Nghiên cứu thành phần hóa học và hoạt tính gây độc tế bào của loài macaranga balansae gagnep , thuộc chi mã rạng (macaranga) họ thầu dầu (euphorbiaceae) (tt)

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC BÁCH KHOA HÀ NỘI Phạm Toàn Thắng NGHIÊN CỨU THÀNH PHẦN HĨA HỌC VÀ HOẠT TÍNH GÂY ĐỘC TẾ BÀO CỦA LOÀI MACARANGA BALANSAE GAGNEP., THUỘC CHI MÃ RẠNG (MACARANGA) HỌ THẦU DẦU (EUPHORBIACEAE) Ngành : Hóa học Mã số : 9440112 TÓM TẮT LUẬN ÁN TIẾN SĨ HÓA HỌC Hà Nội - 2019 Cơng trình hồn thành tại: Trường Đại học Bách khoa Hà Nội Người hướng dẫn khoa học: PGS.TS Trần Thu Hương PGS TS Đoàn Thị Mai Hương Phản biện 1: Phản biện 2: Phản biện 3: Luận án bảo vệ trước Hội đồng đánh giá luận án tiến sĩ cấp Trường họp Trường Đại học Bách khoa Hà Nội Vào hồi …… giờ, ngày … tháng … năm ……… Có thể tìm hiểu luận án thư viện: Thư viện Tạ Quang Bửu - Trường ĐHBK Hà Nội Thư viện Quốc gia Việt Nam GIỚI THIỆU LUẬN ÁN Tính cấp thiết đề tài Ngày nay, với công phát triển kinh tế việc chăm sóc sức khoẻ ban đầu bảo vệ sức khoẻ cộng đồng trở nên cấp thiết quốc gia giới Do đó, nhu cầu sử dụng thuốc để phòng ngừa chữa trị bệnh nan y đặc biệt ung thư ngày cao, trong hướng để phòng ngừa chữa trị bệnh ung thư nghiên cứu tìm kiếm hợp chất có nguồn gốc từ thiên nhiên Chính việc nghiên cứu hố học hoạt tính sinh học lồi thuốc có ý nghĩa quan trọng cho việc sử dụng cách hợp lý có hiệu nguồn tài nguyên thiên nhiên Việt Nam nước nhiệt đới có khí hậu nóng ẩm với 3/4 diện tích rừng Với đặc thù khí hậu thiên nhiên vậy, Việt Nam có hệ thực vật phong phú đa dạng với 12.000 lồi, có 3.200 loài thực vật sử dụng làm thuốc Y học dân gian, mở tiềm nghiên cứu hợp chất tự nhiên từ loài thực vật Việt Nam Qua cho thấy nguồn tài nguyên thực vật vô phong phú mà chúng chứa biết điều lý thú, biết tác dụng tiềm ẩn chưa biết hết Vì việc nghiên cứu vấn đề cỏ, hợp chất thiên nhiên đề tài hấp dẫn, mẻ phong phú Chi Mã rạng (Macaranga) thuộc họ Thầu dầu (Euphorbiaceae) có khoảng 300 lồi, chủ yếu phân bố vùng nhiệt đới, cận nhiệt đới, đặc biệt Châu Á, tập trung nhiều Đông Nam Á Kết nghiên cứu thành phần hóa học hoạt tính sinh học cho thấy số lồi Macaranga chứa hợp chất có cấu trúc hoạt tính đặc biệt lý thú có hoạt tính chống ung thư Kết sàng lọc hoạt tính sinh học khuôn khổ hợp tác Pháp - Việt cho thấy dịch chiết EtOAc Macaranga balansae ức chế phát triển dòng tế bào ung thư KB nồng độ µg/ml 20 % Chính vậy, lựa chọn đề tài: “Nghiên cứu thành phần hóa học hoạt tính gây độc tế bào loài Macaranga balansae Gagnep., thuộc chi Mã Rạng (Macaranga) họ Thầu dầu (Euphorblaceae)” Mục tiêu luận án: Nghiên cứu để làm rõ thành phần hóa học của lồi Macaranga balansae nhằm tìm kiếm hoạt tính gây độc tế bào, làm sở khoa học cho việc sử dụng định hường nghiên cứu ứng dụng loài thực vật cách hiệu Nội dung luận án: Phân lập hợp chất từ thân, lá, loài Macaranga balansae phương pháp sắc ký Xác định cấu trúc hóa học hợp chất phân lập Đánh giá hoạt tính gây độc tế bào số hợp chất phân lập số dòng tế bào ung thư người Những đóng góp luận án Đây cơng trình nghiên cứu thành phần hóa học hoạt tính sinh học lồi Macaranga balansae Việt Nam Trong trình thực luận án này, thu kết nghiên cứu thành phần hóa học hoạt tính sinh học lồi Macaranga balansae thuộc họ Thầu dầu (Euphorbiaceae) Việt Nam kết là: - Từ dịch chiết từ Macaranga balansae 18 hợp chất phân lập xác định cấu trúc có 03 hợp chất QM1, QM3 QM11 - Từ dịch chiết từ thân Macaranga balansae 17 hợp chất phân lập xác định cấu trúc có hợp chất TM15 hợp chất - Từ dịch chiết Macaranga balansae 11 hợp chất phân lập xác định cấu trúc có hợp chất LM3 hợp chất Đã tiến hành đánh giá hoạt tính ức chế phát triển 08 dòng tế bào ung thư người: ung thư phổi - A549, ung thư cổ tử cung - Hela, ung thư tuyến tụy Pan C1, ung thư vú - MCF-7, ung thư gan - Hep3B, ung thư biểu mô - KB, ung thư gan - HepG2, ung thư phổi - Lu-1 14 hợp chất phân lập Trong hợp chất QM3 thể hoạt gây độc tế bào dòng tế bào ung thư tuyến tụy Pan C1 với giá trị IC50 7,89 ± 0,74 µM 03 hợp chất QM1, QM3, QM11 thể hoạt tính gây độc tế bào dòng tế bào ung thư phổi người A549 với giá trị IC50 29,51 ± 1,68; 10,86 ± 0,50 26,73 ± 2,71 µM Kết nghiên cứu luận án bổ sung thêm cơng bố hoạt tính gây độc tế bào dòng tế bào ung thư hợp chất biết: hợp chất QM2 thể hoạt tính gây độc tế bào dòng tế bào MCF-7; hợp chất QM9 QM10 thể hoạt tính gây độc tế bào dòng tế bào KB, HepG2, Lu-1, MCF-7 vi giỏ tr IC50 khong 2,14 ữ 15,7 àM Bố cục luận án Luận án gồm 133 trang với 33 bảng số liệu, 77 hình sơ đồ, 71 tài liệu tham khảo cập nhật đến năm 2019 Bố cục luận án gồm: Mở đầu (2 trang), Chương Tổng quan tài liệu (24 trang) Chương Đối tượng phương pháp nghiên cứu (6 trang), Chương Thực nghiệm (22 trang), Chương Kết nghiên cứu thảo luận (73 trang), Kết luận kiến nghị (2 trang), Danh mục cơng trình cơng bố (1 trang), Tài liệu tham khảo (8 trang) NỘI DUNG CỦA LUẬN ÁN MỞ ĐẦU Phần đề cập đến ý nghĩa khoa học, mục tiêu nội dung nghiên cứu luận án CHƯƠNG TỔNG QUAN TÀI LIỆU Phần Tổng quan tài liệu tập hợp tất nghiên cứu nước quốc tế vấn đề: Nghiên cứu thành phần hóa học hoạt tính sinh học loài thực vật chi Macaranga thuộc họ Thầu dầu (Euphorbiaceae) CHƯƠNG ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 2.1 Đối tượng nghiên cứu Các phận Quả, Thân, Lá loài Macaranga balansae họ Thầu dầu (Euphorbiaceae) 2.2 Phương pháp nghiên cứu 2.2.1 Thu hái mẫu định tên khoa học: Mẫu thực vật thu hái vào tháng năm 2011 huyện Tun Hóa, tỉnh Quảng Bình, Việt Nam Tên khoa học TS Nguyễn Thế Cường thuộc Viện Sinh thái Tài nguyên Sinh vật - Viện Hàn lâm Khoa học Công nghệ Việt Nam định tên 2.2.2 Phương pháp phân lập: Phần trình bày phương pháp phân lập hợp chất tinh khiết 2.2.3 Phương pháp xác định cấu trúc Các phương pháp vật lý đại sử dụng để xác định cấu trúc hợp chất phân lập từ đối