Mục đích nghiên cứu của bài viết nhằm đánh giá biến đổi siêu cấu trúc ống sinh tinh (OST) của bệnh nhân (BN) vô tinh thể sinh tinh nửa chừng. Mời các bạn cùng tham khảo nội dung chi tiết tài liệu.
TẠP CHÍ Y - DƢỢC HỌC QUÂN SỰ SỐ CHUYÊN ĐỀ HÌNH THÁI HỌC-2017 ĐÁNH GIÁ BIẾN ĐỔI SIÊU CẤU TRÚC ỐNG SINH TINH CỦA BỆNH NHÂN VÔ TINH THỂ SINH TINH NỬA CHỪNG Đỗ Thị Hồng Hải*; Trịnh Quốc Thành** TÓM TẮT Mục tiêu: đánh giá biến đổi siêu cấu trúc ống sinh tinh (OST) bệnh nhân (BN) vô tinh thể sinh tinh nửa chừng Kết quả: độ dày lớp vỏ xơ OST tăng, tế bào biểu mơ tinh thối hóa, xuất khơng bào với nhiều kích thước to nhỏ khác bào tương, có mảnh vỡ bong khỏi biểu mơ sinh tinh * Từ khóa: Ống sinh tinh; Vơ tinh thể sinh nửa chừng; Siêu cấu trúc Evaluating the Changes of Superstructure of Spermatophores in Azoospermia Patients with Maturation Arrest Summary Objectives: To evaluate the changes of superstructure spermatophores of azoospermia in patients with maturation arrest Results: Spermatoconstriction of epithelium increases, epithelial cells degenerate, apparent vacuoles appear in different sizes in cytoplasm, there is debris peeling off the epithelial epithelium * Keywords: Azoospermia; Maturation arrest; Superstructure ĐẶT VẤN ĐỀ Vô sinh nam nhiều nguyên nhân gây ra, ngun nhân vơ tinh hay khơng có tinh trùng tinh dịch (azoospermia) chiếm tỷ lệ đáng kể Vô tinh thể sinh tinh nửa chừng vô tinh không tắc, biểu tinh hoàn tạo tinh trùng bị dừng lại giai đoạn đó, giai đoạn muộn thường dừng tinh tử, giai đoạn sớm dừng tinh bào I II khơng có tinh trùng trưởng thành Việc nghiên cứu cấu trúc OST BN azoospermia nói chung BN vơ tinh thể sinh tinh nửa chừng có ý nghĩa lâm sàng, đánh giá khả sinh tinh, khả thu tinh trùng, nuôi cấy tinh trùng giúp tiên lượng điều trị muộn, vô sinh đạt hiệu cao, đem lại hạnh phúc cho cặp vợ chồng Vì vậy, tiến hành nghiên cứu nhằm: Bước đầu đánh giá biến đổi siêu cấu trúc OST BN vô tinh thể sinh tinh nửa chừng ĐỐI TƢỢNG VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU Đối tƣợng nghiên cứu 50 BN nam vô tinh thể sinh tinh nửa chừng chẩn đốn lâm sàng mơ bệnh học Trung tâm Đào tạo Nghiên cứu Công nghệ phôi, Học viện Quân y * Đại học điều dưỡng Nam Định ** Học viện Quân y Người phản hồi (Corresponding): Đỗ Thị Hồng Hải (dohonghai1979@gmail.com) Ngày nhận bài: 25/07/2017; Ngày phản biện đánh giá báo: 25/08/2017 Ngày báo đăng: 30/08/2017 109 TẠP CHÍ Y - DƢỢC HỌC QUÂN SỰ SỐ CHUYÊN ĐỀ HÌNH THÁI HỌC-2017 * Tiêu chuẩn lựa chọn BN: BN azoospermia không tắc, xuất tinh ngược dòng * Tiêu chuẩn loại trừ: hội chứng có tế bào Sertoli (SCOS); sinh thiết tinh hồn có đủ giai đoạn sinh tinh Phƣơng pháp nghiên cứu * Thiết kế nghiên cứu: nghiên cứu hồi cứu kết hợp tiến cứu, mô tả thực nghiệm lâm sàng * Nội dung nghiên cứu: Đo thể tích tinh hoàn theo tiêu chuẩn WHO (2010), làm