Nghiên cứu thủy phân dầu nhân hạt bàng (Terminalia Catappal.) bằng Enzyme Lipase từ mucor javanicus

ĐẠI HỌC QUỐC GIA TP.HCM TRƯỜNG ĐẠI HỌC BÁCH KHOA PHẠM THỊ THÙY DƯƠNG NGHIÊN CỨU THỦY PHÂN DẦU NHÂN HẠT BÀNG (TERMINAUA CATAPPA L.) BẰNG ENZYME LIPASE TỪ MVCOR JAVANICUS Chuyên ngành: Công Nghệ Thực Phẩm Mã số: 60540101 LUẬN VĂN THẠC SĨ Tp Hồ Chí Minh, tháng 01 năm 2018 ii CƠNG TRÌNH ĐƯỢC HỒN THÀNH TẠI TRƯỜNG ĐẠI HỌC BÁCH KHOA -ĐHQG -HCM Cán hướng dẫn khoa học: GS.TS Đống Thị Anh Đào (Ghi rõ họ, tên, học hàm, học vị chữ ký) Cán chấm nhận xét 1: PGS.TS Nguyễn Tiến Thắng (Ghi rõ họ, tên, học hàm, học vị chữ ký) Cán chấm nhận xét 2: PGS.TS Phan Ngọc Hòa (Ghi rõ họ, tên, học hàm, học vị chữ ký) Luận văn thạc sĩ bảo vệ Trường Đại học Bách Khoa, ĐHQG Tp HCM ngày 12 tháng 01 năm 2018 Thành phần Hội đồng đánh giá luận văn thạc sĩ gồm: (Ghi rõ họ, tên, học hàm, học vị Hội đồng chấm bảo vệ luận văn thạc sĩ) TS Trần Bích Lam PGS.TS Nguyễn Tiến Thắng PGS.TS Phan Ngọc Hòa TS Lê Trung Thiên TS Trần Thị Ngọc Yên Xác nhận Chủ tịch Hội đồng đánh giá LV Trưởng Khoa quản lý chuyên ngành sau luận văn sửa chữa (nếu có) CHỦ TỊCH HỘI ĐỒNG TRƯỞNG KHOA iii ĐẠI HỌC QUỐC GIA TP.HCM TRƯỜNG ĐẠI HỌC BÁCH KHOA CỘNG HÒA XÃ HỘI CHỦ NGHĨA VIỆT NAM Độc lập - Tự - Hạnh phúc NHIỆM VỤ LUẬN VĂN THẠC SĨ Họ tên học viên: PHẠM THỊ THÙY DƯƠNG MSHV : 1570883 Ngày, tháng, năm sinh: 26/01/1993 Nơi sinh: Bến Tre Chuyên ngành: Công nghệ thực phẩm Mã số : 60540101 I TÊN ĐỀ TÀI: NGHIÊN CỨU THỦY PHÂN DẦU NHÂN HẠT BÀNG ( TERM1NAL1A CATAPPA L.) BẰNG ENZYME LIPASE TỪ MUCOR JAVANICUS II NHIỆM VỤ VÀ NỘI DUNG: - Khảo sát nguyên liệu dầu nhân hạt bàng enzyme lipase Mucor javanicus - Khảo sát điều kiện phản ứng thủy phân dầu nhân hạt bàng enzyme lipase từ Mucor javanicus' tỉ lệ dầu:đệm, nhiệt độ, pH, tốc độ lắc, tỉ lệ E/S, thời gian - Tối ưu hóa q trình thủy phân dầu nhân hạt bàng enzyme lipase từ Mucor javanicus III NGÀY GIAO NHIỆM VỤ : 10/07/2017 IV NGÀY HOÀN THÀNH NHIỆM VỤ: 03/12/2017 V CÁN BỘ HƯỚNG DẪN: GS.TS ĐỐNG THỊ ANH ĐÀO Tp HCM, ngày tháng năm 20 CÁN BỘ HƯỚNG DẪN CHỦ NHIỆM BỘ MÔN ĐÀO TẠO (Họ tên chữ ký) (Họ tên chữ ký) TRƯỞNG KHOA (Họ tên chữ ký) iv LỜI CẢM ƠN Em xin gửi lời cảm ơn chân thành sâu sắc đến thầy cô giáo trường Đại học Bách Khoa Tp.HCM, đặc biệt thầy cô khoa kỹ thuật hóa học, mơn Cơng nghệ thực phẩm tạo điều kiện cho em học tập nghiên cứu, cung cấp kiến thức kinh nghiệm để em có vốn ừi thức vững vàng trước rời khỏi trường Đặc biệt, em xin chân thành cảm ơn bảo tận tỉnh Cô GS.TS Đống Thị Anh Đào - người trực tiếp hướng dẫn, bảo cho em ừong suốt q trình hồn thành luận vãn tốt nghiệp Em xin gửi lời cảm ơn Cô Ngụy Lệ Hồng - giúp đỡ tạo điều kiện cho em thực thí nghiệm Cản ơn em Châu, em Vận hỗ trợ chị thời gian qua Em xin