Tiêu chuẩn Quốc gia TCVN 8883:2011 - ISO 11264:2005

Tiêu chuẩn Quốc gia TCVN 8883:2011 quy định phương pháp sắc ký lỏng hiệu năng cao (HPLC) để xác định định tính và định lượng một số loại thuốc trừ cỏ trong đất. Phương pháp này cũng xác định các triazin kể cả các chuyển hóa liên quan của chúng, hợp chất ure phenyl và các thuốc trừ cỏ khác. Các hợp chất được xác định và định lượng bằng detector UV.

TIÊU CHUẨN QUỐC GIA TCVN 8883:2011 ISO 11264:2005 CHẤT LƯỢNG ĐẤT - XÁC ĐỊNH THUỐC TRỪ CỎ - PHƯƠNG PHÁP HPLC DÙNG DETECTOR UV Soil quality - Determination of herbicides - Method using HPLC with UV-Detection Lời nói đầu TCVN 8883:2011 hoàn toàn tương đương ISO 11264:2005 TCVN 8883:2011 Ban kỹ thuật Tiêu chuẩn quốc gia TCVN/TC 190 Chất lượng đất biên soạn, Tổng cục Tiêu chuẩn Đo lường Chất lượng đề nghị, Bộ Khoa học Công nghệ công bố CHẤT LƯỢNG ĐẤT - XÁC ĐỊNH THUỐC TRỪ CỎ - PHƯƠNG PHÁP HPLC DÙNG DETECTOR UV Soil quality - Determination of herbicides - Method using HPLC with UV-detection Phạm vi áp dụng Tiêu chuẩn quy định phương pháp sắc ký lỏng hiệu cao (HPLC) để xác định định tính định lượng số loại thuốc trừ cỏ đất Phương pháp xác định triazin kể chuyển hóa liên quan chúng, hợp chất ure phenyl thuốc trừ cỏ khác Các hợp chất xác định định lượng detector UV Giới hạn phát triazin hợp chất ure phenyl ~ 0,01 mg/kg chất khô Giới hạn phụ thuộc vào hợp chất thành phần mẫu đất Tài liệu viện dẫn Các tài liệu viện dẫn sau cần thiết cho việc áp dụng tiêu chuẩn Đối với tài liệu viện dẫn ghi năm công bố áp dụng phiên nêu Đối với tài liệu viện dẫn khơng ghi năm cơng bố áp dụng phiên bao gồm sửa đổi, bổ sung (nếu có) TCVN 7538-1 (ISO 10381-1), Chất lượng đất - Lấy mẫu Phần 1: Hướng dẫn lập chương trình lấy mẫu TCVN 7538-2 (ISO 10381-2), Chất lượng đất - Lấy mẫu Phần 2: Hướng dẫn kỹ thuật lấy mẫu TCVN 5963 (ISO 11465), Chất lượng đất - Xác định chất khô hàm lượng nước sở khối lượng - Phương pháp trọng lực ISO 14507, Soil quality - Pretreatment of samples for determination of organic contaminants (Chất lượng đất - Xử lý sơ mẫu để xác định chất gây ô nhiễm hữu cơ) Nguyên tắc Mẫu đất ẩm đồng ruộng chiết hỗn hợp axeton nước (2:1) Sau thêm NaCI diclometan dầu mỏ, pha hữu tách làm giàu chuyển vào hỗn hợp axetonitril/nước khơng phải làm thêm phân tích RP-HPLC, gradien acetontrinil nước sử dụng detector UV Sử dụng điot phổ UV, GC-MS, GC-NPD GC-AED (một số cần dẫn xuất) để xác nhận kết Thuốc thử Tất thuốc thử phải có chất lượng cấp phân tích biết Độ tinh khiết thuốc thử sử dụng phải kiểm tra phép xác định trắng mô tả 6.5 Nếu giá trị trắng cao vô lý, tức lớn 10 % giá trị thấp chất phân tích, tìm ngun nhân qua kiểm tra bước tồn quy trình Đối với phép đo giới hạn xác định, thuốc thử phù hợp để phân tích dư lượng khơng đáp ứng tiêu chí Trong trường hợp này, cần phải kết hợp phép xác định trắng loạt đo mẫu 4.1 Nước, để phân tích dư lượng, thường nước vòi (nước uống) thích hợp 4.2 Axeton, để phân tích dư lượng 4.3 Natri clorua 4.4 Diclometan, để phân tích dư lượng 4.5 Dầu ête, khoảng nhiệt độ sôi từ 40 °C đến 60 °C, để phân tích dư lượng 4.6 Natri sunfat, khan, để phân tích dư lượng 4.7 Axetonitril, cấp HPLC 4.8 Nước, cấp HPLC 4.9 Propanol-2, để sắc ký 4.10 Axetonitril (4.7)/nước (4.8) hỗn hợp, + (V + V) để hòa tan mẫu 4.11 Metanol, cấp HPLC 4.12 Chất chuẩn (bao gồm số đăng ký hóa chất) Alachlor [015972-60-8], Atrazin [001912-24-9], Atrazin-desetyl [06190-65-4], Atrazin-desisopropyl [01007-28-9], Bromaxin [000314-40-9], Clotoluron [015545-48-9], cloxuron [001982-47-4], Xianazin [021725-46-2], Diclobenin [001194-65-6], Diuron [000330-54-1], Ethofumesat [026225-79-6], Hexanzinon [051235-04-2], Isoproturon [034123-59-6], Metazaclo [061729-08-2], Metamitron [04139405-2], Metabenzthiazuron [018691-97-9], Metobromuron [003060-89-7], Metolaclo [051218-45-2], Metoxuron [019937-59-8], Monuron [000150-68-5], Pendimetalin [040487-42-1], Propazin [000139-402], Propyzamit [023950-58-5], Sebutylazin [00728-69-3], Simazin [000122-34-9], Terbutryn [00088650-0], Terbutylazin [005915-41-3] 4.13 Các dung dịch chuẩn để xác định HPLC 4.13.1 Dung dịch gốc, 11 = mg/mL Cân 10,0 mg chất chuẩn (4.12) cho vào bình định mức 10 mL riêng (5.13) Hòa tan với propanol-2 (4.9) hoặc, trường hợp xác định sebutylazin simazin, hòa tan lượng nhỏ axeton (4.2) hoặc, trường hợp xác định metamitron, lượng nhỏ metanol (4.11) Sau thêm propanol- (4.9) đến vạch mức 4.13.2 Dung dịch trung gian, = 100 g/mL 12 Dùng pipet lấy 1,0 mL dung dịch gốc (4.13.1) cho vào bình định mức 10 mL riêng (5.13) thêm propanol-2 (4.9) đến vạch mức 4.13.3 Dung dịch làm việc I, = 10 g/mL 13 CHÚ THÍCH: Dung dịch làm việc chuẩn bị để thiết lập thời gian lưu Chuẩn bị nồng độ khác chất phân tích cho đáp ứng detector khác Dùng pipet lấy 1,0 mL dung dịch trung gian (4.13.2) cho vào bình định mức 10 mL (5.13) thêm hỗn hợp axetonitril/nước (4.10) đến vạch mức 4.13.4 Dung dịch làm việc II, = g/mL 14 Dùng micro xilanh (5.14) chuyển 100 l dung dịch trung gian (4.13.2) vào bình định mức 10 mL (5.13) thêm hỗn hợp axetonitril/nước (4.10) đến vạch mức 4.13.5 Dung dịch làm việc III, 15 = 0,1 g/mL Dùng micro xilanh (5.14) chuyển 100 l dung dịch làm việc I (4.13.3) vào bình định mức 10 mL (5.13) thêm hỗn hợp axetonitril/nước (4.10) đến vạch mức 4.13.6 Dung dịch hỗn hợp I, 16 = g/mL đến 100 g/mL Theo Bảng 1, dùng micro xilanh (5.14) chuyển khoảng từ 50 l đến 000 l dung dịch gốc (4.13.1) vào bình định mức 10 mL (5.13) thêm propanol-2 (4.9) đến vạch mức 4.13.7 Dung dịch hỗn hợp II, 17 = 0,5 g/mL đến 10 g/mL Dùng pipet lấy 1,0 mL dung dịch hỗn hợp I (4.13.6) cho vào bình định mức 10 mL (5.13) thêm hỗn hợp axetonitril/nước (4.10) đến vạch mức (xem Bảng 1) 4.13.8 Dung dịch hỗn hợp III, 18 = 0,05 g/mL đến g/mL Dùng pipet lấy 1,0 mL dung dịch hỗn hợp II (4.13.7) cho vào bình định mức 10 mL (5.13) thêm hỗn hợp axetonitril/nước (4.10) đến vạch mức Bảng - Nồng độ hợp chất dung dịch hỗn hợp I (4.13.6), II (4.13.7), III (4.13.8) Số TT Hợp chất a Thể tích b L Dung dịch hỗn hợp I Dung dịch hỗn hợp II Dung dịch hỗn hợp III g/mL g/mL g/mL Atrazin-desisopropyl 200 20 0,2 Metamitron 500 50 