Tiêu chuẩn Quốc gia TCVN 10695:2015 - EN 12742:1999

Tiêu chuẩn Quốc gia TCVN 10695:2015 về Nước rau, quả - Xác định hàm lượng axit amin tự do - Phương pháp sắc ký lỏng qui định phương pháp sắc ký lỏng để xác định hàm lượng axit amin tự do trong nước rau, quả và các sản phẩm liên quan. Mời các bạn tham khảo.

TIÊU CHUẨN QUỐC GIA TCVN 10695:2015 EN 12742:1999 NƯỚC RAU, QUẢ - XÁC ĐỊNH HÀM LƯỢNG AXIT AMIN TỰ DO - PHƯƠNG PHÁP SẮC KÝ LỎNG Fruit and vegetable juices - Determination of free amino acids content - Liquid chromatographic method Lời nói đầu TCVN 10695:2015 hồn tồn tương đương EN 12742:1999; TCVN 10695:2015 Ban kỹ thuật tiêu chuẩn quốc gia TCVN/TC/F10 Rau sản phẩm rau biên soạn, Tổng cục Tiêu chuẩn Đo lường Chất lượng thẩm định, Bộ Khoa học Công nghệ công bố NƯỚC RAU, QUẢ - XÁC ĐỊNH HÀM LƯỢNG AXIT AMIN TỰ DO - PHƯƠNG PHÁP SẮC KÝ LỎNG Fruit and vegetable juices - Determination of free amino acids content - Liquid chromatographic method Phạm vi áp dụng Tiêu chuẩn qui định phương pháp sắc ký lỏng để xác định hàm lượng axit amin tự nước rau, sản phẩm liên quan Tài liệu viện dẫn Các tài liệu viện dẫn sau cần thiết cho việc áp dụng tiêu chuẩn Đối với tài liệu viện dẫn ghi năm cơng bố áp dụng phiên nêu Đối với tài liệu viện dẫn khơng ghi năm cơng bố áp dụng phiên nhất, bao gồm sửa đổi, bổ sung (nếu có) TCVN 4851:1989 (ISO 3696:1987), Nước dùng để phân tích phòng thí nghiệm - u cầu kỹ thuật phương pháp thử Ký hiệu Trong tiêu chuẩn sử dụng ký hiệu sau: c nồng độ chất; nồng độ khối lượng; g gia tốc trọng trường (9,81 m/s2) Nguyên tắc Axit amin tách cột sắc ký trao đổi cation cách rửa giải bước với dãy dung dịch đệm lithi xitrat có nồng độ phân tử gam giá trị pH khác Sau phản ứng màu với ninhydrin, axit amin định lượng quang phổ bước sóng 570 nm (hoặc 440 nm prolin) Thuốc thử 5.1 Yêu cầu chung Chỉ sử dụng thuốc thử loại tinh khiết phân tích nước đạt loại TCVN 4851:1989 (ISO 3696:1987) 5.2 Dung dịch đệm dùng cho dịch rửa giải axit amin Chuẩn bị dung dịch đệm theo hướng dẫn nhà sản xuất Có thể sử dụng dung dịch đệm lithi xitrat có bán sẵn, có giá trị pH nồng độ phân tử ion lithi khác Nồng độ phân tử giá trị pH dung dịch đệm khác theo hướng dẫn nhà sản xuất thiết bị (ví dụ: chiều dài đường kính cột phân tích loại resin) Do khơng thể đưa chi tiết xác việc chuẩn bị dung dịch đệm khác nên việc mô tả dung dịch đệm nêu Phụ lục B để tham khảo sử dụng tiêu chuẩn 5.3 Dung dịch lithi hydroxit, c(LiOH) = 0,2 mol/l đến 0,4 mol/l Ví dụ việc chuẩn bị dung dịch để phục hồi cột nêu Phụ lục B 5.4 Thuốc thử màu Ninhydrin dung dịch 