cảm ơn anh (chị) học viên cao học đợt khóa 2015 bạn bè nhiệt tình giúp đỡ em thời gian qua Lời cảm ơn cuối xin gửi đến gia đình, ba, mẹ anh Tuấn - người ln đặt niềm tin, cổ vũ giúp đỡ, động viên tinh thần cho em để em hồn thành tốt cơng việc Xin gửi lời cảm ơn chân thành lòng biết ơn sâu sắc nhất! Tp Hồ Chỉ Minh, ngày 02 tháng 01 năm 2018 Học viên thực Phạm Thị Thùy Dương ABSTRACTS Terminalia catappa L seed contains: 56% fat, 24.5% protein, 9.4% carbohydrate, 4.1% ash and 6% moisture content In this study, we used cold-pressed method to exttact oil from the Terminalia catappa L kernel that collected in An Tinh village, Trang Bang district, Tay Ninh province Then, the oil was hydrolysis with lipase enzyme from Mucor javanicus and obtained the following results: Terminalia catappa L seed oil contains: oleic acid (32%), linoleic acid (28.4%), palmitic acid (33.6%), stearic acid (4.7%), arachidic acid (0.5% acid linolenic (0.1%), myristic acid (0.1%), cis-ll-Eicosenoic acid (0.1%), cisll,14-eicosadienoic acid (0.1%), behenic acid (0.1%) The appropriate conditions for hydrolysis of Terminalia catappa L oil by lipase enzyme from Mucor javanicus were: temperature 37 (°C), pH 7.5, shaking: 300 rpm, ratio of oil:buffer 4:5 (w/v), ratio of enzyme/substtate 3% (w/w), reaction time 52.5 hours and obtained hydrolysis yield 65.28 ± 0.37% The fatty acid composition after hydrolysis by lipase is obtained: oleic acid (33%), linoleic acid (26.3%), palmitic acid (34.9%), stearic acid (4.7%), arachidic acid (0.5% palmitoleic acid (0.3%), linolenic acid (0.1%), myristic acid (0.1%), cis-ll-Eicosenoic acid (0.1%), behenic acid (0.2%) vi TĨM TẮT LUẬN VĂN Quả bàng có giá trị dinh dưỡng cao, thành phần chứa nhiều 56% chất béo, 24.5% protein, 9.4% carbohydrate, 4.1% ừo 6% ẩm Trong đề tài nghiên cứu này, sử dụng phương pháp ép trục vít để thu nhận dầu từ nhân hạt bàng thu mua ấp An Thới, xã An Tịnh, huyện Trảng Bàng, tình Tây Ninh Sau đó, tiến hành thủy phân dầu bàng enzyme lipase Mucor javanicus thu kết sau: Nguyên liệu dầu nhân hạt bàng chứa thành phần acid béo sau: acid oleic (32%), acid linoleic (28.4%), acid palmitic (33.6%), acid stearic (4.7%), acid arachidic (0.5%), acid palmitoleic (0.3%), acid linolenic (0.1%), acid myristic (0.1%), acid cis-11- Eicosenoic (0.1%), acid cisll,14-eicosadienoic (0.1%), acid behenic (0.2%) Điều kiện thích họp để thủy phân dầu nhân hạt bàng enzyme lipase Mucor javanicus là: nhiệt độ 37 (°C), pH 7.5, tốc độ lắc: 300 rpm, tỉ lệ dầu: đệm: 4:5 (w/v), tỉ lệ enzyme/cơ chất % (w/w), thời gian thủy phân 52.5 Tiến hành tối ưu hóa yếu tố thủy phân đạt hiệu suất thủy phân chất béo là: 65.28+0.37% Sản phẩm sau thủy phân có thành phần acid béo sau: acid oleic (33%), acid linoleic (26.3%), acid palmitic (34.9%), acid stearic (4.7%), acid arachidic (0.5%), acid palmitoleic (0.3%), acid linolenic (0.1%), acid myristic (0.1%), acid cis-11- Eicosenoic (0.1%), acid behenic (0.2%) LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan nội dung ừong luận văn thực hướng dẫn trực tiếp Cô GS.TS Đống Thị Anh Đào Các kết nghiên cứu kết luận luận văn trung thực không chép từ nguồn nào, hình thức Việc tham khảo nguồn tài liệu thực trích dẫn ghi nguồn tài liệu tham khảo theo yêu cầu Mọi chép không họp lệ, vi phạm qui chế đào tạo, tơi xin chịu hồn tồn ừách nhiệm Tác giả luận văn Phạm Thị Thùy Dương MỤC LỤC LỜI CẢM ƠN iv ABSTRACTS V TÓM TẮT LUẬN VĂN vi LỜI CAM ĐOAN vii MỤC LỤC viii DANH MỤC BẢNG xi DANH MỤC HÌNH xiii DANH MỤC CÁC TỪ VIẾT TẮT .xiv MỞ ĐẦU Chương TỔNG QUAN 1.1 Hạt bàng 1.2 Dầu nhân hạt bàng 1.2.1 Thành phần hóa học 1.2.2 Tính chất 1.3 Enzyme lipase từ Mucor javanicus 11 13.1 Nguồn gốc 12 1.3.2 Cấu tạo hóa học 12 133 Tính chất 12 3.4 Cơ chế tác dụng 13 13.5 Yếu tố ảnh hưởng đến vận tốc tốc phản ứng enzyme 14 1.3.6 Phương trình thủy phân 14 1,3,7 Các nghiên cứu enzyme MJL 15 Chương ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 16 2.1 Đối tượng 16 2.1.1 Dầu hạt bàng 16 2.1.2 Enzyme lipase 16 2.1.3 Hóa chất 17 2.2 Dụng cụ thiết bị 17 2.2.1 Dụng cụ 17 2.2.2 Thiết bị 18 2.3 Phương pháp nghiên cứu 19 2.3.1 Nội dung nghiên cứu 19 2.3.2 Quy trình thực 20 2.3.3 Xác định hiệu suất thủy phân 23 2.3.4 Bố trí thí nghiệm 23 2.3.4 Phương pháp xử lý số liệu 29 2.3.5 Các phương pháp phân tích 30 Chương KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN .31 3.1 Khảo sát nguyên liệu 31 3.1.1 Dầu nhân hạt bàng 31 3.1.2 Enzyme Mucor javanicus lipase 33 3.2 Khảo sát điều kiện thủy phân dầu nhân hạt bàng 34 3.2.1 Khảo sát ảnh hưởng tỉ lệ dầu:đệm 34 3.2.2 Khảo sát ảnh hưởng nhiệt độ 35 3.2.3 Khảo sát ảnh hưởng pH 36 3.2.4 Khảo sát ảnh hưởng tốc độ lắc 37 3.2.5 Khảo sát ảnh hưởng tỉ lệ E/S 38 3.2.6 Khảo sát ảnh hưởng thời gian 39 3.3 Tối ưu hóa q trình thủy phân dầu nhân hạt bàng 40 3.3.1 Kết thí nghiệm sàng lọc yếu tố 40 3.3.2 Kết tối ưu hóa q trình thủy phân dầu nhân hạt bàng 42 Chương KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 48 4.1 Kết luận 48 4.2 Kiến nghị 48 TÀI LIỆU THAM KHẢO 49 PHỤ LỤC 53 50 Journal of Biotechnology, vol 5, pp 2469-2475, 2006 [20] G Wu, CJ Meininger, "Regulation of nitric oxide synthesis by dietary factors," Annual Reviews Nutrition, vol 22, pp 61-86, 2002 [21] B J Wells, A.G Mainous, C.J Everett, "Association between dietary arginine and C-reactive protein.," Nutrition, vol 21, pp 125-130, 2005 [22] R J.M., "The carcinogenicity of acrylamide," Mutation Research/Genetic Toxicology and Environmental Mutagenesis, vol 580, pp 3-20, 