0,5 Atrazin-desetyl 200 20 0,2 Hexanzinon 200 20 0,2 Metoxuron 200 20 0,2 Bromacil 400 40 0,4 Simazin 100 10 0,1 Monuron 100 10 0,1 Cyanazin 100 10 0,1 10 Metabenzthiazuron 100 10 0,1 11 Clotoluron 100 10 0,1 12 Atrazin 100 10 0,1 13 Isoproturon 100 10 0,1 14 Diuron 200 20 0,2 15 Metobromuron 100 10 0,1 16 Metazaclo 500 50 0,5 17 Sebutylazin 100 10 0,1 18 Propazin 100 10 0,1 19 Diclobanil 200 20 0,2 20 Terbutylazin 100 10 0,1 21 Cloxuron 100 10 0,1 22 Proylamit 100 10 0,1 23 Terbutryn 50 0,5 0,05 24 Ethofumesat 500 50 0,5 25 Metolaclo 500 50 0,5 000 100 10 100 10 0,1 26 Alaclo 27 Pendimathalin a Các hợp chất theo thứ tự rửa giải sử dụng điều kiện định 6.5 Đối với hợp chất bổ sung, xem Phụ lục C b Thể tích dung dịch gốc (4.13.1) lấy để chuẩn bị 10 mL dung dịch hỗn hợp I (4.13.6) Thiết bị, dụng cụ 5.1 Chai thủy tinh, có nắp vặn vòng gioăng polytetraflo etylen, dung tích danh định 250 mL 000 mL 5.2 Bộ chiết (xem Hình 1), bao gồm phận sau 5.2.1 Ống đong, dung tích danh định 000 mL với cổ nhám nút thủy tinh nhám 5.2.2 Ống nối thủy tinh nhám (nguyên tắc bình rửa) với ống điều chỉnh chữ U, đoạn cong cuối đặt mặt phân cách hai pha CHÚ DẪN Ống nối thủy tinh nhám Ống đong Ống điều chỉnh chữ U Pha hữu Pha nước đất Hình - Bộ chiết 5.3 Thiết bị lắc, kiểu đảo dọc kiểu đảo ngang Phải đảm bảo trộn toàn đất chất chiết 5.4 Máy làm bay quay chân khơng, có bể nước kiểm sốt chân khơng 5.5 Bình hình lê, dung tích danh định 10 mL, có vạch chia 0,5 mL 1,0 mL có nút thủy tinh nhám 5.6 Màng lọc, độ xốp tối thiểu 0,45 m, bền với dung mơi 5.7 Ống nghiệm, dung tích danh định mL, đậy kín, có đĩa polytetraflo etylen 5.8 Thiết bị HPLC, bao gồm bơm cao áp lập chương trình gradien, van bơm mẫu 20 L đến 50 L, cột ổn nhiệt, thiết bị loại khí dung mơi 5.9 Detector UV, có bước sóng thay đổi detector mảng điot (DAD) 5.10 Bộ ghi điện tử (hệ thống liệu tích hợp phòng thí nghiệm) 5.11 Cột tách, dài 250 mm, đường kính mm, giá đỡ tiền cột (xem 6.5.1) 5.12 Tiền cột (phần bảo vệ trước cột), dài mm, đường kính mm (xem 6.5.1) 5.13 Bình định mức, dung tích danh định 10 mL, có nút thủy tinh 5.14 Micro xyranh, 50 L đến 000 L 5.15 Bể siêu âm máy trộn xoáy Cách tiến hành 6.1 Chuẩn bị mẫu Lấy mẫu đất ẩm đồng ruộng đại diện theo TCVN 7538-1 (ISO 10381-1), sử dụng thiết bị lấy mẫu theo TCVN 7538-2 (ISO 10381-2) 6.2 Bảo quản mẫu xử lý sơ Mẫu đất ẩm đồng ruộng xử lý sơ theo ISO 14507 sớm tốt (khơng làm khơ hóa học) Bảo quản mẫu đất tối nhiệt độ -20 °C Thuốc trừ cỏ đối tượng chuyển hóa vi khuẩn điều kiện định Nếu bảo quản mẫu nhiều ngày nên làm đông lạnh mẫu Lấy phần mẫu để xác định nước hàm lượng chất khô theo TCVN 5963 (ISO 11465) 6.3 Bổ sung nước vào mẫu Thêm vào khối lượng đất lượng nước xác định tính theo Cơng thức (1) (mỗi mẫu chuẩn bị có lượng nước 100 g) mw 100 ms w w 100 (1) Trong mw khối lượng nước thêm vào, tính g; ms khối lượng mẫu, tính g; ww phần khối lượng nước, tính % CHÚ THÍCH: Việc thêm nước quan trọng để có tỉ lệ cố định (tỉ lệ nước axeton diclometan 1:2:1,5) Dưới điều kiện này, pha hữu lớp 6.4 Chuẩn bị dịch chiết