xét nghiệm tinh dịch đồ theo tiêu chuẩn WHO (2010), kiểm tra chẩn đốn vơ tinh sinh thiết tinh hồn, làm tiêu siêu cấu trúc KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU Đặc điểm chung đối tƣợng nghiên cứu Bảng 1: Tuổi Số ƣợng (n) Tỷ lệ (%) 20 - 29 16,0 30 - 39 31 62,0 40 - 49 18,0 ≥ 50 4,0 Chỉ tiêu Độ tuổi (năm) Tỷ lệ (%) < năm 18 36,0 - năm 27 54,0 ≥ 10 năm 10,0 Thời gian 110 Chỉ tiêu n X SD Min - max (ml) Thể tích tinh hồn (ml) 50 11,9 3,3 - 20 ml Thể tích trung bình tinh hoàn đối tượng nghiên cứu 11,9 ± 3,3 ml, thấp ml cao 20 ml Siêu cấu trúc OST * Lớp vỏ xơ OST: 35,9 7,2 23 - 58 Bảng 2: Thời gian vô sinh phân mức thời gian vô sinh Số ƣợng (n) Bảng 3: Thể tích tinh hồn đối tượng nghiên cứu Tuổi trung bình ( ± SD) Min - max Tuổi cao 58 năm, thấp 23 tuổi Tỷ lệ BN độ tuổi 30 - 39 chiếm tỷ lệ cao Chỉ tiêu Thời gian vô sinh dài 23 năm Tỷ lệ BN có thời gian vô sinh từ - năm chiếm tỷ lệ cao Năm trung bình ( ± SD) Min - max 5,9 3,7 - 23 Hình 1: Siêu cấu trúc lớp vỏ xơ OST (x1200) (1: Màng đáy; 2: Tinh nguyên bào) Trên kính hiển vi điện tử (x1.200) thấy biểu siêu cấu trúc OST thay đổi nhiều: độ dày lớp vỏ xơ OST tăng lên, số lượng, kích thước bó sợi collagen tế bào liên kết tăng lên TẠP CHÍ Y - DƢỢC HỌC QUÂN SỰ SỐ CHUYÊN ĐỀ HÌNH THÁI HỌC-2017 * Tế bào dòng tinh: Dưới kính hiển vi điện tử truyền qua thấy bào tương hầu hết tế bào dòng tinh xuất khơng bào với nhiều kích thước khác Một số OST thấy tinh tử hình thành túi cực đầu Hình 4: Hình ảnh siêu cấu trúc tinh bào II (x1.200) (1: Nhân; 2: Bào tương) Hình 2: Siêu cấu trúc tế bào dòng tinh (x1.000) (1: Màng đáy; 2: Tế bào Sertoli; 3: Tinh bào I) Hình 5: Khơng bào bào tương tế bào dòng tinh (x1.200) (1: Tinh bào II; 2: Tinh tử; 3: Khơng bào) Hình 3: Hình ảnh siêu cấu trúc tinh bào I (x2.000) (1: Nhân; 2: Bào tương) Hình 6: Hình ảnh siêu cấu trúc tinh tử (x2.500) (1: Nhân; 2: Bào tương; 3: Túi cực đầu) 111 TẠP CHÍ Y - DƢỢC HỌC QUÂN SỰ SỐ CHUYÊN ĐỀ HÌNH THÁI HỌC-2017 Tế bào Sertoli Hình 7: Hình ảnh siêu cấu trúc tế bào Sertoli (x1.500) (1: Nhân; 2: Bào tương; 3: Khơng bào) Dưới kính hiển vi điện tử, bào tương tế bào Sertoli xuất không bào Màng nhân gấp nếp nhiều BÀN LUẬN Đặc điểm chung Tỷ lệ vô sinh kể nam nữ tăng cao cộng đồng, đa số trường hợp vô sinh giai đoạn sinh đẻ Trong nghiên cứu chúng tôi, 50 BN nam vô tinh thể sinh tinh nửa chừng có độ tuổi trung bình 35,9 7,2; trẻ 23 tuổi cao tuổi 58 tuổi (trong lứa tuổi 30 - 39 chiếm tỷ lệ cao nhất: 62%) Đây lứa tuổi đ trưởng thành công việc, kinh tế, góp sức cho xã hội ổn định gia đình Trong sống hạnh phúc gia đình, việc muộn vơ tinh ảnh hưởng nhiều đến tâm lý, chất lượng sống BN Mặt khác, kết nghiên cứu cho thấy (bảng 2), thời gian vô sinh nghiên cứu 5,9 3,7 năm; thời gian vơ 112 sinh từ - năm chiếm tỷ lệ cao (54,0%) Một số nghiên cứu cho thấy thời gian vơ sinh dài, nguy có khả có giảm tuổi cao biến đổi cấu trúc OST bị ảnh hưởng tăng, thay đổi hormon, FSH làm cho chất lượng tinh trùng, khả sinh tinh bị ảnh hưởng dẫn đến kết điều trị vô sinh khả có giảm Thể tích tinh hồn tiêu quan trọng đánh giá trình sinh tinh Thể tích trung bình tinh hồn BN nghiên cứu 11,9 3,3 ml (bảng 3), thấp giới hạn bình thường người Việt Nam (12 - 30 ml) Kết thấp so với nghiên cứu Ziaee S.A CS (2006) (17,5 ± 3,52 ml) Tuy nhiên, thể tích tinh hồn phụ thuộc vào chủng tộc Do vậy, Việt Nam, cần có nghiên cứu với cỡ mẫu lớn để đánh giá thể tích tinh hồn liên quan đến vơ tinh nói chung, BN vơ tinh thể sinh tinh nửa chừng nói riêng Siêu cấu trúc OST Quan sát kính hiển vi điện tử thấy lớp vỏ xơ OST dày lên Biểu cấu trúc số lượng, kích thước bó sợi collagen tế bào liên kết tăng lên Điều phù hợp với nghiên cứu Camatini M CS (1978) siêu cấu trúc tinh hoàn BN vô tinh: thành OST dày lên xuất nhiều sợi collagen số lượng tế bào liên kết Dưới kính hiển vi điện tử thấy khơng bào xuất với nhiều kích thước to nhỏ khác bào tương tế bào dòng tinh tế bào Sertoli Đây biểu trình thối hóa tế bào biểu mơ OST TẠP CHÍ Y - DƢỢC HỌC QUÂN SỰ SỐ CHUYÊN ĐỀ HÌNH THÁI HỌC-2017 Tế bào Sertoli loại tế bào cấu tạo nên biểu mô OST Tế bào Sertoli có vai trò lớn định đến q trình sinh tinh Sự bất thường cấu trúc tế bào Sertoli dẫn đến bất thường trình sinh tinh Ở người bình thường trưởng thành, bào tương tế bào Sertoli bao gồm bào quan thông thường Tế bào Sertoli có hình trụ kéo dài từ màng đáy đến lòng OST, nhân tế bào lớn nằm gần màng đáy, có hình tháp, sáng màu, có ba hạt nhân, màng nhân có nhiều vết lõm Trong nghiên cứu này, tế bào Sertoli có cấu trúc gần tương tự tế bào người bình thường trưởng thành: nhân hình tháp nằm gần màng đáy, có hạt nhân màng nhân gấp nếp nhiều Tuy nhiên, số lượng tế bào Sertoli giảm đáng kể so với người bình thường trưởng thành Điều cho thấy mối quan hệ chặt chẽ số lượng tế bào Sertoli với trình sinh tinh Nghiên cứu Sherpe R.M (2003) cho số lượng tế bào Sertoli không ảnh hưởng đến trình sinh tinh mà ảnh hưởng đến kích thước tinh hồn Trên kính hiển vi điện tử (hình 7), tương bào tế bào Sertoli xuất không bào, màng nhân gấp nếp, hạt nhân thấy không thấy, bào tương không phân cực, bào quan thưa thớt, tế bào Sertoli chưa biệt hóa hồn tồn, chúng tơi thấy thể tích nhân tế bào nhỏ so với bình thường Ngồi ra, số trường hợp (nhất BN khơng có tinh tử tinh bào II OST) không thấy thể thực bào bào tương tế bào Sertoli Trong đó, tế bào Sertoli người sinh tinh bình thường: tế bào bao gồm bào quan thơng thường, có hình trụ kéo dài từ màng đáy đến lòng OST, vùng bào tương gần màng đáy có nhiều vi tơ xếp song song với nhau, khu vực đỉnh tế bào có hệ thống lưới nội bào, có hạt máy Golgi Tế bào xuất nhiều nhánh ngón, nhân tế bào phần lớn nằm gần màng đáy, có hình tháp, xám màu chứa nhiễm sắc có ba hạt nhân lớn, rõ rệt, thực bào bào tương Hình 8: Tế bào Sertoli bình thường (Holstein A.F CS, 2003) Tế bào Sertoli người bình thường có đầy đủ bào quan tăng dự trữ giọt lipid bào tương thay đổi tăng dần theo tuổi Ở tế bào Sertoli, khung tế bào phát triển Thành phần tạo nên khung tế bào bao gồm: vi ống, vi tơ actin, vi tơ trung gian, chúng có tác dụng giữ hình dạng tế bào, giữ vị trí bào quan tế bào dòng tinh Ngồi ra, chúng có tác dụng quan trọng vận chuyển tế bào dòng tinh từ phía sát màng đáy tới lòng OST Trong nghiên cứu chúng tơi, tiêu mô bệnh học thấy khung tế bào Sertoli tổn thương, tạo mảnh vỡ bong khỏi biểu mơ sinh tinh 113 TẠP CHÍ Y - DƢỢC HỌC QUÂN SỰ SỐ CHUYÊN ĐỀ HÌNH THÁI HỌC-2017 Qua nghiên cứu siêu cấu trúc OST 50 BN vô tinh thể sinh tinh nửa chừng, nhận thấy: Trịnh Thế Sơn Nghiên cứu đặc điểm hình thái OST BN khơng có tinh trùng tinh dịch, đánh giá hiệu số phương pháp hỗ trợ sinh sản, Luận án Tiến sỹ Y học Học viện Quân y Hà Nội 2011 - Độ dày lớp vỏ xơ OST tăng, số lượng, kích thước bó sợi collagen, tế bào liên kết tăng lên Camatini M, Faleri M, Franchi E Testicular biopsy of secretory azoospermia: electron and light microscopic analysis Arch Androl 1978, (4), pp.281-289 - Các tế bào biểu mô tinh tế bào Sertoli thối hóa xuất khơng bào với nhiều kích thước to nhỏ khác bào tương tế bào dòng tinh, khung tế bào Sertoli tạo mảnh vỡ bong khỏi biểu mô sinh tinh Holstein A.F, Schulze W, Davidoff M Understanding spermatogenesis is a prerequisite for treatment Reproductive Biology and Endocrinology 2003, pp.1-107 TÀI LIỆU THAM KHẢO Sperpe R.M, McKinnell C, Fisher J.S Proliferation and functional maturation of Sertoli cell, and their relevance to disorders of testis function in adulthood Reproduction 2003, 125, pp.769-784 KẾT LUẬN Nguyễn Kim Giao Hiển vi điện tử truyền qua Nhà xuất Y học 2004 Nguyễn Khắc Liêu Tìm hiểu nguyên nhân vô sinh điều trị Viện Bảo vệ Bà mẹ Trẻ sơ sinh Báo cáo khoa học Hội nghị Vô sinh Huế 1998 114 Skinner M.K, Griswold M.D History of the Sertoli cell discovery Sertoli Cell Biology Elsevier Academic Press 2005, pp.3-14 WHO WHO laboratory manual for the examination and processing of human semen Fifth edition Switzerland 2010 ... nhiên, thể tích tinh hồn phụ thuộc vào chủng tộc Do vậy, Việt Nam, cần có nghiên cứu với cỡ mẫu lớn để đánh giá thể tích tinh hồn liên quan đến vơ tinh nói chung, BN vơ tinh thể sinh tinh nửa chừng. .. làm cho chất lượng tinh trùng, khả sinh tinh bị ảnh hưởng dẫn đến kết điều trị vơ sinh khả có giảm Thể tích tinh hồn tiêu quan trọng đánh giá trình sinh tinh Thể tích trung bình tinh hồn BN nghiên... (x1.200) (1: Tinh bào II; 2: Tinh tử; 3: Không bào) Hình 3: Hình ảnh siêu cấu trúc tinh bào I (x2.000) (1: Nhân; 2: Bào tương) Hình 6: Hình ảnh siêu cấu trúc tinh tử (x2.500) (1: Nhân; 2: Bào