tượng nghiên cứu, bao gồm phổ hồng ngoại (FT-IR), phổ khối lượng (HR-ESI-MS, ESI-MS), phổ cộng hưởng từ hạt nhân (1D NMR, 2D NMR) phổ lưỡng sắc tròn (CD) kết hợp với đo điểm chảy độ quay cực 2.2.4 Phương pháp thử hoạt tính sinh học Phần trình bày phương pháp MTT thử hoạt tính gây độc tế bào CHƯƠNG THỰC NGHIỆM 3.1 Phân lập chất từ Quả Macaranga balansae 3.1.1 Xử lý mẫu thực vật phân lập chất từ Macaranga balansae Phần trình bày cụ thể bước ngâm chiết phân lập chất từ Macaranga balansae (Hình 3.1, Hình 3.2, Hình 3.3) 200g bột M balansae lít EtOAc, 25ºC, 24 (4 lần) Bã Dịch chiết lít MeOH, 25ºC, 24 (4 lần) Bã Cất loại dung môi 20g cặn EtOAc (QM-E) Dịch chiết Cất loại dung môi 29g cặn MeOH (QM-M) Hình 3.1 Sơ đồ ngâm chiết Macaranga balansae Hình 3.2 Sơ đồ phân lập chất từ cặn chiết ethyl acetate Macaranga balansae Hình 3.3 Sơ đồ phân lập chất từ cặn chiết methanol Macaranga balansae 3.1.2 Hằng số vật lý số liệu phổ hợp chất phân lập từ Macaranga balansae * Hợp chất 4’-O-methyl-8-prenyltaxifolin (QM1 - hợp chất mới) Chất rắn màu trắng, độ quay cực : -20,0o (c 0,04; CHCl3), đnc.115 - 117oC, HR-ESI-MS m/z 385,1285 [M-H]-, 1H-NMR (500 MHz, CDCl3+CD3OD), δ (ppm): 4,96 (1H, d, J = 12,0 Hz, H-2); 4,48 (1H, d, J = 12,0 Hz, H-3); 6,02 (1H, s, H-6); 7,09 (1H, d, J = 2,0 Hz, H-2’); 6,92 (1H, d, J = 8,0 Hz, H-5’); 7,02 (1H, dd, J = 8,5, 2,0 Hz, H-6’); 3,19 (2H, d, J = 7,0 Hz, H-1”), 5,18 (1H, t, J = 7,5 Hz, H-2”); 1,64 (3H, s, H-4”); 1,57 (3H, s, H-5”); 3,91 (3H, s, -OCH3) 13C-NMR (125 MHz, CDCl3+CD3OD), δ (ppm): 83,1 (C-2); 72,5 (C-3); 196,4 (C-4); 100,5 (C-4a); 161,2 (C-5); 96,2 (C-6); 165,5 (C-7); 108,7 (C-8); 159,9 (C-8a); 129,9 (C-1’); 114,1 (C-2’); 145,9 (C-3’); 147,7 (C-4’); 110,9 (C-5’); 119,6 (C-6’); 21,5 (C-1”); 122,2 (C-2”); 131,8 (C-3”); 25,7 (C-4”); 17,6 (C-5”); 56,0 (-OCH3) * Hợp chất 5,7-Dihydroxy-4’-methoxy-8-prenylflavanone (QM2) Chất rắn màu vàng nhạt, độ quay cực : -31,6o (c 0,1; MeOH), đnc 186 187oC, ESI-MS: m/z 355,1 [M+H]+, 1H-NMR (500 MHz, CDCl3), δ (ppm): 5,38 (1H, dd, J = 13,0, 3,0Hz, H-2); 3,09 (2H, dd, J = 17,0; 13,0 Hz, H-3a); 2,82 (1H, dd, J = 17,0; 3,0 Hz, H-3b); 6,01 (1H, s, H-6); 7,38 (1H, d, J = 9,0 Hz, H-2’); 6,95 (1H, d, J = 8,5 Hz, H-3’); 6,95 (1H, d, J = 8,5 Hz, H-5’); 7,38 (1H, d, J = 9,0 Hz, H-6’); 3,31 (2H, d, J = 7,0 Hz, H-1”); 5,22 (1H, t, J = 7,5 Hz, H-2”); 1,72 (3H, s, H-4”); 1,71 (3H, s, H-5”); 3,83 (3H, s, -OCH3); 12,14 (1H, s, 5-OH) 13C-NMR (125 MHz, CDCl3), δ (ppm): 78,77 (C-2); 43,12 (C-3); 196,48 (C-4); 103,21 (C4a); 159,88 (C-5); 96,83 (C-6); 163,70 (C-7); 106,24 (C-8); 162,24 (C-8a); 130,75 (C-1’); 127,52 (C-2’); 114,14 (C-3’); 159,77 (C-4’); 114,14 (C-5’); 127,52 (C-6’); 21,80 (C-1”); 121,62 (C-2”); 134,85 (C-3”); 17,83 (C-4”); 25,81 (C-5”); 55,37 (COCH3) * Hợp chất 6,8-diprenyl-4’-O-methyl naringenin (QM3 - Hợp chất mới) Chất bột vàng, Độ quay cực :-23,6o (c 0,15; CHCl3), đnc 141-142oC, HRESI-MS m/z 423,2179 [M+H]+, 1H-NMR (500 MHz, CDCl3), δ (ppm): 5,34 (1H, dd, J = 12,5; 3,0 Hz, H-2); 3,07 (2H, dd, J = 17,5; 13,0 Hz, H-3a); 2,82 (2H, dd, J = 17,0, 3,0 Hz, H-3b); 7,37 (1H, d, J = 8,5 Hz, H-2’); 6,95 (1H, d, J= 8,5 Hz, H3’); 6,95 (1H, d, J = 8,5 Hz, H-5’); 7,37 (1H, d, J = 8,5 Hz, H-6’); 3,30 (2H, br d, J = 7,0 Hz, H-1”); 5,21 (1H, t, J = 7,5 Hz, H-2”); 1,70 (3H, s, H-4”); 1,71 (3H, s, H-5”); 3,35 (2H, br d, J = 7,0 Hz, H-1”’); 5,25 (1H, t, J = 7,0 Hz, H-2”’); 1,81 (3H, s, H-4”’); 1,74 (3H, s, H-5”’); 3,83 (3H, s, -OCH3); 12,33 (1H, s, 5-OH); 6,36 (1H, s, 7-OH), 13C-NMR (125 MHz, CDCl3), δ (ppm): 78,56 (C-2); 43,29 (C-3); 196,53 (C-4); 102,83 (C-4a); 159,34 (C-5); 107,27 (C-6); 162,28 (C-7); 106,44 (C-8); 157,78 (C-8a); 131,00 (C-1’); 127,49 (C-2’); 114,08 (C-3’); 159,81 (C-4’); 114,08 (C-5’); 127,49 (C-6’); 21,28 (C-1”); 122,04 (C-2”); 133,89 (C-3”); 17,88 (C-4”); 25,83 (C-5”); 21,91 (C-1”’); 121,82 (C-2”’); 134,65 (C-3”’); 17,83 (C4”’); 25,83 (C-5”’); 55,34 (C-OCH3) * Hợp chất Exiguaflavanone K (QM4) Chất rắn màu trắng, độ quay cực : -20,6o (c 0,13; MeOH), đnc 219 - 221oC, ESI-MS: m/z 371,1 [M+H]+, 1H-NMR (500 MHz, CDCl3+CD3OD), δ (ppm): 5,28 (1H, dd, J = 13,0; 3,0 Hz, H-2); 3,01 (2H, dd, J = 17,0; 13,0 Hz, H-3a); 2,76 (2H, dd, 17,0; 3,0 Hz, H-3b); 5,94 (1H, s, H-6); 6,98 (1H, d, J = 2,0 Hz, H-2’); 6,84 (1H, d, J = 8,5 Hz, H-5’); 6,89 (1H, dd, J = 8,0; 2,0 Hz, H-6’); 3,21 (2H, d, J = 7,0 Hz, H-1”); 5,17 (1H, t, J = 7,5 Hz, H-2”); 1,63 (3H, s, H-4”); 1,61 (3H, s, H-5”); 3,87 (3H, s, -OCH3), 13C-NMR (125 MHz, CDCl3+CD3OD), δ (ppm): 78,4 (C-2); 43,8 (C-3); 196,2 (C-4); 102,5 (C-4a); 161,4 (C-5); 95,9 (C-6); 164,4 (C-7); 107,7 (C-8), 159,8 (C-8a); 131,9 (C-1’); 110,6 (C-2’); 146,8 (C-3’); 145,7 (C-4’); 112,6 (C-5’); 117,7 (C-6’); 21,6 (C-1”); 122,2 (C-2”); 132,0 (C-3”); 25,6 (C-4”); 17,6 (C-5”); 55,9 (C-OCH3) * Hợp chất 8-Prenylnarigenin (QM5) Chất rắn màu vàng nhạt, độ quay cực : -33,8o (c 0,08; MeOH), đnc 206 207oC, ESI-MS: m/z 341 [M+H]+, 1H-NMR (500 MHz, CD3OD), δ (ppm): 5,34 (1H, dd, J = 13,0; 3,0 Hz, H-2); 3,12 (2H, m, H-3a); 2,75 (2H, dt, J = 17,0; 2,0 Hz, H-3b); 5,95 (1H, s, H-6); 7,35 (1H, d, J = 8,5 Hz, H-2’); 6,85 (1H, d, J = 8,5 Hz, H-3’); 6,85 (1H, d, J = 8,5 Hz, H-5’); 7,35 (1H, d, J = 8,5 Hz, H-6’); 3,20 (2H, d, J = 7,0 Hz, H-1”); 5,17 (1H, t, J = 7,0 Hz, H-2”); 1,63 (3H, s, H-4”); 1,58 (3H, s, H5”), 13C-NMR (125 MHz, CD3OD), δ (ppm): 80,26 (C-2); 43,97 (C-3); 198,18 (C4); 103,38 (C-4a); 161,59 (C-5); 96,39 (C-6); 166,08 (C-7); 109,05 (C-8); 163,16 (C-8a); 131,41 (C-1’); 128,93 (C-2’); 116,28 (C-3’); 158,90 (C-4’); 116,28 (C-5’); 128,93 (C-6’); 22,48 (C-1”); 123,95 (C-2”); 131,59 (C-3”); 17,88 (C-4”); 25,94 (C-5”) * Hợp chất 6,8-Diprenylnaringenin (QM6) Chất rắn màu trắng, độ quay cực : +8,3o (c 3,0; MeOH), đnc 134 - 135oC, ESI-MS: m/z 409,1 [M+H]+, 1H-NMR (500 MHz, CDCl3), δ (ppm): 5,33 (1H, dd, J = 