1. Trang chủ
  2. » Thể loại khác

So sánh bộ kit Lê Thị Xuân với bộ kit Scimedx trong chẩn đoán bệnh do giun sán xâm nhập mô

7 104 0

Đang tải... (xem toàn văn)

THÔNG TIN TÀI LIỆU

Thông tin cơ bản

Định dạng
Số trang 7
Dung lượng 300,03 KB

Nội dung

Đề tài nghiên cứu này được thực hiện nhằm mục tiêu so sánh bộ kit Lê Thị Xuân với bộ kit Scimedx trong chẩn đoán bệnh do giun sán xâm nhập mô. Mời các bạn cùng tham khảo bài viết để nắm rõ nội dung chi tiết của đề tài nghiên cứu này.

Nghiên cứu Y học Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 16 * Phụ Số * 2012 SO SÁNH BỘ KIT LÊ THỊ XUÂN VỚI BỘ KIT SCIMEDX TRONG CHẨN ĐOÁN BỆNH DO GIUN SÁN XÂM NHẬP MÔ Trần Xuân Mai*, Phan Anh Tuấn*, Trần Thị Huệ Vân*, Trần Thị Kim Chi*, Nguyễn Thị Cẩm Nhung*, Võ Thị Trúc Nguyên* TÓM TẮT Mục tiêu: So sánh kit Lê Thị Xuân với kit Scimedx chẩn đốn bệnh giun sán xâm nhập mơ Phương pháp: Thử nghiệm labo Kết quả: Hệ số biến thiên kit Lê Thị Xuân Scimedx chẩn đoán Cysticercus cellulosae 3,8% 3,5%, Fasciola sp 3,3% 2,8%, Strongyloides stercoralis 3,5% 3,5% Toxocara sp 3,6% 1,8% Các hệ số biến thiên giới hạn cho phép (CV < 15%) Chỉ số Kappa kit Lê Thị Xuân Scimedx chẩn đoán C cellulosae 0,93; Fasciola sp 0,92; Strongyloides stercoralis 0,91 Toxocara sp 0,95 Tỉ số OD bệnh /OD cutoff kit khác khơng ý nghĩa thống kê Kết luận: Khơng có khác biệt kit chẩn đoán ký sinh trùng nêu Từ khóa: So sánh kit, giun sán xâm nhập mô ABSTRACT COMPARATIVE ANALYSIS OF LE THI XUAN KIT TO SCIMEDX KIT IN THE DIAGNOSIS OF TISSUE INVADING HELMINTHIASIS Tran Xuan Mai, Phan Anh Tuan, Tran Thi Hue Van, Tran Thi Kim Chi, Nguyen Thi Cam Nhung, Vo Thi Truc Nguyen * Y Hoc TP Ho Chi Minh * Vol 16 - Supplement of No - 2012: 160 – 165 Objectives: Compare the kit of Le Thi Xuan and to that of Scimedx in the diagnosis of tissue invading helminthiases Method: Comparative laboratory screening tests Results: Coeficients of variance of Le Thi Xuan kit and Scimedx kit in the diagnosis of cysticercosis are 3.8% and 3.5%, in fascioliasis 3.3% and 2.8%, in strongyloidiasis 3.5% and 3.5% and in toxocariasisa are 3.6% 1.8%, respectively All are in acceptable limits Kappa indexes of Le Thi Xuan kit and Scimedx kit in cysticercosis, fascioliasis strongyloidiasis, toxocariasisa are 0.93, 0.92, 0.91, and 0.9, respectively The mean ratio of OD/OD cutoff of two ksts are not significantly different (p>0.05) Conclusion: There are no differences in capacity of antibody detection between two kits Key words: Comparative analysis of two kits, tissue invading helminthiasis trùng dùng phương pháp trực tiếp ĐẶT VẤN ĐỀ ký sinh trùng sâu quan nội tạng, ký Bệnh ký sinh trùng phát sinh trùng giai đoạn non chưa đẻ trứng phương pháp trực tiếp bệnh ký sinh trùng ký sinh trùng lạc chủ bệnh ký sinh Ascaris