2005 [23] c p Malik, A.K Srivastava, Textbook of Plant Physiology : New Delhi, 1982 [24] E w Russell, "Soil conditions and plant growth Supergene zone," M Nedra vol 19 1973 [25] s Sotheeswaran, M R Sharif, R.A Moreau, GJ Piazza, "Lipids from the seeds of seven Fijian plant species " Food Chemistry, vol 49, pp 11-13, 1994 [26] I A Ajayi, R.A Oderinde, v.o Taiwo, E.o Agbendana, "Short-term toxicological evaluation of Terminalia catappa, Pentaclethra macrophylla and Colophyllum inophyllum seed oils in rats," Food Chemistry, vol 106, pp 458- 565, 2008 [27] R o Vies, J.J Gottenbos, "Nutritional characteristics and food uses of vegetable oils," in Oil Crops of the World, R G Downey, A Ashri, Ed., ed New York: McGraw Hill, 1989, pp 3683 [28] o J Dagne K.A., "Oil content and fatty acid composition of seeds of Cmizotia cass (Compositae)," Journal of the Science of Food and Agriculture, vol 73, pp 274-278, 1997 [29] G Atkinson, "Fat and oil as biscuit ingredients," in Manley's technology of biscuits, crackers and cookies, D Manley, Ed., ed UK: Woodhead Publishing Limited, 2011, pp 160-180 [30] s Janpom, and et al., "Physicochemical properties of Terminalia catappa seed oil as a novel dietary lipid source," Journal of Food and Drug analysis, vol 23, pp 201-209, 2015 [31] Codex, "STANDARD FOR EDIBLE FATS AND OILS CODEX STAN 19-1981 ", ed, 1981 [32] L N Tú, cộng sự, Giáo trình Hóa sinh cơng nghiệp: NXB Khoa học Kỹ thuật, 2012 [33] T Ogiso, M Sugiura, "Studies on Bile-sensitive Lipase V Purification and Properties of Lipase from Mucor javanicus," Chemical and Pharmaceutical Bulletin, vol 17, pp 10251033, 1969 [34] H Ishihara, H Okumura, H Ikezawa, s Tejima., "Studies on lipase from Mucor javanicus: I Purification and properties," Biochimica et Biophysica Acta (BBA) - Lipids and Lipid Metabolism, vol 388, pp 413-422, 1975 [35] F s A N ZEALAND, "Lipase from Mucor javanicus as a processing aid (enzyme)," 2005 [36] K Aunstrup, "Enzymes of Industrial interest traditional products," in Annual Reports on Fermentation Processes vol 1, p Perlman, Ed., ed Academic Press Inc: A Subsidiary of Harcourt Brace Jovanoich, 1977, pp 181-198 [37] T Saiki, Y Takagi, T Suzuki, T Narasaki, G Tamura, K Arima,, "Studies on the Lipoprotein Lipases of Microorganisms Part IV: Purification and General Properties of the Lipoprotein Lipase Produced by Mucor javanicus " Agricultural and Biological Chemistry, vol 33, pp 414 423, 1969 [38] V M Balcão, F Xavier Malcata, "Interesterification and acidolysis of butterfat with oleic 51 acid by Mucor javanicus lipase: changes in the pool of fatty acid residues," Enzyme and Microbial Technology, vol 22, pp 511-519, 1998 [39] A B Santoyo, and et al, "Production of polyglycerol