13,0; 3,0 Hz, H-2); 3,06 (2H, dd, J = 17,0; 12,5 Hz, H-3a); 2,81 (2H, dd, J = 17,0; 3,0 Hz, H-3b); 7,32 (1H, d, J = 8,5 Hz, H-2’); 6,87 (1H, d, J = 8,5 Hz, H-3’); 6,87 (1H, d, J = 8,5 Hz, H-5’); 7,32 (1H, d, J = 8,5 Hz, H-6’); 3,29 (2H, br d, J = 7,0 Hz, H-1”); 5,20 (1H, t, J = 7,5 Hz, H-2”); 1,69 (3H, s, H-4”); 1,70 (3H, s, H5”); 3,34 (2H, br d, J = 7,0 Hz, H-1”’); 5,24 (1H, t, J = 7,0 Hz, H-2”’); 1,81 (3H, s, H-4”’); 1,74 (3H, s, H-5”’); 12,31(1H, s, 5-OH); 6,36 (1H, s, 7-OH), 13C-NMR (125 MHz, CDCl3), δ (ppm): 78,53 (C-2); 43,27 (C-3); 196,60 (C-4); 102,83 (C4a); 159,34 (C-5); 107,29 (C-6); 162,36 (C-7); 106,48 (C-8); 157,78 (C-8a); 131,09 (C-1’); 127,71 (C-2’); 115,54 (C-3’); 155,94 (C-4’); 115,54 (C-5’); 127,71 (C-6’); 21,27 (C-1”); 122,00 (C-2”); 133,93 (C-3”); 17,88 (C-4”); 25,83 (C-5”); 21,91 (C-1”’); 121,77 (C-2”’); 134,72 (C-3”’); 17,82 (C-4”’); 25,83 (C-5”’) * Hợp chất Pentacosanoic acid 2’,3’ dihydroxy-propyl ester (QM7) Chất rắn màu trắng, độ quay cực : -3,11o (c 0,22; MeOH+CHCl3), đnc 7274oC, ESI-MS: m/z 457,1 [M+H]+, 1H-NMR (500 MHz, CDCl3+CD3OD), δ (ppm): 2,34 (2H, t, J = 7,5 Hz, H-2); 1,16 (2H, t, J = 7,5 Hz, H-3); 1,24 (2H, br s, H-4 đến H-24); 0,88 (5H, t, J = 6,5, H-25); 4,13 (2H, m, H-1’); 3,86 (1H, m, H-2’); 3,62 (2H, dd, J = 11,5, 4,0 Hz, H-3’a); 3,55 (2H, dd, J = 11,5; 6,0 Hz, H-3’b), 13CNMR (125 MHz, CDCl3+CD3OD), δ (ppm): 174,46 (C-1); 34,03 (C-2); 31,79 (C3); 29,56 - 29,01 (C-4 đến C-22); 24,75 (C-23); 22,54 (C-24); 13,90 (C-25); 69,83 (C-2’); 65,02 (C-1’); 63,09 (C-3’) * Hợp chất 6,8-Diprenylaromadendrin (QM8) Chất rắn màu vàng, độ quay cực : + 8,3o (c 0,3; MeOH), đnc 151-152oC, ESI-MS: m/z 425,1 [M+H]+, 1H-NMR (500 MHz, CDCl3), δ (ppm): 4,97 (1H, d, J = 12,0 Hz, H-2); 4,51 (1H, d, J = 12,0 Hz, H-3); 7,39 (1H, d, J = 8,5 Hz, H-2’); 6,85 (1H, d, J = 8,5 Hz, H-3’); 6,85 (1H, d, J = 8,5 Hz, H-5’); 7,39 (1H, d, J = 8,5 Hz, H-6’); 3,35 (2H, d, J = 6,5 Hz, H-1”); 5,24 (1H, t, J = 6,5 Hz, H-2”); 1,75 (3H, s, H-4”); 1,81 (3H, s, H-5”); 3,26 (2H, d, J = 7,0 Hz, H-1”’); 5,18 (1H, t, J = 7,0 Hz, H-2”’); 1,70 (3H, s, H-4”’); 1,66 (3H, s, H-5”’); 11,47 (1H, s, 5-OH); 6,47 (1H, s, 7-OH), 13C-NMR (125 MHz, CDCl3), δ (ppm): 82,9 (C-2); 72,5 (C-3); 196,3 (C-4); 158,7 (C-5); 107,8 (C-6); 163,2 (C-7); 107,0 (C-8); 157,8 (C-9); 100,4 (C-10); 128,7 (C-1’); 128,9 (C-2’); 115,5 (C-3’); 156,3 (C-4’); 115,5 (C-5’); 128,9 (C-6’); 21,2 (C-1”); 121,4 (C-2”); 134,9 (C-3”); 25,83 (C-4”); 17,9 (C-5”); 21,7 (C-1”’); 121,5 (C-2”’); 134,4 (C-3”’); 25,81 (C-4”’); 17,8 (C-5”’) * Hợp chất Propolin I (QM9) Chất rắn màu vàng nhạt, độ quay cực : +3,8o (c 0,26; MeOH), đnc 210 211oC, ESI-MS: m/z 493,1 [M+H]+, 1H-NMR (500 MHz, CD3OD_d4), δ (ppm): 5,22 (1H, dd, J = 2,5; 13,0 Hz, H-2); 2,66 (2H, dd, J = 3,0; 17,0 Hz, H-3a); 3,04 (2H, dd, J = 13,0; 17,0 Hz, H-3b); 5,95 (1H, s, H-8); 6,92 (1H, s, H-2’); 6,80 (1H, s, H-4’); 6,80 (1H, s, H-6’); 3,22 (2H, d, J = 7,0 Hz, H-1”); 5,20 (1H, m, H-2”); 1,77 (3H, s, H-4”); 1,98 (2H, m, H-5”); 2,07 (2H, dd, J = 7,5; 14,5 Hz, H-6”); 5,07 (1H, m, H-7”); 1,56 (3H, s, H-9”); 1,90 (2H, m, H-10”); 1,98 (2H, m, H-11”); 5,07 (1H, m, H-12”); 1,66 (3H, s, 14”); 1,58 (3H, s, H-15”), 13C-NMR (125 MHz, CD3OD_d4), δ (ppm): 80,4 (C-2); 44,2 (C-3); 197,7 (C-4); 162,4 (C-5); 109,7 (C6); 165,9 (C-7); 95,4 (C-8); 162,4 (C-9); 103,2 (C-10); 131,9 (C-1’); 114,6 (C-2’); 146,4 (C-3’); 116,26 (C-4’); 146,8 (C-5’); 119,1 (C-6’); 21,8 (C-1”); 124,1 (C-2”); 134,9 (C-3”); 16,1 (C-4”); 40,7 (C-5”); 27,3 (C-6”); 125,3 (C-7”); 135,8 (C-8”); 16,2 (C-9”); 40,8 (C-10”); 27,7 (C-11”); 125,6 (C-12”); 131,9 (C-13”); 25,9 (C14”); 17,7 (C-15”) * Hợp chất Macarecurvatin A (QM10) Chất rắn màu vàng nhạt, đnc 115 - 117oC, ESI-MS: m/z 441,1 [M+H]+, 1HNMR (500 MHz, CDCl3), δ (ppm): 4,88 (1H, d, J = 11,5 Hz, H-2); 4,51 (1H, d, J = 11,5 Hz, H-3); 7,00 (1H, d, J = 2,0 Hz, H-2’); 6,81 (1H, d, J = 8,5 Hz, H-5’); 6,86 (1H, dd, J = 8,5; 2,0 Hz, H-6’); 3,29 (2H, d, J = 7,0 Hz, H-1”); 5,16 (1H, m, H-2”); 1,68 (3H, s, H-4”); 1,78 (3H, s, H-5”); 3,20 (2H, t, J = 5,0 Hz, H-1”’); 5,10 (1H, m, H-2”’); 1,63 (3H, s, H-4”’); 1,53(3H, s, H-5”’), 13C-NMR (125 MHz, CDCl3), δ (ppm): 85,0 (C-2); 73,8 (C-3); 199,0 (C-4); 101,9 (C-4a); 159,1 (C-5); 109,8 (C-6); 163,6 (C-7); 108,9 (C-8); 159,1 (C-8a); 130,2 (C-1’); 160,0 (C-2’); 146,2 (C-3’); 146,9 (C-4’); 120,8 (C-5’); 115,9 (C-6’); 22,1 (C-1”); 123,5 (C-2”); 132,4 (C-3”); 25,9 (C-4”); 17,8 (C-5”); 22,5 (C-1”’); 123,3 (C-2”’); 132,4 (C-3”’); 25,9 (C-4”’); 17,9 (C-5”’) * Hợp chất 4’-deprenyl-4-O-methylmappain (QM11 - hợp chất mới) Chất rắn màu trắng, đnc 207 - 208oC, HR-ESI-MS: m/z 395,2222 [M+H]+, 1HNMR (500 MHz, CDCl3), δ (ppm): 6,80 (1H, d, J = 1,5 Hz, H-1); 6,96 (1H, d, J = 1,5 Hz, H-5); 6,91 (1H, d, J = 16,0 Hz, H-α); 6,78 (1H, d, J = 16,0 Hz, H-β); 6,53 (1H, d, J = 2,0 Hz, H-2’); 6,25 (1H, br s, H-4’); 6,53 (1H, d, J = 2,0 Hz, H-6’); 3,37 (2H, d, J = 6,5 Hz, H-1”); 5,31 (1H, t, J = 7,0 Hz, H-2”); 2,07 (2H, t, J = 7,5 Hz, H-4”); 2,12 (2H, t, J = 8,0 Hz, H-5”); 5,11 (1H, t, J = 6,0 Hz, H-6”); 1,66 (3H, s, H-8”); 1,59 (3H, s, H-9”); 1,74 (3H, s, H-10”); 3,80 (3H, s, -OCH3), 13C-NMR (125 MHz, CDCl3), δ (ppm): 120,5 (C-1); 134,8 (C-2); 145,0 (C-3); 148,9 (C-4); 110,7 (C-5); 140,0 (C-6); 129,1 (C-α); 127,5 (C-β); 133,8 (C-1’); 106,1 (C-2’) 156,9 (C-3’); 102,1 (C-4’); 156,9 (C-5’); 106,1 (C-6’); 28,0 (C-1”); 122,3 (C-2”); 136,6 (C-3”); 39,6 (C-4”); 26,6 (C-5”); 124,1 (C-6”), 131,7 (C-7”); 25,7 (C-8”); 17,7 (C-9”); 16,2 (C-10”); 61,3 (C-OCH3) * Hợp chất 5,7,4'-trihydroxy-8-(2,3-dihydroxy-3-methylbutyl)flavanone (QM12) Chất rắn màu vàng nhạt, độ quay cực : -15,2o (c 0,04; CHCl3), đnc 172 173oC, ESI-MS: m/z 375,1 [M+H]+, 1H-NMR (500 MHz, CDCl3), δ (ppm): 5,37 (1H, dd, J = 13,0;3,0 Hz, H-2); 3,10 (2H, dd, J = 17,0; 13,0 Hz, H-3a); 2,80 (2H, dd, J = 17,0; 