lumbricoides, gium móc, Trichuris trùng sán lớn gan (Faciola sp), giun đũa trichiura Nhưng có số bệnh ký sinh *: Bộ môn Ký sinh học – Khoa Y – Đại học Y Dược TP HCM Tác giả liên lạc: PGS TS Phan Anh Tuấn ĐT: 0908 686277 Email: drtuandhyd@yhoo.com 160 Chuyên Đề Nội Khoa Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 16 * Phụ Số * 2012 chó mèo (Toxocara sp), gạo heo (Cysticercosis cellulosae) Trong vài trường hợp, người ta chẩn đốn bệnh hình ảnh học CT scanner, MRI chẩn đốn hình ảnh học đắt tiền, có độ nhạy thấp, đơi khó chẩn đốn phân biệt với tổn thương nguyên nhân khác Xu hướng ngày dùng phương pháp chẩn đoán huyết miễn dịch, thường kỹ thuật ELISA để tìm kháng thể đặc hiệu cuả ký sinh trùng Hiện nay, có nhiều kit dùng chẩn đốn bệnh sản xuất ngồi nước Tại Bộ mơn Ký Sinh trùng, Lê Thị Xuân sản xuất kit chẩn đoán số ký sinh trùng Để chọn kit sử dụng Bộ môn, so sánh kết chẩn đoán kit kit Scimedx ĐỐI TƯỢNG - PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU Đối tượng nghiên cứu Các kit chẩn đoán ký sinh trùng Lê Thị Xuân (đang sử dụng Bệnh viện Đại học Y Dược sở 2) Scimedx (đang Bộ Y tế cho phép lưu hành) để chẩn đoán Cysticercus cellulosae (C cellulosae), Fasciola sp, Strongyloides stercoralis Toxocara sp Phương pháp nghiên cứu Thử nghiệm labo Cỡ mẫu Cỡ mẫu nghiên cứu hệ số biến thiên kit: n=30 Cỡ mẫu nghiên cứu số Kappa kit chẩn đoán C cellulosae n = 101, Fasciola sp n = 101, Strongyloides stercoralis n= 104 Toxocara sp n= 106 Nguyên vật liệu dụng cụ Huyết chứng dương, chứng âm, huyết bệnh nhân Cộng hợp thỏ kháng IgG người gắn men peroxydase Chuyên Đề Nội Khoa Nghiên cứu Y học Các pipette 0-100mcl, 0-200mcl, 0-1000mcl Máy đọc ELISA hiệu Human Tiến hành nghiên cứu Kỹ thuật viên nhận plaque, plaque Scimedx hay Lê Thị Xuân Thực kỹ thuật ELISA, đọc kết trị số OD máy đọc ELISA bước sóng 450nm; trị số OD ≥ 0,5: dương tính, OD< 0,5: âm tính Người vào số liệu thống kê trị số OD khơng biết số liệu Scimedx hay Lê Thị Xuân Xử lý số liệu Bằng phần mềm SPSS 17.0, dùng phương pháp thống kê Wilcoxon Phân tích số liệu Hệ số biến thiên CV = S/Xtb (S: độ lệch chuẩn, Xtb: trị số trung bình) x 100%(1) Bộ kit Lê Thị Xn Âm tính Dương tính Tổng cộng Bộ kit Scimedx Tổng cộng Âm tính Dương tính a b r1 c d r2 s1 s2 N Chỉ số Kappa: Để so sánh phù hợp kit, dùng số Kappa.(2) Chỉ số Kappa K = (Po – Pe)/ (1- Pe) với Po = (a+d) / N, Pe = ((r1s1 + r2s2)/N) / N Ý nghĩa: Chỉ số Kappa < 0,2: Phù hợp kém, từ 0,2-0,39: Tạm được, từ 0,4-0,59: tương đối, từ 0,6-0,79: Đáng kể số Kappa > 0,8: Hầu hoàn hảo So sánh tỉ số OD bệnh nhân mắc bệnh ký sinh trùng/OD cut off kit KẾT QUẢ Hệ số biến thiên kit Lê Thị Xuân Scimedx mẫu huyết làm xét nghiệm kỹ thuật ELISA 30 lần khác thời điểm khác nhau, trị số trung bình (OD tb) độ lệch chuẩn (SD) OD kit sau: 161 Nghiên cứu Y học Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 16 * Phụ Số * 2012 Bảng 1: Hệ số biến thiên kit chẩn đoán bệnh ký sinh trùng OD tb SD CV% C cellulosae (n=30) LTXuân Scimedx 0,846 1,025 0,032 0,036 3,8 3,5 Fasciola sp (n=30) Strongyloides stercorlis (n=30) Toxocara sp (n=30) LTXuân Scimedx LTXuân Scimedx LT Xuân Scimedx 1,125 1,250 1,129 1,298 1,094 1,230 0,037 0,035 0,040 0,045 0,040 0,022 3,3 2,8 3,5 3,5 3,6 1,8 Nhận xét: Các hệ số biến thiên kit Lê Thị Xuân Scimedx giới hạn cho phép (CV0,05) Như vậy, kit chẩn đoán C cellulosae Lê Thị Xuân có độ nhạy độ đặc hiệu cao sử dụng chẩn đốn thường qui BÀN LUẬN Về kit chẩn đoán Fasciola sp, kit chẩn đốn Lê Thị Xn có độ nhạy 98,8%, độ đặc hiệu 97,3% Scimedx có có độ nhạy 100%, độ đặc hiệu 100% Hệ số biến thiên kit Lê Thị Xuân Scimedx Hệ số biến thiên kit Lê Thị Xuân Scimedx chẩn đoán C cellulosae 3,8% 3,5%, Fasciola sp 3,3% 2,8%, Strongyloides stercoralis 3,5% 3,5% Toxocara sp 3,6% 1,8% Các hệ số biến thiên giới hạn cho phép (CV < 15%) Trong qui trình chẩn đốn, có bước: Gắn kháng ngun vào plaque Pha loãng huyết conjugate Thực qui trình xét nghiệm Đọc trị số OD Một mẫu huyết làm xét nghiệm nhiều lần theo qui trình, thời điểm khác (30 lần), hệ số biến thiên CV97%(13) Như vậy, kit chẩn đoán Strongyloides stercoralis Lê Thị Xuân có độ nhạy độ đặc hiệu cao sử dụng chẩn đoán thường qui Về kit chẩn đoán Toxocara sp, kit chẩn đốn Lê Thị Xn có độ nhạy 94,4%, độ đặc hiệu 96,2% Scimedx có có độ nhạy 87,5%, độ đặc hiệu 94,4% Theo nghiên cứu Mohamad S cs, tùy thành phần kháng nguyên tiết có độ nhạy từ 80-100%, độ đặc hiệu 92-96,2%(16) Nghiên cứu Watthanakulp cs dùng kháng nguyên tiết phát thành phần IgG, độ nhạy từ 5098% độ đặc hiệu từ 71-81%(23) Như vậy, kit chẩn đốn Toxocara sp Lê Thị Xn có độ nhạy độ đặc hiệu cao sử dụng chẩn đoán thường qui 163 Nghiên cứu Y học Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 16 * Phụ Số * 2012 So sánh kết chẩn đoán ký sinh trùng từ kit Lê Thị Xuân kit Scimedx Về độ phù hợp kit: Kết xét nghiệm kỹ thuật miễn dịch ELISA để chẩn đoán C cellulosae, Fasciola sp, Strongyloides stercoralis, Toxocara sp kit Lê Thị Xuân Scimedx có phù hợp cao (Kappa > 0,9) Điều cho thấy sử dụng kit Lê Thị Xuân chẩn đoán thường qui với độ tin cậy cao Trong loại kháng nguyên Lê Thị Xuân kể có loại kháng ngun gồm kháng ngun chẩn đoán Fasciola sp, Toxocara sp kháng nguyên tiết, kháng ngun C cellulosae trích từ dịch nang, kháng nguyên chẩn đoán Strongyloides stercoralis từ ấu trùng Strongyloides stercoralis giai đoạn Về kháng nguyên dùng kit chẩn đoán C cellulosae, kháng nguyên dịch nang thường sử dụng Shiguekawa K.Y cs, dùng loại kháng nguyên từ C cellulosae kháng nguyên dịch nang kháng nguyên toàn nang, tác giả nhận thấy kháng nguyên dịch nang cho kết chéo với loại ký sinh trùng khác