho gen ABL 3.5.1 Biểu mRNA CIZ1b huyết tương bệnh nhân ung thư phổi không tế bào nhỏ người bình thường 3.5.2 Biểu mRNA VEGF huyết tương bệnh nhân ung thư phổi không tế bào nhỏ người bình thường 3.6 Đột biến gen EGFR bệnh nhân ung thư phổi không tế bào nhỏ 3.7 Kết xác định MCV người khỏe mạnh bệnh nhân ung thư phổi không tế bào nhỏ kỹ thuật real-time PCR 3.7.1 Kết xác định MCV huyết tương nhóm người khỏe mạnh kỹ thuật real-time PCR 3.7.2 Kết xác định MCV mô ung thư huyết tương bệnh nhân ung thư phổi không tế bào nhỏ phản ứng real-time PCR 3.7.3 Kết xác định dương tính với MCV phản ứng PCR 3.7.4 Kết giải trình tự so sánh đoạn giải trình tự với trình tự MCV liệu NCBI 3.7.5 Tỷ lệ nhiễm MCV nhóm bệnh nhân ung thư phổi khơng tế bào nhỏ nhóm chứng người bình thường 3.8.1 Mối liên quan biểu mRNA CIZ1b VEGF với rối loạn tế bào máu ngoại vi 3.8.2 Mối liên quan biểu mRNA CIZ1b VEGF với rối loạn hoạt độ men gan 3.8.3 Mối liên quan biểu mRNA CIZ1b VEGF với rối loạn nồng độ Glucose máu 3.8.4 Mối liên quan biểu mRNA CIZ1b VEGF với mô bệnh học khối u 3.8.5 Mối liên quan biểu mRNA CIZ1b VEGF với độ biệt hóa khối u 3.8.6 Mối liên quan biểu mRNA CIZ1b VEGF với giai đoạn bệnh 3.8.7 Mối liên quan biểu mRNA CIZ1b VEGF với đột biến gen EGFR 3.8.8 Mối tương quan biểu mRNA CIZ1b VEGF với số cận lâm sàng 3.9.1 Mối liên quan nhiễm MCV với giai đoạn bệnh độ biệt hoá tế bào khối u ung thư phổi không tế bào nhỏ Bảng 3.38 Mối liên quan giai đoạn bệnh nhiễm MCV Bảng 3.39 Mối liên quan độ biệt hoá tế bào khối u nhiễm MCV 3.9.2 Mối liên quan nhiễm MCV với đặc điểm cận lâm sàng 3.9.3 Mối liên quan nhiễm MCV với marker ung thư Bảng 3.41 Mối liên quan nhiễm MCV với marker ung thư 3.9.4 Mối liên quan nhiễm MCV với đột biến EGFR Bảng 3.42 Mối liên quan nhiễm MCV với đột biến EGFR 3.9.5 Mối liên quan nhiễm MCV với mức độ biểu gene VEGF CIZ1b Bảng 3.43 Mối liên quan nhiễm MCV với mức độ biểu gen VEGF CIZ1b 3.10.1 Giá trị chẩn đoán ung thư phổi không tế bào nhỏ biểu mRNA CIZ1b 3.10.2 Giá trị chẩn đốn ung thư phổi khơng tế bào nhỏ biểu mRNA VEGF CHƯƠNG BÀN LUẬN 4.1 Một số đặc điểm chung nhóm bệnh nhân ung thư phổi khơng tế bào nhỏ 4.1.1 Tuổi mắc bệnh 4.1.2 Giới 4.1.3 Đặc điểm lâm sàng cận lâm sàng bệnh nhân ung thư phổi không tế bào nhỏ 4.2 Mức độ biểu mRNA gen CIZ1b, VEGF, đột biến EGFR tỷ lệ nhiễm Virus Merkel Cell bệnh nhân ung thư phổi không tế bào nhỏ 4.2.1 Mức độ biểu mRNA gen CIZ1b bệnh nhân ung thư phổi không tế bào nhỏ 4.2.2 Mức độ biểu mRNA gen VEGF bệnh nhân ung thư phổi không tế bào nhỏ 4.2.3 Đột biến EGFR bệnh nhân ung thư phổi không tế bào nhỏ nghiên cứu 4.2.4 Tỷ lệ nhiễm MCV bệnh nhân ung thư phổi không tế bào nhỏ nghiên cứu 4.3 Mối liên quan mức độ biểu mRNA gen CIZ1b, VEGF, đột biến EGFR với nhiễm virus Markel cell số triệu chứng lâm sàng, cận lâm sàng bệnh nhân ung thư phổi không tế bào nhỏ 2133 116 Khatri A., Wang J and Pendergast