2-methoxyethanol đệm natri axetat Độ ổn định hỗn hợp thay đổi nhiều khoảng từ vài ngày đến vài tuần Ví dụ việc chuẩn bị dung dịch dùng để tạo màu nêu Phụ lục B 5.5 Đệm lithi xitrat, (pH = 2,00 đến 2,20) mẫu pha lỗng Ví dụ việc chuẩn bị dung dịch đệm nêu Phụ lục B 5.6 Dung dịch chuẩn axit amin Cân phần axit amin cho sau pha lỗng thích hợp, mức độ hấp thụ máy phân tích nằm dải tuyến tính axit amin Điều có lợi cho việc sử dụng dung dịch chuẩn có nồng độ tương tự dự kiến mẫu Nên dùng vật liệu chuẩn 1) chứng nhận qui trình Ví dụ việc chuẩn bị dung dịch thử axit amin nêu Phụ lục B Thiết bị, dụng cụ Sử dụng thiết bị dụng cụ thông thường phòng thử nghiệm thiết bị, dụng cụ sau: 6.1 Máy phân tích axit amin, có kích thước cột sau: mm x 500 mm, mm x 200 mm, 4,6 mm x 200 mm 270 mm, mm x 200 mm, mm x 100 mm 3,2 mm x 140 mm Cột làm thủy tinh thép Các cột khác nhau, mô tả trên, cho độ lệch đáng kể độ phân giải pic thời điểm phân tích 6.2 Resin sắc ký (trao đổi cation) Resin tên thương mại qui định thích hợp máy phân tích khác có bán sẵn, ví dụ: Durrum2) DC-6a, Biotronik2) BTC 3118, Biotronik2) BTC 2710, LKB Ultropac2) II, LKB Ultropac2) 8,6300/7300 Beckman2) Tiền cột có bán sẵn, có dải resin để loại bỏ vết muối amoni từ dung dịch đệm hỗ trợ để kéo dài thời gian sử dụng cột phân tích (ví dụ: Durrum2) C-3, Biotronik2) BTC-F, LKB Ultropac2) I) 6.3 Máy ly tâm, tạo lực ly tâm 000 g ống ly tâm 6.4 CHÚ THÍCH: Tốc độ quay cần gia tốc ly tâm xác tính theo Cơng thức sau: a = 11,18 x r x (n/1000)2 (1) Trong đó: a gia tốc ly tâm; r bán kính máy ly tâm đo từ điểm tâm (trục ly tâm) đến đáy ống ly tâm quay, tính xentimet (cm); n tần suất quay phút 6.4 Ống ly tâm 6.5 Bộ lọc màng, có lọc xyranh thấm nước khơng vơ trùng với cỡ lỗ 0,45 µm Cách tiến hành 7.1 Chuẩn bị mẫu thử Thông thường mẫu không cần xử lý trước phép phân tích theo phương pháp nên dựa vào thể tích, kết biểu thị lít mẫu Đối với mẫu đặc, tiến hành phân tích dựa vào thể tích, sau pha loãng đến tỷ trọng tương đối biết Trong trường hợp này, tỷ trọng tương đối phải nêu rõ Dựa vào lượng mẫu cân hệ số pha lỗng, kết biểu thị kg mẫu Đối với sản phẩm có độ nhớt cao và/hoặc có chứa lượng thịt cao thường tiến hành phép xác định theo khối lượng mẫu thử Trộn kỹ mẫu đục trước pha loãng Trộn mẫu nước với dung dịch đệm loãng (5.5) dung dịch chuẩn nội [c(không-leuxin không valin) = mmol/l, mô tả Phụ lục B] Ly tâm dung dịch 000 g 15 Cuối làm mẫu cách cho dung dịch chảy qua lọc xyranh (6.5) mẫu phù hợp để phân tích CHÚ THÍCH: Độ pha lỗng yêu cầu mẫu phụ thuộc vào thành phần mong muốn nước 1) Vật liệu cung cấp từ Viện đo lường vật liệu chuẩn, C.C.R Retieseweg, 2400 Geel, Bỉ Thông tin đưa tạo thuận tiện cho người sử dụng tiêu chuẩn không ấn định phải sử dụng chúng Có thể sử dụng sản phẩm tương tự chúng cho kết 2) Durrum, Biotronik, Beckman Ultropac tên thương mại Thông tin đưa tạo thuận tiện cho người sử dụng tiêu chuẩn khơng ấn định phải sử dụng chúng Có thể sử dụng sản phẩm tương tự chúng cho kết lượng mẫu bơm Tuy nhiên, thơng thường độ pha lỗng khoảng từ 1:1 đến 1:10 Đối với nước cam, độ pha lỗng thích hợp sử dụng 1:10 Trong trường hợp đặc biệt, ví dụ: nước anh đào nên sử dụng hai độ pha lỗng riêng biệt (ví dụ: 1:5 1:20) Độ pha loãng phải thay đổi phụ thuộc vào nồng độ axit amin khác (ví dụ: trường hợp anh đào có hàm lượng asparagin cao) Lượng mẫu bơm thường thay đổi theo hệ thống khác phụ thuộc vào độ pha loãng mẫu Tuy nhiên, thường sử dụng lượng mẫu bơm từ 20 µl đến 300 µl 7.2 Qui trình thử nghiệm Tiến hành tách axit amin theo điều kiện cụ thể thiết bị Rửa giải đến dung dịch đệm khác (5.2) có giá trị pH khác dải ion sử dụng Ví dụ dung dịch đệm ban đầu thường có nồng độ ion lithi c(LiOH) = 0,10 mol/l pH 2,94 (dung dịch đệm A Phụ lục B) Nồng độ dung dịch đệm tăng đến c(LiOH) = 1,40 mol/l dung dịch đệm có pH 3,65 (dung dịch đệm E Phụ lục B) Giữ cột nhiệt độ không đổi khoảng từ 30 °C đến 80 °C tùy thuộc vào bước tiến hành rửa giải thực hệ thống thực sử dụng Chọn pH, phân tử lithi, thời điểm chạy dung dịch đệm khác nhiệt độ cột điều kiện tách tối ưu mà thay đổi từ phòng thử nghiệm sang phòng thử nghiệm khác Phục hồi cột dung dịch lithi hydroxit (c(LiOH) = 0,2 mol/l đến 0,4 mol/l) mẫu trước cân lại cột trình chạy dung dịch đệm ban đầu Nhiệt độ cột thời điểm phản ứng tạo màu với ninhydrin, thường khoảng từ 100 °C đến 130 °C Sản phẩm phản ứng đo máy đo phổ bước sóng 570 nm tất axit amin ngoại trừ prolin phát bước sóng 440 nm Tính kết Tiến hành hiệu chỉnh hệ thống sử dụng dung dịch chuẩn axit amin, ví dụ: mơ tả Phụ lục B Sử dụng qui trình chuẩn nội diện tích pic để định lượng axit amin Nếu mẫu đặc pha lỗng đến nồng độ đơn (nồng độ ban đầu) phải ghi lại tỷ trọng tương đối mẫu có nồng độ đơn Biểu thị kết đến hai chữ số thập phân, tính mmol lit (mol/l) Độ chụm Chi tiết phép thử liên phòng thử nghiệm độ chụm phương pháp nêu Phụ lục A Các giá trị thu từ phép thử liên phòng thử nghiệm khơng áp dụng cho dải nồng độ mẫu khác với dải nồng độ mẫu nêu Phụ lục A 9.1 Độ lặp lại Chênh lệch tuyệt đối hai kết thử nghiệm đơn lẻ thu tiến hành thử vật liệu thử giống hệt người phân tích, sử dụng thiết bị, khoảng thời gian ngắn, không % trường hợp lớn giới hạn lặp lại r Các giá trị là: - axit amin có mặt nồng độ thấp c < 0,1 mmol/l: r = 0,013 mmol/l; - axit amin có mặt nồng độ cao c < 0,1 mmol/l: r = 2,8 sr; Trong đó: sr = 0,0026 + 0,0132 x c[mmol/l] 9.2 Độ tái lập Chênh lệch tuyệt đối hai kết thử nghiệm đơn lẻ thu tiến hành thử vật liệu thử giống hệt nhau, hai phòng thử nghiệm phân tích, khơng q % trường hợp lớn giới hạn tái lập R Các giá trị là: - axit amin có mặt nồng độ thấp c < 0,1 mmol/l: R = 0,019 mmol/l; - axit amin có mặt nồng độ cao c < 0,1 mmol/l: R = 2,8 sR; Trong đó: sR = 0,007 + 0,0473 x c[mmol/l] 10 Báo cáo thử nghiệm Báo cáo thử nghiệm phải bao gồm: - thông tin cần thiết để nhận biết mẫu (loại mẫu, nguồn gốc mẫu, ký hiệu); - viện dẫn tiêu chuẩn này; - ngày kiểu quy trình lấy mẫu (nếu biết); - ngày nhận mẫu; - ngày thử nghiệm; - kết thử nghiệm đơn vị biểu thị; - độ lặp lại phương pháp đánh giá; - điểm cụ thể quan sát trình thử nghiệm; - thao tác không qui định tiêu chuẩn này, xem tùy chọn, với tình bất thường ảnh hưởng đến kết thử nghiệm Phụ lục A (Tham khảo) Các kết thống kê phép thử liên phòng thử nghiệm Các thông số sau thu phép thử liên phòng thử nghiệm phù hợp với ISO 5725:1986 (Đối với tài liệu để đánh giá phương pháp, xem Thư mục Tài liệu tham khảo) Phép thử Viện Max von Pettenkofer Tổ chức Y tế liên bang, Cục hóa thực phẩm, Berlin, Đức tổ chức thực Năm tiến hành phép thử liên phòng thử nghiệm 1987 Số lượng phòng thử nghiệm Bảng A.1 - Nước cam Giá trị trung Độ lệch chuẩn Giới hạn lặp Độ lệch chuẩn Giới hạn tái bình lặp lại lại tái lập lập Axit aspartic x (mmol/l) sr (mmol/l) r (mmol/l) 2,06 0,02127 0,06 sR (mmol/l) 0,09081 (f = 36) Threonin 0,19 0,00517 1,67 0,015 0,01804 0,01352 0,82 0,05 0,01336 0,05981 10,38 0,04 0,09834 0,06045 0,25 0,28 0,00742 0,6273 1,31 0,02 0,01504 0,02094 0,23 0,04 0,00664 0,05862 0,028 0,02 0,00136 0,01082 0,065 0,004 0,00519 0,00749 0,059 0,015 0,00511 0,00693 0,12 0,014 0,00556 0,00990 0,25 0,00652 0,03 (f = 57) 0,016 0,01172 (f = 39) Phenyl alanin 0,02 (f = 57) (f = 47) Tyrosin 0,02 (f = 56) (f = 47) Leucin 0,03 (f = 55) (f = 47) Iso-Leucin 0,17 (f = 44) (f = 46) Methionin 0,06 (f = 57) (f = 36) Valin 1,78 (f = 40) (f = 47) Alanin 0,17 (f = 47) (f = 33) Glycin 0,17 (f = 44) (f = 39) Prolin 0,04 (f = 52) (f = 36) Axit glutamic 0,26 (f = 44) (f = 43) Serin R (mmol/l) 0,03 (f = 47) 0,02 0,02196 0,06 (f = 43) Axit amino butyric 3,63 0,04450 (f = 52) 0,13 0,2028 0,57 (f = 40) Ethanolamin 0,38 0,01945 (f = 49) 0,06 0,04947 (f = 33) (f = 40) Amoni Độ lệch tính theo giá trị trung bình Ornithin 