kháng nguyên toàn nang(22) Các tác giả Phạm Trí Tuệ, Nguyễn Thị Minh Tâm, nghiên cứu kỹ thuật ELISA, xác định kháng nguyên dịch nang đặc hiệu kháng nguyên toàn nang(2) Guo cs, so sánh kháng nguyên dịch nang C cellulosae kháng nguyên nộingoại tiết dùng kỹ thuật ELISA thấy độ nhạy dịch nang cao hơn(11) Gần đây, nghiên cứu Amit P cộng dùng kháng nguyên dịch nang(4) Như vậy, với kit chẩn đoán gạo heo C cellulosae, Lê Thị Xuân dùng kháng nguyên dịch nang phù hợp với xu chẩn đoán hành Về kháng nguyên dùng kit chẩn đốn Fasciola sp, theo nghiên cứu dùng kháng nguyên thân kháng nguyên tiết Tuy nhiên, dùng kháng ngun tiết phản ứng chéo gặp dùng kháng nguyên thân(14,17,21) Các nghiên cứu gần chẩn 164 đoán sán gan dùng kháng nguyên tiết(6,9) Bộ kit chẩn đoán sán gan Lê Thị Xuân dùng kháng nguyên tiết phù hợp với xu hướng Về kháng nguyên dùng kit chẩn đốn Strongyloides stercoralis, nơi khơng có giun lươn, Costa-Cruz JM, Rodrigues RM phải dùng Strongyloides ratti thay thế(7,20) Những năm gần đây, nghiên cứu Dekumyoy P, kháng nguyên điều chế từ ấu trùng Strongyloides stercoralis(8) Bộ kit chẩn đoán Strongyloides stercoralis Lê Thị Xuân dùng ấu trùng loại giun để làm kháng ngun kit chẩn đốn, tính phù hợp đặc hiệu ký chủ tốt Về kháng nguyên dùng kit chẩn đoán Toxocara sp., giới nghiên cứu dùng kháng nguyên tiết nghiên cứu Iddawela RD, Ponce-Macotela M, Alcântara-Neves NM(3,12,19), gần nghiên cứu Peixoto PL, Watthanakulpanich D dùng kháng nguyên tiết kit chẩn đoán Toxocara sp(18,23) Như vậy, với kit chẩn đoán Toxocara sp, Lê Thị Xuân dùng kháng nguyên tiết phù hợp với xu hướng giới Tóm lại, kháng nguyên dùng kit chẩn đoán Fasciola sp, Toxocara sp kit Lê Thị Xuân, dùng kháng nguyên tiết để chẩn đoán bệnh ký sinh trùng xu hướng đại tránh phản ứng chéo mà kháng nguyên thân mắc phải Còn kháng nguyên dùng chẩn đoán gạo heo C cellulosae kháng nguyên dịch nang, dùng chẩn đoán Strongyloides stercoralis ấu trùng giai đoạn Strongyloides stercoralis phù hợp với xu thế giới So sánh tỉ số OD bệnh/ OD cut off bệnh nhân nhiễm ký sinh trùng từ kit Các mẫu huyết bệnh nhân nhiễm ký sinh trùng thực kỹ thuật ELISA kit Chuyên Đề Nội Khoa Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 16 * Phụ Số * 2012 Tính tốn thống kê cho thấy khác biệt tỉ số OD bệnh/OD cut off kit dùng chẩn đốn bệnh ký sinh trùng khơng có ý nghĩa thống kê, nghĩa có tương đồng khả tầm soát bệnh kit 10 KẾT LUẬN 12 Bộ kit Lê Thị Xn có độ ổn định, khả tầm sốt cao, sử dụng kháng nguyên phù hợp với xu đại, độ nhạy độ đặc hiệu tương đương với kit ngoại ĐỀ NGHỊ Với kết kiểm định chất lượng khả quan trình bày, Bộ môn Ký sinh Khoa Y Đại học Y Dược Tp Hồ Chí Minh xin sử dụng kit chẩn đoán ký sinh trùng Lê Thị Xuân thay kit Scimedx thời gian chờ đợi kit Lê Thị Xuân cấp giấy phép 11 13 14 15 16 TÀI LIỆU