A M (2016) Multifunctional Abl kinases in health and disease J Cell Sci, 129(1): 9-16 117 Livak K J and Schmittgen T D (2001) Analysis of relative gene expression data using real-time quantitative PCR and the 2(-Delta Delta C(T)) Method Methods, 25(4): 402-408 118 Bộ Y tế ( 2018) Hướng dẫn chẩn đốn điều trị UTP khơng tế bào nhỏ, Quyết định số 4825/QĐ-BYT 119 Travis W D., Brambilla E., Burke A P., et al (2015) Introduction to The 2015 World Health Organization Classification of Tumors of the Lung, Pleura, Thymus, and Heart J Thorac Oncol 10(9): 1240-1242 120 Nguyễn Đạt Anh, Nguyễn Thị Hương (2013) Các xét nghiệm thường quy sử dụng lâm sàng, NXB Y Học 2013 121 Herbst R S., Heymach J V and Lippman S M (2008) Lung cancer N Engl J Med, 359(13): 1367-1380 122 Aberle D R., Adams A M., Berg C D., et al (2011) National Lung Screening Trial Research Reduced lung-cancer mortality with lowdose computed tomographic screening N Engl J Med 365(5): 395-409 123 Henschke C I., Yankelevitz D F., Libby D M., et al (2006) International Early Lung Cancer Action Program Survival of patients with stage I lung cancer detected on CT screening N Engl J Med 355(17): 1763-71 124 Coverley D., Marr J and Ainscough J (2005) CIZ1 promotes mammalian DNA replication J Cell Sci 118(Pt 1): 101-12 125 Hanahan D and Weinberg R A (2011) Hallmarks of cancer: the next generation Cell, 144(5): 646-674 126 Ferrara N., Gerber H P and LeCouter J (2003) The biology of VEGF and its receptors Nat Med, 9(6): 669-676 127 Kerbel R.S (2008) Tumor angiogenesis N Engl J Med 358(19): 203949 128 Kuhnert F., Kirshner J R and Thurston G (2011) Dll4-Notch signaling as a therapeutic target in tumor angiogenesis Vasc Cell 3(1): 20 129 Khandekar M J., Piotrowska Z., Willers H., et al (2018) Role of Epidermal Growth Factor Receptor (EGFR) Inhibitors and Radiation in the Management of Brain Metastases from EGFR Mutant Lung Cancers Oncologist, 23: 1-9 130 Kim M S., Park T I., Lee Y M., et al (2013) Expression of Id-1 and VEGF in non-small cell lung cancer Int J Clin Exp Pathol 6(10): 2102-11 131 Alevizakos M., Kaltsas S and Syrigos K N (2013) The VEGF pathway in lung cancer Cancer Chemother Pharmacol 72(6): 116981 132 Yuan A., Yu C J., Luh K T., et al (2000) Quantification of VEGF mRNA expression in non-small cell lung cancer using a real-time quantitative reverse transcription-PCR assay and a comparison with quantitative competitive reverse transcription-PCR Lab Invest 80(11): 1671-80 133 Cha N., Lv M., Zhao Y J., et al (2014) Diagnostic utility of VEGF mRNA and SP1 mRNA expression in bronchial cells of patients with lung cancer Respirology 19(4): 544-8 134 Usuda K., Iwai S., Funasaki A., et al (2018) Expression and Prognostic Impact of VEGF, CD31 and alphaSMA in Resected Primary Lung Cancers Anticancer Res 38(7): 4057-4063 135 Hồng Anh Vũ, Cao Văn Động, Ngơ Thị