3,0 Hz, H-3b); 6,03 (1H, s, H-6); 7,33 (1H, d, J = 8,0 Hz, H-2’); 6,89 (1H, d, J = 8,0 Hz, H-3’); 6,89 (1H, d, J = 8,0 Hz, H-5’); 7,33 (1H, d, J = 8,0 Hz, H-6’); 3,04 - 2,98 (2H, m, H-1”); 4,71 (1H, t, J = 1,0 Hz, H-2”); 1,33 (3H, s, H4”); 1,20 (3H, s, H-5”); 12,29 (1H, s, 5-OH), 13C-NMR (125 MHz, CDCl3), δ (ppm): 78,7 (C-2); 43,2 (C-3); 195,4 (C-4); 103,0 (C-4a); 165,0 (C-5); 91,6 (C-6); 168,6 (C-7); 104,7 (C-8); 157,2 (C-8a); 130,5 (C-1’); 127,9 (C-2’); 115,6 (C-3’); 156,2 (C-4’); 115,6 (C-5’); 127,9 (C-6’); 26,8 (C-1”); 91,5 (C-2”); 71,8 (C-3”); 23,9 (C-4”); 26,0 (C-5”) * Hợp chất Isoscopoletin (QM13) Chất rắn màu trắng, đnc 184 - 186oC, ESI-MS: m/z 193,1 [M+H]+, 1H-NMR (500 MHz, CDCl3), δ (ppm): 6,26 (1H, d, J = 9,5Hz, H-3); 7,59 (1H, d, 9,5 Hz, H4); 6,84 (1H, s, H-5); 6,92 (1H, s, H-8); 6,15 (1H, br s, 6-OH); 3,95 (3H, s, OCH3) * Hợp chất 4’-deprenyl mappain (QM14) Chất rắn màu trắng, đnc 178 - 179oC, ESI-MS m/z 381,1 [M+H]+, 1H-NMR (500 MHz, CDCl3), δ (ppm): 6,80 (1H, s, H-1); 6,96 (1H, s, H-5); 6,94 (1H, d, J = 16,0 Hz, H-α); 6,78 (1H, d, J = 14,0 Hz, H-β); 6,53 (1H, br s, H-2’); 6,24 (1H, br s, H-4’); 6,53 (1H, br s, H-6’); 3,39 (2H, d, J = 6,5 Hz, H-1”); 5,34 (1H, t, J = 6,5 Hz, H-2”); 2,09 (2H, m, H-4”); 2,12 (2H, m, H-5”); 5,08 (1H, m, H-6”); 1,78 (3H, s, H-8”); 1,60 (3H, s, H-9”); 1,68 (3H, s, H-10”) * Hợp chất 3,3',4'-Tri-O-methyl ellagic acid (QM15) Chất rắn màu trắng, đnc 280 - 282oC, ESI-MS: m/z 345,1 [M+H]+, 1H-NMR (500 MHz, DMSO-d6), δ (ppm): 7,49 (1H, s, H-5); 7,57 (1H, s, H-5’); 4,05 (3H, s, 3-OMe); 4,03 (3H, s, 3’-OMe); 3,98 (3H, s, 4’-OMe), 13C-NMR (125 MHz, CDCl3), δ (ppm): 158,5 (C-7’); 158,4 (C-7); 153,8 (C-4’); 152,9 (C-4); 141,9 (C2’); 141,0 (C-2); 140,8 (C-3’); 140,3 (C-3); 113,4 (C-6’); 112,5 (C-6); 111,8 (C5); 61,3 (-OCH3); 61,0 (-OCH3); 56,7 (-OCH3) * Hợp chất Protocatechuic acid (QM16) Chất rắn màu nâu, đnc 348 - 350oC, ESI-MS: m/z 153,1 [M-H]-, 1H-NMR (500 MHz, CD3OD), δ (ppm): 7,45 (1H, s, H -2); 6,82 (1H, d, J = 8,0 Hz, H-5); 7,42 (1H, d, J = 9,5 Hz, H-6) * Hợp chất Gallic acid (QM17) Chất rắn màu nâu, đnc 238 - 240oC, ESI-MS: m/z 171,1 [M+H]+, 1H-NMR (500 MHz, CD3OD), δ (ppm): 7,08 (s, H-2, 6) * Hợp chất Ellagic acid (QM18) 45,8 (C-24); 42,5 (C-13); 39,6 (C-12); 38,5 (C-7); 38,0 (C-10); 37,1 (C-1); 36,1 (C-20); 34,2 (C-2); 33,9 (C-22); 29,7 (C-8); 29,1 (C-25); 28,1 (C-16); 26,1 (C-23); 24,1 (C-15); 23,1 (C-28); 20,8 (C-11); 19,8 (C-26); 19,5 (C-19); 19,0; 18,7 (C-21); 12,0 (C-18); 11,9 (C-29) * Hợp chất β-sistosterol (TM4): Hợp chất TM4 thu chất rắn kết tinh màu trắng Chấm TLC so sánh với chất chuẩn β-sistosterol cho thấy trùng khít Hợp chất TM4 xác định β-sistosterol * Hợp chất Stigmast-4-en-3-one (TM5) Chất rắn màu trắng, đnc 94 - 96 oC, ESI-MS: m/z 413,1 [M+H]+, 1H-NMR (500 MHz, CDCl3), δ (ppm), J (Hz): 5,71 (1H, s, H-40; 2,45-2,27 (5H, m); 2,01 (3H, m); 1,17 (3H, s, H-19); 0,91 (3H, d, J = 6,5 Hz, H-21); 0,84 (3H, t, J = 7,5 Hz, H-29); 0,83 (3H, d, J = 7,0 Hz, H-27); 0,81 (3H, d, J = 7,0 Hz, H-26); 0,70 (3H, s, H-18), 13C-NMR (125 MHz, CDCl3), δ (ppm): 199,6 (C-3); 171,6 (C-5); 123,7 (C-4); 56,0 (C-14); 55,9 (C-17); 53,8 (C-9); 45,8 (C-24); 42,4 (C-13); 39,6 (C-12); 38,6 (C-10); 36,1 (C-20); 35,7 (C-1); 35,6 (C-8); 33,9 (C-2); 33,9 (C-22); 32,9 (C-6); 32,0 (C-7); 29,1 (C-25); 28,1 (C-16); 26,1 (C-23); 24,1 (C-15); 23,0 (C-28); 21,0 (C-11); 19,8 (C-26); 19,0 (C27); 18,7 (C-21); 17,3 (C-19); 11,9 (C-29); 11,9 (C-18) * Hợp chất 3,3’,4’-Tri-O-methylellagic acid (TM6) liệu phổ trùng với hợp chất (QM15) * Hợp chất Stigmastane-3,6-dione (TM7) Chất rắn màu trắng, đnc 203 - 205oC, ESI-MS: m/z 429,1 [M+H]+, 1H-NMR (500 MHz, CDCl3), δ (ppm), J (Hz): 2,61 (2H, s); 2,36 (4H, m); 2,06 (3H, m); 1,86 (2H, m); 1,65 (3H, m); 1,57 - 1,41 (2H, m); 0,96 (3H, s, H-19); 0,92 (3H, d, J = 6,5 Hz, H-21); 0,86 (3H, t, J = 7,5 Hz, H-29); 0,83 (3H, d, J = 7,0 Hz, H-27); 0,82 (3H, d, J = 7,0 Hz, H-26); 0,70 (3H, s, H-18), 13C-NMR (125 MHz, CDCl3), δ (ppm): 212,1 (C-3); 209,6 (C-6); 57,4 (C-5); 56,5 (C-14); 55,9 (C-17); 53,4 (C9); 46,5 (C-7); 45,7 (C-24); 42,9 (C-13); 41,2 (C-10); 39,3 (C-12); 38,0 (C-1); 38,0 (C-8); 37,2 (C-2); 36,8 (C-4); 35,9 (C-20); 33,7 (C-22); 29,1 (C-25); 27,9 (C16); 26,0 (C-23); 23,9 (C-15); 23,0 (C-28); 21,6 (C-11); 19,6 (C-26); 18,9 (C-27); 18,6 (C-21); 12,4 (C-19); 11,9 (C-18); 11,8 (C-29) * Hợp chất Stigmast-4-ene-3,6-dione (TM8) Chất rắn màu vàng nhạt, đnc 172 - 175oC, ESI-MS: m/z 427,1 [M+H]+, 1HNMR (500 MHz, CDCl3), δ (ppm), J (Hz): 6,16 (1H, s, H-4); 2,68 (1H, dd, J = 16,0; 4,0 Hz); 2,53 (1H, td, J = 17,5; 5,5 Hz); 2,46 (1H, m); 2,17 - 2,09 (3H, m); 1,90 (3H, m); 1,65 (5H, m); 1,16 (3H, s, H-19); 0,93 (3H, d, J = 6,5 Hz, H-21); 0,86 (3H, t, J = 7,0 Hz, H-29); 0,83 (3H, d, J = 7,0 Hz, H-27); 0,81 (3H, d, J = 7,0 Hz, H-26); 0,72 (3H, s, H-18) 13C-NMR (125 MHz, CDCl3), δ (ppm): 202,3 (C6); 199,4 (C-3); 161,1 (C-5); 125,4 (C-4); 56,5 (C-14); 55,8 (C-17); 51,0 (C-9); 46,8 (C-7); 45,8 (C-24); 42,5 (C-13); 39,8 (C-10); 39,1 (C-12); 36,0 (C-20); 35,5 (C-1); 34,2 (C-8); 33,9 (C-2); 33,9 (C-22); 29,1 (C-25); 28,0 (C-16); 26,1 (C-23); 23,9 (C-15); 23,0 (C-28); 20,9 (C-11); 19,8 (C-26); 19,0 (C-27); 18,7 (C-21); 17,5 (C-19); 11,9 (C-18); 11,9 (C-29) 11 * Hợp chất trans-Coniferyl aldehyde (TM9) Chất rắn màu trắng, đnc 127 - 129oC, ESI-MS: m/z 193,1 [M+H]+, 1H-NMR (500 MHz, CDCl3), δ (ppm), J (Hz): 9,58 (1H, d, J = 8,0 Hz, -CHO); 7,55 (1H, d, J = 16,0 Hz, H-7); 7,17 (1H, dd, J = 8,0; 2,0 Hz, H-6); 7,14 (1H, d, J = 2,0 Hz, H2); 6,89 (1H, d, J = 8,0 Hz, H-5); 6,61 (1H, dd, J = 16,0; 8,0 Hz, H-8); 3,93 (3H, s, -OCH3), 13C-NMR (125 MHz, CDCl3), δ (ppm): 195,7 (CHO); 155,1 (C-7); 148,9 (C-3); 126,8 (C-1); 126,0 (C-8); 124,8 (C-6); 116,3 (C-5); 111,6 (C-2); 56,2 (OCH3) * Hợp chất Valinic acid (TM10) Chất rắn màu nâu, đnc 210 - 