đất 6.4.1 Chiết phân bố pha lỏng/lỏng Cân 50 g đất chuẩn bị theo 6.1 cho vào chai thủy tinh (5.1) ống thủy tinh (5.2.1), thêm mw gram nước (4.1) 200 mL axeton (4.2) Đậy kín chai lắc tối thiểu h Phải quan sát pha trộn thích hợp hai pha lắc Sau thêm 30 g natri clorua (4.3) 150 mL diclometan (4.4) ete dầu mỏ (4.5) Đậy nắp lắc khoảng Các kỹ thuật chiết khác, chiết siêu âm, chiết vi sóng chiết áp suất, phù hợp Tuy nhiên, sử dụng kỹ thuật chiết khác, phải chứng minh phương pháp tương đương với phương pháp mơ tả tiêu chuẩn Vì lý sức khỏe môi trường, sử dụng diclometan đến mức tối thiểu Thay diclometan ete dầu mỏ (khoảng sôi 40 °C đến 60 °C) số đất hợp chất làm giảm nồng độ hợp chất tới 10 % Thay diclometan etylaxetat dietylete, cho độ thu hồi kém, phụ thuộc vào thành phần mẫu Trong trường hợp số hợp chất (ví dụ metamitron), tỉ lệ thu hồi đạt nhỏ 70 % Để đánh giá định lượng, nên áp dụng kỹ thuật chiết phù hợp với hợp chất riêng Lấy khoảng 50 g natri sunfat khan (4.6) vào bình nón, dung tích danh định 500 mL Chuyển pha hữu vào bình nón, cách gạn dùng ống thủy tinh nhám (5.2.2) sử dụng nitơ Đậy bình lắc (xem 5.3) khoảng h Lấy 140 mL phần thể lỏng, 40 % tổng phần thể lỏng (tương ứng với phần chiết 20 g đất), cho vào bình đáy tròn (5.5) Cơ đến khoảng mL sử dụng máy làm bay quay chân không áp suất thấp nhiệt độ bể nước tối đa 40 °C Tránh mẫu tới khơ hồn tồn Nồng độ lại ký hiệu phần chiết “E1" Nếu dùng diclometan, loại bỏ lớp nước lọc lớp hữu vào bình nón để loại bỏ hạt đất 6.4.2 Cơ mẫu hòa tan Dùng pipet Paster chuyển phần chiết E1 (6.4.1) cho vào bình hình lê có vạch chia (5.5) Rửa bình nón với khoảng mL axetonitril (4.7) Để loại bỏ hồn tồn axeton, mẫu xuống mL, sau thêm axetonitril (4.7) đến 1,0 mL Dùng pipet thêm 1,0 mL nước dùng cho HPLC (4.8) trộn máy trộn xoáy bể siêu âm (5.15) Nếu cần, lọc (xem 5.6) chuyển dung dịch vào ống nghiệm có nắp (5.7) Phần ký hiệu phần chiết “E2” Phần chứa phần chiết đất 10 g đất/mL, E2 = 10g/mL CHÚ THÍCH 1: Sử dụng quy trình chiết (6.4.1) cho phép xác định thuốc thử bảo vệ thực vật khác (ví dụ thuốc trừ sâu thuốc trừ nấm) hợp chất quan trọng mơi trường (ví dụ polyclorined biphenyls hydrocacbon thơm polyciclic) CHÚ THÍCH 2: Phương pháp tiến hành phương pháp với lượng mẫu thuốc thử hạn chế (tỷ lệ) (ví dụ g đất, 10 mL nước, 20 mL axeton, 15 mL diclometan g natri clorua) Trong trường hợp này, gặp khó khăn số mẫu có tính đồng 6.5 Xác định HPLC 6.5.1 Khái quát Các điều kiện theo sau phải xem giá trị hướng dẫn Người sử dụng phải tối ưu hóa điều kiện này, phụ thuộc vào cột sử dụng, thiết bị khác điều kiện phân tách pha 6.5.2 Các điều kiện đo vận hành HPLC vận hành điều kiện sau (ví dụ) Pha tĩnh: Cột1) C18 Pha động: Tỷ lệ nước (4.8) axetonitril (4.7) thích hợp xác định chương trình gradien (xem Bảng 2) Dung tích bơm: 50 L Nhiệt độ lò: 30 °C Tốc độ dòng: 1,0 mL/min Bước sóng phát hiện: 235 nm Bằng cách thay đổi bước sóng từ 220 nm đến 309 nm, cường độ tín hiệu loại chất khác hợp chất riêng tối ưu hóa (xem Bảng 3) Ví dụ, 220 nm hợp chất triazin, 245 nm hợp chất ure