Tuyết Hạnh cs (2011) Đột biến gen EGFR KRAS bệnh nhân ung thư phổi tế bào nhỏ Tạp chí Y học Tp Hồ Chí Minh, 14(4): 166-172 136 Nguyễn Ngọc Quang, Vương Diệu Linh, Lương Viết Hưng cs (2014) Nghiên cứu tần suất số yếu tố liên quan đến đột biến gen EGFR exon 19 exon 21 carcinoma tuyến phổi Tạp Chí Ung thự học Việt Nam, số 4: 96-101 137 Shi Y., Au J S K., Khoa M T., et al (2014) A prospective, molecular epidemiology study of EGFR mutations in Asian patients with advanced non-small-cell lung cancer of adenocarcinoma histology (PIONEER) J Thorac Oncol 9(2):154-162 138 Cheng L., Li Y., Zhang S B., et al (2012) Molecular pathology of lung cancer: key to personalized medicine Modern Pathology 25: 347–369 139 Xu S., Jiang J., Yu X., et al (2014) Association of Merkel cell polyomavirus infection with EGFR mutation status in Chinese nonsmall cell lung cancer patients Lung Cancer 83: 341-346 140 Koutras A K., Antonacopoulou A G., Eleftheraki A G., et al (2012) Vascular endothelial growth factor polymorphisms and clinical outcome in colorectal cancer patients treated with irinotecan-based chemotherapy and bevacizumab Pharmacogenomics J., 12(6): 468-75 141 Schneider B.P., Wang M., Radovich M., et al (2008) Association of vascular endothelial growth factor and vascular endothelial growth factor receptor-2 genetic polymorphisms with outcome in a trial of paclitaxel compared with paclitaxel plus bevacizumab in advanced breast cancer: ECOG 2100 J Clin Oncol, 26(28): 4672-8 142 Guan X., Yin M., Wei Q., et al (2010) Genotypes and haplotypes of the VEGF gene and survival in locally advanced non-small cell lung cancer patients treated with chemoradiotherapy BMC Cancer, 10: 431 143 Garcia-Donas J., Esteban E., Leandro-Garcia L J., et al (2011) Single nucleotide polymorphism associations with response and toxic effects in patients with advanced renal-cell carcinoma treated with first-line sunitinib: a multicentre, observational, prospective study Lancet Oncol, 12(12): 1143-50 144 Schneider B P., Shen F and Miller K D (2012) Pharmacogenetic biomarkers for the prediction of response to antiangiogenic treatment Lancet Oncol, 13(10): e427-36 145 Pohl A., El-Khoueiry A., Yang D., et al (2013) Pharmacogenetic profiling of CD133 is associated with response rate (RR) and progression-free survival (PFS) in patients with metastatic colorectal cancer (mCRC), treated with bevacizumab-based chemotherapy Pharmacogenomics J., 13(2): 173-80 146 Hsieh Y H., Hsu J L., Su I J., et al (2011) Genomic instability caused by hepatitis B virus: into the hepatoma inferno Front Biosci (Landmark Ed)2011, 16: 2586–97 147 Fan X, Liu Y., Heilman S A., et al (2013) Human papillomavirus E7 induces rereplication in response to DNA damage J Virol 2013, 87: 1200–10 148 Wang X., Huong S M., Chiu M L., et al (2003) Epidermal growth factor receptor is a cellular receptor