Tiêu chuẩn Quốc gia TCVN 8179:2009 - ISO/TS 17837:2008. Tiêu chuẩn về sản phẩm phomat chế biến - xác định hàm lượng nitơ và tính hàm lượng protein thô - phương pháp Kjeldahl. Mời các bạn cùng tham khảo.
TIÊU CHUẨN QUỐC GIA TCVN 8179 : 2009 ISO/TS 17837 : 2008 SẢN PHẨM PHOMAT CHẾ BIẾN - XÁC ĐỊNH HÀM LƯỢNG NITƠ VÀ TÍNH HÀM LƯỢNG PROTEIN THƠ - PHƯƠNG PHÁP KJELDAHL Processed cheese products - Determination of nitrogen content and crude protein calculation Kjeldahl method Lời nói đầu TCVN 8179 : 2009 hoàn toàn tương đương với ISO/TS 17837 : 2008; TCVN 8179 : 2009 Ban kỹ thuật tiêu chuẩn quốc gia TCVN/TC/F12 Sữa sản phẩm sữa biên soạn, Tổng cục Tiêu chuẩn Đo lường Chất lượng đề nghị, Bộ Khoa học Công nghệ công bố SẢN PHẨM PHOMAT CHẾ BIẾN - XÁC ĐỊNH HÀM LƯỢNG NITƠ VÀ TÍNH HÀM LƯỢNG PROTEIN THƠ - PHƯƠNG PHÁP KJELDAHL Processed cheese products - Determination of nitrogen content and crude protein calculation - Kjeldahl method CẢNH BÁO – Khi áp dụng tiêu chuẩn liên quan đến vật liệu, thiết bị thao tác gây nguy hiểm Tiêu chuẩn đưa hết tất vấn đề an toàn liên quan đến việc sử dụng chúng Người sử dụng tiêu chuẩn phải tự thiết lập thao tác an tồn thích hợp xác định khả áp dụng giới hạn qui định trước sử dụng tiêu chuẩn Phạm vi áp dụng Tiêu chuẩn qui định phương pháp xác định hàm lượng nitơ theo nguyên tắc Kjeldahl tính hàm lượng protein thơ sản phẩm phomat chế biến, có sử dụng hai phương pháp truyền thống phân hủy kín CHÚ THÍCH: Các kết protein thơ khơng xác nguồn nitơ khơng phải từ sữa có sản phẩm phomat chế biến qui định Tài liệu viện dẫn Các tài liệu viện dẫn sau cần thiết cho việc áp dụng tiêu chuẩn Đối với tài liệu viện dẫn ghi năm cơng bố áp dụng phiên nêu Đối với tài liệu viện dẫn khơng ghi năm cơng bố áp dụng phiên nhất, bao gồm sửa đổi, bổ sung (nếu có) TCVN 7149 (ISO 385), Dụng cụ thí nghiệm thuỷ tinh - Buret TCVN 7153 : 2002 (ISO 1042 : 1998), Dụng cụ thí nghiệm thuỷ tinh - Bình định mức ISO 4788, Laboratory glassware - Graduated measuring cylinders Thuật ngữ định nghĩa Trong tiêu chuẩn sử dụng thuật ngữ định nghĩa sau đây: 3.1 Hàm lượng nitơ (nitrogen content) Phần khối lượng nitơ xác định phương pháp qui định tiêu chuẩn CHÚ THÍCH: Hàm lượng nitơ tính phần trăm khối lượng 3.2 Hàm lượng protein thô (crude protein content) Phần khối lượng protein thơ tính theo qui định tiêu chuẩn CHÚ THÍCH: Hàm lượng protein thơ tính phần trăm khối lượng Nguyên tắc Phần mẫu thử phân hủy hỗn hợp axit sulfuric đậm đặc kali sulfat Dùng đồng (II) sulfat làm chất xúc tác để chuyển nitơ hữu thành amoni sulfat Kali sulfat dùng để nâng điểm sôi axit sulfuric cung cấp hỗn hợp oxi hóa mạnh để phân hủy Bổ sung lượng natri hydroxit dư vào dịch phân hủy nguội để giải phóng amoniac Amoniac giải phóng chưng cất nước vào dung dịch axit clohydric dư chuẩn độ dung dịch axit clohydric thể tích chuẩn Hàm lượng nitơ tính từ lượng amoniac tạo thành hàm lượng protein thô từ hàm lượng nitơ thu Thuốc thử Chỉ sử dụng thuốc thử loại tinh khiết phân tích nước cất nước loại ion nước có độ tinh khiết tương đương, trừ có qui định khác 5.1 Kalsố nguyên nhân là: a) amoni sulfat bị nhiễm bẩn; b) nồng độ đương lượng thực chốt chuẩn độ thấp giá trị nêu; c) việc hiệu chuẩn buret chất chuẩn độ bị sai; d) nhiệt độ chất chuẩn độ cao so với nhiệt độ chuẩn độ buret; e) tốc độ dòng chất chuẩn độ từ buret vượt tốc độ tối đa chuẩn độ có hiệu lực buret CHÚ THÍCH: Cho dù độ thu hồi tối đa theo lý thuyết không vượt 100 %, thực tế thu độ thu hồi cao độ không đảm bảo phép đo 9.4.3 Kiểm tra hiệu qui trình phân hủy sử dụng 0,16 g lysin hydroclorua 0,18 g tryptophan (5.9) với 0,67 g sacaroza (5.10) Độ thu hồi nitơ phải 98 % khối lượng Nếu độ thu hồi thấp 98 %, sau có độ thu hồi từ 99 % đến 100 % khối lượng amoni sulfat, thời gian nhiệt độ phân hủy khơng đủ có vật liệu mẫu chưa phân hủy (nghĩa chưa cháy) bình Kjeldahl Đánh giá cuối hiệu thực tốt với tham gia vào chương trình thử nghiệm thành thạo, phòng thử nghiệm thơng số thống kê tính tốn dựa mẫu sữa 9.4.4 Các giá trị thấp phép thử độ thu hồi (hoặc cao 100 % 9.4.2) cho thấy có sai sót qui trình và/hoặc nồng độ khơng dung dịch axit clohydric (5.7) 10 Tính biểu thị kết 10.1 Phương pháp tính 10.1.1 Hàm lượng nitơ Hàm lượng nitơ mẫu thử, WN tính phần trăm khối lượng, tính đến bốn chữ số thập phân, theo công thức (1) sau đây: 1,4007 Vs Vb xc t m WN = (1) ct nồng độ dung dịch axit clohydric (5.7) tính đến bốn chữ số thập phân, biểu thị mol lit (mol/l); Vb, thể tích dung dịch axit clohydric (5.7), tính xác đến 0,05 ml, dùng cho phép thử trắng (9.3), tính mililít (ml); m khối lượng phần mẫu thử (9.1), xác đến miligam, tính gam (g); Vs thể tích dung dịch axit clohydric (5.7), tính xác đến 0,05 ml, dùng cho phép xác định (9.2.2 3), tính mililit (ml) 10.1.2 Hàm lượng protein thơ Tính hàm lượng protein thô, Wp, phần trăm khối lượng, theo công thức (2) sau đây: Wp = 6,38 WN 6,38 hệ số thường chấp nhận để chuyển đổi hàm lượng nitơ hàm lượng protein thơ 10.2 Biểu thị kết Khơng làm tròn kết tiếp tính kết thử nghiệm cuối ĐIỀU QUAN TRỌNG – Điều đặc biệt giá trị sử dụng để tính tốn tiếp Một ví dụ giá trị thử nghiệm riêng lẻ thu từ phép phân tích nhiều vật liệu mẫu dùng để tính toán thống kê hiệu phương pháp sai lệch phòng thử nghiệm Một ví dụ khác, giá trị sử dụng làm chuẩn cho hiệu chuẩn thiết bị (ví dụ: máy phân tích sữa hồng ngoại) mà gíá trị thu từ nhiều mẫu dùng để tính hồi qui đơn giản hồi qui phức tạp Trong trường hợp này, giá trị thu khơng làm tròn trước chúng dùng để tính tốn tiếp 10.2.1 Hàm lượng nitơ Biểu thị kết đến bốn chữ số thập phân, cần để tính tốn tiếp Cách khác, biểu thị kết thử nghiệm cuối đến ba chữ số thập phân 10.2.2 Hàm lượng protein thô Biểu thị kết đến ba chữ số thập phân, cần để tính tốn tiếp Cách khác, biểu thị kết thử nghiệm cuối đến hai chữ số thập phân 11 Độ chụm 11.1 Phép thử liên phòng thử nghiệm Một phép thử liên phòng thực theo TCVN 6910-1 (ISO 5725-1) [2] TCVN 6910-2 (ISO 5725-2) [3] Các giá trị độ lặp lại độ tái lập loại phomat khác nhau, gồm phomat chế biến lại công bố (xem [5]) Các kết phomat chế biến phép thử đưa Phụ lục A CHÚ THÍCH: Phép thử cộng tác không đưa dải rộng hàm lượng protein tim thấy số sản phẩm phomat chế biến có bán sẵn Các giá trị thu từ phép thử liên phòng thử nghiệm khơng áp