0,048 0,00433 0,012 0,00692 (f = 32) Lysin 0,27 0,00971 0,10 0,03 0,00520 0,03360 4,24 0,015 0,06826 0,01258 2,80 0,19 0,04439 0,1915 0,54 (f = 52) 0,13 0,1585 (f = 43) Glutamin 0,04 (f = 57) (f = 43) Asparagin 0,10 (f = 60) (f = 47) Arginin 0,02 (f = 39) (f = 50) Histidin 0,14 0,45 (f = 52) Độ lệch tính theo giá trị trung bình f = bậc tự Bảng A.2 - Nước táo Axit aspartic Giá trị trung bình Độ lệch chuẩn lặp lại Giới hạn lặp lại x (mmol/l) sr (mmol/l) r (mmol/l) 0,77 0,01239 0,04 Độ lệch chuẩn Giới hạn tái lập tái lập R (mmol/l) sR (mmol/l) 0,04190 (f = 43) Threonin 0,064 0,00449 (f = 52) 0,013 0,00644 (f = 43) Serin 0,20 0,00493 0,27 0,014 0,01009 0,01087 0,10 0,03 0,00563 0,03614 0,033 0,016 0,00390 0,02083 0,31 0,011 0,00570 0,00551 0,047 0,016 0,00468 0,01244 0,01316 (f = 43) < 0,01 Giá trị nhỏ Iso-Leucin 0,024 0,00468 0,00595 (f = 46) - 0,01 Giá trị nhỏ Tyrosin - 0,01 Giá trị nhỏ Phenyl alanin 0,039 0,00583 0,04 (f = 52) 0,013 Leucin 0,04 (f = 42) 0,013 Methionin 0,016 (f = 55) (f = 35) Valin 0,06 (f = 42) (f = 46) Alanin 0,10 (f = 42) (f = 35) Glycin 0,03 (f = 47) (f = 35) Prolin 0,018 (f = 52) (f = 39) Axit glutamic 0,12 0,017 (f = 55) 0,016 0,01513 0,043 (f = 47) 0,00631 (f = 57) Axit amino butyric 0,15 0,018 Ethanolamin Độ lệch tính theo giá trị trung bình Amoni Độ lệch tính theo giá trị trung bình Ornithin < 0,01 Giá trị nhỏ Lysin - 0,01 Giá trị nhỏ Histidin - 0,01 Giá trị nhỏ Arginin - 0,01 Giá trị nhỏ Asparagin 3,81 0,05753 0,01887 (f = 43) (f = 52) 0,16 0,41180 (f = 39) Glutamin < 0,01 0,05 1,17 (f = 47) Giá trị nhỏ f = bậc tự Phụ lục B (Tham khảo) Chi tiết điều kiện đặc trưng thuốc thử sử dụng phân tích axit amin tự nước rau B.1 Yêu cầu chung Phụ lục đưa ví dụ dung dịch sử dụng để phân tích nước rau, Phụ lục chưa liệt kê hết danh mục dung dịch sử dụng dung dịch khác Nên tham khảo sổ tay hướng dẫn nhà sản xuất để xác định điều kiện tốt cho hệ thống cụ thể B.2 Dung dịch đệm cần cho bước pha loãng axit amin (xem 5.2) B.2.1 Dung dịch đệm A [pH = 2,94; c(LiOH) = 0,10 mol/l] Hòa tan 9,4 g trilithi xitrat tetrahydrat, 7,4 g axit xitric ngậm phân tử nước 500 ml nước Thêm vào dung dịch 30 ml metanol ml axit clohydric [c(HCl) = 10 mol/l] Pha loãng nước đến khoảng 900 ml điều chỉnh pH đến 2,94 (20 °C) axit clohydric Thêm nước đến lít nhiệt độ 20 °C Nên bảo quản dung dịch đệm phenol giọt đến giọt dung dịch pentachlorophenol etanol ( = 5,0 mg/l) Kiểm tra pH dung dịch ngày điều chỉnh đến pH 2,94, cần CẢNH BÁO: Phenol pentachlorophenol chất độc nên tiến hành tủ hút, sử dụng cảnh báo thông thường chất độc (đeo găng