for human cytomegalovirus Nature, 424: 456–61 149 Patton J B., George D., Chang K O (2011) Bile acids promote HCV replication through the EGFR/ERK pathway in replicon-harboring cells Intervirology, 54: 339–48 150 Gun-Jik K., Jae-Ho L., Deok H L., et al (2017) Clinical and prognostics significance of Merkel cell polyomavirus in nonsmall cell lung cancer Medicine, 96:3 PHỤ LỤC Phụ lục 1: Bệnh án nghiên cứu BỆNH ÁN NGHIÊN CỨU NHÓM BỆNH LÝ K PHỔI PHẦN HÀNH CHÍNH Họ tên BN: ……… Tuổi: Địa chỉ: ĐT: Ngày vào viện: Chẩn đoán: TIỀN CĂN 2.1 Cá nhân: - Bệnh phổi: ☐0 = Không - Bệnh tim mạch: ☐0 = Không - Bệnh khác: ☐0 = Không - Hút thuốc: ☐0 = Khơng Số HS: … Giới tính: ☐ = Nam ☐1 = Có ☐1 = Có ☐1 = Có ☐1 = Có Thời gian: … năm; Số lượng: /1 năm - Uống rượu, bia: ☐0 = Không ☐1 = Có ☐ = Nữ Thời gian: năm; Số lượng: /1 năm - Làm môi trường khói bụi amiante: ☐0 = Khơng ☐1 = Có Thời gian :……… năm 2.2 Gia đình có bị ung thư: ☐ = Khơng ☐ = Có ☐ = K phổi LÂM SÀNG 3.1 Lý nhập viện: ☐ = Ho ( ho khan, ho máu, ho có đàm…) ☐ = Đau ngực ☐ = khó thở = Khác Mạch: ck/p Huyết áp: mmHg 3.2 Triệu chứng khởi phát: ☐1 = ho ☐2 = ho máu ☐ = Sụt cân Nhiệt độ : ☐ O C ☐3= ho khan khơng đờm ☐4 = ho có đờm ☐5 = khó thở ☐6 = đau ngực ☐7 = khàn tiếng ☐8= sụt cân/thời gian ☐9 = sốt 3.3 Thời gian khởi bệnh: tuần 3.4 Triệu chứng lâm sàng lúc vào viện KPS (KRNAosky performance scale status): ☐1 = ho ☐2 = ho máu ☐3 = ho khan không đờm ☐4= ho có đờm ☐5 = khó thở ☐6 = đau ngực ☐7 = khàn tiếng ☐8= sụt cân/thời gian ☐9 = sốt ☐10 = Khơng có hạch ☐11= Có hạch 3.5 Hội chứng: - Hội chứng phế quản: ☐0 = khơng ☐1 = có - Hội chứng nhiễm trùng: ☐0 = khơng ☐1 = có - Hội chứng suy hơ hấp: ☐0 = khơng ☐1 = có - Hội chứng đơng đặc: ☐0 = khơng ☐1 = có - Hội chứng TDMP: ☐0 = khơng ☐1 = có - Hội chứng cận u: ☐0 = khơng ☐1 = có - Hội chứng u: ☐0 = khơng ☐1 = có XÉT NGHIỆM THƯỜNG QUY 4.1 Huyết đồ: ☐ = khơng thiếu máu ☐ 1= có thiếu máu WBC = K/uL NEU% = % HCT= % RBC = M/uL LYM% = % PLT = K/uL MONO% = % 4.2 Hoạt độ men gan: ☐ = Không thực ☐ = Bình thường ☐ = RL chức AST = U/L ALT = U/L 4.3 Chức thận: ☐ = Khơng thực ☐ = Bình thường ☐ = Suy chức Urê/BUN = mmol/L Creatinin = umol/L 4.4 Đường máu: ☐ = Không thực ☐ = Bình thường ☐ = Có rối loạn Glucose = mmol/L 4.5 Ion đồ: ☐ = Khơng thực ☐ = Bình thường ☐ = Có rối loạn Na = mmol/l Kali = mmol/l Clo = mmol/l 4.6 Bilan tim mạch ( ECG siêu âm tim): ☐ = Không thực ☐ = Bình thường ☐ = Có bệnh lý 4.7 Bilan hơ hấp (đo chức hô hấp): ☐ = Không thực ☐ = Bình thường ☐ 2=Có bệnh lý hơ hấp NỒNG ĐỘ MARKERS 5.1 Nồng độ CEA = ng/mL ☐ = Khơng thực ☐ = Bình thường ☐ = Bất thường 5.2 Nồng độ CYFRA 21- ☐ = Không thực ☐ = Bình thường ☐ = Bất thường 5.3 EGFR ☐ = Không thực ☐ = Không biểu ☐ = Có biểu CHẨN ĐỐN HÌNH ẢNH 6.1 Siêu âm bụng tổng quát: ☐ = Khơng thực ☐ = Bình thường ☐ = Có bệnh lý 6.2 Siêu âm màng phổi: ☐ = Khơng thực ☐ = Bình thường ☐ = Có khối