THAM KHẢO Nguyễn Xuân Phách (1995), Đánh giá mẫu, Đánh gía kiểm định, Thống kê y học – Nhà xb Y học, tr 20-25, 38-55 Phạm Trí Tuệ, Nguyễn Thị Minh Tâm (1991), “Điều chế thăm dò tính đặc hiệu kháng ngun ấu trùng sán lợn ứng dụng phản ứng miễn dịch men ELISA chẩn đoán bệnh ấu trùng sán lợn người”, Tạp chí Y học thực hành, 4, tr 23-28 Alcõntara-Neves NM, dos Santos AB, Mendonỗa LR, Figueiredo CA, Pontes-de-Carvalho L (2008), “An improved method to obtain antigen-excreting Toxocara canis larvae”, Exp Parasitol.’, 119(3):349-51 Amit P, Prasad KN, Kumar GR, Shweta T, Sanjeev J, Kumar PV, Mukesh T (2011), “Immune response to different fractions of Taenia solium cyst fluid antigens in patients with neurocysticercosis” Exp Parasitol., 127(3):687-92 Cook RJ (1998), Kappa In: The Encyclopedia of Biostatistics, T P Armitage, Colton, eds., pp 2160-2166 New York: Wiley, 1998 Cornejo H, Oblitas F, Cruzado S, Quispe W (2010), “Evaluation of an ELISA test with Fasciola hepatica metabolic antigen for diagnosis of human fascioliasis in Cajamarca, Peru” Rev Peru Med Exp Salud Publica., 27(4):569-74 Costa-Cruz JM et al (2003), “Heterologous antigen extract in ELISA for the detection of human IgE anti-Strongyloides stercoralis.”, Rev Inst Med Trop Sao Paulo., 45(5):265-8 Dekumyoy P, Somtana K, Jantanawiwat P, Nuamtanong S, Sanguankiat S, Nuchfaong S, Janyapoon K, Chindanond D (2002), “Improved antigens for IgG-ELISA diagnosis of strongyloidiasis”, Southeast Asian J Trop Med Public Health 33 Suppl 3:53-9 Espinoza JR, Timoteo O, Herrera-Velit P (2005), “Fas2-ELISA in the detection of human infection by Fasciola hepatica”, J Helminthol 79(3):235-40 Chuyên Đề Nội Khoa 17 18 19 20 21 22 23 Nghiên cứu Y học Gekeler F et al (2002), “Sensitivity and Specificity of ELISA and Immunoblot for Diagnosing Neurocysticercosis”, Eur J Clin Microbiol Infect Dis, 21, pp 227-229 Guo H., Zhao Z F., Shi D Z (1997), “A study on the culture medium antigens of C cellulosae for detecting antibodies of cysticercosis by means of ELISA”, Southeast Asian J Trop Med Public Health, 28 Suppl 1, pp 125-127 Iddawela RD, Rajapakse RP, Perera NA, Agatsuma T (2007), “Characterization of a Toxocara canis species-specific excretorysecretory antigen (TcES-57) and development of a double sandwich ELISA for diagnosis of visceral larva migrans”, Korean J Parasitol 2007 Mar;45(1):19-26 Krolewiecki AJ et al (2010), “Improved diagnosis of Strongyloides stercoralis using recombinant antigen-based serologies in a community-wide study in northern Argentina”, Clin Vaccine Immunol 17(10):1624-30 Maleewong W et al (1996), “Comparison of adult somati and excretory-secretory antigens in enzyme-linked immunosorbent assay for serodiagnosis of hunam infection with Fasciola gigantica”, Southeast Asian J