tay, đeo kính an tồn.v.v.) B.2.2 Dung dịch đệm B, [pH = 3,19; c(LiOH) = 0,12 mol/l] Chuẩn bị lít dung dịch đệm này, sử dụng thuốc thử sau: 11,3 g trilithi xitrat tetrahydrat, 6,0 g axit xitric ngậm phân tử nước, 50 ml metanol ml axit clohydric [c(HCl) = 10 mol/l] Tương tự qui trình mô tả trên, chuẩn bị điều chỉnh dung dịch đến pH 3,19 thêm nước đến vạch Sau đó, bổ sung chất bảo quản vào dung dịch đệm mô tả dung dịch đệm A B.2.3 Dung dịch đệm C, [pH = 3,54; c(LiOH) = 0,18 mol/l] Chuẩn bị lít dung dịch đệm sử dụng thuốc thử sau: 16,9 g of trilithi xitrat tetrahydrat, 1,8 g xitric ngậm phân tử nước ml axit clohydric [c(HCl) = 10 mol/l] Tương tự qui trình mơ tả trên, chuẩn bị điều chỉnh dung dịch đến pH 3,54 thêm nước đến vạch Sau đó, bổ sung chất bảo quản vào dung dịch đệm mô tả dung dịch đệm A B.2.4 Dung dịch đệm D, [pH = 4,23; c(LiOH) = 0,40 mol/l] Chuẩn bị lít dung dịch đệm sử dụng thuốc thử sau: 18,8 g of trilithi xitrate tetrahydrat, 8,5 g lithi clorua, 1,5 g axit boric ml axit clohydric [c(HCl) = 10 mol/l] Tương tự qui trình mơ tả trên, chuẩn bị điều chỉnh dung dịch đến pH 4,23 thêm nước đến vạch Sau đó, bổ sung chất bảo quản vào dung dịch đệm mô tả dung dịch đệm A B.2.5 Dung dịch đệm E, [pH = 3,65; c(LiOH) = 1,40 mol/l] Chuẩn bị lít dung dịch đệm sử dụng thuốc thử sau: 5,0 g of trilithi xitrat tetrahydrat, 57,0 g lithi clorua, 4,0 g axit boric ml axit clohydric [c(HCl) = 10 mol/l] Tương tự qui trình mơ tả trên, chuẩn bị điều chỉnh dung dịch đến pH 3,65 thêm nước đến vạch Sau bổ sung chất bảo quản vào dung dịch đệm mô tả dung dịch đệm A B.3 Dung dịch lithi hydroxit để phục hồi cột sắc ký, [c(LiOH) = 0,3 mol/l] (xem 5.3) Hòa tan 12,6 g lithi hydroxit lít nước B.4 Dung dịch thuốc thử màu (xem 5.4) Chuẩn bị dung dịch đệm natri axetat (pH = 5,50) sau: Bổ sung 800 ml axit axetic băng vào l nước ( 1) = 99,8 %) Trộn kỹ thêm từ từ 720 g natri axetat trihydrat Làm ấm cẩn thận dung dịch để natri axetat hòa tan hết Chỉnh pH dung dịch đến 5,50 ± 0,03 (20 °C) axit axetic thêm đến vạch l nhiệt độ 20 °C Chuẩn bị dung dịch ninhydrin (thuốc thử màu) sau: Trong bình định mức lít ban đầu (thủy tinh nâu) trộn 750 ml 2-methoxyetanol với 250 ml dung dịch đệm natri axetat (đã cho trên) Dung dịch lọc qua G1-hỗn hợp thủy tinh thêm 20 g ninhydrin Sử dụng dòng khí nitơ để hòa trộn dung dịch ninhydrin hòa tan Để chuẩn bị hỗn hợp thêm ml dung dịch titan (III) clorua [ (TiCl3) = 15 %] axit clohydric [ (HCl) = 10 %] 0,7 g hydrindantin để ổn định dung dịch Dung dịch thay đổi nhiều từ vài ngày đến vài tuần B.5 Mẫu đệm lithi xitrat (xem 