U ☐ = Tràn dịch màng phổi ☐ = Dày dính màng phổi 6.3 Xạ hình xương: ☐ = Khơng thực ☐ = Bình thường ☐ = Có bệnh lý 6.4 X Quang (quy ước lồng ngực): ☐ = Khơng thực ☐ = Bình thường ☐ = Có bệnh lý 6.5 CT Scanner lồng ngực: ☐ = Không thực ☐ = Bình thường ☐ = Có khối U ☐ = Tràn dịch màng phổi ☐ = Dày dính màng phổi 6.6 Pet- CT ☐ = Không thực ☐ = Bình thường ☐ = Có khối U ☐ = Tràn dịch màng phổi ☐ = Dày dính màng phổi ☐ = Có khối tổn thương ác tính ☐ = Hạch 6.7 Vị trí bướu (trên CT X Quang qui ước): ☐ = Thùy Phổi phải ☐ = Thùy Phổi trái ☐ = Thùy Phổi phải ☐ ☐ = Thùy Phổi phải ☐ = = Rốn Thùy phổi ( Phổi Phải) trái 6.8 Kích thước bướu (trên CT XQ qui ước) : mm 6.9 Hạch: ☐ = Khơng ☐ = Có ☐ = Vị trí hạch: ☐ = Số lượng hạch: * MRI sọ não : bình thường MƠ BỆNH HỌC 7.1 Phương pháp: ☐ = Tế bào học ☐ = Sinh thiết 7.2 Phương pháp lấy bệnh phẩm qua: ☐ = nội soi phế quản ☐ = sinh thiết xuyên thành ngực ☐ = nội soi trung thất ☐ = sinh thiết hạch ☐ = mở thành ngực thám sát + ST 7.3 Kết MBH: ☐ 1= UTPKTBN ☐ 2=UTPTBN 7.4 Với ung thư phổi không tế bào nhỏ: ☐ = Carcinoma tuyến ☐ = Carcinoma TB lớn ☐ = Carcinoma TB gai ☐ = Carcinoma TB gai-tuyến 7.5 Độ biệt hóa: ☐ = Khơng đánh giá ☐ = Tốt ☐ = vừa ☐ = Kém XẾP HẠNG THEO TNM (WHO) 2015 8.1 cTNM T N M ☐ Tx: Không xác định, tế bào ác tính(+) ☐ T0: Khơng có khối u ☐ T1: < 3cm ☐ T2: > 3cm ☐ T3: Khối u > 7cm lan tới thành, hoành, màng tim ☐ T4: Kích thước bất kỳ, xâm nhập vào quan trung thất, mạch máu lớn ☐ NX: Không xác định hạch ☐ N0: Không thấy hạch ☐ N1: Hạch bên rốn phổi phế quản phổi ☐ N2: Hạch trung thất carina, hạch đòn bên ☐ N3: Hạch đòn rốn phổi trung thất bên ☐ M0: Chưa di ☐ M1: Có di 8.2 Xếp giai đoạn: ☐ = IA( T1N0M0) ☐ = IB( T2N0M0); ☐ = IIA(T1N1M0); ☐ = IIB(T2N1M0 T3N0-N1M0) ☐ = IIIA(T1-T3N2M0) ☐ = IIIB( T -T4N3MO) ☐ = IV( M1) KẾT QUẢ SINH HỌC PHÂN TỬ ( NỒNG ĐỘ VEGF VÀ CIZ1b) Nồng độ DNA = Nồng độ ABL = Nồng độ VEGF = Nồng độ log VEGF = Nồng độ CIZ1b = Nồng độ log CIZ1b = Nồng độ OD 260/280 = Nồng độ CIZ1b_ABL Normalisation = Nồng VEGF_ABL Normalisation = độ Nghiên cứu sinh BỆNH ÁN NGHIÊN CỨU (NHĨM NGƯỜI BÌNH THƯỜNG) PHẦN HÀNH CHÍNH Họ tên BN: Tuổi: Giới tính: ☐ = Nam ☐ = Nữ Địa ; Ngày khám sức khoẻ: Kết luận: TIỀN CĂN 2.1 Cá nhân: khoẻ mạnh 2.2 Gia đình có bị ung thư: ☐ = Không ☐ = Có ☐2=K phổi LÂM SÀNG 3.1 Tuần hồn: ☐ = bình thường ☐ = có bệnh lý tim mạch 3.2 Hơ hấp: ☐0 = bình thường ☐1 = có bệnh lý hơ hấp 3.3 Tiêu hố- gan mật : ☐0 = bình thường ☐1 = có bệnh lý tiêu hoá- gan mật 3.4 Nội tiết : ☐0 = bình thường ☐1 = có bệnh lý nội tiết 3.5 Tâm thần kinh: ☐0 = Bình thường ☐1 = Có bệnh lý XÉT NGHIỆM THƯỜNG QUY 4.1 Huyết đồ: ☐ = khơng thiếu máu ☐ 1= có thiếu máu WBC = K/uL NEU% = % HCT= % RBC = M/uL LYM% = % PLT = K/uL MONO% = % 4.2 Hoạt độ men gan: ☐ = Khơng thực ☐ = Bình thường ☐ = RL chức AST = U/L ALT = U/L 4.3 Chức thận: ☐ = Không thực ☐ = Bình thường ☐ = Suy chức Urê/BUN = mmol/L Creatinin = umol/L 4.4 Đường máu: ☐ = Khơng thực ☐ = Bình thường ☐ = Có rối loạn Glucose = mmol/L 4.6 Bilan tim mạch ( ECG siêu âm tim): ☐ = Không thực ☐ = Bình thường ☐ = Có bệnh lý 4.7 Bilan hô hấp (đo chức hô hấp): ☐ = Khơng thực ☐ = Bình thường ☐ 2=Có bệnh lý hô hấp NỒNG ĐỘ MARKERS 5.1 Nồng độ CEA = ng/mL ☐ = Không thực ☐ = Bình thường ☐ = Bất thường 5.2 Nồng độ CYFRA 21- = ng/mL ☐ = Khơng thực ☐ = Bình thường ☐ = Bất thường CHẨN ĐỐN HÌNH ẢNH 6.1 Siêu âm bụng tổng quát: ☐ = Không thực ☐ = Bình thường ☐ = Có bệnh lý 6.4 X Quang (quy ước lồng ngực): ☐ = Khơng thực ☐ = Bình thường ☐ = Có bệnh lý KẾT QUẢ SINH HỌC PHÂN TỬ ( NỒNG ĐỘ VEGF VÀ CIZ1b) Nồng độ DNA = Nồng độ ABL = Nồng độ VEGF = Nồng độ CIZ1b = Nồng độ OD 260/280 = Nồng độ Nồng độ log VEGF = Nồng độ log CIZ1b_ABL CIZ1b Normalisation Nồng độ VEGF_ABL Normalisation = Nghiên cứu sinh = = PHỤ LỤC 3: Phân loại TNM WHO UTP năm 2015 [7, tr.11] Chẩn đoán giai đoạn ( theo TNM) * T: Khối u nguyên phát: - TX : Không xác định khối u nguyên phát - To: không thấy khối u nguyên phát - Tis : có khối u chỗ - T1: Khối u có kích thước lớn 3cm 5cm 7cm có xâm lấn trực tiếp vào thành ngực, hoành, thần kinh hoành, màng phổi, trung thất thành màng tim Hoặc khối u phế quản gốc cách carina < cm; xẹp/viêm phổi tắc nghẽn tồn phổi, có khối u nốt riêng biệt thùy - T4: Khối u kích thước có xâm lấn vào tim, mạch máu lớn, khí quản, dây thần kinh quặt ngược, thực quản, cột sống cựa khí quản Hoặc có khối u nốt riêng biệt khác thùy bên * N: Hạch vùng - NX : Không xác định hạch - No: Khơng có di vào hạch vùng - N1: di hạch cạnh phế quản bên và/hoặc hạch rốn phổi bao gồm xâm lấn trực tiếp khối u vào hạch - N2: di đến hạch trung thất bên và/hoặc hạch cựa khí quản - N3: di hạch trung thất đối bên, hạch rốn phổi đối bên, hạch bậc thang bên đối bên hạch thượng đòn * M: di - Mo: Khơng có di xa - M1: Có di + M1a: Có khối riêng biệt thùy đối bên Hoặc khối u có khối màng phổi có tổn thương ác tính màng phổi + M1b: di xa Giai đoạn Không xác định Giai đoạn Giai đoạn IA Giai đoạn IB Giai đoạn IIA Giai đoạn IIB Giai đoạn IIIA TNM Tx N0 M0 Tis N0 M0 T1a N0 M0 T1b N0 M0 T2a N0 M0 T1a N1 M0 T1b N1 M0 T2a N1 M0 T2b N0 M0 T2b N1 M0 T3 N0 M0 T1 N2 M0 Giai đoạn IIIB Giai đoạn IV T2 N2 M0 T3 N1 M0 T3 N2 M0 T4 N0 M0 T4 N2 M0 T N3 M0 T N M1a T N M1b ... độ biểu mRNA gen CIZ1b bệnh nhân ung thư phổi không tế bào nhỏ 4.2.2 Mức độ biểu mRNA gen VEGF bệnh nhân ung thư phổi không tế bào nhỏ 4.2.3 Đột biến EGFR bệnh nhân ung thư phổi. .. cận lâm sàng bệnh nhân ung thư phổi không tế bào nhỏ 4.2 Mức độ biểu mRNA gen CIZ1b, VEGF, đột biến EGFR tỷ lệ nhiễm Virus Merkel Cell bệnh nhân ung thư phổi không tế bào nhỏ ... tương bệnh nhân ung thư phổi không tế bào nhỏ người bình thư ng 3.5.2 Biểu mRNA VEGF huyết tương bệnh nhân ung thư phổi không tế bào nhỏ người bình thư ng 3.6 Đột biến gen EGFR bệnh nhân ung