Tiêu chuẩn Quốc gia TCVN 6507-6:2015 quy định các nguyên tắc để chuẩn bị các mẫu được lấy ở giai đoạn sản xuất ban đầu từ trại chăn nuôi đến cơ sở giết mổ và huyền phù của chúng để kiểm tra vi sinh vật, khi cần chuẩn bị các mẫu theo các phương pháp khác với phương pháp nêu trong TCVN 6507-1 (ISO 6687-1).
thể gửi đến phịng thử nghiệm Khơng nên tiếp nhận tồn thân thịt phịng thử nghiệm khơng có phịng mổ xác chun dụng Các quan nội tạng sử dụng để phân tích thay đổi tùy thuộc vào loài vi sinh vật cần phát hiện/định lượng 9.2 Các quy trình thực mẫu lấy từ sở giết mổ 9.2.1 Lợn 9.2.1.1 Các mẫu manh tràng Khử trùng bề mặt manh tràng chất khử trùng thích hợp (như nêu 6.2.4 TCVN 6404:2008 (ISO 7218:2007) tiệt trùng sắt nung đỏ lửa Sử dụng thiết bị vô trùng để tạo vết mổ loại bỏ mẫu, thường từ 10 g đến 25 g bề mặt thìa dao trộn vơ trùng Cho mẫu vào vật chứa vô trùng Tiếp tục thực theo quy định 9.1.1.5 Có thể gộp năm mẫu manh tràng riêng rẽ 9.2.1.2 Lượng chứa manh tràng trực tràng Xem 9.1.1.6 12 TCVN 6507-6:2015 9.2.1.3 Hạch bạch huyết màng treo ruột (ruột tịt, đuôi, hỗng tràng đầu gần hạch bạch huyết màng treo ruột) Loại bỏ phần mỡ dính mơ liên kết khỏi bề mặt hạch bạch huyết Khử trùng bề mặt hạch bạch huyết cẩn thận lửa nhúng chìm chất khử trùng thích hợp để khơ Dùng kéo dao mổ kẹp vô trùng cắt thành miếng nhỏ, cân cho vào vật chứa vô trùng Làm mềm hạch bạch huyết cách đập túi chất dẻo vơ trùng bền có chứa mẫu sử dụng cát vô trùng, chày cối Bổ sung ml dung dịch pha lỗng thích hợp vào gam mẫu thử 9.2.1.4 Amiđan Khử trùng bề mặt amiđan cách ngâm nước sôi dung dịch khử trùng thích hợp để khơ Sử dụng kéo dao mổ kẹp vô trùng cắt thành miếng nhỏ làm mềm, cân cho vào vật chứa vô trùng Cho ml dung dịch pha lỗng thích hợp vào gam mẫu thử 9.2.2 Động vật nhai lại, ngựa, thỏ vật nuôi lấy thịt khác 9.2.2.1 Lượng chứa manh tràng trực tràng Xem 9.1.1.6 9.2.2.2 Hạch bạch huyết màng treo ruột (manh tràng, đuôi, hỗng tràng gần hạch bạch huyết màng treo ruột) Xem 9.2.1.3 9.2.3 Gia cầm 9.2.3.1 Lượng chứa manh tràng Gộp lượng chứa 30 manh tràng sau: Dùng kéo vô trùng, cắt manh tràng cịn ngun vẹn trộn tồn lượng chứa trước lấy phần mẫu thử Cách khác: dùng kéo vơ trùng cắt manh tràng cịn ngun vẹn gia cầm Sử dụng vòng bơm 10 μl tăm vô trùng chuyển phần lượng chứa manh tràng vào ống có chứa thể tích nhỏ dung dịch pha lỗng (đến ml) Lặp lại quy trình để gộp mẫu cịn lại Trộn kỹ mẫu gộp 13 TCVN 6507-6:2015 9.2.3.2 Manh tràng bao gồm đoạn nối ruột tịt Quy trình thường áp dụng cho Salmonella gia cầm lấy thịt ni đẻ Có thể gộp 30 manh tràng gia cầm khác Khử trùng bề mặt manh tràng lửa cắt manh tràng thành nhiều miếng kéo vô trùng Cân cho ml dung dịch pha loãng vào gam mẫu 9.3 Quy trình mẫu lấy từ gia cầm trại giống vận chuyển từ trại giống đến trại chăn nuôi Các mẫu lấy để phát Salmonella Có thể sử dụng phương pháp cụ thể nêu TCVN 4829 (ISO 6579) 9.3.1 Lớp lót lồng ấp Cho vào túi chất dẻo vơ trùng năm lớp lót ổ để có m2 diện tích bề mặt, bổ sung từ lít đến lít