dụng cho dải nồng độ chất khác với giá trị nêu Chênh lệch tối đa phép xác định lặp lại không vượt 0,4 % khối lượng protein thô 12 Báo cáo thử nghiệm Báo cáo thử nghiệm phải ghi rõ: a) thông tin cần thiết để nhận biết đầy đủ mẫu thử; b) phương pháp lấy mẫu sử dụng, biết; c) phương pháp thử nghiệm dùng, viện dẫn tiêu chuẩn này; d) chi tiết thao tác không quy định tiêu chuẩn điều coi tuỳ ý cố mà ảnh hưởng đến kết thử; e) kết thử nghiệm thu thỏa mãn yếu cầu độ lặp lại nêu kết cuối thu Phụ lục A (Tham khảo) Kết phép thử liên phòng thử nghiệm Để thử liên phòng thử nghiệm, gồm 18 loại phomat có hàm lượng protein thô dao động từ 18,41 % đến 36,01 % 15 phòng thử nghiệm tham gia phân tích Tám phòng số có tám phòng tham gia thử nghiệm sử dụng thiết bị Kjeldahl qui định tiêu chuẩn bảy phòng sử dụng thiết bị thủy phân kín thiết bị chưng cất (xem [5]) Bảng A.1 - Tổng hợp thông số phân tích thống kê liên phòng thử nghiệm phần trăm protein thô (6,38WN) phomat chế biến xác định phương pháp Kjeldahl, trừ trường hợp ngoại lệ (xem [5]) Phomat Số phòng thử nghiệm Số phép thử Phomat chế 14 28 Trung Độ lệch Độ lệch Hệ số Hệ số Giới Giới bình chuẩn chuẩn biến biến hạn hạn tái lặp lại tái lập thiên thiên tái lặp lại lập % lặp lại lập r= Sr SR R = 2,8 2,8sr CV(r) % CV(R) SR % 18,41 0,065 0,103 0,354 0,561 0,182 0,289 biến, từ sữa nguyên chất Phomat chế biến, chất béo giảm 15 30 19,57 0,068 0,111 0,348 0,570 0,191 0,312 Phomat chế biến, không chứa chất béo, nhà sản xuất số 14 28 22,69 0,084 0,094 0,369 0,415 0,235 0,263 Phomat chế biến, không chứa chất béo, nhà sản xuất số 13 26 22,76 0,047 0,080 0,207 0,351 0,132 0,223 Phomat chế biến, không chứa chất béo, nhà sản xuất số 14 28 23,94 0,129 0,153 0,537 0,638 0,360 0,428 Thư mục tài liệu tham khảo [1] TCVN 6400 (ISO 707), Sữa sản phẩm sữa – Hướng dẫn lấy mẫu [2] TCVN 6910-1 : 2001 (ISO 5725-1 : 1994), Độ xác (độ độ chụm) phương pháp đo kết đo - Phần 1: Các định nghĩa nguyên tắc chung [3] TCVN 6910-2 : 2001 (ISO 5725-2 : 1994), Độ xác (độ độ chụm) phương pháp đo kết đo – Phần 2: Phương pháp để xác định độ lặp lại độ tái lặp phương pháp đo tiêu chuẩn [4] PAHNAS, J.K WAGNER R Gber die Ausfuhrung von Bestimmungen kleiner Stickstoffmengen nach Kjeldahl [On the determination of low nitrogen quantities after KjeldahlJ Biochem Z 1921 125 pp 253-256 [5] LVNGII J M BARBANO DM FLEMING J R Determination of the total nitrogen content of hard, semihard and processed cheese by the Kjeldahl method: Collaborative study } AOAC Int 2002, 85, pp 445-455 ... đương lượng thực chốt chuẩn độ thấp giá trị nêu; c) việc hiệu chuẩn buret chất chuẩn độ bị sai; d) nhiệt độ chất chuẩn độ cao so với nhiệt độ chuẩn độ buret; e) tốc độ dòng chất chuẩn độ từ buret... 11.1 Phép thử liên phòng thử nghiệm Một phép thử liên phòng thực theo TCVN 691 0-1 (ISO 572 5-1 ) [2] TCVN 691 0-2 (ISO 572 5-2 ) [3] Các giá trị độ lặp lại độ tái lập loại phomat khác nhau, gồm phomat... TCVN 6400 (ISO 707), Sữa sản phẩm sữa – Hướng dẫn lấy mẫu [2] TCVN 691 0-1 : 2001 (ISO 572 5-1 : 1994), Độ xác (độ độ chụm) phương pháp đo kết đo - Phần 1: Các định nghĩa nguyên tắc chung [3] TCVN