212oC, ESI-MS: m/z 169,1 [M+H]+, 1H-NMR (500 MHz, CDCl3), δ (ppm), J (Hz): 7,57 (2H, d, J = 1,0 Hz, H-2 H-6); 6,81 (1H, d, J = 7,0 Hz, H-5); 3,91 (s, 3H) * Hợp chất Protocatechuic acid (TM11): liệu phổ trùng với hợp chất (QM16) * Hợp chất 2,3-Dihydroxy-1-(4’-hydroxy-3’-methoxyphenyl)propan-1one (TM12) Chất rắn màu nâu nhạt, đnc 157 - 158 oC, ESI-MS: m/z 213,1 [M+H]+, 1HNMR (500 MHz, CDCl3), δ (ppm), J (Hz): 7,60 (1H, dd, J = 8,5; 1,5 Hz, H-6’); 7,59 (1H, s, H-2’); 6,90 (1H, d, J = 8,0 Hz, H-5’); 5,13 (1H, t, J = 4,0 Hz, H-2); 3,93 (3H, s, -OCH3); 3,90 (1H, dd, J = 11,5; 3,5 Hz, H-3a); 3,76 (1H, dd, J = 12,0; 2,5 Hz, H-3b), 13C-NMR (125 MHz, CDCl3), δ (ppm): 199,6 (C-1); 153,7 (C-4’); 149,2 (C-3’); 128,0 (C-1’); 125,0 (C-6’); 115,9 (C-2’); 112,5 (C-5’); 75,4 (C-2); 66,2 (C-3); 56,4 (-OCH3) * Hợp chất Stigmastane 3,5,6-triol (TM13) Chất rắn màu trắng, đnc 244 - 245oC, ESI-MS: m/z 449,1 [M+H]+, 1H-NMR (500 MHz, CDCl3+CD3OD): 3,98 (1H, m, H-3); 3,54 (1H, s, H-6); 2,02 (2H, m); 1,82 (33H, m, bao gồm 1,13 (3H, s, H-19); 0,89 (3H, d, J = 6,5 Hz, H-21); 0,85 (3H, t, J = 7,5Hz, H-29), 0.82 (3H, d, J = 6,5 Hz, H-26); 0,80 (3H, d, J = 7,0 Hz, H-27); 0,66 (3H, s, H-18), 13C-NMR (125 MHz, CDCl3+CD3OD): 76,6 (C-6); 76,3 (C-5); 68,1 (C-3); 57,2 (C-14); 57,1 (C-17); 46,9 (C-9); 46,3 (C-24); 43,6 (C-13); 41,1 (C-4); 41,1 (C-12); 39,0 (C-10); 37,1 (C-20); 35,0 (C-22); 34,8 (C-2); 33,2 (C-7); 31,3 (C-1); 31,3 (C-8); 30,1 (C-25); 29,1 (C-16); 26,9 (C-23); 25,0 (C-15); 23,9 (C-28); 22,0 (C-11); 20,1 (C-27); 19,4 (C-26); 19,2 (C-21); 17,2 (C-19); 12,5 (C-29); 12,3 (C-28) * Hợp chất (-) Dehydroxycubebin (TM14) Chất rắn màu vàng nhạt, Độ quay cực : -54,9o (c 7,9; CHCl3), đnc 52 55oC, ESI-MS: m/z 341,1 [M+H]+, 1H-NMR (CDCl3, 500 MHz) : 6,69 (1H, d, J = 7,5 Hz, H-5 H-5’); 6,54 (1H, s, H-2 H-2’); 6,53 (1H, d, J = 8,0 Hz, H-6 H-6’); 5,91 (2H, s, OCH2O); 3,89 (1H, dd, J = 8,5; 7,0 Hz); 3,49 (1H, dd, J = 8,5; 6,0 Hz); 2,57 (1H, dd, J = 16,5; 6,5 Hz); 2,49 (1H, dd, J = 14,0; 8,0 Hz); 2,15 (1H, m), 13C-NMR (125 MHz, CDCl3): 147,6; 145,8; 134,1; 121,5; 109,0; 108,1; 100,8; 73,3; 46,5; 39.2 12 * Hợp chất (-) Dehydroxycubebinone (TM15 - Hợp chất mới) Chất rắn màu trắng, độ quay cực : -7,7o (c 0,06; CHCl3), đnc 65 - 66oC, HR-ESI-MS: m/z 355,1176 [M+H]+, 1H-NMR (CDCl3, 500 MHz): 7,32 (1H, d, J = 7,0 Hz); 7,14 (1H, s); 6,79 (1H, d, J = 7,5 Hz); 6,65 (1H, d, J = 7,5 Hz); 6,62 – 6,60 (2H, br s); 6,03 (2H, s, OCH2O); 5,87 (2H, s, OCH2O); 4,17 (1H, t, J = 8,0 Hz); 3,92 - 3,88 (2H, m); 3,80 (1H, m); 3,64 - 3,62 (1H, m); 2,83 (1H, m); 2,77 2,73 (1H, m); 2,66 - 2,61 (1H, m), 13C-NMR (125 MHz, CDCl3): 199,7; 153,2; 149,3; 148,9; 147,2; 134,4; 132,1; 125,8; 122,7; 110,0; 108,9; 108,6; 108,5; 103,1; 101,8; 73,9; 71,5; 51,9; 47,2; 39,4 * Hợp chất 6,7,8-Trimethoxycoumarin (TM16) Chất rắn màu trắng, đnc 182 - 185oC, ESI-MS: m/z 237,1 [M+H]+, 1H-NMR (500 MHz, CDCl3), δ (ppm), J (Hz): 7,60 (1H, d, J = 9,5 Hz, H-3); 6,67 (1H, s, H5); 6,34 (1H, d, J = 9,5 Hz, H-2); 4,03 (3H, s, -OCH3); 3,99 (3H, s, -OCH3); 3,89 (3H, s, -OCH3) * Hợp chất 3,4’-Dimethylellagic acid (TM17) Chất rắn màu trắng, ESI-MS: m/z 331,1 [M+H]+, 1H-NMR (500 MHz, DMSOd6), δ (ppm), J (Hz): 7,49 (2H, s, H-5 H-5’); 4,04 (3H, s, -OCH3); 3,96 (3H, s, OCH3), 13C-NMR (125 MHz, DMSO-d6), δ (ppm): 158,7 (C-7’); 158,7 (C-7); 152,0 (C-4’); 150,0 (C-4); 141,6 (C-2’); 141,2 (C-2); 140,0 (C-3’); 135,6 (C-3); 113,6 (C-6’); 112,8 (C-6); 111,4 (C-5); 106,7 (C-5’); 60,9 (-OCH3); 56,5 (-OCH3) 3.3 Phân lập chất từ Macaranga balansae 3.3.1 Xử lý mẫu thực vật phân lập chất Phần trình bày cụ thể bước ngâm chiết mẫu thực vật phân lập chất từ Macaranga balansae (Hình 3.7 Hình 3.8) Lá M.balansae 3,8 kg Ngâm 14L EtOAc lần Cặn EtOAc 51 g Bã M.balansae Ngâm 15L MeOH lần Bã Cặn MeOH 255 g Hoà 1L aceton Phần rắn 80 g Phần tan (LM-M) 175 g Hình 3.7 Sơ đồ ngâm chiết Macaranga balansae 13 A: acetone D: dichlomethane M: methanol E: ethyl acetate H: n-hexane LM-M (175 g) CC silica gel E/M (100:0 LM-M2 29 g LM-M1 3g CC silica gel H/E (8/2) CC silica gel H/E (9/1) LM-M1.2 100 mg LM-M2.2 500 mg CC silica gel D/M (1/9) CC silica gel D/M (1/9) LM1 2,5 mg LM-M3 4g LM2 4,4 mg LM3 4,2 mg CC silica gel H/E (9/1) LM-M2.3 250 mg KT LM4 3,0 mg LM5 mg LM-M2.5 300 mg CC Sephadex LH-20 D/M (1/9) LM6 12,5 mg LM-M2.9 29 mg CC Sephadex LH-20 D/M (1/9) LM7 1,5 mg LM8 1,8 mg LM-M3.3 200 mg CC silica gel H/D(8/2) LM9 2,5 mg 0:100, v/v) LM-M4 2g LM-M14 8g CC silica gel H/E (9/1) LM-M4.5 30 mg PTLC H/A (95/5) LM10 8,7 mg LM11 mg Hình 3.6 Sơ đồ phân lập từ cặn chiết methanol Macaranga balansae 3.3.2 Hằng số vật lý số liệu phổ hợp chất phân lập từ Macaranga balansae * Hợp chất (-)-dehydroxycubebin (LM1): liệu phổ trùng với hợp chất TM15 * Hợp chất β-sistosterol (LM2): liệu phổ trùng với hợp chất TM4 * Hợp chất 7-carboxyl-6’-methoxycarbonyl-dehydroxycubebin (MML03-Hợp chất mới) Chất rắn màu trắng, độ quay cực : -20o (c 0,005; CHCl3), đnc 78 - 79oC, HR-ESI-MS: m/z [M+H]+ 356,1492, 1H-NMR (CDCl3, 500 MHz) δH ppm: 6,73 (1H, d, J = 8,0 Hz, H-5); 6,62 (1H, d, J = 9,0 Hz, H-6); 6,59 (1H, s, H-5’); 6,54 (1H, s, H-2); 6,28 (1H, s, H-2’); 5,93 (2H, s, OCH2O); 5,86 (2H, s, OCH2O); 4,17 (1H, t, J = 7,0 Hz, H-9’); 3,81 (1H, t, J = 7,0 Hz, H-9); 3,76 (3H, s, OCH3); 3,69 (1H, d, H-7); 2,98 (1H, m, H-7’); 2,25 (2H, m, H-8’), 13C-NMR (125 MHz, CDCl3), δC ppm: 168,7 (C=O); 148,0 (C-3); 146,4 (C-4); 146,1 (C-3’); 146,1 (C4’); 138,6 (C-1); 133,1 (C-1’); 129,5 (C-6’); 121,6 (C-6); 109,3 (C-2’); 108,6 (C5’); 108,3 (C-2); 108,1 (C-5); 100,9 (C-10); 100,8 (C-10’); 73,1 (C-9’); 72,2 (C9); 52,9 (OCH3); 50,9 (C-8); 50,0 (C-7); 42,2 (C-8’); 32,8 (C-7’) * Hợp chất (-)-dehydroxycubebinone (LM4): liệu phổ trùng với hợp chất TM16 * Hợp chất acid protocatechuic (LM5): liệu phổ trùng với hợp chất QM16 * Hợp chất Gallic acid (LM6): liệu