polyricinoleate (PGPR) by using free and immobilized Mucor javanicus lipase," Journal of Biotechnology, vol 131, pp S90-S91, 2007 [40] J L Guil-Guerrero, J.c Lopez-Martinez, p Campra-Madrid, M.A Rincon- Cervera, "GLA purification from echium fastuosum seed oil in a two-step process: Simultaneous pufas exttaction/concenttation and selective enzymatic esterification," Journal of food biochemistry, vol 31, pp 386-398, 2007 [41] TCVN, "TCVN 7597:2013, CODEX STAN 210-1999, Amd 2013 - DẦU THựC VẬT," ed, 2013 [42] Sigma, "Enzymatic Assay of Lipase," ed [43] M M Bradford, "A Rapid and Sensitive Method for the Quantitation of Microgram Quantities of Protein Utilizing the Principle of Protein-Dye Binding," Analytical Biochemistry, vol 72, pp 248-254, 1976 [44] TCVN, "TIÊU CHUẨN QUỐC GIA TCVN 6127 : 2010, ISO 660 : 2009 DẦU MỠ ĐỘNG VẬT VÀ IHựC VẬT - XÁC ĐỊNH TRỊ SỐ AXIT VÀ Độ AXIT," ed, 2010 [45] TCVN, "TCVN 6121 : 2010 ISO 3960 : 2007 DẦU MỠ ĐỘNG VẬT VÀ THỰC VẬT XÁC ĐỊNH TRỊ SỐ PEROXIT - PHƯƠNG PHAP XÁC ĐỊNH DIÊM KẾT THÚC CHUẨN Độ IỐT (QUAN SÁT BẰNG MẮT THƯỜNG)," ed, 2010 [46] J s Amaral, s.c Cunha, A Santos, M.R Alves, R.M Seabra, B.p.p Oliveữa, "Influence of cultivar and environmental conditions on the triacylglycerol profile of hazelnut (Corylus aveỉỉana L.)," Journal Agricultural and Food Chemistry, vol 51, pp 7698-7701,2006 [47] M Venkatachalam, S.K Sathe, "Chemical composition of selected edible nut seeds," Journal Agricutural and Food Chemistry, vol 54, pp 4705-4714, 2006 [48] J Canellas, "Estudio de componentes quimicos de variedades de almendra de Baleares," Doctoral thesis, The University of Illes Balears, Palma de Mallorca, Spain, 1986 [49] M Mehran, M Filsoof, "Characteristics of Iranian almond nuts and oils," Journal of the American Oil Chemist Society, vol 51, pp 433-434,1974 [50] s Aliyu, Md Zahangir Alam, M Ismail Abdul Karim, Hamzah, M Salleh, "Characterization of Candida cylindracea lipase produced from Palm oil mill effluent based medium," International Journal of Chemical and Biochemical Sciences, 2012 52 PHỤ LỤC A CÁC PHƯƠNG PHÁP PHÂN TÍCH A.l Phuong pháp xác định hàm lượng protein enzyme Để thực hiện: chuẩn bị dãy dung dịch chuẩn protein BSA vói nồng độ từ 04-1.4 mg/ml với nồng độ BSA ban đầu mg/ml Đảo ngược chai thuốc thử vài lần (tránh tạo bọt khí), lấy lượng thuốc thử vừa đủ để nhiệt độ phòng 30 phút trước sử dụng Cho 5pl mẫu 250pl thuốc thử Bradford vào giếng, trộn ủ 10 phút nhiệt độ phòng, tránh ánh sáng (khơng q giờ) Thí nghiệm lặp lại lần Ket phân tích máy Elisa Reader với bước sóng 595nm Bảng Số liệu dựng đường chuẩn BSA A.2 Phuong pháp xác định hoạt tính hoạt tính riêng enzyme Hóa chất: - Dầu olive (Sigma Stock No 800-1) - Dung dịch sodium chloride NaCl 3000mM (Sigma Prod No S-9625.) - Dung dịch Sodium Taurocholate 1.5% (w/v) (Sigma Prod.No T-4009) - Dung dịch CaC12 75mM (Sigma Prod No C-3881.) - Dung dịch NaOH lOmM - Dung dịch CaC12 5mM (Sigma Prod No C-3881.) - Dd enzyme lipase: chuẩn bị sử dụng, Chuẩn bị huyền phù chứa 20,000 đến 30,000 u/ml lipase CaCỈ2 5mM lạnh d Chuẩn bị mẫu 53 LI / ml enzyme 7’0 01 Trong đó: - MNHOH: phân tử khối NaOH (g/mol) - VNHOH: thể tích NaOH (pl) sử dụng ừong mẫu phân tích - 60: chuyển từ phút sang - df: hệ số pha loãng - T: thời gian (phút) cần thiết để bổ sung NaOH điều chỉnh pH 7.7 - 0.01: thể tích enzyme (ml) sử dụng A.3 Phương pháp xác định số acid Hóa chất - Dung môi: etanol ete dầu hỏa pha theo tỉ lệ 1:1 (v/v) Ngay trước sử dụng, trung hòa cách thêm dung dịch kali hydroxit với có mặt 0.3 ml dung dịch phenolphtalein 100 ml hỗn hợp dung môi - Etanol, tối thiểu

75 0.001 ™ _ 56-lxcxV Cong mức tính: WAV = ——-— m Trong đó: c -là nồng độ dung dịch chuẩn kali hydroxit sử dụng (mol/1) V-là thể tích dung dịch chuẩn kali hydroxit sử dụng (ml) m- khối lượng phần mẫu thử, tính gam (g) A.4 Phuong pháp xác định sổ peroxide Hóa chất - Nước loại khống, đun sôi làm nguội đen 20 °C 55 - Dung dịch axit axetic bãng/isooctan, chuẩn bị cách ừộn 60 ml axit axetic băng vói 40 ml isooctan (axit axetic băng: (p = 60 ml/100 ml isooctan: (p = 40 ml/100 ml) - Kali iodua, không chứa iôt iodat - Dung dịch kali iodua bão hòa, nồng độ theo khối lượng p = 175 g/100 ml Hòa tan khoảng 14 g kali iodua khoảng 8g nước vừa đun sôi làm nguội nhiệt độ phòng Đảm bảo dung dịch bão hòa (tinh thể khơng hòa tan) Bảo quản chỗ tối chuẩn bị hàng ngày sử dụng Kiểm Ưa dung dịch sau: thêm hai giọt dung dịch tinh bột vào 0.5 ml kali iodua 30 ml dung dịch axit axetic bãng/isooctan Neu cần nhiều giọt dung dịch chuẩn natri thiosulfat 0.1 mol/1 để tạo màu xanh, loại bỏ dung dịch kali iodua, cần - Dung dịch chuẩn natri thiosulfat 0.01 N, c(Na2S2Ũ3) = 0.1 mol/1 - Dung dịch tinh bột, nồng độ theo khối lượng p = g/100 ml Trộn 0.5 g tinh bột lượng nhỏ nước lạnh.Cho hỗn hợp vào 50 ml nước sôi, vừa thêm vừa khuấy đun sôi dung dịch vài giây làm nguội nhanh Dung dịch cần chuẩn bị ngày làm việc - Dung dịch kali iodat chuẩn (KIO3) - Axit clohydric, c(HCl) = mol/1 Cách tiến hành - Cân lOg mẫu cho vào erlen 250ml có nút nhám - Hòa tan phần mẫu thử 50 ml dung dịch axit axetic băng/isooctan cách xoay nhẹ bình - Thêm 0.5 ml dung dịch kali iodua bão hòa Đậy bình nón lắc trộn tay 60 s (sử dụng đồng hồ bấm xác đến ± s) - Mở bình nón, thêm 100 ml nước loại khoáng, tráng rửa nút thủy tinh mài lắc bình - Chuẩn độ lượng iơt giải phóng dung dịch chuẩn natri thiosulfat 0.01 N đến màu vàng cam vàng nhạt sau thêm 0.5 ml dung dịch tinh bột chuyển từ màu tím đến khơng màu Ngừng chuẩn độ sớm tốt dung dịch trở nên không màu 30 s Tính biểu thị kết 56 Trị số peroxit (PV) biểu thị mill đương lượng oxy hóa kilogam, tính cơng thức sau: p-y (V “ Vo)XCthioXCchuẩnX 1000 " m Trong đó: V- thể tích dung dịch chuẩn natri thiosulfat 0.01 N dùng để xác định (ml) Vo- thể tích dung dịch chuẩn natri thiosulf at 0.01 N chuẩn độ mẫu trắng (ml) Cchuẩn- nồng độ xác dung dịch chuẩn natri thiosulf at 0.01 N (mol/1) Cthio- nồng độ xấp xỉ dung dịch chuẩn natri thiosulfat 0.01 N (mol/1) m- khối lượng mẫu thử, tính gam (g) 57 B CÁC GIÁ TRỊ PHÂN TÍCH THựC NGHIỆM B.l Kết ảnh hưởng tỉ lệ dầu:đệm (w/v) đến hiệu suất thủy phân dầu bàng 1:4 1:5 0.1 0.30 18.3 2.00 17.65 0.1 0.30 18.1 2.00 17.45 0.1 0.30 18.0 2.00 17.35 0.1 0.30 11.6 2.02 10.97 0.1 0.30 11.0 2.00 10.49 0.1 0.30 11.3 2.00 10.79 0.1 0.30 9.0 2.00 8.53 0.1 0.30 9.5 1.99 9.07 0.1 0.30 9.5 2.00 9.02 17.49 0.14977 10.75 0.24139 8.87 0.297 B.2 Kết ảnh hưởng nhiệt độ đến hiệu suất thủy phân dầu bàng 58 35 40 45 0.1 0.30 17.6 1.99 17.05 0.1 0.30 18.5 2.00 17.85 0.1 0.30 21.5 2.00 20.79 0.1 0.30 20.4 2.00 19.71 0.1 0.30 21.9 2.01 21.07 0.1 0.30 19.4 2.00 18.73 0.1 0.30 19.3 2.00 18.63 0.1 0.30 19.4 2.00 18.73 0.1 0.30 11.5 2.00 10.98 0.1 0.30 12.4 2.00 11.86 0.1 0.30 10.9 2.00 10.39 B.3 Kết ảnh hưởng pH đến hiệu suất thủy phân dầu bàng Hiệu sũĩt thủy phân pH STT c Vo VI m 20.52 0.72 18.69 0.06 11.08 0.74 Hiệu suit thủy phân dâu (H, dầu trung %) bình (%) 0.1 0.50 7.60 2.00 6.96 0.1 0.50 7.90 2.00 7.26 0.1 0.55 7.90 2.00 7.21 0.1 0.40 8.10 2.01 7.51 0.1 0.40 8.30 2.00 7.75 0.1 0.40 8.00 2.00 7.45 0.1 0.30 19.10 1.99 18.53 0.1 0.35 19.20 2.00 18.48 0.1 0.40 19.50 2.00 18.73 0.1 0.30 21.80 2.00 21.08 0.1 0.30 21.50 2.01 20.68 Độ lệch chuẩn 7.14 0.16 7.57 0.16 18.58 0.13 20.92 0.21 59 0.1 0.30 21.70 2.00 20.98 0.1 0.30 20.40 2.00 19.71 0.1 0.30 20.50 2.00 19.81 0.1 0.30 20.50 2.00 19.81 0.1 0.10 7.30 2.00 7.06 0.1 0.10 7.50 2.00 7.26 0.1 0.10 7.40 2.00 7.16 B.4 Kết ảnh hưởng tốc độ lắc đến 300 350 400 19.77 0.06 7.16 0.10 tiiệu suất thủy phân dầu bàng 0.1 0.30 21.80 1.99 21.19 0.1 0.30 22.20 2.00 21.47 0.1 0.30 22.10 2.00 21.37 0.1 0.30 22.00 2.00 21.28 0.1 0.30 22.50 2.01 21.66 0.1 0.30 22.30 2.00 21.57 0.1 0.30 22.00 2.00 21.28 0.1 0.30 22.30 2.00 21.57 0.1 0.30 22.50 2.00 21.77 21.34 0.15 21.50 0.20 21.54 0.25 60 B.5 Kết ảnh hưởng tỉ lệ E/S đến hiệu suất thủy phân dầu bàng 0.1 0.40 26.90 2.00 25.98 0.1 0.40 27.40 2.00 26.47 0.1 0.40 27.50 2.00 26.57 0.1 0.40 27.90 2.00 26.96 0.1 0.40 28.30 2.00 27.36 0.1 0.40 27.60 2.00 26.67 0.1 0.40 27.00 2.00 26.08 0.1 0.40 27.80 2.00 26.87 0.1 0.40 27.30 2.00 26.38 26.34 0.32 27.00 0.34 26.44 0.40 B.6 Kết ảnh hưởng thòi gian thủy phân đến hiệu suất thủy phân dầu bàng 61 24 36 48 60 72 84 0.1 0.40 29.0 