Tiêu chuẩn ngành 10 TCN 228-1995 quy định các phương pháp xác định dư lượng thuốc trừ sâu lindan hoặc DDT còn tồn động trên rau quả. Quy trình lấy mẫu và bảo quản theo Quyết định 150/NN-BVTV-QĐ ngày 10/3/1995 của Bộ Nông nghiệp và CNTP nay là Bộ Nông nghiệp và Phát triển nông thôn.
TIÊU CHUẨN NGÀNH 10 TCN 22895 RAU QUẢ PHƯƠNG PHÁP XÁC ĐỊNH DƯ LƯỢNG THUỐC TRỪ SÂU LINDAN HOẶC DDT Vegetable or fruit Method for determination of residue of Lindan or residue of DDT 1. Lấy mẫu và bảo quản mẫu: Theo Qui định ban hành kèm theo Quyết định 150/NNBVTVQĐ ngày 10/3/1995 của Bộ Nơng nghiệp và CNTP nay là Bộ Nơng nghiệp và Phát triển nơng thơn 2. Phương pháp xác định: 2.1. Qui định chung: 2.1.1. Thuốc thử dùng trong các phép phân tích phải là loại tinh khiết phân tích. 2.1.2. Nước cất phải là nước cất theo TCVN 211777 2.1.3. Tất cả các phép xác định phải tiến hành song song với ít nhất hai lượng cân mẫu thử 2.1.4. Dư lượng thuốc trừ sâu Lindan hoặc DDT là kết quả trung bình của các lượng cân mẫu thử 2.2. Xác định dư lượng Lindan hoặc DDT: 2.2.1 Ngun tắc: Dư lượng của thuốc trừ sâu Lindan hoặc DDT được chiết ra khỏi mẫu bằng dung mơi axetonitril. Thuốc được hồ tan trong ete dầu hoả, sau đó được làm sạch qua cột florisil và xác định bằng máy sắc ký khí với detector cộng kết điện tử (ECD). Kết quả được tính dựa trên sự so sánh giữa tỷ số số đo diện tích hoặc chiều cao của píc mẫu thử và píc mẫu chuẩn 2.2.2. Dụng cụ, hố chất và thiết bị: - Ống đong dung tích 100ml, 250ml, 500ml; - Bình định mức dung tích 5ml, 10ml; - Bình cầu dung tích 250ml, 500ml; - Pipet 1ml; Quyết định ban hành số 54.NN.QLCN/QĐ ngày 20 tháng 11 năm 1995 của Bộ Nơng nghiệp & PTNT - Phễu lọc Buchner; - Cột làm sạch (15mm x 200mm), khố teflon; - Cốc nghiền dung tích 1 lít; - Phễu chiết dung tích 1 lít, khố teflon; - Phễu thuỷ tinh; - Giấy lọc băng đỏ; - Bông thuỷ tinh; - Microxilanh 10 l; - Cột sắc ký khí thuỷ tinh (3mm x 2m) được nhồi 5% Silicon SE54 trên Shimalite WAW DMCS, 80100 mesh; - Axetonitril; - Ete dầu hoả; - Ete etylic; - nHexan; - Dung dịch rửa giải: 6% ete etylic trong ete dầu hoả; - Florisil sấy ở 130 oC trong 5 giờ, bảo quản trong bình hút ẩm; - Natri sunphat khan hoạt hố ở 500 oC trong 68 giờ, bảo quản trong bình hút ẩm; - Natri clorua; - Celite 545; - Các chất chuẩn Lindan 99%, DDT 99%; - Máy nghiền (máy xay sinh tố); - Cân phân tích ( độ chính xác 0,01mg); - Tủ sấy; - Hệ thống chưng cất quay chân khơng; - Máy sắc ký khí với detector cộng kết điện tử và máy ghi tích phân 2.2.3. Chuẩn bị dung dịch mẫu chuẩn: Cân khoảng 10mg chất chuẩn Lindan hoặc DDT chính xác tới 0,01mg vào bình định mức 10ml. Định mức tới vạch bằng nhexan, được dung dịch gốc, nồng độ 1mg/ml Dùng pipet lấy chính xác 1ml dung dịch gốc vào bình định mức 10ml, định mức tới vạch bằng nhexan, được dung dịch nồng độ 0,1mg/ml Bằng phương pháp pha lỗng liên tục từ dung dịch có nồng độ thu được, được dãy dung dịch chuẩn 2.2.4. Chuẩn bị dung dịch mẫu thử: 2.2.4.1. Chiết suất mẫu thử: Cân khoảng 50g rau, quả (mm) chính