mơi trường tăng sinh sơ làm ấm trước đến nhiệt độ phòng (hoặc tốt đến 37 oC thể tích dung dịch pha loãng lớn) 9.3.2 Vỏ trứng vỡ Nghiền nát trộn mẫu vỏ trứng sau bổ sung mơi trường tăng sinh sơ với độ pha loãng thập phân, ví dụ: lấy phần mẫu thử 25 g bổ sung 225 ml môi trường tăng sinh sơ 9.3.3 Lông tơ lồng ấp Để tránh việc xử lý lơng tơ phịng thử nghiệm hạn chế nguy lây nhiễm chéo, nên thu lượng lông tơ cần phân tích vào túi bình đủ lớn để bổ sung thể tích khối lượng mơi trường cần thiết phịng thử nghiệm bình cho phép chuyển tồn mẫu thử mà không làm phát tán lông tơ 9.3.4 Phân su Thông thường phòng thử nghiệm nhận phân su 250 đến 300 gà Bổ sung lượng/số lượng mơi trường thích hợp theo tỉ lệ từ đến 9.3.5 Mẫu lấy lồng ấp Tiến hành theo 9.1.1.1 (dùng miếng gạc vải) 9.3.6 Mẫu chất thải ướt nơi ấp trứng Tiến hành mẫu vỏ trứng vỡ (9.3.2) mẫu lấy miếng gạc vải (xem 9.1.1.1), sử dụng để lấy mẫu 14 TCVN 6507-6:2015 9.3.7 Phôi chết vỏ 9.3.7.1 Trứng ấp có vỏ nguyên vẹn Lượng chứa bên trứng phải lấy vô trùng Vỏ tiệt trùng cách ngâm nước sôi từ s đến s ngâm dung dịch khử trùng thích hợp từ đến min, đảm bảo trứng chất khử trùng nhiệt độ môi trường để tránh hấp thu chất khử trùng Sau khử trùng, để trứng khô, bóc vỏ kiểm tra lượng chứa bên - Nếu có phơi phát triển mẫu phải chuẩn bị giống gà từ đến ba ngày tuổi (xem 9.1.2.2.1) - Nếu phôi chưa phát triển gộp lượng chứa 30 trứng vào túi chất dẻo vật chứa đủ lớn vơ trùng để tiếp tục đồng hóa pha lỗng phần mẫu thử Một vài trứng khơng có phơi phát triển chứa lượng lớn vi khuẩn đích (Salmonella) mà khơng bị nhiễm bẩn thứ cấp khơng có sinh vật liên quan Các chất đồng kiểm tra cách cấy đĩa trực tiếp tăng sinh tăng sinh Khi kiểm tra phương pháp tăng sinh, pha lỗng mẫu thể tích mơi trường thích hợp (tỉ lệ từ đến 9) 9.3.7.2 Trứng ấp bị vỡ vỏ Đây trứng bị rỗ khí: vỏ trứng khơng cịn ngun vẹn, vỏ bắt đầu vỡ gà không chui khỏi vỏ Khơng cần thiết khử trùng bên ngồi vỏ Lượng chứa bên trứng chuẩn bị theo cách gà từ đến ba ngày tuổi (9.1.2.2.1) 9.3.8 Gà loại Xem 9.1.2.2.1 10 Các dung dịch pha loãng thập phân Chuẩn bị dung dịch pha loãng thập phân theo TCVN 6507-1 (ISO 6887-1) 15 TCVN 6507-6:2015 Thư mục tài liệu tham khảo [1] TCVN 4829 (ISO 6579), Vi sinh vật thực phẩm thức ăn chăn nuôi – Phương pháp phát Salmonella đĩa thạch [2] TCVN 9716 (ISO 8199), Chất lượng nước – Hướng dẫn chung đếm vi sinh vật nuôi cấy 16 ... trứng chuẩn bị theo cách gà từ đến ba ngày tuổi (9.1.2.2 .1) 9.3.8 Gà loại Xem 9.1.2.2.1 10 Các dung dịch pha loãng thập phân Chuẩn bị dung dịch pha loãng thập phân theo TCVN 650 7-1 (ISO 688 7-1 )... (ISO 688 7-1 ) 15 TCVN 650 7-6 :2015 Thư mục tài liệu tham khảo [1] TCVN 4829 (ISO 6579), Vi sinh vật thực phẩm thức ăn chăn nuôi – Phương pháp phát Salmonella đĩa thạch [2] TCVN 9716 (ISO 8199), Chất... Trộn kỹ mẫu gộp 13 TCVN 650 7-6 :2015 9.2.3.2 Manh tràng bao gồm đoạn nối ruột tịt Quy trình thường áp dụng cho Salmonella gia cầm lấy thịt nuôi đẻ Có thể gộp 30 manh tràng gia cầm khác Khử trùng