Trop Med Public Health, Vol 27, No 3, p:566-569 Mercado R et al (2002), “Immunodiagnosis of Strongyloides stercoralis infections in Chile using ELISA test”, Rev Med Chil., 130(12):1358-64 Mohamad S, Azmi NC, Noordin R (2009), “Development and evaluation of a sensitive and specific assay for diagnosis of human toxocariasis by use of three recombinant antigens (TES26, TES-30USM, and TES-120)” J Clin Microbiol., 47(6):1712-7 Pewpan M Intapan et al (1998), “Excretory-secretory antigenic components of adult Fasciola gigantica recognize by infected human sera” Southeast Asian J Trop Med Public Health, vol 29, No 3, p:579-583 Peixoto PL, Nascimento E, Canỗado GG, Miranda RR, Rocha RL, Araújo RN, Fujiwara RT(2011), “Identification of candidate antigens from adult stages of Toxocara canis for the serodiagnosis of human toxocariasis”, Mem Inst Oswaldo Cruz 106(2):200-6 Ponce-Macotela M, Rodríguez-Caballero A, Peralta-Abarca GE, Martínez-Gordillo MN (2011), “ A simplified method for hatching and isolating Toxocara canis larvae to facilitate excretory-secretory antigen collection in vitro Vet Parasitol., 175(3-4):382-5 Rodrigues RM et al (2007),” IgG1, IgG4, and IgE antibody responses in human strongyloidiasis by ELISA using Strongyloides ratti saline extract as heterologous antigen”, Parasitol Res., 101(5):1209-14 Sampaio Silva ML et al (1996), “Antigenic components of excretory-secretory products of adult Fasciola hepatica recognize in human infections” Am J Trop Med Hyg, 54, p:146-148 Shiguekawa K.Y et al (2000), “ELISA and Western Blotting tests in the detection of IgG antibodies to Taenia solium metacestodes in serum samples in human neurocysticercosis”, Trop Med Int Health, 5(6), pp 443-449 Watthanakulpanich D, Smith HV, Hobbs G, Whalley AJ, Billington D (2008), “Application of Toxocara canis excretorysecretory antigens and IgG subclass antibodies (IgG1-4) in serodiagnostic assays of human toxocariasis”, Acta Trop 2008 May;106(2):90-5 165 Nghiên cứu Y học 166 Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 16 * Phụ Số * 2012 Chuyên Đề Nội Khoa ... ELISA chẩn đoán C cellulosae với kit Lê Thị Xuân kit Scimedx có phù hợp cao Bảng 3: Kết xét nghiệm chẩn đoán Fasciola sp từ hai kit Bộ kit Lê Thị Xuân Âm tính Dương tính Tổng cộng Bộ kit Scimedx. .. cộng đoán Fasciola sp với kit Lê Thị Xuân kit Scimedx có phù hợp cao Bảng 4: Kết xét nghiệm chẩn đoán Strongyloides stercoralis từ hai kit Bộ kit Lê Thị Xuân Âm tính Dương tính Tổng cộng Bộ kit Scimedx. .. chẩn đoán Strongyloides stercoralis với kit Lê Thị Xuân kit Scimedx có phù hợp cao Bảng 5: Kết xét nghiệm chẩn đoán Toxocara sp từ hai kit Bộ kit Lê Thị Xuân Âm tính Dương tính Tổng cộng Bộ kit

Ngày đăng: 21/01/2020, 13:51

TỪ KHÓA LIÊN QUAN

TÀI LIỆU CÙNG NGƯỜI DÙNG

TÀI LIỆU LIÊN QUAN

w