phenyl Dung dịch rửa giải A: Nước (4.8) Dung dịch rửa giải B: Axetonitril (4.7) CHÚ THÍCH: Nên sử dụng dung dịch rửa giải A B trộn lẫn dung dịch với 100 % nước 100 % axetonitril Thể tích bơm mẫu lớn 100 l với cột nêu Khơng sử dụng thể tích Thường xuyên thay đổi tiền cột (5.12), tránh yếu tố cản trở nguyên nhân làm tăng áp suất cột tượng lắng đọng hạt mẫu lên cột thời gian tương đối dài Bảng - Chương trình gradien Thời gian Dung dịch rửa giải A Dung dịch rửa giải B % % 80 20 81 19 10 81 19 30 38 62 35 38 62 40 10 90 50 10 90 55 80 20 65 80 20 Bảng - Đáp ứng tương đối, hấp thụ lớn thời gian lưu tương đối thuốc trừ cỏ Số TT Hợp chất Đáp ứng tương đốia Lớn 1st mm Lớn 2nd Thời gian lưu tương đốia mm Antrazin-desisopropyi 0,73 215 0,23 Metamitron 0,46 309 0,31 Antrazin-desetyl 1,04 215 0,36 Hexazinon 0,62 247 0,61 Metoxuron 0,77 209 245 0,62 Bromacil 0,25 212 278 0,64 Lichropher®60RP-chọn B (xem 5.11 5.12) Nucleosil-AB mẫu sản phẩm thương mại phù hợp Thông tin đưa để tạo thuận tiện cho người sử dụng tiêu chuẩn không xác nhận tiêu chuẩn sản phẩm 1) Simazin 1,57 223 0,69 Monuron 1,11 248 0,71 Cyanazin 1,26 220 0,75 10 Metabenztiazuron 1,42 225 269 0,86 11 Clotoluron 1,39 211 245 0,91 12 Antrazin 1,96 223 13 Isoproturon 1,79 204 242 0,99 14 Diuron 1,00 212 251 1,00 15 Metobromuron 1,15 248 1,01 16 Metazaclo 0,25 200 1,05 17 Sebutylazin 2,30 223 1,10 18 Propazin 2,08 223 1,11 19 Diclobenil 1,03 211 1,15 20 Terbutylazin 2,33 224 1,18 21 Cloroxuron 1,59 249 1,27 22 Propyzamid 0,87 207 1,28 23 Terbutryn 2,83 224 1,31 24 Ethofumesat 0,44 228 25 Metolaclo 0,28 200 1,33 26 Alaclo 0,14 200 1,35 27 Pendimethalin 3,39 240 1,71 0,92 280 1,33 CHÚ THÍCH: Nếu xuất tất chất trên, chất khơng phân giải hồn tồn sắc ký, xem Phụ lục A a Về diuron, bước sóng: 235 nm Xem 6.5.4 cản trở Đối với hợp chất bổ sung, xem Phụ lục C 6.5.3 Hiệu chuẩn 6.5.3.1 Hiệu chuẩn thứ Thời gian lưu thuốc trừ cỏ thiết lập phép đo dung dịch làm việc I (4.13.3) II (4.13.4) Hiệu chuẩn hệ thống phân tách khoảng tuyến tính detector UV Phải chuẩn bị dung dịch làm việc chất riêng lẻ hỗn hợp nhiều thành phần (4.13.6, 4.13.7 4.13.8) dung dịch pha loãng trung gian tương ứng nồng độ phân bố khoảng làm việc Đối với xác định định lượng, đo chiều cao tín hiệu (diện tích pic) so sánh với nồng độ tương ứng i Đối với chất, xác định khoảng làm việc dựng đường cong hiệu chuẩn tuyến tính 6.5.3.2 Hiệu chuẩn lại Trước loạt mẫu, hiệu chuẩn ban đầu phải kiểm định cách đo hai dung dịch chuẩn có nồng độ khác 6.5.4 Đo Sắc ký phần chiết E2 (6.4.2) điều kiện mơ tả Dung mơi thể tích bơm phải chuẩn bị giống phần chiết mẫu dung dịch hiệu chuẩn Các chất kết hợp định tính với thời gian lưu xác định định lượng sử dụng chiều cao tín hiệu/pic (hoặc diện tích pic/tín hiệu) EX Các hợp chất phát thuốc trừ cỏ thời gian lưu nằm dung sai ± 0,1 min, so với thuốc trừ cỏ có dung dịch chuẩn tương ứng CHÚ THÍCH: Đất có hàm lượng chất hữu cao cho pic nhiễu Nếu cần, làm sử dụng sắc ký thẩm thấu gel (GPC) sắc ký hấp thụ (ví dụ silica gel florisil) cải thiện kết Nên sử dụng chuẩn nội