5.5), [pH = 2,20; c(LiOH) = 0,10 mol/l] Chuẩn bị lít dung dịch đệm sử dụng thuốc thử sau: 9,4 g trilithi xitrat tetrahydrat, 7,4 g xitric ngậm phân tử nước, 5,0 ml 2,2'-thiodiethanol (bis-(2hydroxyethyl)-sulfit), ml axit clohydric [c(HCI) = 10 mol/l] Tương tự qui trình mơ tả dung dịch A, chuẩn bị điều chỉnh pH dung dịch đến 2,20 thêm nước đến vạch Sau đó, bổ sung chất bảo quản vào đệm mô tả chi tiết đệm A B.6 Chuẩn bị dung dịch thử axit amin B.6.1 Yêu cầu chung Các giá trị nồng độ tính mmol/l axit amin giá trị khác đưa ngoặc phù hợp với mục đích sử dụng B.6.2 Dung dịch chuẩn A Chứa amoniac (c = 2,0), ethanolamin (c = 1,0) axit amin sau: axit aspartic (1,5) threonin (1,0) serin (1,5) axit glutamic (1,5) prolin (6,0) glycin (1,0) alanin (1,5) valin (1,0) methionin (1,0) iso-leucine (1,0) leucin (1,0) tyrosin (1,0) phenylalanin (1,0) axit gamma-amino-n-butyric (1,5) ornithin (1,0) lysin (1,0) histidin (1,0) (1,0) arginin B.6.3 Dung dịch chuẩn B Chứa axit amin sau: asparagin (3,0) glutamin (1,0) B.6.4 Dung dịch chuẩn C Chứa mmol/l chất không-leucin không-valin dùng làm chất chuẩn nội Khi bảo quản - 18 °C dung dịch bền vài tháng Đối với việc hiệu chuẩn thiết bị, trộn ba dung dịch chuẩn A, B, C dung dịch ml thêm dung dịch đệm (xem 5.5) đến 10 ml THƯ MỤC TÀI LIỆU THAM KHẢO 1) Phần thể tích [1] ISO 5725:1986 1), Precision of test methods - Determination of repeatability and reproducibility for a standard test method by inter-laboratory tests (Độ chụm phương pháp thử - Xác định độ lặp lại độ tái lập phương pháp thử chuẩn phép thử liên phòng thử nghiệm) Moore, S and Stein, W.H Chromatography of amino acids on sulfonated polystyrene resins J Biol Chem (1951), 192, 663-681 Determination of free amino acids: No 57,1989 Analyses [Collection]/Intemational Federation of Fruit Juice Producers Loose-leaf edition, as of 1989 Zug: Swiss Fruit Union 1) ISO 5725:1986 hủy thay tiêu chuẩn ISO 5725 (gồm phần) chấp nhận thành tiêu chuẩn TCVN 6910 (ISO 5725)  ... gồm: - thông tin cần thiết để nhận biết mẫu (loại mẫu, nguồn gốc mẫu, ký hiệu); - viện dẫn tiêu chuẩn này; - ngày kiểu quy trình lấy mẫu (nếu biết); - ngày nhận mẫu; - ngày thử nghiệm; - kết... Dung dịch chuẩn C Chứa mmol/l chất không-leucin không-valin dùng làm chất chuẩn nội Khi bảo quản - 18 °C dung dịch bền vài tháng Đối với việc hiệu chuẩn thiết bị, trộn ba dung dịch chuẩn A, B,... methionin (1,0) iso-leucine (1,0) leucin (1,0) tyrosin (1,0) phenylalanin (1,0) axit gamma-amino-n-butyric (1,5) ornithin (1,0) lysin (1,0) histidin (1,0) (1,0) arginin B.6.3 Dung dịch chuẩn B Chứa