phổ trùng với hợp chất QM18) * Hợp chất Methyl Gallate (LM7) Chất dầu màu vàng, đnc 201 - 203oC, ESI-MS: m/z [M+H]+ 185,1; 1H-NMR (500 MHz, MeOD), δ (ppm): 7,06 (2H, s, H-2, H-5); 3,83 (3H, s, OMe) * Hợp chất Vanilic acid (LM8): Xem liệu phổ hợp chất TM10 * Hợp chất Isophytol (LM9): Chất dầu không màu, 1H-NMR (500 MHz, CDCl3), δH (ppm), J (Hz): 5,91 (1H, dd, J = 17,5;11,0 Hz, H-2); 5,20 (1H, dd, J = 17,5;1,0 Hz, H-1a); 5,04 (1H, 14 dd, J = 11,0;1,0 Hz, H-1b); 1,27 (3H, s, H-20); 0,87 (3H, d, J = 6,5 Hz, H-16); 0,87 (3H, d, J = 6,5 Hz, H-17); 0,84 (3H, d, J = 6,5 Hz, H-19); 0,83 (3H, d, J = 6,5 Hz, H-18), 13C-NMR (125 MHz, CDCl3), δC (ppm): 145,3 (C-2); 111,4 (C-1); 73,3 (C-3); 42,7 (C-4); 39,4 (C-14); 37,4 (C-12); 37,4 (C-10); 37,4 (C-8); 37,3 (C-6); 32,8 (C-7); 32,7 (C-11); 27,9 (C-15); 27,7 (C-20); 24,8 (C-13); 24,4 (C-9); 22,7 (C-16); 22,6 (C-17); 21,3 (C-5); 19,7 (C-18); 19,7 (C-19) * Hợp chất Lupeol (LM10): Chất rắn màu trắng, đnc 215 - 216oC, ESI-MS: m/z [M+H]+ 427,1; 1H-NMR (500 MHz, CDCl3): δH 4,68 (1H, d, J = 2,0 Hz, Hβ-29); 4,56 (1H, d, J = 2,0 Hz, Hα-29); 3,18 (1H, dd, J = 11,0; 5,0 Hz; H-3); 2,36 (1H, dt, J = 13,0; 6,0 Hz, H19); 1,68 (3H, s, Me-30); 1,03(3H, s, Me-26); 0,97 (3H, s, Me-23); 0,95 (3H, s, Me-27); 0,83 (3H, s, Me-25); 0,79 (3H, s, Me-28); 0,76 (3H, s, Me-24); 0,67 (1H, d, J = 9,2 Hz; H-5) 13C-NMR (125 MHz, CDCl3): δC 38,7 (C-1); 27,4 (C-2); 79,0 (C-3); 38,8 (C-4); 55,3 (C-5); 18,3 (C-6); 34,2 (C-7); 40,8 (C-8); 50,4 (C-9); 37,1 (C-10); 20,9 (C-11); 25,1 (C-12); 38,0 (C-13); 42,8 (C-14); 27,4 (C-15); 35,6 (C16); 43,0 (C-17); 48,0 (C-18); 48,3 (C-19); 150,9 (C-20); 29,8 (C-21); 40,0 (C22); 28,0 (C-23); 15,3 (C-24); 15,9 (C-25); 16,1 (C-26); 14,5 (C-27); 18,0 (C-28); 109,5 (C-29); 19,3 (C-30) * Hợp chất Sitostenone (LM11): liệu phổ trùng với hợp chất TM5 3.4 Hoạt tính sinh học hợp chất phân lập Hoạt tính gây độc tế bào chất QM3, QM1, TM15, LM3, QM2, QM4, QM5, QM6, QM8, QM9, QM10, TM15, TM1, TM16 đánh giá hoạt tính gây độc tế bào dòng tế bào ung thư người (ung thư phổi - A549, ung thư cổ tử cung - Hela, ung thư tuyến tụy - Pan C1, ung thư vú - MCF-7, ung thư gan - Hep3B, ung thư biểu mô - KB, ung thư gan - HepG2, ung thư phổi – Lu1 thực nghiệm Viện Hóa học Viện Hóa sinh biển thuộc Viện Hàn lâm khoa học Công nghệ Việt Nam CHƯƠNG KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 4.1 Nghiên cứu thành phần hóa học từ Macaranga balansae Từ dịch chiết EtOAc MeOH Macaranga balansae phân lập xác định cấu trúc hóa học 18 hợp chất có: 10 hợp chất nhóm flavonoid là: 4’-O-methyl-8-prenyltaxifolin (QM1); 5,7-dihydroxy-4’-methoxy-8prenylflavanone (QM2); 6,8-diprenyl-4’-O-methoxy-flavanone (QM3); exiguaflavanone K (QM4); 8-prenylnarigenin (QM5); 6,8-diprenylnarigenin (QM6); 6,8-piprenylaromadendrin (QM8); propolin I (QM9); macarecurvatin A (QM10); 5,7,4’-Trihydroxy-8-(2,3-dihydroxy-3-methylbutyl)flavanone (QM12) 01 hợp chất nhóm coumarin isoscopoletin (QM13) 02 hợp chất nhóm stilben 4’-deprenyl-4O-methylmappain (QM11); 4’-deprenyl mappain (QM14) 05 hợp chất khác: acid 3,3’,4’-tri-O-methyl ellagic (QM15); acid protocatechuic (QM16); acid gallic (QM17); acid ellagic (QM18); 2,3-dihydroxy propyl pentacosanoate (QM7) Trong số 18 hợp chất phân lập có 03 hợp chất 4’-O-methyl-8prenyltaxifolin (QM1); 6,8-diprenyl-4’-O-methoxy-flavanone (QM3) 4’-deprenyl4-O-methylmappain (QM11) 15 Hình Các hợp chất từ Macaranga balansae 4.1.1 Hợp chất 4’-O-methyl-8-prenyltaxifolin (QM1) (hợp chất mới) Hình 4.2 Cấu trúc hóa học hợp chất QM1 8-prenyltaxifolin Hợp chất QM1 phân lập từ cặn chiết ethyl acetate dạng chất rắn màu trắng, đnc: 115-116oC Phổ khối HR-ESI-MS cho pic ion giả phân tử [M-H]ở m/z 385,1267 (tính tốn lý thuyết cho cơng thức C21H21O7 m/z: 385,1287), kết hợp với liệu phổ NMR cho phép xác định công thức phân tử hợp chất QM1 C21H22O7 Trên phổ IR cho thấy đỉnh hấp thụ nhóm hydroxyl carbonyl 3443 1634 cm-1 Phổ 1H-NMR xuất tín hiệu đặc trưng hợp chất khung flavanonol với tín hiệu hệ ABX vòng B δH 7,09 (1H, d, J = 2,0 Hz; H2’); 6,92 (1H, d, J = 8,0 Hz; H-5’); 7,02 (1H, dd, J = 8,5; 2,0 Hz; H-6’), nhóm oxymethine vòng C δH 4,96 (1H, d, J = 12,0 Hz; H-2); 4,48 (1H, d, J = 12,0 Hz; H-3) nhóm prenyl hợp chất thể qua nhóm methyl δH 1,64 (3H, s, H-4”); 1,57 (3H, s, H-5”), proton-allylic δH 3,19 (2H, d, J = 7,0 Hz; CH2-1”), proton vinylic δH 5,18 (1H, t, J = 7,5 Hz; H-2”) Ngồi ra, phổ 1H-NMR có tín hiệu proton vòng thơm dạng singlet δH 6,02 (1H, s, H-6), nhóm methoxy δH 3,91 (3H, s, -OCH3) Phổ 13C-NMR DEPT QM1 cho thấy có mặt 21 nguyên tử carbon, tương ứng với nhóm methyl δC 25,7 (C-4”); 17,6 (C-5”), nhóm methoxy δC 56,0; nhóm methylene δC 21,5 (C-1”), nhóm methine δC 96,2 (C-6); 110,9 (C-5’); 114,1 (C-2’); 119,6 (C-6’); 122,2 (C-2”), nhóm oxymethine δC 72,5 (C-3); 83,1 (C-2), nhóm carbonyl δC 196,4 (C-4) nguyên tử carbon không liên kết trực tiếp với hydro δC 100,5 (C-4a); 108,7 (C-8); 129,9 16 (C-1’); 131,8 (C-3”); 145,9 (C-3’); 147,7 (C-4’); 159,9 (C-8a); 161,2 (C-5); 165,5 (C-7) Giá trị độ chuyển dịch hóa học carbon δC 72,5 (C-3); 83,1 (C-2); 131,8 (C-3”); 145,9 (C-3’); 147,7 (C-4’); 159,9 (C-8a); 161,2 (C-5); 165,5 (C-7) cho phép xác định chúng gắn với nguyên tử oxy Từ liệu phổ cho thấy cấu trúc hợp chất QM1 gần tương tự với hợp chất 8-prenyltaxifolin [39], ngoại trừ có thêm nhóm methoxy Các mảnh cấu trúc sau kết nối nhờ phân tích phổ HMBC Tương tác HMBC H-2’(δH 7,09) với C-4’(δC 147,7)/C-6’(δC 119,6)/C-2 (δC 83,1), H-6’ (δH 7,02) với C-2 (δC 83,1)/C-2’(δC 114,1)/C-4’(δC 159,8), H-5’(δH 6,921) với C-3’ (δC 145,9)/C-4’(δC 147,7)/C-1’(δC 129,98) xác nhận cấu trúc vòng B Tương tác xa phổ HMBC proton H-2” (δH 5,18) với C-8 (δC 108,7)/C-4” (δC 25,7)/C-5” (δC 17,6) tương tác proton thuộc nhóm methylene CH2-1” (δH 3,19) với C-7 (δC 165,5)/C-8 (δC 108,7)/C-8a (δC 159,9), tương tác proton H-6 (δH 96,2) với C-4a (δC 100,5)/C-8 (δC 108,7)/C-7(δC 165,5)/C-5 (δC 161,2) xác nhận cấu trúc vòng A bị vị trí cho phép xác định nhóm isoprenyl gắn vị trí C-8 vòng A Cấu trúc vòng C thiết lập qua tương tác HMBC H-3 (δH 4,48) với C-2 (δC 83,1)/C-4 (δC 196,4)/C-1’ (δC 129,9) tương tác H-2 (δH 4,96) với C-3 (δC 72,5)/C-4 (δC 196,4)/C-6’ (δC 119,6)/C-1’ (δC 129,9)/C-2’ (δC 114,1) Tương tác xa 3J phổ HMBC proton nhóm methoxy với C-4’ (δC 147,7) cho phép xác định vị trí nhóm methoxy gắn với C-4’ (Hình 4.5) Hình 4.2 Phổ DEPT hợp chất QM1 17 Hình 4.3 Phổ 1H-NMR hợp chất QM1 Hình 4.3 Phổ HSQC hợp chất QM1 18 Hình 4.4 Một số tương tác phổ HMBC hợp chất QM1 Hình 4.5 Phổ HMBC hợp chất QM1 Hình 4.6 Phổ CD hợp chất QM1 19 Bảng 4.1 Số liệu phổ NMR hợp chất QM1 hợp chất tham khảo QM1a 8-prenyltaxifolinb,# C Hd độ bội (J, H độ bội Cc  C Hz) (J, Hz) 4,90 d 83,1 4,96 d (12,0) 82,9 (10,8) 4,40 d 72,5 4,48 d (12,0) 71,2 (10,8) 196,4 196,7 4a 100,5 100,0 161,2 161,0 96,2 6,02 s 95,6 5,94 s 165,5 159,2 108,7 107,0 8a 159,9 158,0 1’ 129,9 130,1 6,87 d 2’ 114,1 7,09 d (2,0) 115,2 (1,2) 3’ 145,9 144,8 4’ 147,7 145,5 6.74 d 5’ 110,9 6,92 d (8,5) 115,0 (8,4) 6,70 dd 6’ 119,6 7,02 dd (2,0; 8,5) 119,1 (1,2; 8,4) 3,01 d 1” 21,5 3,19 d (7,0) 21,2 (7,2) 2” 122,2 5,18 t (7,0) 122,6 5,07 m 3” 131,8 128,4 4” 25,7 1,64 s 25,6 1,56 s 5´´ 17,6 1,57 s 17,5 1,54 s 4’56,0 3,91 s OMe a đo CDCl3 CD3OD, bđo DMSO-d6, c125MHz, d500 MHz, # H C 8-prenyltaxifolin [39] 4.2 Nghiên cứu thành phần hóa học từ thân Macaranga balansae Từ thân M balansae phân lập xác định cấu trúc 17 hợp chất đó: hợp chất steroid 6-hydroxystigmast-4-ne-3-one (TM3); β-sistosterol (TM4); stigmast-4-en-3-one (TM5); stigmastane-3,6-dione (TM7); stigmast-4-ene-3,6-dione (TM8); stigmastane 3,5,6-triol (TM13) hợp chất phenolic vanillin (TM2); coniferyl aldehyde (TM9); acid vanillic (TM10); acid protocatechuic (TM11) (-)2,3-dihydroxy-1-(4’-hydroxy-3’methoxyphenyl)propan-1-one (TM12) hợp chất lignan (-)dehydroxycubebinone (TM15); dehydroxycubebin (TM14) dẫn xuất acid ellagic acid ellagic 3,3’,4’-trimethylellagic (TM6) acid 3,4’-dimethylellagic (TM17) coumarin 6,7,8-trimethoxycoumarin (TM16) hợp chất 20 triterpenoid acetyl aleuritolic (TM1) Trong số 17 hợp chất phân lập có hợp chất lignan (-)-dehydroxycubebinone (TM15) Hình 4.8 Cấu trúc hợp chất phân lập từ thân Macaranga balansae 4.3 Nghiên cứu thành phần hóa học thân Macaranga balansae Từ Macaranga balansae phân lập 11 hợp chất có hợp chất (-)-dehydroxycubebinone (LM4) (trùng với hợp chất TM15 phân lập từ dịch chiết MeOH thân M.balansae) hợp hợp chất 7-carboxyl-6’methoxycarbonyl-dehydroxycubebin (LM3); hợp chất biết dehydroxycubebin (LM1); β-sistosterol (LM2); stigmast-4-en-3-one (LM11); acid 3, 3’,4’trimethylellagic (LM5); acid gallic (LM6), methyl gallate (LM7); vanillic acid (LM8); isophytol (LM9); lupeol (LM10) Cấu trúc hợp chất xác định phương pháp phổ đại NMR, MS so sánh với tài liệu tham khảo O O COOH O O O H O O O H3COOC O HO O O LM1 O O LM3 LM2 LM4 O O O OH O O OMe COOH HO MeO O OMe LM5 O COOMe OH HO OH COOH HO OH OCH3 OH LM7 LM6 LM8 H H HO H LM9 HO H LM10 O LM11 Hình 4.9 Cấu trúc hợp chất phân lập từ cây Macaranga balansae 4.4 Kết thử hoạt tính sinh học 21 Kết thử hoạt tính gây độc tế bào số hợp chất phân lập từ ba phận quản, thân, loài Macaranga balansae trình bày Bảng 4.2 4.3 4.4.1 Kết thử hoạt tính gây độc tế bào số hợp chất phân lập từ loài loài Macaranga balansae Bảng 4.2 Kết thử hoạt tính gây độc tế bào hợp chất phân lập từ loài Macaranga balansae TT Hợp Giá trị IC50 (µM) chất A549 Hela MCF-7 Hep3B Pan C1 29,51 ± 48,98 ± 53,09 ± 64,27 ± QM1 55,1± 2,44 1,68 2,19 1,24 1,84 16,23 ± 30,09 ± 10,83±0,3 17,77 ± 29,02 ± QM2 2,11 1,15 0,83 1,13 10,86 ± 54,95± 50,09 ± 41,83±1,3 7,89 ± QM3 0,50 1,39 2,15 0,74 QM4 >100 >100 >100 >100 >100 39,51 ± 48,98 ± 34,78±1,2 58,98 ± 34,78±1,2 QM5 1,16 2,19 1,19 56,23 ± 30,09 ± 68,28±1,4 67,09 ± 98,28±1,2 QM6 2,11 1,15 1,15 7 49,51 ± 48,98 ± 34,47±2,5 68,98 ± 64,47±1,5 QM8 1,18 2,19 2,19 26,23 ± 30,09 ± 80,09 ± 52,14±2,0 QM9 2,14±0,03 2,14 1,15 1,15 39,41 ± 48,98 ± 66,98 ± QM10 15,7±0,26 45,7±2,23 1,25 2,19 2,19 10 26,73 ± 40,09 ± 50,93 ± 79,43 ± 54,95 ± QM11 2,71 1,35 1,07 1,93 0,82 11 TM1 >100 >100 >100 >100 >100 12 7,23 ± 80,09 ± TM15 >100 >100 >100 3,11 2,15 13 TM16 >100 >100 >100 >100 >100 14 LM3 >100 >100 >100 >100 >100 15 1,62 ± 2,93 ± 0,28 ± 0,12 ± 0,99 ± C 0,05 0,15 0,07 0,005 0,42 C: Camptothecina Camptothecina sử dụng làm chất đối chứng dương Kết Bảng 4.2 cho thấy hợp chất QM1, QM3, QM11 thể hoạt tính gây độc tế bào dòng tế bào ung thư phổi - A549 với giá trị IC50 29,51 ± 1,68; 10,86 ± 0,50 26,73 ± 2,71 µM Đặc biệt dòng tế bào ung thư tuyến tụy - Pan C1 hợp chất QM3 thể hoạt tính gây độc tế bào tốt với giá trị IC50 đạt 7,89 µM Ba hợp chất thể hoạt tính yếu dòng tế bào ung thư Hela, MCF-7, Hep3B với giá trị IC50 nằm khoảng 40.09-79.43 µM Ngồi hợp chất biết QM2 thể hoạt tính gây độc tế bào dòng tế 22 bào A549, Hela, MCF-7, Hep3B, Pan C1 với giá trị IC50 16,23 ± 2,11; 30,09 ± 1,15; 10,83±0,38; 17,77 ± 0,83; 29,02 ± 1,13 hợp chất TM15 thể hoạt tính tốt dòng tế bào A549 với giá trị IC50 7,23 ± 3,11 Bảng 4.3 Kết thử hoạt tính gây độc tế bào hợp chất phân lập từ loài Macaranga balansae TT Hợp chất IC50 (g/ml) KB HepG2 Lu-1 QM1 58,98 ±3,19 54,09 ± 1,21 79,11 ± 2,86 QM2 49,13±1,59 48,22±0,98 13,76±0,64 QM3 20,86 ± 0,50 55,95± 2,39 96,09 ± 3,15 QM4 >100 >100 >100 QM5 77,57±1,56 71,4±1,89 76,06±0,4 QM6 74,98±0,43 69,86±3,12 76,34±0,77 QM8 58,8±2,7 60,35±2,5 64,53±2,43 QM9 6,34±0,43 5,41±0,28 9,25±0,74 QM10 12,59±0,21 13,69±0,24 10,69±0,19 10 QM11 29,73 ± 2,11 33,09 ± 2,25 44,13 ± 1,97 11 TM1 >100 >100 111,40±3,9 12 TM15 37,64±2,94 37,28±1,01 13,07±0,89 13 TM16 >100 >100 >100 14 LM3 >100 >100 >100 15 Ellipticine 