xác tới 0,1g vào cốc nghiền. Thêm vào đó 200ml axetonitril (V1) và 10g celite. Nghiền 5 phút. Lọc qua phễu lọc Buchner vào bình cầu 500ml Lấy 100ml dung dịch lọc (V2) vào phễu chiết. Thêm vào đó 100ml ete dầu hoả (V 3). Lắc 12 phút. Cho tiếp 10ml dung dịch natri clorua bão hồ và 600ml nước cất. Lắc đều hỗn hợp trong 3045 giây. Để n cho tách lớp. Bỏ phần nước và chiết tiếp hai lần, mỗi lần với 100ml nước cất Chuyển phần dung mơi (V4) qua phễu lọc chứa 10g natri sunphat khan vào bình cầu 250ml. Cơ cạn còn 5010ml bằng hệ thống chưng cất quay chân khơng ở 45oC 2.2.4.2. Làm sạch mẫu thử: - Cột làm sạch gồm: Bông thuỷ tinh 4g florisil 2g natrisunphat khan - Làm ẩm cột bằng 40 50ml ete dầu hoả. Chuyển dung dịch chiết đã cô cạn vào cột - Rửa giải bằng 200ml dung dịch rửa giải với tốc độ 5ml/phút. Cơ cạn dung dịch trên bằng hệ thống chưng cất quay chân khơng ở 45 oC - Chuyển dung dịch rửa giải đã cơ cạn vào bình định mức 5ml. Định mức đến vạch bằng nhexan (VE) 2.2.5. Điều kiện phân tích: - Nhiệt độ buồng bơm mẫu : 270 oC - Nhiệt độ cột : 230 oC - Nhiệt độ detector : 270 oC - Tốc độ khí mang (nitơ 99,999%) : 50ml/phút - Dòng detector : 2nA 2.2.6. Tiến hành phân tích trên máy: Bơm dung dịch chuẩn (Vc) và dung dịch mẫu (Vm), lặp lại 3 lần 2.2.7. Tính tốn kết quả: Dư lượng thuốc trừ sâu Lindan hoặc DDT trong mẫu (X) được tính theo cơng thức: A m xVc x C c xVe x V xV x P X (mg / kg ) = A c x Vm x m m xV xV x R Trong đó: Am: Số đo trung bình diện tích hoặc chiều cao của pic mẫu thử AC: Số đo trung bình diện tích hoặc chiều cao của pic mẫu chuẩn VC: Thể tích dung dịch mẫu chuẩn bơm vào máy, l Vm: Thể tích dung dịch mẫu thử bơm vào máy, l Cc: Nồng độ dung dịch mẫu chuẩn bơm vào máy, g/ml VE: Thể tích cuối của dung dịch mẫu thử, ml mm: Khối lượng mẫu thử, g V1: Thể tích dung mơi dùng để chiết suất mẫu thử, ml V2: Thể tích dung dịch lọc dùng để chiết lỏng lỏng, ml V3: Thể tích dung mơi dùng để chiết lỏng lỏng, ml V4: Thể tích dung mơi sau khi chiết lỏng lỏng, ml P: Độ tinh khiết của chất chuẩn, % R: Hiệu suất thu hồi của phương pháp, % 2.2.8. Hiệu suất thu hồi và giới hạn phát hiện của phương pháp: Hiệu suất thu hồi của phương pháp: 70110% Giới hạn phát hiện của phương pháp: 0,0002mg/kg. ... Máy sắc ký khí với detector cộng kết điện tử và máy ghi tích phân 2.2.3. Chuẩn bị dung dịch mẫu chuẩn: Cân khoảng 10mg chất chuẩn Lindan hoặc DDT chính xác tới 0,01mg vào bình định mức 10ml. Định mức tới vạch bằng nhexan, được dung dịch gốc, nồng độ 1mg/ml... axetonitril (V1) và 10g celite. Nghiền 5 phút. Lọc qua phễu lọc Buchner vào bình cầu 500ml Lấy 100 ml dung dịch lọc (V2) vào phễu chiết. Thêm vào đó 100 ml ete dầu hoả (V 3). Lắc 12 phút. Cho tiếp 10ml dung dịch natri clorua bão hồ và 600ml nước cất. Lắc... Dùng pipet lấy chính xác 1ml dung dịch gốc vào bình định mức 10ml, định mức tới vạch bằng nhexan, được dung dịch nồng độ 0,1mg/ml Bằng phương pháp pha lỗng liên tục từ dung dịch có nồng độ thu được, được dãy dung dịch chuẩn 2.2.4. Chuẩn bị dung dịch mẫu thử: