Mục tiêu của nghiên cứu là xác định giá trị chẩn đoán ung thư phổi không tế bào nhỏ của các dấu ấn ung thư CEA, CYFRA 21‐1 và NSE. Nghiên cứu đối với nhóm chứng là các bệnh nhân được chẩn đoán xác định mô bệnh học là ung thư phổi không tế bào nhỏ bằng phương pháp hóa mô miễn dịch.
Nghiên cứu Y học Y Học TP. Hồ Chí Minh * Tập 17 * Phụ bản của Số 2 * 2013 CARCINOEMBRYONIC ANTIGEN (CEA), CYFRA 21‐1, VÀ NEURON‐ SPECIFIC ENOLASE (NSE) TRONG UNG THƯ PHỔI KHƠNG TẾ BÀO NHỎ Lê Ngọc Hùng*, Trần Minh Thơng** TĨM TẮT Cơ sở: Mục tiêu của nghiên cứu là xác định giá trị chẩn đốn ung thư phổi khơng tế bào nhỏ của các dấu ấn ung thư CEA, CYFRA 21‐1 và NSE. Phương pháp: Thiết kế nghiên cứu hồi cứu, mơ tả. Nhóm chứng là các bệnh nhân được chẩn đốn xác định mơ bệnh học là ung thư phổi khơng tế bào nhỏ bằng phương pháp hóa mơ miễn dịch. Nhóm chứng là những bệnh nhân khám bệnh ngoại trú do những lý do khơng liên quan đến chẩn đốn ung thư phổi. Tất cả bệnh nhân 2 nhóm đều được thực hiệu ba xét nghiệm CEA, CYFRA 21‐1 và NSE. Kết quả: Có 49 bệnh nhân UTPKTBN trong nhóm bệnh (gồm 46 là bronchial adenocarcinoma và 3 là squamous cell carcinoma) và 79 bệnh nhân trong nhóm chứng. Tuổi trung bình của bệnh nhân nhóm bệnh là 62(trung vị) cao hơn nhóm chứng (52). Điểm cắt cho chẩn đoán UTPKTBN của ba dấu ấn ung thư CEA, CYFRA 21‐1 và NSE là 3, 2, và 18 μg/L theo thứ tự. Độ nhạy trong khoảng 72‐80% và độ đặc hiệu 75‐90%. Phân tích tuyến tính đa biến định tính cho thấy cả 3 dấu ấn ung thư CEA, CYFRA 21‐1 và NSE có giá trị độc lập trong chẩn đốn. Kết luận: CEA, CYFRA 21‐1, NSE là các dấu ấn ung thư chun biệt cho chẩn đốn ung thư phổi khơng tế bào nhỏ. Từ khóa: CEA, CYFRA 21‐1, NSE, ung thư phổi khơng tế bào nhỏ, độ nhạy, độ đặc hiệu. ABSTRACT CARCINOEMBRYONIC ANTIGEN, CYFRA 21‐1, AND NEURON‐SPECIFIC ENOLASE IN NON SMALL CELL LUNG CANCER (NSCLC) Le Ngoc Hung, Tran Minh Thong * Y Hoc TP. Ho Chi Minh * Vol. 17 ‐ Supplement of No 2 ‐ 2013: 116 ‐ 121 Objectives: The aim of study was to confirm the diagnostic value on non small cell lung cancer of tumor markers as CEA, CYFRA 21‐1 and NSE. Methods: The study method was retrospective, descriptive. The case group was patients diagnosed histopathological as non small cell lung cancer by immunohistochemistry method. The control group was out‐ patients with reasons without relationship to lung cancer diagnosis. All patients in two groups had been done with three tests as CEA, CYFRA 21‐1 and NSE. Results: Three were 49 patients with NSCLC in the case group (including 46 with bronchial adenocarcinoma and 3 with squamous cell carcinoma) and 79 patients in the control group. The average of age of patients in the case group was 62 (median), higher than in the control group (52). The cut‐off points for NSCLC diagnosis of three tumor markers CEA, CYFRA 21‐1, and NSE were 3, 2, and 18 μg/L respectively. The sensitivity rates was in range of 72‐80% and specificity 75‐90%. The multinomial logistic regression shoed that all of three tumor markers CEA, CYFRA 21‐1 and NSE had the independent value in diagnosis of NSCLC. Conclusions: CEA, CYFRA 21‐1, NSE were specific tumor markers for diagnosis of NSCLC. * Khoa Sinh Hóa, bệnh viện Chợ Rẫy Tác giả liên lạc: TS. BS. Lê Ngọc Hùng 116 ** Bộ mơn Sinh Hóa, Khoa Y Đại Học Y Dược TP Cần Thơ ĐT: 0913‐653618 E‐mail: lengochungan@yahoo.com Hội Nghị Khoa Học Kỹ Thuật – Bệnh Viện Chợ Rẫy ‐ Năm 2013 Y Học TP. Hồ Chí Minh * Tập 17 * Phụ bản của Số 2 * 2013 Nghiên cứu Y học Keywords: CEA, CYFRA 21‐1, NSE, non‐small cell lung cancer, sensitivity, specificity. kể trên một số bệnh nhân (20‐30%) với NHẬP ĐỀ NSCLC(16). Ung thư phổi là bệnh ác tính thường gặp, tử Với sự tiến bộ trong giải phẫu bệnh, phương vong cao. Đa số bệnh nhân ung thư phổi, 50‐ pháp hóa mơ miễn dịch được sử dụng như là 70%, được phát hiện ở giai đoạn bệnh đã tiến một phương pháp nhuộm đặc biệt giúp xác định triển, khơng còn khả năng phẫu thuật và có tiên sự hiện diện của kháng ngun trên lát cắt mơ, lượng nặng(8). dựa vào sự kết hợp phản ứng miễn dịch và hóa Ung thư phổi được chia làm hai nhóm chính chất. Với phương pháp này nhà bệnh học có thể dựa theo kiểu tế bào: ung thư phồi tế bào nhỏ đánh giá và phân loại được các kiểu phenotype (UTPTBN, small cell lung cancer: SCLC) và ung miễn dịch trên mô bệnh phẩm. Khoa Giải Phẫu thư phổi không thế bào nhỏ (UTPKTBN, non‐ Bệnh bệnh viện Chợ Rẫy được trang bị phương SCLC: NSCLC). UTPTBN chiếm khoảng 10‐15% tiện để thực hiện chẩn đoán các dấu ấn ung thư ung thư phổi và khác biệt về sinh học với mơ học bằng hóa mơ miễn dịch, trong đó có ung UTPKTBN bởi sự hiện diện của nội tiết tố thần thư phổi khơng tế bào nhỏ (NSCLC). kinh (neuroendocrine) và tốc độ phát triển Mục tiêu nghiên cứu là đánh giá giá trị chẩn nhanh của khối u. Về lâm sàng, UTPTBN có di đốn của các dấu ấn ung thư sinh hóa như CEA, căn sớm rất thường gặp, rất nhạy với hóa trị và CYFRA21‐1, NSE trong bệnh lý ung thư phổi xạ trị, nhưng dễ tái phát, đặc biệt bệnh có thể khơng tế bào nhỏ dựa trên kết quả giải phẫu phát triển nhanh và kháng thuốc(5). bệnh bằng phương pháp hóa mơ miễn dịch. Nhằm để cải thiện quản lý bệnh nhân ung PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU thư phổi, các phương pháp phát hiện ra các chất được phóng thích bởi tế bào ung thư vào trong Nghiên cứu thiết kế hồi cứu, mơ tả. Nhóm hệ tuần hồn, gọi là dấu ấn ung thư, được phát bệnh là những trường hợp UTPKTBN được xác triển liên tục. Bộ xét nghiệm dấu ấn ung thư có định bằng kết quả giải phẫu bệnh với phương giá trị trong ung thư phổi là CEA pháp hóa mơ miễn dịch. Nhóm chứng là các (carcinoembryonic antigen), CYFRA 21‐1, và bệnh nhân đến khoa khám bệnh theo yêu cầu, NSE (neuron‐specific enolase) hiện đang được bệnh viện Chợ Rẫy khám bệnh do các lý do khác khuyến cáo áp dụng(16,17). NSCLC khác biệt với khơng phải ung thư phổi. SCLC về mơ học do đó cũng khác nhau về sinh Tất cả các xét nghiệm được thực hiện trên học, đó là lý do nhiều nghiên cứu cố gắng tìm các mẫu máu của bệnh nhân được lấy trước khi các dấu ấn có độ nhạy cao, phân biệt giữa hai bắt đầu can thiệp điều trị chuyên biệt cho ung thể mơ học này. Trong nhóm NSCLC, CEA được thư phổi. CEA, NSE được đo bằng phương pháp xem là dấu ấn cho phân nhóm ung thư tế bào miễn dịch hóa phát quang, sử dụng hạt từ tính tuyến (adenocarcinoma) và sự hiện diện của (chemiluminescence immunoassay, magnetic phân đoạn cytokeratin 19 tan trong huyết thanh particles) trên hệ thống máy miễn dịch tự động (serum‐soluble fragments of cytokeratin 19) LIASON, Diasorin, Ý. CYFRA 21‐1 trong serum CYFRA 21‐1 thường gặp trong phân nhóm ung được đo tại khoa Sinh Hóa, trên máy KRYPTOR thư tế bào vãy (squamous cell carcinoma). Tuy của hãng BRAHMS ‐ Đức. Nguyên lý của xét nhiên các giá trị này cũng rất thay đổi(8). Xét nghiệm là phản ứng tạo phức hợp kháng thể – nghiệm men enolase đặc hiệu thần kinh kháng nguyên‐ kháng thể theo nguyên tắc (neuron‐specific enolase, NSE) đầu tiên được sandwich. Đo lường tín hiệu phát ra từ phức xem là dấu ấn hữu ích cho UTPTBN, nhưng lại hợp miễn dịch theo cơng nghệ TRACE (Time‐ khơng chun biệt do NSE nhuộm được dương Resolved Amplified Cryptate Emission). Đơ lặp tính 80% trên UTPKTBN và tăng nồng độ đáng Hội Nghị Khoa Học Kỹ Thuật – Bệnh Viện Chợ Rẫy ‐ Năm 2013 117 Nghiên cứu Y học Y Học TP. Hồ Chí Minh * Tập 17 * Phụ bản của Số 2 * 2013 lại có CV 5 – 8,3%, độ chính xác 0,7 – 4,9%. Các biến số khảo sát chính gồm đặc điểm nhân trắc của bệnh nhân (tuổi, phái tính), kết quả chẩn đốn giải phẫu bệnh với phương pháp hóa mơ miễn dịch. UTPKTBN được chia ra 3 phân nhóm: ung thư tế bào tuyến (adenocarcinoma), ung thư tế bào vãy (squamuous cell carcinoma), ung thư tế bào lớn khác (other large cell carcinoma). Và kết quả sinh hóa của các dấu ấn ung thư CEA, CYFRA 21‐1, NSE. Phân tích diện tích dưới đường cong ROC (a receiver operating characteristic curve) cho chẩn đoán ung thư phổi không do tế bào nhỏ giúp xác định điểm cắt hợp lý với độ nhạy và độ đặc hiệu tương ứng. Sử dụng bảng 2x2 để xác định lại độ nhạy, độ đặc hiêu, giá trị tiên đoán dương, giá trị tiên đoán âm. Mối liên quan đơn biến giữa các dấu ấn ung thư và kết quả bệnh lý được kiểm định với phép kiểm chi bình phương. Phân tích tuyến tính đa biến định tính áp dụng để xác định biến số có giá trị độc lập ảnh hưởng đến chẩn đốn ung thư phổi khơng tế bào nhỏ. Giá trị p 5 μg/L, theo thứ tự. Trong nghiên cứu của chúng tơi tỉ lệ bệnh nhân có CEA > 5 μg/L là 71,8% (23/32 trường hợp), đây cũng là phản ảnh độ ác Hội Nghị Khoa Học Kỹ Thuật – Bệnh Viện Chợ Rẫy ‐ Năm 2013 119 Nghiên cứu Y học Y Học TP. Hồ Chí Minh * Tập 17 * Phụ bản của Số 2 * 2013 tính cao trong mẫu khảo sát của chúng tơi. Chưa có thống nhất về giá trị tiên lượng của CEA trong NSCLC. Theo các tác giả Mino N 1988, Nisman B 1998 và Rastel D 1994(9,10,14) CEA có giá trị tiên lượng, nhưng tác giả Shinkai T 1986 và Buccheri G 1987(15, 3) không công nhận kết quả này. Tác giả Kulpa J 2002, ghi nhận bệnh nhân ung thư phổi khơng tế bào nhỏ có thời gian sống là 9 tháng nếu CEA ≥ 3 μg/L so với 12 tháng nếu CEA 27 μg/L thời gian sống trung bình khoảng 7 tháng, ngắn hơn nhóm có nống độ thấp hơn (thời gian sống trung bình là 12 tháng)(8). Có 27,8% (5/18) bệnh nhân trong mẫu nghiên cứu của chúng tơi có NSE > 27 μg/L. Phân tích đơn biến cho thấy các biến số tuổi ≥ 60, CEA ≥ 3,0 μg/L, CYFRA 21‐1 ≥ 2,0 μL, và NSE ≥ 18 μg/L đều có giá trị ý nghĩa thống kê so sánh giữa nhóm bệnh ung thư phổi khơng tế bào nhỏ so với nhóm chứng. Nhưng qua khảo sát đa biến tuyến tính định tính (multinomial logistic regression) cho thấy chỉ có 3 biến số CEA, CYFRA 21‐1 và NSE có giá trị độc lập trong hổ trợ chẩn đốn ung thư phổi khơng phải tế bào nhỏ. KẾT LUẬN Hội Nghị Khoa Học Kỹ Thuật – Bệnh Viện Chợ Rẫy ‐ Năm 2013 Y Học TP. Hồ Chí Minh * Tập 17 * Phụ bản của Số 2 * 2013 Các dấu ấn sinh học về ung thư phổi khơng phải tế bào nhỏ như CEA, CYFRA 21‐1 và NSE có giá trị hướng dẫn trong chẩn đốn bệnh lý này. Do đa số bệnh nhân trong nhóm chứng là ung thư tế bào tuyến (adenocarcinoma) (46/49, 93,9%), do vậy cần khảo sát với cỡ mẫu lớn hơn để xác định rõ hơn giá trị của các dấu ấn ung thư này. 10 11 12 13 TÀI LIỆU THAM KHẢO Bergan B, Brezicka FT, Engstrom CP, et al. (1993). Clinical usefulness of serum assays of neuron‐specific enolase, carcinoembryonic antigen and CA‐50 antigen in the diagnosis of lung cancer. Eur J Cancer 29A: 198‐202. Broers JLV, Carney DN, de ley L et al (1985). Differential expression of intermediate filament proteins distinguishes classic from variants small‐cell lung cancer cell lines. Proc Nati Acad Sci USA 82: 4409‐4413. Buccheri G, Ferrigano D, Sartoris AM et al (1987). Tumor markers in bronchogenic carcinoma. Superiority of tissue polypeptide antigen to carcinoembryonic antigen and carbohydrate antigenic determinant 19‐9. Cancer 60: 42‐50. Ebert W, Dienemann H, Fateh‐Moghadam A et al (1994). Cytokeratin 19 fragment CYFRA 21‐1 compared with carcinoembryonic antigen, squamous cell carcinoma antigen and neuron‐specific enolase in lung cancer. Results of an international multicentre study. Eur J Clin Chen Clin Biochem 32: 189‐199. Ettinger DS (2004). Overview and state of the art in the management of lung cancer. Oncology 18; 3‐9. Giovanella L, Piantanida R, Ceriani L et al (1997). Immunoassay of neuron‐specific enolase (NSE) and serum fragments of cytokeratin 19 (CYFRA 21‐1) as tumor markers in small cell lung cancer: clinical evaluation and biological hypothesis. Int J Biol Markers 12: 22‐26. Graziano SL, Mazid R, Newman N et al (1989). The use of neuroendocrine immunoperoxidase markers to predict chemotherapy response in patients with non‐small cell lung cancer. J Clin Oncol 7: 1398‐1406. Kulpa J, Wojcik E, Reinfuss M, Kolodziejski L (2002). Carcinoembryonic antigen, squamous cell carcinoma antigen, CYFRA 21‐1, and neuron‐specific enolase in squamous cell lung cancer patients. Clinical Chemistry 48 (11): 1931‐1937. Mino N, Ilo A, Hamamoto K (1988). Availability of tumor‐ antigen 4 as a marker oof squamous cell carcinoma of the lung and other organs. Cancer 62: 730‐734. 14 15 16 17 18 19 20 Nghiên cứu Y học Nisman B, Lafair J, Heching N et al (1998). Evaluation of tissue polypeptide specific antigen, CYFRA 21‐1, and carcinoembryonic antigen in non‐smal cell lung cancer. Cancer 82: 1850‐1859. Moro D, Villemain D, Vuillez JP, Delord CA et al. (1995). CEA, CYFRA 21‐1 and SCC in non‐small cell lung cancer. Lung Cancer 13: 169‐176. Pujol JL, et al (2004). CYFRA 21‐1 is a prognostic determinant in non‐small cell lung cancer: results of a meta‐analysis in 2063 patients. Br J Cancer 90: 2097‐2105. Pujol JL, Grenier J, Daures JP et al (1993). Serum fragment of cytokeratin subunit 19 measured by CYFRA 21‐1 immunoradiometric assay as a marker of lung cancer. Cancer Res 53: 61‐6. Rastel D, Ramaioli A, Cornillie F et al (1994). CYFRA 21‐1, a sensitive and specific new tumor marker for squamous cell lung cancer. Report of the first European Multicentre Evaluation. Eur J Cancer 30A: 601‐606. Shinkai T, Saijo N, Tominaga K et al (1986). Serial plasma carcinoembryonic antigen measurement for monitoring patients with advanced lung cancer during chemotherapy. Cancer 57: 1318‐1323. Slodkowska J, Zych J, Szturmowicz M, Demkow U et al (2005). Neuroendocrine phenotype of non‐small cell lung carcinoma: immunohistological evaluation and biochemical study. Int J Biol Markers 20: 217‐226. Sturgeon C (2002). Practice guidelines for tumor marker use in the clinic. Clin Chem 48: 1151‐1159. Sugama Y, Kitamura S. Kawai T et al (1994). Clinical usefulness of CYFRA 21‐1 assay in diagnosing lung cancer: measurement of serum cytokeratin fragment. Jpn J Cancer 85: 1178‐1184. Takada M, Masuda N, Matsuura E, et al (1995). Measurement of cytokeratin 19 fragment as a marker of lung cancer by CYFRA 21‐1 enzyme immunoassay. Br J Cancer 71; 160‐165 Wieskopf B, Demangent C, Purohit A et al (1995). CYFRA 21‐1 as a biologic marker of non‐small cell lung cancer. Evaluation of sensitivity, specificity and prognostic role. Chest 108: 163‐ 169. Ngày nhận bài báo: 18/04/2013 Ngày phản biện đánh giá bài báo: 6/05/2013 Ngày bài báo được đăng: 27/05/2013 Hội Nghị Khoa Học Kỹ Thuật – Bệnh Viện Chợ Rẫy ‐ Năm 2013 121 ... dạng mơ học khác nhau của ung thư phổi do bởi hai nhóm chính ung thư phổi tế bào nhỏ và ung thư phổi khơng tế bào nhỏ đều xuất phát từ chung một dòng tế bào và sự khác biệt chỉ xảy ra ... ảnh hưởng đến chẩn đốn ung thư phổi khơng tế bào nhỏ. Giá trị p