thí nghiệm để xác định độ thu hồi loạt mẫu, chí mẫu Chất hợp chất liệt kê khơng có điều tra nghiên cứu, hợp chất hữu thích hợp khác mà có khả có mẫu Người sử dụng phải kiểm tra để đảm bảo không xuất pic nhiễu sắc phổ 6.5.5 Kiểm định sai số dương Có thể xảy kết dương sai tượng tách chất có mẫu Kiểm định phép xác định HPLC bị hạn chế áp dụng mạng diot detector UV quét, đo so sánh phổ UV mẫu tiêu chuẩn CHÚ THÍCH: Sắc ký khí sử dụng detector chọn lọc nơtron/proton detector chọn lọc khối phổ sử dụng phương pháp phát độc lập để kiểm định kết số chất phân tích Trong trường hợp xác định hợp chất phenylure, sản phẩm phân hủy tạo thành vùng phun nóng Khả khác phép xác định hợp chất dẫn xuất theo sắc ký khí Khối phổ cột lỏng (LC-MS) sử dụng có Tính tốn 7.1 Tính nồng độ khối lượng EX chất phần chiết E2 theo Công thức (2) EX EX i x in (2) Trong in i nồng độ khối lượng chất i dùng để hiệu chuẩn, tính g/mL; giá trị đo (pic tín hiệu diện tích tín hiệu) chất i dùng để hiệu chuẩn; EX giá trị đo (pic tín hiệu diện tín hiệu) chất x phần chiết đất E 7.2 Tính hàm lượng w chất phần chiết đất E2 theo Công thức (3) w EX EN x 100 w dm 100 w w (3) Trong w phần khối lượng chất, tính mg/kg chất khơ; wdm phần khối lượng chất khơ, tính mg/kg; EX nồng độ khối lượng chất x phần chiết đất E, tính g/mL; EN nồng độ khối lượng đương lượng đất đồng ẩm phần chiết tính g/mL; ví dụ 20 g/2 mL (xem 6.4.2); ww phần khối lượng nước đất, tính % 7.3 Thể kết Thể kết quả, theo mg chất kg chất khô, với hai chữ số có nghĩa, ví dụ Diuron: 1,1 mg/kg chất khơ Antrazin: 0,63 mg/kg chất khô Antrazin desetyl: 0,08 mg/kg chất khô Báo cáo thử nghiệm Báo cáo thử nghiệm phải chứa thơng tin sau: a) Nhận dạng đầy đủ mẫu; b) Viện dẫn tiêu chuẩn này; c) Hàm lượng thuốc trừ cỏ riêng lẻ, tính mg/kg chất khơ, làm tròn theo 7.3; d) Mọi chi tiết không quy định tiêu chuẩn tùy chọn, yếu tố mà có ảnh hưởng đến kết Độ xác Kết nghiên cứu độ trình bày Phụ lục B Thí nghiệm độ thu hồi ba phòng thí nghiệm độc lập thực lại hai mức nồng độ với phân tích lặp ba Phép thử liên phòng thí nghiệm thực với năm mẫu đất khác nhau, ba năm mẫu đất có dư lượng thuốc trừ cỏ hai loại đất lại thêm thuốc trừ cỏ chuẩn Số lượng phòng thí nghiệm tham gia từ tám đến mười bốn phòng Phụ lục A (tham khảo) Phổ sắc ký Hình A.1 - Phổ sắc ký dung dịch trộn thuốc trừ cỏ II (xem 4.13.7) theo 6.4.2, bước sóng 235 nm Danh mục thuốc trừ cỏ Hình A.1 tương ứng với Bảng Hình A.2 - Phổ sắc ký mẫu đất, lấy từ dịch chiết E2 ( E2 = 10 g/mL theo 6.4.2) Antrazin (12): 0,28 mg/kg mmd; metazaclo (16): 0,48 mg/kg mT pendimetalin (27): 0,17 mg/kg mT Danh mục thuốc trừ cỏ Hình A.2 tương ứng với Bảng Phụ lục B (quy định) Xác nhận B.1 Xác định độ thu hồi Không thể thu đất tự nhiên với 27 thuốc trừ cỏ dư lượng tăng lên Mục tiêu phép thử liên phòng thí nghiệm để kiểm tra 27 hợp chất trước hết để xác định dư lượng theo cách thức định tính Trường hợp khó khăn phân tích 27 chất cho Phương pháp phải xác nhận ba phòng thí nghiệm độc lập, cách thêm chuẩn vào mẫu đất không bị nhiễm bẩn với hai mức nồng độ tăng ba lần Mức tương ứng với 0,04 mg/kg mdm, mức tương ứng với 0,4 mg/kg mr, mức tham chiếu theo atrazin Thuốc trừ cỏ lại bổ sung vào theo 4.13.6 4.13.7 Độ thu hồi phần lớn trường hợp nằm khoảng từ 70 % đến 120 % Độ thu hồi trung bình 108 % (xem Bảng B.1) Các độ thu hồi dựa mẫu đất thêm chuẩn Bảng B.1 - Tỉ lệ thu hồi Mứca Mứca 0,04 mg/kg mmd 0,4 mg/kg mmd wf wf Số TT SR Giá trị trung bình SR wf SR % Atrazin-desisopropyl % % (129) 19 108 119 14 Metamitron 110 107 109 Atrazin-desetyl 115 110 113 Hexazinon 111 108 10 109 Metaxuron 117 10 110 113 Bromacil 115 109 120 Simazin 115 110 113 Monuron 115 111 113 Cyanazin 102 15 106 11 104 13 10 Metabenzthiazuron 117 27 108 14 113 20 11 Clotoluron 106 11 100 12 103 12 12 Atrazin 108 11 104 106 10 15 119 110 11 (269) b 13 Isoproturon 14 Diuron 113 11 107 10 15 Metobromuron 97 35 85 59 16 Metazaclo 107 10 103 105 17 Sebutylazin 96 14 96 16 96 15 18 Propazin 87 18 71 13 79 15 19 Diclobenil 115 14 99 28 107 21 20 Terbutylazin 118 15 114 11 116 13 21 Cloxuron 106 14 106 14 106 14 22 Propyamid 93 27 101 14 99 20 23 Terbutryn (127) (153) 60 24 Ethofumesatc 25 Metolaclo 112 104 10 108 26 Alaclo 112 10 104 13 108 11 27 Pendimentalin (173) 56 106 17 110 12 105 12 108 12 Tất hợp chất a tham chiếu theo atrazin b Tín hiệu trùng: tỉ lệ thu hồi wf (%) c Ethofumesat không liên quan đến phép thử SR hệ số phương sai tương đối (% tương đối) B.2 Thử liên phòng thí nghiệm Phương pháp thử nghiệm ba phòng thí nghiệm tiến hành năm mẫu đất Trong phép thử định Bn Bo 2, Bn Bo 37/94 Q, sử dụng mẫu đất với dư lượng nguyên gốc Các phép thử B.2.2 B.2.3 sử dụng mẫu đất thêm chuẩn sau làm đồng Đánh giá tiến hành theo TCVN 6910-2 (ISO 5725-2) (xem Bảng B.2) Bảng B.2 - Kết phép thử liên phòng thí nghiệm Mẫu Thử nghiệm X Vr VR mg/kg mdm % % Số phòng Số phòng thí nghiệm thí nghiệm tham gia ngoại lai Atrazin Bn Bo 1,4 11 27 10 Atrazin Bn Bo 0,017 34 Atrazin B.2.2 0,33 24 11 Atrazin B.2.3 0,34 21 11 Atrazin 37/94 Q 0,017 30 52 Atrazin-desetyl Bn Bo 0,043 22 Atrazin-desetyl B.2.2 0,14 13 27 11 Simazin Bn Bo 0,025 14 53 Simazin 37/94 Q 0,14 12 43 14 Pendimethalin Bn Bo 0,58 15 24 Pendimethalin B.2.2 0,10 15 30 10 Pendimethalin B.2.2 0,19 34 11 Clotoluron B.2.2 0,79 41 Clotoluron B.2.3 0,29 34 10 Isoproturon B.2.2 0,64 11 21 11 Clofuron Bn Bo 2,8 24 Diuron 37/94 Q 2,2 10 17 12 X Giá trị trung bình Vr Hệ số độ lặp lại VR Hệ số độ tái lập Phụ lục C (tham khảo) Hợp chất bổ sung thử phương pháp (xem 6.4 6.5) C.1 Thuốc trừ cỏ Liệt kê theo thứ tự rửa giải Cloriazon, Carbetamid, Metribzin, Terbutylazin-desetyl, Lenacil, 1-(3,4-Diclophenyl)ure (Diuron metabolit 1), 1-(3,4-Diclophenyl)-3-metylur (Diuron metabolit 2), Linuron, Phenmedipham, Cloxuron, Propyzamind, Clopropham, EPTC, Flocloridon, Diflufenican, Prosulflocard, Triallat, Trifluralin C.2 Thuốc trừ cỏ thuốc diệt nấm bổ sung thử phương pháp (xem 6.4 6.5) Pymetrozin, Pirimacard, Pyrimethanil, Myclobutanil, Fluquinconazol, Aclonifen, Parathion, Quinoxyfen, Clopyrifos, Fenpropathrin Giới hạn phát hợp chất khoảng từ 0,27 mg/kg mdm đến 0,82 