0,27± 0,07 0,21± 0,06 0,32± 0,05 Ellipticine sử dụng làm chất đối chứng dương Kết Bảng 4.3 cho thấy hợp chất QM9 thể hoạt tính tốt dòng tế bào ung thư KB, HepG2, Lu-1 MCF-7 với giá trị IC50 6,34±0,43; 5,41±0,28; 9,25±0,74 2,14±0,03 Đặc biệt dòng tế bào ung thư vú người - MCF-7 hợp chất QM9 cho giá trị IC50 ấn tượng 2,14±0,03 µM Hợp chất QM10 thể hoạt tính dòng tế bào ung thư KB, HepG2, Lu-1 MCF-7 với giá trị IC50 nằm khoảng từ 10,69±0,19 đến 15,7±0,26 Các hợp chất QM2, TM15 thể hoạt tính gây độc tế bào dòng tế bào ung thư phổi - Lu-1 với giá trị IC50 13,76±0,64 13,07±0,89 µM KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ KẾT LUẬN Đây cơng trình nghiên cứu thành phần hóa học hoạt tính sinh học lồi Macaranga balansae Việt Nam Trong trình thực luận án này, thu kết nghiên cứu thành phần hóa học hoạt tính sinh học lồi Macaranga balansae thuộc họ Thầu dầu (Euphorbiaceae) Việt Nam kết là: Thành phần hóa học: Đã phân lập xác định cấu trúc hóa học 37 hợp chất từ quả, thân loài Macaranga balansae, cụ thể: - hợp chất mới: hợp chất nhóm flavonoid: 4’-O-methyl-8-prenyltaxifolin (QM1), 6,8-diprenyl-4’-O-methoxy-flavanone (QM3) hợp chất nhóm stilben: 23 4’-deprenyl-4-O-methylmappain (QM11) hợp chất lignan: (-)dehydroxycubebinone (TM15 trùng với hợp chất LM4), 7-carboxyl-6’methoxycarbonyl-dehydroxycubebin (LM3) - 32 hợp chất biết: 8a hợp chất nhóm flavonoid: 5,7-dihydroxy-4’methoxy-8-prenylflavanone (QM2), exiguaflavanone K (QM4), 8-prenylnarigenin (QM5); 6,8-diprenylnarigenin (QM6); 6,8-piprenylaromadendrin (QM8); propolin I (QM9); macarecurvatin A (QM10); 5,7,4’-Trihydroxy-8-(2,3dihydroxy-3-methylbutyl)flavanone (QM12) hợp chất nhóm coumarin: isoscopoletin (QM13), 6,7,8-trimethoxycoumarin (TM16) hợp chất nhóm stilbene: 4’-deprenyl mappain (QM14) hợp chất nhóm sterpenoid: 6hydroxystigmast-4-ne-3-one (TM3); β-sistosterol (TM4 có liệu phổ trùng với hợp chất LM2); stigmast-4-en-3-one (TM5 có liệu phổ trùng với hợp chất LM11); stigmastane-3,6-dione (TM7); stigmast-4-ene-3,6-dione (TM8); stigmastane 3,5,6-triol (TM13) hợp chất phenolic: vanillin (TM2); coniferyl aldehyde (TM9); acid vanillic (TM10 có liệu phổ trùng với hợp chất LM8 ); acid protocatechuic (TM11 có liệu phổ trùng với hợp chất QM16 LM5) (-)2,3-dihydroxy-1-(4’-hydroxy-3’-methoxyphenyl)propan-1-one (TM12); acid gallic (QM17), methyl gallate (LM7) dẫn chất acid ellagic: 3,3’,4’-tri-Omethyl ellagic (TM6 có liệu phổ trùng với hợp chất QM15) acid 3,4’dimethylellagic (TM19), acid ellagic (QM18 có liệu phổ trùng với hợp chất LM6) hợp chất lignan: dehydroxycubebin (TM14 có liệu phổ trùng với hợp chất LM1) hợp chất triterpenoid: acetyl aleuritolic (TM1), lupeol (LM10) hợp chất khác: 2,3-dihydroxy propyl pentacosanoate (QM7), isophytol (LM9) Hoạt tính sinh học: Đã tiến hành đánh giá hoạt tính ức chế phát triển 08 dòng tế bào ung thư người: A549, Hela, Pan C1, MCF-7, Hep3B, KB, HepG2, Lu-1 14 hợp chất phân lập Trong hợp chất QM3 thể hoạt gây độc tế bào dòng tế bào ung thư tuyến tụy Pan C1 với giá trị IC50 7,89 ± 0,74 µM 03 hợp chất QM1, QM3, QM11 thể hoạt tính gây độc tế bào dòng tế bào ung thư phổi người A549 với giá trị IC50 29,51 ± 1,68; 10,86 ± 0,50 26,73 ± 2,71 µM Kết nghiên cứu luận án bổ sung thêm cơng bố hoạt tính gây độc tế bào dòng tế bào ung thư hợp chất biết: hợp chất QM2 thể hoạt tính gây độc tế bào dòng tế bào MCF-7 với giá trị IC50 10,83±0,38 µM; hợp chất QM9 QM10 thể hoạt tính gây độc tế bào dòng tế bào KB, HepG2, Lu-1, MCF-7 với giá trị IC50 khoảng 2,14 ÷ 15,7 µM KIẾN NGHỊ - Hiện nay, loài Macaranga balansae chưa ứng dụng khai thác nhiều Do đó, cần sâu nghiên cứu hoạt tính sinh học dược học loài nhằm khẳng định thêm giá trị khoa học, đồng thời góp phần tạo sản phẩm phục vụ chăm sóc sức khỏe cộng đồng - Cần khảo sát thêm hoạt tính sinh học khác hợp chất phân lập từ loài thực vật trên, đặc biệt chất QM1, QM3, QM11, TM15, LM3 nhằm tìm kiếm khả ứng dụng hợp chất 24 DANH MỤC CÁC CƠNG TRÌNH ĐÃ CƠNG BỐ CỦA LUẬN ÁN Huong Doan Thi Mai, Thang Pham Toan, Giap Tran Huu, Thanh Nguyen Le, Vu Thi Kim Oanh, Nguyen Thi Minh Hang, Huong Tran Thu, Van Minh Chau, Marc Litaudon and Van Cuong Pham (2019) New flavonoid and stilbene derivatives from the fruits of Macaranga balansae… Natural Product Research, doi.org/10.1080/14786419.2019.1587425 Phạm Toàn Thắng, Hà Thị Thoa, Trần Hữu Giáp, Nguyễn Anh, Dũng, Trần Thu Hương, Nguyễn Thị Minh Hằng, Đoàn Thị Mai Hương, Lê Nguyễn Thành, Phạm Văn Cường (2017) Bước đầu nghiên cứu thành phần hóa học dịch chiết etyl axetat Mã rạng balansae (Macaranga balansae Gagnep Tạp chí Hóa học, 55 (5E24) 96 - 100 Pham Toan Thang, Ha Thi Thoa, Tran Huu Giap, Le Nguyen Thanh, Nguyen Thi Minh Hang, Vu Thi Kim Oanh, Tran Thu Hương, Doan Thi Mai Hương, Pham Văn Cuong (2018) Chemical constituents from the ethyl acetate extract of the stems of Macaranga balansae Gagnep Vietnam Journal of Chemistry, 56 (2), 249 – 253 Pham Toan Thang, Nguyen Anh Dung, Tran Huu Giap, Vũ Thi Kim Oanh, Nguyen Thi Minh Hang, Tran Thu Huong, Le Nguyen Thanh, Doan Thi Mai Huong, Pham Van Cuong (2018) Preliminary study on the chemical constituents of the leaves of Macaranga balansae Gagnep Vietnam J Chem, 56 (5), 632 – 636 ... balansae Gagnep., thuộc chi Mã Rạng (Macaranga) họ Thầu dầu (Euphorblaceae)” Mục tiêu luận án: Nghiên cứu để làm rõ thành phần hóa học của lồi Macaranga balansae nhằm tìm kiếm hoạt tính gây độc. .. hoạt tính sinh học lồi Macaranga balansae Việt Nam Trong trình thực luận án này, thu kết nghiên cứu thành phần hóa học hoạt tính sinh học loài Macaranga balansae thuộc họ Thầu dầu (Euphorbiaceae). .. đề: Nghiên cứu thành phần hóa học hoạt tính sinh học loài thực vật chi Macaranga thuộc họ Thầu dầu (Euphorbiaceae) CHƯƠNG ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 2.1 Đối tượng nghiên cứu Các phận