2.00 28.04 0.1 0.40 46.8 2.00 45.50 0.1 0.40 45.4 2.00 44.12 0.1 0.40 46.6 2.00 45.30 0.1 0.40 57.4 2.00 55.93 0.1 0.40 58.9 2.00 57.41 0.1 0.40 58.0 2.00 56.53 0.1 0.40 60.2 2.00 58.62 0.1 0.40 60.5 2.00 58.93 0.1 0.40 60.3 2.00 58.70 0.1 0.40 61.7 2.00 60.11 0.1 0.40 61.3 2.00 59.70 0.1 0.40 61.9 2.00 60.35 0.1 0.40 63.2 2.00 61.58 0.1 0.40 63.5 2.00 61.87 0.1 0.40 63.9 2.00 62.26 0.1 0.40 62.3 2.00 60.65 0.1 0.40 62.0 2.00 60.40 0.1 0.40 61.5 2.00 59.91 44.97 0.74 56.62 0.74 58.75 0.16 60.05 0.33 61.90 0.34 60.32 0.38 62 c CÁC BẢNG THỐNG KÊ c.l Ảnh hưởng tỉ lệ dầu: đệm (w/v) đến hiệu suất thủy phân dầu ANOVA Table for H by TL dau_dem Source Sum of Squares Df Mean Square Between groups 144.9414317 36.23535792 Within groups 42.29380833 10 4.229380833 Total (Corr.) 187.23524 14 Multiple Range Tests for H by TL dau dem Method: 95 percent LSD Homogeneous Groups TL dau dem Count Mean 1:1 1:5 1:4 1:2 1:3 C 3 7.123333333 8.873333333 10.75 12.0475 17.4 p -Value 0.0029 X XX XX X X Ảnh hưởng nhiệt độ đến hiệu suất thủy phân dầu ANOVA Table for H by Nhiet Source Sum of Squarei Between groups 152.387425 Within groups 2.684666667 Total (Corr.) 155.0720917 Method: J5.0 pe: •cent LSD Nhiet Count Mean 45 11.07666667 30 17.64666667 40 18.69666667 35 F-Ratio 8.57 Dị Mean Square F-Ratio p -Value 50.79580833 151.37 0.0000 0.3355833333 11 Homogeneous Groups X X X 20.52333333 X C.3 Ảnh hưởng pH đến hiệu suất thủy phân dầu ẠNOVA Table for H by pH Source Sum of Squares Between groups 707.7742278 Within groups 0.2504 Total (Corr.) 708.0246278 Method: 95.( pH Count Df Mean Square 12 17 141.5548456 0.02086666667 percent LSD Mean 7.143333333 7.16 7.57 18.58 Homogeneous Groups X X X X F-Ratio 6783.78 p-Value 0.0000 63 C.4 Ảnh hưởng tốc độ lắc đến hiệu suất thủy phân dầu ANOVA Table for H by Toe lac Method: 95.0 percent LSD C.5 Ảnh hưởng tỉ lệ E/S đến hiệu suất thủy phân dầu ANOVA Table for H by Ti le E s Method: 95.0 percent LSD C.6 Ảnh hưởng thòi gian thủy phân đến hiệu suất thủy phân dầu ANOVA Table for H by Thoi gian 64 24 36 48 60 84 72 3 3 3 44.97333333 56.62333333 58.75 60.05333333 60.32 61.90333333 X X X X X X ... TÀI: NGHIÊN CỨU THỦY PHÂN DẦU NHÂN HẠT BÀNG ( TERM1NAL1A CATAPPA L.) BẰNG ENZYME LIPASE TỪ MUCOR JAVANICUS II NHIỆM VỤ VÀ NỘI DUNG: - Khảo sát nguyên liệu dầu nhân hạt bàng enzyme lipase Mucor javanicus. .. thủy phân dầu nhân hạt bàng enzyme lipase từ Mucor javanicus' tỉ lệ dầu: đệm, nhiệt độ, pH, tốc độ lắc, tỉ lệ E/S, thời gian - Tối ưu hóa q trình thủy phân dầu nhân hạt bàng enzyme lipase từ Mucor. .. triển khai đề tài Nghiên cứu thủy phân dầu nhân hạt bàng enzyme lipase từ Mucor javanicus điều cần thiết Mục tiêu nghiên cứu Tối ưu hóa điều kiện thủy phân dầu nhân hạt bàng để thu hàm lượng