mg/kg mdm C.3 Thuốc trừ cỏ thuốc diệt nấm thêm chiết phương pháp (xem 6.4) Sự xác định thực sắc ký khí detector PN detector bẫy electron (ECD) Aclonifen, Clopyrifos, Clothalonil, Cyproconazole, Dimethoat, Endosulfan, Epoxiconazol, Fenproathrin, Fenpropimorph, Fluquinconazol, Flusilazol, Lindan, Myclobutanil, Parathion, Parathion-metyl, Pirimicard, Propiconazol, Pyrimethalin, Quinoxyfen, Terbutylazin-desetyl Giới hạn phát hợp chất khoảng từ 0,01 mg/kg m dm đến 0,1 mg/kg mdm THƯ MỤC TÀI LIỆU THAM KHẢO [1] TCVN 6910-2 (ISO 5725-2:1994) Độ xác (độ độ chụm) phương pháp đo kết đo Phần 2: Phương pháp xác định độ lặp lại độ tái lập phương pháp đo tiêu chuẩn [2] LEGLER, J., 1989: HPLC-Bestimmung von trinkwasserrrelevanten Herbiziden mit der Trennsäule Lichrospher ® PR-select B und einem Gradienten aus Acetonitril und Wasser Pers comm [3] STEINWANDTER, H., 1985: Universal On-line Method for Extracting and Isolating Pesticide Residues and Industrial Chemicals, Fresenius J Anal Chem 322, pp 752-754 [4] STEINWANDTER, H., 1987: Contributions to residue analysis in soils In Comments on pesticide extractions, Freseniuś J Anal Chem 327, pp 309-311 [5] STEINWANDTER, H., 1989: Universal extraction and clean-up methods In: Sherma J (ed) Analytical methods for pesticides and plant growth regulators Vol XVII, Academic Press, Orlando, Florida, pp 35-73 [6] STEINWANDTER, H., 1991: Contributions to residue analysis in soils II Miniaturization of the on-line exxtraction method for the determination of some triazin compounds by PR-HPLC Freseniuś J Anal Chem 399, pp 30-33 [7] VDLUFA, 1991: Die Untersuchung von Boden, Methodenbuch Bd I, Auflage, VDLUFA-Verlag, Darmstadt [8] VDLUFA, 1996: Umweltanalytik, Methodenbuch Bd VIII, Teillieferung, Methode 3.3.1: Bestimmung von Herbiziden in Böden mittels Hocholeistungs-Flüssigkeits-Chromatographie mit UVDetektion., VDLUFA-Verlag, Darmstadt [9] VDLUFA, 2000: Umweltanalytik, Methodenbuch Bd VIII, Ergänzungslieferung, Methode 3.3.2.1: Bestimmung ausgewählter PCB-Einzelkomponenten und Chlorierter Kohlenwasserstoffe in Böden, Klärschlämmen und Komposten VDLUFA-Verlag, Darmstadt [10] VDLUFA, 2000: Umweltanalytik, Methodenbuch Bd VIII, 2: Ergänzungslieferung, Methode 3.3.3.1: Bestimmung von Polycyclischen Aromatischen Kohlenwasserstoffen (PAK) in Böden, Klärschlammen und Komposten VDLUFA-Verlag, Darmstadt ... [00191 2-2 4-9 ], Atrazin-desetyl [0619 0-6 5-4 ], Atrazin-desisopropyl [0100 7-2 8-9 ], Bromaxin [00031 4-4 0-9 ], Clotoluron [01554 5-4 8-9 ], cloxuron [00198 2-4 7-4 ], Xianazin [02172 5-4 6-2 ], Diclobenin [00119 4-6 5-6 ],... [00306 0-8 9-7 ], Metolaclo [05121 8-4 5-2 ], Metoxuron [01993 7-5 9-8 ], Monuron [00015 0-6 8-5 ], Pendimetalin [04048 7-4 2-1 ], Propazin [00013 9-4 02], Propyzamit [02395 0-5 8-5 ], Sebutylazin [0072 8-6 9-3 ], Simazin... Diuron [00033 0-5 4-1 ], Ethofumesat [02622 5-7 9-6 ], Hexanzinon [05123 5-0 4-2 ], Isoproturon [03412 3-5 9-6 ], Metazaclo [06172 9-0 8-2 ], Metamitron [0413940 5-2 ], Metabenzthiazuron [01869 1-9 7-9 ], Metobromuron